CN106967655A - 一种藻相调节剂及其制备方法与应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种藻相调节剂及其制备方法,该方法通过将蜡样芽胞杆菌发酵液、枯草芽胞杆菌发酵液、巨大芽胞杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液和热带假丝酵母发酵液按一定体积比混合均匀得到混合菌液,然后向混合菌液中加入硅藻土作为吸附剂,搅拌吸附,然后板框过滤,烘干得藻相调节剂;该藻相调节剂治理蓝藻养殖水体,可有效去除蓝藻,同时改善水体环境,促进有益藻相的形成,藻相调节效果显著。同时,该藻相调节剂中的复合益生菌在调节水体pH值、降解氨氮、亚硝酸盐等有害物质方面也能起到积极作用,为养殖动物生长营造出优良的水体环境。
Description
技术领域
本发明属于养殖水体治理领域,具体涉及一种藻相调节剂及其制备与应用。
背景技术
水是水产养殖动物赖以生存的环境,其好坏直接影响到水产养殖动物的生长发育和养殖的经济效益。藻类作为养殖水体中的重要组成部分,是主要的初级生产者和水质调节者。藻相是指水体中藻的种类、数量和结构比例。良好的藻相在维持养殖生态系统物质循环和能量传递方面发挥着举足轻重的作用。
以绿藻或硅藻为主的藻相是养殖过程中的良好藻相,这些单细胞有益藻类是水体溶氧的主要来源,可以作为养殖鱼类的天然饵料,而且绿藻和硅藻种群生长稳定性好,可以保持水体的稳定。
以蓝藻为主的藻相是水产养殖中最常和最普遍出现的不良藻相。蓝藻是养殖水体中常见的一类有害藻类,主要包括微囊藻、螺旋藻、鱼腥藻、颤藻等,其中以微囊藻最为典型,危害性最大。
蓝藻极易在富营养化水体中大量繁殖,并在水体表面形成一层粘腻、腥臭的蓝绿色薄膜,严重时可以布满整个养殖水体,抑制有益藻类的生长,导致水体生产力的下降。同时,蓝藻生长速度快,稳定性差,容易因老化而大量死亡,死亡藻体被细菌分解,消耗水体中大量溶氧,导致鱼类缺氧。另外,大多蓝藻具有藻毒素,其中研究最多的微囊藻毒素可直接造成养殖动物的中毒死亡,并且微囊藻毒素具有致癌性,在肝脏毒性和神经毒性上对人类健康构成了很大的威胁。
目前,我国已有超过半数的水体存在富营养化环境,西湖、太湖、滇池都曾爆发过蓝藻水华。蓝藻水华不仅破坏养殖生态环境,制约着水产养殖经济效益,也严重危害着人类的健康。
养殖水体中,有害蓝藻相较于其他藻类更容易形成种群优势,频频爆发蓝藻水华,主要是因为在长期的进化过程中,蓝藻发展了一套独特的生理学机制和适应特性,形成了极强的生态竞争优势。
蓝藻具有对磷的有效利用优势。对水产养殖而言,伴随着大量的投饵和排泄物的产生,充足的氮素进入水体,养殖池塘一般是不缺氮的。而水体中的磷容易被底泥吸附沉积,磷元素成为藻类生长的主要限制因子,而蓝藻中的微囊藻可以过量吸收环境中的磷并贮存起来,当外源磷不足时,仍可利用体内贮存的磷进行正常的生长繁殖,其他藻类则不具备这种储磷功能,环境中的磷源因被微囊藻过量剥夺而缺乏,导致有益藻类因缺磷而生长受阻。另外,蓝藻具有对二氧化碳的浓缩机制。在富营养化水体中,浮游植物的光合作用很强,导致水体的二氧化碳浓度下降,pH值上升,蓝藻特有的二氧化碳浓缩机制使其在高pH值条件下对低浓度二氧化碳有超强的吸收能力,比其他藻类更能富集吸收利用二氧化碳,导致水体中的二氧化碳含量极低,pH值严重偏高,其他藻类无法生存。蓝藻的这些特性使其很容易成为优势种,从而形成以蓝藻为主的不良藻相。
目前,养殖水体对蓝藻藻相的治理方法主要有传统的物理方法、化学方法和生物方法。采用以人工打捞为主的物理方法治理蓝藻,安全性好,但工程量大、不易操作,且蓝藻容易再次形成优势,指标不治本。化学方法主要是通过投放化学杀藻剂(硫酸铜等)杀死蓝藻细胞,该方法不具有特异性和专一性,有益藻、有害藻以及部分浮游动物、微生物均可被杀死,破坏了养殖生态,且化学药物的投放容易造成水体的二次污染,得不偿失。生物治理方法比较多样,如通过培植水生植物与蓝藻竞争营养物质,投放滤食性食藻鱼类捕食蓝藻等方式来控制蓝藻的生长繁殖等,这些利用大型水生动植物调控有害蓝藻的方式具有生态、环保的优点,但见效缓慢,成本高。有研究表明,一些微生物如蜡样芽孢杆菌、粘细菌、侧孢芽孢杆菌等能够特异性的破坏蓝藻细胞,起到杀灭蓝藻的效果,相比较而言,微生物控藻技术具有特异性强、成本低、容易操作、安全高效等优点,是最有前途的一种调控藻相的方式。
