CN106896225A - 一种沙门氏菌的快速检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种沙门氏菌的快速检测方法，涉及沙门氏菌的检测技术领域。一种沙门氏菌的快速检测方法，包括以下步骤：1.培养基配制；2.无菌操作取25g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入225mL预热后的增菌培养基，放入均质器中均质2min；42℃静止或者振荡培养6h，根据需要也可以延长至24h；取0.1mL上述增菌液，加入含1mL选择性培养基的5mL玻璃管内，42±1℃继续培养18‑24 h；3.将培养物混合均匀，取1mL到试管中沸水（100℃）加热10min，冷却至室温，用滴管滴加3‑4滴至胶体金检测卡的样品孔，反应5‑10min，判读结果，超过30 min显色无效。本发明为沙门氏菌的快速定性检测提供了一种便捷有效地途径。
Description
技术领域
本发明涉及沙门氏菌的检测技术领域，尤其指一种沙门氏菌的快速检测方法。
背景技术
沙门氏菌是一种严重威胁人类及动物生命健康的人畜共患病原菌，可引起人和动物急性胃肠炎、伤寒、败血症以及肠外灶性感染等，已被FAO列为A类病原微生物。历年来，沙门氏菌引起的食物中毒常列于细菌性食物中毒的榜首。我国疾病预防控制中心已将沙门氏菌列为食品中要求控制的细菌指标之一。
准确及时的检测手段是预防和控制病原微生物传播的关键。目前沙门氏菌的检测多采用传统的微生物培养的方法， 主要包括前增菌、选择性增菌、平板分离、生化试验和血清学鉴定等步骤，涉及的实验较多、操作较烦琐、检测周期较长(一般需要4～7d)、准备和收尾工作繁重，已无法满足现阶段食品中致病菌快速检测的现实需要。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明提供一种沙门氏菌的快速检测方法。
一种沙门氏菌的快速检测方法，包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取 26.5 g 增菌粉末培养基，加入预热 42±1 ℃去离子水 1L，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取 7.5 g 选择粉末培养基，加入预热 42±1 ℃去离子水100 mL，充分溶解，备用；
2. 无菌操作取 25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入 225 mL 预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2 min；42 ℃静止或者振荡培养 6 h，根据需要也可以延长至 24h；取 0.1 mL 上述增菌液，加入含 1 mL 选择性培养基的 5 mL 玻璃管内，42±1 ℃继续培养 18-24 h；
3. 将培养物混合均匀，取 1 mL 到试管中沸水（100 ℃）加热 10 min，冷却至室温，用滴管滴加 3-4 滴至胶体金检测卡的样品孔，反应 5-10 min，判读结果，超过 30 min 显色无效。
进一步的，所述增菌粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：蛋白胨70～ 110份、氯化钠50～ 80份、磷酸氢二钠70～ 90份、磷酸二氢钾5～ 10份、煌绿0.06～0.08份、牛胆盐5～10份、萘啶酸0.1～0.14份、脱脂牛奶粉150～400份。
进一步的，所述选择粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：胰蛋白胨5-7.5份，鱼粉蛋白胨2.5-7.5份，牛肉浸膏2-8份，氯化钠2.5-7.5份，磷酸氢二钠 1-2份，磷酸二氢钾6-12份，甘露醇1-3份，丙酮酸钠5-15份，阿卡波糖0.2-1份，胆盐5号1.25-5 份，硫代硫酸钠10-30份。
本发明的有益效果是：本发明提供了一种快速灵敏的检测样品中的沙门氏菌的方法，为沙门氏菌的快速定性检测提供了一种便捷有效地途径。缩短沙门氏菌检测时间，加快检测进程，缩短检测人员的劳动时间，降低劳动强度，节省水电及储存清洁等成本，提高检测效率，降低检测成本，便于现场检测，提高准确度。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作进一步说明：
实施例一
一种沙门氏菌的快速检测方法，包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取 26.5 g 增菌粉末培养基，加入预热 42 ℃去离子水 1 L，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取 7.5 g 选择粉末培养基，加入预热 42 ℃去离子水 100mL，充分溶解，备用；
2. 无菌操作取 25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入 225 mL 预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2 min；42 ℃静止或者振荡培养 6 h，根据需要也可以延长至 24h；取 0.1 mL 上述增菌液，加入含 1 mL 选择性培养基的 5 mL 玻璃管内，42 ℃继续培养21 h；
