CN106632718B - 白及多糖的制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种白及多糖的制备方法,首先称取白及饮片,加水浸泡后热浸渍提取,提取液经冷藏、过滤、AB‑8树脂脱色后真空浓缩,再经醇沉、冷藏、过滤、氮气流除乙醇与冷冻干燥,得到白色干燥的白及多糖,其含量为85%左右,水溶性良好。本发明采用热水浸渍法提取白及多糖,避免了水煎煮法提取时过度加热使白及多糖降解与杂质含量较高;解决了传统水煎醇沉的方法存在的白及多糖提取率低、杂质高、色泽差而无法满足现代医疗领域与新型生物材料深入研究开发要求的问题,也解决了目前白及多糖供应不足的问题。
Description
技术领域
本发明属于医药技术领域,具体涉及一种白及多糖的制备方法。
背景技术
白及多糖(bletillastriata polysaccharide,BSP)是从中药白及中提取出的一种水溶性高分子黏性多糖,又被称为白及葡甘露聚糖,由D-葡萄糖和D-甘露糖按照大约1:4的比例组成,且以β型糖苷键聚合形成空间螺旋结构;其平均分子量在65000~150000kDa,溶于水可形成粘稠的凝胶液,从而具有良好的生物黏附性,且对人体极为安全,毒理安全性评价表明白及多糖安全无刺激、无过敏,因而,用途广泛:①可作为食品配料或添加剂,是一种优良的天然食品增稠剂。②白及多糖具有优良的成膜性,可制备水果涂抹保鲜剂,可减少水分蒸发、抑制采后呼吸,达到保鲜目的。③白及多糖且具有抗溃疡、抗炎、抗肿瘤、止血、可促进创面愈合等广泛的药理活性,可发挥协同治疗作用,同时具有黏膜黏附、黏合、缓释、乳化、包囊等功能,是常用的制剂辅料及性能卓越的药用载体。如:以白及多糖为骨架材料,将中药提取物复合到其中,可增加其生物黏附性。④白及多糖无抗原性,且有良好的生物相容性和可降解性,是一种有相当发展前景的生物医学材料,如:用作血管栓塞剂、血浆代用品、体内支架材料等。⑤白及多糖具有收敛、延缓皮肤衰老、增稠、保湿等功效,可用于日化产品中,是一种理想的天然日化添加剂和功能性成分。因此,白及多糖的应用不断扩大,需求量急剧增加。
目前,白及多糖的制备方法主要是从中药材白及中采用水煎醇沉的方法制备,但是,由于传统的煎煮、浓缩与干燥过程使白及多糖不仅受热破坏,且易于氧化而变色,造成白及多糖不仅提取率较低且所得白及多糖色泽较差,无法满足现代医疗领域与新型生物材料深入研究开发的要求。因此,开发一种简单、高效的白及多糖提取方法对于白及多糖的进一步开发研究具有重要意义!
发明内容
本发明的目的是提供一种白及多糖的制备方法,解决了传统水煎醇沉的方法存在的白及多糖提取率低、杂质高、色泽差而无法满足现代医疗领域与新型生物材料深入研究开发要求的问题。
本发明所采用的技术方案是,白及多糖的制备方法,具体是按照以下步骤实施:
步骤1:向白及饮片中加入水浸泡后热浸渍,提取3次并将提取液合并,然后冷藏、静置、分离上清液,沉淀弃掉,得上清液;
步骤2:称取与白及饮片等质量的AB-8大孔吸附树脂,加入步骤1所得上清液中进行脱色,搅拌使AB-8大孔吸附树脂以悬浮状态分散于其中,并维持搅拌状态2h,然后过滤分离出AB-8大孔吸附树脂,得脱色的白及提取液,备用;
步骤3:将步骤2所得脱色的白及提取液真空浓缩,得到清膏,放至室温,加入95%乙醇使含醇量达到70~85%,冷藏、静置、过滤,得到白及多糖粗提物滤饼,备用;
步骤4:将步骤3所得白及多糖粗提物滤饼置于氮气流中除掉乙醇,然后,置于冷冻干燥机进行冷冻干燥,干燥后得白色疏松干燥物,即得。
本发明的特点还在于,
步骤1中水的加入量为白及饮片的8~15倍。
步骤1中浸泡时间为60~90min;热浸渍温度为80~100℃,时间为60~120min。
步骤1中在4℃下冷藏、静置48h。
步骤3中真空浓缩温度为70~85℃。
