CN106701627A - 一种高产褐藻胶裂解酶的海洋弧菌及其应用 - Google Patents
一种高产褐藻胶裂解酶的海洋弧菌及其应用 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106701627A CN106701627A CN201710008519.8A CN201710008519A CN106701627A CN 106701627 A CN106701627 A CN 106701627A CN 201710008519 A CN201710008519 A CN 201710008519A CN 106701627 A CN106701627 A CN 106701627A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- algin
- splendidus
- vibiro
- culture medium
- catenase
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/63—Vibrio
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
- C12N9/88—Lyases (4.)
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Y—ENZYMES
- C12Y402/00—Carbon-oxygen lyases (4.2)
- C12Y402/02—Carbon-oxygen lyases (4.2) acting on polysaccharides (4.2.2)
- C12Y402/02003—Poly(beta-D-mannuronate) lyase (4.2.2.3)
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
本发明提供一株高产褐藻胶裂解酶的海洋灿烂弧菌(Vibiro splendidus)OU02株,其保藏编号为CGMCC No.13478。本发明所筛选的灿烂弧菌(Vibiro splendidus)OU02株用于生产制备褐藻胶裂解酶。本发明所筛选的灿烂弧菌OU02株所产生的褐藻胶裂解酶可以降解褐藻胶产生具有潜在生物学活性的褐藻寡糖,该微生物发酵周期短,酶活性高,且多数活性为胞内酶活,有利于样品的收集及保存,为后续的工业化应用奠定了基础。
Description
技术领域
本发明属于有益微生物筛选技术领域,具体涉及一种高产褐藻胶裂解酶的海洋弧菌及其应用
背景技术
褐藻胶是由α-L-古洛糖醛酸(G)和β-D-甘露糖醛酸(M)通过1,4-糖苷键,按照不同的组合方式构成的非均聚线性分子。褐藻胶裂解酶通过β-消除反应,催化单体间的1,4-糖苷键,在非还原端的C4、C5之间形成不饱和双键,该双键在235nm处有最大吸光值。在酶活测定中,主要通过OD235紫外吸收法检测不饱和双键的产生和薄层层析法(TLC)测定降解产物的均一性。
目前褐藻胶裂解酶,尤其是内切型褐藻胶裂解酶,已经被广泛应用于生产褐藻胶寡聚糖、研究褐藻胶的精细结构以及制备红藻和褐藻的原生质体。此外,褐藻胶裂解酶通过降解细菌生物膜上的多糖,在治疗囊性纤维化方面有巨大的潜在应用价值。褐藻胶裂解酶还可应用于褐藻胶发酵生产生物乙醇,但目前所使用的褐藻胶裂解酶存在着产物均一性差的问题。
发明内容
本发明的目的在于提供一株高产褐藻胶裂解酶的菌株,其降解褐藻胶的产物均一性高,从而推动褐藻胶寡糖的制备及应用,以弥补现有技术的不足。
本发明的第一个目的在于提供一株高产褐藻胶裂解酶的海洋灿烂弧菌(Vibriosplendidus)OU02株,该微生物保存在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.13478,保藏日期为2016年12月22日。
本发明所筛选的灿烂弧菌(Vibiro splendidus)OU02株用于生产制备褐藻胶裂解酶;
本发明还提供了一种用于诱导上述海洋弧菌表达产生褐藻胶裂解酶的培养基,培养基的基本碳源为褐藻胶;
作为实施例的一种具体记载,一种培养基的具体配比如下:褐藻胶2g/L,酵母粉0.5g/L,蛋白胨2.5g/L,海水溶解并调节pH 7.6-7.8。
本发明再一个方面提供一种制备褐藻胶裂解酶的方法。
本发明所筛选的灿烂弧菌OU02株还用来发酵生产褐藻寡糖。
本发明所筛选的灿烂弧菌OU02株所产生的褐藻胶裂解酶可以降解褐藻胶产生具有潜在生物学活性的褐藻寡糖,该微生物发酵周期短,酶活性高,且多数活性为胞内酶活,有利于样品的收集及保存,为后续的工业化应用奠定了基础。
附图说明