3. 将培养物混合均匀，取 1 mL 到试管中沸水（100 ℃）加热 10 min，冷却至室温，用滴管滴加 3-4 滴至胶体金检测卡的样品孔，反应 5-10 min，判读结果，超过 30 min 显色无效。
其中，所述增菌粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：蛋白胨90份、氯化钠60份、磷酸氢二钠80份、磷酸二氢钾7份、煌绿0.07份、牛胆盐7份、萘啶酸0.12份、脱脂牛奶粉300份。
其中，所述选择粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：胰蛋白胨6份，鱼粉蛋白胨5份，牛肉浸膏4份，氯化钠5份，磷酸氢二钠 1.5份，磷酸二氢钾8份，甘露醇2份，丙酮酸钠10份，阿卡波糖0.5份，胆盐5号3份，硫代硫酸钠20份。
实施例二
一种沙门氏菌的快速检测方法，包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取 26.5 g 增菌粉末培养基，加入预热 43 ℃去离子水 1 L，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取 7.5 g 选择粉末培养基，加入预热 43 ℃去离子水 100mL，充分溶解，备用；
2. 无菌操作取 25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入 225 mL 预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2 min；42 ℃静止或者振荡培养 6 h，根据需要也可以延长至 24h；取 0.1 mL 上述增菌液，加入含 1 mL 选择性培养基的 5 mL 玻璃管内，43 ℃继续培养18-24 h；
3. 将培养物混合均匀，取 1 mL 到试管中沸水（100 ℃）加热 10 min，冷却至室温，用滴管滴加 3-4 滴至胶体金检测卡的样品孔，反应 5-10 min，判读结果，超过 30 min 显色无效。
其中，所述增菌粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：蛋白胨70份、氯化钠50份、磷酸氢二钠70份、磷酸二氢钾5份、煌绿0.06份、牛胆盐5份、萘啶酸0.1份、脱脂牛奶粉150份。
其中，所述选择粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：胰蛋白胨5份，鱼粉蛋白胨2.5份，牛肉浸膏2份，氯化钠2.5份，磷酸氢二钠 1份，磷酸二氢钾6份，甘露醇1份，丙酮酸钠5份，阿卡波糖0.2份，胆盐5号1.25份，硫代硫酸钠10-份。
实施例三
一种沙门氏菌的快速检测方法，包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取 26.5 g 增菌粉末培养基，加入预热41℃去离子水 1 L，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取 7.5 g 选择粉末培养基，加入预热41 ℃去离子水 100mL，充分溶解，备用；
2. 无菌操作取 25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入 225 mL 预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2 min；42 ℃静止或者振荡培养 6 h，根据需要也可以延长至 24h；取 0.1 mL 上述增菌液，加入含 1 mL 选择性培养基的 5 mL 玻璃管内，41 ℃继续培养18-24 h；
3. 将培养物混合均匀，取 1 mL 到试管中沸水（100 ℃）加热 10 min，冷却至室温，用滴管滴加 3-4 滴至胶体金检测卡的样品孔，反应 5-10 min，判读结果，超过 30 min 显色无效。
其中，所述增菌粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：蛋白胨110份、氯化钠80份、磷酸氢二钠90份、磷酸二氢钾10份、煌绿0.08份、牛胆盐10份、萘啶酸0.14份、脱脂牛奶粉400份。
其中，所述选择粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：胰蛋白胨7.5 份，鱼粉蛋白胨7.5份，牛肉浸膏8份，氯化钠7.5份，磷酸氢二钠2份，磷酸二氢钾12份，甘露醇3份，丙酮酸钠15份，阿卡波糖1份，胆盐5号5 份，硫代硫酸钠30份。
最后需要说明的是，具体实施方式是对本发明的进一步说明而非限制，对本领域普通技术人员来说，可以在不脱离本发明实质内容的情况下做进一步变换，而所有这些变换都应属于本发明所附权利要求的保护范围。
Claims (3)
1.一种沙门氏菌的快速检测方法，其特征在于：
包括以下步骤：
1.培养基配制
1）增菌培养基配制：称取 26.5 g 增菌粉末培养基，加入预热 42±1 ℃去离子水 1L，充分溶解，备用；
