KR20160021182A - 줄기세포 동원을 증강하기 위한 방법 및 조성물 - Google Patents

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크리스티앙 드라포
기테 에스. 옌센
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스템테크 인터내셔널, 인크.
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Abstract

본 발명은 피험자에서 줄기세포 동원을 증강시키기 위해 동원화제, 예를 들어, 조혈줄기세포(HSC) 및 골수줄기세포(BMSC)를 사용하는 방법을 제공한다. 한 구현예에서, 과일, 버섯, 미생물, 모계유체 및 이들의 추출물들의 배합 조성물이 사용되어 줄기세포의 트래피킹을 촉진함으로써, 조직 및/또는 기관 내 유지 및 치유의 특정 부위로의 줄기세포의 이주를 유발한다. HSC 및/또는 BMSC의 증가된 순환 및 체내에서 유지 및 천연재생 기전의 부위로의 이주. 후코이단의 투여를 위한 투요 요법 및 줄기세포의 방출 및 순환을 증강시키는 방법이 추가로 제공된다.

Description

줄기세포 동원을 증강하기 위한 방법 및 조성물{METHODS AND COMPOSITIONS FOR ENHANCING STEM CELL MOBILIZATION}
본 발명은 줄기세포의 동원(mobilization)을 강화하기 위한 방법 및 조성물에 관한 것이다.
본원에서 모든 간행물은 마치 각 개별 간행물 또는 특허 출원이 참조로서 편입되는 것으로 특정적으로 및 개별적으로 지시되는 것과 동일한 정도로 참조로서 편입된다. 하기 설명에는 본 발명을 이해하는 데 유용할 수 있는 정보가 포함된다. 본원에 제공된 모든 정보는 선행기술 또는 현재 청구된 발명과 관련된 것, 또는 특이적으로 또는 전적으로 참조된 모든 공보가 선행기술임을 승인하는 것은 아니다
줄기세포들(SC)은 유기체의 전체 수명에 걸쳐 자기 복제를 하고 신체의 다양한 세포 유형들로 분화하는 독특한 능력을 갖는 세포들로서 정의된다. 두 가지 널리 공지된 유형의 줄기세포는 배아 줄기세포와 성체 줄기세포다. 배아 줄기세포(ESC)는 포배라 칭하는 5 내지 10일령의 배아로부터 추출된다. 일단 격리된 ESC는 시험 관내에서 성장하고 다양한 유형의 조직 세포(예, 심장 세포, 간 세포, 신경 세포 및 신장 세포)로 분화하도록 유도되고, 그 후 그것들은 조직을 재생하기 위해 특정 조직들 내로 주입될 수 있다.
성체 줄기세포(ASC)는 다양한 조직의 특화된 세포로 자기 갱신 및 분화될 수 있는 미분화된 또는 원시 세포이며, 출생 후 임의의 살아있는 유기체에서 발견된다. ASC는 다양한 조직, 예컨대 간(난형 세포), 창자 (창자 crypt 줄기세포), 근육(위성 세포), 뇌 (신경줄기세포) 및 최근에 췌장(네스틴양성 췌장줄기세포)에서 단리되고 있다. 탯줄 줄기세포들 및 태반 줄기세포들은 ASC로 간주된다.
조직(조직 줄기세포)에서 발견된 ASC의 역할은, 최근의 연구들이 하나의 조직에서 유래된 ASC가 다른 조직의 특징적인 세포 유형으로 발달할 수 있는 능력을 가질 수 있음을 보고해 왔지만, 그들이 발견되는 조직을 유지하고 복구하는 것이다. 예를 들면, 간 내의 타원형 세포는 실험관 내에서 인슐린 생산 췌장 세포가 되는 능력을 갖는 것으로 나타났다. 그럼에도 불구하고, 일반적인 견해는 국지(local) 줄기세포는 그것이 위치하는 조직의 미미한 치유에 주로 관여된다는 것이다. 큰 부상 또는 퇴행의 경우에, 치유되고 있는 조직에서 발견되는 새로운 조직 세포의 수는 복제 및 분화될 지엽 줄기세포의 용량을 훨씬 초과하고, 이는 다른 부위에서 오는 줄기세포가 회복 과정에 관여되어야 함을 시사한다.
많은 조직이 그 자신의 특정 조직줄기세포의 피험자군을 함유하고 있으나, 주요관심대상인 어떤 ASC는 주로 골수 및 혈액에서 발견되는 것이고, 조직줄기세포는 전통적으로 다른 조직으로의 그것의 분화능에 제한된 것으로 여겨진다. 그러나 골수줄기세포(BMSC)는 최근에 다른 조직의 세포가 될 수 있는 유의미한 능력을 가짐을 보여주었다.
신체의 재생 메커니즘의 응집적, 포괄적인 묘사를 제시간에 추출하는 이들 프로세스들을 동결시키기는 어렵다. 그럼에도 불구하고, BMSC, HSC, 골수 기질 세포(MSC), 다분화능 성체 전구 세포(MAPCs), 매우 작은 배아-형 줄기세포(VSEL), 외배엽-형 줄기세포(ELSC) 또는 할구-형 줄기세포(BLSC)가 신체의 자연 치유 시스템의 광범위한 성분을 구성하든 아니든, 신체 내의 그러한 다른 줄기세포를 단언하기 위해 충분한 정보가 이용될 수 있다. 줄기세포가 광범위한 다양한 세포 유형로 분화할 수 있기 때문에, 그것은 다양한 조직 및 장기의 치유 및 재생 프로세스에서 중요한 역할을 한다. 골수 기질 세포(MSC)를 포함하는 골수 줄기세포는 장기의 조직에서 방출되고, 여러 장기 및 조직으로 이주하도록 피험자의 순환계 또는 면역 체계 내에서 순환하고, 이어서 성숙하고, 최종적으로는 분화된 세포가 된다. 그러므로, 줄기세포 트래피킹(즉, 방출, 순환, 귀환 및/또는 이주)의 증강은 이들 생리적 프로세스들을 증폭할 수 있고, 다양한 병리 상태들에 대한 잠재적인 치료법들을 제공 할 수 있다. 치료적 접근법으로서 줄기세포 동원을 활용하는 조성물 및 방법이 있다. 그러나, 줄기세포의 동원을 촉진하는 기존의 방법은 유의미한 결점, 예를 들어, 좋지 못한 동력학 성능, 고비용, 불편한 투여 방법 및 원치 않는 부작용을 안고 있다. 하나의 선도적인 접근법인 과립구 집락-자극 인자(G-CSF) 또는 그의 재조합 형태들의 주입은 정점의 순환하는 HSC 수를 달성하기 위한 날들을 필요로 한다. 반대 문제가 단지 몇 분 내에 작동하는 인터루킨-8 (IL-8)의 투여에 따라 존재하고, 혈류에서 순환하는 HSC 수준을 상승시키는데 대한 단기 효과를 갖는다. G-CSF 및 상이한 분자, CXCR4 길항제 AMD3100는 유의미한 부작용, 예를 들어, 출혈, 비장 파열, 혈이 섞인 가래, 골장애 등을 초래할 수 있다. 따라서, 부작용 없이 저렴한 비용으로 긍정적인 임상적 혜택들을 얻기 위해 줄기세포 동원화제들을 인간 피험자들에게 전달하는 효과적이고 편리한 방법이 당업계에 필요하다.
따라서, 본 명세서에 개시된 본 발명의 조성물 및 방법은 손상된 조직의 치유 및 치료를 촉진하기 위해 신체 내에서 줄기세포의 방출, 순환, 귀환 및/또는 이주를 강화하고, 그뿐만 아니라 더 큰 활력과 감소된 발병률을 위해, 일부 수준의 세포 손실로 고통 받는 조직들의 재생에 도움을 준다.
발명의 요약
조성물과 방법과 함께 설명되고 도해된 하기 구현예 및 이들의 양상은 예시적이고 실례가 되지만, 범위를 한정하는 것으로 의미되지 않는다. 한 구현예에서, 본 발명은 피험자에서 줄기세포 동원을 증가시키는 방법을 포함하는데, 상기 방법은 줄기세포 동원을 증가시킬 수 있는 동원화제를 제공하는 것 및 상기 피험자에서 줄기세포 동원을 증가시키기에 충분한 양으로 상기 동원화제를 상기 피험자에 투여하는 것을 포함한다. 또 하나의 구현예에서, 상기 동원화제는 하기를 포함하는 군에서 선택된 하나 이상의 하기 성분을 포함하는 조성물이다: 알로에 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯( 헤리시움 에리나세우스 ) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물. 다른 구현예에서, 동원화제는 후코이단이다. 또 하나의 구현예에서, 상기 후코이단은 운다리아 피나티피다(참미역)에서 추출된 것이다. 또 하나의 구현예에서, 상기 후코이단의 양은 250mg이다. 또 하나의 구현예에서, 상기 줄기세포는 골수-유도 줄기세포(BMSC)이다. 또 하나의 구현예에서, 상기 줄기세포는 조혈줄기세포(HSC)이다. 또 하나의 구현예에서, 상기 양의 투여에는 경구 투여가 포함된다. 또 하나의 구현예에서, 상기 경구 투여에는 캡슐 또는 정제의 사용이 포함된다. 다른 구현예에서, 경구 투여는 1일 1회를 초과한다. 다른 구현예에서, 경구 투여는 매일 이행된다. 다른 구현예에서, 상기 캡슐 또는 정제는 하나 이상의 동원화제를 약 50, 100, 150, 200, 250mg 이하의 양으로 포함한다. 다른 구현예에서, 하나 이상의 동원화제를 약 250, 500, 750, 또는 1000mg 이하의 양으로 포함한다. 다른 구현예에서, 상기 캡슐 또는 정제는 알로에 마크로클라다를 750mg 이하로 포함한다. 다양한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 알로에 마크로클라다 750mg 이하 및 하기 중 하나 이상을 1000mg 이하 포함한다: 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 구기자나무( 라이시움 바르바룸 ) 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물. 다양한 구현예에서, 상기 방법은 상기 동원화제의 투여 후, 줄기세포의 트래피킹을 야기한다.. 한 구현예에서, 피험자에게 동원화제를 제공하는 것은 어떤 기간 내, 예컨대 12일 미만, 6일 미만, 3일 미만, 2일 또는 1일 미만 내에, 피험자의 줄기세포의 방출을 증강시킨다. 대안적 구현예에서, 기간은 투여 이후에, 12시간 이내, 6시간, 약 4시간 이내, 약 2시간 이내, 또는 약 1시간 이내이다. 다양한 구현예에서, 투여 약 1, 2, 또는 3시간 후부터, 줄기세포가 순환계로 방출된다. 또 하나의 구현예에서, 방출된 줄기세포는 순환계에 진입하여 피험자의 체내에서 순환하는 줄기세포의 수를 증가시킨다. 다른 구현예에서, 정상적인 기준선과 비교하여 순환 줄기세포의 숫자에서 백분율 증가는 대조군과 비교하여 약 25%, 약 50%, 약 100% 또는 약 100% 이상 증가이다. 한 구현예에서, 대조군은 동일한 피험자로부터 기준선 값이다. 다른 구현예에서, 대조군은 처리되지 않은 피험자에서, 또는 위약 또는 약리학적 담체로 처리된 피험자에서 순환 줄기세포의 수이다.
본 발명의 또 하나의 구현예는 하기로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 하기 성분을 포함하는 약제학적 조성물을 제공한다: 알로에 또는 이것의 추출물, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물, 및 약제학적으로 허용가능한 담체. 다양한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 알로에를 포함한다. 다양한 구현예에서, 상기 알로에는 알로에 마크로클라다이다. 다양한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 상기의 하나 이상의 성분을 약 50, 100, 150, 200, 250mg 이하의 양으로 포함한다. 다양한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 상기의 하나 이상의 성분을 약 250, 500, 750, 또는 1000mg 이하의 양으로 포함한다. 다양한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 알로에 마크로클라다를 750mg 이하로 포함한다. 다양한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 알로에 마크로클라다 750mg 이하 및 하기 중 하나 이상을 1000mg 이하 포함한다: 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 구기자나무( 라이시움 바르바룸 ) 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물.
도면의 간단한 설명
예시적인 구현예들은 참조된 도면들에 도시된다. 본 명세서에 개시된 구현예들 및 도면들은 제한적이기보다 예시적인 것으로 간주되도록 의도된다.
도 1은 본 발명의 다양한 구현예에 따른 내인성 줄기세포의 동원 및 이주를 묘사한다. 정상적 생리적 조건 하에서 또는 질환 또는 부상에 대한 반응 시, 조혈 줄기세포가 구획, 예컨대 골(A)에서 동원되어 상기 혈류(B)로 순환되고, 상기 신체 (C)의 상이한 부분에서의 치유 및 재생을 촉진하기 위해 조직으로 이주한다.
도 2는 본 발명의 한 구현예에 따라, 줄기세포의 이주와 연관된 단계들의 개략적 예시를 보여주고, CXCR4의 역할을 강조한다.
도 3은, 본 발명의 다양한 구현예에 따라, (A) 전체 라이시움 바르바룸(LB) 과실 및 (B) 초유(Col)의 소비 후, 인간 체내에서 전형적인 시간 경과에 따른 줄기세포 이주를 묘사하는 그래프를 제공한다. 양쪽 생성물의 경우, 상기 얇은 선들은 개별 반응을 나타낸다. LB의 경우, 굵은 점선은 평균 응답을 나타내는 한편, 굵은 선은 45분에 평균 피크 응답을 갖는 응답의 시간 경과를 보여준다. Col에 대해, 모든 참여자들은 60분에 정점이었으므로, 굵은 선들은 응답의 평균 시간 경과를 보여준다.
도 4는 본 발명의 한 구현예에 따라 (A) 버섯(동충하초, 영지, 노루궁뎅이 버섯)의 다당류가 풍부한 분획, 및 (B) 스피룰리나 또는 그의 추출물의 소비 후 인체 내의 줄기세포 이주의 전형적인 시간 경과를 예시하는 그래프를 제공한다.
도 5a, 5b 및 5c는 각각, 본 발명의 구현예에 따라, 라이시움 바르바룸, 초유 및 버섯다당류의 섭취 후, 인간 지원자의 말초혈액에서의 CD34+ 림프구의 비율을 나타내는, 혈액샘플의 유세포 측정 프로파일이다. 상기의 X 축은 줄기세포 마커의 형광세기를 나타낸다. M1 마커는 줄기세포 마커 CD34에 대한 양성을 보여주는 사건들을 지시한다.
도 6은 본 발명의 한 구현예에 따라 LB, Col, 및 버섯 다당류들의 소비 전후에 CD34+ 순환하는 줄기세포들의 표면 상에서 CXCR4의 발현을 예시하는 그래프이다.
도 7은 본 발명의 한 구현예에 따라 라이시움 바르바룸, 초유, 스피룰리나 및 버섯 (동충하초, 영지, 노루궁뎅이 버섯)의 다당류가 풍부한 분획의 소비 후, 전형적인 시간 경과에 따른 인체 내의 줄기세포 이주를 예시하는 그래프를 제공한다.
도 8은 본 발명의 다양한 구현예에 따라, 운다리아 피나티피다에서 추출된 후코이단의 경구 투여 후 인간지원자에서 순환하는 CD34+ 조혈줄기세포의 변화를 묘사한다. 말초혈액 줄기세포의 기준선 수치가 지원자별로 정량화되었다. 그 후, 지원자들은 운다리아 피나티피다로부터 추출된 후코이단 250mg을 섭취하였다. 줄기세포의 수치는 그 후 45, 90 및 180분에 측정되었다. 순환하는 줄기세포의 수는 평균적으로 각각 17%, 23% (P<0.02) 및 32% (P<0.02) 증가하였다.
도 9는 본 발명의 다양한 구현예에 따라, 조류 종, 코르다리아 클라도시폰 (Chordaria cladosiphon )에서 유래된 후코이단을 소비한 결과를 묘사한다. 코르다리아 클라도시폰에서 유래된 후코이단 250mg의 소비는 동일한 조건 하에서 순환하는 줄기세포의 개수의 평균 감소를 야기하였다.
도 10은 본 발명의 다양한 구현예에 따라, 적하수오( 폴리고눔 물티플로룸 ), 블루 - 그린조류 및 후코이단의 조합물을 소비한 결과를 묘사한다. 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)를 포함하는 조합물의 소비는, 동일한 조건 하에서 위약과 비교하여, 순환하는 줄기세포의 수의 일시적 증가를 초래하였다. 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)을 함유하는 상기 조합물은 순환하는 줄기세포의 수를 13±6 % (n=7) (p < 0.05)의 보통 증가를 초래함을 보여주었다. 그 증가는 참여자들 중의 2명에서 25%를 초과하였다.
도 11은 본 발명의 다양한 구현예에 따라, 알로에 마크로클라다에서 유래된 추출물의 경구 투여 후, 인간지원자에서의 순환하는 CD34+ 조혈 줄기세포의 변화를 묘사한다. 줄기세포의 수치가 차후에, 표시된 바와 같이 60, 120, 180 및 240 분에 측정되었는데, 60 내지 120분 시점에 걸쳐 빠른 증가율을 나타내었고, 추후에 그리고 180 및 240 분에 측정한 결과, 빠른 증가율이 지속되었다.
도 12는 토종(indigenous) 펠렛 형태와 비교할 경우, 본 발명의 다양한 구현예에 따른 알로에 마크로클라다의 추출물을 경구 투여 한 후, 인간 지원자의 순환하는 CD45낮음 CD34+ 조혈줄기세포의 변화를 묘사한다. 토종 펠렛(340mg)은 CD45낮음 CD34+ 세포에 어떤 영향도 미치지 않았다. 그러나, 250mg 및 750mg의 수액/겔은 순환하는 CD45낮음 CD34+세포의 수의 증가를 유발하여, 120분에 증가율이 27% 및 32%에 도달하였으나, 이와 같은 효과는 유의성에 미치지 못했다. 250mg 및 750mg의 수액/겔에서 보여진 결과는 어떤 유의미한 차이를 보여주지 않았기 때문에, 함께 모았다. 함께 모은 경우, 수액/겔(n=8)의 데이터는 120분에 순환하는 CD45낮음 CD34+세포의 수의 29.6% 증가율 (p<0.02)을 보여주었다.
