CN106860497B - 竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用及组合物 - Google Patents

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Abstract

竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用及组合物，属于药物技术领域。竹节参提取物中的竹节参多糖、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V均对抑郁症具有较好的治疗效果，能够应用于制备治疗抑郁症的药物。本发明还提供了一种具有上述竹节参提取物的组合物，该组合物能够用于预防和治疗抑郁症。

Description

竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用及组合物
技术领域
本发明涉及药物技术领域，且特别涉及一种竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用及组合物。
背景技术
抑郁症(Depression，DEP)是一种严重影响身心健康的情感障碍性精神疾病，患者表现为持续的情绪低落和认知障碍。随着现代生活节奏的加快和社会竞争的日益激烈，抑郁症已成为现代社会的常见病、高发病，其发病率正在迅速攀升，研究抑郁症的发病机理、预防途径和治疗方法具有重大的医学意义和现实需求。
传统观点认为，抑郁症发病机理与脑内单胺类神经递质异常有关，其中单胺类神经递质包括5-羟色胺、乙酞胆碱和儿茶酚胺类(包括多巴胺，去甲肾上腺素和肾上腺素)物质。临床上常用抗抑郁症药物主要包括单胺重摄取抑制剂型；单胺氧化酶抑制剂；受体拈抗剂及植物药。现代病理学研究表明：抑郁症发病机制甚为复杂，诱发原因较多，合成抗抑郁药大多存在抗抑郁谱窄、副作用大、药价高和易复发等缺陷。因此，国内外在抗抑郁药的研制与开发方面越来越注重传统植物用药。近年来国内外对单一药用植物的提取物的抗抑郁活性研究报道较多，已发现的抗抑郁活性植物成分主要有苯并二蒽酮类、黄酮及低聚糖类、生物碱类、间苯三酚类、倍半萜类、二萜类、三萜类、皂苷、有机酸等类型化合物。
竹节参为五加科植物竹节参(Panax japonicus C.A.Mey.)的干燥根茎，其具有滋补强身、活血化瘀、散瘀止痛、止血祛痰的功效，在土家族苗族聚居区被誉为“草药之王”，属珍稀濒危的名贵“七类”中草药。研究表明，竹节参提取物具有抗炎、抗肿瘤、降血脂的功效，对多种疾病具有有效的治疗效果，如竹节参提取物能够用于预防和治疗慢性阻塞性肺疾病、护肝、降血脂、治疗肠粘膜损伤、制备抗血栓药物、制备抗尿酸性关节炎药物、制备抗骨质疏松药物等等，但是目前尚无竹节参提取物在制备治疗抑郁症的药物方面的应用。
发明内容
本发明的目的在于提供一种竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用。
本发明的另一目的在于提供一种包括上述竹节参提取物的组合物，该组合物对于抑制和治疗抑郁症具有较好的效果。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
一种竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，竹节参提取物包含竹节参多糖提取物或竹节参总皂苷提取物中的至少一种。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参提取物包括质量比为1：2.5～4的竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参提取物包括质量比为1：3～3.5的竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参提取物为竹节参多糖提取物，其单位体重用量为每天15～250mg/kg。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参提取物为竹节参总皂苷提取物，其单位体重用量为每天20～350mg/kg。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参总皂苷提取物中竹节参皂苷V的含量为50％以上。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参多糖提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量6～8倍的水，浸泡1～3小时后煎煮1～2.5小时，过滤；对过滤后的滤渣进行2～3次二次提取，并过滤，合并所有过滤后的滤液，减压浓缩得到浓缩液；对浓缩液进行2～3次醇提，合并所有醇提得到的沉淀物，冷冻干燥。
