CN107114775A - 一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物及其制备方法 - Google Patents
一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物及其制备方法，成分及其重量份为鮸鱼鱼鳔多肽80~95份、三七总皂甙10~15份、愈创木酚0.0001~0.0002份、鱼油1~10份、维生素C 0.5~2份和香柑内酯0.0002~0.0006份。有益效果为：本发明制备的复配物绿色安全、无毒副作用，分子量小，易吸收，利用率高，可同时补充服用者对氨基酸等的需求；在降低血压的同时增加心脏冠状动脉和脑血管的血流量，改善心脑组织的血液微循环；能有效降低人体内血清胆固醇及低密度脂蛋白的含量，减少心血管疾病的发生的概率；采用生物酶解法制备，步骤简单，效率高，成本低廉。
Description
技术领域
本发明涉及保健食品领域，具体是一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物及其制备方法。
背景技术
高血脂症是一种全身性疾病，指血液之中总胆固醇(TC) 和/或甘油三酯(TG) 过高或高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C) 过低，现代医学称之为血脂异常。脂质不溶或微溶于水，必须与蛋白质结合以脂蛋白形式存在，因此，高血脂症通常也称为高脂蛋白血症。高血脂症是中老年代谢疾病的常见病、多发病，是引起冠心病、动脉硬化、脑血栓和脑出血的主要因素。近年来由于生活水平的提高，日常饮食中高热量食物逐渐增多，而人们的日常活动量却相对减少，致使高血脂症日趋增多且呈现年青化趋势，严重威胁着人们的身体健康。
据调查，心脑血管疾病已经成为危害我国人民身体健康的第一号杀手，而高血脂症是引起心脑血管疾病的重要原因之一。据统计，我国成年人中高血脂患病率为18.6％，高血脂症在中老年人达到70％左右，已经成为国民健康的最大威胁。高血脂症的药物治疗见效快，但降血脂药物副作用较大。因此，辅以使用降血脂保健食品成为治疗高脂血症的一种重要方式，对于提高中老年人的生活质量具有重要意义。而研制出疗效确切的降血脂保健食品已成为防治心脑血管疾病的当务之急。
现有技术如授权公告号为CN104055773B的中国发明专利，公开了一种降血脂组合物及其应用。该组合物含有鸟氨酸、门冬氨酸、维生素 B6。该降血脂组合物能够调节血脂、增强心脑血管供血能力、降低甘油三酯、胆固醇及提高谷丙转氨酶、谷草转氨酶的酶活，促进脂肪酸代谢，恢复机体的降血脂能力，可用于制备降血脂的药物、保健品、食品添加剂或者食品。该组合物是通过促进肝脏对甘油三酯和高密度脂蛋白的分解，来降低血脂，增加了肝脏的负担，长此以往会影响身体健康。
发明内容
本发明的目的在于提供一种绿色安全、无毒副作用，改善心脑组织的血液微循环，改善脂肪和类脂的代谢，降血脂效果明显的基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物及其制备方法。
本发明针对背景技术中提到的问题，采取的技术方案为：一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物，成份及其重量份为：鮸鱼鱼鳔多肽80~95份、三七总皂甙10~15份、愈创木酚0.0001~0.0002份、鱼油1~10份、维生素C 0.5~2份和香柑内酯0.0002~0.0006份。上述复配物绿色安全、无毒副作用，分子量小，易吸收，利用率高，可同时补充服用者对氨基酸等的需求；其中愈创木酚和香柑内酯通过三七总皂甙具有活血散瘀的作用，使扩张心脑组织血管，能抗血小板聚集，抗血栓形成，减少心血管疾病的发生的概率，并在降低血压的同时增加心脏冠状动脉和脑血管的血流量，改善心脑组织的血液微循环；能有效降低人体内血清胆固醇及低密度脂蛋白的含量，减少心血管疾病的发生的概率。
