CN106818474A - 利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法 - Google Patents

利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106818474A
CN106818474A CN201710038517.3A CN201710038517A CN106818474A CN 106818474 A CN106818474 A CN 106818474A CN 201710038517 A CN201710038517 A CN 201710038517A CN 106818474 A CN106818474 A CN 106818474A
Authority
CN
China
Prior art keywords
culture
tea tree
tissue culture
rataria
culture medium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201710038517.3A
Other languages
English (en)
Inventor
叶乃兴
林庆良
王鹏杰
陈丹
林浥
何冰媛
屈艳勤
郑德勇
杨江帆
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fujian Agriculture and Forestry University
Original Assignee
Fujian Agriculture and Forestry University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fujian Agriculture and Forestry University filed Critical Fujian Agriculture and Forestry University
Priority to CN201710038517.3A priority Critical patent/CN106818474A/zh
Publication of CN106818474A publication Critical patent/CN106818474A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/001—Culture apparatus for tissue culture
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H4/00—Plant reproduction by tissue culture techniques ; Tissue culture techniques therefor
    • A01H4/008—Methods for regeneration to complete plants

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)

Abstract

本发明涉及一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法，包括培养容器消毒、培养基配制、无菌水制备、诱导培养、分化培养、生根培养和瓶苗移栽。本发明的茶树幼胚抑菌组培过程中，培养容器和培养基都无需高温高压灭菌，减少了工作量和能源消耗，简化了茶树幼胚组培技术环节，降低了茶树幼胚组培成本；而且操作简单，只需按不同的培养基配方配制后即可使用，实用性强，推广性好。本发明的茶树幼胚抑菌组培方法与常规的茶树幼胚组培方法相比，可以降低成本10％以上。

