CN107028887A - 脂质体用于治疗慢性乙型病毒性肝炎的用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及脂质体用于制备治疗慢性乙型病毒性肝炎的药物用途，其中所述脂质体由包括磷脂和胆固醇的物质制备而成。本发明还涉及所述脂质体用于制备促进慢性乙型病毒性肝炎患者发生乙型肝炎E抗体转阳且乙型肝炎E抗原转阴的血清学转换、用于降低慢性乙型病毒性肝炎患者外周血血清中的乙型肝炎病毒滴度、用于降低慢性乙型病毒性肝炎患者外周血血清中的谷丙转氨酶浓度以及用于保持慢性乙型病毒性肝炎患者的T细胞受体库稳定的药物的用途。

Description

脂质体用于治疗慢性乙型病毒性肝炎的用途
技术领域
本发明涉及脂质体技术领域，具体涉及脂质体用于治疗慢性乙型病毒性肝炎的用途。
背景技术
乙型病毒性肝炎是一种全球性疾病，是由乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus，HBV)引起的、以肝脏炎性病变为主并可引起多器官损害的一种疾病。据世界卫生组织报告：全球乙型肝炎病毒感染者约占人群的30％，即全球约有18亿人曾感染过乙型肝炎病毒，其中约0.35亿人为慢性感染者，后者表现为持续性病毒血症。在全球范围内，中国属乙型病毒性肝炎高流行区，乙型肝炎病毒携带者约1.2亿，慢性乙型病毒性肝炎患者约0.3亿。乙型病毒性肝炎多为围产期传播、青春期发病、青壮年恶化。因此，其危害的人群多为青壮年。大部分患者感染后通过自然病程痊愈，而部分患者则迁延不愈并发展为肝硬化、肝癌。据统计，全球每年至少有50万慢性感染患者死于肝硬化和肝癌。
HBV作为一种嗜肝DNA病毒，本身并不能直接引起肝细胞损伤，其感染的病理和临床后果取决于免疫机制。细胞免疫应答中，CD8+细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic Tlymphocyte，CTL)在控制病毒感染中发挥了重要的作用。急性HBV感染患者体内能检测到极强的抗原特异性的CTL，因此绝大多数急性自限性感染患者都可以清除病毒而痊愈。与急性病毒感染患者不同，慢性HBV感染患者体内CTL功能低下，并且病毒特异性CTL在持续性感染病程中逐渐由免疫优势减弱到免疫弱势，T细胞(抗原)受体(T cell receptor,TCR)库多样性下降，在一些患者中甚至表现为整体TCR库的多样性下降。
TCR是T细胞表面识别抗原的分子，也是T细胞产生免疫应答最关键的分子。T细胞在胸腺发育过程中，TCR通过V(D)JC基因重排和选择，组成了外周多样性的T细胞库，使其能对外界各种各样的抗原产生应答。TCR库是某一特定时间点个体的免疫系统中所有功能多样性CD8+T细胞抗原受体的总和。其中，HBV特异性CTL的反应决定了HBV感染的最终结果。HBV感染后，CTL活性高的感染者体内病毒被清除而痊愈；CTL活性低或测不到的感染者则发展为慢性持续感染状态，并进一步发展为肝硬化或/和肝癌。因此，克服HBV持续感染患者的免疫耐受状态，在体增强启动HBV特异性CTL应答，稳定并增加其TCR多样性反应，可治疗HBV慢性感染持续状态，及防止其相关的继发性肝硬化、肝癌等疾病。
脂质体(liposome)于1965年由Bangham首次发现。它是人工制备的类脂质小球体，由一个或多个类似于细胞膜的类脂双分子层包裹着水相介质组成。构成双分子层的类脂及其亲水性的首基部分形成膜的内外表面，而亲脂性的尾端部分处于膜的中间。脂质体的这种结构使其能够携带各种亲水的、疏水的和两性的物质。在医药中，脂质体主要作为免疫佐剂及药物载体被广泛使用，主要利用脂质体可以和细胞膜融合的特点，将药物送入细胞内部。
目前尚未有脂质体本身作为药物用于治疗慢性乙型病毒性肝炎的报道。
发明内容
本发明提供脂质体用于治疗慢性乙型病毒性肝炎的用途。
本发明第一方面涉及脂质体用于制备治疗慢性乙型病毒性肝炎的药物的用途，其中所述脂质体由包括磷脂和胆固醇的物质制备而成。
