CN107043728A - 一种防治草莓白粉病的复合菌剂及方法 - Google Patents

一种防治草莓白粉病的复合菌剂及方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种防治草莓白粉病的复合菌剂及方法，所述复合菌剂包括乳酸菌、酵母菌(Pichia fermentans)和醋酸杆菌(Acetobacter peroxydans)；所述乳酸菌为副干酪乳杆菌(Lactobacillus parafarraginis)、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)和哈尔滨乳杆菌(Lactobacillus harbinensis)中的至少一种。本发明能够有效提高草莓产量50％以上及缩短出货时间，减少5天以上，同时，还能防治草莓白粉病，对草莓白粉病的防治效率高达85％以上。

Description

一种防治草莓白粉病的复合菌剂及方法
技术领域
本发明属于农用微生物技术领域，尤其涉及一种防治草莓白粉病的复合菌剂及方法。
背景技术
随着植物种类的不断增多，植物栽培方式的不断多样化，植物病害日趋严重，而传统的化学防治方法存在着许多弊端，比如：化学农药的大量使用引起了严重的环境污染，农产品的农药残留也越来越严重，病菌抗药性产生速度也越来越快等一系列对人们生活有害的影响。在当今倡导低碳经济、环保节约型社会中，寻求既能保护人类生活，又可增产的新技术十分适应当今社会的发展。
生物防治是利用一种生物或其产物对付另外一种生物的方法，分为以虫治虫、以菌治虫、以菌治菌三大类。它利用了生物物种间的相互关系，以一种或一类生物或其产物抑制另一种或另一类生物。生物防治的方法有很多，微生物防治就是其中一种。生物防治主要是利用有益的微生物，通过生物间的竞争作用、抗生作用、寄生作用、溶菌作用及诱导抗性等，来抑制某些病原物的存活和活动，其优越性在于资源丰富、选择性强、无残留、无污染、成本低，兼防兼治、增产增收、保持生态平衡，起到长效的作用。
草莓白粉病是草莓生产中的主要病害。近年来，草莓白粉病的发生逐渐加重，特别是保护地草莓白粉病，发生严重时，病叶率在45％以上，病果率在50％以上，严重影响了草莓的产量、品质和经济效益(杨联伟.烟台果树，2005(3)：15-16)。
用于生物防治的微生物主要包括真菌、细菌、放线菌和酵母菌等很多生物种群，细菌主要包括乳酸菌、芽孢杆菌、醋酸杆菌等。其中，乳酸菌被广泛应用于酸奶行业，被证实为对人体无公害，且通过提供营养物质、改善消化道微生态环境、调节免疫系统功能等作用机制起到促进人类消化吸收、增强免疫等作用。
现有的白粉病防治方法：
1.农业措施
选择抗病品种；合理控制氮肥用量，多施磷、钾肥，合理密植；合理进行水肥管理；施用腐熟有机肥、复合肥要适量，尤其氮肥不能施用过多，防止烧苗及旺长；适时浇水，满足苗期对水分的需求；利用风口调节棚室内温、湿度；及时摘除老叶、病叶，清洁田园，增加温室草莓的通风透光性；
2.物理措施
温度湿度过大时应加大放风量；草莓声场过程中应及时摘除老叶、病残叶、病梗、病果，集中带到室外深埋或烧掉，消灭菌源；
3.药剂防治
目前防治中常用4％朵麦可水剂、50％多菌灵、30％特富灵可湿性粉剂。但是化学药剂的长期大量使用，使各种有害病菌产生了抗药性，增加了防治难度；同时化学药剂在草莓内有残留，危害人们的身体健康，并且污染环境。
生防微生物对农药的反应敏感，种类比较单一，抗菌谱较窄，且在植株上定殖较难，生防效果不稳定，都限制了其在植物领域的广泛应用。因此，进一步开发广谱抗菌、生防效果稳定的微生物资源迫在眉睫。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供一种防治草莓白粉病的复合菌剂及方法。所述复合菌剂能够有效提高草莓产量(50％以上)及缩短出货时间(减少5天以上)，同时，还能防治草莓白粉病，对草莓白粉病的防治效率高达85％以上。
本发明第一方面，提供一种防治草莓白粉病的复合菌剂，所述复合菌剂包括乳酸菌、酵母菌(Pichia fermentans)和醋酸杆菌(Acetobacter peroxydans)；所述乳酸菌为副干酪乳杆菌(Lactobacillus parafarraginis)、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)和哈尔滨乳杆菌(Lactobacillusharbinensis)中的至少一种。作为优选，所述乳酸菌为鼠李糖乳杆菌(Lactobacillusrhamnosus)，与酵母菌(Pichia fermentans)、醋酸杆菌容易联合培养，且培养后的复合菌种能够相互适应，防止白粉病效果较好。
作为优选，所述复合菌剂中乳酸菌的活菌量至少为108CFU/mL。
作为优选，所述酵母菌(Pichia fermentans)的活菌量至少为107CFU/mL。
作为优选，所述醋酸杆菌(Acetobacter peroxydans)的活菌量至少为106CFU/mL。
所述复合菌剂的制备方法如下：使用发酵设备对乳酸菌、酵母菌和醋酸杆菌三种菌种进行联合发酵，发酵至PH降至4以下。由于本发明采用的三种菌种类型不同，酵母菌是兼性厌氧菌，醋酸菌为异养需氧型菌，有氧条件下繁殖，无氧情况下不繁殖，有氧条件下发酵；乳酸菌为异养厌氧型，无氧条件下繁殖，有氧情况下不繁殖，无氧条件下发酵。将这三种菌在联合发酵过程中，能够相互适应，筛选出能够达到生存平衡的复合菌剂，增强菌剂在植株上的定植力，不至于陷入种类单一的局限。
本发明第二方面，提供一种基于所述复合菌剂的防治草莓白粉病的方法，在草莓开花初期，将所述复合菌剂对草莓进行喷洒或滴灌，直至草莓生长结果期结束。