도 13은 펠렛의 경구 투여 후, 인간지원자의 순환하는 CD34+ 조혈 줄기세포의 변화를 묘사한다. 토종 펠렛(340mg)은, 비록 유의성에 도달하지 못했지만, 순환하는 CD34+ 세포의 수의 18% 증가율을 유발하였다. 250mg 및 750mg의 수액/겔의 용량은 순환하는 CD34+세포의 수의 증가를 유발하였고, 증가율은 120분에 29.8% 및 32%에 도달하였다. 그러나, 250mg으로 보여진 효과만이 유의성에 도달하였다(p<0.04). 250mg 및 750mg의 수액/겔에서 보여진 결과는 어떤 유의미한 차이를 보여주지 않았기 때문에, 함께 모았다. 수액/겔의 데이터(n=8)는 120분에 순환하는 CD34+세포의 수의 29.9% 증가율 (p<0.001)을 보여주었다.
도 14는 토종 펠렛 형태와 비교했을 때, 본 발명의 다양한 구현예에 따라 알로에 마크로클라다의 추출물을 경구 투여한 후, 인간지원자의 순환하는 CD34+ KDR-조혈 줄기세포의 변화를 묘사한다. 토종 펠렛(340mg)은 120분에 순환하는 CD34+ KDR-세포의 수의 21.9% 증가율(p<0.03)을 유발하였다. 250mg의 용량은 순환하는 CD34+ KDR-세포의 수의 증가를 유발하여, 120분에 42.4%의 증가율 및 180분에 22%의 증가율에 도달하였으나, 이와 같은 효과는 유의성에 미치지 못하였다. 750mg의 용량은 순환하는 CD34+ KDR-세포의 수의 증가를 유발하여, 120분에 47.2%의 증가율 및 180분에 27.2%의 증가율에 도달하였으나, 이와 같은 효과는 유의성에 미치지 못하였다. 250mg 및 750mg의 수액/겔에서 보여진 결과는 어떤 유의미한 차이를 보여주지 않았기 때문에, 함께 모았다. 수액/겔의 모든 데이터(n=8)는 순환하는 CD34+세포의 증가를 보여주었고, 120분에 유의미한 44.8% 증가율(p<0.01) 및 180분에 24.7%의 증가율(p<0.02)에 도달하였다.
도 15는 토종 펠렛 형태와 비교했을 때, 본 발명의 다양한 구현예에 따라, 알로에 마크로클라다의 추출물을 경구 투여한 후, 인간 지원자의 순환하는 CD45- CD31+ KDR+. 조혈줄기세포의 변화를 묘사한다. 토종 펠렛(340mg)은 120분 및 180분에 각각, 순환하는 CD45- CD31+ KDR+세포의 수의 80.6%(p<0.02) 및 69%(p<0.03) 증가를 유발시켰다. 250mg의 용량은 순환하는 CD45- CD31+ KDR+세포의 수의 증가를 유발하여, 120분 및 180분 각각에 32.4% 및 46.8% 증가율에 도달하였으나, 180분에서의 효과(p<0.003)만이 유의성에 도달하였다. 750mg의 용량은 순환하는 CD45- CD31+ KDR+세포의 수의 유의미한 증가를 유발하여, 180분에 75.4% 증가율에 도달하였다(p<0.02). 250mg 및 750mg의 수액/겔에서 보여진 결과는 어떤 유의미한 차이를 보여주지 않았기 때문에, 함께 모았다. 수액/겔의 데이터(n=8)는 180분에 순환하는 CD34+세포의 61.1% 증가율(p<0.004)을 드러냈다.
발명의 상세한 설명
본원에 인용된 모든 참고 문헌들은 완전히 기재된 것처럼 그들의 전문으로서 참고로 인용된다. 달리 정의되지 않는 한, 본 명세서에 사용된 기술 및 과학 용어들은 본 발명이 속하는 당업계의 통상의 기술을 가진 자들에 의해 통상적으로 이해되는 것과 동일한 의미를 갖는다. Allen 등, Remington : The Science and Practice of Pharmacy 22 nd ed., Pharmaceutical Press (September 15, 2012); Hornyak 등, Introduction to Nanoscience and Nanotechnology, CRC Press (2008); Singleton and Sainsbury, Dictionary of Microbiology and Molecular Biology 3 rd ed., revised ed., J. Wiley & Sons (New York, NY 2006); Smith, March’s Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms and Structure 7 th ed., J. Wiley & Sons (New York, NY 2013); Singleton, Dictionary of DNA and Genome Technology 3 rd ed., Wiley-Blackwell (November 28, 2012); 및 Green and Sambrook, Molecular Cloning: A Laboratory Manual 4th ed., Cold Spring Harbor Laboratory Press (Cold Spring Harbor, NY 2012), 가 당해분야의 숙련가에게 본원에 사용된 많은 용어들에 대한 일반적인 가이드를 제공한다. 항체 제조 방법에 대한 참조는, Greenfield, Antibodies A Laboratory Manual 2 nd ed., Cold Spring Harbor Press (Cold Spring Harbor NY, 2013); Koand Milstein, Derivation of specific antibody-producing tissue culture and tumor lines by cell fusion, Eur. J. Immunol. 1976 Jul, 6(7):511-9; Queen and Selick, Humanized immunoglobulins, U. S. Patent No. 5,585,089 (1996 Dec); 및 Riechmann 등, Reshaping human antibodies for therapy, Nature 1988 Mar 24, 332(6162):323-7 참조.
당업자는 본 명세서에서 설명된 것들에 유사한 또는 대등한 많은 방법 및 재료를 인지할 것이며, 이는 본 발명의 실시에 이용될 수 있다. 사실상, 본 발명은 본원에 기재된 방법에 결코 제한되지 않는다. 본 발명을 위해, 하기 용어들은 아래와 같이 정의된다.
본원에 사용되는 "투여하는" 및/또는 "투여한다"는 약제학적 조성물을 환자에 전달하기 위한 임의의 경로를 지칭한다. 전달 경로는 비침습적 경구(입을 통해), 국소 (피부), 경점막(코, 협측/설하, 질, 눈과 직장)과 흡입 경로뿐만 아니라 비경구 경로, 그리고 당분야에 공지된 다른 방법을 포함할 수 있다. 비경구는 안와내, 주입, 동맥내, 경동맥내, 관절내, 심장내, 피내, 근육내, 복강내, 폐내, 척주내, 흉골내, 척수강내, 자궁내, 정맥내, 거미막하, 피막하, 피하, 경점막, 또는 경기관을 비롯하여, 주사와 일반적으로 연관된 전달 경로를 지칭한다. 비경구 경로를 거쳐, 조성물은 주입 또는 주사용 용액 또는 현탁액의 형태, 또는 냉동건조된분말일 수 있다.
본원에 사용되는 "알로에"는 알로에속의 모든 종을 지칭한다. 알로에 종의 예에는, 알로에속 내 약 400종뿐만 아니라, 알로에 바바덴시스, 알로에 아프리카나, 알로에 알비다 , 알로에 알비플로라 , 알로에 아르보레스켄스 , 알로에 아르겐티카우다 , 알로에 아리스타타 , 알로에 아우사나 , 알로에 바이네시이 , 알로에 발리이 , 알로에 캄페리 , 알로에 캐피타타 , 알로에 킬리아리스 , 알로에 콤믹스타 , 알로에 코랄리나 , 알로에 데윈테리, 알로에 디코토마 , 알로에 딘테리 , 알로에 에미넨스 , 알로에 에리나케아 , 알로에 엑스켈사 , 알로에 페록스 , 알로에 포르베시이 , 알로에 그라실리스 , 알로에 해만티폴리아 , 알로에 헬레내 , 알로에 헤레로엔시스 , 알로에 인디카, 알로에 이네르미스 , 알로에 인양겐시스 , 알로에 유드디이 , 알로에 킬리피엔시스 , 알로에 카미에센시스 , 알로에 마쿨라타 , 알로에 마크로클라다알로에 마르로티이 , 알로에 나미벤시스 , 알로에 나이에리엔시스 , 알로에 페그레래 , 알로에 페르폴리아타 , 알로에 플리카틸리스 , 알로에 폴리파일라 , 알로에 사포나리아, 알로에 스코비니폴리아 , 알로에 신카타나 , 알로에 슬라데니아나 , 알로에 스쿠아로사 , 알로에 스트리아툴라 , 알로에 숙코트리나 , 알로에 수잔내 , 알로에 테누이오르 , 알로에 트라스키이 , 알로에 바리에가타, 알로에 베라, 알로에 비리디플로라, 알로에 불가리스, 알로에 윌디이가 포함된다.
"초유"는 본원에서 이용된 바와 같이, 젖분비의 첫 수일 동안 암컷 포유동물의 유선에 의해분비된 액체를 지칭하고, 이것이 소화 과정에 의해 파괴되지 않도록 하는 다양한 영양소와 단백질분해효소 저해제를 내포한다. 인간은 출산 후 첫 2일 이내에 상대적으로 소량의 초유를 생산하지만, 소는 약 9 갤런의 초유를 생산한다. 초유는 전달 인자, PRP, IGF-1, n-아세틸 뉴라민산, GMP, 핵산 및 디펜신들을 포함하여, 농축된 수준의 중요한 면역 조절제들을 함유한다. 초유 추출물들은 단핵구들에 의한 식균 작용을 활성화하고 다형체 유핵 세포들에서 파열된 반응성 산소를 증가시키는 것으로 나타나고 있다. 초유는 또한 시험관 내 세포-기반분석들에서 천연 킬러 (NK) 세포 활성화를 시동하고, 또한 항-염증성 사이토킨의 분비를 시동하는 것으로 나타났다. 초유에 대한 본 명세서의 참고 문헌들은 또한 그의 유도체들 및 인공 대체물들을 포함한다.
"분화"는 본원에서 이용된 바와 같이, 세포가 생물학적 기능을 수행하기 위해 더욱 전문화되는 과정을 지칭한다. 예로서, 조혈 줄기세포, 조혈 선조체 및/또는 줄기세포는 다분화능 줄기세포로부터, 특징적인 기능을 갖는 특정한 계통 및/또는 세포, 예를 들면, 성숙 체세포에 수임된 세포로 변할 수 있다. 분화는 악성 전환을 겪은 세포에 의해 종종 완전히 또는 부분적으로 상실되는 성질이다.
"증강," "증강한다" 또는 "증강하는"은 본원에서 이용된 바와 같이, 세포 또는 생물체의 특정 매개변수의 성과에서 향상 또는 상기 매개변수에서 다른 생리학적으로 유익한 증가를 지칭한다. 때때로, 현상의 개선은 특정 매개 변수의 측정치들에서 감소로 정량화된다. 예로서, 줄기세포의 이주는 순환계에서 순환 줄기세포의 숫자에서 감소로서 측량될 수 있지만, 이것은 그럼에도 불구하고, 이들 세포가 상실된 또는 손상된 기능을 대체하는 또는 교정하는 세포로 분화하는 것이 포함되지만 이에 국한되지 않는 유익한 생리학적 결과를 수행하거나 또는 조장할 수 있는 신체의 영역으로 이들 세포의 이주에서 증강을 나타낼 수 있다. 한 구현예에서, 증강은 순환 줄기세포의 숫자에서 15%, 20%, 30% 또는 50%보다 큰 감소를 지칭한다. 하나의 특정한 비제한적인 예에서, 줄기세포 이주의 증강은 세포들의 모집단 또는 세포들의 모집단의 응답에서 15%, 20%, 30%, 50%, 75% 또는 그 이상의 감소와 같은 비-조혈 계통의 세포들의 모집단을 초래하거나 또는 그에 의해 측정될 수 있다. 한 구현예에서, 증강된 매개 변수는 줄기세포들의 트래피킹이다. 한 구현예에서, 증강된 매개변수는 기원 조직으로부터 줄기세포의 방출이다. 한 구현예에서, 증강된 매개변수는 줄기세포의 이주이다. 다른 구현예에서, 매개변수는 줄기세포의 분화이다. 다시 또 다른 구현예에서, 매개 변수는 줄기세포들의 귀환이다.
본원에 사용되는 "후코이단"은 조류에서 얻은 황산화된 푸칸들을 기재한다. 후코이단은 하기의 총망라하지 않은 목록에 제공된 바와 같은 광범위한 조류 종으로부터 수득되고 있다: 클라도시폰 오카무라누스 (Cladosiphon okamuranus ), 코르다리아 플라겔리포르미스 ( Chordaria fla겔liformis ), 코르다리아 그라실리스 (Ch. Gracilis ), 사운데르셀라 심플렉스 ( Saundersella simplex), 데스마에스티아 인테르메디아 (Desmaestia intermedia ), 딕타이오시폰 포에니쿨라케우스 ( Dictyosiphon foeniculaceus ), 딕타이오타 디코토마 (Dictyota dichotoma ), 파디나 파보니카 ( Padina pavonica ), 스파토글루스숨 ( Spatoglussum ), 스크로에데리 (schroederi), 아데르노사이스티스 우트리쿨라리스 ( Adernocystis utricularis ), 파일라옐라 리트토랄리스 (Pylayella littoralis ), 아스코파일룸 노도숨 ( Ascophyllum nodosum ), 비푸르카리아 비푸르카타 (Bifurcaria bifurcate), 푸쿠스 비스쿨로수스 ( Fucus . Visculosus ), 푸쿠스 스피랄리스 (F. spiralis ), 푸쿠스 셀르라투스 (F. serratus ), 푸쿠스 에바에스켄스 (F. evaescens ), 히만탈리아 로레아 ( Himanthalia lorea), 히지키아 푸시포르메 ( Hizikia fusiforme ), 펠베티아 카날리쿨라타 ( Pelvetia canaliculata ), 펠베티아 리그티이 (P. wrightii ), 사르가스숨 스테노파일룸 ( Sargassum stenophyllum ), 사르가스숨 호네리 (S. honeri), 사르가스숨 켈마니움 (S. Khellmanium ), 사르가스숨 무티쿰 (S. muticum ), 알라리아 피스툴로사 (Alaria fistulosa ), 알라리아 마르기나타 (A. marginata ), 아르트로탐무스 비피두스 ( Arthrothammus bifidus), 코르다 필름( Chorda film), 엑클로니아 쿠로메 ( Ecklonia kurome ), 엑클로니아 카바 (E. cava ), 에이세니아 비사이클리스 ( Eisenia bicyclis ), 라미나리아 앙구스타타 ( Laminaria angustata ), 라미나리아 브라실리엔시스(L. brasiliensis ), 라미나리아 클로우스토니 (L. cloustoni ), 라미나리아 디기타타 (L. digitata), 라미나리아 자포니카(L. japonica), 라미나리아 렐리기오시아 (L. religiosia ), 라미나리아 사카리나 (L. saccharina ), 마크로시스티스 인테그리폴리아 ( Macrocystis integrifolia ), 마크로시스티스 파이리페라 (M. pyrifera ), 네레오시스티스 루에트케아나 ( Nereocystis luetkeana ), 운다리아 피나티피다 (Undaria pinnatifida ), 페탈로니아 파스키아 ( Petalonia fascia), 스키토시폰 로멘타리아 ( Scytosiphon lomentaria). 실체적인 제약학적 연구는 후코이단에서 수행되었고, 주로 2가지 상이한 형태에 집중하였다: F-후코이단(95%를 초과하여 푸코스의 황산화된 에스테르로 이루어짐) 및 U-후코이단(대략 20%의 글루쿠론산으로 이루어짐) (이들 각각은 본원에서 사용되는 용어 "후코이단"에 포함됨). 후코이단의 제공원에 따라, 후코이단은 일정한 구현예에서 방출 제제로서 역할을 할 수 있고, 반면 다른 구현예에서, 후코이단은 이주화제로서 역할을 할 수 있다.
"조혈 제제"은 본원에서 이용된 바와 같이, 조혈에 영향을 주는 화합물, 항체, 핵산분이자, 단백질, 세포 또는 기타분자를 지칭한다. 분자화제는 자연적으로 발생하는 분자 또는 합성분자일 수 있다. 몇몇 경우들에서, 작용제는 조혈 세포들의 성장, 증식, 성숙, 이주 또는분화 또는 방출에 영향을 미친다.
"조혈 줄기세포"는 본 발명에서 이용된 바와 같이, 적혈구, 백혈구, 거대핵세포, 그리고 혈소판을 비롯한 모든 혈액 세포로 궁극적으로분화할 수 있는 다분화능 줄기세포를 의미한다. 이것은 선조 세포들 또는 아세포들로의분화의 중간 단계를 포함할 수 있다. 용어 "조혈 전구 세포들", "선조 세포들" 또는 "아세포들"은 본 발명에서 교환 가능하게 사용되고 감소된 분화 가능성을 갖는 성숙한 HSC를 기재하지만, 여전히 골수성 또는 림프 계통 등의 특정 계통의 다른 세포들로 성숙할 수 있다. "조혈 전구 세포들"은 적혈구 버스트 형성 단위들, 과립구, 적혈구, 대식세포, 거대 핵 세포 집락 형성 단위들, 과립구, 적혈구, 대식세포, 및 과립구 대식세포 집락-형성 단위들을 포함한다.
본원에서 사용되는 "귀환"은 순환계로부터 조직 또는 장기 내로 이주하는 세포의 과정을 지칭한다. 일부 경우들에서, 귀환은 조직-특이적 접착분자들 및 접착 공정들을 통해 수행된다. 귀환은 골수로의 역 이주를 지칭할 수도 있다.
"단리된 생물학적 성분" (가령, 핵산분이자, 폴리펩티드, 다당류 또는 다른 생물학적분이자)은 본원에서 이용된 바와 같이, 상기 성분이 자연적으로 발생하는 다른 생물학적 성분으로부터 실제적으로분리된 또는 정제된 생물학적 성분을 지칭한다. 핵산과 단백질은 표준 정제 방법에 의해 단리되거나, 숙주 세포에서 재조합 발현되거나, 또는 화학적으로 합성될 수 있다.