在优选的实施方案中，所述脂质体由包括磷脂、胆固醇、棕榈酸和/或维生素E的物质制备而成。
在优选的实施方案中，用于制备所述脂质体的各物质的摩尔比为磷脂:胆固醇:棕榈酸:维生素E＝1:(0.1-1):(0-0.15):(0-0.25)。
在优选的实施方案中，所述磷脂为大豆磷脂。优选为大豆卵磷脂。
在优选的实施方案中，所述脂质体的给药方式为皮下注射。
在优选的实施方案中，所述脂质体的剂型为液体脂质体剂型或冻干脂质体剂型。优选为冻干脂质体剂型。所述冻干脂质体剂型采用人血白蛋白或聚维酮K30为赋形剂进行冻干，优选采用人血白蛋白为赋形剂。
本发明第二方面涉及本发明第一方面所述的脂质体用于制备促进慢性乙型病毒性肝炎患者发生乙型肝炎E抗体转阳且乙型肝炎E抗原转阴的血清学转换的药物的用途。
本发明第三方面涉及本发明第一方面所述的脂质体用于制备降低慢性乙型病毒性肝炎患者外周血血清中的乙型肝炎病毒滴度的药物的用途。
本发明第四方面涉及本发明第一方面所述的脂质体用于制备降低慢性乙型病毒性肝炎患者外周血血清中的谷丙转氨酶浓度的药物的用途。
本发明第五方面涉及本发明第一方面所述的脂质体用于制备保持慢性乙型病毒性肝炎患者的T细胞受体库稳定的药物的用途。
本发明涉及的脂质体选用最常用的磷脂(优选大豆磷脂)和胆固醇构成磷脂双分子层膜。其中，前者是主要的类脂质成分，后者兼有稳定磷脂双分子层膜的作用。另外任选添加少量棕榈酸和/或维生素E，前者能够增加负电荷数量，增强脂质体的结合能力，后者是为了防止磷脂氧化分解。在冻干过程中，甘露醇和人血白蛋白可作为冻干过程中的保护剂和赋形剂。在制备过程中使用的磷酸缓冲液(优选pH 6.5)可减缓磷脂的水解，并调节渗透压至等渗。
本发明具有以下有益效果：
1.本发明的制剂脂质体能够大量制备，体外稳定性好，能够满足慢性疾病患者长期治疗、多次给药的要求，而且制备过程简便，易于操作。
2.在针对慢性乙型病毒性肝炎患者的临床研究中发现，采用本发明的脂质体治疗后，可以有效地促使慢性乙型病毒性肝炎患者发生血清学转换(抗HBe(乙型肝炎E抗体)转阳、HBeAg(乙型肝炎E抗原)转阴)、降低患者外周血HBV病毒滴度并降低血清转氨酶浓度，治疗效果超过目前大部分用于治疗HBV感染的主流药物；同时，本发明的脂质体作为免疫调节剂，能有效地维持CTL的TCR库的稳定性，提示该脂质体本身可作为一种治疗慢性乙型病毒性肝炎的理想药物。
3.本发明中脂质体本身即可用于治疗慢性乙型病毒性肝炎，无需携带其他药物，并且作用效果好。
附图说明
图1中图1a为通过透射电镜(TEM)观察的本发明实施例1中制备的脂质体的超微结构；图1b为通过透射电镜观察的本发明实施例1中制备的每个脂质体内包含的脂质双层膜个数所对应的脂质体个数的关系图。
图2为通过激光粒度分析仪检测的本发明实施例1中制备的脂质体的粒径分布。
图3中图3A-3C分别为本发明实施例3中采用高通量测序定量分析慢性乙型病毒性肝炎患者接受本发明实施例1中制备的脂质体治疗(以下简称脂质体治疗组)前(第0周)后(第76周)、未经治疗的慢性乙型病毒性肝炎患者(以下简称未治疗组)在第0周和第76周以及健康人在第0周和第76周的TCR库的变化。各组分别选取一个代表性病例进行两个时间点的TCR库相关性比较，一个点代表一个T细胞克隆。通过比较发现，脂质体治疗组患者在接受本发明的脂质体治疗之后，TCR库谱发生变化(参见图3A)。与未治疗组患者的TCR库多样性持续下降(参见图3B)相反,脂质体治疗组维持甚至扩展了个体整体的TCR库多样性；与未治疗的健康人相比(参见图3C)，脂质体治疗组有新的高丰度T细胞克隆出现，可能反映了脂质体在患者体内诱导了HBV特异性的CD8+CTL。
图3D为上述三个组前后两个时间点的TCR库克隆丰度相关性比较。以各T细胞克隆前后时间点的丰度(abundance)做相关性分析，得到相关系数。相关系数是用以反映变量之间相关程度的统计指标。在比较两个时间点TCR库的相关系数时，此变量就是各单个T细胞克隆在两个TCR库的表达量。两个样本间的TCR库相关系数，即表示各T细胞克隆在两个样本间表达量的相似程度。值从-1到1，越接近于1，表示各T细胞克隆在两个样本间的表达量越接近；越接近于-1，表示T细胞克隆在两个样本间的表达量变化越大。图3D更进一步证明脂质体本身可以稳定TCR库，并可以长期维持针对HBV的优势T细胞免疫应答。
