CN106616028A - 一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明提供一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，按重量份数计包括如下中药组份制得：刺五加10‑20份、党参5‑10份、杜仲5‑10份、茯苓5‑10份、板蓝根5‑10份、芒果叶5‑15份、穿心莲提取物10‑20份。本发明提供的防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，可增强该鱼种的免疫力、有效防治其病毒性疾病尤其是锦鲤疱疹病毒，并促进其生长。

Description

一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂及其制备方法

技术领域

本发明属于水产养殖技术领域，尤其是涉及一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂。

背景技术

锦鲤体格健美、色彩艳丽、花纹多变、泳姿雄然，是一种具有较高观赏价值及经济价值的鱼类，目前我国已成为世界锦鲤的主要生产国和出口国。随着其养殖规模不断扩大，集约化程度不断提高，其病害发生也有增加的趋势，锦鲤的各种病毒性传染疾病尤其是锦鲤疱疹病毒病开始广泛传播。锦鲤疱疹病毒病1998年首次爆发在以色列，但在1999年才确认其真正病原是锦鲤疱疹病毒(Koiherpesvirus，KHV)。此后在英国、欧洲大陆、美国、日本也都有暴发。近年来，锦鲤疱疹病毒病的广泛传播，造成锦鲤养殖业巨大的经济损失，已经成为制约锦鲤养殖业可持续发展的重要因素之一。

流行病学研究表明，KHV传播迅速，可感染任何年龄的锦鲤与鲤，感染KHV的病鱼典型临床症状是行动迟缓、食欲不振、平衡失调、体表多黏液、在皮肤和鳍基部出现出血症状、眼球凹陷、鳃苍白或颜色不规则并伴有中度至严重的鳃坏死，感染后7～10d开始出现死亡，2～3周后死亡率可达100％。该病毒造成病鱼的死亡率极高，疫情难以控制。目前，治疗这种病毒的方式有高温治疗、疫苗防治等，但治疗效果不佳，西药副作用大；中药品种能有效治疗病毒性疾病尤其是锦鲤疱疹病毒的品种少且效率低。

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，可增强该鱼种的免疫力、有效防治锦鲤的病毒性疾病尤其是锦鲤疱疹病毒，促进其生长。

本发明实现目的的技术方案如下:

一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，按重量份数计包括如下中药组份：刺五加10-20份、党参5-10份、杜仲5-10份、茯苓5-10份、板蓝根5-10份、芒果叶5-15份、穿心莲提取物10-20份。

进一步地，上述防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，按重量份数计包括如下组份：刺五加15份、党参8份、杜仲8份、茯苓8份、板蓝根8份、芒果叶10份、穿心莲提取物15份。

其中上述穿心莲提取物，按质量百分比计，含有穿心莲内酯含量至少为40％及脱水穿心莲内酯含量至少为2％。

此外，本发明还提供了上述防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂的制备方法，包括如下制备步骤：

1)将芒果叶干燥粉碎至，用9倍量的乙醇回流提取2次，每次3小时，合并每次所得提取液，回收溶剂，用真空干燥箱50℃干燥，得芒果叶提取物；

2)将刺五加、党参、杜仲、茯苓、板蓝根按量称取，混合、粉碎过筛成40目的粉末，放入煎煮容器内，加入4-6倍质量的水，浸泡2小时，然后煎熬2小时，过滤，将药汁倒出；再次向药渣内加入相对于粉末质量2-4倍的水，煎熬1小时，过滤，得药汁；将两次过滤所得药汁混合，得中药混合液；

3)将芒果叶提取物加入到步骤2)所得中药混合液中，搅拌混合均匀，置入真空浓缩设备中进行浓缩，浓缩温度为60℃，浓缩时间为30分钟，冷却后得混合浓缩液；

4)将穿心莲提取物加入步骤3)所得混合浓缩液，混合均匀，得防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂待用液。

此外上述步骤还包括将步骤4所制得的待用液，经过喷雾干燥，得到防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂干粉。

此外，本发明还提供了上述防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂在制备防治病毒性疾病提高锦鲤免疫机能的饲料中的应用，上述饲料添加剂在基础饲料中的添加量为基础饲料总质量的1-10％。

进一步地，上述添加剂在基础饲料中的添加量为基础饲料总质量的7％。

病毒是病原微生物中最小的一种，在细胞内繁殖，其核心是核糖核酸(RNA)或脱氧核糖核酸(DNA)，外壳是蛋白质，不具有细胞结构。病毒寄生于寄主细胞内，依赖寄主细胞代谢系统进行增殖复制。在病毒基因提供的遗传信息调控下合成病毒核酸和蛋白质，然后在胞浆内装配为成熟的感染性病毒体，以各种方式自细胞释放出而感染其他细胞，病毒核酸有时整合于细胞，不易消除，因此抗病毒药研究发展缓慢。锦鲤疱疹病毒，简称KHV，因其主要是由DNA类疱疹滤过性病毒感染所引起，又名鲤鱼肾炎及鳃坏疽病毒，该病的发病迅速，死亡速度快。一旦发现KHV，目前常用的处理方法是将鱼杀灭，切断病毒源，因此该病的预防工作也具有非常重要的意义，其中预防工作的重点之一就是日常需要注意增强提高鱼体的自身免疫力。