2）选择性培养基配制：称取 7.5 g 选择粉末培养基，加入预热 42±1 ℃去离子水100 mL，充分溶解，备用；
2.无菌操作取 25 g(mL)样品到均质袋中，并向其中加入 225 mL 预热后的增菌培养基，放入均质器中均质 2 min；42 ℃静止或者振荡培养 6 h，根据需要也可以延长至 24h；取 0.1 mL 上述增菌液，加入含 1 mL 选择性培养基的 5 mL 玻璃管内，42±1 ℃继续培养 18-24 h；
3.将培养物混合均匀，取 1 mL 到试管中沸水（100 ℃）加热 10 min，冷却至室温，用滴管滴加 3-4 滴至胶体金检测卡的样品孔，反应 5-10 min，判读结果，超过 30 min 显色无效。
2.根据权利要求1所述的一种沙门氏菌的快速检测方法，其特征在于：所述增菌粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：蛋白胨70～ 110份、氯化钠50～ 80份、磷酸氢二钠70～ 90份、磷酸二氢钾5～ 10份、煌绿0.06～0.08份、牛胆盐5～10份、萘啶酸0.1～0.14份、脱脂牛奶粉150～400份。
3.根据权利要求1所述的一种沙门氏菌的快速检测方法，其特征在于：所述选择粉末培养基包括以下原料（按重量份数计）：胰蛋白胨5-7.5 份，鱼粉蛋白胨2.5-7.5份，牛肉浸膏2-8份，氯化钠2.5-7.5份，磷酸氢二钠 1-2份，磷酸二氢钾6-12份，甘露醇1-3份，丙酮酸钠5-15份，阿卡波糖0.2-1份，胆盐5号1.25-5 份，硫代硫酸钠10-30份。
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|---|---|
| CN (1) | CN106896225A (zh) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108103139A (zh) * | 2017-12-30 | 2018-06-01 | 华南农业大学 | 一种沙门菌的快速检测方法 |
| CN113999888A (zh) * | 2021-12-16 | 2022-02-01 | 上海市农业科学院 | 一种食源性致病菌洗脱方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102864204A (zh) * | 2012-09-07 | 2013-01-09 | 四川大学 | 一种用于禽蛋中沙门氏菌检测的增菌培养液 |
| CN104894040A (zh) * | 2015-06-30 | 2015-09-09 | 刘少伟 | 食品中沙门氏菌一步法选择性增菌培养基及其制备方法 |
| CN106370860A (zh) * | 2016-08-24 | 2017-02-01 | 天津中新科炬生物制药有限公司 | 血清免疫球蛋白e胶体金层析定量检测试剂盒及试纸条 |
| CN106568951A (zh) * | 2016-10-26 | 2017-04-19 | 北京农业质量标准与检测技术研究中心 | 基于核酸适配体的大肠杆菌o157：h7胶体金试纸条及检测方法 |
-
2017
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Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102864204A (zh) * | 2012-09-07 | 2013-01-09 | 四川大学 | 一种用于禽蛋中沙门氏菌检测的增菌培养液 |
| CN104894040A (zh) * | 2015-06-30 | 2015-09-09 | 刘少伟 | 食品中沙门氏菌一步法选择性增菌培养基及其制备方法 |
| CN106370860A (zh) * | 2016-08-24 | 2017-02-01 | 天津中新科炬生物制药有限公司 | 血清免疫球蛋白e胶体金层析定量检测试剂盒及试纸条 |
| CN106568951A (zh) * | 2016-10-26 | 2017-04-19 | 北京农业质量标准与检测技术研究中心 | 基于核酸适配体的大肠杆菌o157：h7胶体金试纸条及检测方法 |
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| 夏诗琪 等: "胶体金免疫层析法联检食品中5 种典型沙门氏菌模型的建立和优化", 《食品科学》 * |
| 夏诗琪 等: "胶体金免疫层析法联检食品中5种典型沙门氏菌模型的建立和优化", 《食品科学》 * |
| 曹春梅 等: "斑点免疫金渗滤法快速检测沙门氏菌O9抗原的研究", 《中国人兽共患病杂志》 * |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN108103139A (zh) * | 2017-12-30 | 2018-06-01 | 华南农业大学 | 一种沙门菌的快速检测方法 |
| CN113999888A (zh) * | 2021-12-16 | 2022-02-01 | 上海市农业科学院 | 一种食源性致病菌洗脱方法 |
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