CN106902102A - 玛咖酰胺类化合物在制备治疗月经不调药物中的应用 - Google Patents

Abstract

本发明公开了玛咖酰胺类化合物在制备治疗月经不调药物中的应用，所述的玛咖酰胺类化合物，其中R₁为H或羟基或C1‑4烷氧基，R₂为C7‑23的饱和或不饱和脂肪烃基。本发明发现玛咖酰胺类化合物对于女性月经不调有良好的疗效，具有潜在开发价值及工业应用前景。

Description

玛咖酰胺类化合物在制备治疗月经不调药物中的应用

技术领域

本发明属于生物医药技术领域，更具体地，涉及玛咖酰胺类化合物在制备治疗月经不调药物中的应用。

背景技术

月经的产生，是天癸、脏腑、气血、经络协调作用于子宫的生理现象。女性生殖系统突出的生理特点是具有周期性，月经周期是由下丘脑、垂体和卵巢三者生殖激素之间的相互作用来调节的，使子宫内膜发生周期性的增生、分泌、脱落出血，临床上表现为规律性的月经来潮。

月经不调，又称月经失调症，是一种常见的妇科疾病，表现为月经周期或出血量的异常，可伴月经前、经期时的腹痛及全身症状。月经失调症的机理在于气血失于调节而导致血海蓄溢失常，其病因多由于肝气郁滞或者肾气虚衰所致，而以肝郁为主，肝为肾之子，肝气郁滞，疏泄失调，子病及母，使肾气的闭藏失司，故常发展为肝肾同病。女性一旦出现月经不调，预示着女性正常的生理过程也发生了故障。长期如此，轻者会引起色斑、暗疮，加速容颜衰老，严重者将导致妇科重症，乃至女性生殖疾病。目前，对于月经失调的治疗大都采用中药治疗，但是现有的中药治疗药品有的副作用大，长时间服用甚至会给患者的身体机能造成损害，成为目前使用中药辅助治疗上述病症的重大障碍。

玛咖Lepidium meyenii Walp.为十字花科（Brassicaceae）独荇菜属Lepidium L.一年生草本植物，原产于南美洲秘鲁的安第斯山区。近20年来，许多研究证明了玛咖具有提高人畜生育能力、改善性功能、抑制前列腺增大、抗疲劳、抗抑郁、改善骨质疏松、提高记忆力等作用。由于玛咖营养丰富、功效多样以及人们的健康意识日益增强，近年来玛咖产业规模迅速发展壮大，进而促进了对玛咖药用价值的深入研究。

公开号CN 105687388A的专利，将玛咖浓缩精华与活性食用玫瑰组合用于调整及平衡女性内分泌，激发女性荷尔蒙的内源性分泌，解决女性月经不调、痛经、气质型不育不孕等亚健康状况；该专利提出使用有效成分含量高出玛咖原粉5倍的玛咖浓缩精华，即可达到调整和平衡人体内分泌的功效，但其浓缩工艺复杂，且未具体分析其特定功效成分。公开号CN 105876018A的专利，将玛咖与灵芝、当归、手掌参、黄芪、雪莲、金边玫瑰和紫河车混配成一种灵芝助孕茶，对女性月经不调、痛经、内分泌失调、不孕等症有极佳的疗效；该专利是将玛咖作为组合物的一种组分，与其他配方相配合发生作用，未专门研究玛咖及其成分在其中所产生的功效。

玛咖中含有多种次生代谢产物，如玛咖酰胺、玛咖烯、玛咖生物碱、玛咖芥子油苷及其分解产物异硫氰酸苄酯、甾醇、多酚类物质等，同时含有多种氨基酸、维生素、矿物质。玛咖酰胺为目前仅在玛咖中发现的一类化合物，作为玛咖特有成分而备受关注。玛咖酰胺是一系列非极性长链脂肪酸的氮苄基酰胺类化合物，现在已发现其具有多种生物活性，如：提高性功能和生育能力、神经细胞的保护作用、神经调节作用（阵痛、抗抑郁、抗焦虑）、改善骨质疏松作用等。现有研究表明玛咖的多种生物碱作用于下丘脑和脑垂体，能调节内分泌系统，平衡荷尔蒙，而玛咖酰胺在治疗月经不调中的应用还未见报道。