Description

利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法
技术领域
本发明涉及一种植物组织培养方法，具体涉及一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法，属生物技术领域。
背景技术
茶树(Camellia sinensis(L.)O.Kuntze)为山茶科山茶属多年生常绿乔木或灌木，具有悠久的栽培历史，是我国重要的经济作物之一。常规茶树育种技术具有局限性，如远缘杂交困难，有益突变频率低、选育优良品种耗时长、花期不遇等，制约了茶树优质资源的利用，使得茶树品种选育工作难以取得突破性的进展
虽然传统育种方法已培育出了高产优质的茶树品种，但生产上仍缺少高茶氨酸、高茶多酚和低咖啡碱等符合人们消费需求的特异品种。这主要是因为茶树基因的高度杂合性，传统的茶树育种年限长、难度较大。植物离体再生技术的日益成熟和基因工程技术的不断发展，为茶树品种创新开辟了新的途径。基因工程技术的应用需要建立高频率的遗传转化体系，而高频率的遗传转化体系又依赖于高频率的再生体系，所以茶树未成熟胚组织培养再生体系是为遗传转化、品种改良打下基础。
茶树幼胚组织培养的成本主要包括组培苗生产所需的培养基、设施设备、供电成本、耗材和人工成本。常规的茶树幼胚组织培养方法，要求外植体接种在高温高压灭菌后的无菌培养基中才能正常生长，耗能大，人工操作成本高。如果能通过药物抑菌的方法来改造培养基，使培养基无需经过高温高压灭菌，就能够获得茶树的正常生长。然而，针对不同的植物品种难以筛选到一种合适的抗菌剂，往往是当培养基抗菌时，植物组织的生长就受到抑制；而植物组织正常生长，就无法获得满意的抗菌效果。其原因，一是还没有一种抗生素对所有的菌类都有效，而且抗生素药效期短；二是有些抗菌素、防腐剂在有效的浓度下，其杀菌、抗菌离子对植物组织直接产生伤害，有些则产生盐害。必须选择与植物组织亲和、药效期长(至少一个生长周期)，不产生盐害并具有杀菌、抗菌活性的物质作为抗菌剂。因此，筛选合适的抗菌药剂是抑菌组培技术得以应用的关键。
本发明就是为茶树幼胚组织培养提供一种抑菌的培养方法。一方面可以降低茶树幼胚组织培养对设施设备的要求，尤其不需要高温高压灭菌所需配置的高压锅设备，缩减了投资成本，电能消耗大幅度降低；另一方面，采用这种培养基开展茶树幼胚组织培养，组培环节大为简化，人工操作的速度大幅提高，从而降低了人工成本。此外，由于改造后的培养基自身具有杀菌、抗菌或抑菌作用，能有效控制组织培养过程中的污染问题，又不会对茶树生长产生毒害或抑制，即不影响茶树的正常生长，从根本上简化了茶树幼胚组织培养。
发明内容
本发明的目的是提供一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法。
本发明的目的是通过以下方法实现的。
本发明的一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法，包括培养容器消毒、培养基配制、无菌水制备、诱导培养、分化培养、生根培养和瓶苗移栽，其特征在于：
1.培养容器消毒：将培养瓶、瓶盖及接种用的塑料盘在100mg/L次氯酸钠+10mg/L环丝氨酸+0.5mg/L十二烷基磺酸钠的水溶液中浸泡不少于10h，保存备用；
2.培养基配制：诱导培养基为：MS+0.1～2mg/L 2,4-D+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+0.1～0.5mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；分化培养基为：MS+1～3mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L IBA+0.5～2mg/L GA3+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+0.1～0.5mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；生根培养基为：1/2MS+1～3mg/L IBA+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+0.1～0.5mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；所述MS，为1962年，Murashige和Skoog公开的MS培养基；所述6-BA，指6-苄氨基嘌呤；所述GA3，指赤霉素；所述IBA，指α-吲哚丁酸；所述2,4-D，指2,4-二氯苯氧乙酸；配制培养基时，先称各培养基配方中的蔗糖和琼脂粉，加培养基总重量1/2的自来水，加热至琼脂粉完全溶解，再按各培养基配方配齐其他原料后，定容，然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8，分装到消毒过的培养容器中，封口，冷却凝固，备用；
3.无菌水的制备：采用次氯酸钠、环丝氨酸、十二烷基磺酸钠和水配制无菌水，终浓度为100mg/L次氯酸钠、10mg/L环丝氨酸、0.5mg/L十二烷基磺酸钠，现配现用；
4.诱导培养：采取未成熟的果实，用洗衣粉浸泡冲洗15min后，去除果壳，用体积比为75％酒精消毒30s，再用重量体积比为0.1％升汞浸泡消毒12min，无菌水反复冲洗不少于3次；消毒后的种子在无菌条件下剥开种壳，取出幼嫩的子叶型胚，接种于诱导培养基上，培养30d后长出各种类型的胚状体或愈伤组织；培养室温度为26℃，暗培养；
