CN106635908B - 一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用 - Google Patents

一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN106635908B
CN106635908B CN201611242621.6A CN201611242621A CN106635908B CN 106635908 B CN106635908 B CN 106635908B CN 201611242621 A CN201611242621 A CN 201611242621A CN 106635908 B CN106635908 B CN 106635908B
Authority
CN
China
Prior art keywords
crude oil
degrading
oil
marine
bacterium
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201611242621.6A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106635908A (zh
Inventor
李春荣
张帆
王文科
申圆圆
邓红章
张慧慧
姬雨
王广华
郭静茹
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Shaanxi Aomei Environmental Protection Technology Co.,Ltd.
Original Assignee
Changan University
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Changan University filed Critical Changan University
Priority to CN201611242621.6A priority Critical patent/CN106635908B/zh
Publication of CN106635908A publication Critical patent/CN106635908A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106635908B publication Critical patent/CN106635908B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
    • C12N1/205—Bacterial isolates
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
    • C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
    • C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C02—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F—TREATMENT OF WATER, WASTE WATER, SEWAGE, OR SLUDGE
    • C02F3/00—Biological treatment of water, waste water, or sewage
    • C02F3/34—Biological treatment of water, waste water, or sewage characterised by the microorganisms used
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Water Supply & Treatment (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Hydrology & Water Resources (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

本发明属于生物工程技术领域，具体公开了一种海洋石油降解菌6‑10‑1(Advenella kashmirensis)，该菌保藏于中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.13003。本发明还公开了该菌及其菌剂在降解原油污染水体中的应用。本发明的海洋石油降解菌对原油污染水体的降解能力强，环境适应能力强；同时，该菌对原油污染水体降解过程中，对污染水体中的原油的降解浓度达1mL/100mL，可有效实现原油污染水体的恢复处理；其固体菌剂也可对原油污染土壤具有良好的降解修复效果，实现原油污染的修复处理，在原油污染的生物修复中展现了良好的应用前景。

