CN106932585A - 幽门螺杆菌胶体金分型检测试纸条及试剂盒 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条，所述试纸条包括支撑板，在所述支撑板的表面从加样端依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫这四个部件，所述金标垫上包含胶体金标记抗人IgG的Fc段单抗；所述硝酸纤维素膜上设有包被有HP细胞毒(CagA)抗原、HP空泡毒(VacA)抗原、HP尿素酶亚单位A蛋白抗原和HP尿素酶亚单位B蛋白抗原的四条检测线和质控线，且上述的四条检测线及质控线相互都不重合。本发明的试纸条属于非侵入性检测技术，能同时检测尿素酶A、尿素酶B、Cag/A和Vac/A 4种幽门螺杆菌抗体，采用国际上公认的标准幽门螺杆菌菌株和质控血清，确保了检测的可靠性。该试纸条操作方法简单、快速、大众化，具有应用前景和潜在的社会价值。

Description

幽门螺杆菌胶体金分型检测试纸条及试剂盒

技术领域

本发明涉及医学生物技术领域，具体涉及一种致病菌的检测方法，特别涉及致病性幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条。

背景技术

现已证实幽门螺杆菌是导致胃溃疡、胃癌等严重消化道疾病的重要致病因素。目前幽门螺杆菌感染率已经达到50％左右。但因为幽门螺杆菌致病性不一致(分为低毒型和高毒型)，并不是所有的幽门螺杆菌感染均需要进行治疗。故诊断出是否被幽门螺杆菌感染以及被何种幽门螺杆菌感染对临床治疗具有重要的指导意义。当前，诊断幽门螺杆菌感染的方法大致分为侵入性和非侵入性两类。

1侵入性：

1)经胃镜取胃粘膜做幽门螺杆菌培养：尽管幽门螺杆菌培养法最为可靠，视为幽门螺杆菌诊断的金标准，但敏感性不高。加上幽门螺杆菌是微需氧菌，培养需要一定的设备，故一般医院不适其为常规。

2)快速尿素酶和组织学检查：两者的联合应用，大大提高了诊断幽门螺杆菌的阳性率，但仅仅能够判断是否由于幽门螺杆菌感染，不能进一步进行分型。检测结果受取材部位，组织块大小，细菌量，检测试剂pH值，观察时间，环境温度等因素影响。组织学检测耗时长，免疫组织化学费用高。

2非侵入性：

1)细菌培养：复杂，耗时，需要一定实验条件，标本转送培养需专门的转送液并低温保存。

2)血清抗幽门螺杆菌抗体检测：检测的抗体是IgG，阳性仅表明过去或现在感染幽门螺杆菌，幽门螺杆菌根除后血清抗体尤其是细胞毒Cag/A抗体可以维持很久，长达数年，因此该结果不能及时判断幽门螺杆菌治疗后的情况。

3)碳13/碳14呼气试验：敏感性、特异性虽高，但是碳13呼气试验使用了稳定性同位素，检测需要特殊的质谱仪检测，耗时长，费用高，基层医院不适宜推广碳14呼气试验对人体有放射性，孕妇和小儿慎用。此外，这种呼气试验当检测值处于临界值附近时，结果不可靠。另外，以上方法皆不能分型。

可见，现有的主流检测幽门螺杆菌技术尚停留在通过尿素酶试验检测有无幽门螺杆菌感染水平，分型产品欠缺。

为解决上述技术问题，本发明由此而来。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是克服现有技术中检测幽门螺杆菌技术的缺陷，提供一种简便、高效可以分型检测幽门螺杆菌致病基因的试纸条其试剂盒。

为解决上述问题，本发明第一方面提供的技术方案是:一种幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条，所述试纸条包括支撑板，在所述支撑板的表面从加样端依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫这四个部件，所述金标垫上包含胶体金标记抗人IgG的Fc段单抗；所述硝酸纤维素膜上设有包被有HP细胞毒(CagA)抗原、HP空泡毒(VacA)抗原、HP尿素酶亚单位A蛋白抗原和HP尿素酶亚单位B蛋白抗原的四条检测线和质控线，且上述的四条检测线及质控线相互都不重合。且优选，这四条检测线和质控线相互平行。