步骤3中在4℃下冷藏、静置24h。
本发明的有益效果是:
1.本发明采用热水浸渍法提取白及多糖,避免了水煎煮法提取时过度加热使白及多糖降解与杂质含量较高;提取液冷藏静置通过自然沉降使不溶性杂质沉淀而除掉,保证了最终产品的澄明度;使用AB-8大孔吸附树脂除掉提取液中色素,真空浓缩避免了高热与空间环境中氧气对白及多糖的影响;采用氮气流除乙醇与冷冻干燥法干燥,不仅保护白及多糖不被氧化变色,也使最终产品具有良好的水溶性。因此,解决了传统水煎醇沉的方法存在的白及多糖提取率低、杂质高、色泽差而无法满足现代医疗领域与新型生物材料深入研究开发要求的问题,也解决了目前白及多糖供应不足的问题。
2.采用本发明方法制备的白及多糖,其外观为白色、含量高、水溶性良好,是一种天然可降解的医疗与生物新型材料,可广泛应用于日化、制药、医疗与生物等领域的新材料、新产品的深入开发,因此,具有广阔的应用前景。
附图说明
图1是白及多糖微球的电镜扫描图。
具体实施方式
下面结合附图和具体实施方式对本发明进行详细说明。
本发明白及多糖的制备方法,具体包括以下步骤:
步骤1:向白及饮片中加入8~15倍量水,浸泡60~90分钟,于80~100℃下热浸渍提取60~120分钟,提取3次,并将3次提取液合并,于4℃冷藏、静置48h,分离上清液,沉淀弃掉,得上清液;
步骤2:称取与白及饮片等质量的AB-8大孔吸附树脂,加入步骤1所得上清液中进行脱色,搅拌使AB-8大孔吸附树脂以悬浮状态分散于其中,并维持搅拌状态2h,然后过滤分离出AB-8大孔吸附树脂,得脱色的白及提取液,备用;
步骤3:将步骤2所得脱色的白及提取液于70~85℃条件下进行真空浓缩,得到清膏,放至室温,加入95%乙醇使含醇量达到70~85%,4℃冷藏、静置24h,过滤,得到白及多糖粗提物滤饼,备用;
步骤4:将步骤3所得白及多糖粗提物滤饼置于氮气流中除掉乙醇,然后,置于冷冻干燥机进行冷冻干燥,干燥后得白色疏松干燥物,即得。
以下从原理方面说明本发明的关键点所在:
本发明是基于白及多糖的特点以及传统提取方法的不足,采用优化的现代提取技术制备而成。
1.本发明采用的原料药物白及,为兰科植物白及[Bletillastriata(Thunb.)Reichb.f.]的干燥块茎,又名良姜、紫兰。据《本草纲目》记载:“白及别名连及草,甘根,白给。其根白色,连及而生,故曰白及”,其味苦、甘、涩,性平微寒,归肺、胃、肝经。白及具有补肺,收敛止血,消肿生肌的功效。临床主治肺伤咳血,衄血,金疮出血,痈疽肿毒,溃疡疼痛,皮肤皲裂等症。时珍曰“性涩而收,得金秋之令,故能入肺止血,生肌治疮也。”素有“外科最善”之称,是我国传统止血药。现代药理学研究认为其主要有效物质为所含的多糖类成分,即白及多糖(bletillastriata polysaccharide,BSP)。白及多糖是从白及中提取出的一种水溶性高分子黏性多糖,又被称为白及葡甘露聚糖,由D-葡萄糖和D-甘露糖按照大约1:4的比例组成,且以β型糖苷键聚合形成空间螺旋结构;其平均分子量在65000~150000kDa,溶于水可形成粘稠的凝胶液,从而具有良好的生物黏附性,且对人体极为安全,毒理安全性评价表明白及多糖安全无刺激、无过敏,因而,用途广泛:①可作为食品配料或添加剂,是一种优良的天然食品增稠剂。②白及多糖具有优良的成膜性,可制备水果涂抹保鲜剂,可减少水分蒸发、抑制采后呼吸,达到保鲜目的。③白及多糖且具有抗溃疡、抗炎、抗肿瘤、止血、可促进创面愈合等广泛的药理活性,可发挥协同治疗作用,同时具有黏膜黏附、黏合、缓释、乳化、包囊等功能,是常用的制剂辅料及性能卓越的药用载体。如:以白及多糖为骨架材料,将中药提取物复合到其中,可增加其生物黏附性。④白及多糖无抗原性,且有良好的生物相容性和可降解性,是一种有相当发展前景的生物医学材料,如:用作血管栓塞剂、血浆代用品、体内支架材料等。⑤白及多糖具有收敛、延缓皮肤衰老、增稠、保湿等功效,可用于日化产品中,是一种理想的天然日化添加剂和功能性成分。因此白及多糖的应用不断扩大,用药需求急剧增加。