进一步地，喷洒时复合菌剂与水按1：100-1：400的比例稀释，5～7天喷洒一次。
进一步地，滴灌时复合菌剂与水按1：150-1：250的比例稀释，7～10天滴灌一次。
本发明的特点在于，本发明提供的复合菌剂以乳酸菌为主，酵母菌(Pichiafermentans)、醋酸杆菌(Acetobacter peroxydans)为辅，三个主要菌种，按一定比例调配而成。酵母菌是兼性厌氧菌，醋酸杆菌为异养需氧型菌，有氧条件下繁殖，无氧情况下不繁殖，有氧条件下发酵；乳酸菌为异养厌氧型，无氧条件下繁殖，有氧情况下不繁殖，无氧条件下发酵。由于繁殖条件不同，彼此生存条件相互抑制，难以发挥抗菌抑菌效果，一般条件下本领域技术人员不会将这三个菌种混合在一起。这三种菌种如果能成功混合，能够有效发挥抑菌效果，由于广谱抗菌作用，草莓寄生菌不易产生抗性。
为了将这三种菌复合起来，本发明将此三种菌联合发酵，三种菌种在同一个发酵罐内混合联合发酵，发酵过程中三种菌种相互适应、相互筛选、优胜劣汰，最终达到三种菌种的某种生存平衡的复合菌剂，生存平衡后的复合菌种中乳酸菌的活菌量不低于108CFU/mL；酵母菌(Pichia fermentans)的活菌量不低于107CFU/mL；醋酸杆菌(Acetobacterperoxydans)的活菌量不低于106CFU/mL，一般平衡后乳酸菌、酵母菌与醋酸杆菌的活菌量比例为100：10：1左右。达到生存平衡的复合菌剂在植株上的定植力大大增加，能够有效发挥广谱抗菌作用，草莓寄生菌不易产生抗性。
本发明提供的复合菌剂能够抑制麦类白粉菌、霉菌、赭曲霉菌、黄曲霉菌等病原菌的生长繁殖。所述复合菌剂能有效预防草莓白粉病的发生，实验组草莓的病情指数远远低于对照组，且当解复合菌剂稀释至400倍时，实验组草莓的病情指数仍低于8％，防治效率高达85.1％。本发明提供的方法能较大程度的代替农药化肥，具有绿色环保、无公害、无残留等特点，可有效减轻生态环境污染，对草莓无污染，人们可以放心食用。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
1、本发明提供的复合菌剂，在一定配比范围内表现出明显的增效或相加作用，组合物对病菌的防治效果比单剂有了明显提高，降低了农药化肥的使用剂量，减少了用药次数，降低了用药成本，减少了农药化肥对生态环境的不利影响。
2、本发明提供的复合菌剂，三种有效菌种的组合，扩大了杀菌谱，弥补了单种菌剂使用时的缺陷和局限性。
3、本发明提供的复合菌剂，药效发挥迅速，持效期长，使用成本低，使用方便，省时省力，其推广应用有着巨大的经济效益和社会效益。
4、本发明所使用的复合菌剂能够抑制麦类白粉菌、霉菌、赭曲霉菌、黄曲霉菌等病原菌的生长繁殖。所述复合菌剂能有效预防草莓白粉病的发生，实验组草莓的病情指数远远低于对照组，且当解复合菌剂稀释至400倍时，实验组草莓的病情指数仍低于8％，防治效率高达85.1％。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明的技术方案做进一步详细说明，但本发明并不局限于以下技术方案。
实施案例：复合菌剂对草莓白粉病防治效果的验证试验
1、复合菌剂制备
使用大型发酵设备对三种菌种(醋酸杆菌、酵母菌和鼠李糖乳杆菌，购买于株式会社GSLBIO公司)进行联合发酵，当PH降至4以下时即是发酵成功，此时，复合菌剂中鼠李糖乳杆菌的活菌量108CFU/mL以上，酵母菌(Pichia fermentans)的活菌量为107CFU/mL以上，醋酸杆菌(Acetobacter peroxydans)的活菌量为106CFU/mL以上。联合发酵的营养成分为复合菌剂种子液、海盐、糖浆、葡萄糖、水、复合氨基酸、复合维生素和醋酸钠，培养温度为25～30℃。
2、试验地点：昆明市西山区自耕农场
3、试验方法
1)试验组和对照组设立：两组试验组(试验1组、试验2组)，每组试验组2垄草莓(一垄、二垄)，共400棵，每个处理组之间设立保护行；一组对照组，对照组设2垄草莓，共400棵；以上试验组及对照组均在昆明市西山区自耕农场5号大棚中。
喷洒：草莓开花初期，对试验组采取叶面施肥，试验1组将复合菌剂按1：100的比例稀释，试验2组将复合菌剂按1：400的比例稀释。每周一次，直至草莓果期结束。对照组则使用未加入复合菌剂的清水进行喷洒以作对照。喷洒一个月后，检查草莓白粉病的发病情况。
滴灌：将复合菌剂按1：200的比例稀释，并按日常滴灌量对草莓试验1组和2组进行滴灌，对照组使用未加入复合菌剂的清水进行滴灌，一个月后，检查草莓白粉病的发病情况。
结果及分析
草莓白粉病叶部分级标准：0级：叶片无病斑；1级：病斑面积占整个叶面积的5％以下；2级：病斑面积占整个叶面积的6％-15％；3级：病斑面积占整个叶面积的16％-25％；4级：病斑面积占整个叶面积的26％-50％；5级：病斑面积占整个叶面积的50％以上。草莓白粉病果部分级标准：0级：果实无病斑；1级：病斑面积占整个果实面积的5％以下；2级：病斑面积占整个果实面积的6％-15％；3级：病斑面积占整个果实面积的16％-25％；4级：病斑面积占整个果实面积的26％-50％；5级：病斑面积占整个果实面积的50％以上。
病情指数＝[∑(病级值*该级发病叶数)/(调查总叶数*最高病级值)]*100％
防治效率的计算公式＝[1-(处理的病情指数/对照的病情指数)]*100％。
以SPSS统计软件对实验数据进行分析，结果如表1所示：
表1复合菌剂对草莓白粉病的预防效果
综上，本发明所使用的复合菌剂能够抑制麦类白粉菌的生长繁殖。从而能有效预防草莓白粉病的发生，实验组草莓的病情指数远远低于对照组，且当解复合菌剂稀释至400倍时，实验组草莓的病情指数仍低于8％，防治效率高达85.1％。