优选地，所述硝酸纤维素膜上设有的四条检测线距离加样端较近一侧，质控线距离加样端较远一侧。

优选地，所述质控线上包被有兔抗鼠IgG抗体。

优选地，所述HP细胞毒(CagA)抗原对应的基因序列为Seq ID No.1。

优选地，所述HP空泡毒(VacA)抗原对应的基因序列为Seq ID No.2。

优选地，所述HP尿素酶亚单位A蛋白抗原对应的基因序列为Seq ID No.3。

优选地，所述HP尿素酶亚单位B蛋白抗原对应的基因序列为Seq ID No.4。

优选地，所述所述硝酸纤维素膜上设置的四条检测线从加样端依次排列为：包被有HP细胞毒(CagA)抗原的检测线、包被有HP空泡毒(VacA)抗原的检测线、包被有HP尿素酶亚单位B蛋白抗原的检测线和包被有HP尿素酶亚单位A蛋白抗原的检测线。且各个检测线之间间距为3～8mm；最后一条检测线和质控线的间距为3～10mm。

优选地，样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫这四个部件，相邻两部件间边缘重叠。

金标垫表面涂布或嵌有牛血清白蛋白、吐温20和蔗糖；样品垫表面涂布或嵌有牛血清白蛋白、吐温20和蔗糖。其中，在表面上涂布或嵌有可以采用浸泡后再干燥来进行。优选，浸泡在2％牛血清白蛋白(BSA)、l％Tween-20、2.5％蔗糖、0.05％NaN3、0.01MpH7.2PB溶液中。

本发明还提供一种幽门螺杆菌的胶体金分型检测试盒，其保护有上述的幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条。

胶体金法是以胶体金作为示踪标记物，应用于抗原抗体的一种新型免疫标记技术，有其独特的优点。基本原理：胶体金是由氯金酸在还原剂如枸橼酸纳、鞣酸等作用下，聚合成一定大小的金颗粒，并由于静电作用而成为一种稳定的胶体状态，形成一种带负电的疏水胶溶液。由于静电作用而成为稳定的胶体状态，故称胶体金。胶体金能稳定又迅速地吸附蛋白质，而蛋白质的生物活性无明显改变。它可以作为探针进行细胞表面和细胞内多糖、蛋白质、多肽、抗原、激素、核酸等生物大分子的精确定位，也可以用于日常的免疫诊断，进行免疫组织化学定位，由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染的问题，且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记，使定位更加精确。因此在临床诊断及药物检测等方面的应用已受到广泛的重视，也已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型免疫标记技术。它具备简单、快速、准确及无污染等优点。

本项目的快速检测试纸条采用检测抗体分型的胶体金法，通过生物工程技术设计出不同幽门螺杆菌抗原，将其固定在醋酸纤维膜上，检测时根据幽门螺杆菌抗体种类的不同，判断细菌抗体类型，结果可预测疾病的严重程度及转归，为临床是否及早采取干预提供指导。该试纸条属于非侵入性检测技术，能同时检测尿素酶A、尿素酶B、Cag/A和Vac/A 4种幽门螺杆菌抗体，采用国际上公认的标准幽门螺杆菌菌株和质控血清，确保了检测的可靠性。该试纸条操作方法简单、快速、大众化，具有应用前景和潜在的社会价值。

综上所述，国内外尚无免疫胶体金法快速分型检测幽门螺杆菌试剂，本项目已经具备实验室产品，且经过了初步临床试验。可见，本项目可行性强。

而本项目主要是通过基因工程获得优化的抗原表位，对样本中的多种抗体进行检测，从而达到分型检测的目的。与现有方法比较，具有样本获取容易、易于操作、检测时间短、敏感度高、特异性强和成本较低等的特点。本项目产品仅仅需要2-5分钟。实现从加样到检验结果的一步、快速、简捷而精准，首次实现集分型与检测于一体，这将极大地满足客户的需求，同时检测成本比其它试剂低廉，而且能够实现患者自我检测。

附图说明

图1是本发明一实施例的检测试纸条的检测线和质控线排列示意图。其中，1为包被有HP CagA抗原的检测线，2为包被有HP VacA抗原的检测线，3为包被有HP UreB蛋白抗原的检测线，4为包被有HP UreA蛋白抗原的检测线，5为质控线。