"구기자나무(라이시움 바르바룸)" 또는 "구기자나무 (라이시움 바르바룸)"는 본원에서 이용된 바와 같이, 성장된 작고 밝은 오렌지-적색, 타원체 베리 또는 과일을 지칭한다. 한 가지 예시적인 제공원은 중국 북부, 주로 닝샤후이 (Ningxia Hui) 자치구에 있다. 이것은 때때로, 고지 베리 또는 구기자로 지칭된다. 구기자나무 ( 라이시움 바르바룸) 가지과 (솔라나세애)에 속하는데, 이러한 가지과에는 수백 개의 식물 식품, 예를 들면, 감자, 토마토, 가지, 그리고 피망 (파프리카)이 포함된다. 본원에서 사용되는 라이시움 바르바룸 (라이시움 바르바룸 ( Lycium barbarum )) 및 이것의 추출물은 구기자나무 ( 라이시움 바르바룸 )의 모든 분획, 추출물, 또는 단리된 또는 정제된 분자를 지칭한다. 예를 들면, 상기 성분은 구기자나무 ( 라이시움 바르바룸)의 단백질 또는 핵산 또는 다당류, 피토케미컬, 또는 분획이다. 따라서, 본 발명의 어떤 구현예에서, 구기자나무 ( 라이시움 바르바룸 )의 성분은 구기자나무 ( 라이시움 바르바룸 )을 교란하고, 무기 또는 유기용매를 첨가하여, 분획을 수집함으로써 수득된다. 분획물의 특정한 비제한적 실례는 고성능 액체크로마토그래피, 박층 크로마토그래피, 또는 증류를 이용하여 단리된다. 분획화는 구기자나무 ( 라이시움 바르바룸)의 성분의 분자량 또는 소수성에 기반할 수 있다.
"조정" 또는 "조정한다" 또는 "조정하는"은 본원에서 이용된 바와 같이, 한 가지 반응의 또는 합동으로 또는 별개로 두 가지 반응의 상향 조절 (즉, 활성화 또는 자극), 하향 조절 (즉, 저해 또는 억제)을 지칭한다.
"이주"는 본원에서 이용된 바와 같이, 다세포 생물체의 발생과 유지에서 세포의 움직임을 위한 중심 과정을 지칭한다. 세포는 종종 화학주성으로 통상적으로 지칭되는, 특정한 외부 신호에 응하여, 그리고 이들 신호를 향하여 이주한다. 이주는 순환계로부터 조직 또는 장기로 이주하는 세포의 과정을 포함한다. 더욱 특정하게는, 순환 줄기세포는 세포 표면의 접착분자의 발현을 통해 모세관 내피의 표면에 묶이고, 내피와 줄기세포 둘 모두에서 세포골격 변화를 유발하고, 그리고 조직 및/또는 장기 부위로 가는 도중에서 모세관 벽을 통한 움직임을 가능하게 한다. 일부 경우들에서, 귀환은 조직-특이적 접착분자들 및 접착 공정들을 통해 수행된다.
본원에서 사용된 "이주화제"는 순환계로부터 조직 또는 장기로 이주하는 세포의 과정을 증강할 수 있는 동원화제다. 줄기세포의 이주는 예로서, 순환계 또는 면역계 내에서 순환 줄기세포의 감소에 의해, 또는 순환 줄기세포의 맥관, 예를 들면, 모세관 내피의 표면에 대한 귀환, 묶임, 및/또는 혈관외유출과 관계하는, 세포 표면 상에서 표면 마커 및/또는 접착분자의 발현에 의해 증명될 수 있다. 이주화제의 예에는 라이시움 바르바룸에서 추출된 단리된 또는 정제된 성분, 예를 들어 라이시움 바르바룸 추출물의 다당류-풍부 분획(분획 A), 초유, 예를 들어 초유 추출물의 단백질-풍부 분획(분획 B), 후코이단, 예를 들어 조류에서 추출된 단리된 성분 또는 화합물, 예컨대 코르다리아 클라도시폰 ( Chordaria cladosiphon ) 또는 기타 조류를 비롯한 조류 추출물의 다당류-풍부 분획(분획 C)에서 발견되는 화합물, 또는 이것의 추출물, 버섯, 예를 들어 버섯에서 추출된 단리된 성분 또는 화합물, 예컨대 코르디셉스시넨시스 또는 이들의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이들의 추출물, 노루궁뎅이 버섯( 헤리시움 에리나세우스 ) 또는 이들의 추출물, 스피룰리나(예를 들면 아르트로스피라 플레이텐시스 , 아르트로스피라 막시마) 또는 이것의 추출물을 비롯한, 버섯추출물의 다당류-풍부 분획(분획 D)에서 발견되는 화합물이 포함된다. 상이한 구현예에서, 이와 같은 제제는 줄기세포, 예컨대 CD34높음 (CD34+) 세포의 이주에 영향을 미친다. 한 구현예에서, 이주화제는 골수-유도 줄기세포들 및/또는 말초 혈액 내에서 순환하는 조혈 줄기세포들의 수를 감소시킨다. 다른 구현예에서, 이주화제는 순환 줄기세포 상에서 CXCR4의 증강된 발현에 관계한다.
"버섯 다당류"는 본원에서 이용된 바와 같이, 버섯의 다양한 종, 예를 들면, 동충하초 (코르디셉스시넨시스), 헤르시움 에리나세우스, 그리고 영지(가노데르마 루시덤)에서 주로 발견되는 글루칸을 지칭한다. 이것은 또한 동물들 및 인간들에서 타고난 및 세포-매개된 면역 반응들을 증강시킬 수 있고, 항종양 활성들을 나타낼 수 있는 약용 버섯들로부터 수많은 생물 활성 다당류들 또는 다당류-단백질 착물들을 포함한다.
"제약학적으로 허용되는 담체"는 본원에서 이용된 바와 같이, 본 발명에서 유용한 전통적인 제약학적으로 허용되는 담체를 지칭한다.
"다당류"는 본원에서 이용된 바와 같이,분지된 또는분지되지 않은 연쇄에서 배당체로 연결된 약 10개 이상의 단당류 잔기의 중합체를 지칭한다.
"선조체 세포"는 본원에서 이용된 바와 같이, 정의된 세포 계통에서 자손을 낳는 세포를 지칭한다.
본원에 사용되는 줄기세포의 "모집"은 순환계 내에 줄기세포가 조직 또는 장기 내에 특정한 부위로 이주하는 과정을 지칭한다. 모집은 화합물 또는 분자, 예를 들면, 화학유인 신호 또는 세포 수용체에 의해 가능해질 수 있다. 예로서, CXCR4와 SDF-1 둘 모두 줄기세포 귀환과 이주에서 확인된 역할을 갖는다.
"방출 제제"은 본원에서 이용된 바와 같이, 기원 조직으로부터 줄기세포의 방출과 떠남을 증강할 수 있는 동원화제다. 기원 조직으로부터 줄기세포의 방출은 예로서, 순환계 또는 면역계 내에서 순환 줄기세포의 증가에 의해, 또는 기원 조직, 예를 들면, 골수로부터 줄기세포의 떠남에 관련된 마커의 발현에 의해 증명될 수 있다. 예를 들면, 방출 제제는 말초혈액에서의 골수-유도 줄기세포 및/또는 조혈줄기세포의 수를 증가시킨다. 또 하나의 구현예에서, 상기 방출 제제는 말초혈액에서 순환하는, 줄기세포, 예컨대 CD34높음 (CD34+) 세포의 수에 영향을 미친다.
"줄기세포"는 본원에서 이용된 바와 같이, 종말 분화되지 않고, 이런 이유로 다른 유형의 세포를 생산할 수 있는 세포이다. 줄기세포들의 특성은 심장 세포들, 피부 세포들, 또는 신경 세포들과 같이 특정 형상들 및 특화된 기능들을 갖는 성숙한 세포들로 발달할 잠재성이다. 줄기세포는 분화전능성, 전분화능, 그리고 다분화능을 비롯한 3가지 유형으로 나눠진다. "분화전능성 줄기세포"는 체내에서 임의의 세포로 성장하고분화할 수 있고, 따라서, 전체 생물체의 세포와 조직을 형성할 수 있다. "다분화능 줄기세포들"은 1개 이상의 세포 또는 조직 유형으로 자기-갱신 및 분화할 수 있다. "다분화능 줄기세포"는 자기-재생할 뿐만 아니라 성체 세포 또는 조직 유형으로 분화할 수 있는 클론 세포이다. 다분화능 줄기세포분화는 감소된 분화 가능성의 선조 세포들 또는 아세포들로 분화되는 중간 단계를 포함할 수 있지만, 여전히 특정 계보의 다른 세포들로 성숙 할 수 있다. 본원에 사용되는 용어 "줄기세포"는 자가-재생 및 분화가 가능한 전분화능 줄기세포 및 다분화능 줄기세포를 지칭한다. "골수-유도 줄기세포"는 조혈계를 재구성하고, 내피, 간엽 및 전분화능 능력을 보유할 수 있는 골수에서 발견되는 가장 원시적인 줄기세포이다. 줄기세포는 유착성 간질 세포 유형으로서, 또는 세포 표면 상에서 또는 세포가 세포 표면 CD34에 대해 음성인 방식으로 CD34를 발현하는 더욱 분화된 세포로서 골수 내에 체류한다. "성체 줄기세포"는 자기-재생에 대한 상당한 잠재력을 갖고 복수의 세포 유형으로분화할 수 있는, 성체 생물체에서 발견되는 줄기세포의 피험자군이다. 줄기세포들의 다른 예들은 골수 기질 세포들 (MSC), HSC, 다분화능 성체 전구 세포들 (MAPCs), 매우 작은 배아-형 줄기세포들 (VSEL), 외배엽-형 줄기세포 (ELSC) 또는 할구-형 줄기세포 (BLSC)이다.
"줄기세포 순환 약물" (SCCA), "동원화제", 및/또는 "동원 인자"는 본원에서 이용된 바와 같이, 순환계로부터 조직 또는 장기 내로 줄기세포의 방출, 순환, 귀환 및/또는 이주에 영향을 주는 하나 또는 그 이상의 화합물, 항체, 핵산분이자, 단백질, 다당류, 세포, 또는 뉴로펩티드와 기타 신호전달분자가 포함되지만 이들에 국한되지 않는 다른분자를 지칭한다. 분자 약물은 자연 발생 분자 또는 합성분자일 수 있다. 동원화제의 실례에는 "방출 제제", 여기서 방출 제제는 기원 조직으로부터 줄기세포의 떠남을 증강할 수 있고, 그리고 "이주화제"가 포함되고, 여기서 이주화제는 순환계로부터 조직 또는 장기 내로 이주하는 세포의 과정을 증강할 수 있다.
본원에 사용되는 "피험자"에는 모든 동물, 예를 들면 포유동물 및 다른 동물, 예컨대, 비제한적으로, 반려 동물, 농장 동물 및 동물원 동물이 포함된다. 용어 "동물"은 임의의 살아있는 다세포 척추동물 생물체를 포함할 수 있는데, 이러한 범주에는 예로서, 포유동물, 조류(bird), 유인원, 개, 고양이, 말, 소, 설치류 등이 포함된다. 마찬가지로, 용어 "포유 동물"은 인간 및 인간 이외의 포유 동물들 모두를 포함한다.
본원에 사용되는 "다육식물"은 용설란과, 선인장과, 돌나물과, 석류풀과, 협죽도과, 용수과(Didiereaceae), 대극과(Euphorbiaceae), 원추리과(Asphodelaceae), 쇠비름과(Portulacaceae) 내의 모든 식물 종을 지칭한다. 여기에는 추가로 수분 보존에 적응된 저장 기관을 가진 것으로 알려진 식물들이 포함되되, 상기 저장 기관은 잎, 줄기, 뿌리 또는 임의의 다른 위치에 위치한다.
"치료 차원의 유효량"은 본원에서 이용된 바와 같이, 치료되는 피험자에서 원하는 효과를 달성하는데 충분한, 조성물 내에 특정된 조성물, 또는 활성제의 양을 지칭한다. 예로서, 이것은 조직을 보충하거나, 수복하거나, 또는 회춘시키는 줄기세포의 이주를 증강하는데 효과적인 양일 수 있다. 다른 구현예에서, "치료 차원의 유효량"은 혈류 내에 순환 줄기세포의 상승된 수준에 의해 증명될 수 있는 바와 같이, 줄기세포의 트래피킹을 증강하는, 예를 들면, 줄기세포의 방출을 증가시키는데 효과적인 양이다. 또 하나의 구현예에서, 상기 "치료 차원의 유효량"은 순환계에서 다양한 조직 또는 기관으로의 줄기세포의 귀환 및 이주를 증강하는 데 효과적인 양으로, 이는 혈류에서 순환하는 줄기세포 및/또는 귀환 및 이주와 관련된 표면 마커의 발현의 감소된 수치로서 실증될 수 있다. 치료 차원의 유효량은 다양한 인자, 예를 들면 비제한적으로 상기 피험자의 생리적 조건(예컨대, 연령, 성별, 질환 유형 및 단계, 일반적인 신체 조건, 주어진 투여량에 대한 반응성, 원하는 임상 효과) 및 상기 투여 경로에 따라 달라질 수 있다. 임상과 약리학분야에서 숙련자는 일과적인 실험을 통해, 치료 차원의 유효량을 결정할 수 있을 것이다.
"트래피킹"은 본원에서 이용된 바와 같이, 기원 조직으로부터 세포의 움직임, 순환계 또는 면역계 내에서 이주, 그리고 조직 및/또는 장기 내에 부위를 향한 국지화의 과정을 지칭한다. 트래피킹은 또한, 기원 조직으로부터 방출, 예를 들면, 골수로부터 줄기세포의 떠남으로 시작되는 줄기세포 동원을 포함한다.. 트래피킹은 기원 조직으로부터 세포의 움직임, 내피에 접착에 의한 귀환, 이행, 그리고 표적 조직 및/또는 장기 내에서 최종 이주를 더욱 포함한다. 게다가, 트래피킹은 면역계의 세포의 움직임의 과정을 포함할 수도 있다. 트래피킹의 한 가지 특정한 비제한적 실례는 이주로 지칭되는, 줄기세포의 표적 장기로의 움직임이다. 트래피킹의 또 다른 특정한 무제한적 실례는 골수를 떠나고 표적 장기로 이주하는 B-세포 또는 전-B-세포의 움직임이다.
"치료한다," "치료하는" 및 "치료"는 본원에서 이용된 바와 같이, 치료적 처치 및 예방적 또는 방지적 조치 둘 모두를 지칭하고, 여기서 목적은 치료가 궁극적으로 실패하더라도, 표적화된 질환, 질병 또는 장애(집합적으로 "병")를 예방하거나 또는 둔화시키는 (줄이는) 것이다. 치료가 필요한 피험자에는 병을 이미 앓고 있는 피험자뿐만 아니라 병에 걸리기 쉬운 피험자 또는 병이 예방되어야 하는 피험자가 포함될 수 있다.
기재된 바와 같이, 줄기세포는 더 특화된 세포로 분화되는 능력을 갖는 독특한 세포이다. 줄기세포의 하나의 특정 유형인 조혈 줄기세포(HSC)는 많은 상이한 유형의 혈액 세포들로 분화할 수 있다. 또한, HSC는 전형적으로 골수 내에 상주하며, 여기서 세포들의 증식 및 자기-갱신은 HSC가 조혈 시스템의 지원 및 유지에 연관되게 한다. 기존 과학 문헌은 주로 조혈 계통 세포 유도체들로 발전할 HSC의 잠재성에 초점을 맞추어 왔다. 부각되는 증거는 HSC가 비조혈성 조직 특이적 세포들로 역시분화하는 용량을 추가로 확인하였다. 최근에, HSC는 근육 세포, 간세포, 골 세포, 신경교 세포들, 및 뉴런들과 같은 각종 조직-특이적 세포 유형들로분화할 수 있는 능력을 갖는 것으로 밝혀졌다. 결과적으로, HSC는 실질적으로 신체의 모든 세포 유형의 일정한 유지 및 면역 보호에 책임이 있는 혈액 및 면역 세포들을 형성한다.
마찬가지로, 골수줄기세포들 (BMSC)은 다른 조직들의 세포들로 될 현저한 능력을 갖는 것으로 최근에 밝혀졌다. 골수에서, 줄기세포들은 "비대칭 세포분열"로 알려진 공정을 사용하여 복제되고, 에에 따르면 2개의 딸 세포들은 동일하지 않고; 그 중 하나의 세포는 원래의 DNA를 유지하고 골수 내에 남아있는 한편, 나머지 세포는 DNA 사본들을 함유하고 그것이 복구를 필요로 하는 다양한 조직들 내로 이주하는 혈액 내에 방출된다. BMSC는 전통적으로 가소성에 대한 잠재성이 거의 없고, 그것들이 적혈구 세포들, 림프구들, 혈소판, 뼈 및 결합 조직으로 발달하는데 있어서 제한되는 것으로 간주되었다. 그러나, BMSC의 예외적인 가소성을 입증하는 수 많은 과학적 연구가 지난 몇 년간에 걸쳐 발표되고 있다. 예를 들면, 이식 후, BMSC 및 HSC는 근육 세포, 심장 세포, 내피모세관 세포, 간 세포뿐만 아니라 폐, 소화관, 피부 및 뇌 세포가 될 수 있는 능력을 보유함이 입증되었다. 추가적인 실례로서, 일부 연구는 특정 간-유도분자와 접촉 시 간 세포가 될 수 있는 HSC의 능력을 보고하는데, 그러나 이러한 과정은 몇 시간 내에 발생하였다. 간단히, HSC는 반투과성 막(분자들이 통과하기에 충분히 크지만, 세포들이 하나의 구획에서 다른 구획으로 통행하는 것을 방지하기 충분히 작은 공극들, 공극 크기 0.4 μm)에 의해 분리된 정상 또는 손상된 간 조직 중의 하나의 공동-배양되었다. HSC (CD45) 또는 간 세포들(알부민) 중의 하나에 특이적인 분자들을 검출하기 위한 면역 형광분석 방법을 사용하여, 본 연구자들은 상부 구획에 놓인 세포들의 피험자군의 변환에 따를 수 있었다. HSC가 8시간 동안 단독으로 배양되었을 때, 그것들은 CD45만을 발현하였고 어떠한 알부민도 발현하지 않았으며, 이는 어떠한 HSC도 간 세포로 분화되지 않았음을 지시한다. 그러나, HSC가 손상된 간 조직에 노출된 경우, 이들은 빠르게 알부민에 대해 양성화되었다. 경시적으로, CD45에 대해 양성인 세포 집단은, 알부민에 대해 양성인 집단이 증가하기 시작하면서, 감소하기 시작하였다. 알부민-양성 세포들은 그 절차에서 8시간 만큼 일찍 나타났고 48시간에 3.0%로 빈도의 증가가 나타났다. 전환은 최소였고, HSC가 손상되지 않은 간 (부상에 대해 대조군)에 노출되었을 때 지연되었다.
