CN107012526A - 一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法 - Google Patents

一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法 Download PDF

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Abstract

一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法，属于组织修复材料制备技术领域，包括：羊胎盘提取物的制备、牛奶蛋白溶液的制备、再生纤维素纺丝液的制备、静电纺丝制得修复材料。本发明制得的修复材料具有良好的抗菌性能、机械性能、组织修复性能及药物附着性。

Description

一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法
技术领域
本发明属于组织修复材料制备技术领域，尤其涉及一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法。
背景技术
纤维素作为天然的生物高聚物，具有生物可降解性、生物相容性以及独特的物理、化学和机械性能，已成为新型生物医学材料领域的研究热点。而现有技术多是采用再生纤维素与其他材料共混，冷冻干燥制备复合膜，采用此方法制得的复合膜均匀性、稳定性较差，且组织修复能力及药物附着性有待进一步的提高。
发明内容
为了解决现有技术中存在的问题，本发明提供了一种具有良好的组织修复能力及药物附着性的羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法。
本发明采用以下技术方案：
一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将新鲜羊胎盘解冻，用生理盐水漂洗，剪碎，除去筋膜及血管，通过组织匀浆机制备质量浓度10％的匀浆液，离心处理，收集沉淀将其冷冻干燥，冻干后用粉碎机绞碎，过60目筛网，得羊胎盘粉末；
步骤二：取羊胎盘料粉末，加入质量百分比80％的去离子水搅拌，90℃预处理5min，降温至50℃，用0.2mol/L的NaOH调pH至7，加入质量百分比1％的蛋白酶，酶解反应20min，反应结束后用沸水浴灭酶5min，冷却至室温后用NaOH/HCl调pH至中性，8000r/min离心处理20min，收集上清液，得羊胎盘提取物；
步骤三：将牛奶于70℃蒸发器内浓缩到含水率60％以下，再进行离心脱脂处理，时间20min，转速3000r/min，取下层乳液；
步骤四：向乳液中加入质量百分比3％、1mol/L的NaOH，反应2h，过半透膜，将析出的蛋白质收集，加去离子水、蛋白质粘合剂，其中蛋白质、去离子水、蛋白质粘合剂按质量比8:75:2送入揉合机，并加热至60℃充分混匀，得牛奶蛋白溶液；
步骤五：将蚕茧去蛹，置入煮沸的质量浓度为0.5％的碳酸钠水溶液中，浴比为1:50，除去蚕茧表面丝胶,将已成丝状的蚕茧捞出并拧干，再重复上述操作一次后，用去离子水洗净，风干后得到脱胶丝素；
步骤六：将CaCl2在室温状态下溶解于甲酸中，搅拌30min，制得浓度为5wt.％的CaCl2-FA溶液，然后将脱胶丝素溶解于CaCl2-FA溶液中，磁力搅拌3h，获得再生丝素蛋白溶液，室温下干燥成膜，将膜用去离子水浸泡3h，再干燥，获得再生丝素蛋白膜，将再生丝素蛋白膜在室温状态下二次溶解于甲酸中，浴比为1:10，溶解时间为2h，得再生丝素蛋白纺丝液；
步骤七：取棉短绒5g，将其溶解在甲酸中，配制成质量浓度4％的纤维素溶液；
步骤八：将再生丝素蛋白纺丝液与纤维素溶液按重量比4:1混合均匀得再生纤维素纺丝液；
步骤九：将羊胎盘提取物、牛奶蛋白溶液、再生纤维素纺丝液按质量比2:3:29混合均匀，使用超声波震荡对其进行分散，50℃条件下磁力搅拌1h，再在室温下继续搅拌8h，得到粘稠溶液置于与高压装置连接的医用针管中，通过静电纺丝制得修复材料，高压装置电压为20kV，纺丝流量2ml/h，将制得的材料置于体积浓度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
优选的，步骤九中所述的医用针管的容量为20ml。
优选的，步骤九中所述的医用针管的针头固定在距离静电纺丝接收板20cm处。
优选的，步骤九中所述的医用针管的针头内径为0.41mm。
本发明的有益效果在于：
1)羊胎盘中具有多种生物活性物质，具有调节机体免疫力、促进细胞新陈代谢的作用。
2)由于牛奶蛋白中含有多种氨基酸，皮肤不会排斥，就相当于人的一层皮肤一样，对皮肤有养护作用。
3)丝素蛋白具有良好的抗菌性、生物相容性及组织修复能力。
4)纤维素具有良好的生物相容性、可降解性及优良的机械性能。
5)纤维素可以改善材料的机械性能，丝素蛋白可以改善材料的组织修复能力。
6)采用静电纺丝技术制备的材料，进一步提高了材料的孔隙率，有利于药物的附着。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的描述。
实施例1
一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法，包括以下步骤：
步骤一：将新鲜羊胎盘解冻，用生理盐水漂洗，剪碎，除去筋膜及血管，通过组织匀浆机制备质量浓度10％的匀浆液，离心处理，收集沉淀将其冷冻干燥，冻干后用粉碎机绞碎，过60目筛网，得羊胎盘粉末；
步骤二：取羊胎盘料粉末，加入质量百分比80％的去离子水搅拌，90℃预处理5min，降温至50℃，用0.2mol/L的NaOH调pH至7，加入质量百分比1％的蛋白酶，酶解反应20min，反应结束后用沸水浴灭酶5min，冷却至室温后用NaOH/HCl调pH至中性，8000r/min离心处理20min，收集上清液，得羊胎盘提取物；
步骤三：将牛奶于70℃蒸发器内浓缩到含水率60％以下，再进行离心脱脂处理，时间20min，转速3000r/min，取下层乳液；
步骤四：向乳液中加入质量百分比3％、1mol/L的NaOH，反应2h，过半透膜，将析出的蛋白质收集，加去离子水、蛋白质粘合剂，其中蛋白质、去离子水、蛋白质粘合剂按质量比8:75:2送入揉合机，并加热至60℃充分混匀，得牛奶蛋白溶液；
步骤五：将蚕茧去蛹，置入煮沸的质量浓度为0.5％的碳酸钠水溶液中，浴比为1:50，除去蚕茧表面丝胶,将已成丝状的蚕茧捞出并拧干，再重复上述操作一次后，用去离子水洗净，风干后得到脱胶丝素；
步骤六：将CaCl2在室温状态下溶解于甲酸中，搅拌30min，制得浓度为5wt.％的CaCl2-FA溶液，然后将脱胶丝素溶解于CaCl2-FA溶液中，磁力搅拌3h，获得再生丝素蛋白溶液，室温下干燥成膜，将膜用去离子水浸泡3h，再干燥，获得再生丝素蛋白膜，将再生丝素蛋白膜在室温状态下二次溶解于甲酸中，浴比为1:10，溶解时间为2h，得再生丝素蛋白纺丝液；
步骤七：取棉短绒5g，将其溶解在甲酸中，配制成质量浓度4％的纤维素溶液；
步骤八：将再生丝素蛋白纺丝液与纤维素溶液按重量比4:1混合均匀得再生纤维素纺丝液；
步骤九：将羊胎盘提取物、牛奶蛋白溶液、再生纤维素纺丝液按质量比2:3:29混合均匀，使用超声波震荡对其进行分散，50℃条件下磁力搅拌1h，再在室温下继续搅拌8h，得到粘稠溶液置于与高压装置连接的医用针管中，通过静电纺丝制得修复材料，高压装置电压为20kV，纺丝流量2ml/h，将制得的材料置于体积浓度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
步骤九中所述的医用针管的容量为20ml，所述的医用针管的针头固定在距离静电纺丝接收板20cm处，针头内径为0.41mm。