Description

一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用
技术领域
本发明涉及生物工程技术领域，具体涉及一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用。
背景技术
石油中的所包含的烷烃、芳香烃、含硫化合物以及含硫或含氮的杂环化合物等均具有毒性，对人类和环境的危害极大。而原油是未经加工的石油，是天然有机物质经过地质变迁而形成的一种粘稠的黑色或深棕色的液体或固体，一般情况下大多存在于地下或海底，且带有刺激性气味，主要成分是碳氢原子结合形成的链状化合物，其对水体具有极大的危害。
目前，对石油污染的水体的修复技术主要有物理修复技术、化学修复技术、光催化修复技术和生物修复技术；生物修复技术是一个具有政策、经济和技术吸引力的处理方法，被认为是最具发展潜力的技术方法，并且逐步发展成为一种经济效益和环境效益俱佳的、解决复杂环境污染问题的最有效的手段。
普遍来说一种微生物仅能降解一种或少数几种原油烃，且不同微生物对同种污染组分的降解效果也不同，多种微生物在降解过程中还可能出现协同或竞争作用。但是原油和其炼油产物，所含的原油经种类非常复杂，而且不同源产地的原油其原油经成份也有很大的差异。因此微生物修复技术在迅速发展的同时还存在一些局限性，特定的微生物只能降解特定的化合物类型，微生物的繁殖与代谢活性受环境因素的影响较大，常常在投加至土壤的初始阶段出现大量死亡。
发明内容
针对现有技术中存在的问题，本发明的目的在于提供一种可用于降解原油污染水体的海洋石油降解菌、菌剂，将该菌种直接投加入污染水体中，达到较好的降解效果，实现原油污染的治理。
为了达到上述目的，本发明采用以下技术方案予以实现。
(一)一种海洋石油降解菌，已于2016年09月12日保藏于北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.13003；命名为海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1。
将所述海洋石油降解菌在牛肉膏蛋白胨培养基上培养，菌株6-10-1在牛肉膏蛋白胨的平板上呈圆形、边缘完整、光滑、不透明、奶白色，表面湿润，无特殊气味。菌体呈短杆状，大小为(0.41-1.02)μm×(0.41-1.53)μm，无鞭毛，为革兰氏阴性菌。
海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1的16S rDNA测序结果如SEQID No.1所示。
(二)一种海洋石油降解菌菌剂，其特征在于，所述菌剂为固体菌剂，且以海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1为活性成分。
(三)所述海洋石油降解菌在降解原油污染水体中的应用。
(四)所述海洋石油降解菌菌剂在降解原油污染水体中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果为：
本发明的海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1对原油污染水体的降解能力强，环境适应能力强，可在大量有机物存在的条件下顺利生长；同时，该菌对原油污染水体降解过程中，对污染水体中的原油的降解浓度达1mL/100mL，可有效实现原油污染水体的恢复处理；其固体菌剂也可对原油污染土壤具有良好的降解修复效果，实现原油污染的修复处理，在原油污染的生物修复中展现了良好的应用前景。
附图说明
下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步详细说明。
图1为本发明的海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1在牛肉膏蛋白胨培养基平板上的菌落形态图；
图2为本发明的海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1在显微镜下的的菌体形态图，图中，放大倍数为1000倍；
图3为本发明实施例3中I号原油的波长-吸光度曲线图；图中，横坐标为波长，单位为nm，纵坐标为吸光度，单位为1；
图4为本发明实施例3中I号原油的标准曲线图；图中，横坐标为浓度，单位为mg/L，纵坐标为吸光度，单位为1；
图5为本发明实施例4中II号原油的标准曲线图；图中，横坐标为浓度，单位为mg/L，纵坐标为吸光度，单位为1。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域的技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。