HSC 및 BMSC는 신체의 조혈 및 면역 체계들을 유지하는데 있어서 전통적인 이들의 역할을 넘어 신체 내의 다양한 조직들 및 장기들의 치유 및 재생 공정들에서 중요한 역할을 하기 때문에, 줄기세포 트래피킹의 활성화 및 증강은 이들 생리적 공정들을 증폭시킬 수 있고 다양한 병리 현상들에 대한 잠재적 치료를 제공할 수 있다. HSC 및 BMSC의 고전적인 제공원은 골수이고, 이는 엉덩이, 갈비뼈, 흉골 및 다른 뼈 구조물들을 포함한다. 뼈는 특정 중간엽 세포 유형(조골 세포), 세포외 매트릭스 당단백질들 및 독특하게 풍부한 미네랄 시그니처와의 상호 작용을 포함하여 HSC 및 BMSC에 대한 독특한 규제 미세 환경을 제공한다. 이와 같은 줄기세포 "틈새"는 특정 생리적 조건에 대한 줄기세포의 반응을 안내하는 상당히 많은 핵심분자간 상호작용을 함유한다. 틈새는 줄기세포 활성에 뿌리를 둔 재생 공정들의 변화를 초래하는 조직의 상태의 변화들에 대한 중요한 초점일 수 있다. (Adams and Scadden, 2006)
골수에서 발견된 HSC의 피험자군들을 넘어, HSC는 또한 정상적인 건강한 사람들의 말초 혈류에 존재한다. 적은 수의 줄기 및 전구 세포들이 혈류에서 순환한다는 것이 수십 년 동안 알려져 왔지만, 더욱 최근의 연구들은 더 많은 수의 HSC가 과립구-집락 자극 인자 (G-CSF)와 같은 사이토킨을 공여자에게 주입함으로써 골수로부터 혈액으로 동원되도록 회유될 수 있다. 이러한 진보에도 불구하고, 줄기세포들이 골수로부터 방출되어 조직 및/또는 장기 내의 한 사이트를 향하여 이주하는 자연적인 과정은 완전히 이해되지 않는다. 선도적인 모델은 케모카인, 기질-유도된 인자-1 (SDF-1) 및 그의 특정 수용체인 CXCR4를 포함한다. 이 용량에서, SDF-1의 CXCR4에 대한 결합은 세포막 표면 상의 접착분자들의 증가된 발현을 통해 줄기세포들의 골수에 대한 접착을 유도한다. 따라서 줄기세포들의 골수에 대한 접착의 중단은 줄기세포들의 말초 혈류로의 동원을 촉진하다. 도 1C) 일부 인자, 예컨대 G-CSF 또는 IL-8은 단백질분해효소의 상승된 활성화 또는 SDF-1 리간드의분해를 통해 접착을 방해할 수 있다. 분자의 기타 유형, 예컨대 L-셀렉틴 차단제는 이와 달리, 결국 골수 환경에 줄기세포 접착을 감소시키는 CXCR4 발현을 하향조절할 수 있다. 일반적으로, CXCR4에 대한 SDF-1의 결합은 접착을 촉진시킴으로써, CXCR4 발현을 감소시키는 L-셀렉틴 차단제, 예컨대 황산화된 푸칸이 줄기세포 동원을 유발시킬 수 있다.
말초혈류에 순환하는 줄기세포는 귀환 및 분출을 통해 치유 및 재생이 필요한 조직의 부위에 모집된다. 이와 같은 혈류로의 줄기세포의 동원 및 차후의 조직 부상의 부위로의 이주가 기계적 및 화학적 유인물질 신호의 조합에 의해 초래된다. 예로서, 기계력 또는 다른 인자가 줄기세포의 표면 상에서 L-셀렉틴을 활성화시킬 수 있다. L-셀렉틴들의 활성화는 차례대로 수용체인 CXCR4의 상승된 발현을 촉진할 수 있다. 조직 부상된 부위에서 세포들은 또한 SDF-1 리간드를 분비할 수 있고, 그에 따라 수용체 CXCR4를 발현하는 줄기세포들을 부상 부위로 이끌 수 있다. SDF-1과 CXCR4의 상호 작용은 말초 혈류 내의 줄기세포의 순환을 중단시키기에 충분한 접착을 촉진한다. 도 1B) 이와 같은 모델을 기반으로, L-셀렉틴 차단제, 예컨대 황산화된 푸칸은 HSC를 혈류로 동원하는 핵심적인 능력을 보유할 수 있고, 이어서 차후의 귀환, 분출 및 조직으로의 이주가 유기체 내 세포 및 조직의 재생유지 및 치유를 촉진할 수 있다. G-CSF가 부상된 조직으로부터 방출되고 혈류 중의 그의 존재가 골수로부터 HSC 방출을 시동하는 반면에, L-셀렉틴 차단제들로 구성된 식이 보조제들은 아마도 신체의 자연적인 재생 및 복구 현상을 지원할 수 있다.
알로에 식물 줄기세포가 세포주로서 단리 및 배양될 수 있는 식물 종의 한 예에는 알로에속에서 유래된 식물들이 포함된다. 알로에속의 일원들은 화장품 및 의약품분야에 사용되어 왔고, 어떤 식물, 예컨대알로에 베라는 ‘사막의 백합’, ‘불멸의 식물’, 및 ‘의약 식물’이라 일컬어져 왔다. 알로에에서 추출된 성분들은, 수많은 기타 응용들 중, 치유/상처 치유, 항-염증성 및 항산화제 효과에 사용돼 왔다. 이와 같은 효과들은 알로에속에서 유래된 식물들에 존재하는 생물학적 성분들, 예컨대 글루코만난 및 아세만난에서 초래될 수 있다. 알로에의 이들 생물학적 활성성분은 종종 알로에 식물에서 유래된 잎의 내부에서 발견된 맑고 점도가 높은 겔에서 발견된다. 이와 같은 겔은 99 퍼센트가 물이지만, 광범위한 당단백질 및 다당류, 예컨대 공지된 생물학적 활성성분 중 글루코만난(보습제), 아세만난(면역기능의 조절, 예컨대 대식세포 활성화 및 사이토카인 생산), 브라드키닌아제(항-염증성), 마그네슘락테이트(항소양증 효과)를 함유하는 것으로 알려져 있다. 그러나, 줄기세포재생 및 치유를 촉진하는 데 사용하는 관점에서 알로에추출물의 적용은 대체로 알려지지 않았다.
예컨대, 남아프리카의 알로에 페록스 및 북아프리카의 알로에 베라와 같이 좀 더 잘 알려진 종들과 달리, 마다가스카에 널리 퍼진 알로에 마크로클라다종이 특히 관심대상이다. 줄기가 없는 알로에 마크로클라다는 잎이 넓고 종종 붉은 빛을 띄며, 꽃차례가 직립 비분지형으로, 1,500m에 달하는 마다가스카 남부 중심의 초원에 널리 퍼져 있고, 특정 기후 조건(평균온도(14-22°C) 및 강수량(1,000 mm 초과), 건기 6개월)을 갖는 고원(고도 1,000m 초과)에서 자란다. 알로에 겔이 기재된 약효 목적을 위해 사용되고 있는 반면에, 알로에 마크로클라다 식물 또는 구조 전체가 마다가스카에서 어떤 전통적 의료 행위 중 존재하는 바와 같이, 섭취에 적합한 미정제 제제 또는 캡슐로 압축될 수 있고, 여기서 이들 조성물의 토종 사용은 펠렛을 통한 것으로, 상기 펠렛은 때때로 알로에 마크로클라다의 연소된 식물 재료를 함유한다. 그와 같은 치료적 접근법의 기전이 이해되지 않지만, 생물학적 활성성분이 알로에 겔뿐만 아니라, 뿌리, 잎 또는 기타 식물 알로에 구조에 존재할 잠재성을 시사한다. 일부 구현예에서, 그와 같은 성분을 추출, 단리 또는 정제하여 그것의 치료 효과를 증강시키는 것이 주요 관심사일 수 있다.
알로에 추출물 . 추출물은 당해 분야의 숙련가에게 알려진 모든 방법들 중 어느 하나에 따라 제조될 수 있다. 일반적으로, 추출 절차는 적절히 혼합하면서, 어느 정도의 시간 동안 고체 식물 재료를 용매와 접촉시켜 고형 물질을 용매에 적절히 노출시킴으로써, 추출물 성분들이 상기 용매에 의해 잡아 먹힐 수 있게(taken up) 하는 단계를 수반한다. 용매는 다양한 극성 및 무극성 특징의 성분들을 추출하는 데 사용하기 위한 수성, 알코올성 및 유기 용매일 수 있다. 예로서, 식물 재료는 기계적으로 분쇄되어, 0.5시간 내지 8시간 동안, 4 내지 50oC의 온도에서, 수성 트리스-HCl 완충용액 (pH 6-8)과 접촉하도록 방치되어, 상기 식물 재료에서 수성 성분이 추출된다. 고체 식물 재료와 액체용매의 접촉 후, 고체 불용성 물질이 분리되어, 미정제 추출물 제제로서 액체 및 고체분획을 생성하였다. 액체 및 고체 분획의 분리가 다양한 방법, 예를 들면, 원심분리, 여과, 크로마토그래피, 또는 당해분야의 숙련가에게 알려진 임의의 다른 방법에 따라, 수행될 수 있다. 액체 분획의 분리, 예컨대 원심분리 후 수성 용매의 디캔팅 후, 잔여 고체가 제2용매, 예컨대 알코올성 용매 및 공용매, 예컨대 메탄올 또는 물과 접촉될 수 있다. 다시 한 번의 원심분리는 상기 액체분획에서 불용성 고체 식물 재료 및 가용성 성분을분리하는 수단을 제공한다. 알코올성 추출물에서 이와 같은 성분들은 동결건조기, 스피드 백(speed vac), 회전식 증발기 또는 진공펌프를 사용하여 회수되어, 건조될 수 있다. 유기 추출물은 추가로 적합한 유기용매, 예컨대 디메틸설폭사이드 또는 디클로로메탄의 존재 하에, 상기 잔류 고체를 흔들어 줌으로써 추가로 수득될 수 있다. 지질분획 역시 무극성 생물학적 활성성분을 추출하기 위해, 고친유성 제제의 첨가, 예컨대 리포좀의 첨가에 의해 수득될 수 있다. 각 경우에, 이들 다양한 분리 공정이 사용되어 관심대상인 생물학적 활성성분을 단리할 수 있다. 예를 들면, 알로에에 존재하는 것으로 알려진 생물학적 활성성분에는 글루코만난, 아세만난, 브라디키나아제, 마그네슘락테이트, 살리실산, 항프로스타글란딘, 마로일 글루칸, 베라실글루칸 A, 베라실글루칸 B, 베라실글루칸 C, 만노스-6-포스페이트, 디(2-에틸헥실) 프탈레이트 (DEHP), 칼슘이소시트레이트, 알로인, 알로에-에모딘 및 다른 안트라퀴논 글리코사이드가 포함된다.
적하수오(폴리고눔 물티플로룸). 플레체 플라워 뿌리로 알려져 있는, 적하수오( 폴리고눔 물티플로룸 ( Polygonum multiflorum )) 식물의 건조된 뿌리 괴경은 헤수우 (He shou wu)로 불리는 전통적인 중국 약제로서 이용되고 있는데, 상기 약제는 사형 선고를 받고 식품 또는 음료 없이 투옥된 한 유명한 중국 무관의 설화로부터 TCM에서 명성을 얻었다. 덩굴 같은 잡초, 적하수오( 폴리고눔 물티플로룸)의 잎과 뿌리를 소비함으로써 생존한 이 무관의 체포자들은 이후에, 그의 유해가 윤기가 흐르는 흑색 모발을 여전히 갖고 있다는 것을 발견하였다. 이 이야기의 기원은 출처가 의심스럽지만, 그것들은 적하수오( 폴리고눔 물티플로룸)가 신체의 재생 및 원기를 회복시키는 잠재력으로의 태핑을 위한 중요한 특성들을 갖는다는 오래된 관념을 설명하는 작용을 한다. 최근의 과학적 연구는 적하수오( 폴리고눔 물티플로룸)의 추출물이 소닉 헤지호그 (Shh)와 β-카테닌 발현 (초기 배아형성과 줄기세포 정체성 유지 둘 모두에 관련된 2가지 중요한 경로)의 증가된 발현을 통해, 모낭 성장을 실제로 증강할 수 있다는 것을 확증하였다.
적하수오( 폴리고눔 물티플로룸) 추출물의 추가분석은 상기 식물이 생리활성 화합물의 풍부한 제공원임을 확증하였는데, 2가지 주목할 만한 실례는 안트라퀴논과 유도체 및 히드록시 스틸벤이다. 안트라퀴논과 유도체는 항말라리아제, 완하제, 그리고 화학요법 치료제에 대한 기초로서 역할하였다. 하이드록실스틸벤, 예컨대2,3,5,4'-테트라하이드록시스틸벤-2-O-β-D-글루코사이드는 상이한 신경 퇴행성 질환의 증상을 막는 중요한 신경보호 효과를 제공함이 입증된 바 있다. 종합하면, 이들 결과는 적하수오( 폴리고눔 물티플로룸) 추출물의 성분이 아마도 염증을 조정하고, 암 증식의 위험을 감소시키고, 또는 신체의 세포, 조직, 그리고 장기에 대한 보호 효과를 제공함으로써, 신체를 치유하고 재생하기 위한 중요한 성질을 소유한다는 것을 지시한다.
적하수오(폴리고눔 물티플로룸)에서 이들 성분의 효과가 일정한 특정한 질환에 대해 다소 이해되긴 하지만, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)의 성분이 어떻게 체내에서 줄기세포 활성에 특유하게 영향을 주는지에 관한 지식은 훨씬 적다. 이것은 설명된 바와 같이, 줄기세포가 신체의 자연 치유와 재생 기전에서 필수적인 역할을 수행한다는 것을 고려하면, 놀라운 것이다. 상기 주제에 관한 소수의 기존 연구 중에서 하나는 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 추출물이 마우스에서 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)추출물의 투여 이후에, 골수 줄기세포와 림프구양 선조체의 숫자에서 증가에 의해 증명되는 바와 같이, 줄기세포와 선조체의 증식을 증강한다는 것을 지시한다. 유사하게, 미국 특허 App. No. 12/006,221은 마우스에 투여 후, GM-CSF 및 줄기세포인자 (SCF) 발현의 증가를 기술한다. 이들 결과는 GM-CSF와 SCF 둘 모두 전술한 바와 같이, 줄기세포 이주와 동원에서 중요한 역할을 수행하는 것으로 연루된다는 점을 고려하면, 줄기세포 활성에 대한 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 추출물의 잠재력 효과에 관한 흥미로운 문제를 제기한다.
후코이단. 후코이단은, 정맥내 주사 시 골수의 구획에서 유래된 HSC의 말초혈류로의 이주를 촉진하는 것으로 기록된 황산화된 푸칸 다당류 L-셀렉틴 작용제이나, 이와 같은 효과는 그것의 L-셀렉틴의 자극과 관련 없는 것으로 보인다. 말초 혈류 내에서 HSC의 순환은 체내에서 줄기세포 재생과 수복 기전을 증강하는데 결정적인 단계이다. 황산화된 푸칸으로서, 후코이단은 다양한 종의 조류에서 발견된다. 다른 황산화된 푸칸들은 또한 극피 동물 (예, 성게 및 해삼)와 같은 동물 종들에서 발견되고 있다.
정맥내 후코이단 투여 후 HSC의 유의미하게 상승된 수치를 입증하는 동물 모델에서의 생체내 데이터에도 불구하고, 인간 피험자에서의 양성 임상 효과의 관측은 훨씬 더 제한적이다. 보고된 연구는 중요한 트래피킹 수용체, CXCR4를 발현하는 HSC가, 경구 후코이단 투여 4일 후, 유의미하게 증가하였음을 보여준 바 있다. 그러나, 말초혈액에서 순환하는 HSC의 절대적인 수에서 미미한 변화만이 관측되었다.
기재된 바와 같이, 후코이단(또한 당업계에서 푸코이딘 또는 푸칸설페이트로 공지됨)은 황산화된 푸코스 다당류 L-셀렉틴 리간드이다. 셀렉틴 활성은 중요한 탄수화물 또는 폴리펩타이드 변형, 예컨대 시알화, 푸코실화, 및 황산화에 따라 달라진다. P-와 L-셀렉틴 상에서 황산화된 푸칸, 예를 들면, 후코이단에 대한 결합 부위의 존재는 최소한 부분적으로, 후코이단이 BM으로부터 HSC의 이탈을 증강하는 기전인 것으로 증명되었다. 아마도 좀 더 유의미하게, 황산화된 푸칸, 예컨대 후코이단이, SDF-1에 존재하는 헤파린-결합 도메인에 대한 경쟁적 결합을 통해, 내피 표면 또는 골수 상에서 격리된 SDF-1을 추방하는 것이 보여진 바 있다. 후코이단에 의한 SDF-1의 헤파린-결합 부위의 점유는 세포 표면들에 테더링되는 것을 방지하고, 그에 따라 혈장 중의 순환하는 SDF-1을 증가시킨다. 어떤 특정한 이론에 구속되는 바 없이, 혈류에서 SDF-1 리간드의 증대된 수치는 따라서 BM에서 유래된 HSC를 발현하는 CXCR4 수용체의 이주를 촉진할 수 있다. 도 1C) 이와 같은 모델을 기반으로, 본 발명자들은 L-셀렉틴 리간드, 예컨대 후코이단이 HSC를 동원하는 핵심적인 능력을 보유할 수 있고, 후코이단으로 이루어진 식이 보충물의 경구 투여가 체내에서의 천연 재생 및 치유를 가장 잘 지원할 수 있을 것이라는 가설을 제시하였다.