发明内容

针对上述现有技术中的问题，本发明的目的在于提供上述玛咖酰胺类化合物在制备治疗月经不调药物中的应用。

本发明的另一目的在于提供一种治疗月经不调的药物。

本发明的上述目的是通过以下技术方案予以实现的。

玛咖酰胺类化合物在制备治疗月经不调药物中的应用，所述的玛咖酰胺类化合物，结构如下通式：

其中R₁为H或羟基或C1-4烷氧基，R₂为C7-23的饱和或不饱和脂肪烃基。

本发明通过动物实验及临床研究发现，所述的玛咖酰胺类化合物对女性月经不调有显著疗效，可用于制备治疗月经不调的药物。

所述通式所示的玛咖酰胺类化合物可与有机酸或无机酸形成可药用的加成盐。

本发明还提供一种治疗月经不调的药物，包含有效剂量的权利要求1所述的玛咖酰胺类化合物或其盐，和一种或多种药学上可接受的载体。

上述的药学上可接受的载体是无毒并且对所述通式的化合物发挥疗效没有不利影响。

所述载体是本领域通常能获得的，优选地，所述的载体是固体赋形剂、液体赋形剂或半固体赋形剂。

优选地，所述的固体赋形剂包括淀粉、纤维素、滑石粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、稻米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、甘油硬脂酰酯、氯化钠或无水脱脂乳。

优选地，所述的液体赋形剂或半固体赋形剂包括甘油、丙二醇、水或乙醇。

另外，所述药物中还加入有其它辅剂如香味剂、甜味剂。

本发明所述药物的施用方式为口服，在治疗上的有效量为12g/天，可根据情况一天服用2~3次。

本发明所述药物的各剂型可以按照药学领域的常规方法制备，如将所述通式化合物与一种或多种载体混合，然后将其制成所需的剂型，如片剂、药丸、胶囊、半固体、粉末、缓释剂型、溶液、混悬液、配剂、气雾剂等。

与现有技术相比，本发明有益效果在于：本发明将玛咖酰胺类化合物应用在在制备治疗月经不调药物中，疗效显著。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。除非特别说明，本发明采用的试剂、方法和设备为本技术领域常规试剂、方法和设备。

以下以具体实施条件为例对本发明方法进行进一步说明。

实施例1

所述的玛咖酰胺类化合物，结构如下通式：

其中R₁为H或羟基或C1-4烷氧基，R₂为C7-23的饱和或不饱和脂肪烃基。

上述玛咖酰胺类化合物的合成路线如下：

（1）

（2）

脂肪酸与二氯亚砜加热回流得脂肪酰氯。将苯甲胺或苯甲胺衍生物溶于吡啶中，缓慢滴加得到的脂肪酰氯，搅拌反应1h。经萃取、重结晶等，制得所述玛咖酰胺类化合物。

一共制备如下玛咖酰胺类化合物，结构式分别为：

化合物1. N-苄基棕榈酰胺

化合物2. N-（3-甲氧苄基）棕榈酰胺

化合物3. N-苄基十八烷酰胺

化合物4. N-（3-甲氧苄基）十八烷酰胺

化合物5. N-苄基油酰胺

化合物6. N-（3-甲氧苄基）油酰胺

其中化合物1的核磁和质谱数据为：¹H-NMR(CDCl₃)δ(ppm) ：7.30(5H，m，H-3′ to H-7′)，5.74(1H，s，N-H)，4.44(2H，d，J=5.7Hz，H2-1 ′ )，2.21(2H，t， J=7.7Hz，H2-2)，2.00(4H，m，H2-8，H2-11)，1.66(2H，m，H2-3)，1.29(20H， m，H2-4 to H2-7，H2-12 to H2-17)，0.88(3H，t，J=6.6Hz，H3-18)；¹³C-NMR(CDCl₃)δ(ppm) ：172.89(C-1)， 138.45(C-2 ′ )129.99(C-10)，129.73(C-9)， 128.68(C-4 ′，C-6 ′ )，127.80(C-3 ′，C-7 ′ )，127.46(C-5 ′ )，43.58(C-1 ′ )，36.78(C-2)， 31.88(C-16)，29.12-29.75(C-4 to C-7 and C-12 to C-15)，27.21(C-11)，27.16(C-8)，25.74(C-3) ；ESI-HRMS m/z346.3142(calculated forC23H39NO，[M+H]+，346.3104)。证明其为N-苄基棕榈酰胺。

