CN106946721A - 一种从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法 - Google Patents

一种从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法 Download PDF

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Abstract

一种从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,包括以下步骤:(1)将猫豆原料粉碎,加入水、蛋白酶制剂和抗氧化剂,酶解,得酶解物;(2)加入低度醇水溶液,提取,过滤,纳滤,得透过液;(3)浓缩,冷却至室温,调节pH值,析晶,过滤,干燥,得酪氨酸粗品;滤液调节pH值,析晶,过滤,干燥,得左旋多巴粗品;(4)分别在酪氨酸或左旋多巴粗品中,加入酸性醇水溶液,过滤,调节pH值,冷冻析晶,过滤,干燥,得高纯酪氨酸或左旋多巴。本发明方法所得产品均为白色结晶性粉末,酪氨酸的纯度≥97.5%,收率≥85%,左旋多巴的纯度≥99.8%,收率≥91%;本发明方法可操作性强,环保无污染,成本低,适于工业化生产。

Description

一种从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法
技术领域
本发明涉及一种从猫豆中提取两种氨基酸的方法,具体涉及一种从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法。
背景技术
猫豆,又名刺毛黎豆,是常春油麻藤的种子。常春油麻藤主要分布于亚热带、温带地区,生于灌木丛,溪谷,河边,在中国境内主要分布于四川、贵州、云南、陕西南部、湖北、浙江、江西、湖南、福建、广东、广西。猫豆具有营养价值丰富、均衡的特点,尤其是蛋白质丰富,其营养成分与大豆、蚕豆等接近。此外,猫豆中富含左旋多巴,是提取天然左旋多巴最主要的原料药材,其中,左旋多巴的含量最高可达到10%。近年来研究发现,猫豆中还有多种重要的氨基酸,其中,酪氨酸的含量最高可达到2%。
左旋多巴是一种抗震颤麻痹药,是治疗帕金森症的首选药物。酪氨酸是一种重要的原料药和食品添加剂,由于其结构与左旋多巴相似,因此,可以用于合成左旋多巴。
酪氨酸和左旋多巴的分子结构式如下所示。
目前,大量获得左旋多巴的方法主要有三种:天然植物提取法、化学合成法和微生物发酵法。在我国,普遍使用的是天然植物提取法,尤其是从猫豆中提取和分离左旋多巴。但是,由于左旋多巴的性质不稳定,在高温或接触空气条件下易氧化、分解。因此,传统的提取左旋多巴的方法收率普遍偏低。
目前,获得酪氨酸的方法也有三种:蛋白质水解法、化学催化法和微生物发酵法。国内关于从猫豆原料中提取、分离酪氨酸的相关报道较少。
CN102267919A公开了一种猫豆左旋多巴的制备方法,是以猫豆为原料,通过预处理,酸水提,浓缩,萃取,脱色,结晶,干燥等步骤获得左旋多巴。但是,该方法有机溶剂的用量过大;且整个过程对易氧化的左旋多巴未做任何保护措施,左旋多巴的收率偏低。
CN104311440A公开了一种从猫豆中提取左旋多巴的方法,是以猫豆为原料,通过破碎、高压提取、双水相萃取、后续处理等步骤获得左旋多巴。但是,该方法提取条件苛刻,左旋多巴在提取过程中容易被破坏;且由于使用了高沸点的有机溶剂,将导致产品中溶剂残留超标。
CN1042703A公开了一种水渗漉-离子交换法提取左旋多巴新工艺,是以猫豆为原料,通过粉碎,酸水渗漉,阳离子树脂交换,洗脱,浓缩,精制等步骤获得左旋多巴。但是,该方法酸水用量大,且离子交换树脂的洗脱和再生同样需要大量的酸、碱,对环境污染较大;且只能获得左旋多巴一种产品,猫豆资源未得到充分利用。
