CN101664387A - 乙醚脂质体的制备及抗流感应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及乙醚脂质体的制备及抗流感用途，主要特征是病毒灭活剂与靶向制剂技术的结合，并在体内模拟灭活疫苗的制备过程，诱导免疫作用，达到较强的抗病毒效果，对流感病毒小鼠模型有较强的保护作用。
Description
技术领域
本发明涉及药剂学、病毒学和免疫学领域。具体而言，本发明涉及乙醚脂质体的制备及在抗流感病毒中的应用。
背景技术
一直以来，治疗病毒性疾病药物都是通过酶抑制来阻止病毒的复制，以达到治疗疾病的目的。而预防则是通过接种疫苗。对于流感病毒亦是如此。现在对于多种病毒性疾病都缺乏有效的治疗和预防手段，由于病毒的快速变异能力，酶抑制剂在使用一段时间后就会因病毒耐药而失去作用。对于变异较快的病毒疫苗也无法有效预防，如流感病毒等。若能像用抗生素杀灭细菌一样，用灭活剂来杀灭病毒，则可为我们增加一个治疗手段。但由于灭活剂在灭活病毒的同时也会对人体细胞造成损伤，因此一直未用于病毒性疾病的治疗。然而，近年来，制剂技术不断进步，可以通过靶向技术把药物传递集中与病灶部位，减毒增效。靶向脂质体技术在肿瘤和利什曼病的治疗中都得到成功的应用。但未见有人将此二者结合起来用于抗病毒治疗。
传统的灭活疫苗疫苗制备就是在体外用灭活剂(如甲醛)将病毒灭活，制成疫苗，再注入体内引发免疫反应。一些病毒性疾病的痊愈(如流感)应是依靠机体的免疫能力来彻底清除体内的病毒，而酶抑制剂只是阻止病毒的复制，无法完全清除(如艾滋病和乙肝等)。
流感病毒属于被膜病毒，体外易被病毒灭活剂如脂溶剂、氧化剂等灭活，乙醚曾作为麻醉剂在临床应用多年，有很高的安全性，同时，它也是一种能有效灭活流感病毒的脂溶剂。在此，我们将乙醚制成脂质体以用于流感的治疗，作为现有治疗手段的补充。
发明内容
本发明利用靶向制剂技术将乙醚制成脂质体，用于流感的治疗。它是通过脂质体的靶向作用将病毒灭活剂传输至淋巴细胞，灭活病毒，然后形成免疫记忆，诱发治疗性免疫，通过免疫反应再次杀灭病毒。其后半程就类似把病毒灭活疫苗的制备由体外转移至体内进行。
一种乙醚脂质体制剂，其特征在于，由下述重量比的成分组成：乙醚∶磷脂∶胆固醇∶乳化剂＝60-80∶10-30∶5-10∶2-10。所述的磷脂为大豆磷脂、卵磷脂或合成磷脂；表面活性剂为吐温80、司盘、油酸、泊洛沙姆188中的一种或一种以上组成。按注入法，高速搅拌，转速3000-4000转/分钟，搅拌1小时，所得乙醚脂质体制剂用0.22μm微滤膜过滤除菌，低温保存。
制剂可用于流感病毒所引起的疾病的治疗。因此制剂的体内过程复杂，涉及到药物的转运，灭活及免疫反应的诱导，而所有的过程都指向一个方向，制剂的治疗效果。因此采用了最直接，最有力的证明方法，动物的药效试验
采用小鼠实验模型进行药效学实验，以小鼠存活率为观察指标。
材料：流感病毒亚洲甲型肺适应株(FM1)、使用前接种11日龄鸡胚，常规培养，48h收集尿囊液，传代2次。测定其对小鼠的半数致死量(LD50)，并确定造模浓度为25LD50。昆明种小鼠，清洁级，雌雄各半，18-20g。昆明种小鼠按性别、体重随机分为4组，每组20只。
病毒对照组：生理盐水灌胃0.2mL。(接种前)
阳性对照组(利巴韦林)：70mg/kg灌胃。(接种前)
乙醚脂质体组：1g/kg灌胃。(接种前)
假手术盐水组：生理盐水灌胃0.2mL。
病毒对照组：乙醚轻度麻醉小鼠后，以25μL流感病毒液滴鼻造模。用生理盐水灌胃，每次0.2mL，每日1次，共灌胃7d。假手术组以生理盐水25μL滴鼻造模，余同病毒对照组。
从感染之日起，连续观察14d，记录死亡时间和死亡数，计算存活率。
表1 存活率实验结果
| 组别 | 7天死亡数(只) | 7天存活率(％) | 14天死亡数(只) | 14天存活率(％) |
| 假手术盐水组 | 0 | 100 | 0 | 100 |
| 病毒对照组 | 7 | 65 | 18 | 10 |
| 阳性对照组 | 3 | 85 | 6 | 70 |
| 乙醚脂质体组 | 2 | 90 | 3 | 85 |
具体实施方式
一种乙醚脂质体制剂，其特征在于，由下述重量比的成分组成：乙醚∶磷脂∶胆固醇∶乳化剂＝65∶20∶5∶10。按注入法制备，高速搅拌，转速3000-4000转/分钟，搅拌1小时，所得乙醚脂质体制剂用0.22μm微滤膜过滤除菌，低温保存。
Claims (4)
1、一种乙醚脂质体制剂，其特征在于，由下述重量比的成分组成：乙醚∶磷脂∶胆固醇∶乳化剂＝60-80∶10-30∶5-10∶2-10。
2、根据权利要求1所述的乙醚脂质体制剂，所述的磷脂为大豆磷脂、卵磷脂或合成磷脂；表面活性剂为吐温80、司盘、油酸、泊洛沙姆188中的一种或一种以上组成。
3、权利要求1-2所述乙醚脂质体制剂的制备方法，其特征在于：
按注入法高速搅拌，转速3000-4000转/分钟，搅拌1小时，所得乙醚脂质体制剂用0.22μm微滤膜过滤除菌，低温保存。
4、根据权利要求1中所述的乙醚脂质体的应用，其特征在于其中所述的制剂可用于流感病毒所引起的疾病的治疗。
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| CN200810141246A CN101664387A (zh) | 2008-09-02 | 2008-09-02 | 乙醚脂质体的制备及抗流感应用 |
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Publications (1)
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| CN101664387A true CN101664387A (zh) | 2010-03-10 |
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Country Status (1)
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|---|---|
| CN (1) | CN101664387A (zh) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107028887A (zh) * | 2017-03-28 | 2017-08-11 | 江苏孟德尔基因科技有限公司 | 脂质体用于治疗慢性乙型病毒性肝炎的用途 |
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2008
- 2008-09-02 CN CN200810141246A patent/CN101664387A/zh active Pending
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| CN107028887A (zh) * | 2017-03-28 | 2017-08-11 | 江苏孟德尔基因科技有限公司 | 脂质体用于治疗慢性乙型病毒性肝炎的用途 |
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