图2为本发明一实施例的幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条示意图。

具体实施方式

以下结合具体实施例对上述方案做进一步说明。应理解，这些实施例是用于说明本发明而不限于限制本发明的范围。实施例中采用的实施条件可以根据具体厂家的条件做进一步调整，未注明的实施条件通常为常规实验中的条件。

介绍和概述

本发明通过举例而非给出限制的方式来进行说明。应注意的是，在本公开文件中所述的“一”或“一种”实施方式未必是指同一种具体实施方式，而是指至少有一种。

下文将描述本发明的各个方面。然而，对于本领域中的技术人员显而易见的是，可根据本发明的仅一些或所有方面来实施本发明。为说明起见，本文给出具体的编号、材料和配置，以使人们能够透彻地理解本发明。然而，对于本领域中的技术人员将显而易见的是，本发明无需具体的细节即可实施。在其他例子中，为不使本发明费解而省略或简化了众所周知的特征。

以下将以举例形式进行说明，如有未详尽之处，可以参考常用的实验手册(如《分子克隆实验手册》)以及所用的试剂盒仪器的厂商说明书。其中，所有的化学试剂均采用分析级，实验用水经Milli-XQ过滤，各试剂盒材料都可以从商业渠道获得。基因合成为金开瑞公司合成。pET32a质粒、TOP10菌株和BL21菌株由金开瑞公司提供，内切酶购自Takara公司，蛋白纯化试剂盒购自GE Healthcare公司。

实施例1.幽门螺杆菌细胞毒(CagA)、空泡毒(VacA)、尿素酶亚单位A蛋白和尿素酶亚单位B蛋白的核心抗原表达

幽门螺杆菌细胞毒(CagA)、空泡毒(VacA)、尿素酶亚单位A蛋白和尿素酶亚单位B蛋白的四个基因序列是申请人根据GenBank收录的幽门螺杆菌26695株的序列，经过优选找到的核心抗原序列，经金开瑞公司人工合成。其中，HP细胞毒(CagA)的基因序列为Seq IDNo.1，且HP空泡毒(VacA)的基因序列为Seq ID No.2，所述HP尿素酶亚单位A蛋白抗原的基因序列为Seq ID No.3，HP尿素酶亚单位B的基因序列为Seq ID No.4。

1.1人工合成上述四条基因序列

且在基因的两端根据需要添加酶切位点片段

1.2表达载体pET32a-CagA,pET32a-VacA,pET32a-ureA和pET32a-ureB的构建

合成的CagA，VacA和ureA核心抗原基因序列，经过BamH I和Xho I双酶切；合成的ureB核心抗原基因序列经过EcoRI和Xho I双酶切。回收双酶切后的DNA片段，然后将此片段与用同样的酶酶切的pET32a表达载体连接，构建表达载体。

连接产物转化DH5a感受态细胞，将转化菌涂布氨苄青霉素抗性的LB琼脂平板37℃培养过夜。分别挑几个单克隆菌落，进行酶切分析和DNA测序鉴定。大量培养阳性克隆菌株，分装加甘油保存在-80℃超低温冰箱；大量提取阳性克隆表达载体，并分装冻存于-20℃。

1.3CagA，VacA，UreA和UreB核心抗原的蛋白表达

将构建好的表达质粒pET32a-CagA,pET32a-VacA,pET32a-ureA和pET32a-ureB分别转入表达用大肠杆菌的感受态细胞BL21(DE3)中，涂布到含有氨苄青霉素的LB平皿上，37℃培养10～12h，挑取单个菌落放入含有氨苄青霉素的3ml LB液体培养基中培养过夜，进行细菌活化。

次日以1:50的比例接种至含有氨苄青霉素的LB液体培养基中，培养至OD600约为1时，加入IPTG至终浓度0.1mM,于37℃诱导3小时。8,000rpm离心15min，收集细菌。细菌用0.01M pH 7.2磷酸盐缓冲液(PBS)洗涤后，加入裂解液，高压破菌后，加入Triton X100至终浓度1％，于室温缓慢摇动15分钟，12000rpm离心15分钟，保留上清。