Claims (8)

1.一种防治草莓白粉病的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂包括乳酸菌、酵母菌(Pichia fermentans)和醋酸杆菌(Acetobacter peroxydans)；所述乳酸菌为副干酪乳杆菌(Lactobacillus parafarraginis)、布氏乳杆菌(Lactobacillus buchneri)、鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)和哈尔滨乳杆菌(Lactobacillus harbinensis)中的至少一种。
2.如权利要求1所述的防治草莓白粉病的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂中乳酸菌的活菌量至少为108CFU/mL。
3.如权利要求1所述的防治草莓白粉病的复合菌剂，其特征在于，所述酵母菌(Pichiafermentans)的活菌量至少为107CFU/mL。
4.如权利要求1所述的防治草莓白粉病的复合菌剂，其特征在于，所述醋酸杆菌(Acetobacter peroxydans)的活菌量至少为106CFU/mL。
5.如权利要求1所述的防治草莓白粉病的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂的制备方法如下：使用发酵设备对乳酸菌、酵母菌和醋酸杆菌三种菌种进行联合发酵，发酵至PH降至4以下。
6.一种基于如权利要求1～5任一所述的复合菌剂的防治草莓白粉病的方法，其特征在于，在草莓开花初期，将所述复合菌剂对草莓进行喷洒或滴灌，直至草莓生长结果期结束。
7.如权利要求6所述的防治草莓白粉病的方法，其特征在于，喷洒时复合菌剂与水按1：100-1：400的比例稀释，5～7天喷洒一次。
8.如权利要求6所述的防治草莓白粉病的方法，其特征在于，滴灌时复合菌剂与水按1：150-1：250的比例稀释，7～10天滴灌一次。
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