CN104402748A公开了一种微波辅助从猫豆中提取左旋多巴的方法,是以猫豆为原料,通过粉碎,水、醋酸、抗坏血酸和果胶酶预处理,微波辅助提取,精滤,超滤,纳滤,浓缩,结晶,分离,洗涤与干燥等步骤获得左旋多巴。但是,该方法需要微波辅助,设备造价昂贵,投入较大,生产成本高;且左旋多巴的收率不高,不适合工业化生产。
CN104610080A公开了一种利用猫豆制备左旋多巴的方法,是通过除杂粉碎、酸水提、浓缩、萃取、脱色、结晶、干燥等步骤获得左旋多巴。但是,该方法对各步骤都未采取保护措施,因此,左旋多巴的提取率和纯度都不高。
CN105055494A公开了一种猫豆提取物的制备方法,是通过猫豆粉碎,加入果胶酶和淀粉酶,亚临界萃取,阴阳离子吸附,氨水洗脱,干燥,得到猫豆提取物。但是,该方法工艺复杂,设备要求高,提取物中左旋多巴的含量不超过15%。
上述诸多方法中,仅仅都只涉及猫豆中左旋多巴的提取和分离,均未涉及猫豆中另一种活性成分——酪氨酸的提取和分离。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是,克服现有技术存在的上述缺陷,提供一种产品纯度、收率高,工艺过程可操作性强,不使用有毒有害有机溶剂,环保无污染,成本低,适宜于工业化生产的从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案如下:一种从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,包括以下步骤:
(1)原料粉碎、酶解:将猫豆原料粉碎,再加入水、蛋白酶制剂和抗氧化剂,混合均匀,酶解,得酶解物;
(2)提取、纳滤:在步骤(1)所得酶解物中,加入低度醇水溶液,室温下搅拌提取,过滤,纳滤,得透过液;
(3)浓缩、析晶:将步骤(2)所得透过液浓缩,冷却至室温,调节pH值,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得酪氨酸粗品;将过滤酪氨酸粗品后的滤液,调节pH值,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得左旋多巴粗品;
(4)重结晶:分别在步骤(3)所得酪氨酸粗品或左旋多巴粗品中,加入酸性醇水溶液,在室温下搅拌溶解,过滤,调节pH值,冷冻析晶,过滤,真空干燥,得高纯酪氨酸或高纯左旋多巴。
优选地,步骤(1)中,所述猫豆原料粉碎后的粒径为50~200目(更优选80~120目)。优选使用低温粉碎机进行粉碎,可防止粉碎过程中机器零件摩擦产生的局部高温破坏原料中的有效成分。所述猫豆原料中,酪氨酸的质量含量为1~2%,左旋多巴的质量含量为2~10%。
优选地,步骤(1)中,所述蛋白酶制剂的酶活为5万~15万U/g(更优选8万~12万U/g)。
优选地,步骤(1)中,所述猫豆原料与水、蛋白酶制剂、抗氧化剂的质量比为1:1~2:0.01~0.05:0.001~0.005。加入水的目的是将原料吸水膨胀,有利于酶解;若水的用量过多,则将降低蛋白酶的浓度,若水的用量过少,则原料膨胀不彻底,都不利于充分酶解。加入蛋白酶制剂的目的是将猫豆原料中的蛋白质分解,得到多肽和氨基酸,从而提高酪氨酸和左旋多巴的含量;若蛋白酶制剂的用量过多,则将造成物资的浪费,若蛋白酶制剂的用量少,则将不利于充分酶解。加入抗氧化剂的目的是保护酪氨酸和左旋多巴,使其在提取和分离过程中不被氧化、降解;若抗氧化剂的用量过多,则将造成物资的浪费;若抗氧化剂的用量过少,则不利于起到保护的作用。
优选地,步骤(1)中,所述抗氧化剂为维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、茶多酚或番茄红素等中的一种或几种。
优选地,步骤(1)中,所述酶解的温度为15~50℃(更优选20~30℃),酶解的时间为2~14h(更优选6~12h)。酶解的目的在于改变猫豆原料原有的植物组织结构,同时提高酪氨酸和左旋多巴的含量,使其更快、更多的被提取出。若酶解温度过低,则蛋白酶的催化活性低,难以充分水解蛋白质;若酶解温度过高,则将破坏蛋白酶和目标产物。若酶解的时间过长,则将导致时间和能源的浪费;若酶解的时间过短,则易造成酶解不充分。
