CN106770123B - 流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及本发明提供了一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置，其特征在于所述的装置由泵(1)、进样器(2)、流动注射反应管(3)、荧光检测器(4)组成，其中，所述的泵、进样器、流动注射反应管和荧光检测器依次通过管路连接。本发明还涉及一种流动注射荧光法鉴别地沟油的方法，通过油品反应前后的荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量，并以混合醛类物质为标准物质，做标准工作曲线，测定线性范围及最低灵敏度，验证地沟油中醛类物质测定方法的稳定性；通过食用油脂中脂肪醛含量的测定，实现鉴别地沟油。

Description

流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法
技术领域
本发明涉及一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法。
背景技术
地沟油一般是在日常生活中人们对各种各样废弃油、劣质油的统称。地沟油的来源主要有三种：反复煎炸过的老油、泔水中提炼出的泔水油以及下水道漂浮油污。地沟油主要是通过脱色、脱酸和脱臭三个步骤变为食用油。工业上生产地沟油的过程就是把收集到的废弃油脂先倒入沉淀池，然后在其中加入添加剂，如明矾、硫酸等进行加热，这样废弃油脂中的那些动植物油脂就会因为加热而漂浮到上面来，把上层废油(大多是褐红色的)取出，再进行脱色工序，在剩下的废油中添加木材的锯末并不断的搅拌，经过脱色后的废油过滤，废油就变成了深棕黄色，而经过上述加工环节生产出来的地沟油就具备了相当的市场价值。长期使用地沟油对人体有很大的危害，如：(1)消化不良，在炼制“地沟油”的过程中，动植物油经污染后发生酸败、氧化和分解等一系列化学变化，产生对人体有重毒性的物质，砷，就是其中的一种，人一旦使用砷量巨大的地沟油后，会引起消化不良、头痛、头晕、失眠、乏力、肝区不适等症状；(2)腹泻，地沟油的制作过程不卫生，其中含有的大量细菌、真菌等有害微生物，一旦到达人的肠道，轻者会引发人们腹泻，重者则会引起人们恶心、呕吐等一系列肠胃疾病。
由于地沟油的来源不同，所以成分也有所不同，检测地沟油也没有固定的标识物。目前在检测地沟油方法中，比较实用简便的检测方法是对地沟油电导率、外源物质、动物油脂、重金属元素和甘油三酯等进行检测。地沟油的检测方法主要有：(1)、光谱检测技术，包括：红外光谱法、拉曼光谱法、紫外分光光度法、原子吸收法、荧光光谱法、核磁共振法；(2)、色谱检测技术，包括：气相色谱法、液相色谱法、离子色谱法；(3)、免疫及分子生物学技术，包括：免疫层析试纸条法、普通聚合酶链式反应和实时荧光酶链式聚合反应法；(4)、电子鼻技术；(5)、电化学分析技术；(6)、其他检测技术，如：流动注射-化学发光联用检测胆固醇等；(7)、感官鉴别法。但是，仍需要开发能够准确而快速进行地沟油的检测方法。
发明内容
本发明提供了一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置，其特征在于所述的装置由泵(1)、进样器(2)、流动注射反应管(3)、荧光检测器(4)组成，
其中，所述的泵、进样器、流动注射反应管和荧光检测器依次通过管路连接。
本发明还涉及一种流动注射荧光法鉴别地沟油的方法，其特征在于包括下列步骤：
(1)通过泵将载流溶剂按照所需流量输送到管路中；
(2)取待测油样，用有机溶剂萃取，得到含醛类物质的有机溶剂萃取液；
(3)将有机溶剂萃取液稀释，加入萘肼溶液，混匀，再加入酸催化剂，为反应前混合液；
(4)将反应前混合液，注入进样器，测定荧光，记录反应前荧光数值；
(5)将反应前混合液置于水浴中，在升高温度下，充分反应一段时间的混合液，为反应后混合液；
(6)将反应后混合液，优选室温下静置5-20分钟后，注入进样器，测定荧光，记录反应后荧光数值；通过反应前后的荧光数值的变化，根据标准曲线，计算醛类物质的含量。
(7)以醛类物质为标准物质，通过步骤(3)-(6)，做标准工作曲线，测定线性范围及最低灵敏度，验证地沟油中醛类物质测定方法的稳定性；通过食用油脂中脂肪醛含量的测定，实现鉴别地沟油。
本发明利用萘肼与油脂中的醛类物质发生化学反应生成强的荧光化合物萘腙的原理，根据检测油脂中醛类物质的含量，实现了地沟油的鉴别。本发明涉及的流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法具有操作简便、快速、灵敏度高等特点，可广泛应用于食用油的监管和地沟油的鉴别。
附图说明
图1是本发明方法所采用的检测装置结构示意图；
图2是本发明实施例1中流动注射荧光法测定地沟油的色谱图。
其中，泵(1)、进样器(2)、流动注射反应管(3)、荧光检测器(4)。
具体实施方式
本发明的一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置，其特征在于所述的装置由泵(1)、进样器(2)、流动注射反应管(3)、荧光检测器(4)组成，其中，所述的泵、进样器、流动注射反应管和荧光检测器依次通过管路连接。
在本发明的一个实施方案中，所述泵为蠕动泵；所述的进样器为色谱通用六通阀进样器。
在本发明的一个实施方案中，所述的流动注射反应管为聚四氟乙烯管；所述的管路为聚四氟乙烯管。
本发明还涉及一种流动注射荧光法鉴别地沟油的方法，其特征在于包括下列步骤：
(1)通过泵将载流溶剂按照所需流量输送到管路中；