Claims (4)

1.一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：
步骤一：将新鲜羊胎盘解冻，用生理盐水漂洗，剪碎，除去筋膜及血管，通过组织匀浆机制备质量浓度10％的匀浆液，离心处理，收集沉淀将其冷冻干燥，冻干后用粉碎机绞碎，过60目筛网，得羊胎盘粉末；
步骤二：取羊胎盘料粉末，加入质量百分比80％的去离子水搅拌，90℃预处理5min，降温至50℃，用0.2mol/L的NaOH调pH至7，加入质量百分比1％的蛋白酶，酶解反应20min，反应结束后用沸水浴灭酶5min，冷却至室温后用NaOH/HCl调pH至中性，8000r/min离心处理20min，收集上清液，得羊胎盘提取物；
步骤三：将牛奶于70℃蒸发器内浓缩到含水率60％以下，再进行离心脱脂处理，时间20min，转速3000r/min，取下层乳液；
步骤四：向乳液中加入质量百分比3％、1mol/L的NaOH，反应2h，过半透膜，将析出的蛋白质收集，加去离子水、蛋白质粘合剂，其中蛋白质、去离子水、蛋白质粘合剂按质量比8:75:2送入揉合机，并加热至60℃充分混匀，得牛奶蛋白溶液；
步骤五：将蚕茧去蛹，置入煮沸的质量浓度为0.5％的碳酸钠水溶液中，浴比为1:50，除去蚕茧表面丝胶,将已成丝状的蚕茧捞出并拧干，再重复上述操作一次后，用去离子水洗净，风干后得到脱胶丝素；
步骤六：将CaCl2在室温状态下溶解于甲酸中，搅拌30min，制得浓度为5wt.％的CaCl2-FA溶液，然后将脱胶丝素溶解于CaCl2-FA溶液中，磁力搅拌3h，获得再生丝素蛋白溶液，室温下干燥成膜，将膜用去离子水浸泡3h，再干燥，获得再生丝素蛋白膜，将再生丝素蛋白膜在室温状态下二次溶解于甲酸中，浴比为1:10，溶解时间为2h，得再生丝素蛋白纺丝液；
步骤七：取棉短绒5g，将其溶解在甲酸中，配制成质量浓度4％的纤维素溶液；
步骤八：将再生丝素蛋白纺丝液与纤维素溶液按重量比4:1混合均匀得再生纤维素纺丝液；
步骤九：将羊胎盘提取物、牛奶蛋白溶液、再生纤维素纺丝液按质量比2:3:29混合均匀，使用超声波震荡对其进行分散，50℃条件下磁力搅拌1h，再在室温下继续搅拌8h，得到粘稠溶液置于与高压装置连接的医用针管中，通过静电纺丝制得修复材料，高压装置电压为20kV，纺丝流量2ml/h，将制得的材料置于体积浓度75％乙醇中浸泡30min，在40℃下真空干燥。
2.根据权利要求1所述的一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法，其特征在于：步骤九中所述的医用针管的容量为20ml。
3.根据权利要求1所述的一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法，其特征在于：步骤九中所述的医用针管的针头固定在距离静电纺丝接收板20cm处。
4.根据权利要求1所述的一种羊胎盘复合再生纤维修复材料的制备方法，其特征在于：步骤九中所述的医用针管的针头内径为0.41mm。
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