优选地,步骤(2)中,所述低度醇水溶液的用量为酶解物质量的5~20倍。本发明人研究发现,酪氨酸和左旋多巴以及杂质在水中的溶解度均比较大,而在醇中的溶解度很小,只有醇的水溶液,特别是低度醇水溶液对酪氨酸和左旋多巴的选择性好,有利于与杂质相分离,提取率高。若低度醇水溶液的用量过少,则酪氨酸和左旋多巴的提取不完全;若低度醇水溶液的用量过多,则将增加纳滤和浓缩的处理量,并增加溶剂的消耗。
优选地,步骤(2)中,所述低度醇水溶液中的醇为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇等中的一种或几种,低度醇水溶液的体积浓度为5~50%。
优选地,步骤(2)中,所述提取的时间为3~12h(更优选4~8h)。若提取的时间过短,则酪氨酸和左旋多巴来不及充分溶解和渗透,造成收率偏低;若提取的时间过长,则将导致时间和能源的浪费。
优选地,步骤(2)中,所述纳滤所用纳滤膜的截留分子量为0.5~2.0kDa。纳滤的目的是除去提取液中的淀粉、果胶、水溶性纤维、植物油脂、黄酮和色素等大分子类杂质。
优选地,步骤(3)中,所述浓缩的方式为降膜浓缩,浓缩至浓缩液总固形物质量浓度为5~30%(更优选15~25%)。使用降膜浓缩可确保在浓缩至目标浓度的过程中,热敏性、易氧化的酪氨酸和左旋多巴不被高温破坏。
优选地,步骤(3)中,析出酪氨酸粗品时,调节pH值至5.2~5.8。
优选地,步骤(3)中,析出左旋多巴粗品时,调节pH值至3.3~3.7。
优选地,步骤(3)中,用于调节pH值的酸性溶液为盐酸、硫酸、磷酸、醋酸或柠檬酸等中的一种或几种,酸的质量浓度为5~10%。
优选地,步骤(4)中,所述酸性醇水溶液的用量为左旋多巴粗品或酪氨酸粗品质量的5~20倍(更优选8~15倍)。采用酸性醇水溶液重结晶的原理是:酪氨酸和左旋多巴在酸性醇水溶液中溶解度很大,调节pH值到各自的等电点时,溶解度急剧变小,但是,pH值的变化对其中杂质的溶解度并没有波动,从而达到精制的目的。本发明人研究发现,若重结晶用的溶剂与提取用溶剂一致,重结晶的效果往往不理想,通过改变溶剂的种类或性质,有利于提高重结晶产品的得率和纯度,因此,步骤(4)重结晶析晶选用的是酸性醇水溶液,而步骤(2)选用的是低度醇水溶液。若酸性醇水溶液的用量过少,溶解后,粗品中的杂质浓度过高,容易析出杂质,影响晶体的纯度;若酸性醇水溶液的用量过少,溶解后,酪氨酸和左旋多巴在溶剂中的浓度太低,难以充分析出,导致收率偏低。
优选地,步骤(4)中,所述酸性醇水溶液中的醇为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇等中的一种或几种,酸性醇水溶液中醇的体积浓度为50~80%。若醇的浓度过低,则酪氨酸和左旋多巴粗品将难以溶解;若醇的浓度过高,则酪氨酸和左旋多巴在其中的溶解度过大,将导致重结晶收率偏低。
优选地,步骤(4)中,所述酸性醇水溶液中的酸为盐酸、硫酸、磷酸、醋酸或柠檬酸等中的一种或几种,酸性醇水溶液中酸的质量浓度为0.5~10%(更优选1~5%)。若酸的浓度过低,则酪氨酸和左旋多巴粗品将难以充分溶解;若酸的浓度过高,则将破坏酪氨酸和左旋多巴的分子结构。
优选地,步骤(4)中,析出高纯酪氨酸时,调节pH值至5.3~5.7。重结晶时,调节的pH值范围较步骤(3)析晶时小,是为了更接近等电点,使得析出的产物纯度更高。
优选地,步骤(4)中,析出高纯左旋多巴时,调节pH值至3.4~3.6。重结晶时,调节的pH值范围较步骤(3)析晶时小,是为了更接近等电点,使得析出的产物纯度更高。
优选地,步骤(4)中,用于调节pH值的碱性水溶液中的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙或氨水等中的一种或几种,碱的质量浓度为0.5~10%。