图1:TLC检测细胞裂解物酶活测定图,其中1.未加胞内酶对照样品;2.加酶样品;3.未加膜上提取酶对照;4.加酶;
图2:本发明筛选的菌株的生长曲线图。
具体实施方式
本发明从具有产生高活性褐藻胶裂解酶的海洋无脊椎动物的消化腺来源的共生微生物中进行筛选,获得了一株能够产生专一性的褐藻胶裂解酶的微生物菌株,从而促成了本发明。
下面结合实施例对本发明进行详细的描述
实施例1:微生物的筛选及鉴定
1、微生物的筛选
在无菌条件下对新鲜活扇贝及鲍鱼进行解剖,分离出二者的消化腺。在提取的消化腺组织中加入无菌生理盐水,浸提后获得扇贝、鲍鱼消化腺组织的悬浊液。用无菌生理盐水将悬浊液按照,10-1,10-2,10-3,10-4,10-5,10-6的梯度进行稀释。分别取稀释后的液体100-200 μL涂布到2216E褐藻胶固体选择培养基上。将培养板置于25℃培养箱中进行培养。从平板上挑取生长状态良好的菌落接种于2216E褐藻胶液体选择培养基中,于摇床中振荡培养。24h后对各菌株的产褐藻胶裂解酶活性进行测定,选择活性高的菌株进行后续筛选。
所用到的培养基的配方如下:
2216E褐藻胶选择液体培养基:褐藻胶2g/L,酵母粉0.5g/L,蛋白胨2.5g/L,海水溶解并调节pH 7.6-7.8。
2216E褐藻胶选择固体培养基:在液体培养基的基础上,补加琼脂(15g/L)。
将待筛选的菌株用提取的胞内粗酶对褐藻胶进行降解,以加入同体积灭活酶作为对照,反应结束后采用TLC法对降解产物进行分析,来筛选产物均一性高的菌株。
最终筛选获得了高产褐藻胶裂解酶的海洋灿烂弧菌(Vibiro splendidus)OU02株,该微生物保存在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.13478,保藏日期为2016年12月22日。
灿烂弧菌(Vibiro splendidus)OU02株的16S rRNA基因的扩增、序列测定及分析
采用细菌基因组提取试剂盒(Tiangen)提取已筛选到的高活性菌株的基因组,以此为模板,扩增该菌株的16S rRNA基因。采用以下引物:
27F:5’-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3’
1492R:5’-GGTTACCTTGTTACGACTT-3’
PCR反应按照以下条件进行:95℃预变性3min;95℃变性30s,50℃退火30s,68℃延伸90s共进行35个循环,之后68℃延伸10min。
获得的RCR产物经胶回收试剂盒(Omega)纯化后,与pMD19-T 载体(Takara)连接,转化E.coli Top 10感受态细胞,挑取阳性克隆进行DNA测序,进化树分析显示其与Vibrionales Bacterium SWAT-3的亲缘关系最近。
实施例2:灿烂弧菌(Vibiro splendidus)OU02株的发酵研究
1、菌株发酵培养
将筛选得到的高活性菌株进行发酵培养,获得该微生物在褐藻胶培养基中的生长曲线。
按1-3%的接种量,将种子液接入褐藻胶液体培养基中,25℃,150rpm摇床中培养,在不同时间收集发酵液,以未接菌的培养基作为空白对照,测定菌液600nm处吸光值,绘制该菌的生长曲线(图1)。结果发现该菌在褐藻胶培养基中,大约在6-10小时内达到生长的平台期,此时OD600=2.5左右。这作为将来菌体收集的最佳时间。
2、不同部位酶的提取及活性测定(以下操作均在4℃条件下进行)
①胞外酶:将发酵液在12,000rpm条件下离心15min。将离心后的上清透析到50mMTris-HCl pH7.5,200mM NaCl缓冲液中。
②胞内酶:上一步中发酵液离心后的菌体用50mM
Tris-HClpH7.5,200mM NaCl缓冲液重悬,之后进行超声破碎(超声3s,间隔5s,总时间15min),超声破碎后的液体在20,000g条件下离心20min,收集离心后的上清即为提取的胞内酶。
③膜结合酶:第二步中细菌经超声破碎、离心后的沉淀被认为是包括难以溶解的膜结构。在50mM Tris-HClpH7.5,200mM NaCl缓冲液中按0.1%(v/v)的比例加入吐温20,配成膜结合蛋白浸提液。用该浸提液,重悬第二步中细菌经超声破碎、离心后的沉淀,之后过夜反应提取膜结合酶。最后,反应液经20000g,离心20min后的上清即为膜结合酶。
采用235nm处检测不饱和双键的吸光值的方法对提取的酶组份进行活性测定。结果表明该菌的褐藻胶裂解酶主要来源于细胞内和细胞膜上,其中胞内酶所占比例较高。
3、酶解产物的TLC分析
用提取的胞内粗酶对褐藻胶进行降解,以加入同体积灭活酶作为对照,反应结束后采用TLC法对降解产物进行分析。分别取2μL降解后的溶液和对照组溶液点样于硅胶板上(Silica gel 60F 254,Merck)。吹干后将硅胶板置于展开剂中开始层析,展开剂按以下比例配置:正丁醇/甲酸/水(v/v)=4:6:1。层析结束后,取出硅胶板并吹干,在硅胶板上喷洒显色剂(苯胺-二苯胺显色剂),吹干,再将硅胶板置于高温条件下显色,直至出现明显的斑点。