现阶段,利用微生态制剂调控养殖水体藻相的研究并不多,且主要集中在对有害藻的杀灭效果上,而在对藻相的整体调控、促进有益藻相的形成和稳定方面的研究较少,用于水体藻相调节的微生态制剂产品几乎没有。
发明内容
本发明的目的在于解决现有技术的上述问题,提供一种藻相调节剂及其制备方法与应用。
本发明的发明人在研究过程中意外发现,通过筛选得到高效的能调节养殖水体藻相的微生物菌种组合:蜡样芽胞杆菌、枯草芽胞杆菌、巨大芽胞杆菌、植物乳杆菌、热带假丝酵母,采用硅藻土吸附菌体制成藻相调节剂。藻相调节剂中的蜡样芽胞杆菌可特异性的降解蓝藻细胞壁,使其藻细胞内容物外溢,最终死亡,专一高效的杀灭有害蓝藻;枯草芽胞杆菌可分解死亡蓝藻细胞和藻毒素,同时吸收亚硝酸盐、氨氮、硫化氢等有害物质,改良水体理化环境;乳酸菌、酵母菌通过产酸作用降低水体pH值;巨大芽孢杆菌通过解磷作用,释放底泥中的不溶性磷,增加水体溶磷;吸附剂硅藻土可有效吸附菌体到其微孔结构中,形成紧密的结合,保护有效菌体避免其在发酵后处理、存储过程中和进入水体后遭受不良外部环境和其他生物的侵害,同时菌体可借助硅藻土的漂浮力延长沉底的时间,加大与喜欢集中在水面生长的蓝藻的接触机会,另外,硅藻土释放的硅元素可有效促进有益硅藻的生长。
为实现上述目的,本发明所采取的技术方案为:
将蜡样芽胞杆菌发酵液、枯草芽胞杆菌发酵液、巨大芽胞杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液和热带假丝酵母发酵液按0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5的体积比混合均匀得到混合菌液,然后按15-25%的量向混合菌液中加入过150-250目的硅藻土作为吸附剂,搅拌吸附0.5-4小时,之后板框过滤,滤饼于20-60℃烘干成菌粉,即得藻相调节剂;
其中,所述蜡样芽胞杆菌发酵液、枯草芽胞杆菌发酵液、巨大芽胞杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液和热带假丝酵母发酵液中的活菌数分别为70-130亿CFU/mL,70-130亿CFU/mL,70-130亿CFU/mL,70-130亿CFU/mL和70-130亿CFU/mL;且所述的藻相调节剂中的活菌数为350-750亿CFU/g。
其中,所述的菌株蜡样芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:0.5-1.5%酵母膏、1-3%糖蜜、1-3%豆饼粉、0.1-0.3%硫酸铵、0.05-0.15%磷酸氢二钾、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠;起始pH 7-7.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到蜡样芽胞杆菌发酵液,活菌数70-130亿CFU/mL。
所述的菌株枯草芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,起始pH 7-7.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到枯草芽胞杆菌发酵液;其中,液体发酵培养基成分为:0.5-1.5%酵母膏、1-3%糖蜜、1-3%豆饼粉、0.1-0.3%硫酸铵、0.05-0.15%磷酸氢二钾、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠,所述枯草芽胞杆菌发酵液中活菌数为70-130亿CFU/mL。
所述的菌株巨大芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,以起始pH 7-7.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到巨大芽胞杆菌发酵液液体;所述发酵培养基成分为:0.5-1.5%酵母膏、1-3%糖蜜、1-3%豆饼粉、0.1-0.3%硫酸铵、0.05-0.15%磷酸氢二钾、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠;所述巨大芽胞杆菌发酵液活菌数为70-130亿CFU/mL。