本发明方法中,用酸或碱调节pH值的目的是:利用两种氨基酸在其各自的等电点时溶解度最小的原理,使其析出。pH值高于或低于等电点,对应的氨基酸的溶解度都会增大,从而导致析晶的收率偏低;若用于调节pH值的酸或碱的浓度过低,将导致加入酸或碱后的结晶溶剂体积过大,结晶的浓度降低,晶体析出量减少;若用于调节pH值的酸或碱的浓度过高,酸或碱加入时,将导致局部pH值过高或过低,都有可能破坏产品的分子结构,使收率偏低。
优选地,步骤(4)中,所述冷冻析晶的温度为5~10℃,析晶的时间为6~24h。
本发明方法的原理为:通过使用低温粉碎、室温提取以及抗氧化剂的添加等手段,最大程度的保护了原料中的酪氨酸和左旋多巴,使其在整个提取、分离过程中不被破坏和氧化。同时,通过用蛋白酶将猫豆中的蛋白质水解,提高了原料中酪氨酸和左旋多巴的含量,因此,收率会有大幅度的提升。另外,本发明人巧妙的利用左旋多巴的等电点为3.5,酪氨酸的等电点为5.66,两种氨基酸等电点不同且相差较大,氨基酸在其等电点时溶解度最小的特性,通过依次调节pH值至相应的等电点,可以使酪氨酸和左旋多巴分别结晶析出。
本发明方法的有益效果如下:
(1)本发明方法可以同时从猫豆中提取酪氨酸和左旋多巴,所得高纯酪氨酸产品和高纯左旋多巴产品均为白色结晶性粉末,经高效液相色谱法检测,所得高纯酪氨酸的纯度≥97.5%,收率≥85%,所得高纯左旋多巴的纯度≥99.8%,收率≥91%,产品质量均符合药典标准;
(2)本发明方法采用温和的粉碎和提取方式,并通过添加抗氧化剂和使用蛋白酶,保护产品不被破坏的同时还提高了产品的含量,因此,收率相比传统工艺有大幅度的提升,提高了猫豆资源的利用率,且工艺过程可操作性强,不使用有毒有害有机溶剂,环保无污染,成本低,适宜于工业化生产。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
本发明实施例所使用的猫豆原料购于广西河池,其中,酪氨酸的质量含量为1.5%,左旋多巴的质量含量为9.6%;本发明实施例所使用的蛋白酶制剂为复合蛋白酶MF101,酶活为10万U/g,购于安琪酵母股份有限公司;本发明实施例所使用的化学试剂和原料,如无特殊说明,均通过常规商业途径获得。
本发明实施例中,采用高效液相色谱(HPLC)外标法检测酪氨酸和左旋多巴的含量。
实施例1
(1)原料粉碎、酶解:将100kg猫豆原料用低温粉碎机粉碎至粒径为80目,再加入100kg水、1.5kg蛋白酶制剂和0.15kg维生素E,混合均匀,20℃下,酶解10h,得201kg酶解物;
(2)提取、纳滤:在步骤(1)所得201kg酶解物中,加入1100kg体积浓度为20%的甲醇水溶液,室温下搅拌提取4h,过滤,用截留分子量为1.0kDa的纳滤膜纳滤,得1000kg透过液;
(3)浓缩、析晶:将步骤(2)所得1000kg透过液用降膜式浓缩器浓缩至总固形物质量浓度为15%,冷却至室温,用质量浓度5%的盐酸水溶液调节pH值至5.3,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得酪氨酸粗品2.1kg;将过滤酪氨酸粗品后的滤液,用质量浓度5%的盐酸水溶液调节pH值至3.4,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得左旋多巴粗品11.3kg;
(4)重结晶:在2.1kg步骤(3)所得酪氨酸粗品中,加入21kg柠檬酸乙醇水溶液(其中,乙醇的体积浓度为70%,柠檬酸的质量浓度为5%),在室温下搅拌溶解,过滤,用质量浓度5%的氨水水溶液调节pH值至5.6,在5℃下,冷冻析晶12h,过滤,真空干燥,得高纯酪氨酸1.28kg;在11.3kg步骤(3)所得左旋多巴粗品中,加入113kg柠檬酸乙醇水溶液(其中,乙醇的体积浓度为70%,柠檬酸的质量浓度为5%),在室温下搅拌溶解,过滤,用质量浓度5%的氨水水溶液调节pH值至3.5,在5℃下,冷冻析晶12h,过滤,真空干燥,得高纯左旋多巴8.73kg。
经高效液相色谱法检测,所得高纯酪氨酸精品的纯度为98.5wt%,酪氨酸的总收率为85%;所得高纯左旋多巴的纯度为99.9wt%,左旋多巴的总收率为91%。