鱼鳔多肽的平均分子量为550.0~750.0 Da，甘氨酸含量为16.3~16.6%，羟脯氨酸的含量为7.7~8.1%，丙氨酸的含量为7.4~7.9%，脯氨酸的含量为6.8~7.1%，谷氨酸的含量为6.6~6.9%，精氨酸的含量为6.2~6.5%，天冬氨酸的含量为4.3~4.6%，精氨酸的含量为3.8~4.1%。
一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，制备步骤为：
1）将鮸鱼鱼鳔洗净，匀浆，按照1g：15~ 20ml的重量体积比加入0.17~0.23mol/L的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液，混合均匀，调节pH为6.0~7.5，得到混合液；
2）将步骤1得到的混合液温度升至45~ 55℃进行预热5~10min，于300~600 W微波处理10~15min，然后加入复合酶系进行酶解，复合酶系为质量比1:0.7~1.2的中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量为原料质量的2.0~2.5%，酶解温度为45~55℃，酶解时间为4~6h。酶解结束后，升温至90~95℃，并于此温度保持10~15min，离心取上清液；
3）将步骤2得到的上清液过截留分子量为1~2kDa的超滤膜，收集滤过液，制成浓度5~10mg/ml的溶液，进行大孔树脂脱盐；脱盐后的酶解液在≤40℃的温度下进行低压浓缩，最后经喷雾干燥得到鮸鱼鱼鳔多肽；
4）取配方量鮸鱼鱼鳔多肽、三七总皂甙、愈创木酚、鱼油、维生素C和香柑内酯于适量双蒸水中混合均匀，将混合物喷雾干燥得复配物粉末，即为基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物。上述复配物为片剂、分散片、速溶片、散剂、颗粒剂或胶囊。
与现有技术相比，本发明的优点在于：1）本发明制备的复配物绿色安全、无毒副作用，分子量小，易吸收，利用率高，可同时补充服用者对氨基酸等的需求；2）活血散瘀、扩张心脑组织血管，能抗血小板聚集，抗血栓形成，并在降低血压的同时增加心脏冠状动脉和脑血管的血流量，改善心脑组织的血液微循环；3）能有效降低人体内血清胆固醇及低密度脂蛋白的含量，减少心血管疾病的发生的概率；4）不会对肝脏造成负担，反而会起到养肝护肝的作用；5）采用生物酶解法制备，步骤简单，效率高，成本低廉。
具体实施例
下面通过实施例对本发明方案作进一步说明：
实施例1：
一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物，成份及其重量份为：鮸鱼鱼鳔多肽80~95份、三七总皂甙10~15份、愈创木酚0.0001~0.0002份、鱼油1~10份、维生素C 0.5~2份和香柑内酯0.0002~0.0006份。鱼鳔多肽的平均分子量为550.0~750.0 Da，甘氨酸含量为16.3~16.6%，羟脯氨酸的含量为7.7~8.1%，丙氨酸的含量为7.4~7.9%，脯氨酸的含量为6.8~7.1%，谷氨酸的含量为6.6~6.9%，精氨酸的含量为6.2~6.5%，天冬氨酸的含量为4.3~4.6%，精氨酸的含量为3.8~4.1%。
一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，制备步骤为：
1）将鮸鱼鱼鳔洗净，匀浆，按照1g：15~ 20ml的重量体积比加入0.17~0.23mol/L的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液，混合均匀，调节pH为6.0~7.5，得到混合液；
2）将步骤1得到的混合液温度升至45~ 55℃进行预热5~10min，于300~600 W微波处理10~15min，然后加入复合酶系进行酶解，复合酶系为质量比1:0.7~1.2的中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量为原料质量的2.0~2.5%，酶解温度为45~55℃，酶解时间为4~6h。酶解结束后，升温至90~95℃，并于此温度保持10~15min，离心取上清液；