从上清中纯化融合蛋白每5ml上清加入1ml 50％Ni-NTA悬液(QIAGEN)，4℃缓慢摇动结合1-2小时，然后将此混悬液装入层析柱内，用4ml洗涤缓冲液洗涤两次，用洗脱缓冲液洗脱结合的6×His蛋白，每次用0.5ml。

纯度及浓度测定通过SDS-PAGE分析蛋白纯度及含量，并用BCA试剂盒(Pierce)进行蛋白定量。

纯化的核心抗原蛋白用于制备试剂盒的试剂。

实施例2检测用层析膜的制备

2.1.配制包被缓冲液

KC10.2g、Na₂幽门螺杆菌O₄·12H₂O 2.9g、KH₂PO₄0.2g、甲醇30ml，双蒸去离子水定容至1000ml，0.22um的膜过滤

2.2硝酸纤维素层析膜的制备

T线(检测线)：

用包被缓冲液将CagA、VacA、UreA和UreB核心抗原蛋白稀释成50～100ng/ml，调整机器，从金标垫端依次划出四条检测线(T线)，分别为CagA，VacA，UreB和UreA。

C线(质控线)：

用包被缓冲液将兔抗鼠IgG抗体稀释到50～100ng/ml，调整机器，划线为C线，即为质控线，C线靠近吸收垫，距吸收垫约3mm。两线距离5～8mm，线应细致、均匀。37℃烘干，封装备用。

实施例3金标抗人IgG的Fc段单抗的制备

3.1.所需溶液的配制

(1)配制氯金酸溶液

10g氯金酸；双蒸去离子水定容至1000ml。配好的溶液储存在4℃。

配制1％柠檬酸三钠

用双蒸去离子水溶解柠檬酸三钠，0.22um膜滤过，现配现用。

配制0.1Mol/L碳酸钾

用双蒸去离子水配制，13.8g碳酸钾；双蒸去离子水定容至1000ml，0.22um膜滤过，储存在4℃。

配制2％PEG-20000

20g PEG-20000双蒸去离子水定容至1000ml，0.22um膜过滤，储存在4℃。

配制标记洗涤保存液

2％牛血清白蛋白(BSA)、0.05％叠氮钠(NaN3)、0.01MpH7.2PBS溶液。

分别称取20gBSA和0.5gNaN3，用0.01M pH 7.2PBS溶液定容至1000ml，0.22um膜过滤，储存在置4℃。

3.2.胶体金的制备

用双蒸去离子水将1％氯金酸稀释成0.01％，置电炉煮沸，按每100ml0.01％氯金酸加入2mll％柠檬酸三钠，继续煮沸，直到液体呈亮红色即停止加热，冷却至室温后补足失水。制备好的胶体金外观应纯净、透亮、无沉淀和漂浮物，有效期一周。

3.3.胶体金标记单克隆抗体的制备

用0.1M碳酸钾调胶体金的pH值至8.2，按8～10ug抗体/ml胶体金加入抗人IgG Fc段单克隆抗体，磁力搅拌器混匀30min，搅拌下加入BSA至终浓度为1％，静置1小时。13000rpm，4℃离心30min，弃上清，沉淀用标记洗涤保存液洗涤两次，用十分之一初始胶体金体积的标记洗涤保存液将沉淀重悬，储存在4℃备用，有效期一周。

实施例4金标垫的制备

4.1.配制封闭液

2％牛血清白蛋白(BSA)、l％Tween-20、2.5％蔗糖、0.05％NaN3、0.01MpH7.2PB溶液，0.22pm分别取20g BSA、0.5g NaN3、10ml Tween-20和25g蔗糖，用0.01M pH7.2PBS溶液定容至1000ml。0.22um滤膜过滤，储存在4℃。