实施例1 菌株的分离纯化
(1)菌株来源
本发明提供一种海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1，分离自延长原油集团的七里洞采油场集油站落地原油污染土壤中，土壤的理化性质为：铵态氮15.09ppm，硝态氮0.72ppm；氮含量15.81ppm，磷含量82.05ppm，钾含量17.45ppm，有机质含量1.43％，pH为7.65。
(2)菌株的分离纯化
将10g原油污染土壤样品加入100mL富集液体培养基中，28℃、130r/min摇床培养7d。待培养液混浊后，吸取5mL培养液重新转接入新鲜富集培养基中，与上述培养条件相同连续转接富集培养3次。取1mL上述菌悬液，用无菌水系列稀释后，分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，29℃左右恒温培养3d。其中，富集液体培养基的成分为：NaNO3 1.5g，(NH4)2SO41.5g，K2HPO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，KCl 0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，CaCl2 0.002g，蒸馏水1000mL，原油I号1％(体积比)，pH 7.0。其中，I号原油采自延长原油集团七里洞采油场集油站，密度为0.65g/mL；牛肉膏蛋白胨培养基的成分为：牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，NaCl5.0g，营养琼脂15.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.4-7.6。待平板菌落有效分离后，根据菌落颜色、形态特征及表面湿度的不同，分别用接种针挑选单菌落进行平板划线纯化分离。将菌株接种于斜面，4℃冰箱冷藏备用。
(3)溶油圈法筛选原油降解菌
将上述菌种接种于含油无机盐固体培养基上，置于37℃培养箱中培养10-15d，观察有无嗜油圈，并根据嗜油圈直径(D)与菌落直径(d)的比值初步确定菌株的原油降解能力。将初步筛选的原油降解菌接种于斜面培养基，4℃冰箱冷藏备用。
实施例2 菌株的鉴定
(1)菌株的形态特征
如图1所示，将所述海洋石油降解菌在牛肉膏蛋白胨培养基上30℃恒温培养24h后观察菌落形态，菌株6-10-1在牛肉膏蛋白胨的平板上呈圆形、边缘完整、光滑、不透明、奶白色，表面湿润，无特殊气味。如图2所示，菌体呈短杆状，大小为(0.41-1.02)μm×(0.41-1.53)μm，无鞭毛。
(2)生化特性
根据《伯杰氏细菌鉴定手册》和《常见细菌系统鉴定手册》对海洋石油降解菌进行生理生化鉴定，鉴定结果如表1所示。
表1 海洋石油降解菌6-10-1菌株的生理生化鉴定结果
指标 特性
革兰氏染色 —
葡萄糖 +
木糖 +
果糖 +
醋酸盐 +
乳糖 +
麦芽糖 —
蔗糖 —
氧化酶 +
过氧化氢酶 +
脲酶 +
硝酸盐还原性 —
注：“—”表示反应为阴性；“+”表示反应为阳性。
(3)菌株的16S rDNA鉴定
用DNA提取试剂盒提取菌株海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1的基因组DNA，然后进行16S rDNA基因克隆、测序，其16S rDNA测序结果如SEQ ID No.1所示，具体如下：
GCAGCGGGAA AGTAGCTTGC TACTTTTGCC GGCGAGTGGC GAACGGGTGA GTAATGTATCGGAACGTGCC CAGTAGCGGG GGATAACTAC GCGAAAGCGT GGCTAATACC GCATACGCCC TACGGGGGAAAGGGGGGGAT CTTAGGACCT CTCACTATTG GAGCGGCCGA TATCGGATTA GCTAGTTGGT GGGGTAAAGGCCTACCAAGG CGACGATCCG TAGCTGGTTT GAGAGGACGA CCAGCCACAC TGGGACTGAG ACACGGCCCAGACTCCTACG GGAGGCAGCA GTGGGGAATT TTGGACAATG GGGGAAACCC TGATCCAGCC ATCCCGCGTGTGCGATGAAG GCCTTCGGGT TGTAAAGCAC TTTTGTCAGG GAAGAAAAGG TTTCGGATAA TACCCGGAACTGATGACGGT ACCTGAAGAA TAAGCACCGG CTAACTACGT