TLC结果见图2,TLC结果显示该微生物胞内酶的降解产物主要有三种组份,均一性较好,适应用于规模化制备均一性寡糖。
Claims (7)
1.一株高产褐藻胶裂解酶的海洋灿烂弧菌,其特征在于,所述的海洋灿烂弧菌的保藏编号为CGMCC No.13478。
2.权利要求1所述的灿烂弧菌在制备褐藻胶裂解酶中的应用。
3.一种用于诱导权利要求1所述的灿烂弧菌来表达产生褐藻胶裂解酶的培养基,其特征在于,所述的培养基中的基本碳源为褐藻胶。
4.如权利要求3所述的培养基,其特征在于,所述的培养基的配比如下:褐藻胶2g/L,酵母粉0.5g/L,蛋白胨2.5g/L,海水溶解并调节pH 7.6-7.8。
5.一种制备褐藻胶裂解酶的方法,其特征在于,所述的方法是使用权利要求1所述的灿烂弧菌来发酵制备的。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述的方法中使用了权利要求3所述的培养基。
7.一种制备褐藻寡糖的方法,其特征在于,所述的方法是使用权利要求1所述的灿烂弧菌来发酵制备褐藻寡糖。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710008519.8A CN106701627B (zh) | 2017-01-05 | 2017-01-05 | 一种高产褐藻胶裂解酶的海洋弧菌及其应用 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201710008519.8A CN106701627B (zh) | 2017-01-05 | 2017-01-05 | 一种高产褐藻胶裂解酶的海洋弧菌及其应用 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106701627A true CN106701627A (zh) | 2017-05-24 |
CN106701627B CN106701627B (zh) | 2020-07-03 |
Family
ID=58908196
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201710008519.8A Active CN106701627B (zh) | 2017-01-05 | 2017-01-05 | 一种高产褐藻胶裂解酶的海洋弧菌及其应用 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106701627B (zh) |
Cited By (7)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110423787A (zh) * | 2019-08-09 | 2019-11-08 | 中国海洋大学 | 一种均一性褐藻三糖的制备方法 |
CN111197065A (zh) * | 2020-02-24 | 2020-05-26 | 江南大学 | 一种生产褐藻胶水解物的方法 |
CN111961619A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-11-20 | 天津科技大学 | 一株可产具有良好热稳定性褐藻胶裂解酶的海生弧菌和应用 |
CN112646807A (zh) * | 2020-12-25 | 2021-04-13 | 北京雷力海洋生物新产业股份有限公司 | 一种高产褐藻胶裂合酶的基因工程菌株及其发酵方法 |
CN112708575A (zh) * | 2020-12-09 | 2021-04-27 | 汪秋宽 | 大洋中华微菌及在制备褐藻聚糖硫酸酯降解酶中的应用 |
CN114657085A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-06-24 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种高产褐藻胶裂解酶菌株及其应用 |
CN114940963A (zh) * | 2022-02-25 | 2022-08-26 | 山东大学 | 一种高效表达褐藻酸裂解酶的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1920003A (zh) * | 2005-08-22 | 2007-02-28 | 中国海洋大学 | 一种新的弧菌科弧菌属菌株及其应用 |