(2)取待测油样，用有机溶剂萃取，得到含醛类物质的有机溶剂萃取液；
(3)将有机溶剂萃取液稀释，加入萘肼溶液，混匀，再加入酸催化剂，为反应前混合液；
(4)将反应前混合液，注入进样器，测定荧光，记录反应前荧光数值；
(5)将反应前混合液置于水浴中，在升高温度下，充分反应一段时间的混合液，为反应后混合液；
(6)将反应后混合液，优选室温下静置5-20分钟后，注入进样器，测定荧光，记录反应后荧光数值；通过反应前后的荧光数值的变化，根据标准曲线，计算醛类物质的含量。
(7)以醛类物质为标准物质，通过步骤(3)-(6)，做标准工作曲线，测定线性范围及最低灵敏度，验证地沟油中醛类物质测定方法的稳定性；通过食用油脂中脂肪醛含量的测定，实现鉴别地沟油。
在本发明的一个实施方案中，步骤(1)中所述的载流溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、四氢呋喃；所述的载流溶剂的流量为0.5-2mL/min。
在本发明的一个实施方案中，步骤(2)中所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、或四氢呋喃；所述的取待测油样与有机溶剂按照体积比1：1萃取。
在本发明的一个实施方案中，步骤(3)中所述的有机溶剂萃取液稀释的倍数为10-200倍，优选80-150倍；所述的萘肼的浓度为10-3-10-5mol/L，优选10-3-2×10-4mol/L；所述的酸催化剂为盐酸、硫酸、醋酸、三氟乙酸、三氯乙酸、硝酸、甲酸或对甲基苯磺酸，所用酸催化剂的浓度与萘肼浓度的比为(0.01-1):1,优选(0.05-1):1，更优选(0.1-1):1。
在本发明的一个实施方案中，步骤(4)中所述的注入进样器的体积为5-100μL。
在本发明的一个实施方案中，步骤(5)中所述的水浴温度为40-80℃，反应时间为5-30分钟。
在本发明的一个实施方案中，测定荧光中，激发波长350nm，发射波长400nm。
在本发明的一个实施方案中，步骤(7)中所述的醛类物质为等摩尔量甲醛、乙醛、正丙醛、正丁醛、正戊醛、正己醛、正庚醛、正辛醛和正壬醛配成的混合醛；所述的标准工作曲线为y＝28x+42，相关系数r2＝0.997，其中y为待测物质的峰高，x为待测物质的浓度；线性范围为0.0005-0.04mol/L，最低灵敏度为0.0003mol/L；所述的地沟油中鉴别方法，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于该数值为地沟油。
在本发明中，除非另外说明，否则所有份数或百分数均为重量份或重量百分数。
在本发明中，所用物质均为已知物质，可以购得或通过已知的方法合成。
在本发明中，所用装置或设备均为所述领域已知的常规装置或设备，均可购得。
下文将结合实施例具体说明本发明，但本发明并不限于以下实施例。
实施例
实施例1
一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法，具体实施步骤如下：
(1)通过泵将载流溶剂乙腈按照1mL/min输送到管路中。
(2)取待测油样5mL，加入5mL乙腈，油样中的极性醛类物质将通过萃取进入乙腈溶剂中。
(3)将乙腈溶剂萃取液稀释100倍，与萘肼混匀，萘肼溶度2×10-4mol/L，再加入盐酸催化剂，浓度为2×10-4mol/L，此溶液为反应前混合液。
(4)将反应前混合液，注入进样器20μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应前荧光数值。
(5)将反应前混合液置于水浴中，在60℃下，反应10分钟，该混合液为反应后混合液。
(6)将反应后混合液室温静置10分钟，注入进样器20μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应后荧光数值，通过反应前后，荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量。
(7)通过油脂中脂肪醛含量的测定，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于0.018mol/L为地沟油，实现鉴别地沟油。
实施例2
一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法，具体实施步骤如下：
(1)通过泵将载流溶剂甲醇按照0.5mL/min输送到管路中。
(2)取待测油样5mL，加入5mL甲醇，油样中的极性醛类物质将通过萃取进入甲醇溶剂中。
(3)将甲醇溶剂萃取液稀释10倍，与萘肼混匀，萘肼溶度10-3mol/L，再加入硫酸催化剂，浓度为2×10-4mol/L，此溶液为反应前混合液。
(4)将反应前混合液，注入进样器5μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应前荧光数值。
(5)将反应前混合液置于水浴中，在40℃下，反应30分钟，该混合液为反应后混合液。
(6)将反应后混合液室温静置10分钟，注入进样器5μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应后荧光数值，通过反应前后，荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量。
(7)通过油脂中脂肪醛含量的测定，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于0.018mol/L为地沟油，实现鉴别地沟油。