实施例2
(1)原料粉碎、酶解:将200kg猫豆原料用低温粉碎机粉碎至粒径为100目,再加入400kg水、8kg蛋白酶制剂和0.8kgβ-胡萝卜素,混合均匀,30℃下,酶解7h,得605kg酶解物;
(2)提取、纳滤:在步骤(1)所得605kg酶解物中,加入9075kg体积浓度为30%的乙醇水溶液,室温下搅拌提取6h,过滤,用截留分子量为0.5kDa的纳滤膜纳滤,得9000kg透过液;
(3)浓缩、析晶:将步骤(2)所得9000kg透过液用降膜式浓缩器浓缩至总固形物质量浓度为20%,冷却至室温,用质量浓度8%的硫酸水溶液调节pH值至5.7,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得酪氨酸粗品4.3kg;将过滤酪氨酸粗品后的滤液,用质量浓度8%的硫酸水溶液调节pH值至3.7,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得左旋多巴粗品23.1kg;
(4)重结晶:在4.3kg步骤(3)所得酪氨酸粗品中,加入64.5kg盐酸甲醇水溶液(其中,甲醇的体积浓度为80%,盐酸的质量浓度为1%),在室温下搅拌溶解,过滤,用质量浓度0.5%的氢氧化钠水溶液调节pH值至5.7,在10℃下,冷冻析晶24h,过滤,真空干燥,得高纯酪氨酸2.7kg;在23.1kg步骤(3)所得左旋多巴粗品中,加入346.5kg盐酸甲醇水溶液(其中,甲醇的体积浓度为80%,盐酸的质量浓度为1%),在室温下搅拌溶解,过滤,用质量浓度0.5%的氢氧化钠水溶液调节pH值至3.4,在10℃下,冷冻析晶24h,过滤,真空干燥,得高纯左旋多巴17.7kg。
经高效液相色谱法检测,所得高纯酪氨酸精品的纯度为98.0wt%,酪氨酸的总收率为90%;所得高纯左旋多巴的纯度为99.8wt%,左旋多巴的总收率为92%。
实施例3
(1)原料粉碎、酶解:将150kg猫豆原料用低温粉碎机粉碎至粒径为80目,再加入150kg水、3kg蛋白酶制剂和0.15kg茶多酚,混合均匀,20℃下,酶解12h,得302kg酶解物;
(2)提取、纳滤:在步骤(1)所得302kg酶解物中,加入3020kg体积浓度为50%的甲醇水溶液,室温下搅拌提取8h,过滤,用截留分子量为2.0kDa的纳滤膜纳滤,得2800kg透过液;
(3)浓缩、析晶:将步骤(2)所得2800kg透过液用降膜式浓缩器浓缩至总固形物质量浓度为25%,冷却至室温,用质量浓度10%的醋酸水溶液调节pH值至5.7,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得酪氨酸粗品3.2kg;将过滤酪氨酸粗品后的滤液,用质量浓度10%的醋酸水溶液调节pH值至3.3,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得左旋多巴粗品17kg;
(4)重结晶:在3.2kg步骤(3)所得酪氨酸粗品中,加入32kg盐酸异丙醇水溶液(其中,异丙醇的体积浓度为50%,盐酸的质量浓度为1.5%),在室温下搅拌溶解,过滤,用质量浓度5%的氢氧化钾水溶液调节pH值至5.6,在5℃下,冷冻析晶10h,过滤,真空干燥,得高纯酪氨酸1.98kg;在17kg步骤(3)所得左旋多巴粗品中,加入170kg盐酸异丙醇水溶液(其中,异丙醇的体积浓度为50%,盐酸的质量浓度为1.5%),在室温下搅拌溶解,过滤,用质量浓度5%的氢氧化钾水溶液调节pH值至3.5,在5℃下,冷冻析晶10h,过滤,真空干燥,得高纯左旋多巴13.25kg。
经高效液相色谱法检测,所得高纯酪氨酸精品的纯度为97.5wt%,酪氨酸的总收率为88%;所得高纯左旋多巴的纯度为99.9wt%,左旋多巴的总收率为92%。

Claims (10)

1.一种从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)原料粉碎、酶解:将猫豆原料粉碎,再加入水、蛋白酶制剂和抗氧化剂,混合均匀,酶解,得酶解物;