进一步地，在本发明较佳实施例中，竹节参总皂苷提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量12～15倍的乙醇，浸泡2～4小时后水浴并回流提取2～4小时，过滤；对过滤后的残渣进行2～4次再提取，并过滤，合并所有过滤后的提取液，减圧回收乙醇后配制成固体：液体为1g：2～3mL的溶液，使用HP-400大孔树脂柱依次用水、质量浓度60％的乙醇洗脱溶液得到乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液冷冻干燥。
进一步地，在本发明较佳实施例中，回流提取过程中进行超声波处理，超声波处理的频率为23～25KHz，功率为600～900KW，每间隔45～75秒后超声波处理15～30秒。
本发明还提供了一种组合物，其包括上述的竹节参提取物及医用辅料。
本发明的有益效果是：本发明提供了竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，表明竹节参提取物中的竹节参多糖、竹节参总皂苷和竹节参皂苷V对于抑郁症具有显著的疗效，其具有开发和制备抗抑郁药物的前景，竹节参提取物还具有对人体副作用小，使用安全的优点。本发明还提供了一种包含上述竹节参提取物的组合物，该组合物能够用于抑制和治疗抑郁症。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
下面对本发明实施例提供的竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用及组合物进行具体说明。
本发明实施例提供了一种竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，即竹节参提取物在制备治疗内源性抑郁症、反应性抑郁症、隐匿性抑郁症、继发性抑郁症、产后抑郁症等抑郁症药物中的应用。该竹节参提取物中含有竹节参多糖提取物、竹节参总皂苷提取物或竹节参皂苷V中的至少一种；且当竹节参提取物为竹节参多糖提取物时，其单位体重用量为每天15～250mg/kg；当竹节参提取物为竹节参总皂苷提取物时，其单位体重用量为每天25～350mg/kg；当竹节参提取物为竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物的混合物时，竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物的质量比为1：2.5～4；且当竹节参多糖提取物和竹节参总皂苷提取物的质量比为1：3～3.5时，竹节参提取物对于抑郁症具有最佳的治疗效果；竹节参多糖提取物的优选单位体重用量为每天15～75mg/kg，竹节参总皂苷提取物的优选单位体重用量为每天25～135mg/kg；此外，竹节参总皂苷提取物中竹节参皂苷V的含量优选为50％以上；竹节参皂苷V的纯度为90％以上。
其中，竹节参多糖提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量6～8倍的水，浸泡1～3小时后煎煮1～2.5小时，过滤；对过滤后的滤渣进行2～3次二次提取并过滤；二次提取的方法是：向滤渣中加入其质量4～6倍的水并煎煮1.5～2小时后过滤；合并所有过滤后的滤液，减压浓缩得到浓缩液，对浓缩液进行2～3次醇提；醇提是向浓缩液中加入乙醇至乙醇质量浓度为60～65％，并放置12小时以上后过滤获取沉淀物；合并所有醇提得到的沉淀物，冷冻干燥得到竹节参多糖提取物。
竹节参总皂苷提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量12～15倍的乙醇，浸泡2～4小时后水浴并回流提取2～4小时，过滤；对过滤后的残渣进行2～4次再提取并过滤，再提取是向残渣中加入其质量6～8倍的乙醇并回流提取2～3次，每次提取1～1.5小时得到提取液：在回流提取的过程中，使用超声波处理残渣，超声波处理的频率为23～25KHz，功率为600～900KW，每间隔45～75秒后超声波处理15～30秒；合并所有过滤后的提取液，减圧回收乙醇后配制成固体：液体为1g：2～3mL的溶液，使用HP-400大孔树脂柱依次用水、质量浓度60％的乙醇洗脱溶液得到乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液冷冻干燥得到竹节参总皂苷提取物。
本发明还提供了一种组合物，其包括上述竹节参提取物及医用辅料，该组合物可以制备成为片剂、颗粒剂、胶囊剂、膏剂等常用药品使用。
以下结合实施例中的实验方法和结果对本发明作进一步的详细描述。
1.实验材料。
1.1竹节参多糖提取物的提取、纯化和制备。
将竹节参磨成100μm以下的粉末，向竹节参粉末中加入其质量8倍的水，浸泡3小时后煎煮2.5小时，过滤得到滤液和滤渣，对滤渣进行3次二次提取得到滤液，二次提取的方法是：向滤渣中加入其质量6倍的水并煎煮2小时后过滤；合并滤液后減压浓缩得到浓缩液，对浓缩液进行3次醇提得到沉淀物，醇提是向浓缩液中加入乙醇至乙醇浓度为65％，并放置18小时后过滤获取沉淀物，合并沉淀物后冷冻干燥得到竹节参多糖。
1.2竹节参总皂苷提取物的提取、纯化和制备。