CN1920002A (zh) * | 2005-08-22 | 2007-02-28 | 中国海洋大学 | 一种新的弧菌科弧菌属菌株及其应用 |
CN102586216A (zh) * | 2012-03-15 | 2012-07-18 | 华东理工大学 | 一种利用海洋弧菌生产褐藻胶裂解酶的方法 |
CN103911315A (zh) * | 2014-01-03 | 2014-07-09 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一株产褐藻胶裂解酶的菌株及其应用 |
CN104195080A (zh) * | 2014-08-23 | 2014-12-10 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一株产褐藻胶裂解酶的芽孢杆菌及其应用 |
-
2017
- 2017-01-05 CN CN201710008519.8A patent/CN106701627B/zh active Active
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN1920003A (zh) * | 2005-08-22 | 2007-02-28 | 中国海洋大学 | 一种新的弧菌科弧菌属菌株及其应用 |
CN1920002A (zh) * | 2005-08-22 | 2007-02-28 | 中国海洋大学 | 一种新的弧菌科弧菌属菌株及其应用 |
CN102586216A (zh) * | 2012-03-15 | 2012-07-18 | 华东理工大学 | 一种利用海洋弧菌生产褐藻胶裂解酶的方法 |
CN103911315A (zh) * | 2014-01-03 | 2014-07-09 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一株产褐藻胶裂解酶的菌株及其应用 |
CN104195080A (zh) * | 2014-08-23 | 2014-12-10 | 中国科学院天津工业生物技术研究所 | 一株产褐藻胶裂解酶的芽孢杆菌及其应用 |
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
AHMET H. BADUR等: "Alginate Lyases from Alginate-Degrading Vibrio splendidus 12B01 Are Alginate Lyases from Alginate-Degrading Vibrio splendidus 12B01 Are Endolytic", 《APPLIED AND ENVIRONMENTAL MICROBIOLOGY》 * |
周久顺: "海洋弧菌Vibrio sp.QY102产褐藻胶裂解酶的发酵工艺优化", 《中国优秀硕士学位论文全文数据库基础科学辑(电子期刊)》 * |
Cited By (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN110423787A (zh) * | 2019-08-09 | 2019-11-08 | 中国海洋大学 | 一种均一性褐藻三糖的制备方法 |
CN110423787B (zh) * | 2019-08-09 | 2022-03-04 | 中国海洋大学 | 一种均一性褐藻三糖的制备方法 |
CN111197065A (zh) * | 2020-02-24 | 2020-05-26 | 江南大学 | 一种生产褐藻胶水解物的方法 |
CN111961619A (zh) * | 2020-08-19 | 2020-11-20 | 天津科技大学 | 一株可产具有良好热稳定性褐藻胶裂解酶的海生弧菌和应用 |
CN112708575A (zh) * | 2020-12-09 | 2021-04-27 | 汪秋宽 | 大洋中华微菌及在制备褐藻聚糖硫酸酯降解酶中的应用 |
CN112708575B (zh) * | 2020-12-09 | 2024-02-02 | 汪秋宽 | 大洋中华微菌及在制备褐藻聚糖硫酸酯降解酶中的应用 |
CN112646807A (zh) * | 2020-12-25 | 2021-04-13 | 北京雷力海洋生物新产业股份有限公司 | 一种高产褐藻胶裂合酶的基因工程菌株及其发酵方法 |
CN112646807B (zh) * | 2020-12-25 | 2022-07-05 | 北京雷力海洋生物新产业股份有限公司 | 一种高产褐藻胶裂合酶的基因工程菌株及其发酵方法 |
CN114657085A (zh) * | 2021-12-24 | 2022-06-24 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种高产褐藻胶裂解酶菌株及其应用 |