将上述玛咖酰胺类化合物制备成治疗月经不调的药物，其剂型可以为多种，制备方法按照现有技术中的常规方法，以下以片剂为例。

片剂的制备：辅料采用羟丙基纤维素50mg和淀粉400mg，在玛咖酰胺活性成分500mg中加入滑石粉50mg，使药物表面覆盖了一层亲水材料，微粒均匀分散，可以改善其溶解特性，有助于提高药物的生物利用度；再进行压片，每片重1g，活性成分50%。

实施例2

一、实验动物：大鼠126只，体重200g±20g，约3月龄，全雌，未经交配，随机平分14笼饲养，分别为空白组、造模组、试验1~6低/高剂量组（分别对应实施例1获得的六种玛咖酰胺类化合物），各组在整个实验过程中均给予全价颗粒饲料、饮自来水，室温25℃，自由摄食，自然光照，每日清洁。

给药剂量：本发明制得的药物适用于口服，故本实验采用大鼠灌胃给药。

空白组：9只，每日灌胃一次，每只灌服蒸馏水10ml/kg体重，连续21天。

造模组：9只，每日灌胃一次，每只灌服蒸馏水10ml/kg体重，连续21天。

试验1~6低剂量组：每组9只，每日灌胃一次，每只灌服0.6g/kg体重，连续21天。

试验1~5高剂量组：每组9只，每日灌胃一次，每只灌服2.4g/kg体重，连续21天。

所有大鼠每日定时灌胃，容量相同。

二、实验方法：运用游泳力竭实验的方法建立大鼠月经不调动物模型。

训练方式：先让大鼠进行7天适应性游泳，每天20min；再进行负重训练，制作负重物使其重量相当于每只大鼠体重的10%。实验时，将负重物的大鼠放入缸中，让其游泳至接近力竭。力竭标准：游泳动作明显失调，不能再坚持或沉入水底超过3秒不能重回水面。出现上述情况，及时捞起，并注意保暖。如此，每日游泳一次，进行造模。其中，除空白组外，造模组、试验1~6低/高剂量组每日仍按上述方式持续负重力竭训练。试验1~6低/高剂量组同时给药，连续21天后，进行结果检测。

造模检验：采用阴道脱落细胞角化指标观察法。用生理盐水浸泡后的消毒纤细棉签取大鼠阴道脱落细胞，在清洁载玻片上涂片，用95%乙醇溶液固定15min后，将载玻片取出放干。然后用瑞氏染色剂染色，在光学显微镜下观察。每三天涂片观察一次。随机抽大鼠涂片进行观察，发现大鼠角化细胞大量减少，与正常不游泳大鼠有显著差异。

三、试验结果

①分组后，即开始对各组大鼠行为、体征、体重等情况进行观察和记录。大鼠行为、体征、体重情况见下表。

表1 大鼠行为、体征、体重情况（±SD）

实验前各组间大鼠体重无显著性差异，P＞0.05；实验后各组间大鼠体重无显著性差异，P＞0.05。

②对大鼠子宫、卵巢的影响

处死大鼠，手术分离大鼠的子宫、卵巢，肉眼观察后，子宫、卵巢称重，计算脏器系数，作统计学处理。

卵巢肉眼外观形态观察：空白组双侧卵巢均可见多个卵泡凸起和黄体；造模组卵泡凸起数目少，偶见黄体，可见卵巢萎缩；试验1~6低剂量组卵泡凸起数目少，黄体数目极少，可见卵巢萎缩、发黑；试验1~6高剂量组卵泡凸起数目极多，可见黄体，卵巢血循环丰富。

表2 试验后对大鼠子宫、卵巢重量的影响（±SD）

*P，P＜0.05；**P，P＜0.01.

