CN107245461A - 一种解淀粉芽孢杆菌b6及其应用 - Google Patents

Abstract

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌B6及其应用，所述解淀粉芽孢杆菌B6保藏单位为中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏日为2016年11月20日，保藏编号为CCTCCM 2016621。解淀粉芽孢杆菌B6能够抑制73种西瓜病原菌，广谱抑制效果较好，而且耐受能力和繁殖能力高，可以直接在传统种植地接种，即使不设置温室大棚也具有较好的效果。

Description

一种解淀粉芽孢杆菌B6及其应用

技术领域

本发明涉及微生物技术领域，具体涉及一种解淀粉芽孢杆菌B6及其应用。

背景技术

现有技术中，土传病害是指病原体如真菌、细菌、线虫和病毒随病残体生活在土壤中，条件适宜时从作物根部或茎部侵害作物而引起的病害。而连作是病土形成的主要人为因素，主要原因由于连续种植一类作物，使相应的某些病菌得以连年繁殖，在土壤中大量积累，形成病土，年年发病。

以西瓜为例，宁夏有80万亩压砂西瓜，如果算上甘肃新疆的西瓜和甜瓜面积，就达近千万亩，这些地区都是传统的种植地，普遍存在连作障碍，亟需治理。由于土壤对化学药剂的吸附作用，一般的化学防治效果均不理想，因此大家普遍认为土传病害或连作障碍是个老大难问题。一般而言，设施大棚采用微生物学的方法来治理连作障碍，防治效果一般在80%以上，那是因为大棚内的土壤含丰富的有机质，有利于生防菌的存活和繁殖。而宁夏的压砂西瓜种植的土壤几乎不含有机质，甚至连常见的土壤颗粒都不存在，西瓜就长在人为搬到地里的沙砾中，施入地里的生防菌难以活下来，因此宁夏甘肃等地的压砂瓜连作障碍的防治成为一个世界性难题。

发明内容

本发明的目的是针对现有技术中的上述不足，提供一种易存活和繁殖的解淀粉芽孢杆菌以及其应用方法，其应用方法可以有效防治土传病害。

本发明的目的通过以下技术方案实现：

解淀粉芽孢杆菌B6，拉丁学名：Bacillus amyloliquefaciens，保藏单位：中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，保藏日：2016年11月07日，保藏编号 CCTCCM 2016621。

本发明的解淀粉芽孢杆菌B6对土传病害病原菌有极强的抑制甚至灭杀的作用，是通过大量的实验劳动得出的智慧成果。

首先，申请人通过分离获得宁夏西瓜主要病害的病原菌，不仅可以摸清现阶段宁夏西瓜的病害发生基本情况，而且这些病原菌将用作靶标，供下一步分离筛选生防拮抗菌用。

进而，申请人通过大量的分离筛选工作，获得有效拮抗或抑制上述病原菌的微生物。具体方法是从菜园、森林、湿地等各种地方取土样，用无菌水稀释后涂布在营养琼脂培养基上，待培养基上长出菌落后，挑选5000余种菌落保存在4℃冰箱备用。在培养基平板中央上接种西瓜病原菌，在离中央病菌约2厘米的地方接种待试菌株，如果待试菌株能够抑制病原菌生长，中央的病原菌就不能够长到拮抗菌的位置，两者之间会存在一个无菌地带；如果待试菌株无抑制作用，病原菌就能一直生长到待试菌株所在的位置，甚至越过待试菌株；

最后，获得了83个能够抑制西瓜病原菌的拮抗菌株。通过对103种真菌作拮抗试验，最终筛选出可以抑制73种西瓜病原菌的解淀粉芽孢杆菌B6。经实践证明，解淀粉芽孢杆菌B6对甜瓜枯萎病、甜瓜蔓枯病、甜瓜炭疽病、甜瓜黑点根腐病、甜瓜菌核病均有一定的防治作用。

本发明还提供了一种土传病害生物防治基质，由所述解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述土传病害生物防治基质中的解淀粉芽孢杆菌B6有效活菌数大于等于500万/克，优选地，所述有效活菌数为500万/克-2亿/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 60%-100%