4.2.金标垫的制备：

将金标垫浸泡于封闭液中30min后，于37℃烘干。然后将制备好的金标记抗体均匀的铺在金标垫上，每毫升溶液铺20平方厘米，冷冻干燥，封装，储存在4℃。

实施例5试纸条样品垫的制备

5.1.配制封闭液

2％BSA、0.5％Tween-20、2.5％蔗糖、0.05％NaN3、0.01M pH 7.2PBS溶液。

分别取20gBSA、0.5gNaN3,5mlTween-20和2.5g蔗糖，用0.01M pH7.2PBS溶液定容至1000ml。

0.22um滤膜过滤，储存在4℃。

5.2.样品垫的制备

将样品垫浸泡于封闭液中30min后，于37℃烘干，封装，储存在4℃。

实施例6试纸卡的组装

将样品垫11、金标垫12、硝酸纤维素膜13、吸收垫14按图2依次层叠起来，固定在PVC垫的支撑板15上。然后切成4mm宽的小条，装入测试卡。每十个一包，加入干燥剂，真空封装。4～8℃保存，有效期一年；常温保存，有效期6个月。

以上显示和描述了本发明的基本原理、主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实例的限制，上述实例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等同物界定。

序列表

<110> 蔡长春、孙明宽、贾乙

<120> 幽门螺杆菌胶体金分型检测试纸条及试剂盒

<160> 4

<210> 1

<211> 1227

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 1

cacaataacg ctctgtcttc tgtgttaatg gggagtcata atggcataga acctgaaaaa 60

gtttcattgt tgtatggaaa caatggtggt cctgaagcta ggcatgattg gaacgccacc 120

gttggttata aaaaccaacg aggcgacaat gtggctacac tcattaatgt gcatatgaaa 180

aatggcagtg ggttagtcat agcaggtggt gagaaaggga ttaacaaccc tagtttttat 240

ctctacaaag aagaccaact cacaggctca caacgagcat tgagtcaaga agagatccaa 300

aacaaagtgg atttcatgga atttcttgca caaaataatg ctaaattaga caacttgagc 360

aagaaagaga aagaaaaatt ccaaaatgag attgaagatt ttcaaaaaga ctctaaggct 420

tatttagacg ccctagggaa tgatcacatt gcttttgttt ctaaaaaaga caaaaaacat 480

ttagctttag ttgctgagtt tggtaatggg gaattgagct acactctcaa agattatggg 540

aaaaaagcag ataaagcttt agatagggag gcaaaaacca ctcttcaagg tagcctaaaa 600

catgatggcg tgatgtttgt tgattattct aatttcaaat acaccaacgc ctccaagagt 660

cctgataagg gtgtgggtgc tacgaatggc gtttcccatt tagaagcagg ctttagcaag 720

gtagctgtct ttaatttgcc taatttaaat aatctcgcta tcactagtgt cgtaaggcag 780

gatttagagg ataaactaat cgctaaagga ttgtccccac aagaagctaa taagcttgtc 840

aaagattttt tgagcagcaa caaagaattg gttggaaaag ctttaaactt caataaagct 900

gtagctgaag ctaaaaacac aggcaactat gacgaggtga aacaagctca gaaagatctt 960

gaaaaatctc taaagaaacg agagcgtttg gagaaagatg tagcgaaaaa tttggagagc 1020

aaaagcggca acaaaaataa aatggaagca aaatctcaag ctaacagcca aaaagatgag 1080

atttttgcgt tgatcaataa agaggctaat agggatgcaa gagcaatcgc ttacgctcag 1140

aatcttaaag gcatcaaaag ggaattgtct gataaacttg aaaatatcaa caaggatttg 1200

aaagacttta gtaaatcttt tgatgaa 1227

<210> 2

<211> 2256

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 2

atggaaatac aacaaacaca ccgcaaaatc aatcgccctt tggtttctct cgctttagta 60

ggagcgttag tcagcatcac accgcaacaa agtcatgccg cctttttcac aaccgtgatc 120

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<210> 3

<211> 717

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 3

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cgtggttttc atggcgctaa aagcgatgac aactatgtaa aaacaattaa ggagtaa 717

<210> 4

<211> 1707

<212> DNA

<213> 人工合成

<400> 4

atgaaaaaga ttagcagaaa agaatatgtt tctatgtatg gccctactac aggcgataaa 60

gtgagattgg gcgatacaga cttgatcgct gaagtagaac atgactacac catttatggc 120

gaagagctta aattcggtgg cggtaaaacc ctgagagaag gcatgagcca atccaacaac 180

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aacaaagaca tgcaagatgg cgttaaaaac aatcttagcg taggtcctgc tactgaagcc 360