GCCAGCAGCC GCGGTAATAC GTAGGGTGCAAGCGTTAATC GGAATTACTG GGCGTAAAGC GTGCGCAGGC GGTTCGGAAA GAAAGATGTG AAATCCCAGGGCTCAACCTT GGAACTGCAT TTTTAACTAC CGAACTAGAG TATGTCAGAG GGGGGTGGAA TTCCACGTGTAGCAGTGAAA TGCGTAGATA TGTGGAGGAA CACCGATGGC GAAGGCAGCC CCCTGGGATA ATACTGACGCTCATGCACGA AAGCGTGGGG AGCAAACAGG ATTAGATACC CTGGTAGTCC ACGCCCTAAA CGATGTCAACTAGCTGTTGG GCCCTTCGGG GCTTAGTAGC GCAGCTAACG CGTGAAGTTG ACCGCCTGGG GAGTACGGTCGCAAGATTAA AACTCAAAGG AATTGACGGG GACCCGCACA AGCGGTGGAT GATGTGGATT AATTCGATGCAACGCGAAAA ACCTTACCTA CCCTTGACAT GTCTGGAATC CTGAAGAGAT TTAGGAGTGC TCGCAAGAGAACCGGAACAC AGGTGCTGCA TGGCTGTCGT CAGCTCGTGT CGTGAGATGT TGGGTTAAGT CCCGCAACGAGCGCAACCCT TGTCATTAGT TGCTACATTT AGTTGAGCAC TCTAATGAGA CTGCCGGTGA CAAACCGGAGGAAGGTGGGG ATGACGTCAA GTCCTCATGG CCCTTATGGG TAGGGCTTCA CACGTCATAC AATGGTCGGGACAGAGGGTT GCCAAACCGC AAGGTGGAGC TAATCTCATA AACCCGATCG TAGTCCGGAT TGCAGGCTGCAACTCGCCTG CATGAAGTCG GAATCGCTAG TAATCGCGGA TCAGCATGTC GCGGTGAATA CGTTCCCGGGTCTTGTACAC ACCGCCCGTC ACACCATGGG AGTGGGTTTT ACCAGAAGTA GTTAGCCTAA CCGCAAGGGGGGCGATACCA CG
之后在GenBank中进行Blast比对，结果显示，与其序列相似度达到98.56％均为海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)，将其归属为单胞菌类并命名海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1。
实施例3 海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1对I号原油污染水体的降解
试验方法：
(1)海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1菌悬液的制备
在无菌条件下，挑取分离纯化获得的海洋石油降解菌，接种于100mL的牛肉膏蛋白胨液体培养基中，摇床扩大培养48h；其中，牛肉膏蛋白胨液体培养基的成分是：牛肉膏3.0g，蛋白胨10.0g，NaCl 5.0g，营养琼脂15.0g，蒸馏水1000mL，pH 7.4-7.6。pH值用1mol/L的氢氧化钠或1mol/L氯化氢调至要求值。其中，培养基灭菌条件是：温度为121～126℃，时间为25min。
(2)I号原油最大吸收波长的测定
石油及其产品在紫外光区有一定的吸收特征，石油组分中带有苯环的芳香族化合物波长一般为250～260nm，而带有共轭双键的化合物波长一般在215～230nm之间，有研究表明，在使用紫外分光光法测定时，255nm左右为原油和重质油的选择范围，225nm左右与为轻质油及炼油厂的油品的选择范围。在100mg/L浓度下，依据获得的波长与吸光度数据，绘制供试I号原油的波长-吸光度曲线如图3所示，其中，I号原油采自延长石油集团七里洞采油场集油站，密度为0.65g/mL。
(3)I号原油标准曲线的绘制
分别取0、2、2.5、5、6、7mg I号原油于50mL比色管中，用石油醚定容，此时的浓度分别为0、40、50、100、120、140mg/L，在258nm波长下，以石油醚为参比溶液，测定标准浓度的吸光度。横坐标为浓度(mg/L)，纵坐标为吸光度。绘制I号原油的浓度(mg/L)-吸光度(A)的标准曲线如图4所示。
(4)原油降解率的测定