水 0%-39%

粘结剂 0%-1%；

所述粘结剂为羟甲基纤维素和/或凹凸棒土。

本发明的土传病害生物防治基质具有以下三个优点：1、既能实现对病原菌的防治，也能通过有机肥料给作物提供营养，也能从一定程度上改善宁夏甘肃等几乎不含有机质的土壤环境；2、有机肥料也能作为有机营养物，促进本发明解淀粉芽孢杆菌B6的繁殖生长；3、育苗基质能够隔离西瓜根部与土壤的直接接触，从而降低病原菌感染根部的可能性，达到保护西瓜根部的目的。

另，考虑粘结剂的粘结效果以及对于本申请解淀粉芽孢杆菌B6的生长需求，所述粘结剂可以由羟甲基纤维素和凹凸棒土按重量比5:1-1:5组成，进一步地所述粘结剂优选为羟甲基纤维素，羟甲基纤维素和凹凸棒土在本发明育苗基质中均能起到良好的粘结作用，而羟甲基纤维素还能作为一种有机营养物质协同有机肥料参与到营养供给中，提高育苗基质对于西瓜的促进成长效果。

另，所述育苗基质可以仅为有机肥料，也可以仅由有机肥料和水组成，也可以仅由有机肥料和粘结剂组成，也可以由有机肥料、水和粘结剂组成，还可以由有机肥料、水、粘结剂以及根据需求添加的功能剂（例如维生素、无机盐、糖、中药药剂等）组成。

优选地，所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 62-89%

水 10-30%

粘结剂 1-8%。

通过对水的加入量调节，能够很好地迎合作物的生长需求做出调整，而粘结剂的加入能使本发明的有机肥料粘在一起，便于挤压成一定的形状，符合种植需求。

更为优选地，所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 68-75%

水 20-25%

粘结剂 5-7%。

水量大于25wt%，西瓜容易吸收水分导致糖分稀释，甜味感降低；水量低于20wt%，容易导致营养物质运输不畅，作物不能汲取足够营养而萎缩，同时水量过低也不利于本发明解淀粉芽孢杆菌B6的繁殖。

其中，所述有机肥料为草炭、动物粪便中的至少一种。草炭是沼泽发育过程中的产物，形成于第四纪，由沼泽植物的残体，在多水的嫌气条件下，不能完全分解堆积而成。含有大量水分和未被彻底分解的植物残体、腐殖质以及一部分矿物质，肥效长，能够很好地改善基础土壤；动物粪便中含有有动物消化道分泌的各种活性酶以及微生物产生的各种酶，这些酶有利于提高土壤的吸收性能、缓冲性能和抗逆性能。

进一步地，所述动物粪便进过发酵处理，经过发酵处理后，动物粪便中还含有腐殖酸等有益物质，有利于作物生长。

进一步地，本申请的动物粪便发酵处理工艺包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至50-70wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入宁夏五丰农业科技有限公司生产的有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪的0.02-0.1wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在50-60℃，温度维持时间为20-30天。

所述动物粪便经过该发酵工艺处理后，其内的病原微生物和杂草种子能被有效灭活，并且产生大量腐殖酸等有益成分，用于本申请的育苗基质中，能够提高解淀粉芽孢杆菌B6的活性从而降低西瓜病死率，也能作为丰富的有机营养促进西瓜成长，从而提高西瓜甜度、质地等品质。

进一步优选地，所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的羊粪组成，所述草炭与经过发酵处理的羊粪的重量比为5:1-1:1。该有机肥料组合是综合考虑了西瓜和解淀粉芽孢杆菌B6的生长需求并经过无数次实验得到，通过该比例组合，能够有效抑菌从而大大降低西瓜病死率的同时也适当提升了西瓜的甜度。

更进一步优选地，所述草炭产自辽宁，所述羊粪为青海高原羊粪，所述有机腐熟剂产自宁夏五丰农业科技有限公司，辽宁草炭、青海高原羊粪以及产自宁夏五丰农业科技有限公司的有机腐熟剂用于本发明的土传病害生物防治基质，能够增强解淀粉芽孢杆菌B6防治对西瓜病原菌的灭杀作用。