所述的菌株植物乳杆菌经YPD斜面、MRS液体摇瓶和MRS种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:1-3%酵母膏、1-3%乳糖、1-3%豆饼粉、0.5-1.5%碳酸钙、0.1-0.3%硫酸铵、0.2-0.8%磷酸氢二钾、0.2-0.8%醋酸钠、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠,起始pH5.5-6.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到植物乳杆菌发酵液,活菌数70-130亿CFU/mL。
其中所述的菌种热带假丝酵母经YPD斜面、MRS液体摇瓶和MRS种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,以起始pH5.5-6.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到热带假丝酵母发酵液液体;所述发酵培养基成分为:1-3%酵母膏、1-3%乳糖、1-3%豆饼粉、0.5-1.5%碳酸钙、0.1-0.3%硫酸铵、0.2-0.8%磷酸氢二钾、0.2-0.8%醋酸钠、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠,所述热带假丝酵母发酵液的活菌数70-130亿CFU/mL。
所述的藻相调节剂中的活菌数为500亿CFU/g;所述的硅藻土的目数为200目。
另外,本发明还要求保护由上述方法制备得到的藻相调节剂以及该藻相调节剂在改善养殖水体环境中的用途。
本发明涉及五种菌均购于中国微生物菌种保藏管理委员会农业微生物中心,蜡样芽孢杆菌ACCC03320;枯草芽孢杆菌ACCC03538;巨大芽孢杆菌ACCC01669;植物乳杆菌ACCC10171;热带假丝酵母ACCC20274。
相对于现有技术,本发明具有以下优点:
(1)目前,对于养殖水体出现不良藻相,有害蓝藻爆发的情况,主要采用物理捞除、化学杀灭和投放大型水生动植物的方法进行处理,但存在不易操作、二次污染、见效缓慢,成本高等问题,本专利通过微生态制剂调节水体藻相,操作方便、安全高效、经济环保。
(2)现阶段对养殖水体中的不良藻相的调控的处理方式主要是对有害蓝藻的杀灭或去除,忽略了对水体藻相的整体调控,指标不治本,蓝藻藻相极易再度爆发。而只有在控制有害藻类的同时加强促进有益藻的生长繁殖,促进水体有益藻相的形成和稳定,才能使养殖水环境得到根本的改善,防止蓝藻的在再次爆发。本专利技术在杀灭蓝藻的同时,促进绿藻、硅藻等有益藻类的生长繁殖,建立稳定的优良藻相,避免了蓝藻的复发。
(3)常规培育有益藻类的方法主要是通过投施氮肥磷肥等营养元素来肥水,但采用常规的肥水方法很难在爆发过蓝藻的水体起到良好的肥水效果,主要是因为蓝藻爆发一般在富营养化水体,氮磷营养过剩,而蓝藻特有的聚磷和二氧化碳浓缩机制,导致水体氮磷比失调(氮多磷少)和pH值严重超标(8.5-10),即使施肥,有益藻类在此环境下也根本无法生长。本专利制剂中的乳酸菌、酵母菌通过产酸降低水体pH值;巨大芽孢杆菌通过解磷作用,转化底泥中的不溶性磷为可溶磷,增加水体溶磷,平衡氮磷比,从根本上改善水体低磷高pH值的状况,使有益藻类得以正常生长繁殖。使用本专利微生态制剂,借助水体本身充足的氮源和从底泥释放的磷源,不用额外施肥也能形成以有益藻类为主的优良藻相,避免了施肥造成的水体负担,同时节约了成本。
(4)藻相调节剂中的蜡样芽胞杆菌可特异性的降解蓝藻细胞壁,使其藻细胞内容物外溢,最终死亡,专一高效的杀灭有害蓝藻;枯草芽胞杆菌可分解死亡蓝藻细胞和藻毒素,同时吸收亚硝酸盐、氨氮、硫化氢等有害物质,改良水体理化环境;乳酸菌、酵母菌通过产酸作用降低水体pH值;巨大芽孢杆菌通过解磷作用,释放底泥中的不溶性磷,增加水体溶磷;吸附剂硅藻土可有效吸附菌体到其微孔结构中,形成紧密的结合,保护有效菌体避免其在发酵后处理、存储过程中和进入水体后遭受不良外部环境和其他生物的侵害,同时菌体可借助硅藻土的漂浮力延长沉底的时间,加大与喜欢集中在水面生长的蓝藻的接触机会,另外,硅藻土释放的硅元素可有效促进有益硅藻的生长。
(5)本专利藻相调节剂治理蓝藻养殖水体,可有效去除蓝藻,同时改善水体环境,促进有益藻相的形成,藻相调节效果显著。同时,该藻相调节剂中的复合益生菌在调节水体pH值、降解氨氮、亚硝酸盐等有害物质方面也能起到积极作用,为养殖动物生长营造出优良的水体环境。