현저한 단점들이 인간의 치료 용도에 대한 제한들을 제시하였더라도, 동물 모델들에서 생체내 데이터를 강제하는 것은 마우스들 및 영장류들에서 정맥내 (IV) 후코이단 투여 후 순환하는 HSC의 현저하게 상승된 수치들을 보여준다. 최근 보고서들은 후코이단(출처를 알 수 없음)을 마우스들에 주입한지 3시간 후 미처리된 대조군들에 비해, 순환하는 HSC, HSC 전구 세포들 및 유도체 세포 유형들(적혈구 버스트 형성 단위들, 과립구, 적혈구, 대식 세포, 거핵 세포 집락 형성 단위들, 과립구, 적혈구, 대식 세포, 및 과립구 대식 세포 집락-형성 단위들을 포함함)의 수치에 있어서 극적인 12배의 증가를 보이고 있다. HSC, HSC 전구 세포들 및 유도체 세포유형들의 수치들에 있어서 지속되는 증가의 유사한 결과들이 3일 동안 매일 주사한 후 보고되었다. 영장류에서의 후코이단 주사는 또한 투여 6 시간 후 HSC 및 HSC-유도체 수치를 11배 내지 26배 증가시키고, 최대 24시간 후까지 관측가능한 지속된 상승을 보임이 실증된 바 있다. 이들 양성 관측에도 불구하고, 몇가지 문제들이 인간 피험자에서의 후코이단의 치료 용도를 방해할 수 있다. 지속되거나 또는 반복되는 상승 기간들이 치료적인 줄기세포 활성 아래 놓인 줄기세포 귀환 및 관외 유출 공정들을 가능케 하는데 필요할 수 있기 때문에, 순환하는 상승된 HSC 및 골수-유도 줄기세포들의 임시적 및 일시적 효과가 줄기세포 재생 및 복구 메커니즘들의 긍정적인 임상적 이점들을 완전히 실현하는 데는 실패할 것이다. 이러한 제한은 IV 주사를 정기적으로 투여하는 어려움 및 불편함의 관점에서 더 심각해졌다.
인간 피험자에서의 기존 관측은 제한적이고, 인간에서 경구 후코이단 투여에 대한 확보가능한 데이타는 IV 주사를 사용하는 동물연구의 양성 임상을 반영하지 않는다. 다른 이들에 의해 보고된 연구는 중요한 트래피킹 수용체인 CXCR4를 발현하는 HSC의 백분율이 경구 후코이단 투여 12일 후(운다리아 피나티피다에서 유래된 10% w/w 또는 75% w/w 후코이단 추출물을 매일 3g씩), 유의미하게 증가하였음(45% 내지 90%)을 보여주었다. 그러나, 단지 약간의 변화 (~ 12%)가 말초 혈액 중에서 순환하는 HSC의 절대 수에서 관찰되었다 (최대 효과는 후코이단 추출물 투여 후 4일 후에 1.64 내지 1.85 세포들/μl였다). 중요한 점은, 경구 투여를 수반하는 치료적 적용의 경우, 후코이단이 위장의 산성 조건에서 생존할 수 있고, 불리한 부작용을 보이지 않는다는 점이다. 이것은 후코이단의 대사를 수행하는 촉매적 푸코이디나제가 지상 포유동물이 아닌 해양 무척추동물에서만 발견된다는 보고와 일치한다. 이는 지속된 치료 효과를 위해, 후코이단을 비롯한 투여된 황산화된 푸칸의 높은 지속성 및 안정성의 중요한 치료적 혜택을 제공할 수 있다. 혈류 내로의 확산은 위장의 고도의 산성 조건들 외에 먼저 입, 식도, 및 내장에서 효소적 공정들을 생존시켜야 하는 경구 용도로 특히 이상적이다.
본 발명자들은 후코이단의 제공원 및 적절한 용량요법이 경구 후코이단 투여를 통한 HSC 동원을 촉진하기 위한 핵심적인 특징임을 발견한 바 있다. 후코이단은 광범위한 부류의 황산화된 푸칸의 일원으로, L-푸코스에 풍부한 다당류이고, 두 가지 제공원: 조류 및 해양 무척추동물에서 주로 수득된다. 이들 2개의 제공원들로부터 얻은 황산화된 푸칸들은 조성물 및 구조에 있어서 크게 다르다. 분자 구조의 이러한 다양성은 상이한 종들의 조류로부터 후코이단들에 걸쳐 추가로 존재한다. 일반적으로 L-푸코스로 구성된 ~20,000분자량 다당류로서 기재되었지만, 정확한 후코이단 구조들은 부분적으로 제공원 유기체에 의존한다. 예로서, F. 베스쿨로서스로부터 가장 잘-연구된 후코이단은 α(1→3) 글루코시드 결합들 및 위치 4에 황산염 기들을 갖고, 5 단위들 마다 황산화된 푸코스분지들을 갖는 L-푸코스로 주로 구성된 것으로 보고되었다. 이와 대조적으로, 상이한 조류인 아스코필럼 노도섬으로부터 후코이단은 다당류 형성을 위해 대체하고, 아마도 핵자기 공명(NMR) 연구들에서 보여주는 바와 같이 황산화된 분지화 지점들이 거의 없는 반복되는 α(1→3) 및 α(1→4) 글루코시드 결합들을 큰 비율로 갖는다 (Berteau, 2003). 요컨대, 상이한 종들로부터 후코이단들은 구조적으로 독특하고, 이질성이고, 다양하다.
본 발명은 동원화제의 투여에 의해 치료가 필요한 피험자에 넓은 범위의 임상적 이익과 생리학적 이익을 제공하기 위한 새로운 조성물과 방법을 제시한다. 임의의 특정 이론에 의해 한정됨 없이, 본 발명자들은 발명 조성물의 투여를 통해 획득된 유익한 다른 생리학적인 결과가 동원화제의 투여를 후행하는 줄기세포 트래피킹과 이주를 증강하는 것에 기인한다고 생각한다.
하기를 포함하는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분과 함께 동원화제를 포함하는 조성물들이 본원에 기재되었다: 알로에 또는 이것의 추출물, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸, 초유, 버섯다당류(예를 들면, 코르디셉스시넨시스, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) (사자의 갈기), 가노데르마 루시덤(레이시(Reishi), 후코이단(조류에서 선택적으로 추출됨, 예를 들면, 운다리아 피나티피다, 코르다리아 클라도시폰(Chordaria cladosiphon)(리무(Limu))), 스피룰리나 (예를 들면, 아르트로스피라 플레이텐시스, 아르트로스피라 막시마), 이들의 유사체, 이들의 유도체, 이들의 추출물, 이들의 합성 또는 약제학적 등가물, 이들의 분획 및 전술된 항목들의 모든 조합. 동원화제는 하나 또는 그 이상의 조성물에서 함께 합동되거나 또는 이들은 섭생의 일부로서 개별적으로 투여되거나 또는 소비될 수 있다. 이들은 개별 생리학적 효과, 서로와 부가 효과 및/또는 상승 효과, 예를 들면, 방출 제제와 동원화제 둘 모두로서 기능을 가질 수 있다. 일부 구현예에서, 동원화제는 동원화제로서 기능하고, 순환계로부터 조직 또는 장기 내로 이주하는 세포의 과정을 증강할 수 있다. 일부 구현예에서, 동원화제는 방출 제제로서 기능하고, 기원 조직으로부터 줄기세포의 방출과 떠남을 증강할 수 있다. 다양한 구현예에서, 본 조성물은 상기 성분 및 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 약제학적 조성물이다.
한 구현예에서, 동원화제, 예를 들면알로에가 피험자에 투여되는데, 상기 피험자에 알로에 및 다른 동원화제의 혼합물이 제공될 수 있다. 일부 구현예에서, 상기 피험자는 알로에 식물 전체를 소비 및 소화한다. 상기 식물은 신선화, 냉동, 냉동-건조, 탈수, 일부 다른 방식으로 보존될 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 알로에는 식물 전체 및 이것의 추출물 모두를 포괄한다. 한 구현예에서, 상기 동원화제는 알로에의 추출물, 또는 알로에에서 추출된 단리된 성분 또는 화합물, 예컨대 알로에 추출물의 다당류-풍부분획에서 발견되는 화합물이다. 알로에는 단리된 또는 정제된 물질로 단독으로 제공될 수도 있고, 또는 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 조성물의 일부일 수도 있다. 한 구현예에서, 알로에는 이주화제로서 역할을 할 수 있다. 다양한 구현예에서, 상기 알로에는 알로에 마크로클라다이다.
한 구현예에서, 피험자는 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)와 다른 동원화제들의 혼합물을 제공받을 수 있지만, 동원화제, 예를 들면, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)가 피험자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 피험자는 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 전체를 소비 및 소화한다. 상기 식물은 신선화, 냉동, 냉동-건조, 탈수, 일부 다른 방식으로 보존될 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)는 베리(berry) 전체 및 이것의 추출물을 모두 포괄한다. 한 구현예에서, 상기 동원화제는 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)의 추출물, 또는 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)에서 추출된 단리된 성분 또는 화합물, 예컨대 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)추출물의 다당류-풍부분획에서 발견되는 화합물이다. 적하수오(폴리고눔 물티플로룸)는 단리된 또는 정제된 물질로서 단독으로 제공될 수 있고 또는 제약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 부분일 수도 있다.
대안의 구현예들에서, 조류의 추출물이 피험자에게 제공되고 투여된다. 또 하나의 구현예에서, 상기 조류는 식물 전체 및 이것의 추출물 모두를 포괄한다. 다른 구현예에서, 조류는 단리된 또는 정제된 물질로서 단독으로 제공될 수 있고 또는 제약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 부분일 수도 있다. 다른 구현예에서, 추출물은 고도로 황산화된, 다가음이온 가용성 섬유이다. 한 구현예에서, 추출물은 단리된 후코이단이다. 상이한 구현예에서, 후코이단은 단리 이후에 정제된다. 대안적 구현예에서, 다당류분획물이 피험자에 투여된다. 다른 구현예에서, 고도로 황산화된, 다가음이온 가용성 섬유가 피험자에 투여된다. 한 구현 예에서, 단리된 후코이단이 피험자에게 투여된다. 상이한 구현예에서, 정제된 후코이단이 피험자에 투여된다. 한 구현예에서, 운다리아 피나티피다는 피험자에게 투여 후 방출 제제로서 기능할 수 있다.
한 구현예에서, 동원화제, 예로서 구기자나무( 구기자나무(라이시움 바르바룸))가 피험자에 투여되지만, 상기 피험자는 구기자나무( 구기자나무(라이시움 바르바룸)), 그리고 다른 동원화제의 혼합물이 제공될 수도 있다. 일부 구현예에서, 피험자는 전체 구기자나무( 라이시움 바르바룸)베리를 소비하고 소화한다. 베리는 신선한, 동결된, 동결-건조된, 탈수된, 또는 일부 다른 방식으로 보존될 수 있다. 이런 이유로, 구기자나무(라이시움 바르바룸)는 본원에서 설명된 바와 같이, 전체 베리와 이의 추출물 둘 모두를 포괄한다. 한 구현예에서, 동원화제는 구기자나무 (라이시움 바르바룸)의 추출물, 또는 구기자나무( 라이시움 바르바룸)로부터 추출된 단리된 성분 또는 화합물, 예를 들면, 구기자나무( 라이시움 바르바룸) 추출물의 다당류-풍부한 분획물에서 발견된 화합물이다. 구기자나무 (라이시움 바르바룸)는 단리된 또는 정제된 물질로서 단독으로 제공될 수 있고 또는 제약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 부분일 수도 있다.
한 구현예에서, 피험자는 초유와 다른 동원화제들의 혼합물을 제공받을 수 있지만, 초유가 피험자에게 투여된다. 일부 구현예들에서, 피험자는 전체 초유를 소비하고 소화한다. 초유는 신선한, 동결된, 동결-건조된, 탈수된, 또는 일부 다른 방식으로 보존될 수 있다. 이런 이유로, 초유는 본원에서 설명된 바와 같이, 전체 초유와 이의 추출물 둘 모두를 포괄한다. 한 구현예에서, 상기 동원화제는 초유 추추물, 또는 초유에서 추출된 단리된 성분 또는 화합물, 예컨대 초유 추출물의 단백질-풍부분획에서 발견되는 화합물이고, 초유는 단리된 또는 정제된 물질로서 단독으로 제공될 수도 있고, 또는 약제학적으로 허용가능한 담체를 포함하는 조성물의 일부일 수도 있다.
한 구현예에서, 피험자는 버섯들과 다른 동원화제들의 혼합물을 제공받을 수 있지만, 버섯 또는 버섯들의 배합물이 피험자에게 투여된다. 일부 구현예에서, 상기 피험자는 전체 버섯을 소비하고 소화한다. 버섯은 신선화, 동결, 동결-건조, 탈수, 또는 일부 다른 방식으로 보존될 수 있다. 이런 이유로, 버섯은 본원에서 설명된 바와 같이, 전체 버섯과 이의 추출물 둘 모두를 포괄한다. 한 구현예에서, 약물은 동충하초( 코르디셉스 시넨시스) 또는 이의 추출물이다. 한 구현예에서, 동원화제는 영지(가노데르마 루시덤) 또는 이의 추출물이다. 한 구현예에서, 동원화제는 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물이다. 버섯은 단리된 또는 정제된 물질로서 단독으로 제공될 수 있고, 또는 제약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 부분일 수도 있다.
한 구현예에서, 피험자는 조류와 다른 동원화제들의 혼합물을 제공받을 수 있지만, 조류가 피험자에게 투여된다. 일부 구현예들에서, 피험자는 전체 조류를 소비하고 소화한다. 조류는 신선한, 동결된, 동결-건조된, 탈수된, 또는 일부 다른 방식으로 보존될 수 있다. 따라서, 본원에 기재된 조류는 조류 전체 및 이것의 추출물 모두를 포괄한다. 한 구현예에서, 동원화제는 코르다리아 클라도시폰(Chordaria cladosiphon) 또는 이의 추출물이다. 조류는 단리된 또는 정제된 물질로서 단독으로 제공될 수 있고, 또는 제약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 부분일 수도 있다. 한 구현예에서, 조류, 민가지말 큰실말( 코르다리아 클라도시폰 ) 은 이주화제로서 기능할 수 있다.
한 구현예에서, 피험자는 스피룰리나와 다른 동원화제들의 혼합물을 제공받을 수 있지만, 스피룰리나가 피험자에게 투여된다. 일부 구현예들에서, 피험자는 전체 스피룰리나를 소비하고 소화한다. 스피룰리나는 신선화, 동결, 동결-건조, 탈수, 또는 일부 다른 방식으로 보존될 수 있다. 이런 이유로, 본원에서 설명되는 스피룰리나는 스피룰리나 전체와 이의 추출물 모두를 포괄한다. 한 구현예에서, 동원화제는 아르트로스피라 플라텐시스, 아르트로스피라 막시마, 또는 이들의 추출물이다. 스피룰리나는 단리된 또는 정제된 물질로서 단독으로 제공될 수 있고 또는 제약학적으로 허용되는 담체를 포함하는 조성물의 부분일 수도 있다.
다양한 구현예에서, 본 조성물 내 하나 이상의 동원화제 각각의 용량은 1-5, 5-10, 10-25, 25-50, 50-100, 100-150, 150-200, 200-250, 250-300, 300-350, 350-400, 400-450, 450-500, 500-550, 550-600, 600-650, 650-700, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000mg 또는 그 이상의 동원화제를 포함할 수 있다. 예를 들면, 상기 조성물 중 하나 이상의 동원화제는 이들 가변 용량 각각에서 조합될 수 있다. 예를 들면, 상기 조성물 중 대표적인 용량 집합이 표 1에 보여진다. 다양한 구현예에서, 상기 조성물은 1-5, 5-10, 10-25, 25-50, 50-100, 100-150, 150-200, 200-250, 250-300, 300-350, 350-400, 400-450, 450-500, 500-550, 550-600, 600-650, 650-700, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000mg 또는 그 이상의 알로에 또는 이것의 추출물, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸, 초유, 버섯다당류(예를 들면, 코르디셉스시넨시스, 노루궁뎅이 버섯( 헤리시움 에리나세우스)(사자의 갈기), 가노데르마 루시덤 (레이시(Reishi)), 후코이단(조류, 예를 들면, 운다리아 피나티피다, 코르다리아 클라도시폰(리무(Limu))에서 임의로 추출됨), 스피룰리나(예를 들면, 아르트로스피라 플레이텐시스, 아르트로스피라 막시마), 이들의 유사체, 이들의 유도체, 이들의 추출물, 이들의 합성 또는 약제학적 등가물, 이들의 분획 및 모든 전술된 항목들의 조합을 포함한다. 다양한 구현예에서, 상기 알로에는 알로에 마크로클라다이다. 다양한 구현예에서, 상기 용량은 50-250, 250-500, 500-750, 750-1000, 1000-2000, 2000-3000, 3000mg 또는 그 이상의 총량에 대해, 하나 이상의 동원화제를 함유할 수 있다. 다양한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 알로에 마크로클라다를 750mg 이하 및 하기 중 하나 이상을 1000mg 이하 포함한다: 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 구기자나무(라이시움 바르바룸) 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물. 다양한 구현예에서, 총투여량은 1일 이상 매일 투여되거나 또는 하루에 수회 투여된다.