本发明还提供了该种土传病害生物防治基质的制备方法，包括如下步骤：

（1）将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中；

（2）将接种之后的有机肥料、水和粘接剂混合均匀并压合成所需形状；优选地，压合成直径5-15厘米，高1-9厘米的圆柱，圆柱的顶端中央压出一个直径1-3厘米深1-2厘米的种子槽，供放西瓜种子用；更为优选地，所述圆柱直径10厘米，高5厘米，种子槽直径2厘米深1.5厘米。

将土传病害生物防治基质压合成圆柱，更便于工业化应用。

本发明还提供了该种土传病害生物防治基质的使用方法，包括如下步骤：

（1）在播种地挖坑，将所述土传病害生物防治基质放入坑中；

（2）将种子放到所述土传病害生物防治基质表面上，优选地，所述种子放在种子槽内，然后浇水、覆土、盖膜。该使用方法能够将西瓜主根与带病土壤隔离从而提高该解淀粉芽孢杆菌B6存活率和繁殖能力，进而提高西瓜土传病害的防治效果。

此外，发明人还在83个能够抑制西瓜病原菌的拮抗菌株中筛选出可以抑制61种西瓜病原菌的短小芽孢杆菌FE05，拉丁学名：Bacillus pumilus，保藏单位：中国典型培养物保藏中心（CCTCC），地址：湖北省武汉市武昌区八一路珞珈山，保藏日：2016年11月07日，保藏编号 CCTCCM 2016624。解淀粉芽孢杆菌B6与短小芽孢杆菌FE05的拮抗组合，差异互补，能够抑制97种西瓜病原菌，实现广谱抑制西瓜病原菌的目的。

发明人通过将解淀粉芽孢杆菌B6和短小芽孢杆菌FE05进行组合，得到了能够广谱抑制西瓜病原菌的土传病害生防菌剂，可以替代上述的短小芽孢杆菌FE05接种至有机肥料中，并且该土传病害生防菌剂繁殖能力高，耐受营养匮乏环境能力强，应用于在宁夏甘肃等几乎不含有机质的土壤也能够发挥有效作用。优选地，所述土传病害生防菌剂由解淀粉芽孢杆菌B6和短小芽孢杆菌FE05按数量比5-1:1的比例组成。经试验检测，该比例能够调节解淀粉芽孢杆菌B6和短小芽孢杆菌FE05之间的共生平衡，降低它们自身的争夺资源导致相互抑制作用，综合两种菌种对于不同西瓜病原菌的细菌效果以及不同西瓜病原菌的数量、危害作用，从而优选出该菌种比例能够利用较少的营养资源达到较好的广谱抑菌效果。

本发明的有益效果：1、本发明的解淀粉芽孢杆菌B6是以宁夏西瓜病原菌为标靶，从菜园、森林、湿地等各种地方取土样培植得到的能够抑制西瓜病原菌的拮抗菌株，特异性强，特别适用于宁夏等地的环境土壤；2、本发明的解淀粉芽孢杆菌B6能够抑制73种西瓜病原菌，广谱抑制效果较好，而且耐受能力和繁殖能力高，可以直接在传统种植地接种，即使不设置温室大棚也具有较好的效果。

附图说明

图1为分离得到的解淀粉芽孢杆菌B6单菌落在显微镜下放大的菌落图。

图2为解淀粉芽孢杆菌B6芽孢染色结果图。

图3为分离得到的短小芽孢杆菌FE05单菌落在显微镜下放大的菌落图。

图4为短小芽孢杆菌FE05芽孢染色结果图。

具体实施方式

结合以下实施例对本发明作进一步描述，见图1-4所示。

实施例1

本实施例的土传病害生物防治基质由解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为500万/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 79.5%

水 20%

粘结剂 0.5%

其中，所述粘结剂为羟甲基纤维素。

所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的动物粪便组成，所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为3:1，所述草炭为辽宁草炭，所述动物粪便为青海高原羊粪；