附图说明
图1:本发明藻相调节剂的制备流程图。
具体实施方式
以下的实施例将对本发明作进一步说明,但并不因此限制本发明的内容。
实施例1
菌株蜡样芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:1%酵母膏、2%糖蜜、2%豆饼粉、0.2%硫酸铵、0.1%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%硫酸亚铁、0.01%硫酸锰、0.01%氯化钠。起始pH7-7.5,转速200r/min,罐压0.04-0.06MPa,35℃发酵24h,得到蜡样芽胞杆菌发酵液,活菌数100亿CFU/mL;
菌株枯草芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:1%酵母膏、2%糖蜜、2%豆饼粉、0.2%硫酸铵、0.1%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%硫酸亚铁、0.01%硫酸锰、0.01%氯化钠。起始pH7-7.5,转速200r/min,罐压0.04-0.06MPa,35℃发酵24h,得到枯草芽胞杆菌发酵液,活菌数100亿CFU/mL;
菌株巨大芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:1%酵母膏、2%糖蜜、2%豆饼粉、0.2%硫酸铵、0.1%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%硫酸亚铁、0.01%硫酸锰、0.01%氯化钠。起始pH7-7.5,转速200r/min,罐压0.04-0.06MPa,35℃发酵24h,得到巨大芽胞杆菌发酵液,活菌数100亿CFU/mL;
菌株植物乳杆菌经YPD斜面、MRS液体摇瓶和MRS种子罐扩大培养后,按5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:2%酵母膏、2%乳糖、2%豆饼粉、1%碳酸钙、0.2%硫酸铵、0.5%磷酸氢二钾、0.5%醋酸钠、0.05%硫酸镁、0.05%硫酸亚铁、0.01%硫酸锰、0.01%氯化钠。起始pH5.5-6.5,转速200r/min,罐压0.04-0.06MPa,35℃发酵24h,得到植物乳杆菌发酵液,活菌数100亿CFU/mL;
菌种热带假丝酵母经YPD斜面、MRS液体摇瓶和MRS种子罐扩大培养后,按5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:2%酵母膏、2%乳糖、2%豆饼粉、1%碳酸钙、0.2%硫酸铵、0.5%磷酸氢二钾、0.5%醋酸钠、0.05%硫酸镁、0.05%硫酸亚铁、0.01%硫酸锰、0.01%氯化钠。起始pH5.5-6.5,转速200r/min,罐压0.04-0.06MPa,35℃发酵24h,得到热带假丝酵母发酵液,活菌数100亿CFU/mL;
将上面5种发酵液按1:1:1:1:1的体积比混合均匀得到混合菌液,按20%的量向混合菌液中加入过200目的硅藻土作为吸附剂,搅拌吸附1-2小时,然后板框过滤,滤饼于40℃烘干成菌粉,即得复合微生态制剂,活菌数为500亿CFU/g,其中蜡样芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、植物乳杆菌、热带假丝酵母各100亿CFU/g,经检测、包装后即得成品藻相调节剂。
本发明在实际养殖池塘中的应用
本试验于2016年8月20日-2016年9月9日在武汉市江夏区保福乡多福科技农庄养殖场进行。夏季8、9月份气温高、养殖进入中后期阶段,池塘积累了较多残余饲料和排泄物,水体富营养化严重,是蓝藻的高发季。试验挑选了4个蓝藻情况比较严重的草鱼养殖池塘A、B、C和D,这4个池塘水面都有大片蓝藻漂浮,池水老化发黑,经检测4个池塘藻相均以蓝藻为主,蓝藻细胞数均超过5×105cell/mL,占比80%以上,是典型且普遍的不良藻相。