3）将步骤2得到的上清液过截留分子量为1~2kDa的超滤膜，收集滤过液，制成浓度5~10mg/ml的溶液，进行大孔树脂脱盐；脱盐后的酶解液在≤40℃的温度下进行低压浓缩，最后经喷雾干燥得到鮸鱼鱼鳔多肽；
4）取配方量鮸鱼鱼鳔多肽、三七总皂甙、愈创木酚、鱼油、维生素C和香柑内酯于适量双蒸水中混合均匀，将混合物喷雾干燥得复配物粉末，即为基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物。上述复配物为片剂、分散片、速溶片、散剂、颗粒剂或胶囊，以上实验数据呈非线性，其作用机理有待验证。
实施例2：
一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物，成份及其最优选重量份为：鮸鱼鱼鳔多肽90份、三七总皂甙13份、愈创木酚0.0001份、鱼油6份、维生素C 1.3份和香柑内酯0.0004份。
一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，制备步骤为：
1）匀浆鮸鱼鱼鳔与Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液（pH 6.0~7.5，浓度0.2 mol/L）按照1g：18ml的重量体积比混合、匀浆，然后调节pH值至6.5，得混合液；
2）将混合液温度升至55℃搅拌预热10分钟，于400 W微波处理15分钟；按原料质量的2.3%加入中性蛋白酶和木瓜蛋白酶复合酶系(1:1，w/w)，酶解温度为55℃，酶解时间5 h；
3）将所得的酶解产物升温至95℃，并于此温度保持12min，再冷却至室温，然后离心，得酶解液；酶解液依次经1 kDa超滤膜超滤，收集小于1 kDa组分制成浓度8 mg/ml的溶液，按照大孔树脂柱体积的1:15将超滤酶解液加入到DA201-C大孔树脂柱，用双蒸水洗脱2个体积后，然后用60%乙醇溶液洗脱，收集乙醇洗脱液，在35℃进行低压浓缩，最后浓缩液经喷雾干燥得鱼鳔多肽；
4）取配方量鮸鱼鱼鳔多肽、三七总皂甙、愈创木酚、鱼油、维生素C和香柑内酯于适量双蒸水中混合均匀，将混合物喷雾干燥得复配物粉末，粉末上胶囊填充机进行充填。制成0.3g/粒的胶囊。
所得的鱼鳔多肽经SEC- HPLC试验表明：平均分子量为628.0 Da，甘氨酸（Gly）含量为16.5%，羟脯氨酸(Hyp)的含量为7.9%，丙氨酸（Ala）的含量为7.6%，脯氨酸(Pro)的含量为7.0%，谷氨酸（Glu）的含量为6.8%，精氨酸（Arg）的含量为6.4%，天冬氨酸（Asp）的含量为4.5%，精氨酸(Arg)的含量为3.9%。
功能试验：试验样品：实施例2制得的鮸鱼鱼鳔多肽复配物胶囊，分为高（0.33g/kg·bw）、中（0.67g/kg·bw）、低剂量组（2.0g/kg·bw）；
试验动物：SPF级雌性ICR小鼠，体重为18-22g；
试验环境条件：SPF屏障系统；
剂量选择及样品处理：设低（0.33g/kg·bw）、中（0.67g/kg·bw）、高剂量组（2.0g/kg·bw）。低、中、高剂量受试液配置时，分别取胶囊内容物1.65g、3.35g、10.0g 加生理盐水定容至50mL，对照组予以等体积的生理盐水，每天灌胃一次，灌胃体积为0.1mL/10g·bw，连续30天。
试验结果：经口给与小鼠低（0.33g/kg·bw）、中（0.67g/kg·bw）、高剂量组（2.0g/kg•bw）的鮸鱼鱼鳔多肽复配物30天。实验结果（表1）表明：给予本发明鮸鱼鱼鳔多肽复配物不同剂量的小鼠与模型对照组比较，复配物组总胆固醇（TC）合甘油三酯（TG）含量低于模型组，中剂量组和高剂量组也低于阳性对照组；复配物组低密度脂蛋白（LDL）含量低于模型组，高剂量组也低于阳性对照组；复配物组高密度脂蛋白（HDL）含量高于模型组，中剂量组和高剂量组也高于阳性对照组。结果提示本发明的鮸鱼鱼鳔多肽复配物具有显著地降血脂功效，中剂量组和高剂量组的多数指标甚至优于阳性对照组（阿托伐他汀）。
表1 鮸鱼鱼鳔多肽复配物对高血脂小鼠血脂指标的影响