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至60wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.06wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在55℃，温度维持时间为25天。

本实施例的土传病害生物防治基质的制备方法，包括如下步骤：

（1）将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中；

（2）将接种之后的有机肥料、水和粘接剂混合均匀并压合成直径10厘米，高5厘米的圆柱，圆柱的顶端中央压出一个直径2厘米深1.5厘米的种子槽，供放西瓜种子用；

本实施例的土传病害生物防治基质的使用方法，包括如下步骤：

（1）在播种地挖坑，将所述土传病害生物防治基质放入坑中；

（2）将种子放到所述土传病害生物防治基质种子槽内，然后浇水、覆土、盖膜。

实施例2

本实施例与实施例1的区别在于：

所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为600万/克

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 69%

水 30%

粘结剂 1%。

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至50wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.02wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在50℃，温度维持时间为30天。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例3

本实施例与实施例1的区别在于：

所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为800万/克

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 89.9%

水 10%

粘结剂 0.1%。

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至70wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.1wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在60℃，温度维持时间为20天。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例4

本实施例与实施例1的区别在于：

所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为1000万/克

所述解淀粉芽孢杆菌B6由解淀粉芽孢杆菌B6和短小芽孢杆菌FE05按数量比5:1的比例组成。

所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为5:1。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例5

本实施例与实施例1的区别在于：

所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为1200万/克

所述解淀粉芽孢杆菌B6由解淀粉芽孢杆菌B6和短小芽孢杆菌FE05按数量比1:1的比例组成。

所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为1:1。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例6

本实施例与实施例1的区别在于：

所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为3000万/克

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 83.5%

水 15.8%

粘结剂 0.7%

所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为4:1，所述动物粪便为牛粪。

所述粘结剂为凹凸棒土。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例7

本实施例与实施例1的区别在于：

所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为4000万/克

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 75.5%

水 24.2%

粘结剂 0.3%

所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为2:1，所述动物粪便为猪粪。

所述粘结剂由羟甲基纤维素和凹凸棒土按重量比1:1的比例组成。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例8

本实施例的土传病害生物防治基质由解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为6000万/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 70%

水 29.9%

粘结剂 0.1%

其中，所述粘结剂为羟甲基纤维素。

所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的动物粪便组成，所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为2.5:1，所述草炭为辽宁草炭，所述动物粪便为青海高原羊粪；

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至55wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.04wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在53℃，温度维持时间为27天。

本实施例的土传病害生物防治基质的制备方法，包括如下步骤：

（1）将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中；

（2）将接种之后的有机肥料、水和粘接剂压合成直径5厘米，高1厘米的圆柱，圆柱的顶端中央压出一个直径1厘米深1厘米的种子槽，供放西瓜种子用。

本实施例的土传病害生物防治基质的使用方法与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例9

本实施例的土传病害生物防治基质由解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为8000万/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 90%

水 9.8%

粘结剂 0.2%

其中，所述粘结剂由羟甲基纤维素和凹凸棒土按重量比2:1的比例组成。

所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的动物粪便组成，所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为1.5:1，所述草炭为辽宁草炭，所述动物粪便为青海高原羊粪；

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至65wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.08wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在58℃，温度维持时间为22天。

本实施例的土传病害生物防治基质的制备方法，包括如下步骤：

（1）将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中；

（2）将接种之后的有机肥料、水和粘接剂混合均匀并压合成直径15厘米，高9厘米的圆柱，圆柱的顶端中央压出一个直径3厘米深2厘米的种子槽，供放西瓜种子用。

本实施例的土传病害生物防治基质的使用方法与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例10

本实施例的土传病害生物防治基质由解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为1亿/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 65%

水 34.4%

粘结剂 0.6%

其中，所述粘结剂为羟甲基纤维素。

所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的动物粪便组成，所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为4:1，所述草炭为辽宁草炭，所述动物粪便为青海高原羊粪；

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至66wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.05wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在54℃，温度维持时间为26天。