5.分化培养：将诱导出的出各种类型的胚状体或愈伤组织转入分化培养基中，30d后逐步分化出芽；多次继代培养可以获得更多的芽苗；培养室温度为26℃，光照12h，光照强度为1400Lx；
6.生根培养：取高度为3～5cm芽苗，接种到生根培养基上，培养25d后成为完整植株；培养室温度为25℃，光照12h，光照强度为1500Lx；
7.瓶苗移栽：将生根培养获得的完整植株取出，洗净根部的培养基，用800倍的多菌灵浸泡30min后，移栽至透水性好的微酸性土壤中，大棚上层用遮光网遮盖，移栽的环境温度为22～28℃。
本发明的应用效果：本发明的抑菌组培方法，利用化学试剂添加到各种培养基中，达到灭菌或抑菌的作用，配制的培养基是无需高温高压灭菌。因此，在茶树幼胚诱导培养、分化培养、生根培养各个阶段，除了要考虑常用的评价指标外，还要考虑污染率的问题。
1.诱导培养：通过实验证实，本发明的一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法与常规的茶树幼胚组培方法相比，结果如表1所示，在诱导培养阶段的外植体培养的成活率差异不显著。
表1本发明的抑菌组培方法对茶树幼胚诱导培养的影响
组培方式 外植体数 外植体污染数 成活率(％)
常规组培方法 30 0 100
抑菌组培方法 30 0 100
2.分化培养：本发明的抑菌组培方法与常规组培茶树幼胚的分化率和污染率的比较，结果如表2所示，分化率和污染率二个指标都差异不显著。从瓶苗的生长状况看，本发明的抑菌组培方法的培养基，由于不经过高温高压灭菌，激素和营养元素损失较少，其茶树幼胚组培苗更壮，叶色更绿。
表2本发明的抑菌组培方法对茶树体胚分化率和污染率的影响
3本发明的抑菌组培方法对茶树幼胚生根率和污染率的影响：在组培苗生根过程中，本发明的抑菌组培方法与常规的茶树幼胚组培方法相比，结果如表3所示，生根率和污染率的差异不显著。
表3本发明的抑菌组培方法的茶树幼胚瓶苗生根情况
组培方式 平均生根率(％) 平均污染率(％)
常规组培方法 87 0.8
抑菌组培方法 86 0.5
4.成本分析：本发明的抑菌组培方法与常规组培的成本分析见表4。本发明抑菌组培省去了高压灭菌环节，简化了组培程序，提高了工作效率。从直接费用计算，每年可以节约5.5万元左右(以每天配制50L培养基计算)。常规组培需要添置高压锅等设备及日常维护，此外，常规组培还存在实验室安全等问题。
表4本发明的茶树幼胚简便组培方法与常规组培的成本分析表
本发明具有如下有益效果：
1.本发明的茶树幼胚抑菌组培方法中，培养容器和培养基都无需高温高压灭菌，减少了工作量和能源消耗，简化了茶树幼胚组培技术环节，降低了茶树幼胚组培成本。
2.本发明的茶树幼胚抑菌组培方法，操作简单，只需按不同的培养基配方配制后即可，实用性强，推广性好。
3.本发明的茶树幼胚抑菌组培方法与常规的茶树幼胚组培方法对比，可以降低成本10％以上。
具体实施方式
为了进一步阐明本发明而不是限制本发明，以下结合实施例加以说明。
实施例一：一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法
一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法，包括以下步骤：
1.培养容器消毒：将培养瓶、瓶盖及接种用的塑料盘在100mg/L次氯酸钠+10mg/L环丝氨酸+0.5mg/L十二烷基磺酸钠的水溶液中浸泡不少于10h，保存备用；
2.培养基配制：诱导培养基为：MS+0.5mg/L 2,4-D+60mg/L次氯酸钠+3mg/L环丝氨酸+0.3mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；分化培养基为：MS+2mg/L6-BA+0.3mg/L IBA+1mg/L GA3+60mg/L次氯酸钠+3mg/L环丝氨酸+0.3mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；生根培养基为：1/2MS+2mg/L IBA+60mg/L次氯酸钠+3mg/L环丝氨酸+0.3mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；配制培养基时，先称各培养基配方中的蔗糖和琼脂粉，加培养基总重量1/2的自来水，加热至琼脂粉完全溶解，再按各培养基配方配齐其他原料后，定容，然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8，分装到消毒过的培养容器中，封口，冷却凝固后备用；
3.无菌水的制备：采用次氯酸钠、环丝氨酸、十二烷基磺酸钠和水配制无菌水，终浓度为100mg/L次氯酸钠、10mg/L环丝氨酸、0.5mg/L十二烷基磺酸钠，现配现用；
4.诱导培养：采取未成熟的果实，用洗衣粉浸泡冲洗15min后，去除果壳，用体积比为75％酒精消毒30s，再用重量体积比为0.1％升汞浸泡消毒12min，无菌水反复冲洗3次。消毒后的种子在无菌条件下剥开种壳，取出幼嫩的子叶型胚，接种于诱导培养基上，培养30d后长出各种类型的胚状体或愈伤组织；培养室温度为26℃，暗培养；
5.分化培养：将诱导出的出各种类型的胚状体或愈伤组织转入分化培养基中，30d后逐步分化出芽。多次继代培养后可以获得更多的芽苗；培养室温度为26℃，光照12h，光照强度为1400Lx；
6.生根培养：取高度为3～5cm芽苗，接种到生根培养基上，培养25d后成为完整植株；培养室温度为25℃，光照12h，光照强度为1500Lx；
7.瓶苗移栽：将生根培养获得的完整植株取出，洗净根部的培养基，用800倍的多菌灵浸泡30min后，移栽至透水性好的微酸性土壤中，大棚上层用遮光网遮盖，移栽的环境温度为22～28℃。