具体实施方式
为更好地理解本发明，下文将结合实施例对本发明进行详细描述，但应理解的是，这些实施例仅为对本发明进行示例说明，而非意在限制本发明，在本发明的构思前提下对本发明的简单改进都属于本发明要求保护的范围。
在本发明中，如无其他说明，则所有操作均在室温、常压实施。
实施例1：脂质体制备及性质分析
(1)脂质体制备、浓缩及冻干：
采用以下原料制备本实施例的脂质体：大豆卵磷脂、胆固醇、棕榈酸、维生素E、甘露醇(20％无菌水溶液)、人血白蛋白(浓度为20％的溶液)、乙醚、乙醇和磷酸盐缓冲液(pH6.5，0.1mM)。
采用高压注射和二次乳化的方法制备脂质体。将大豆卵磷脂14.1166g、胆固醇2.3202g、棕榈酸0.4630g、维生素E 0.8514g加入300mL乙醚中溶解；将上述溶液经0.2μm微孔膜过滤至乳化瓶中，再加入300mL乙醇，形成乳化液(W/O)；将得到的上述乳化液注入14.4L水中，同时控制反应温度为40℃并进行搅拌，二次形成乳化液(W/O/W)，随着乙醚的挥发逐步形成脂质体。通过超滤装置浓缩和透析(透析倍数须达到200倍以上)，去除液体中可能游离的有机溶剂，获得高浓度的脂质体0.5L，即脂质体浓缩液。然后将0.5L脂质体浓缩液中加入20％甘露醇水溶液140mL，20％人血白蛋白30mL，30mL磷酸盐缓冲液，充分混匀后，按1mL/瓶的规格进行分装。冻干机预冷至8℃后，将上述样品放入冻干机，降温至-39℃过夜；依次开启冷凝器、真空泵及加热器，升华样品中的有机溶剂和水分，最终得到白色疏松块状物；灭菌并包装得到成品。
(2)透射电镜形态学观察:
将步骤(1)制备的脂质体冻干成品用1mL无菌注射水重悬后，用0.22μm的聚碳酸酯膜滤器过滤除去杂质，取100μL的脂质体溶液，用PBS(pH 6.5，0.1mM)稀释到2mL，重悬脂质体溶液，充分搅拌；用移液枪将制备的上述样品滴于支持膜铜网上，晾干；打开透射电镜，将载有样品的铜网放入透射电镜中进行观察，放大倍数为×160000。结果如图1所示，由图1a可见，脂质体成囊泡存在，大小相对均一，大部分小于100nm；由图1b可见，大部分脂质体含有2个双层膜，少数含有4个或6个双层膜。
(3)激光粒度分析仪检测脂质体粒径分布：
运用马尔文ZEN1690型激光粒度分析仪检测制备的脂质体粒径分布。将步骤(1)制备的脂质体冻干成品用1mL无菌注射水重悬后，用0.22μm的聚碳酸酯膜滤器过滤除去杂质，取100μL的脂质体溶液，用PBS(pH6.5，0.1mM)稀释到2mL，充分搅拌；取1.2mL上述样品加入样品容器中进行检测。
如图2所示，激光粒度分析仪的分析结果与透射电镜结果类似，可见制备的脂质体粒径分布范围为30-250nm，大部分处于50-100nm范围内，说明该脂质体为纳米级别。
实施例2：脂质体冻干赋形剂的选择
脂质体的冻干与赋形：比较脂质体浓缩液体积占比、不同的赋形剂(人血白蛋白、聚维酮K30)及其浓度对脂质体冻干后外形收缩程度的影响，结果如表1所示。
表1：脂质体浓缩液体积占比和赋形剂及其浓度对冻干的影响
注：*脂质体浓缩液的体积占乳化液的体积百分比。
由表1可以看出，在对脂质体进行冻干时，当脂质体浓缩体积是最终乳化液体积的25-50％，加入1％的人血白蛋白作为赋形剂可以保证脂质体冻干后外形不发生收缩。
实施例3：脂质体在慢性乙型病毒性肝炎患者中的治疗作用
本实施例利用实施例1中制备的脂质体成品，对筛选的慢性乙型病毒性肝炎患者进行治疗，探索其在慢性乙型病毒性肝炎中的治疗作用及效果。
(1)受试对象的选择：选择慢性乙型病毒性肝炎患者119名作为受试对象。受试对象具体资料如下：