本实施例的土传病害生物防治基质的制备方法，包括如下步骤：

（1）将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中；

（2）将接种之后的有机肥料、水和粘接剂混合均匀并压合成直径12厘米，高7厘米的圆柱，圆柱的顶端中央压出一个直径2.5厘米深1.8厘米的种子槽，供放西瓜种子用。

本实施例的土传病害生物防治基质的使用方法与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例11

本实施例的土传病害生物防治基质由解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为1.2亿/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 72%

水 27.6%

粘结剂 0.4%

其中，所述粘结剂由羟甲基纤维素和凹凸棒土按重量比3:1的比例组成。

所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的动物粪便组成，所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为2:1，所述草炭为辽宁草炭，所述动物粪便为青海高原羊粪；

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至58wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.07wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在56℃，温度维持时间为24天。

本实施例的土传病害生物防治基质的制备方法，包括如下步骤：

（1）将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中；

（2）将接种之后的有机肥料、水和粘接剂混合均匀并压合成直径7厘米，高3厘米的圆柱，圆柱的顶端中央压出一个直径1.2厘米深1.1厘米的种子槽，供放西瓜种子用。

本实施例的土传病害生物防治基质的使用方法与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例12

本实施例的土传病害生物防治基质由解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为1.5亿/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 99.2%

粘结剂 0.8%

所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的动物粪便组成，所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为3.6:1，所述草炭为辽宁草炭，所述动物粪便为青海高原羊粪；

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至53wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.09wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在53.9℃，温度维持时间为26天。

本实施例的土传病害生物防治基质的制备方法，包括如下步骤：

（1）将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中；

（2）将接种之后的有机肥料、水和粘接剂混合均匀并压合成直径8.8厘米，高2.4厘米的圆柱，圆柱的顶端中央压出一个直径1.6厘米深1.6厘米的种子槽，供放西瓜种子用。

本实施例的土传病害生物防治基质的使用方法与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例13

本实施例的土传病害生物防治基质由解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为1.8亿/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 80%

水 20%

所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的动物粪便组成，所述草炭与经过发酵处理的动物粪便的重量比为2.8:1，所述草炭为辽宁草炭，所述动物粪便为青海高原羊粪；

所述发酵处理包括如下步骤：

（1）含水量调节：将动物粪便的含水量调至66.6wt%；

（2）加入有机腐熟剂：往含水量调节完的动物粪便加入有机腐熟剂并进行混合，所述有机腐熟剂的加入量为含水量调节完的动物粪便的0.03wt%；

（3）高温灭菌：利用有机腐熟剂与动物粪便的反应热使动物粪便的温度维持在51.2℃，温度维持时间为21天。

所述土传病害生物防治基质的制备方法为将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中；

所述土传病害生物防治基质的使用方法包括如下步骤：

（1）在播种地挖坑，将所述土传病害生物防治基质放入坑中；

（2）将种子放到所述土传病害生物防治基质表面上，然后浇水、覆土、盖膜。本实施例的土传病害生物防治基质的使用方法与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例14

本实施例与实施例1的区别在于：

所述育苗基质为有机肥料；所述有机肥料由辽宁草炭和市售的已经发酵处理好的青海高原山羊粪按重量比3:1的比例组成。

所述土传病害生物防治基质的制备方法为将解淀粉芽孢杆菌B6接种到有机肥料中，所述土传病害生物防治基质的解淀粉芽孢杆菌B6的有效活菌数为2亿/克；

所述土传病害生物防治基质的使用方法包括如下步骤：

（1）在播种地挖坑，将所述土传病害生物防治基质放入坑中；

（2）将种子放到所述土传病害生物防治基质表面上，然后浇水、覆土、盖膜。

本实施例的其余内容与实施例1相同，这里不再赘述。

实施例15

本实施例与实施例1的区别在于：

本实施例的土传病害生物防治基质由短小芽孢杆菌EF05和解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成，所述短小芽孢杆菌EF05由和解淀粉芽孢杆菌B6的数量比为1:3。

对比例1

本对比例与实施例1的区别在于：

所述育苗基质不经接种处理。

所述育苗基质的制备方法为将有机肥料、水和粘接剂混合均匀并压合成直径10厘米，高5厘米的圆柱，圆柱的顶端中央压出一个直径2厘米深1.5厘米的种子槽，供放西瓜种子用；