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actggtcctg ctgatggcac taatgcgact actatcactc caggcagaag aaatttaaaa 540

tggatgctca gagcggctga agaatattct atgaacttag gtttcttggc taaaggtaac 600

gcttctaacg acgcgagctt agccgatcaa attgaagctg gtgcgattgg ctttaaaatc 660

cacgaagact ggggcaccac tccttctgca atcaatcatg cgttagatgt tgcagacaaa 720

tacgatgtgc aagtcgctat ccacacagac actttgaatg aagccggttg cgtggaagac 780

actatggcag ctattgccgg acgcactatg cacactttcc acactgaagg tgctggcggc 840

ggacacgctc ctgatattat taaagtagct ggtgaacaca acattcttcc cgcttccact 900

aaccccacta tccctttcac tgtgaataca gaagcagaac acatggacat gcttatggtg 960

tgccaccact tggataaaag cattaaagaa gatgttcagt tcgctgattc aaggatccgc 1020

cctcaaacca ttgcggctga agacactttg catgacatgg ggattttctc aatcaccagc 1080

tctgactctc aagctatggg tcgtgtgggt gaagttatca ctagaacttg gcaaacagct 1140

gacaaaaaca aaaaagaatt tggccgcttg aaagaagaaa aaggcgataa cgacaacttc 1200

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ggtgacgcga acgcttctat ccctacccca caaccagttt attacagaga aatgttcgct 1440

catcatggta aagccaaata cgatgcaaac atcacttttg tgtctcaagc ggcttatgac 1500

aaaggcatta aagaagaatt agggcttgaa agacaagtgt tgccggtaaa aaattgcaga 1560

aacatcacta aaaaagacat gcaattcaac gacactaccg ctcacattga agtcaatcct 1620

gaaacttacc atgtgttcgt ggatggcaaa gaagtaactt ctaaaccagc caataaagtg 1680

agcttggcgc aactctttag cattttc 1707

Claims (10)

1.一种幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条，所述试纸条包括支撑板，在所述支撑板的表面从加样端依次排列的样品垫、金标垫、硝酸纤维素膜和吸收垫这四个部件，所述金标垫上包含胶体金标记抗人IgG的Fc段单抗；所述硝酸纤维素膜上设有包被有HP细胞毒抗原、HP空泡毒抗原、HP尿素酶亚单位A蛋白抗原和HP尿素酶亚单位B蛋白抗原的四条检测线和质控线，且上述的四条检测线及质控线相互都不重合。

2.根据权利要求1所述的分型检测试纸条，其特征在于，所述质控线上包被有兔抗鼠IgG抗体。

3.根据权利要求1所述的分型检测试纸条，其特征在于，所述硝酸纤维素膜上设有的四条检测线距离加样端较近一侧，质控线距离加样端较远一侧。

4.根据权利要求1所述的分型检测试纸条，其特征在于，所述HP细胞毒抗原对应的基因序列为Seq ID No.1。

5.根据权利要求1所述的分型检测试纸条，其特征在于，所述HP空泡毒抗原对应的基因序列为Seq ID No.2。

6.根据权利要求1所述的分型检测试纸条，其特征在于，所述HP尿素酶亚单位A蛋白抗原对应的基因序列为Seq ID No.3。

7.根据权利要求1所述的分型检测试纸条，其特征在于，所述HP尿素酶亚单位B蛋白抗原对应的基因序列为Seq ID No.4。

8.根据权利要求1所述的分型检测试纸条，其特征在于，所述所述硝酸纤维素膜上设置的四条检测线从加样端依次排列为：包被有HP细胞毒抗原的检测线、包被有HP空泡毒抗原的检测线、包被有HP尿素酶亚单位B蛋白抗原的检测线和包被有HP尿素酶亚单位A蛋白抗原的检测线。

9.根据权利要求1所述的分型检测试纸条，其特征在于，样品垫、玻璃纤维垫、硝酸纤维素膜和吸收垫这四个部件，相邻两部件间边缘重叠。

10.一种幽门螺杆菌的胶体金分型检测试盒，其包含有权利要求1-9任一项所述的幽门螺杆菌的胶体金分型检测试纸条。