Claims (4)

1.一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法，包括培养容器消毒、培养基配制、无菌水制备、诱导培养、分化培养、生根培养和瓶苗移栽，其特征在于：
(1)培养容器消毒：将培养瓶、瓶盖及接种用的塑料盘在100mg/L次氯酸钠+10mg/L环丝氨酸+0.5mg/L十二烷基磺酸钠的水溶液中浸泡不少于10h，保存备用；
(2)培养基配制：诱导培养基为：MS+0.1～2mg/L 2,4-D+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+0.1～0.5mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；分化培养基为：MS+1～3mg/L 6-BA+0.1～0.5mg/L IBA+0.5～2mg/L GA3+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+0.1～0.5mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；生根培养基为：1/2MS+1～3mg/L IBA+40～100mg/L次氯酸钠+1～5mg/L环丝氨酸+0.1～0.5mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8；所述MS，为1962年，Murashige和Skoog公开的MS培养基；所述6-BA，指6-苄氨基嘌呤；所述GA3，指赤霉素；所述IBA，指α-吲哚丁酸；所述2,4-D，指2,4-二氯苯氧乙酸；配制培养基时，先称各培养基配方中的蔗糖和琼脂粉，加培养基总重量1/2的自来水，加热至琼脂粉完全溶解，再按各培养基配方配齐其他原料后，定容，然后用1mol/L的NaOH或1mol/L的HCl调pH值至5.8，分装到消毒过的培养容器中，封口，冷却凝固，备用；
(3)无菌水的制备：采用次氯酸钠、环丝氨酸、十二烷基磺酸钠和水配制无菌水，终浓度为100mg/L次氯酸钠、10mg/L环丝氨酸、0.5mg/L十二烷基磺酸钠，现配现用；
(4)诱导培养：采取未成熟的果实，用洗衣粉浸泡冲洗15min后，去除果壳，用体积比为75％酒精消毒30s，再用重量体积比为0.1％升汞浸泡消毒12min，无菌水反复冲洗不少于3次；消毒后的种子在无菌条件下剥开种壳，取出幼嫩的子叶型胚，接种于诱导培养基上，培养30d后长出各种类型的胚状体或愈伤组织；培养室温度为26℃，暗培养；
(5)分化培养：将诱导出的出各种类型的胚状体或愈伤组织转入分化培养基中，30d后逐步分化出芽；多次继代培养可以获得更多的芽苗；培养室温度为26℃，光照12h，光照强度为1400Lx；
(6)生根培养：取高度为3～5cm芽苗，接种到生根培养基上，培养25d后成为完整植株；培养室温度为25℃，光照12h，光照强度为1500Lx；
(7)瓶苗移栽：将生根培养获得的完整植株取出，洗净根部的培养基，用800倍的多菌灵浸泡30min后，移栽至透水性好的微酸性土壤中，大棚上层用遮光网遮盖，移栽的环境温度为22～28℃。
2.根据权利要求1所述的一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法，其特征在于所述诱导培养基为：MS+0.5mg/L 2,4-D+60mg/L次氯酸钠+3mg/L环丝氨酸+0.3mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8。
3.根据权利要求1所述的一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法，其特征在于所述分化培养基为：MS+2mg/L 6-BA+0.3mg/L IBA+1mg/L GA3+60mg/L次氯酸钠+3mg/L环丝氨酸+0.3mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8。
4.根据权利要求1所述的一种利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法，其特征在于所述生根培养基为：1/2MS+2mg/L IBA+60mg/L次氯酸钠+3mg/L环丝氨酸+0.3mg/L十二烷基磺酸钠+30g/L蔗糖+3.0g/L琼脂粉，pH5.8。
CN201710038517.3A 2017-01-18 2017-01-18 利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法 Pending CN106818474A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710038517.3A CN106818474A (zh) 2017-01-18 2017-01-18 利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201710038517.3A CN106818474A (zh) 2017-01-18 2017-01-18 利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN106818474A true CN106818474A (zh) 2017-06-13

Family

ID=59124422

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201710038517.3A Pending CN106818474A (zh) 2017-01-18 2017-01-18 利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106818474A (zh)

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107896987A (zh) * 2017-10-16 2018-04-13 广西壮族自治区金秀瑶族自治县科学技术情报研究所 一种广西野生石崖茶组培苗的繁育方法
CN108575476A (zh) * 2018-01-30 2018-09-28 普安县红星村跑马地茶叶种植农民专业合作社 一种降低茶叶氟含量的种植方法
CN108834900A (zh) * 2018-07-31 2018-11-20 安徽农业大学 抑制茶树组培中外植体氧化褐变和内生菌污染的培养方法
CN111034617A (zh) * 2019-12-25 2020-04-21 云南省农业科学院茶叶研究所 一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法
CN115968786A (zh) * 2023-02-16 2023-04-18 云南省农业科学院茶叶研究所 一种茶树组织培养的培养基及培养方法