取扩大培养的6-10-1菌悬液3mL，接种于100mL含油无机盐液体培养基中，含油无机盐培养基的成分是：NaNO3 1.5g，(NH4)2SO4 1.5g，K2HPO4 1g，MgSO4·7H2O 0.5g，KCl0.5g，FeSO4·7H2O 0.01g，CaCl2 0.002g，蒸馏水1000mL，I号原油1.5mL，pH 7.0；在30℃，120rpm恒温水浴振荡器中培养7d。培养液用5:1(V/V)的硫酸溶液调节pH值为2-3，加入甲醇2-4mL，用3×15mL的石油醚(60-90℃)萃取三次，萃取液经无水硫酸钠干燥后转入50mL容量瓶并定容。
将石油醚萃取液经系列稀释后，以石油醚为参比，通过紫外分光光度法测定其相应的吸光度，根据I号原油的浓度(mg/L)-吸光度的标准曲线，确定石油醚提取液相应样品的浓度，依据浓度计算降解效率。
原油降解率的计算方法参考以下公式：
η(％)＝(1-Ct/Co)×100％
其中：η-原油降解率；Ct-菌株存在下原油浓度；Co-对照原油浓度。
试验结果：
按照上述计算公式计算得本实施例的海洋石油降解菌(Advenellakashmirensis)6-10-1对原油污染水体的降解率为75.85％。
实施例4 海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1对II号原油污染水体的降解
试验方法：
(1)海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1菌悬液的制备
同实施例3。
(2)II号原油标准曲线的绘制
同实施例3。II号原油采自长庆油田，密度为0.87g/mL。II号原油的浓度(mg/L)-吸光度(A)的标准曲线如图5所示。
(3)原油降解率的测定
具体的测定方法同实施例3。
试验结果：按照上述计算公式计算得1.2mL和4.2mL的海洋石油降解菌6-10-1菌悬液对II号原油污染水体的周降解率分别为7.03％和17.82％。
实施例5 包埋法制备海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1固体菌剂
海藻酸钠(Sodium alginate，SA)是一种具有前途和广泛类型的自然凝胶，并且被公认为价格便宜和对微生物具有无毒性。添加载体材料能增强机械强度、SA凝胶的耐受性以及为微生物提供吸附位点。以海藻酸钠为包埋材料，CaCl2溶液为交联剂，α-乳糖为营养物吸附剂。
制备方法按照以下步骤进行：
①将4g海藻酸钠、1.5g生物质碳、0.5g的α-乳糖混合，并加入100mL蒸馏水缓缓搅拌，搅拌时注意将活性炭搅拌均匀外，搅拌幅度不宜过大，防止大量气泡进入海藻酸钠溶液，搅拌结束后将该溶液置于121℃条件下高压灭菌20min。
②待灭菌之后，将其冷却至30℃左右，分别加入20mL的按照实施例3中海洋石油降解菌6-10-1菌悬液制备方法所得到的已活化36h的海洋石油降解菌6-10-1菌悬液，分别将其混合均匀，分别得到混合液。
③分别用10mL一次性注射器将混合液挤入质量百分数为4％的CaCl2溶液中，交联24h，形成固定微球，即为包埋法制备的海洋石油降解菌6-10-1固体菌剂。
④过滤，然后用无菌水洗涤三次，浸泡在生理盐水中，4℃保存备用。
实施例6 吸附法制备海洋石油降解菌(Advenella kashmirensis)6-10-1固体菌剂
以生物质材料及其对应生物炭为目标载体，通过吸附法固定原油降解混合菌。
固定方法按照以下步骤进行：
①将1.5g生物质碳加入装有100mL牛肉膏蛋白胨培养基的锥形瓶中，并分别加入20mL的按照实施例3中所得到的已活化36h的海洋石油降解菌6-10-1菌悬液，混合。
②将锥形瓶置于30℃条件下转速为120r/min的摇床中，固定18小时。
③然后在3000rpm条件下离心10min，去掉上清液，将下层沉淀用无菌水水清洗2次。
④将其置于培养皿内于30℃烘箱中烘干，即为吸附法制备的海洋石油降解菌6-10-1固体菌剂，将其浸泡在生理盐水中，4℃保存备用。
实施例7 海洋石油降解菌6-10-1固体菌剂对II号原油污染水体的降解
将实施例5和实施例6所制备的海洋石油降解菌6-10-1固体菌剂用于降解原油污染水体，具体如下：分别取5g包埋法和吸附法制备的海洋石油降解菌6-10-1固体菌剂，分别接入1mL II号原油/100mL原油无机盐培养基中30℃、120r/min恒温培养7d后，测定其对原油的去除效果，并与海洋石油降解菌6-10-1菌悬液对II号原油污染水体的降解率进行对比，结果如表2所示。
表2 海洋石油降解菌6-10-1固体菌剂和菌悬液对II号原油污染水体的降解率
Figure BDA0001196484730000111