将竹节参磨成200μm以下的粉末，向竹节参粉末中加入其质量15倍的乙醇，浸泡3小时后水浴回流提取3小时，过滤得到提取液和残渣，对残渣进行4次再提取得到提取液，再提取是向残渣中加入其质量6倍的乙醇回流提取2次得到提取液，每次提取1.5小时，在回流提取的过程中，使用超声波处理残渣，超声波处理的频率为24KHz，功率为800KW，每间隔50秒后超声波处理25秒；合并提取液，減圧回收乙醇后配制成固体：液体为1g：3mL的溶液，使用HP-400大孔树脂柱依次用水、60％的乙醇洗脱溶液得到乙醇洗脱液，将乙醇洗脱液干燥得到竹节参总皂苷。
1.3竹节参皂苷V的提取、纯化和制备。
取上述竹节参总皂苷使HP-20树脂柱纯化，收集55～85％的乙醇洗脱液，減压回收乙醇冷冻干燥，得到竹节参皂苷V，其纯度为97％。
2.竹节参多糖、竹节参总皂苷与竹节参皂苷V抑制与治疗抑郁症的实验研究。
2.1实验方法及实验内容。
2.1.1实验试剂：竹节参多糖(DT)、竹节参总皂苷(ZG)、竹节参皂苷V(ZV)为自制，氟西汀为上海西部药业有限公司产品。
2.1.2实验仪器：TE-CAr全波长多功能酶标仪(型号SAFIRE2)；LXJ-II离心机(上海医用分析仪器厂)；Satrious电子天平(德国)；恒温水浴锅(上海亚荣生化仪器厂)；低温高速离心机(天美Z323K)；RSFJ800心肺功能测定仪(成都日升科技有限公司)；移液枪(大龙)。
2.1.3实验动物：SPF级雄性昆明小鼠72只，体重20±2g，由华中科技大学提供。
2.2实验样品溶液的配制。
2.2.1CMC-Na溶液的配制：精密称取4gCMC-Na溶解于1000mL蒸馏水，配制成浓度为0.4％的CMC-Na溶液。
2.2.2阳性对照液制备：称取氟西汀适量，置于研钵中碾成细粉，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成2.0mg/mL的氟西汀悬液，为阳性对照药液。
2.2.3DT药液的配制：精密称取DT适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成2.0mg/mL的DT混悬液。
2.2.4ZG药液的配制：精密称取ZG适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成2.0mg/mL的ZG混悬液。
2.2.5ZV药液的配制：精密称取ZV适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成1.0mg/mL的ZV混悬液。
2.2.6DT+ZG(1)药液的配制：精密称取ZG与DT适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成含DT为1.0mg/mL与含ZG为1.0mg/mL的混悬液(即DT：ZG＝1：1)。
2.2.7DT+ZG(2)药液的配制：精密称取ZG与DT适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成含DT为0.5mg/mL与含ZG为1.5mg/mL的混悬液(即DT：ZG＝1：3)。
2.2.8DT+ZG(3)药液的配制：精密称取ZG与DT适量，溶解于适量CMC-Na溶液中，配制成含DT为0.4mg/mL与含ZG为1.6mg/mL的混悬液(即DT：ZG＝1：4)。
2.3动物实验。
2.3.1动物自主兴奋性实验。
动物分组：将动物称重，编号，选择健康小鼠72只，按体重大小排序，用随机分组法分成9组，正常组、模型组、阳性组、DT组、ZG组、ZV组、DT+ZG(1)组、DT+ZG(2)组与DT+ZG(3)组，各组动物均自由饮食，适应性饲养一周后用于实验。
实验方法：采用底面为正方形的敞箱，长100cm，宽100cm，高50cm，底面用黑线分为100个面积相近的扇形。实验时将大鼠放在敞箱正中心，以大鼠5min内水平运动越格数(至少3爪跨过边界)评价其运动性；以垂直运动直立次数(两前爪离开地面)评价其探究性，通过比较各给药组给药前后自主运动变化情况来考察各给药组是否有自主兴奋作用，同时以给予生理盐水的空白组和给予阳性对照药盐酸氟西汀的阳性对照组来进行随行对照。实验过程中给药前通过观察大鼠在敞箱内的活动，记录5min内水平运动越格数以及垂直运动直立的次数；在给药7天后，观察大鼠在敞箱内的活动，记录5min内水平运动越格数以及垂直运动直立的次数。
数据处理：各组实验数据用均数±标准差(X±SD)表示，并用spss13.0进行统计学处理，显著性检验采用方差分析。
水平运动变化率＝(给药7天后水平运动越格数-给药前水平运动越格数)/给药前水平运动越格数×100％。
垂直运动变化率＝(给药7天后垂直运动越格数-给药前垂直运动越格数)/给药前垂直运动越格数×100％。
表1给药前与给药7天后各给药组大鼠开场实验自主运动变化情况
Figure BDA0001266665780000091
结果：运用SPSS软件，进行t检验，分别比较以上各组给药前后自主运动情况，与空白组和阳性对照药氟西汀组一样，其他给药组大鼠水平运动和垂直运动在给药前后均无显著性差异(P＞0.05)，表明在给上述药物后对中枢神经系统无自主兴奋作用。
2.3.2强迫游泳实验。