본 발명은 피험자에서 줄기세포의 트래피킹을 증강하는 방법을 더욱 제시한다. 한 구현예에서, 줄기세포의 트래피킹 수준은 피험자의 말초혈액 중 순환하는 조혈줄기세포 (HSC)의 수와 관련이 있다. 또 다른 구현예에서, 줄기세포들의 트래피킹의 수치는 피험자의 말초 혈액 내에서 순환하는 골수-유도 줄기세포들의 수에 관한 것이다. 다양한 구현예에서, 피험자에서 줄기세포의 트래피킹을 증강시키는 것은 동원화제의 치료 차원의 유효량을 투여함으로써, 투여 경로와 무관하게, 상기 피험자에서 줄기세포의 방출, 순환, 귀환 및/또는 이주를 증가시키는 것을 포함한다.
또 하나의 구현예에서, 본원에 제공된 방법은 피험자에서 줄기세포의 트래피킹을 증강시키는데, 이 방법에는 하기를 포함하는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 함유하는 조성물의 치료 차원의 유효량를 투여하는 것이 포함된다: 알로에 또는 이것의 추출물, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 아르트로스피라 플레이텐시스 또는 이것의 추출물, 아르트로스피라 막시마 또는 이것의 추출물, 후코이단 또는 이것의 추출물, 코르다리아 클라도시폰 또는 이것의 추출물, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물(그럼으로써 상기 피험자에서 줄기세포의 트래피킹을 증강시킨다). 한 구현예에서, 줄기세포 트래피킹의 증강은 하기를 포함하는 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 함유하는 조성물의 특정 용량에 대한 줄기세포의 반응을분석함으로써, 측정될 수 있다: 알로에 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 아르트로스피라 플레이텐시스 또는 이것의 추출물, 아르트로스피라 막시마 또는 이것의 추출물, 후코이단 또는 이것의 추출물, 코르다리아 클라도시폰 또는 이것의 추출물, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물 및/또는 코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물(그럼으로써, 상기 피험자에서 줄기세포의 트래피킹을 증강시킨다.)
또 하나의 구현예에서, 피험자에서 줄기세포의 트래피킹을 증강시키는 방법에는 동원화제의 투여 후, 순환하는 줄기세포, 예컨대 줄기세포의 개체군의 일시적 증가가 포함된다. 한 구현예에서, 줄기세포들은 조혈 줄기세포들 (HSC)이다. 또 다른 구현예에서, 줄기세포들은 골수-유도 줄기세포들이다. 다양한 구현예에서, 상기 줄기세포는 CD45낮음 CD34+, CD34+, CD34+ KDR-, 또는 CD45- CD31+ KDR+, CD34+CD133-, CD34+CD133+이거나, 또는 이들 마커의 다양한 하위-조합을 발현한다. 다른 구현예에서, 동원화제의 추출물의 투여는 순환 줄기세포 상에서 CXCR4 발현에서 증가를 야기한다. 한 구현예에서, 피험자에게 동원화제를 제공하는 것은 어떤 기간 내, 예컨대 12일 미만, 6일 미만, 3일 미만, 2일 또는 1일 미만 내에, 피험자의 줄기세포의 방출을 증강시킨다. 대안적 구현예에서, 기간은 투여 이후에, 12시간 이내, 6시간, 약 4시간 이내, 약 2시간 이내, 또는 약 1시간 이내이다. 다양한 구현예에서, 투여 약 1, 2, 또는 3시간 후부터, 줄기세포가 순환계로 방출된다. 또 하나의 구현예에서, 방출된 줄기세포는 순환계에 진입하여 피험자의 체내에서 순환하는 줄기세포의 수를 증가시킨다. 다른 구현예에서, 정상적인 기준선과 비교하여 순환 줄기세포의 숫자에서 백분율 증가는 대조군과 비교하여 약 25%, 약 50%, 약 100% 또는 약 100% 이상 증가이다. 한 구현예에서, 대조군은 동일한 피험자로부터 기준선 값이다. 다른 구현예에서, 대조군은 처리되지 않은 피험자에서, 또는 위약 또는 약리학적 담체로 처리된 피험자에서 순환 줄기세포의 수이다.
또 하나의 구현예에서, 피험자에서 줄기세포의 트래피킹을 증강시키는 방법에는 피험자의 체내에서 순환하는 줄기세포의 수의 일시적 감소가 포함된다. 또 하나의 구현예에서, 피험자에서 줄기세포의 트래피킹을 증강하는 방법에는 순환하는 줄기세포, 예컨대 줄기세포의 개체군의 일시적 감소가 포함된다. 한 구현예에서, 줄기세포들은 조혈 줄기세포들 (HSC)이다. 또 다른 구현예에서, 줄기세포들은 골수-유도 줄기세포들이다. 다양한 구현예에서, 상기 줄기세포는 CD45낮음 CD34+, CD34+, CD34+ KDR-, 또는 CD45- CD31+ KDR+, CD34+CD133-, CD34+CD133+이거나, 또는 이들 마커의 다양한 하위-조합을 발현한다. 다른 구현예에서, 동원화제의 추출물의 투여는 순환 줄기세포 상에서 CXCR4 발현에서 증가를 야기한다. 한 구현예에서, 피험자에게 동원화제를 제공하는 것은 투여 후 어떤 시간 내, 예컨대 약 5시간 미만, 약 4시간 미만, 약 2시간 또는 약 1시간 미만 내에 피험자의 줄기세포의 이주를 증강시킨다. 다른 구현예에서, 상기 동원화제는 초유, 버섯다당류, 예를 들면 코르디셉스시넨시스, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스), 가노데르마 루시덤, 후코이단, 예를 들면 코르다리아 클라도시폰, 스피룰리나, 예를 들면, 아르트로스피라 플레이텐시스 및/또는 아르트로스피라 막시마이다. 다양한 구현예에서, 정상적인 기준선 대비 순환하는 줄기세포의 수의 백분율 감소는, 대조군과 비교할 때, 약 25%, 약 50%, 약 75% 또는 심지어 약 100%일 수 있다. 한 구현예에서, 대조군은 동일한 피험자로부터 기준선 값이다. 다른 구현예에서, 대조군은 처리되지 않은 피험자에서, 또는 위약 또는 약리학적 담체로 처리된 피험자에서 순환 줄기세포의 수이다.
한 구현예에서, 동원화제의 투여는 투여 이후에 약 1 내지 약 3 시간 시점에 순환에서 조직으로 줄기세포의 이주를 유발한다. 순환하는 줄기세포는 순환계를 떠나고, 따라서 피험자의 체내에서 순환하는 줄기세포의 수를 감소시킨다. 정상적인 기준선과 비교하여 순환 줄기세포의 숫자에서 백분율 감소는 대조군과 비교하여 약 15%, 약 30%, 약 50% 또는 약 75% 이상 감소이다. 한 구현예에서, 대조군은 동일한 피험자로부터 기준선 값이다. 다른 구현예에서, 대조군은 처리되지 않은 피험자에서, 또는 위약 또는 약리학적 담체로 처리된 피험자에서 순환 줄기세포의 수이다.
또 하나의 구현예에서, 동원화제의 투여는 피험자의 체내에서 순환하는 줄기세포의 수의 일시적 감소에 의해 측정된 줄기세포의 귀환율을 증가시킨다. 정상적인 기준선과 비교하여 순환 줄기세포의 숫자에서 백분율 감소는 대조군과 비교하여 약 25%, 약 50%, 약 75%, 또는 심지어 약 100%이다. 한 구현예에서, 대조군은 동일한 피험자로부터 기준선 값이다. 다른 구현예에서, 대조군은 처리되지 않은 피험자에서, 또는 위약 또는 약리학적 담체로 처리된 피험자에서 순환 줄기세포의 수이다. 다른 구현예에서, 동원화제의 추출물의 투여는 순환 줄기세포 상에서 CXCR4 발현에서 증가를 야기한다.
다양한 구현예에서, 조성물의 치료 차원의 유효량의 투여에는 1-5, 5-10, 10-25, 25-50, 50-100, 100-150, 150-200, 200-250, 250-300, 300-350, 350-400, 400-450, 450-500, 500-550, 550-600, 600-650, 650-700, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000mg 또는 그 이상의 동원화제를 하나 이상 함유하는 용량의 경구 투여가 포함된다. 예를 들면, 상기 조성물 중 하나 이상의 동원화제는 이들 가변 용량 각각에서 조합될 수 있다. 예를 들면, 상기 조성물 중 대표적인 용량 집합이 표 1에 보여진다. 다양한 구현예에서, 상기 조성물은 1-5, 5-10, 10-25, 25-50, 50-100, 100-150, 150-200, 200-250, 250-300, 300-350, 350-400, 400-450, 450-500, 500-550, 550-600, 600-650, 650-700, 700-750, 750-800, 800-850, 850-900, 900-950, 950-1000, 1000mg 또는 그 이상의 알로에 또는 이것의 추출물, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸, 초유, 버섯다당류(예를 들면, 코르디셉스시넨시스, 노루궁뎅이 버섯( 헤리시움 에리나세우스)(사자의 갈기), 가노데르마 루시덤 (레이시(Reishi)), 후코이단(조류, 예를 들면, 운다리아 피나티피다 , 코르다리아 클라도시폰(리무(Limu))에서 임의로 추출됨), 스피룰리나(예를 들면, 아르트로스피라 플레이텐시스 , 아르트로스피라 막시마),이들의 유사체, 이들의 유도체, 이들의 추출물, 이들의 합성 또는 약제학적 등가물, 이들의 분획 및 모든 전술된 항목들의 조합을 포함한다. 다양한 구현예에서, 상기 알로에는 알로에 마크로클라다이다. 다양한 구현예에서, 상기 용량은 50-250, 250-500, 500-750, 750-1000, 1000-2000, 2000-3000, 3000mg 또는 그 이상의 총량에 대해, 하나 이상의 동원화제를 함유할 수 있다. 다양한 구현예에서, 상기 약제학적 조성물은 알로에 마크로클라다를 750mg 이하 및 하기 중 하나 이상을 1000mg 이하 포함한다: 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 구기자나무(라이시움 바르바룸 ) 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물. 다양한 구현예에서, 총투여량은 1일 이상 매일 투여되거나 또는 하루에 수회 투여된다.
일부 구현예들에서, 동원화제를 투여받은 피험자는 건강하다. 다른 구현예에서, 피험자는 질환 또는 생리학적 장애, 예를 들면, 면역억제, 만성 질병, 외상성 손상, 퇴행성 질환, 감염, 또는 이들의 조합을 앓는다. 일정한 구현예에서, 피험자는 피부, 소화계, 신경계, 림프계, 심혈관계, 내분비계, 또는 이들의 조합의 질환 또는 장애를 앓는다. 특정한 구현예에서, 상기 피험자는 골다공증, 알츠하이머병, 심근경색, 파킨슨병, 외상성 뇌 손상, 다발성 경화증, 간 경변증, 하기 실시예에 기술된 모든 질환 및 병태, 또는 이들의 조합을 앓는다. 동원화제의 치료 차원의 유효량의 투여는 상기 언급된 모든 병태를 예방, 치료 및/또는 그것의 중증도를 줄이거나, 또는 달리 그것과 관련하여 유익한 임상적 혜택을 제공하는데, 본 발명의 방법의 응용 및 및 본 발명의 동원화제의 사용이 이와 같은 용도들에 제한되지 않는다. 다양한 구현예들에서, 신규 조성물들 및 방법들은 무엇보다도 파킨슨 및 당뇨병과 같은 퇴행성 질환뿐만 아니라 뼈, 연골, 힘줄 및 인대 등과 같은 골격 조직들의 치료에서 그 치료적 용도를 찾을 수 있다. 혈액으로부터 조직들로의 줄기세포들의 방출, 순환, 귀환 및/또는 이주를 증강시키는 것은 증가된 복구 효율을 위해 결함 부위로 줄기세포들의 더욱 효율적인 전달로 유도할 수 있다. 본 발명의 신규 조성물들 및 방법들은 또한 유전자 치료적 접근법들과 관련하여 사용될 수 있다.
본 발명은 피험자에 투여를 위한 다양한 조성물을 더욱 제시한다. 한 구현예에서, 투여는 안구, 질, 직장, 비내, 표피, 그리고 경피를 비롯한 국소이다. 한 구현예에서, 투여는 경구이다. 한 구현예에서, 경구 투여를 위한 조성물은분말, 과립, 물 또는 비-수성 매체에서 현탁액 또는 용액, 캡슐, 향주머니, 정제, 로젠지, 또는 비등성제를 포함한다. 또 하나의 구현예에서, 경구 투여용 조성물은 추가로 증점제, 풍미제, 희석제, 유화제,분산 조제 또는 결합제를 포함한다.
동원화제 및 줄기세포 트래피킹을 증강하는 방향으로 동원화제를 이용하는 방법이 본원에서 설명된다. 동원화제 및 순환계로부터 조직 또는 장기 내로 이주하는 줄기세포의 과정을 증강하기 위해 동원화제를 이용하는 방법이 본원에서 더욱 설명된다. 추가로, 방출 제제 및 기원 조직으로부터 줄기세포의 떠남을 증강하기 위해 방출 제제를 이용하는 방법이 본원에서 설명된다. 또한, 말초혈액 순환계로 HSC의 유의미한 방출을 유발하는 동원화제의 경구투여 방법이 본원에 기재된다. 본 발명자들은 줄기세포 동원화제의 효과적인 투여를 증명하고, 따라서 인체에서 줄기세포-관련된 유지와 수복을 증강하기 위한 안전하고, 편의하고 효과적인 방법을 달성하였다. 줄기세포들의 병리학이 매우 중요하고, 흥미롭고, 본 명세서에 개시된 주제에 관한 것이지만, 본 발명의 기본 범위는 혈액으로부터 조직들로 줄기세포들의 방출, 순환, 귀환 및/또는 이주가 손상된 조직을 복구하는데 및 기존 조직의 활력 및 건강을 유지하는데 있어서 중요하다는 것이다. 따라서, 이러한 목적을 달성하기 위한 방법들 및 조성물들의 개발의 중요성은 본 발명의 초점과 목표들 사이에 있다.
따라서, 본 발명은 그 중에서도 특히, 줄기세포의 트래피킹을 뒷받침함으로써 체내에서 자연 조직 치유와 재생을 증강하기 위한 신규한 조성물과 방법을 제시한다. 게다가, 본 발명은 포유동물에서 줄기세포의 트래피킹을 증강함으로써 포유동물에서 건강 문제의 발생을 예방하거나, 늦추거나 또는 만약 그렇지 않으면 감소시키기 위한 신규한 조성물과 방법을 제시한다. 본원에서 개시된 조성물과 방법은 조직 내로 줄기세포의 방출, 순환, 귀환 및/또는 이주를 뒷받침하고, 이런 이유로 조직 수복의 과정을 뒷받침함으로써 현존하는 조직의 재생을 더욱 증가시킬 수 있다.
실시예
하기 실시예는 청구된 발명을 더욱 예증하기 위해 제공되고 요부의 범위를 한정하는 것으로 해석되지 않는다. 특정한 물질이 언급된 정도까지, 단지 예시를 목적으로 하고 발명을 한정하는 것으로 의도되지 않는다. 당업자는 발명 능력의 발휘 없이, 그리고 본 발명의 범위를 벗어나지 않으면서 등가의 수단, 조성물 또는 반응물질을 개발할 수 있다.
실시예 1
라이시움 바르바룸의 생산 및 제조
라이시움 바르바룸으로부터 다당류들은 Luo et at. (2004)의 방법에 의해 제조하였다. (2004). 말린 과일 샘플들 (100g)는 미세분말로분쇄하고, 끓는 물 1.5 l에 넣고 중국 약초에 대한 전통적인 방법으로 2 시간 동안 달였다. 탕액은 조악한 다당류들을 얻기 위해 실온에서 냉각되도록 방치하고, 여과한 후, 이어서 동결-건조하였다.
건조된 조악한 다당류들은 클로로포름:메탄올 용매 (2:1) (v/v) 150 ml로 지질들을 제거하기 위해 3회 환류 하였다. 여과 후, 잔류물을 공기-건조하였다. 수득 생성물을 뜨거운 물(90 ℃) 300 ml에서 3회 추출한 후, 여과하였다. 상기 조합된 여과물을 각각 150 ml의 95% 에탄올, 100% 에탄올 및 아세톤을 사용하여 침전시켰다. 여과 및 원심분리 후, 침전물을 수집하고, 진공-건조시켜 원하는 다당류들 (13 g)을 제공하였다. 다당류의 함량을 페놀황 방법을 측정하였다. 결과는 추출물 중의 다당류들의 함량이 97.54%에 도달할 수 있다는 것을 보여주었다.
실시예 2
라이시움 바르바룸 소비 후 줄기세포의 이주
구기자(라이시움 바르바룸), 또는 이것의 화합물의 소비는 CD34+ 줄기세포의 모집 및 이주를 증강시켰다(순환계에 진입하는 줄기세포의 다이아그램에 대해, 도 2 참조).
건강한 인간 지원자를 식별하고, 라이시움 바르바룸의 소비 전, 그리고 소비 후 최대 4시간 동안 매 시간, 각각의 말초혈액 (순환하는 CD34+ 세포)에서 CD34+ 세포의 비율을 평가하였다. 상기 지원자에게 라이시움 바르바룸의 소비 전 후 어느 시간 동안 신체 및 정신적 활동을 제한할 것을 지시하였다.
지원자 각각에게 건조된 라이시움 바르바룸 5g 또는 라이시움 바르바룸 으로부터 추출된 다당류 1g을 제공하였다. 각각의 지원자로부터 얻은 전체 혈액 샘플들 중의 적혈구들은 FACS 용균 용액을 사용하여 용해시켰다(Beckton Dickenson, 산 호세, 캘리포니아). 나머지 세포들은 형광 이소티오시아네이트로 콘주게이트된 모노클로날 항체 HPCA-2에 의해 세척하고 염색하였다. 샘플들은 1% 포르말린에 고정하고, FacsCalibur 유세포분석기(Becton Dickenson, San Jose, Calif.) 및 CellQuest 소프트웨어(Becton Dickenson, 산 호세, 캘리포니아)를 사용하여 유동 세포 계측법에 의해 분석하였다.