(2)给药方式：用上臂皮下注射方式给药，每次给予900μg脂质体成品；将脂质体成品溶解在3mL无菌水中分别在治疗的第0、4、8、12、20、28周皮下注射给药6次。
(3)疗效评价：慢性乙型病毒性肝炎患者经过本发明实施例1的脂质体治疗后，分别在第12、28、32、40、52、64、76周采集受试患者的外周血，分别检测HBeAg/抗HBe转换率、血清HBV病毒滴度及血清谷丙转氨酶(ALT)浓度，评价脂质体治疗效果。
①脂质体治疗后患者发生较高血清学转换率：
研究结束时，脂质体治疗组119例受试者中，有24例受试者发生HBeAg/抗HBe血清学转换(HBeAg转阴、抗HBe转阳)，转换率为20.2％(表2)。根据2016年美国肝病学会慢性乙型肝炎实践指南中的数据(表3)，接受本发明的脂质体治疗后HBeAg/抗HBe血清学转换率仅次于长效干扰素，与恩替卡韦疗效相当，优于阿德福韦和拉米夫定，远高于安慰剂。
表2：脂质体治疗后患者HBeAg/抗HBe血清转换率
表3:其他药物治疗后的HBeAg/抗HBe血清学转换率*
拉米夫定 安慰剂 阿德福韦 恩替卡韦 长效干扰素
转换率 16～21％ 4～6％ 12％ 21％ 27～32％
*数据源于AASLD Guidelines for Treatment of Chronic Hepatitis B,Hepatology.2016；63(1):261-83。
②脂质体治疗后患者血清HBV病毒滴度降低：
受试患者接受本发明实施例1的脂质体治疗后，随着时间的延长，外周血HBV DNA载量呈逐渐下降趋势(表4)。至研究开始后76周(治疗结束第48周)，发生HBV DNA载量下降大于等于2个对数级的受试者比例达到40.3％(48/119)，证明本发明的脂质体有利于降低患者血清HBV病毒滴度。
表4：脂质体治疗后血清HBV DNA载量下降大于等于2个对数级的患者百分比
③脂质体治疗后患者血清ALT水平有较高的复常率：
血清中的ALT由肝脏细胞释放，当肝脏细胞受损时，其释放的ALT增加，则外周血中的ALT水平升高。受试患者接受本发明实施例1的脂质体治疗后，ALT水平恢复正常范围的比率(复常率)逐步升高(表5)，第4周为6.7％，第76周上升至34.5％(41/119)。因此表明接受本发明的脂质体治疗后，可以有效降低患者的血清ALT水平，证明本发明的脂质体可以减轻HBV感染所造成的肝脏损伤。
表5：脂质体治疗后血清ALT水平复常率
(3)疗效对比实验：在对比实验中，分别以未治疗组和健康人组为对照组。在脂质体治疗组给予本发明实施例1的脂质体前后，以及在两个对照组与脂质体治疗组治疗前后相对应的两个时间点，分别采集、分离脂质体治疗组和两个对照组人员的外周血单个核细胞，进行深度测序，进行TCR库分析。图3A-3C分别为脂质体治疗组、未治疗组以及健康人组前后两个时间点的TCR库的变化。在脂质体治疗组中，通过监测脂质体治疗前和脂质体治疗后76周的TCR库来观察脂质体是否可以使T细胞长期存活。以各T细胞克隆前后时间点的丰度(abundance)做相关性分析，得到相关系数。由图3D可以看出，脂质体本身可以稳定TCR库，并可以长期维持针对HBV的优势T细胞免疫应答，在慢性乙型病毒性肝炎感染的治疗中发挥重要作用。
综上，本发明发现了脂质体自身在治疗慢性乙型病毒性肝炎中具有良好的效果，该效果是出乎本领域技术人员所预料的。发明人推测本发明的脂质体具有治疗慢性乙型病毒性肝炎的用途原因可能有以下几个方面：首先，脂质体中的脂质成分，如卵磷脂、脑磷脂、磷脂酰肌醇和溶血卵磷脂等，具有免疫调节作用，有益于慢性乙型病毒性肝炎的治疗；其次，乙型肝炎病毒的抗原，如表面抗原本身含有大量脂质成分，可与脂质体发生膜融合，从而被包裹于脂质体内部；而脂质体同样可以与抗原呈递细胞的细胞膜融合，从而将其携带的抗原释放到细胞内部，从而使该抗原通过MHC I类分子途径进行呈递，有利于诱导CTL应答。
虽然已参照特定实施方案对本发明进行了说明，但本领域技术人员应认识到的是，在不偏离本发明主旨和范围的情况下，可对所述实施方案进行改变或改进，本发明范围通过所附权利要求书限定。