筛选出不动时间在60～160s之间的小鼠64只，分为8个组，即模型对照组、阳性对照(氟西汀20mg/kg)组、竹节参不同成分给药剂量组，每组各为8只.每天上午8时灌胃给药，连续给药7d，第7d给药后60min进行强迫游泳实验.小鼠游泳2min后立即开始观察，观察时间持续4min，记录此4min内小鼠在水中停止挣扎或者呈漂浮状态，仅微小肢体运动以保持头部浮在水面的持续时间(即不动时间)。
2.3.3悬尾实验。
筛选出不动时间在20～120s之间的小鼠64只，分组及给药方法同上.第7d给药后60min进行悬尾实验.将小鼠尾部在距尾尖2cm处黏在一根水平木棍上，使小鼠成倒挂状态，头部距离桌面5cm，悬挂处两侧及后部用挡板隔开小鼠视线，观察6min，记录后5min内小鼠的累积不动时间。
表2竹节参对小鼠强迫游泳实验不动时间的影响(x±s)
组别 例数/只 剂量g/kg 不动时间/s
模型组 8 --- 143±19
阳性组 8 0.02 126±13**
DT组 8 0.02 120±11**
ZG组 8 0.02 119±12*
ZV组 8 0.01 125±17*
DT+ZG组(1) 8 0.02 125±13**
DT+ZG组(2) 8 0.02 122±14*
DT+ZG组(3) 8 0.02 121±11*
结果：上述竹节参不同给药组对小鼠强迫游泳实验不动时间的影响与模型对照组比较，竹节参给药组及阳性对照组不动时间明显缩短(P<0.05，P<0.01)。
表3竹节参对小鼠悬尾实验不动时间的影响(x±s)
组别 例数/只 剂量/mg/kg 不动时间/s
模型组 8 --- 116±26
阳性组 8 0.02 91±26**
DT组 8 0.02 90±15**
ZG组 8 0.02 94±10**
ZV组 8 0.01 89±11*
DT+ZG组(1) 8 0.02 87±16**
DT+ZG组(2) 8 0.02 86±16**
DT+ZG组(3) 8 0.02 84±15*
注：与模型对照组比较，*P<0.05，**P<0.01。
结果：上述竹节参不同给药组对小鼠悬尾实验不动时间的影响与模型对照组相比较，竹节参各给药组及阳性对照组不动时间明显缩短(P<0.05，P<0.01)。
综上所述，竹节参总多糖、竹节参总皂苷、竹节参皂苷V以及竹节参多糖和竹节参总皂苷的混合物均对行为绝望模型有抗抑郁作用，表明竹节参提取物具有抗抑郁的作用，能够用于制备抗抑郁的药物。
本发明提供的以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

Claims (6)

1.一种竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，其特征在于，所述竹节参提取物包含竹节参多糖提取物或竹节参总皂苷提取物中的至少一种；所述竹节参提取物包括质量比为1：2.5～4的所述竹节参多糖提取物和所述竹节参总皂苷提取物；所述竹节参提取物为所述竹节参多糖提取物，其单位体重用量为每天15～250mg/kg；所述竹节参提取物为所述竹节参总皂苷提取物，其单位体重用量为每天20～350mg/kg。
2.根据权利要求1所述的竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，其特征在于，所述竹节参提取物包括质量比为1：3～3.5的所述竹节参多糖提取物和所述竹节参总皂苷提取物。
3.根据权利要求1所述的竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，其特征在于：所述竹节参总皂苷提取物中竹节参皂苷V的含量为50％以上。
4.根据权利要求1所述的竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，其特征在于，所述竹节参多糖提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量6～8倍的水，浸泡1～3小时后煎煮1～2.5小时，过滤；对过滤后的滤渣再进行2～3次提取，并过滤，合并所有过滤后的滤液，减压浓缩得到浓缩液；对所述浓缩液进行2～3次醇提，合并所有醇提得到的沉淀物，冷冻干燥。
5.根据权利要求1所述的竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，其特征在于，所述竹节参总皂苷提取物是按照以下制备方法制得：向竹节参粉末中加入其质量12～15倍的乙醇，浸泡2～4小时后水浴并回流提取2～4小时，过滤；对过滤后的残渣进行2～4次再提取，并过滤，合并所有过滤后的提取液，减圧回收乙醇后配制成固体：液体为1g：2～3mL的溶液，使用HP-400大孔树脂柱依次用水、质量浓度60％的乙醇洗脱所述溶液得到乙醇洗脱液，将所述乙醇洗脱液冷冻干燥。
6.根据权利要求5所述的竹节参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，其特征在于，所述回流提取过程中进行超声波处理，所述超声波处理的频率为23～25KHz，功率为600～900KW，每间隔45～75秒后超声波处理15～30秒。
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