实施例3
一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法，具体实施步骤如下：
(1)通过泵将载流溶剂乙醇按照0.7mL/min输送到管路中。
(2)取待测油样5mL，加入5mL乙醇，油样中的极性醛类物质将通过萃取进入乙醇溶剂中。
(3)将乙醇溶剂萃取液稀释50倍，与萘肼混匀，萘肼溶度10-3mol/L，再加入醋酸催化剂，浓度为2×10-4mol/L，此溶液为反应前混合液。
(4)将反应前混合液，注入进样器10μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应前荧光数值。
(5)将反应前混合液置于水浴中，在50℃下，反应20分钟，该混合液为反应后混合液。
(6)将反应后混合液室温静置20分钟，注入进样器10μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应后荧光数值，通过反应前后，荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量。
(7)通过油脂中脂肪醛含量的测定，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于0.018mol/L为地沟油，实现鉴别地沟油。
实施例4
一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法，具体实施步骤如下：
(1)通过泵将载流溶剂四氢呋喃按照1.5mL/min输送到管路中。
(2)取待测油样5mL，加入5mL四氢呋喃，油样中的极性醛类物质将通过萃取进入四氢呋喃溶剂中。
(3)将四氢呋喃溶剂萃取液稀释150倍，与萘肼混匀，萘肼浓度5×10-4mol/L，再加入三氟乙酸催化剂，浓度为2.5×10-4mol/L，此溶液为反应前混合液。
(4)将反应前混合液，注入进样器50μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应前荧光数值。
(5)将反应前混合液置于水浴中，在70℃下，反应10分钟，该混合液为反应后混合液。
(6)将反应后混合液室温静置15分钟，注入进样器10μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应后荧光数值，通过反应前后，荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量。
(7)通过油脂中脂肪醛含量的测定，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于0.018mol/L为地沟油，实现鉴别地沟油。
实施例5
一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法，具体实施步骤如下：
(1)通过泵将载流溶剂甲醇按照2mL/min输送到管路中。
(2)取待测油样5mL，加入5mL甲醇，油样中的极性醛类物质将通过萃取进入甲醇溶剂中。
(3)将甲醇溶剂萃取液稀释200倍，与萘肼混匀，萘肼溶度10-5mol/L，再加入三氟乙酸催化剂，浓度为10-6mol/L，此溶液为反应前混合液。
(4)将反应前混合液，注入进样器50μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应前荧光数值。
(5)将反应前混合液置于水浴中，在80℃下，反应5分钟，该混合液为反应后混合液。
(6)将反应后混合液室温静置5分钟，注入进样器50μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应后荧光数值，通过反应前后，荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量。
(7)通过油脂中脂肪醛含量的测定，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于0.018mol/L为地沟油，实现鉴别地沟油。
实施例6
一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法，具体实施步骤如下：
(1)通过泵将载流溶剂乙醇按照1mL/min输送到管路中。
(2)取待测油样5mL，加入5mL乙醇，油样中的极性醛类物质将通过萃取进入乙醇溶剂中。
(3)将乙醇溶剂萃取液稀释100倍，与萘肼混匀，萘肼溶度10-4mol/L，再加入三氟乙酸催化剂，浓度为3×10-5mol/L，此溶液为反应前混合液。
(4)将反应前混合液，注入进样器30μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应前荧光数值。
(5)将反应前混合液置于水浴中，在50℃下，反应15分钟，该混合液为反应后混合液。
(6)将反应后混合液室温静置15分钟，注入进样器30μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应后荧光数值，通过反应前后，荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量。
(7)通过油脂中脂肪醛含量的测定，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于0.018mol/L为地沟油，实现鉴别地沟油。
实施例7
一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法，具体实施步骤如下：