도 3a는 라이시움 바르바룸의 소비가 순환하는 줄기세포의 일시적인 급감을 유발함을 보여준다. 특히, X-축은 대조군 수치의 백분율로 표현되는, 라이시움 바르바룸 섭취 후 전형적인 실험의 시간 경과를 보여준다. 섭취 시에, 순환하는 CD34+ 세포들의 비율은 대조군과 동일하다. 순환하는 CD34+ 세포의 피크 감소를 소비 약 1~2시간 후 관측하였다. 이 시점에, 순환하는 CD34+ 세포의 수가 30% 감소하여, 대조군 값을 밑돌았다. 라이시움 바르바룸 섭취 후 4시간까지, 순환하는 CD34+ 세포들은 기준선 값으로 회귀되었다. 순환하는 줄기세포들의 수의 감소는 순환하는 줄기세포들의 막 상의 CXCR4의 발현의 증가에 의해 수반되었다 (도. 6).
그러므로, 구기자(라이시움 바르바룸) (또는 라이시움 바르바룸의 생물학적 성분)는 조직들로의 순환으로부터 내인성 줄기세포들 (예 CD34+ 세포들)의 이주를 증강시킬 수 있다. 구기자(라이시움 바르바룸) (또는 라이시움 바르바룸의 생물학적 성분)의 소비가 CD34+ 줄기세포의 이주를 유발함으로써(예를 들면, 도 3 참조), 구기자(라이시움 바르바룸)의 이주화제로서의 효능을 입증할 수 있다.
실시예 3
초유 소비 후 줄기세포들의 이주
실시예 2에서와 같이, 그리고 도 3b와 관련하여, 초유의 투여는 줄기세포 이주를 유발하였다.
실시예 4
버섯 소비 후 줄기세포들의 이주
실시예 2에서와 같이, 그리고 도 4와 관련하여, 버섯(코르디셉스시넨시스, 가노데르마 루시덤, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스))의 다당류-풍부분획의 투여가 줄기세포 이주를 유발하였다.
실시예 5
후코이단 또는 스피룰리나 소비 후 줄기세포들의 이주
실시예 2에서와 같이, 조류 해초 예컨대코르다리아 클라도시폰에서 유래된 후코이단의 투여는 비록 간접적이긴 하지만, 궁극적으로는 줄기세포 이주를 도울 수 있는 어떤 유익한 결과를 촉진하였다. 예를 들면, 코르다리아 클라도시폰에서 유래된 후코이단의 소비는 순환하는 CD34+ HSC의 수의 감소를 유발하였고(도 9 참조), 이것은 줄기세포 이주를 지원하는 데 효과적인 역할을 시사한다. 실시예 2에서와 같이, 스피룰리나의 투여는 줄기세포 이주를 유발하였고(도 4b 참조), 구기자(라이시움 바르바룸), 초유 및 버섯과 함께 스피룰리나를 투여하는 것 역시 줄기세포 이주를 유발하였다(도 7).
실시예 6
LB, 초유, 스피룰리나 및 버섯의 배합물의 소비 후 줄기세포들의 이주
표 1에 열거된 다음 구성 성분들을 포함하는 조성물들을 포유 동물 피험자들에게 제공하였다. 이들 조성물들의 투여는 줄기세포 이주를 초래하였다.
표 1
Figure pct00001
실시예 7
골수 유래 줄기세포들은 다중 원거리 조직들을 채운다.
LB, 초유 및 버섯의 혼합물이 어떻게 조직들 내로 줄기세포 이주를 자극할 수 있고, 따라서 신체의 원거리 조직들을 채우고 복구할 수 있는지를 평가하기 위해 마우스 모델을 선택하였다.
수컷 마우스를 골수 공여자 동물로 선택한 한편, 모든 수용체 마우스는 암컷이었다. 암컷 수용체의 경우, 꼬리 정맥 내로 GFP+ 수컷 골수 세포들을 주입하기에 앞서 반치사적으로 방사선을 조사하였다. 두 군의 마우스를 평가하였다. 동물 20마리의 1군에 반-치명적으로 방사선을 조사하고, 골수를 주사한 후, 정상적인 사료를 제공하였다. 동물 20마리의 2군에 역시 반-치명적으로 방사선을 조사하고, 수컷 골수를 주사한 후, 및 LB, 초유 및 버섯의 혼합물을 포함하는 정상적인 사료를 제공하였다. GFP + 세포들의 혼입은 뇌, 심장 근육, 근육들, 간, 췌장, 소장의 섹션들 및 폐 조직에서 검사하였다.
이들 데이터는 LB, 초유 및 버섯의 혼합물을 함유하는 규정식이 다양한 조직들로 골수줄기세포들의 귀환 및 이주를 어디까지 촉진하는지 그 범위를 문서화한다.
실시예 8
외상을 입은 조직의 증가된 줄기세포 다시 채우기
LB, 초유 및 버섯의 혼합물이 어떻게 조직들 내로 줄기세포 이주를 자극할 수 있고, 따라서 신체의 원거리 조직들을 채우고 복구할 수 있는지를 평가하기 위해 마우스 모델을 선택하였다.
수컷 마우스를 골수 공여자 동물로 선택한 한편, 모든 수용체 마우스는 암컷이었다. 암컷 수용체의 경우, 꼬리 정맥 내로 GFP+ 수컷 골수 세포들을 주입하기에 앞서 반치사적으로 방사선을 조사하였다. 두 군의 마우스를 평가하였다. 동물 20마리의 1군에 반-치명적으로 방사선을 조사하고, 골수를 주사한 후, 정상적인 사료를 제공하였다. 동물 20마리의 2군에 역시 반-치명적으로 방사선을 조사하고, 수컷 골수를 주사한 후, 및 LB, 초유 및 버섯의 혼합물을 포함하는 정상적인 사료를 제공하였다.
골수 이식 후 및 급식 실험을 개시하기 며칠 전에, 동물들에게 관상 동맥, 피부의 천공, 레이저-유도된 뇌졸중 또는 다른 부상들의 결찰에 의해 심장 마비를 시동하는, 경골 근육 내의 심장독의 주입과 같은 부상을 입혔다. 두 군의 마우스의 회복은 전신 형광 이미지화를 사용하여 6주 동안 모니터링하였다. 6주 후, 동물들을 희생시키고, 부상된 조직은 조직 회복의 정도를 평가하기 위해 분석하였다. GFP + 세포들의 혼입은 뇌, 심장 근육, 근육들, 간, 췌장, 소장의 섹션들 및 폐 조직에서 검사하였다.
이들 데이터는 LB, 초유 및 버섯의 혼합물을 함유하는 규정식이 다양한 조직들로 골수 줄기세포들의 귀환 및 이주를 어디까지 촉진하고, 따라서 조직 복구 및 치유 과정을 증강시키는지 그 범위를 문서화한다.
실시예 9
줄기세포 동원화제로서 후코이단에 대한 일반 연구 설계
두 가지 소비재를 인간 피험자에게 시험하였다: 운다리아에서 추출된 후코이단 및 위약. 고지에 의한 동의 하에 20세 내지 45세의 건강한 인간지원자에게서 말초정맥 혈액샘플을 수득하였다. 혈액 및 골수 샘플들은 무균 조건 하에서 수득하여, 즉시 처리하였다. 후코이단 또는 위약 1g을 4-6 oz의 물과 함께 지원자들에게 제공하였다. 위약의 외관은 후코이단의 그것과 동일하였고 식물성 캡슐들 내에 캡슐화된 황갈색-염색되고, 미세하게 분쇄된 감자 박편들로 구성되었다.
실시예 10
생체 내 연구 설계
다음의 배제 기준들을 사용하였다: 즉, 20세 미만 및 65세 초과 연령, 임신, 매일의 투약을 요하는심한 천식 및 알레르기, 임의의 공지된 만성 질환 또는 이전의/현재의 성병, 빈번한 기분 전환 약물 사용, 및 손상된 소화 기능(이전의 주요 위장 수술을 포함함). 지원자 3명에 대해, 1주 간격으로 이틀 동안의 연구 일수로 일정을 계획하였다. 생물학적 주기변동의 영향을 최소화하기 위해, 모든 검사를 항상 낮의 동일한 시간(오전 8~11시)에 항상 수행하였다. 다른 유형의 림프구들의 방출 대 귀환에 의한 스트레스로부터의 간섭으로 인해, 시험하는 동안 임의의 신체적 및 정신적 스트레스를 최소화하기 위한 노력이 이루어졌다. 또한, 각 연구 일에, 지원자들은 특정 연구 일에 사람에게 영향을 미칠 수 있는 임의의 예외적인 스트레스 관련된 상황을 결정하는 데 목적을 둔 설문지를 작성하도록 지시받았다. 최종분석에서 배제하기 위한 소정의 기준은 현저한 수면 부족 및 심각한 불안을 포함하였다. 설문 조사를 완료한 후, 지원자들에게 편안하게 의자에 앉아 4 시간 동안 대기하도록 지시하였다. 1시간 후, 기준선 혈액샘플을 채취하였다. 기준선 샘플을 채취한 직후, 소비품을 제공하였다. 소비재의 섭취 후, 60, 90 및 180분에 혈액샘플을 채취하였다. 각 시점에, 혈액 5 ml를 헤파린에 주입하고, 혈액 2 ml를 EDTA에 주입하였다. 혈액 바이알들은 사용할 때까지 흔들 접시에 두었다.
실시예 11
FACS분류를 사용하여 줄기세포 개체군의 측정
Coulter 카운터(Micro Diff II, Beckman Coulter)를 사용하여 차동으로 완전한 혈구수(CBC)를 얻기 위해 EDTA로 주입한 혈액을 사용하였다. 모든 CBCs는 샘플을 채취하는 시간 내에 수행하였다. 모든 CBCs는 삼중으로 수행하였다. 구배 원심분리에 의한 PBMC분획의 정제를 위해 헤파린이 가해진 혈액을 사용하였고, 면역 염색 및 유세포분석기를 위해 상기 혈액을 처리하였다. 줄기세포마커들 CD34-FITC (클론 8G12, BD BioSciences, San Jose, CA, USA) 및 CD133-PE (Miltenyi Biotech, Auburn, CA, USA)를 2가지 색상의 면역 형광을 위해 사용하였다. CD34-FITC/CD133-PE에 의한 모든 샘플들의 염색은 삼중으로 수행하였다. IgG1-FITC 및 IgG1-PE 이소타입 대조군들(BD BioSciences)을 병렬 샘플에 사용하였다. 각각의 공여자를 위한 별개의 양성 대조군 샘플들은 CD45-FITC 및 CD14-PE를 포함하였다. 염색된 PBMC는 1% 포르말린에 고정하였고, 즉시 유세포분석기에 의해 획득하였다. 200,000 사건들의 파일을 각각의 삼중 샘플에 대해 수집하였다. CD34 + CD133-, CD34 + CD133 + 및 CD34-CD133 + 서브 세트들의 백분율은 별도로분석하였고 CBC 차동 카운트에 의해 얻어지는 삼중 림프구 카운트들의 평균으로부터 얻어진 바와 같이, 림프구 세포 수들로 승산한 후에 다시 분석하였다.
실시예 12
미역(운다리아 미나티피다)에서 유래된 후코이단의 경구 투여 후 말초 혈액에서 순환하는 CD34 + HSC의 증가
본 발명자들은 인간 피험자들의 말초 혈류에서 HSC 동원을 실시하는 그들의 잠재력을 확인하기위해, 여러 가지 상이한 조류 종에서 유래된 후코이단의 경구 투여를 시험하였다. 하나의 종, 운다리아 피나티피다에서 유래된 후코이단은 순환하는 CD34+ HSC의 수의 유의미한 상승을 유발하였고, 45, 90 및 180분 측정간격에 17%, 23% (P<0.02) 및 32% ((P<0.02) 증가가 발생하였고, 이것은 방출 제제로서의 효능을 입증하였다. 도 8) 본 발명자들이 잘 알고 있듯이, 이것은 상기 문헌에 보고된 가장 유의미한 증가이고, 게다가, Irimeh 등에서 이전에 보고된 14일 후 12% 증가율(이것 역시 운다리아 피나티피다에서 유래된 후코이단의 경구 투여를 시험하였다)과 비교하여, 주목할 만한 개선이다. 중요하게는, Irimeh 등은 매일 투여된 후코이단 3g을 보고한 반면에, 본 발명자들은 250mg의 복용 요법을 사양하여 개선된 결과를 성취하였다. 이것은 CD34+ HSC의 방출 및 순환을 촉진하기 위해 후코이단을 경구 투여할 때 특정 복용량을 적용하기 위한 중요한 역할을 강조한다. 게다가, 낮은 복용량은 일상적인 매일 투여와 같은 장기간의 환자의 사용을 허용 할 수 있는 반면, 높은 복용량은 반복 및/또는 일상적인 사용과 호환되지 않을 수 있다.
실시예 13
큰실말(코르다리아 클라도시폰)에서 유래된 후코이단의 경구 투여 후 말초 혈액 내에서 순환하는 CD34+ HSC의 감소.
이러한 관찰들로부터 확장하여, 발명자들은 민가지말 큰실말(코르다리아 클라도시폰)을 포함하여 여러 가지 다른 조류 종에서 유래된 후코이단이 인간 피험자들에서 CD34+ HSC의 순환하는 수를 증가시키는 데 실패하였음을 발견하였다(도 9). 상기한 바와 같이 미역(운다리아 피나티피다)으로부터의 후코이단의 효과적인 250mg의 복용량을 포함하여 여러 가지 복용 요법들의 적용에도 불구하고, 큰실말(코르다리아 클라도시폰)에서 유래된 후코이단은 순환하는 CD34+ HSC의 수의 감소를 초래하였고, 아마도 결과적으로 순환하는 HSC의 표면 상에 CXCR4 발현의 증가를 가져왔다. 이러한 결과들은 후코이단의 정확한 제공원과 효과적인 치료 복용량을 확인하는 것 사이의 복잡한 상호 작용을 반영한다. 코르다리아 클라도시폰에서 유래된 이와 같은 후코이단 250mg의 소비는 순환하는 줄기세포 수의 평균 감소를 초래하였고(도 3) 동일한 후코이단 제조 방법을 사용하고, 동일한 조건 하에서 지원자에 투여함으로써, 줄기세포의 이주를 지원하는 데 효과적인 역할을 입증할 수 있었다.
이러한 결과들은 상이한 제공원에서 유래된 후코이단이 구조-활성 관계에서 갈라진다는 이전 보고서들과 일치한다. 알로에 노도숨 및 펠베티아 칸쿨라타에서 유래된 후코이단분획이 HSC 이주에 관여하는 트리-황산화된 디사카라이드헤파린-유사 모티프를 통해 항-응고제 활성을 보유함이 보고된 바 있다. 특히 주목할 만한 것은 황산화 패턴이 그것의 항응고제 활성과 상관관계를 가진다는 보고였다. 갈탁탄, 3-연결된, 규칙적으로 2-O-황산화된 갈탁탄의 계열에서 유래된 유사한분자는 상응하는 3-연결된, 규칙적으로 2-O-황산화된 푸칸에서 발견되지 않는 항응고제 활성을 보유한다. 항-응고제 활성에 대한 이와 같은 보고들 및 HSC 이주와 관련한 본 발명자들의 관측이 황산화된 푸칸, 예를 들면 후코이단의 구조-활성 관계가 포괄적인 특징, 예컨대 어떤 화학적 작용기의 존재 또는 부재에 의한 전하 밀도의 결과가 아님을 입증하였다. 대신에, 생물학적 활성은 비판적으로 다당류의 정확한 구조에 의존한다. 필연적으로, 뚜렷이 다른 조류 종에서 유래된 상이한 구조적 후코이단은 HSC 동원을 비롯하여 다양한 치료적 적용에 대한 복잡한 범위의 효능을 제공할 것으로 기대된다. 상기에서 기재된 바와 같이, 이것은 또한 상이한 종에서 유래된 후코이단들을 사용할 때 달라질 수 있는 치료차원의 유효량을 정립할 필요가 있음을 시사한다.
실시예 14
적하수오(폴리고눔 물티플로룸)를 단독으로, 또는 적하수오, 라이시움 바르바룸, 후코이단, 초유, 스피룰리나및 버섯의 배합물에 포함하여 소비한 후, 줄기세포들이 동원된다.
적하수오(폴리고눔 물티플로룸)는 순환하는 줄기세포의 수의 13±6 % (n=7) (p < 0.05)의 보통의 증가를 유발함을 보여주었다. 그 증가율은 2명 이상의 참가자들에서 25% 초과하였다. 결과는 도 10에 나타내었다.
실시예 15
알로에 마크로클라다의 경구 투여 후, 말초혈액에서 순환하는 CD34+ HSC의 증가
본 발명자들은 인간 피험자의 말초혈류에서 HSC 동원을 증강시키는 가능성을 확인하기 위해, 알로에속에서 유래된 알로에 마크로클라다의 경구 투여을 추가로 시험하였다. 도 11에서 보는 바와 같이, 표시된 바와 같이 60, 120, 180 및 240분에 줄기세포의 수치를 추후에 측정하였고, 60분 내지 120분 시점에 빠른 증가율을 보였고, 180분 및 240분에 이후 측정에 걸쳐 지속되었다.
실시예 16
알로에 마크로클라다 추출물 효능 및 토종 펠렛의 비교
골수줄기세포 동원에 대한 알로에 마크로클라다펠렛(마다가스카의 토착민에 의해 수작업으로 제작됨)의 효과의 초기문서화 이후, 본 발명자들은 줄기세포 동원에 미치는 영향에 대해 상기 식물의 다양한 부분들을 시험하였다.
토종 펠렛이 본질적으로 잔류 수액 및 식물 재의 조악한 제조법으로 제조되고, 식물 재료를 태움으로써 제조되기 때문에, 치료적으로 효과적인 성분의 파괴를 초래할 가능성이 있다는 점을 고려하여, 본 발명자들은 개선된 조성물 식물 수액 및 겔을 제조하여, 초기 유효량인 340mg의 펠렛과 대비하여, 인간 피험자에서 본 배합물의 두 가지 용량, 즉 250mg 및 750mg을 시험하였다.