由表2可知，海洋石油降解菌6-10-1的固体菌剂对II号原油污染水体也具有降解修复的作用，将其与菌悬液的降解效果相对比，结果表明固体菌剂的降解效果较佳，且吸附法制备的固体菌剂的降解效果优于包埋法制备的固体菌剂的降解效果。
虽然，本说明书中已经用一般性说明及具体实施方案对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。
SEQUENCE LISTING
<110> 长安大学
<120> 一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用
<130> 2016
<160> 1
<170> PatentIn version 3.5
<210> 1
<211> 1402
<212> DNA
<213> 海洋石油降解菌（Advenella kashmirensis）6-10-1
<400> 1
GCAGCGGGAA AGTAGCTTGC TACTTTTGCC GGCGAGTGGC GAACGGGTGA GTAATGTATC 60
GGAACGTGCC CAGTAGCGGG GGATAACTAC GCGAAAGCGT GGCTAATACC GCATACGCCC 120
TACGGGGGAA AGGGGGGGAT CTTAGGACCT CTCACTATTG GAGCGGCCGA TATCGGATTA 180
GCTAGTTGGT GGGGTAAAGG CCTACCAAGG CGACGATCCG TAGCTGGTTT GAGAGGACGA 240
CCAGCCACAC TGGGACTGAG ACACGGCCCA GACTCCTACG GGAGGCAGCA GTGGGGAATT 300
TTGGACAATG GGGGAAACCC TGATCCAGCC ATCCCGCGTG TGCGATGAAG GCCTTCGGGT 360
TGTAAAGCAC TTTTGTCAGG GAAGAAAAGG TTTCGGATAA TACCCGGAAC TGATGACGGT 420
ACCTGAAGAA TAAGCACCGG CTAACTACGT GCCAGCAGCC GCGGTAATAC GTAGGGTGCA 480
AGCGTTAATC GGAATTACTG GGCGTAAAGC GTGCGCAGGC GGTTCGGAAA GAAAGATGTG 540
AAATCCCAGG GCTCAACCTT GGAACTGCAT TTTTAACTAC CGAACTAGAG TATGTCAGAG 600
GGGGGTGGAA TTCCACGTGT AGCAGTGAAA TGCGTAGATA TGTGGAGGAA CACCGATGGC 660
GAAGGCAGCC CCCTGGGATA ATACTGACGC TCATGCACGA AAGCGTGGGG AGCAAACAGG 720
ATTAGATACC CTGGTAGTCC ACGCCCTAAA CGATGTCAAC TAGCTGTTGG GCCCTTCGGG 780
GCTTAGTAGC GCAGCTAACG CGTGAAGTTG ACCGCCTGGG GAGTACGGTC GCAAGATTAA 840
AACTCAAAGG AATTGACGGG GACCCGCACA AGCGGTGGAT GATGTGGATT AATTCGATGC 900
AACGCGAAAA ACCTTACCTA CCCTTGACAT GTCTGGAATC CTGAAGAGAT TTAGGAGTGC 960
TCGCAAGAGA ACCGGAACAC AGGTGCTGCA TGGCTGTCGT CAGCTCGTGT CGTGAGATGT 1020
TGGGTTAAGT CCCGCAACGA GCGCAACCCT TGTCATTAGT TGCTACATTT AGTTGAGCAC 1080
TCTAATGAGA CTGCCGGTGA CAAACCGGAG GAAGGTGGGG ATGACGTCAA GTCCTCATGG 1140
CCCTTATGGG TAGGGCTTCA CACGTCATAC AATGGTCGGG ACAGAGGGTT GCCAAACCGC 1200
AAGGTGGAGC TAATCTCATA AACCCGATCG TAGTCCGGAT TGCAGGCTGC AACTCGCCTG 1260
CATGAAGTCG GAATCGCTAG TAATCGCGGA TCAGCATGTC GCGGTGAATA CGTTCCCGGG 1320
TCTTGTACAC ACCGCCCGTC ACACCATGGG AGTGGGTTTT ACCAGAAGTA GTTAGCCTAA 1380
CCGCAAGGGG GGCGATACCA CG 1402