(1)通过泵将载流溶剂乙腈按照1mL/min输送到管路中。
(2)取待测油样5mL，加入5mL乙腈，油样中的极性醛类物质将通过萃取进入乙腈溶剂中。
(3)将乙腈溶剂萃取液稀释100倍，与萘肼混匀，萘肼溶度2×10-4mol/L，再加入三氯乙酸催化剂，浓度为2×10-5mol/L，此溶液为反应前混合液。
(4)将反应前混合液，注入进样器20μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应前荧光数值。
(5)将反应前混合液置于水浴中，在60℃下，反应15分钟，该混合液为反应后混合液。
(6)将反应后混合液室温静置15分钟，注入进样器20μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应后荧光数值，通过反应前后，荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量。
(7)通过油脂中脂肪醛含量的测定，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于0.018mol/L为地沟油，实现鉴别地沟油。
实施例8
一种流动注射荧光法鉴别地沟油的装置及其方法，具体实施步骤如下：
(1)通过泵将载流溶剂四氢呋喃按照1mL/min输送到管路中。
(2)取待测油样5mL，加入5mL四氢呋喃，油样中的极性醛类物质将通过萃取进入四氢呋喃溶剂中。
(3)将四氢呋喃溶剂萃取液稀释80倍，与萘肼混匀，萘肼溶度5×10-4mol/L，再加入三氯乙酸催化剂，浓度为2.5×10-5mol/L，此溶液为反应前混合液。
(4)将反应前混合液，注入进样器20μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应前荧光数值。
(5)将反应前混合液置于水浴中，在70℃下，反应10分钟，该混合液为反应后混合液。
(6)将反应后混合液室温静置10分钟，注入进样器20μL，测定荧光，激发波长350nm，发射波长400nm，记录反应后荧光数值，通过反应前后，荧光数值的变化，根据标准工作曲线，计算醛类物质的含量。
(7)通过油脂中脂肪醛含量的测定，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于0.018mol/L为地沟油，实现鉴别地沟油。

Claims (8)

1.一种流动注射荧光法鉴别地沟油的方法，其特征在于包括下列步骤：
(1)通过泵将载流溶剂按照所需流量输送到管路中；
(2)取待测油样，用有机溶剂萃取，得到含醛类物质的有机溶剂萃取液；
(3)将有机溶剂萃取液稀释，加入萘肼溶液，混匀，再加入酸催化剂，为反应前混合液；其中所述的有机溶剂萃取液稀释的倍数80-150倍；所述的萘肼的浓度为10-3-10-5mol/L；所述的酸催化剂为盐酸、硫酸、醋酸、三氟乙酸、三氯乙酸、硝酸、甲酸或对甲基苯磺酸，所用酸催化剂的浓度与萘肼浓度的比为 (0.05-1):1；
(4)将反应前混合液，注入进样器，测定荧光，记录反应前荧光数值；
(5)将反应前混合液置于水浴中，在升高温度下，充分反应一段时间的混合液，为反应后混合液；
(6)将反应后混合液，室温下静置5-20分钟后，注入进样器，测定荧光，记录反应后荧光数值；通过反应前后的荧光数值的变化，根据标准曲线，计算醛类物质的含量；
(7)以醛类物质为标准物质，通过步骤(3)-(6)，做标准工作曲线，测定线性范围及最低灵敏度，验证地沟油中醛类物质测定方法的稳定性；通过食用油脂中脂肪醛含量的测定，实现鉴别地沟油；其中所述的醛类物质为等摩尔量甲醛、乙醛、正丙醛、正丁醛、正戊醛、正己醛、正庚醛、正辛醛和正壬醛配成的混合醛；所述的标准工作曲线为y＝28x+42，相关系数r2＝0.997，其中y为待测物质的峰高，x为待测物质的浓度；线性范围为0.0005-0.04mol/L，最低灵敏度为0.0003mol/L。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(1)中所述的载流溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、四氢呋喃；所述的载流溶剂的流量为0.5-2mL/min。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(2)中所述的有机溶剂为甲醇、乙醇、乙腈、或四氢呋喃；所述的待测油样与有机溶剂按照体积比1:1萃取。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(3)中所述的萘肼的浓度为10-3-2X10- 4mol/L；所用酸催化剂的浓度与萘肼浓度的比为 (0.1-1):1。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(4)中所述的注入进样器的体积为5-100μL。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于步骤(5)中所述的水浴温度为40-80℃，反应时间为5-30分钟。
7.根据权利要求1所述的方法，其特征在于测定荧光中，激发波长350nm，发射波长400nm。
8.根据权利要求1所述的方法，其特征在于所述的鉴别地沟油的方法中，普通食用油中醛类物质的含量低于0.018mol/L，高于该数值为地沟油。
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