CN106797887A - 锥栗组培苗瓶内生根的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种锥栗组培苗瓶内生根的方法，选取经常规组培中壮芽培养35～40d的锥栗继代芽，经过消毒修剪后先进行预生根培养，经过30～35d预生根培养后再进行生根培养，置于温度20±1℃，湿度55～70%，光照强度2000～2500lux，光照15～16h/d的环境中培养，获得带根组培苗。本发明缩短了锥栗继代芽生根周期，生根率高，根系多，质量好，生根组培苗移栽成活率高，可实现锥栗组培产业化育苗，为人工无性系林的建设提供优质种苗，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。

Description

锥栗组培苗瓶内生根的方法
技术领域
本发明属于锥栗无性繁殖技术，涉及一种锥栗组培苗瓶内生根的方法。
背景技术
锥栗（Castanea henryi (Skam) Rehd. et Wils.），壳斗科栗属，别名：锥栗、尖栗、箭栗，旋栗，棒栗等，落叶乔木，高达30米，胸径达1米。叶互生，卵状披针形，长8-17厘米，宽2-5厘米，顶端长渐尖，基圆形，叶缘锯齿具芒尖。雄花序生小枝下部叶腋，雌花序生小枝上部叶腋。壳斗球形，带刺直径2-3.5厘米；坚果单生于壳斗，卵圆形。花期5-7月，果期9-10月。广布于中国秦岭南坡以南、五岭以北各地，生于海拔100-1800米的丘陵与山地，常见于落叶或常绿的混交林中。锥栗喜光，耐旱，要求排水良好。病虫害少，生长较快。锥栗是中国重要木本粮食植物之一。果实可制成栗粉或罐头。木材可供枕木、建筑等用。
目前，锥栗常见的种植方式为播种育苗。组织培养技术是一种快速无性繁殖技术，选择锥栗优良家系或者无性系为材料，通过组织培养方法繁殖苗木，既可以满足生产上的数量要求，又可保持母本性状。然而在组培过程中，常常出现生根率低、生根不统一、根系数量少以及根系不粗壮的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一种能提高锥栗组培苗的生根率，根系数量以及根系萌发整齐度的锥栗组培苗生根诱导方法。
为了实现上述发明目的，本发明的技术方案如下：
锥栗组培苗瓶内生根的方法，选取增殖继代锥栗小苗，先进行预生根培养，然后再进行生根培养，置于适宜环境中培养，获得带根组培苗，主要操作步骤如下：
（1）取材：选取经常规组培中壮芽培养35～40d的锥栗继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1～2cm的单芽，于节下2～3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄，备用；
（2）预生根培养：将步骤（1）修剪后的单芽接种于预生根培养基中,在特定的光温环境中进行预生根培养；
（3）生根培养：待步骤（2）中的单芽经过30～35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，在特定的光温环境中进行生根培养。
以上所述的预生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+NAA 1.0～2.0mg/L+维生素C 6g/L++VC 1.0～2.0mg/L +白糖15g/L+琼脂5.0g/L。
以上所述的生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+IAA 1.0～2.0mg/L+ABT6#0.5～2.0 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L。
以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3 760mg/L + KNO3 1320mg/L +CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 226mg/L + H3BO3 0.63mg/L +MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L +CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA37.3mg/L + 肌醇 80mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
以上步骤（2）和步骤（3）所述的光温环境为：温度20±1℃，湿度55～70%，光照强度2000～2500lux，光照15～16h/d。
本发明具有的优点及有益效果如下：
1、本发明采用1/2改良ER培养基作为基本培养基，同时重点调整了与锥栗生根的相关的微量元素和有机成分，使得培养基更科学，更有针对性，更易促使锥栗继代芽生根，效果显著。
2、本发明在生根诱导前采用低浓度NAA和抗坏血酸（VC）对继代单芽进行预生根培养，然后再进行生根培养，可使组培苗发根统一，发根速度快，根系粗壮且数量较多。
3、本发明在增殖继代单芽经过30～35d时间预生根培养后转入生根培养，即可达到预生根培养效果，又避免了小苗在预生根培养阶段长出根系而使后期生根培养发根不整齐。
4、本发明的在特定的光温条件下进行预生根和生根培养，适应锥栗组培苗的生长特性，促进苗木的生长。
5、本发明缩短了锥栗继代芽生根周期，生根率高，根系多，质量好，生根组培苗移栽成活率高，可实现锥栗组培产业化育苗，为人工无性系林的建设提供优质种苗，具有较好的经济效益、社会效益和生态效益。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步说明。
实施例1：
选取经常规组培中壮芽培养35～40d的锥栗继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1～2cm的单芽，于节下2～3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中, 所述的预生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+NAA 1.0mg/L+维生素C 6g/L++VC 2.0mg/L +白糖15g/L+琼脂5.0g/L，在温度20±1℃，湿度55～60%，光照强度2000lux，光照16h/d的环境中进行预生根培养。待单芽经过30～35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，所述的生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+IAA 1.0mg/L+ABT6#0.5 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L，在温度20±1℃，湿度55～60%，光照强度2000lux，光照16h/d环境中进行生根培养。培养15-20d，90%以上的单芽长出根系。
以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3 760mg/L + KNO3 1320mg/L +CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 226mg/L + H3BO3 0.63mg/L +MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L +CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA37.3mg/L + 肌醇 80mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
实施例2：
选取经常规组培中壮芽培养35～40d的锥栗继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1～2cm的单芽，于节下2～3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中, 所述的预生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+NAA 1.5mg/L+维生素C 6g/L++VC 1.0mg/L +白糖15g/L+琼脂5.0g/L，在温度20±1℃，湿度60～65%，光照强度2000lux，光照15h/d的环境中进行预生根培养。待单芽经过30～35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，所述的生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+IAA 1.5mg/L+ABT6#1.0 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L，在温度20±1℃，湿度60～65%，光照强度2000lux，光照15h/d的环境中进行生根培养。培养15-20d，90%以上的单芽长出根系。
以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3 760mg/L + KNO3 1320mg/L +CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 226mg/L + H3BO3 0.63mg/L +MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L +CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA37.3mg/L + 肌醇 80mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
实施例3：
选取经常规组培中壮芽培养35～40d的锥栗继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1～2cm的单芽，于节下2～3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄。将修剪后的单芽接种于预生根培养基中, 所述的预生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+NAA 2.0mg/L+维生素C 6g/L++VC 1.5mg/L +白糖15g/L+琼脂5.0g/L，在温度20±1℃，湿度65～70%，光照强度2500lux，光照15h/d的环境中进行预生根培养。待单芽经过30～35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，所述的生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+IAA 2.0mg/L+ABT6#2.0 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L，在温度20±1℃，湿度65～70%，光照强度2500lux，光照15h/d的环境中进行生根培养。培养15-20d，90%以上的单芽长出根系。
以上所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3 760mg/L + KNO3 1320mg/L +CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 226mg/L + H3BO3 0.63mg/L +MnSO4..4H2O 22.3mg/L + ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L +CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA37.3mg/L + 肌醇 80mg/L + 烟酸 0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。