Claims (4)

1.一种海洋石油降解菌，其特征在于，所述海洋石油降解菌分离自延长原油集团的七里洞采油场集油站落地原油污染土壤中；且已于2016年09月12日保藏于中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.13003；命名为海洋石油降解菌Advenella kashmirensis 6-10-1；
所述海洋石油降解菌Advenella kashmirensis 6-10-1的16S rDNA序列如SEQ IDNo.1所示。
2.一种海洋石油降解菌菌剂，其特征在于，以权利要求1所述的海洋石油降解菌Advenella kashmirensis 6-10-1为活性成分，且所述海洋石油降解菌菌剂为固体菌剂。
3.权利要求1所述的海洋石油降解菌Advenella kashmirensis 6-10-1在降解原油污染水体中的应用。
4.权利要求2所述的海洋石油降解菌菌剂在降解原油污染水体中的应用。
CN201611242621.6A 2016-12-29 2016-12-29 一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用 Active CN106635908B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611242621.6A CN106635908B (zh) 2016-12-29 2016-12-29 一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201611242621.6A CN106635908B (zh) 2016-12-29 2016-12-29 一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106635908A CN106635908A (zh) 2017-05-10
CN106635908B true CN106635908B (zh) 2020-04-24

Family

ID=58836180

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201611242621.6A Active CN106635908B (zh) 2016-12-29 2016-12-29 一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106635908B (zh)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107217017B (zh) * 2017-05-27 2020-12-08 青岛农业大学 一株不动杆菌及其在石油降解中的应用
CN108587987B (zh) * 2018-07-23 2020-04-14 北京润世能源技术有限公司 一株微生物采油菌w-y6及其应用
CN109437470B (zh) * 2018-09-30 2021-06-01 中国石油大学(华东) 一种清除海洋溢油的处理工艺
CN109234201B (zh) * 2018-10-25 2020-07-28 北京润世能源技术有限公司 一株微生物采油菌w-y10及其应用
CN112877254B (zh) * 2021-03-10 2022-06-03 闽江学院 一株内生克什米尔小陌生菌及其应用
CN112725249B (zh) * 2021-03-10 2022-05-13 闽江学院 一种促生复合微生物菌剂及其应用

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Draft Genome Sequence of Advenella kashmirensis Strain W13003, a Polycyclic Aromatic Hydrocarbon-Degrading Bacterium;Xinxin Wang等;《Genome Announcements》;20140130;第2卷(第1期);1-2页 *
Isolation and characterisation of crude oil sludge degrading bacteria;Obi LU等;《Springerplus》;20161109;第5卷(第1期);表1-3 *
高效海洋石油降解菌的筛选鉴定及生物修复研究;郝文静;《中国硕士学位论文全文数据库_工程科技Ⅰ辑》;20140615;摘要及第2.3.2、3.3.1、3.3.2节 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN106635908A (zh) 2017-05-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106635908B (zh) 一种海洋石油降解菌、菌剂及其应用
CN106635909B (zh) 一种原油降解混合菌、菌剂及其应用
CN106635910B (zh) 一种缺陷短波单胞菌、菌剂及其应用
CN112980746B (zh) 一株石油降解菌及其应用
CN102277312A (zh) 一株低温降解多环芳烃菌株及其在石油烃污染场地地下水生物修复中的应用
CN105950501B (zh) 一株降解多环芳烃类有机污染物的泛菌
CN110643534B (zh) 一株可降解磷酸三苯酯的失野口鞘氨醇菌
CN111733098B (zh) 一种芽孢杆菌在低温降解石油烃中的应用
CN111748483A (zh) 一株石油烃降解芽孢杆菌及其应用
Papizadeh et al. Growth-phase dependent biodesulfurization of dibenzothiophene by Enterobacter sp. strain NISOC-03
CN104789506B (zh) 一株可降解盐环境中多环芳烃的海旋菌及其应用
CN110964687A (zh) 用于废水处理的复合微生物菌剂的制备方法
CN102174446B (zh) 一种可高效降解苯并[a]芘的短小芽孢杆菌及其应用
CN110564635A (zh) 一株高效降解石油的雷氏普罗维登斯菌l1与应用
CN114107068B (zh) 一种可降解石油烃的真菌及其在降解石油中的应用
CN106754528B (zh) 一种弯曲假单胞菌及其应用
CN104745515A (zh) 一种降解多环芳烃的不动杆菌及其应用
CN116004463A (zh) 苯酚高效降解相关菌群及其应用
CN112300961B (zh) 一种喹啉降解菌株及其在含喹啉废水中的应用
CN1132934C (zh) 德氏假单胞菌菌株及其在脱除含硫有机化合物中硫的应用
CN114134079B (zh) 一株四环素类抗生素降解菌、方法及应用
CN114480221B (zh) 一种短稳杆菌及其在甲醛降解上的应用
CN116855429B (zh) 一株节杆菌和一种复合修复菌剂及其制备方法与应用
CN110373357B (zh) 一种恶臭假单胞菌及其应用
CN105331558A (zh) 一种荧蒽降解菌及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20210923

Address after: 710021 room 1813, the first building of the old third session, No. 60, Weiyang Road, Weiyang District, Xi'an City, Shaanxi Province

Patentee after: Shaanxi Aomei Environmental Protection Technology Co.,Ltd.

Address before: 710064 No. 33, South Second Ring Road, Shaanxi, Xi'an

Patentee before: CHANG'AN University