(2)提取、纳滤:在步骤(1)所得酶解物中,加入低度醇水溶液,室温下搅拌提取,过滤,纳滤,得透过液;
(3)浓缩、析晶:将步骤(2)所得透过液浓缩,冷却至室温,调节pH值,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得酪氨酸粗品;将过滤酪氨酸粗品后的滤液,调节pH值,搅拌析晶,过滤,真空干燥,得左旋多巴粗品;
(4)重结晶:分别在步骤(3)所得酪氨酸粗品或左旋多巴粗品中,加入酸性醇水溶液,在室温下搅拌溶解,过滤,调节pH值,冷冻析晶,过滤,真空干燥,得高纯酪氨酸或高纯左旋多巴。
2.根据权利要求1所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述猫豆原料粉碎后的粒径为50~200目。
3.根据权利要求1或2所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述蛋白酶制剂的酶活为5万~15万U/g;所述猫豆原料与水、蛋白酶制剂、抗氧化剂的质量比为1:1~2:0.01~0.05:0.001~0.005;所述抗氧化剂为维生素C、维生素E、β-胡萝卜素、茶多酚或番茄红素中的一种或几种。
4.根据权利要求1~3之一所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(1)中,所述酶解的温度为15~50℃,酶解的时间为2~14h。
5.根据权利要求1~4之一所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述低度醇水溶液的用量为酶解物质量的5~20倍;所述低度醇水溶液中的醇为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇中的一种或几种,低度醇水溶液的体积浓度为5~50%;所述提取的时间为3~12h。
6.根据权利要求1~5之一所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(2)中,所述纳滤所用纳滤膜的截留分子量为0.5~2.0kDa。
7.根据权利要求1~6之一所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(3)中,所述浓缩的方式为降膜浓缩,浓缩至浓缩液总固形物质量浓度为5~30%。
8.根据权利要求1~7之一所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(3)中,析出酪氨酸粗品时,调节pH值至5.2~5.8;析出左旋多巴粗品时,调节pH值至3.3~3.7;用于调节pH值的酸性溶液为盐酸、硫酸、磷酸、醋酸或柠檬酸中的一种或几种,酸的质量浓度为5~10%。
9.根据权利要求1~8之一所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(4)中,所述酸性醇水溶液的用量为左旋多巴粗品或酪氨酸粗品质量的5~20倍;所述酸性醇水溶液中的醇为甲醇、乙醇、异丙醇或正丁醇中的一种或几种,酸性醇水溶液中醇的体积浓度为50~80%;所述酸性醇水溶液中的酸为盐酸、硫酸、磷酸、醋酸或柠檬酸中的一种或几种,酸性醇水溶液中酸的质量浓度为0.5~10%。
10.根据权利要求1~9之一所述从猫豆中同时提取高纯度酪氨酸和左旋多巴的方法,其特征在于,步骤(4)中,析出高纯酪氨酸时,调节pH值至5.3~5.7;析出高纯左旋多巴时,调节pH值至3.4~3.6;用于调节pH值的碱性水溶液中的碱为氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙或氨水中的一种或几种,碱的质量浓度为0.5~10%;所述冷冻析晶的温度为5~10℃,析晶的时间为6~24h。
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