CN107085099A - 一种超导量点及其在免疫荧光快速定量检测中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种超导量点，包括超导量点，超导量点在检测有害物质的免疫层析反应中用于标记抗原，其中超导量点是以氟化钙（CaF2）、氟化锂（LiF）或氟化钡（BaF2）包被核壳结构(CdSe/ZnS)的纳米粒子。本发明还提出一种超导量点在免疫荧光快速定量检测中的应用。本发明中，所提出的超导量点为无机荧光发光物，比化学发光免疫检测技术的有机发光物更稳定，超导量点作为免疫荧光标记，灵敏度要远高于这些有机荧光染料，解决了现有免疫检测技术中抗原抗体的标记物荧光强度低、淬灭时间短的问题。

Description

一种超导量点及其在免疫荧光快速定量检测中的应用
技术领域
本发明涉及抗原检测技术领域，尤其涉及一种超导量点及其在免疫荧光快速定量检测中的应用。
背景技术
免疫荧光技术（Immunofluorescence technique ）又称荧光抗体技术，它是根据抗原抗体反应的原理，先将已知的抗原或抗体标记上荧光基团，再用这种荧光抗体（或抗原）作为探针，与被测抗原或配体发生特异性结合，形成的荧光复合物在一定波长光的激发下可产生荧光，利用荧光分析仪可检测未知抗原或相应配体的含量。免疫荧光技术是高度敏感的微量测定技术，可检测的物质有：食品中有毒有害物质（如霉菌毒素）、违法添加物、肿瘤标志物、药物（抗生素等）、病毒等病原体抗原和抗体、心脏标志物、激素（包括甾体激素等、兴奋剂）、体液中的各种蛋白质及可用免疫（荧光）检测的其它痕量物质。
常用的免疫荧光有机染料标记物有荧光素类以及罗丹明类染料。荧光素类常用的有异硫氰酸荧光素（FITC），罗丹明是一种邻苯二酚类荧光染料。这些传统有机荧光染料发光寿命较短，稳定性欠佳，容易出现光漂白现象，现有的微量有害物质免疫层析检测技术无法同时满足快速和定量的需求，并且样品处理比较复杂、操作繁琐。为此我们提出了一种超导量点及其在免疫荧光快速定量检测中的应用，用来解决上述问题。
发明内容
基于背景技术存在的技术问题，本发明提出了一种超导量点及其在免疫荧光快速定量检测中的应用。
本发明提出的一种超导量点，包括超导量点，超导量点在检测有害物质的免疫层析反应中用于标记抗原，其中超导量点是以氟化钙（CaF2）、氟化锂（LiF）或氟化钡（BaF2）包被核壳结构(CdSe/ZnS)的纳米粒子。
本发明还提出，一种超导量点在免疫荧光快速定量检测中的应用，包括如下步骤：
1）、进行待测样品的制备：将样品进行处理，使其适用于免疫层析反应；
2）、加样到试纸条上：进行免疫层析反应；样品中的微量物质和加样区超导量点标记的微量物质抗体结合，通过毛细作用向前层析；当达到检测区后，检测线T线上固定的微量物质抗原与剩余未结合的超导量点标记的微量物质抗体结合；
3）、用仪器读取试纸条，记录检测结果：用仪器读取T线和C线的荧光强度并计算T/C值，通过仪器内置的标准曲线可计算出样品中微量物质的含量。
优选的，在步骤3）中，检测线T线上结合的超导量点标记的微量物质抗体量和样品中微量物质的浓度成反比。
本发明中，所提出的超导量点为无机荧光发光物，比化学发光免疫检测技术的有机发光物更稳定，超导量点作为免疫荧光标记，灵敏度要远高于这些有机荧光染料，解决了现有免疫检测技术中抗原抗体的标记物荧光强度低、淬灭时间短的问题。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步解说。
本发明提出的一种超导量点，包括超导量点，超导量点在检测有害物质的免疫层析反应中用于标记抗原，其中超导量点是以氟化钙CaF2、氟化锂LiF或氟化钡BaF2包被核壳结构(CdSe/ZnS)的纳米粒子。
本发明提出一种超导量点在免疫荧光快速定量检测中的应用，包括以下步骤：
1）、进行待测样品的制备：将样品进行处理，使其适用于免疫层析反应；
2）、加样到试纸条上：进行免疫层析反应；样品中的微量物质和加样区超导量点标记的微量物质抗体结合，通过毛细作用向前层析；当达到检测区后，检测线T线上固定的微量物质抗原与剩余未结合的超导量点标记的微量物质抗体结合；
3）、用仪器读取试纸条，记录检测结果：用仪器读取T线和C线的荧光强度并计算T/C值，通过仪器内置的标准曲线可计算出样品中微量物质的含量。
本发明中，在步骤3）中，检测线T线上结合的超导量点标记的微量物质抗体量和样品中微量物质的浓度成反比。
本发明中，超导量点粒径小、尺寸可调，激发光谱宽、发射光谱窄；斯托克位移较大，即激发光和发射光波长距离较远，光强度高；吸光系数和光量子产率高，可以提高检测灵敏度，检测下限低，便于产品微（痕）量残留检测；光、热稳定性好，耐光漂白，可以经受反复多次的激发，荧光信号无干扰，淬灭时间较长，发光稳定，能提高检测产品的稳定性，大幅放宽储存运输条件，不需要有机物荧光免疫检测产品的苛刻低温条件。超导量点荧光探针与有机荧光探针相比，物理、化学性质更稳定，对样品的pH值、离子强度等理化性质要求更低，抗干扰能力更强，检测结果更稳定；超导量点具备高亲水性、低生物毒性、水溶性好；超导量点比有机荧光染料成本低、制备简单，采用无磷合成工艺，绿色环保。
该超导量点为无机荧光发光物，比化学发光免疫检测技术的有机发光物更稳定。超导量点作为免疫荧光标记，灵敏度要远高于这些有机荧光染料；并且该超导量点可以结合多种化学基团，能结合抗原、抗体等多种生物分子。
超导量点技术利用免疫层析原理，可对食品中的有毒有害物质等多种微量物质进行快速定量检测。该方法操作简便，样品处理时间短，检测时无需接触剧毒的标准品，标准曲线放在云端，避免每次检测都要绘制标准曲线的繁琐及标准曲线之间的偏差，能够快速定量检测多个样品，可满足现场和实验室的检测要求。
以上所述，仅为本发明较佳的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其发明构思加以等。

Claims (3)

1.一种超导量点，其特征在于，包括超导量点，超导量点在检测有害物质的免疫层析反应中用于标记抗原，其中超导量点是以氟化钙CaF2、氟化锂LiF或氟化钡BaF2包被核壳结构(CdSe/ZnS)的纳米粒子。
2.一种根据权利要求1所述的超导量点在免疫荧光快速定量检测中的应用，其特征在于，包括如下步骤：
1）、进行待测样品的制备：将样品进行处理，使其适用于免疫层析反应；
2）、加样到试纸条上：进行免疫层析反应；样品中的微量物质和加样区超导量点标记的微量物质抗体结合，通过毛细作用向前层析；当达到检测区后，检测线T线上固定的微量物质抗原与剩余未结合的超导量点标记的微量物质抗体结合；
3）、用仪器读取试纸条，记录检测结果：用仪器读取T线和C线的荧光强度并计算T/C值，通过仪器内置的标准曲线可计算出样品中微量物质的含量。
3.根据权利要求2所述的超导量点在免疫荧光快速定量检测中的应用，其特征在于，在步骤3）中，检测线T线上结合的超导量点标记的微量物质抗体量和样品中微量物质的浓度成反比。
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