CN106755261A - 一种肿瘤药敏试验方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种肿瘤药敏试验方法，是将肿瘤组织以组织块的形式进行三维培养，然后加入化疗药物，计算组织块对化疗药物的敏感性。本发明可以使检测方法标准化、商品化、极大地简化操作程序，提高了检测的准确性和稳定性，减少化疗中的盲目性，指导临床科学合理地用药，提高化疗的有效率。

Description

一种肿瘤药敏试验方法
技术领域
本发明属于生物医药技术领域，涉及一种肿瘤药敏试验方法。
背景技术
肿瘤治疗过程中，肿瘤会出现新的突变，最初能起到作用的药物有可能慢慢失去药效。因此，针对癌症患者的资料方案需要不断地调整。研究人员一直试图通过肿瘤细胞体外化疗药敏感性检测指导化疗药物的选择。然而目前已有的各种肿瘤原代细胞体外药敏试验，与体内药效可能差异巨大，不宜进入广泛的临床应用。如果在肿瘤治疗过程中，能够实现获取更接近体内肿瘤特性的体外培养体系，将为化疗方案的设计提供更多的临床依据。
肿瘤药敏试验已发展为体内和体外多种常用方法。由于以上方法均须分离细胞，破坏了组织结构的完整性，影响了肿瘤细胞之间的相互联系，导致结果欠可靠。
发明内容
本发明的目的主要是提供一种肿瘤药敏试验方法。
本发明通过下述技术方案实现：
一种肿瘤药敏试验方法，是将肿瘤组织以组织块的形式进行三维培养，然后加入化疗药物，计算组织块对化疗药物的敏感性。
进一步地，在加入化疗药物之前和加入化疗药物之后，分别采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中癌细胞的数量及形状变化。值得说明的是，无标记动态细胞分析技术是通过微晶电极阻抗值的改变进行癌细胞数量和形状变化。
再进一步地，对组织块进行培养的条件如下：O2含量在0.1～20%，C O2含量在0.1%～20%，压力在0～5psi，温度在25～45℃，湿度在0～85%。
更进一步地，在进行三维培养之前，培养标本采用含有双抗的无血清RPMI-1640培养液或者DMEM培养基进行清洗，洗去组织表面的血液，并剔除血管和坏死成分。
另外，采用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液或者DMEM培养基对组织进行三维培养。
此外，组织块的大小为1mm³。
本发明具有以下优点及有益效果：
本发明可以使检测方法标准化、商品化、极大地简化操作程序，提高了检测的准确性和稳定性，减少化疗中的盲目性，指导临床科学合理地用药，提高化疗的有效率。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明做进一步的说明，但本发明的实施方式并不限于此。
实施例
一种肿瘤药敏试验方法，选择坏死较少的部分肿瘤组织（标本），放入培养液中并在4h内在超净工作台进行实验操作。具体地，准备灭菌的微孔培养板，每孔放入适量含10%小牛血清的RPMI-1640培养液或者DMEM培养基。将选择的标本用含有双抗的无血清RPMI-1640培养液或者DMEM进行清洗三次，洗去组织表面的血液，并剔除血管和坏死成分，然后将标本切割成1mm³大小的组织块，最后将切割好的组织块放入上述的多孔培养板中，每孔放1块，培养板放入生理环境模拟培养系统培养箱中孵育，培养时的条件如下：O2含量在0.1～20%，C O2含量在0.1%～20%，压力在0～5psi，温度在25～45℃，湿度在0～85%。
第2天，取出微孔培养板，分别采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中癌细胞的数量及形状变化，然后向部分孔中加入化疗药物3μL作为实验组，未加入化疗药物的作为对照组，每一个组织块均选择多种单药及组合用药。化疗药物与培养液充分混匀后，放入生理环境模拟培养系统培养箱中孵育72小时。
第5天，取出微孔培养板，分别采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中癌细胞的数量及形状变化，通过前后两次测定的癌细胞数量及形状变化来判定化疗药物敏感性。
值得说明的是，本发明的方法是保持了细胞间接触，维持了组织心态和功能，更加接近机体实体瘤内环境，临床效果相关性好，非常适用于临床应用。同时本发明减少了操作步骤、提高了实验的准确性，降低了实验成本并节约了试验时间。
按照上述实施例，便可很好地实现本发明。值得说明的是，基于上述设计的前提下，为解决同样的技术问题，即使在本发明上做出的一些无实质性的改动或润色，所采用的技术方案的实质仍然与本发明一样，故其也应当在本发明的保护范围内。

Claims (6)

1.一种肿瘤药敏试验方法，其特征在于，是将肿瘤组织以组织块的形式进行三维培养，然后加入化疗药物，计算组织块对化疗药物的敏感性。
2.根据权利要求1所述的一种肿瘤药敏试验方法，其特征在于，在加入化疗药物之前和加入化疗药物之后，分别采用无标记动态细胞分析技术测定组织块中癌细胞的数量及形状变化。
3.根据权利要求2所述的一种肿瘤药敏试验方法，其特征在于，组织块进行培养时的条件如下：O2含量在0.1～20%，CO2含量在0.1%～20%，压力在0～5psi，温度在25～45℃，湿度在0～85%。
4.根据权利要求3所述的一种肿瘤药敏试验方法，其特征在于，在进行三维培养之前，培养标本采用含有双抗的无血清RPMI-1640培养液或者DMEM培养基进行清洗，洗去组织表面的血液，并剔除血管和坏死成分。
5.根据权利要求4所述的一种肿瘤药敏试验方法，其特征在于，采用含10%小牛血清的RPMI-1640培养液或者DMEM培养基对组织进行三维培养。
6.根据权利要求5所述的一种肿瘤药敏试验方法，其特征在于，组织块的大小为1mm³。
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