CN114657085B (zh) * | 2021-12-24 | 2023-10-20 | 中国热带农业科学院热带生物技术研究所 | 一种高产褐藻胶裂解酶菌株及其应用 |
CN114940963A (zh) * | 2022-02-25 | 2022-08-26 | 山东大学 | 一种高效表达褐藻酸裂解酶的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用 |
CN114940963B (zh) * | 2022-02-25 | 2023-09-15 | 山东大学 | 一种高效表达褐藻酸裂解酶的枯草芽孢杆菌工程菌及其构建方法与应用 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106701627B (zh) | 2020-07-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN106701627A (zh) | 一种高产褐藻胶裂解酶的海洋弧菌及其应用 | |
CN105154358B (zh) | 一种芽孢杆菌及其同步糖化发酵生产l-乳酸的方法 | |
CN104164395B (zh) | 一种用于发酵产氢的拜氏梭菌及其发酵方法和应用 | |
CN103695341B (zh) | 一种由海洋细菌分泌的褐藻胶裂解酶及其制备方法 | |
CN106635920B (zh) | 一种高产岩藻多糖酶的海洋交替假单胞菌及其应用 | |
CN105861341A (zh) | 一株汉逊德巴利酵母菌株及其发酵制备3-羟基丙酸的方法 | |
CN109294933A (zh) | 一株酿酒酵母及其与产酯酵母共培养提高传统发酵食品品质的方法 | |
CN104893997B (zh) | 一种低温生产几丁质酶的菌株及其发酵方法 | |
CN103451133A (zh) | 一种环状芽孢杆菌及其在制备阿魏酸脱羧酶中的应用 | |
CN110218676A (zh) | 一种丁酸梭菌及其应用 | |
CN106434475B (zh) | 一株链霉菌属多糖降解菌及其培养方法与应用 | |
CN105219667B (zh) | 用于木糖发酵制氢的菌株及制氢方法 | |
CN108546660A (zh) | 甲壳素脱乙酰基酶高产菌株及其应用 | |
CN105802892A (zh) | 一种产角蛋白酶的嗜麦芽寡养单胞菌及其应用 | |
CN103865850B (zh) | 一株蝙蝠弧菌及制备琼胶酶的方法 | |
CN111826308B (zh) | 一株海洋沉积物来源的几丁质高效降解菌及其应用 | |
CN105441334B (zh) | 产灰树花多糖的菌株及其应用 | |
CN107446868A (zh) | 一株甲基营养型芽孢杆菌及其降解羽毛产寡肽的应用 | |
CN105838658A (zh) | 一种提高乳酸菌在高盐条件下生物量的方法 | |
CN108841743A (zh) | 寒地秸秆腐熟细菌菌株及其制备方法和应用 | |
CN114075520B (zh) | 一种产γ-聚谷氨酸的贝莱斯芽孢杆菌及其固体发酵生产γ-聚谷氨酸的方法 | |
CN104818220B (zh) | 一株从腐烂秸秆中筛选获得的米根霉菌株jhsw01 | |
CN103074283A (zh) | 一种蜡状芽孢杆菌和微生物菌剂及它们的应用 | |
CN105907691B (zh) | 一种两阶段pH控制缩短乳酸菌高盐发酵周期的方法 | |
CN105779309A (zh) | 一株土曲霉菌株及其在制备木聚糖酶中的应用 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PB01 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20220506 Address after: 200120 station 545, floor 5, building 21, No. 1-28, Lane 588, Tianxiong Road, Zhoupu Town, Pudong New Area, Shanghai Patentee after: Shanghai Haitang Biomedical Technology Co.,Ltd. Address before: 266100 Shandong Province, Qingdao city Laoshan District Songling Road No. 238 Patentee before: OCEAN University OF CHINA |