本发明的鮸鱼鱼鳔多肽复配物配方合理，操作简单，具有较强的工业实施性。本发明的鱼鳔多肽复配物可作为老年人和体弱多病者的日常保健产品，亦可作为术后病人的医用食品。
本发明的操作步骤中的常规操作为本领域技术人员所熟知，在此不进行赘述。
以上所述的实施例对本发明的技术方案进行了详细说明，应理解的是以上所述仅为本发明的具体实施例，并不用于限制本发明，凡在本发明的原则范围内所做的任何修改、补充或类似方式替代等，均应包含在本发明的保护范围之内。
Claims (9)
1.一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物，其特征在于成份及其重量份为：鮸鱼鱼鳔多肽80~95份、三七总皂甙10~15份、愈创木酚0.0001~0.0002份、鱼油1~10份、维生素C 0.5~2份和香柑内酯0.0002~0.0006份。
2.根据权利要求1所述的一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物，其特征在于：所述的鱼鳔多肽的平均分子量为550.0~750.0 Da，甘氨酸含量为16.3~16.6%，羟脯氨酸的含量为7.7~8.1%，丙氨酸的含量为7.4~7.9%，脯氨酸的含量为6.8~7.1%，谷氨酸的含量为6.6~6.9%，精氨酸的含量为6.2~6.5%，天冬氨酸的含量为4.3~4.6%，精氨酸的含量为3.8~4.1%。
3.一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，其特征在于以下步骤：
1）将鮸鱼鱼鳔洗净，匀浆，加入Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液，混合均匀，调节pH，得到混合液；
2）加热步骤1得到的混合液进行预热，微波处理后加入复合酶系进行酶解，酶解结束后，灭酶，离心取上清液；
3）将步骤2得到的上清液超滤，再进行DA201-C大孔树脂脱盐、浓缩和喷雾干燥，得到鮸鱼鱼鳔多肽；
4）取配方量鮸鱼鱼鳔多肽、三七总皂甙、愈创木酚、鱼油、维生素C和香柑内酯于适量双蒸水中混合均匀，将混合物喷雾干燥得复配物粉末，即为基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物。
4.根据权利要求3所述的一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，其特征在于：所述的Na2HPO4-NaH2PO4缓冲液的浓度0.17~0.23mol/L，按照1g：15~ 20ml的重量体积比混合鮸鱼鱼鳔匀浆和缓冲液，混合液的pH为6.0~7.5。
5. 根据权利要求3所述的一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，其特征在于：所述的预热温度为45~ 55℃，预热时间为5~10min。
6. 根据权利要求3所述的一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，其特征在于：所述的微波功率为300~600 W，微波处理10 ~ 15min。
7.根据权利要求3所述的一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，其特征在于：所述的复合酶系为质量比1:0.7~1.2的中性蛋白酶和木瓜蛋白酶，加入量为原料质量的2.0~2.5%，酶解温度为45~55℃，酶解时间为4~6h。
8.根据权利要求3所述的一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，其特征在于：所述的超滤膜规格为1~2kDa。
9.根据权利要求3所述的一种基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物的制备方法，其特征在于：所述的基于鮸鱼鱼鳔多肽的降血脂复配物为片剂、分散片、速溶片、散剂、颗粒剂或胶囊。
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