对其中池塘A作投施本专利菌剂处理,于试验开始当天水样采集完后全池泼洒,用量为1000g/亩·米;池塘B按常规处理蓝藻的方式在下风塘边局部泼洒硫酸铜杀藻,2天后换掉1/3池水;池塘C按常规处理蓝藻的方式在下风塘边局部泼洒硫酸铜杀藻,2天后换掉1/3池水,同时投施氮肥和磷肥培藻,用量为尿素2kg/亩·米,过磷酸钙5kg/亩·米;池塘D为不做处理的对照。试验期间,各池均不再投施其他投入品,只进行正常投喂和管理,每隔5天采样1次,检测水体中藻相的变化情况,同时保持对其他水质指标的监测,结果见表1和表2:
表1、浮游植物的数量变化(cell/mL)
表2:pH值、氨氮、亚硝酸盐的浓度变化
通过表1、表2可以看到,试验期间,各池塘的各项指标变化如下:
池塘A投施了本专利藻相调节剂后,蓝藻数量由5.1×105cell/mL逐渐降到1092cell/mL,去除率达到99.78%,蓝藻占比从83.96%下降到0.39%;绿藻、硅藻均得到良好生长,其中绿藻数量增长38.72%,硅藻数量增长349.56%,占比分别从8.37%、7.51%上升到25.41%、73.81%,形成以硅藻为优势藻种的优良藻相,水色呈现出黄褐色的良好状态。另外,池塘A的理化条件也得到很大改善,pH值迅速从9.8下降并维持在7.5-7.8,氨氮从1.1mg/L下降到0.3mg/L,亚硝酸盐从0.1mg/L下降到0.02mg/L。
池塘B投施硫酸铜后,各种藻类数量迅速下降到极低的水平,10天后,蓝藻又再度快速生长形成优势。试验期间,池塘B的pH值维持在9.4-9.8的高位,氨氮维持在1.0-1.1mg/L,亚硝酸盐从0.1mg/L上升到0.3mg/L,养殖环境恶化。
池塘C投施硫酸铜后,各种藻类数量迅速下降到极低的水平,10天后,蓝藻又再度快速生长形成优势,由于C池塘额外投施了氮磷肥,蓝藻的疯长程度较池塘B更为严重,而绿藻、硅藻等有益藻类并没有因为氮磷肥的施用而快速生长。池塘C的pH值呈现逐步升高的趋势,最高达到10.1,氨氮升高并维持在1.5mg/L左右,亚硝酸盐从0.1mg/L上升到0.4mg/L,养殖环境恶化严重。
池塘D不做任何处理,蓝藻仍在不断生长,优势地位更加明显,绿藻、硅藻日渐消亡,藻相岌岌可危。池塘D的pH值、氨氮、亚硝酸盐均有不同程度的升高。
总结:采用硫酸铜杀藻,或者施用硫酸铜杀藻再施肥肥水的方法,杀灭了水体中的大部分有害藻、有益藻、微生物等,破坏了整个养殖生态环境,只能暂时控制住蓝藻,但并没有改善水体低磷高pH的不良状态,导致有益藻类无法正常生长,很快蓝藻又会卷土重来,治标不治本。同时,由于水体微生态系统遭到破坏,氨氮、亚硝酸盐等有害物质逐渐积累,养殖环境进一步恶化。
相比较而言,本专利藻相调节剂在有效杀灭蓝藻的同时,通过改善水体低磷高pH值的不良状态,使有益藻类得以正常生长繁殖,促进优良藻相的形成和稳定,具有显著的调节藻相的作用。另外,藻相调节剂中的各益生菌在调节水体pH值、降解氨氮、亚硝酸盐等有害物质方面也起到了积极的作用,为养殖动物生长营造出优良的水体环境。
以上详描述了本发明的优选实施方式,但是,本发明并不限于上述实施方式中的具体细节,本发明的技术构思内,可以对本发明的技术方案进行多种简单变型,这些简单变型均属于本发明的保护范围。
Claims (9)
1.一种藻相调节剂的制备方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:
将蜡样芽胞杆菌发酵液、枯草芽胞杆菌发酵液、巨大芽胞杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液和热带假丝酵母发酵液按0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5:0.5-1.5的体积比混合均匀得到混合菌液,然后按15-25%的量向混合菌液中加入过150-250目的硅藻土作为吸附剂,搅拌吸附0.5-4小时,之后板框过滤,滤饼于20-60℃烘干成菌粉,即得藻相调节剂;