2.本发明采用热水浸渍法提取白及多糖,避免了水煎煮法提取时过度加热使白及多糖降解与杂质含量较高;提取液冷藏静置通过自然沉降使不溶性杂质沉淀而除掉,保证了最终产品的澄明度;使用AB-8大孔吸附树脂除掉提取液中色素,真空浓缩避免了高热与空间环境中氧气对白及多糖的影响;采用氮气流除乙醇与冷冻干燥法干燥,不仅保护白及多糖不被氧化变色,也使最终产品具有良好的水溶性。因此,解决了传统水煎醇沉的方法存在的白及多糖提取率低、杂质高、色泽差而无法满足现代医疗领域与新型生物材料深入研究开发要求的问题,也解决了目前白及多糖供应不足的问题。
实施例1
步骤1:称取质量份白及饮片10份,加入8倍量水,浸泡60分钟,于100℃下热浸渍提取60分钟,提取3次,并将3次提取液合并,于4℃冷藏、静置48h,分离上清液,沉淀弃掉,得上清液;
步骤2:称取与白及饮片等质量的AB-8大孔吸附树脂,加入步骤1所得上清液中进行脱色,搅拌使AB-8大孔吸附树脂以悬浮状态分散于其中,并维持搅拌状态2h,然后过滤分离出AB-8大孔吸附树脂,得脱色的白及提取液,备用;
步骤3:将步骤2所得脱色的白及提取液于70℃条件下进行真空浓缩,得到清膏,放至室温,加入95%乙醇使含醇量达到85%,4℃冷藏、静置24h,过滤,得到白及多糖粗提物滤饼,备用;
步骤4:将步骤3所得白及多糖粗提物滤饼置于氮气流中除掉乙醇,然后,置于冷冻干燥机进行冷冻干燥,干燥后得白色疏松干燥物,即得,以葡萄糖含量折算得本品中白及多糖含量为84.2%。
实施例2
步骤1:称取质量份白及饮片20份,加入10倍量水,浸泡80分钟,于90℃下热浸渍提取90分钟,提取3次,并将3次提取液合并,于4℃冷藏、静置48h,分离上清液,沉淀弃掉,得上清液;
步骤2:称取与白及饮片等质量的AB-8大孔吸附树脂,加入步骤1所得上清液中进行脱色,搅拌使AB-8大孔吸附树脂以悬浮状态分散于其中,并维持搅拌状态2h,然后过滤分离出AB-8大孔吸附树脂,得脱色的白及提取液,备用;
步骤3:将步骤2所得脱色的白及提取液于85℃条件下进行真空浓缩,得到清膏,放至室温,加入95%乙醇使含醇量达到75%,4℃冷藏、静置24h,过滤,得到白及多糖粗提物滤饼,备用;
步骤4:将步骤3所得白及多糖粗提物滤饼置于氮气流中除掉乙醇,然后,置于冷冻干燥机进行冷冻干燥,干燥后得白色疏松干燥物,即得,以葡萄糖含量折算得本品中白及多糖含量为85.6%。
实施例3
步骤1:称取质量份白及饮片30份,加入15倍量水,浸泡90分钟,于90℃下热浸渍提取120分钟,提取3次,并将3次提取液合并,于4℃冷藏、静置48h,分离上清液,沉淀弃掉,得上清液;
步骤2:称取与白及饮片等质量的AB-8大孔吸附树脂,加入步骤1所得上清液中进行脱色,搅拌使AB-8大孔吸附树脂以悬浮状态分散于其中,并维持搅拌状态2h,然后过滤分离出AB-8大孔吸附树脂,得脱色的白及提取液,备用;
步骤3:将步骤2所得脱色的白及提取液于80℃条件下进行真空浓缩,得到清膏,放至室温,加入95%乙醇使含醇量达到70%,4℃冷藏、静置24h,过滤,得到白及多糖粗提物滤饼,备用;
步骤4:将步骤3所得白及多糖粗提物滤饼置于氮气流中除掉乙醇,然后,置于冷冻干燥机进行冷冻干燥,干燥后得白色疏松干燥物,即得,以葡萄糖含量折算得本品中白及多糖含量为86.3%。
实施例4
步骤1:称取质量份白及饮片15份,加入12倍量水,浸泡90分钟,于90℃下热浸渍提取90分钟,提取3次,并将3次提取液合并,于4℃冷藏、静置48h,分离上清液,沉淀弃掉,得上清液;