실시예 17
알로에 마크로클라다가 다양한 줄기세포 유형에 걸쳐 줄기세포 트래피킹을 증강시킨다
흥미롭게도, 조악한 제조 기술에도 불구하고, 발명자들이 고안한 수액 및 겔 배합물 제제뿐만 아니라 알로에 마크로클라다 토종 펠렛 역시 4가지 유형의 줄기세포, 즉CD45낮음 CD34+, CD34+, CD34+ KDR-, 및 CD45- CD31+ KDR+의 동원에 가능한 영향을 보여주었으나, 발명자들의 개선된 조성물이 이들 줄기세포의 모든 유형에서 일관되게 유의미한 증가를 유발하였다.
도 14에 도시된 바와 같이, 토종 펠렛(340mg)은 CD45낮음 CD34+ 세포에 어떤 영향도 미치지 않았다. 그러나, 250mg 및 750mg의 수액/겔은 순환하는 CD45낮음 CD34+세포의 수의 증가를 유발하여, 120분에 증가율이 27% 및 32%에 도달하였으나, 이와 같은 효과는 유의성에 미치지 못했다. 250mg 및 750mg의 수액/겔에서 보여진 결과는 어떤 유의미한 차이를 보여주지 않았기 때문에, 함께 모았다. 함께 모은 경우, 수액/겔(n=8)의 데이터는 120분에 순환하는 CD45낮음 CD34+세포의 수의 29.6% 증가율 (p<0.02)을 보여주었다.
실시예 18
알로에 마크로클라다 제제용량이 CD34+ 세포유형에 미치는 가변 효과
도시된 바와 같이, 도 13에서, 토종 펠렛(340mg)은 순환하는 CD34+ 세포의 수의 18% 증가를 유발하였으나, 이것은 유의성에는 미치지 못하였다. 250mg 및 750mg의 수액/겔의 용량은 순환하는 CD34+세포의 수의 증가를 유발하였고, 증가율은 120분에 29.8% 및 32%에 도달하였다. 그러나, 250mg으로 보여진 효과만이 유의성에 도달하였다(p<0.04).
250mg 및 750mg의 수액/겔에서 보여진 결과는 어떤 유의미한 차이를 보여주지 않았기 때문에, 함께 모았다. 수액/겔의 데이터(n=8)는 120분에 순환하는 CD34+세포의 수의 29.9% 증가율 (p<0.001)을 보여주었다.
실시예 19
알로에 마크로클라다 제제 투여량이 CD34+ KDR-세포 유형에 미치는 가변 효과
도 14에 도시된 바와 같이, 토종 펠렛 (340mg)은 120분에 순환하는 CD34+ KDR-세포의 수의 21.9% 증가를 유발하였다(p<0.03). 250mg의 용량은 순환하는 CD34+ KDR-세포의 수의 증가를 유발하여, 120분에 42.4%의 증가율 및 180분에 22%의 증가율에 도달하였으나, 이와 같은 효과는 유의성에 미치지 못하였다. 750mg의 용량은 순환하는 CD34+ KDR-세포의 수의 증가를 유발하여, 120분에 47.2%의 증가율 및 180분에 27.2%의 증가율에 도달하였으나, 이와 같은 효과는 유의성에 미치지 못하였다.
250mg 및 750mg의 수액/겔에서 보여진 결과는 어떤 유의미한 차이를 보여주지 않았기 때문에, 함께 모았다. 수액/겔의 모든 데이터(n=8)는 순환하는 CD34+세포의 증가를 보여주었고, 120분에 유의미한 44.8% 증가율(p<0.01) 및 180분에 24.7%의 증가율(p<0.02)에 도달하였다.
실시예 20
알로에 마크로클라다 제제 투여량이 CD45-CD34+ KDR+세포 유형에 미치는 가변 효과
도시된 바와 같이, 도 15에서토종 펠렛(340mg)은 순환하는 CD45- CD31+ KDR+세포의 수의 증가를 유발하여, 각각 120분에 80.6% 증가율(p<0.02) 및 180분에 69% 증가율(p<0.03)에 도달하였다. 250mg의 용량은 순환하는 CD45- CD31+ KDR+세포의 수의 증가를 유발하여, 120분 및 180분 각각에 32.4% 및 46.8% 증가율에 도달하였으나, 180분에서의 효과(p<0.003)만이 유의성에 도달하였다. 750mg의 용량은 순환하는 CD45- CD31+ KDR+세포의 수의 유의미한 증가를 유발하여, 180분에 75.4% 증가율에 도달하였다(p<0.02). 250mg 및 750mg의 수액/겔에서 보여진 결과는 어떤 유의미한 차이를 보여주지 않았기 때문에, 함께 모았다. 수액/겔의 데이터(n=8)는 180분에 순환하는 CD34+세포의 61.1% 증가율(p<0.004)을 드러냈다.
앞서 설명된 다양한 방법과 기술은 본 발명을 실시하기 위한 다수의 방법을 제공한다. 당연히, 설명된 모든 목적 또는 이점이 본원에서 설명된 임의의 특정 구현예에 따라 반드시 달성되는 것은 아닌 것으로 이해된다. 따라서, 예로서, 당업자는 이들 방법이 본원에서 교시되거나 또는 암시된 바와 같은 다른 목적 또는 이점을 반드시 달성하는 것은 아니지만, 본원에서 교시된 바와 같은 한 가지 이점 또는 일군의 이점을 달성하거나 또는 최적화하는 방식으로 수행될 수 있다는 것을 인식할 것이다. 다양한 유리하고 불리한 대안이 본원에서 언급된다. 일부 바람직한 구현예는 한 가지, 다른, 또는 여러 유리한 특질을 특정적으로 포함하고, 다른 바람직한 구현예는 한 가지, 다른, 또는 여러 불리한 특질을 특정적으로 배제하고, 또 다른 바람직한 구현예는 한 가지, 다른, 또는 여러 유리한 특질의 포함에 의해 존재하는 불리한 특질을 특정적으로 경감하는 것으로 이해된다.
게다가, 당업자는 상이한 구현예로부터 다양한 특질의 적용가능성을 인식할 것이다. 유사하게, 앞서 논의된 다양한 원소, 특질과 단계뿐만 아니라 각각의 이런 원소, 특질 또는 단계에 대한 다른 공지된 등가물은 본원에서 설명된 원리에 따라 방법을 수행하기 위해 당업자에 의해 혼합되고 정합될 수 있다. 다양한 구현예에서, 다양한 원소, 특질, 그리고 단계 중에서 일부는 특정적으로 포함될 것이고, 그리고 다른 일부는 특정적으로 배제될 것이다.
본 발명이 특정 구현예들 및 실시예의 맥락에서 개시되었더라도, 본 발명의 구현예들은 구체적으로 개시된 구현예들 너머로 다른 대안적인 구현예들 및/또는 용도 및 그의 변형 및 등가물들로 확장된는 것이 당업계의 숙련자들에 의해 이해될 것이다.
많은 변이와 대안적 원소가 본 발명의 구현예에서 개시되었다. 더욱 추가의 변이와 대안적 원소는 당업자에게 명백할 것이다. 이들 변이에는, 비제한적으로, 줄기세포 동원화제의 제공원, 줄기세포 동원화제, 이것의 유사체 및 유도체를 제조, 단리 또는 정제하는 방법, 줄기세포 동원화제, 이것의 유사체 및 유도체를 사용하여 다양한 질환 및/또는 병태를 치료하는 방법, 본원에 사용되는 기술 및 조성물 및 용액의 사용, 및 본 발명의 교시를 통해 생성된 생성물의 특정 용도가 포함된다. 본 발명의 다양한 구현예는 이들 변이 또는 원소 중에서 임의의 한 가지를 특정적으로 포함하거나 또는 배제할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 일정한 구현예를 설명하고 청구하는데 이용된 성분의 양, 성질, 예를 들면, 농도, 반응 조건 등을 표시하는 숫자는 일부 경우에 용어 "약"에 의해 수식되는 것으로 이해된다. 따라서, 일부 구현예에서, 서면 명세서와 첨부된 청구항에서 진술된 수치 매개변수는 특정 구현예에 의해 획득이 추구되는 원하는 성질에 따라 변할 수 있는 근사이다. 일부 구현예들에서, 수치 매개 변수들은 보고된 유효 숫자의 수 및 비추어서 및 통상의 반올림 기법을 적용함으로써 해석되어야 한다. 본 발명의 몇몇 구현예들의 광범위한 범위를 나타내는 수치 범위들 및 매개 변수들이 근사치들임에도 불구하고, 특정 예들에 기재된 수치 값들은 정확하게 실행 가능한 것으로 보고되어 있다. 본 발명의 일부 구현예들에 나타낸 수치 값들은 이들의 각각의 시험 측청치들 중에서 발견되는 표준 편차로부터 반드시 특정 오류들을 포함할 수 있다.
일부 구현예에서, 본 발명의 특정 구현예를 설명하는 문맥에서 (특히, 하기의 일정한 청구항의 문맥에서) 이용된 용어 부정관사 ("a"와 "an")와 정관사 ("the") 및 유사한 참고물은 단수와 복수 둘 모두를 커버하는 것으로 간주될 수 있다. 본원에서 값의 범위의 열거는 단순히, 범위 내에 속하는 각 별개의 값을 개별적으로 지칭하는 속기 방법으로서 역할하는 것으로 의도된다. 본원에서 달리 지시되지 않으면, 각 개별 값은 마치 이러한 값이 본원에서 개별적으로 열거되는 것처럼 명세서 내로 통합된다. 본 명세서에서 설명된 모든 방법은 본 명세서에서 달리 명시되지 않는 한 또는 문맥에 의해 명확히 반대되지 않는 한, 임의의 적절한 순서로 수행될 수 있다. 본원의 어떤 구현예와 관련하여 제공되는 어떤 및 모든 예, 또는 예시적인 언어(예를 들면 "예컨대")의 사용은 본 발명을 보다 잘 서술하기 위한 것 일뿐, 그 외에 청구된 본 발명이 범위에 제한을 두지 않는다. 본 명세서에서 어떠한 언어도 본 발명의 실시에 있어서 필수적인 임의의 비-청구된 요소를 명시하는 것으로서 해석되어서는 안 된다.
본 명세서에 개시된 본 발명의 대안의 구성요소 또는 실시형태의 그룹은 제한으로서 해석되어서는 안 된다. 각 그룹 구성원은 개별적으로 또는 그룹의 다른 구성원 또는 본원에서 발견되는 다른 원소와 임의의 조합으로 지칭되고 청구될 수 있다. 그룹의 하나 또는 그 이상의 구성원은 편의성 및/또는 특허성의 이유로 그룹에 포함되거나, 또는 그룹으로 삭제될 수 있다. 임의의 그러한 포함 또는 삭제가 발생할 때, 본원에서 명세서는 수정된 그룹을 함유하고, 그에 따라 첨부된 특허 청구의 범위에 사용된 모든 마쿠쉬 그룹들의 서면 설명을 충족시킬 것으로 여겨진다.
본 발명을 수행하기 위해 본 발명자들에게 공지된 최적 방식을 비롯한 본 발명의 바람직한 구현예가 본원에서 설명된다. 이들 바람직한 구현예에서 변이는 전술한 설명을 읽은 후, 당업자에게 명백해질 것이다. 당업자는 적절하면 이런 변형을 이용할 수 있고, 그리고 본 발명은 본원에서 특정적으로 설명된 것과 달리 실시될 수 있는 것으로 예기된다. 따라서, 본 발명의 많은 구현예는 근거 법률에 의해 허용되는, 여기에 첨부된 청구항 내에 열거된 요부의 모든 변형과 등가물을 포함한다. 게다가, 이들의 모든 가능한 변형에서 상기 기재한 구성요소의 어떤 조합은 본 명세서에 달리 표시되지 않거나 또는 문맥에 의해 달리 명확하게 모순되지 않는다면, 본 발명에 의해 포함된다.
게다가, 본 명세서 전체에서 특허와 인쇄된 간행물이 무수하게 참조된다. 상기 인용된 참고문헌과 인쇄된 간행물 각각은 본원에서 개별적으로 전체적으로 참조로서 편입된다.
끝으로, 본원에서 개시된 발명의 구현예는 본 발명의 원리를 예시하는 것으로 이해된다. 이용될 수 있는 다른 변형은 본 발명의 범위 내에 있을 수 있다. 따라서, 실례로서, 하지만 제한 없이, 본 발명의 대안적 형태가 본원에서 교시에 따라 활용될 수 있다. 따라서, 본 발명의 구현예는 도시되고 설명된 것에 엄밀하게 국한되지 않는다.

Claims (20)

  1. 피험자에서 줄기세포 동원을 증가시킬 수 있는 방법으로, 상기 방법이
    줄기세포동원을 증가시킬 수 있는동원화제를 제공하고; 그리고
    피험자에서 줄기세포 동원을 증가시키는 충분한 양으로일정량의 동원화제를 피험자에 투여하는 것을 특징으로 하는 방법.
  2. 청구항 1에 있어서, 동원화제가 하기로 이루어진 군에서 선택되는 하기 성분 중에서 하나 또는 그 이상을 포함하는 조성물인 것을 특징으로 하는 방법: 알로에 또는 이것의 추출물, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물.
  3. 청구항 1에 있어서, 상기 동원화제가 알로에를 포함하는 것인 방법.
  4. 청구항 3에 있어서, 상기 알로에가 알로에 마크로클라다인 것인 방법.
  5. 청구항 1에 있어서, 상기 줄기세포가 골수-유도 줄기세포(BMSC)를 포함하는 것인 방법.
  6. 청구항 1에 있어서, 상기 줄기세포가 조혈 줄기세포(HSC)를 포함하는 것인 방법.
  7. 청구항 1에 있어서, 상기 정량을 투여하는 것이 경구 투여를 포함하는 것인 방법.
  8. 청구항 7에 있어서, 상기 경구 투여가 1일 1회를 초과하여 시행되는 것인 방법.
  9. 청구항 7에 있어서, 상기 경구 투여가 매일 시행되는 것인 방법.
  10. 청구항 7에 있어서, 상기 경구 투여가 캡슐의 사용을 포함하는 것인 방법.
  11. 청구항 7에 있어서, 상기 캡슐이 하나 또는 그 이상의 동원화제를 약 50, 100, 150, 200, 250mg 이하의 양으로 포함하는 것인 방법.
  12. 청구항 7에 있어서, 상기 캡슐이 하나 또는 그 이상의 동원화제를 약 250, 500, 750 또는 1000mg 이하의 양으로 포함하는 것인 방법.
  13. 청구항 12에 있어서, 750mg 이하의 알로에 마크로클라다를 포함하는 것인 방법.
  14. 하기를 포함하는 약제학적 조성물:
    하기로 구성된 그룹으로부터 선택된 하기의 성분 중 하나 이상: 알로에 또는 이것의 추출물, 적하수오(폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 라이시움 바 르바룸 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯(헤리시움 에리나세우스) 또는 이것의 추출물, 가노데르마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물; 및 약제학적으로 허용되는 담체.
  15. 청구항 14에 있어서, 상기 약제학적 조성물이 알로에를 포함하는 것인 약제학적 조성물.
  16. 청구항 15에 있어서, 상기알로에가 알로에 마크로클라다인 것인 약제학적 조성물.
  17. 청구항 14에 있어서, 하나 이상의 성분을 약 50, 100, 150, 200, 250mg 이하의 양으로 포함하는 것인 약제학적 조성물.
  18. 청구항 14에 있어서, 하나 이상의 성분을 약 250, 500, 750, 또는 1000mg 이하의 양으로 포함하는 약제학적 조성물.
  19. 청구항 18에 있어서, 알로에 마크로클라다를 750mg 이하로 포함하는 약제학적 조성물.
  20. 청구항 19에 있어서, 알로에 마크로클라다를 750mg 이하로, 그리고 하기로 이루어진 군에서 선택되는 하나 이상의 성분을 1000mg이하로 포함하는 약제학적 조성물: 적하수오( 폴리고눔 물티플로룸) 또는 이것의 추출물, 라이시움 바르바룸 또는 이것의 추출물, 초유 또는 이것의 추출물, 스피룰리나 또는 이것의 추출물, 후코이단, 노루궁뎅이 버섯( 헤리시움 에리나세우스 ) 또는 이것의 추출물, 가노데르 마 루시덤 또는 이것의 추출물, 및/또는코르디셉스시넨시스 또는 이것의 추출물.
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Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2013531012A (ja) 2010-06-28 2013-08-01 ステムテック インターナショナル， インコーポレイテッド 幹細胞の移動を増強するための方法および組成物
KR20140091674A (ko) 2011-11-18 2014-07-22 스템테크 인터내셔널, 인크. 줄기 세포의 동원 및 증진을 강화하는 foti의 용도
CN105852125A (zh) * 2016-04-27 2016-08-17 深圳爱生再生医学科技有限公司 芦荟干细胞冻干粉及其制备方法和应用
WO2018034314A1 (ja) * 2016-08-18 2018-02-22 北海道公立大学法人札幌医科大学 間葉系幹細胞活性化剤
CN110192623A (zh) * 2019-07-05 2019-09-03 福建冠丰生物科技有限公司 一种海参牡蛎复合型营养低聚肽粉及其制备方法

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IT1282952B1 (it) * 1996-01-24 1998-04-02 Silvie Limited Formulazioni farmaceutiche gastroresistenti contenenti colostro e uso del colostro per il trattamento della costipazione
CA2435196A1 (fr) * 2003-07-21 2005-01-21 Thi Thanh Nguyen Methode de traitement radical et etiologique contre les rides et vieillissement precoces
MA29706B1 (fr) * 2007-02-14 2008-09-01 Philippe Alleon Complement alimentaire comprenant de la spiruline et un produit a base de plante du genre aloe, et son utilisation cosmetique
JP2013531012A (ja) * 2010-06-28 2013-08-01 ステムテック インターナショナル， インコーポレイテッド 幹細胞の移動を増強するための方法および組成物
WO2013022788A1 (en) * 2011-08-05 2013-02-14 Stemtech International, Inc. Skin care compositions containing combinations of natural ingredients
KR20140091674A (ko) * 2011-11-18 2014-07-22 스템테크 인터내셔널, 인크. 줄기 세포의 동원 및 증진을 강화하는 foti의 용도

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