本对比例的育苗基质的使用方法，包括如下步骤：

（1）在播种地挖坑，将所述土传病害生物防治基质放入坑中；

（2）将种子放到所述土传病害生物防治基质种子槽内，然后浇水、覆土、盖膜。

对比例2

本对比例与实施例1的区别在于：

所述育苗基质由如下重量分数的原料组成：

玉米粉 33%

大米粉 33%

小麦麸皮 33%

羟甲基纤维素 1%。

申请人曾在宁夏中卫香山用西瓜专用基质做田间试验，西瓜地是连作10年的地块，有严重的土传病害。西瓜品种为金城5号和京欣品种，每个实施例的试验面积50亩，每个对照例的试验面积为50亩，西瓜采摘前统计发病率和含糖率，采摘后立刻检测肉色肉质以及在传统冰霜内的保质期，得到下表数据：

金城5号实施例1-8的西瓜肉色鲜红均匀，籽粒棕黑，瓜内水汁丰富，甘甜可口，瓜瓤紧实嫩脆，咀嚼口感美妙；而对比例1-2的西瓜色泽粉红，籽粒淡棕，酸甜，瓤沙，肉质松软。

京欣实施例1-8的西瓜肉色鲜红均匀，籽粒棕黑，瓜瓤汁多，果肉鲜嫩，紧实甘甜，肉质鲜美，而对比例1-2的西瓜酸甜，瓤沙，肉质松软。

由以上检测可以得知，本申请的传病害生物防治基质用于与宁夏等地环境相近的土壤时，能够有效防止西瓜的土传病害，大大降低了西瓜的病死率，相对不添加微生物防治的对比例1而言，病死率可减少7%以上，并且在一定程度上提高了西瓜甜度，而且肉色和肉质均得到明显的改善，保质期也得以延长。

最后应当说明的是，以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非对本发明保护范围的限制，尽管参照较佳实施例对本发明作了详细地说明，本领域的普通技术人员应当理解，可以对本发明的技术方案进行修改或者等同替换，而不脱离本发明技术方案的实质和范围。

Claims (10)

1.一种解淀粉芽孢杆菌B6，其特征在于：保藏单位为中国典型培养物保藏中心（CCTCC），保藏编号为CCTCCM 2016621。

2.一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：将权利要求1所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6应用于防治土传病害上。

3.根据权利要求2所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：所述土传病害包括甜瓜枯萎病、甜瓜蔓枯病、甜瓜炭疽病、甜瓜黑点根腐病和甜瓜菌核病。

4.根据权利要求2或3所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：将所述解淀粉芽孢杆菌B6接种到育苗基质形成一种土传病害生物防治基质，所述土传病害生物防治基质中的解淀粉芽孢杆菌B6有效活菌数大于等于500万/克；

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 60%-100%

水 0%-39%

粘结剂 0%-1%；

所述粘结剂为羟甲基纤维素和/或凹凸棒土。

5.根据权利要求4所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：

所述育苗基质包括如下重量百分比的组分：

有机肥料 62-89%

水 10-30%

粘结剂 1-8%。

6.根据权利要求4所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：所述有机肥料为草炭、动物粪便中的至少一种。

7.根据权利要求6所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：所述有机肥料由草炭和经过发酵处理的羊粪组成，所述草炭与经过发酵处理的羊粪的重量比为1-5:1。

8.根据权利要求1所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：所述粘结剂为羟甲基纤维素和凹凸棒土中的至少一种。

9.根据权利要求8所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：所述粘结剂由羟甲基纤维素和凹凸棒土按重量比5:1-1:5组成。

10.根据权利要求4所述的一种解淀粉芽孢杆菌B6的应用，其特征在于：所述土传病害生物防治基质的使用方法包括如下步骤：（1）在播种地挖坑，将权利要求4所述土传病害生物防治基质放入坑中；（2）将种子放到所述土传病害生物防治基质表面上，然后浇水、覆土、盖膜。