步骤2:称取与白及饮片等质量的AB-8大孔吸附树脂,加入步骤1所得上清液中进行脱色,搅拌使AB-8大孔吸附树脂以悬浮状态分散于其中,并维持搅拌状态2h,然后过滤分离出AB-8大孔吸附树脂,得脱色的白及提取液,备用;
步骤3:将步骤2所得脱色的白及提取液于75℃条件下进行真空浓缩,得到清膏,放至室温,加入95%乙醇使含醇量达到75%,4℃冷藏、静置24h,过滤,得到白及多糖粗提物滤饼,备用;
步骤4:将步骤3所得白及多糖粗提物滤饼置于氮气流中除掉乙醇,然后,置于冷冻干燥机进行冷冻干燥,干燥后得白色疏松干燥物,即得,以葡萄糖含量折算得本品中白及多糖含量为84.5%。
以下从应用结果进一步说明本发明所产生的有益效果:
1.以白及多糖为骨架材料的沙棘油凝胶乳的制备
处方:沙棘油10mL,白及多糖2.5g,三乙醇胺1.6g,甘油12mL,醋酸氯已定0.05g,硬脂酸1.0g,茉莉香精适量,纯化水加至100mL。
制法:取处方量白及多糖加入适量热纯化水中,待充分溶胀后,经高速分散匀质机匀质;另取干燥洁净的烧杯,加入处方量甘油、醋酸氯已定、三乙醇胺搅拌使充分溶解,加入适量纯化水,与白及多糖凝胶液混合,在70~75℃水浴中保温,得水相;取沙棘油、硬脂酸,在70~75℃水浴中加热至硬脂酸完全溶解,得油相;在保温下,将油相缓缓加入水相,边加边搅拌,至形成均匀的乳剂,加入茉莉香精,搅拌即得。
本品为O/W型凝胶乳,外观为淡黄色,膏体细腻均匀、有光泽,且具有良好的保湿性、涂布性与稳定性。从而解决了沙棘油由于较强的油腻性而不易于直接应用,又易被空气氧化而失活的问题,并改善了其外观,增加了产品的保湿性与稳定性,且易于涂布及清洗,为沙棘油在日化产业的进一步应用提供了一定依据。
2.白及多糖微球的制备
处方:白及多糖1.0g,液体石蜡25mL,司盘-85 2mL,吐温-80 1mL,乙二胺1.8mL,环氧氯丙烷0.6mL。
制法:精密称取处方量白及多糖置于10mL烧杯中,加5mL热纯化水使其充分溶解;量取处方量液体石蜡,司盘-85,吐温-80混合组成油相,置于50mL烧杯中,搅拌30min;然后在搅拌状态下将上述白及多糖溶液分散到油相中继续搅拌30min后,置于0℃冰箱中冷凝20min;随后向其中分别加入乙二胺、环氧氯丙烷,搅拌下交联固化成球。继续搅拌1h后加入石油醚去除油相,异丙醇、丙酮交替洗涤5次,于60℃烘箱中干燥,即得。
所得白及多糖微球外观为黄白色白及多糖微球,如图1所示,表面平整光滑,粒径细小、均匀,平均25±2μm,可作为多种药物的载体材料。
Claims (4)
1.白及多糖的制备方法,其特征在于,具体是按照以下步骤实施:
步骤1:向白及饮片中加入水浸泡后热浸渍,提取3次并将提取液合并,然后在4℃下冷藏、静置48h、分离上清液,沉淀弃掉,得上清液;
浸泡时间为60~90min;热浸渍温度为80~100℃,时间为60~120min;
步骤2:称取与白及饮片等质量的AB-8大孔吸附树脂,加入步骤1所得上清液中进行脱色,搅拌使AB-8大孔吸附树脂以悬浮状态分散于其中,并维持搅拌状态2h,然后过滤分离出AB-8大孔吸附树脂,得脱色的白及提取液,备用;
步骤3:将步骤2所得脱色的白及提取液真空浓缩,得到清膏,放至室温,加入95%乙醇使含醇量达到70~85%,冷藏、静置、过滤,得到白及多糖粗提物滤饼,备用;
步骤4:将步骤3所得白及多糖粗提物滤饼置于氮气流中除掉乙醇,然后,置于冷冻干燥机进行冷冻干燥,干燥后得白色疏松干燥物,即得。
2.根据权利要求1所述的白及多糖的制备方法,其特征在于,步骤1中水的加入量为白及饮片的8~15倍。
3.根据权利要求1所述的白及多糖的制备方法,其特征在于,步骤3中真空浓缩温度为70~85℃。
4.根据权利要求1所述的白及多糖的制备方法,其特征在于,步骤3中在4℃下冷藏、静置24h。
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