其中,所述蜡样芽胞杆菌发酵液、枯草芽胞杆菌发酵液、巨大芽胞杆菌发酵液、植物乳杆菌发酵液和热带假丝酵母发酵液中的活菌数分别为70-130亿CFU/mL,70-130亿CFU/mL,70-130亿CFU/mL,70-130亿CFU/mL和70-130亿CFU/mL;且所述的藻相调节剂中的活菌数为350-750亿CFU/g。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的菌株蜡样芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:0.5-1.5%酵母膏、1-3%糖蜜、1-3%豆饼粉、0.1-0.3%硫酸铵、0.05-0.15%磷酸氢二钾、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠;起始pH 7-7.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到蜡样芽胞杆菌发酵液,活菌数70-130亿CFU/mL。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的菌株枯草芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,起始pH 7-7.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到枯草芽胞杆菌发酵液;其中,液体发酵培养基成分为:0.5-1.5%酵母膏、1-3%糖蜜、1-3%豆饼粉、0.1-0.3%硫酸铵、0.05-0.15%磷酸氢二钾、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠,所述枯草芽胞杆菌发酵液中活菌数为70-130亿CFU/mL。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的菌株巨大芽胞杆菌经PDA斜面、LB液体摇瓶和LB种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,以起始pH 7-7.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到巨大芽胞杆菌发酵液液体;所述发酵培养基成分为:0.5-1.5%酵母膏、1-3%糖蜜、1-3%豆饼粉、0.1-0.3%硫酸铵、0.05-0.15%磷酸氢二钾、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠;所述巨大芽胞杆菌发酵液活菌数为70-130亿CFU/mL。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的菌株植物乳杆菌经YPD斜面、MRS液体摇瓶和MRS种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,液体发酵培养基成分为:1-3%酵母膏、1-3%乳糖、1-3%豆饼粉、0.5-1.5%碳酸钙、0.1-0.3%硫酸铵、0.2-0.8%磷酸氢二钾、0.2-0.8%醋酸钠、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠,起始pH5.5-6.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到植物乳杆菌发酵液,活菌数70-130亿CFU/mL。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,其中所述的菌种热带假丝酵母经YPD斜面、MRS液体摇瓶和MRS种子罐扩大培养后,按2.5-7.5%的接种量接种到发酵罐中,以起始pH5.5-6.5,转速150-250r/min,罐压0.04-0.06MPa,30-40℃发酵20-28h,得到热带假丝酵母发酵液液体;所述发酵培养基成分为:1-3%酵母膏、1-3%乳糖、1-3%豆饼粉、0.5-1.5%碳酸钙、0.1-0.3%硫酸铵、0.2-0.8%磷酸氢二钾、0.2-0.8%醋酸钠、0.02-0.08%硫酸镁、0.02-0.08%硫酸亚铁、0.005-0.015%硫酸锰、0.005-0.015%氯化钠,所述热带假丝酵母发酵液的活菌数70-130亿CFU/mL。
7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,其中所述的藻相调节剂中的活菌数为500亿CFU/g;所述的硅藻土的目数为200目。
8.根据权利要求1-7任一项所述的方法制备得到的藻相调节剂。
9.一种权利要求8所述藻相调节剂在改善养殖水体环境中的用途。
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