造模组与空白组比较，子宫系数有显著差异（P＜0.05），卵巢系数有极显著差异（P＜0.01）；试验1~6低剂量组与造模组相比，子宫系数与卵巢系数均无显著性差异（P＞0.05）；试验1~6高剂量组与造模组相比，子宫系数无显著性差异（P＞0.05），卵巢系数有显著性差异（P＜0.05）。说明本发明药物不会导致动物体重增加，对月经不调具有一定疗效。

实施例3

一、病例选择及分组

月经不调的诊断：

a). 月经先期：月经周期提前7天以上，月经量基本正常，连续出现两个月经周期以上者。

b). 月经后期：月经周期延后7天以上，月经量基本正常，连续出现两个月经周期以上者。

c). 月经过多：月经周期基本正常，而经量较以往明显增多，或经量超过100ml者。

d). 月经过少：月经周期基本正常，而经量明显减少，或经期缩不足两天，经量也少于正常。

将诊断为月经不调的志愿者随机分为治疗组1~6组和对照组，每组30例，每组之间的年龄、月经不调病症时间及情况、病种构成等无显著性差异。

治疗组1~6组：分别对应实施例1的六种玛咖酰胺类化合物制备得到的片剂，口服，一次2g，一日两次。

对照组：随机选取一种市售的乌鸡白凤丸，口服，一次6g，一日两次。

治疗方法：每月为一组疗程，连续用药两个疗程。

二、疗效判断标准

痊愈：治疗后月经周期、经量、经期恢复正常，其他症状消失，停药1个周期月经不调未复发。

显效：治疗后月经周期到28±7天，月经过多者经量比治疗前减少1/3；经期恢复到7天以内，其他症状消失或减轻，停药1个周期月经不调无复发。

有效：治疗后月经周期、经量、经期较治疗前改善，其他症状亦较治疗前减轻。

无效：治疗后月经周期、经量及经期无改善。

表3 两组疗程结束后疗效比较

两组疗程结束后疗效比较，无显著性差异。

表4 停药一个月后疗效比较

追踪随访一周期（停药一个月）疗效比较，无显著性意义。

治疗后，治疗组及对照组均未出现不良反应症状。治疗前后通过检测GPT、BUN、EKG以及血常规，未发现有治疗后的异常改变，也未有迹象表明治疗药物对血液及心、肝、肾等脏器有损害作用。

临床疗效试验结果表明，治疗组与对照组的近期疗效，可以看出治疗组痊愈率加显效率为36.7~43.3%，对照组痊愈率加显效率为30%，治疗组的治疗有效率高于对照组。停药一个月后追踪随访再次进行疗效比较，可以看出治疗组痊愈率加显效率为40~46.7%，对照组痊愈率加显效率为30%；治疗组的无效率为10~16.7%，对照组的无效率为23.3%。

综上所述，本发明的玛咖酰胺类化合物治疗月经不调具有一定的疗效，安全可靠。

以上详细描述了本发明的实施，但是，本发明并不限于上述实施方式中的具体细节，在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，这些简单变型均属于本发明的保护范围。

Claims (5)

1.玛咖酰胺类化合物在制备治疗月经不调药物中的应用，所述的玛咖酰胺类化合物，结构如下：

其中R₁为H或羟基或C1-4烷氧基，R₂为C7-23的饱和或不饱和脂肪烃基。

2.一种治疗月经不调的药物，其特征在于，包含有效剂量的权利要求1所述的玛咖酰胺类化合物或其盐，和一种或多种药学上可接受的载体。

3.根据权利要求2所述的药物，其特征在于，所述的载体是固体赋形剂、液体赋形剂或半固体赋形剂。

4.根据权利要求3所述的药物，其特征在于，所述的固体赋形剂包括淀粉、纤维素、滑石粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、明胶、麦芽、稻米、面粉、白垩、硅胶、硬脂酸镁、硬脂酸钠、甘油硬脂酰酯、氯化钠或无水脱脂乳。

5.根据权利要求3所述的药物，其特征在于，所述的液体赋形剂或半固体赋形剂包括甘油、丙二醇、水或乙醇。