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104885941A (zh) * 2015-05-26 2015-09-09 福建农林大学 一种巨芒化学消毒组培方法

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104885941A (zh) * 2015-05-26 2015-09-09 福建农林大学 一种巨芒化学消毒组培方法

Non-Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
刘德华等: "茶树组织培养的研究 I.胚状体和胚性细胞团的形成及植株再生", 《湖南农学院学报》 *
周健等: "茶树幼胚培养萌发率与再生途径影响因素研究", 《西南农业学报》 *
李莉: "《应用微生物学》", 30 September 2006, 武汉理工大学出版社 *
王玉书等: "茶树未成熟胚组培育苗技术的研究", 《茶叶科学》 *
蔡海云等: "诱导茶树成熟胚培育成幼苗的研究", 《生物学杂志》 *

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107896987A (zh) * 2017-10-16 2018-04-13 广西壮族自治区金秀瑶族自治县科学技术情报研究所 一种广西野生石崖茶组培苗的繁育方法
CN107896987B (zh) * 2017-10-16 2020-06-23 广西壮族自治区金秀瑶族自治县科学技术情报研究所 一种广西野生石崖茶组培苗的繁育方法
CN108575476A (zh) * 2018-01-30 2018-09-28 普安县红星村跑马地茶叶种植农民专业合作社 一种降低茶叶氟含量的种植方法
CN108575476B (zh) * 2018-01-30 2020-03-17 贵州筑信达创科技有限公司 一种降低茶叶氟含量的种植方法
CN108834900A (zh) * 2018-07-31 2018-11-20 安徽农业大学 抑制茶树组培中外植体氧化褐变和内生菌污染的培养方法
CN111034617A (zh) * 2019-12-25 2020-04-21 云南省农业科学院茶叶研究所 一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法
CN111034617B (zh) * 2019-12-25 2021-03-26 云南省农业科学院茶叶研究所 一种云南大叶种茶树幼胚组织培养繁育茶苗的方法
CN115968786A (zh) * 2023-02-16 2023-04-18 云南省农业科学院茶叶研究所 一种茶树组织培养的培养基及培养方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106818474A (zh) 利用抑菌培养基培育茶树幼胚的组培方法
CN102405842B (zh) 一种开放式培养甘蔗脱毒种苗的方法
CN102577976B (zh) 一种构树简便组培方法
CN102668989B (zh) 一种甘蔗液体浅层培养方法
CN105052738B (zh) 一种柽柳组织培养快速繁殖的方法
CN104885941A (zh) 一种巨芒化学消毒组培方法
CN106665357A (zh) 一种建立石蒜再生体系的方法
CN108419678A (zh) 一种砂质植物组织培养基及其制备方法与应用
CN104885943B (zh) 一种文心兰化学消毒组培方法
CN104885945B (zh) 一种香蕉化学消毒组培方法
CN106942053A (zh) 一种针对兴安天门冬的组培快繁方法
CN104094842B (zh) 长寿花抑菌组培方法
CN103947548A (zh) 一种百子莲高频再生体系建立的方法
CN107711514A (zh) 一种旱地木槿紫色花系优良单株组培快繁方法
CN104885942B (zh) 一种杜鹃花化学消毒组培方法
CN104488722A (zh) 一种南美叉柱花的组织培养快速繁殖方法
CN110301278A (zh) 一种“红阳”猕猴桃无溃疡病病原菌种苗培育技术
CN109089884A (zh) 一种栝楼种苗的快繁方法
CN104488726A (zh) 太子参试管苗的瓶外生根方法
CN109349108A (zh) 一种甜荞体细胞胚胎发生与植株再生方法
CN105494105B (zh) 一种牡丹组织培养容器苗技术
CN106818475A (zh) 一种利用抑菌培养基培育甜椒的组培方法
CN106857249A (zh) 一种利用抑菌培养基培育茶树的组培方法
CN114586684A (zh) 一种三倍体桉树新品种“京桂一号桉”的组培快繁方法
CN103250641A (zh) 甘蓝型油菜玻璃化再生苗的去玻璃化方法

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
RJ01 Rejection of invention patent application after publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20170613