CN106977626A - 一种肝素钠提纯的高效方法 - Google Patents
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Abstract
本发明为一种肝素钠提纯的高效方法。本发明所要解决的技术问题是提供一种吸附除杂减少酶解过程的方法，该方法能解决单纯的吸附与酶解难以彻底除杂的问题，大大地提高了生产效率。
Description
技术领域
本发明属于肝素钠加工提纯领域，具体地说，涉及一种肝素钠提纯的高效方法。
背景技术
肝素钠是肝素的钠盐形式产物，可广泛用于防治各种心脑血管疾病，在临床应用中广受青睐。
肝素钠广泛存在于哺乳动物的肠粘膜、肺、肝中，特别是猪小肠粘膜中含量最高。目前我国生产的肝素钠主要以猪小肠粘膜为原料进行提取，由于肝素钠在动物体内多以肝素钠-蛋白质复合物的形式存在，故使得粗品中会残留一定量的蛋白质，影响了产品的品质。由于一些提纯采用单一的吸附或酶解法进行精制很难得到效价高的肝素钠，而酶解反应由于反应速度较慢，酶用量大，生产周期长，且纯化时采用多次溶解再沉淀的方法，酒精用量大，并且产品收率低，大大影响了生产效率。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种肝素钠提纯的高效方法，该方法能解决单纯的吸附与酶解难以彻底除杂的问题，大大缩短了酶解时间，提高了生产效率。本发明的解决上述技术问题所采用的技术方案是一种肝素钠提纯的高效方法，包括下述步骤：预处理，将粗品肝素钠进行粉碎、过筛；溶解，按照粗品肝素钠，水的重量比为2~17进行溶解；酶解，所制成的肝素钠溶液中加入胰酶和酶激活剂，在pH8、70℃下酶解5小时；升温至80℃，过滤取滤液；将所得的滤液经氧化、吸附、过滤、超滤浓缩、沉淀、脱水后制得肝素钠；所述肝素钠粗品经粉碎过筛后所得为直径小于50目的粉末；所述加入胰酶的量为溶液质量的7%；所述酶激活剂为氯化钙、醋酸钙的一种或两种，所用量为溶液质量的0.2%；所述氧化为在所得滤液中加入双氧水，对滤液进行氧化处理，加入量为滤液质量的0.5%，对滤液进行氧化处理；所述吸附为向氧化后的滤液中加入占滤液质量分数1.5%的Ca3(PO4)2以除去滤液中的杂质；所述过滤为采用板框过滤，采用0.2微米的醋酸纤维素滤膜；所述超滤浓缩为选用截留分子量为2000的醋酸纤维素滤膜；所述沉淀为将超滤浓缩后的溶液中用盐酸调节pH至5.5，边搅动边加入乙醇，使乙醇度数在55度，静置15小时沉淀；所述脱水用无水乙醇脱水，离心后真空干燥。
本发明的一种肝素钠提纯的高效方法，得到的产品效价高，收率高，且酶解速率大大提高，缩短生产周期，降低生产成本，利于工业化生产。
具体实施方式
本发明的具体步骤为实验前先对所用器具、试剂、耗材进行高压灭菌。具体步骤如下：预处理，将粗品肝素钠进行粉碎、过筛；溶解，按照粗品肝素钠，水的重量比为2~17进行溶解；酶解，所制成的肝素钠溶液中加入胰酶和酶激活剂，在pH8、70℃下酶解5小时；升温至80℃，过滤取滤液；将所得的滤液经氧化、吸附、过滤、超滤浓缩、沉淀、脱水后制得肝素钠；所述肝素钠粗品经粉碎过筛后所得为直径小于50目的粉末；所述加入胰酶的量为溶液质量的7%；所述酶激活剂为氯化钙、醋酸钙的一种或两种，所用量为溶液质量的0.2%；所述氧化为在所得滤液中加入双氧水，对滤液进行氧化处理，加入量为滤液质量的0.5%，对滤液进行氧化处理；所述吸附为向氧化后的滤液中加入占滤液质量分数1.5%的Ca3(PO4)2以除去滤液中的杂质；所述过滤为采用板框过滤，采用0.2微米的醋酸纤维素滤膜；所述超滤浓缩为选用截留分子量为2000的醋酸纤维素滤膜；所述沉淀为将超滤浓缩后的溶液中用盐酸调节pH至5.5，边搅动边加入乙醇，使乙醇度数在55度，静置15小时沉淀；所述脱水用无水乙醇脱水，离心后真空干燥。实例证明本发明的一种肝素钠提纯的高效方法，得到的产品效价高，提纯程度较好。
以上所述，仅是本发明的较佳实施例而已，并非是对本发明作其它形式的限制，任何熟悉本专业的技术人员可能利用上述揭示的技术内容加以变更或改型为等同变化的等效实施例。但是凡是未脱离本发明技术方案内容，依据本发明的技术实质对以上实施例所作的任何简单修改、等同变化与改型，仍属于本发明技术方案的保护范围。
Claims (1)
1.一种肝素钠提纯的高效方法，包括下述步骤：预处理，将粗品肝素钠进行粉碎、过筛；溶解，按照粗品肝素钠，水的重量比为2~17进行溶解；酶解，所制成的肝素钠溶液中加入胰酶和酶激活剂，在pH8、70℃下酶解5小时；升温至80℃，过滤取滤液；将所得的滤液经氧化、吸附、过滤、超滤浓缩、沉淀、脱水后制得肝素钠；所述肝素钠粗品经粉碎过筛后所得为直径小于50目的粉末；所述加入胰酶的量为溶液质量的7%；所述酶激活剂为氯化钙、醋酸钙的一种或两种，所用量为溶液质量的0.2%；所述氧化为在所得滤液中加入双氧水，对滤液进行氧化处理，加入量为滤液质量的0.5%，对滤液进行氧化处理；所述吸附为向氧化后的滤液中加入占滤液质量分数1.5%的Ca3(PO4)2以除去滤液中的杂质；所述过滤为采用板框过滤，采用0.2微米的醋酸纤维素滤膜；所述超滤浓缩为选用截留分子量为2000的醋酸纤维素滤膜；所述沉淀为将超滤浓缩后的溶液中用盐酸调节pH至5.5，边搅动边加入乙醇，使乙醇度数在55度，静置15小时沉淀；所述脱水用无水乙醇脱水，离心后真空干燥。
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