Claims (5)

1.一种锥栗组培苗瓶内生根的方法，其特征在于：选取增殖继代锥栗小苗，先进行预生根培养，然后再进行生根培养，置于适宜环境中培养，获得带根组培苗，主要操作步骤如下：
（1）取材：选取经常规组培中壮芽培养35～40d的锥栗继代芽，消毒瓶子外表后，在超净工作台上的无菌空间内，选取继代芽丛中生长健壮、高度1～2cm的单芽，于节下2～3mm处剪切，清除基部叶片和叶柄，备用；
（2）预生根培养：将步骤（1）修剪后的单芽接种于预生根培养基中,在特定的光温环境中进行预生根培养；
（3）生根培养：待步骤（2）中的单芽经过30～35d预生根培养后，将单芽转接入生根培养基，在特定的光温环境中进行生根培养。
2.根据权利要求1所述的锥栗组培苗瓶内生根的方法，其特征在于：所述的预生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+NAA 1.0～2.0mg/L+维生素C 6g/L++VC 1.0～2.0mg/L+白糖15g/L+琼脂5.0g/L。
3.根据权利要求1所述的锥栗组培苗瓶内生根的方法，其特征在于：所述的生根培养基其原料含量为：1/2改良ER培养基+IAA 1.0～2.0mg/L+ABT6#0.5～2.0 mg/L+蔗糖25g/L+琼脂5.0g/L。
4.根据权利要求2或3任一所述的锥栗组培苗瓶内生根的方法，其特征在于：所述的改良ER培养基的配方为：NH4NO3 760mg/L + KNO3 1320mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L +MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 226mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 22.3mg/L +ZnSO4.4H2O 8.64H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L +CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 80mg/L + 烟酸0.5mg/L + 盐酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
5.根据权利要求1所述的锥栗组培苗瓶内生根的方法，其特征在于：步骤（2）和步骤（3）所述的光温环境为：温度20±1℃，湿度55～70%，光照强度2000～2500lux，光照15～16h/d。
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