Claims (10)

1.脂质体用于制备治疗慢性乙型病毒性肝炎的药物的用途，其特征在于，所述脂质体由包括磷脂和胆固醇的物质制备而成。
2.根据权利要求1的用途，其特征在于，所述脂质体由包括磷脂、胆固醇、棕榈酸和/或维生素E的物质制备而成。
3.根据权利要求2的用途，其特征在于，用于制备所述脂质体的各物质的摩尔比为磷脂:胆固醇:棕榈酸:维生素E＝1：(0.1-1)：(0-0.15)：(0-0.25)。
4.根据权利要求1的用途，其特征在于，所述磷脂为大豆磷脂。
5.根据权利要求1的用途，其特征在于，所述脂质体的给药方式为皮下注射。
6.根据权利要求1的用途，其特征在于，所述脂质体的剂型为液体脂质体剂型或冻干脂质体剂型。
7.如权利要求1至6中任一项所述的脂质体用于制备促进慢性乙型病毒性肝炎患者发生乙型肝炎E抗体转阳且乙型肝炎E抗原转阴的血清学转换的药物的用途。
8.如权利要求1至6中任一项所述的脂质体用于制备降低慢性乙型病毒性肝炎患者外周血血清中的乙型肝炎病毒滴度的药物的用途。
9.如权利要求1至6中任一项所述的脂质体用于制备降低慢性乙型病毒性肝炎患者外周血血清中的谷丙转氨酶浓度的药物的用途。
10.如权利要求1至6中任一项所述的脂质体用于制备保持慢性乙型病毒性肝炎患者的T细胞受体库稳定的药物的用途。
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Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019120112A1 (zh) * 2017-12-20 2019-06-27 江苏孟德尔基因科技有限公司 一种模拟抗原化合物用于治疗hbv感染相关症状的用途

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1346633A (zh) * 2001-10-08 2002-05-01 沈阳药科大学 利巴韦林脂质体制剂
CN101664387A (zh) * 2008-09-02 2010-03-10 邱瑞宝 乙醚脂质体的制备及抗流感应用
CN102427804A (zh) * 2009-03-27 2012-04-25 牛津大学之校长及学者 降低胆固醇水平的脂质体
CN102727437A (zh) * 2006-08-02 2012-10-17 牛津大学院长校长专家委员会 病毒感染的脂质体治疗

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101557813A (zh) * 2006-08-02 2009-10-14 联合治疗公司 病毒感染的脂质体治疗
CN101953773B (zh) * 2010-09-10 2012-12-26 海南美兰史克制药有限公司 一种拉米夫定脂质体固体制剂

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1346633A (zh) * 2001-10-08 2002-05-01 沈阳药科大学 利巴韦林脂质体制剂
CN102727437A (zh) * 2006-08-02 2012-10-17 牛津大学院长校长专家委员会 病毒感染的脂质体治疗
CN101664387A (zh) * 2008-09-02 2010-03-10 邱瑞宝 乙醚脂质体的制备及抗流感应用
CN102427804A (zh) * 2009-03-27 2012-04-25 牛津大学之校长及学者 降低胆固醇水平的脂质体

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JANOS SZEBENI ET AL: "Liposome triggering of innate immune responses:A perspective on benefits and adverse reactions", 《JOURNAL OF LIPOSOME RESEARCH》 *
NAHID LATIF ET AL: "Liposomes in immunology", 《J.BIOSCI》 *
严文伟等: "阳离子脂质体对反义寡核苷酸抗乙型肝炎病毒作用的促进", 《北京大学学报（医学版）》 *
佰荣泰华BJCRO: "临床试验总结报告样本", 《百度文库》 *
马挺军等: "大豆卵磷脂增强免疫活性的研究", 《中国农学通报》 *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019120112A1 (zh) * 2017-12-20 2019-06-27 江苏孟德尔基因科技有限公司 一种模拟抗原化合物用于治疗hbv感染相关症状的用途

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