本发明所提供的防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂中，穿心莲提前物主要有效成分为心莲内酯含量、脱水穿心莲内酯，具有极强的抗菌消炎活性。本发明中穿心莲提取物的制备参照专利2012105014849所提供的穿心莲提取物提前方法制备而得，在制备获得上述穿心莲提前物的同时，去除了穿心莲中的色素等杂质成分，避免了穿心莲制剂毒副作用的发生，增加了在水产养殖中使用的安全性。同时由于穿心莲内酯类活性成分在加热过程中容易分解损失，本发明在制备过程中避免了高温加热、高温干燥等环节，最大程度的避免了其有效成分受热分解；

芒果叶资源丰富、价格低廉、分布地域广，四季可采，其提取物中主要有效成为芒果苷，是一种黄酮类化合物。通过本发明提供制备方法获得的芒果叶提取物，具有很强的抗氧化活性，具有抗氧化、抑菌抗病毒、抗炎性、免疫调节、提高免疫功能和促进生长的作用；

目前对穿心莲提取物提取物、芒果叶提取物同时作为水产饲料添加剂原料配伍使用的研究较少，还未有将其用来防止锦鲤疱疹性病毒疾病的相关报道。通过采用本发明提供的上述饲料添加剂配方来代替化学合成添加剂，经过研发人员对锦鲤各生长指标进行反复试验论证，发现使用本发明所提供的添加剂，该品类鱼不仅无不良反应，可增强该鱼种的免疫力、有效防治锦鲤的病毒性疾病尤其是锦鲤疱疹病毒，并促进其生长，毒副作用小，同时对水质环境的污染也降至低点，大大提升了该品类鱼的存活率。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明作进一步详述，以下实施例只是描述性的，不是限定性的，不能以此限定本发明的保护范围。

实施例1：

一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，有如下中药组份：刺五加15kg、党参8kg、杜仲8kg、茯苓8kg、板蓝根8kg、芒果叶10kg、穿心莲提取物15kg。

其中穿心莲提取物，按质量百分比计含有穿心莲内酯40％及脱水穿心莲内酯2％。

其制备方法为：

1)将芒果叶干燥粉碎至，用9倍量的乙醇回流提取2次，每次3小时，合并每次所得提取液，回收溶剂，用真空干燥箱50℃干燥，得芒果叶提取物；

2)将刺五加、党参、杜仲、茯苓、板蓝根按量称取，混合、粉碎过筛成40目的粉末，放入煎煮容器内，加入4-6倍质量的水，浸泡2小时，然后煎熬2小时，过滤，将药汁倒出；再次向药渣内加入相对于粉末质量2-4倍的水，煎熬1小时，过滤，得药汁；将两次过滤所得药汁混合，得中药混合液；

3)将芒果叶提取物加入到步骤2)所得中药混合液中，搅拌混合均匀，置入真空浓缩设备中进行浓缩，浓缩温度为60℃，浓缩时间为30分钟，冷却后得混合浓缩液；

4)将穿心莲提取物加入步骤3)所得混合浓缩液，混合均匀，得防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂待用液；

5)将步骤4)所制得的待用液，经过喷雾干燥，得到防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂干粉。

实施例2：

一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，由如下组分刺五加10kg、党参5kg、杜仲5kg份、茯苓5kg、板蓝根5kg、芒果叶5kg、穿心莲提取物10kg。

其中穿心莲提取物，按质量百分比计含有穿心莲内酯40％及脱水穿心莲内酯2％。

其制备方式与实施例1一致。

实施例3

一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，由如下组分刺五加20kg、党参10kg、杜仲10kg份、茯苓10kg、板蓝根10kg、芒果叶15kg、穿心莲提取物20kg。

其中穿心莲提取物，按质量百分比计含有穿心莲内酯40％及脱水穿心莲内酯2％。

其制备方式与实施例1一致。

实施例4

将实施例1所制防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂添加到市售基础饲料中，添加量为基数饲料的1％。

实施例5

将实施例1所制防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂添加到市售基础饲料中，添加量为基数饲料的7％。

实施例6

将实施例1所制防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂添加到市售基础饲料中，添加量为基数饲料的10％。

对比例1

在实施例5的饲料添加剂配方中，不添加芒果叶和穿心莲提取物，其余与实施例5一致。

对比例2

在实施例5的饲料添加剂配方中，仅保留有芒果叶和穿心莲提取物，其他组分不添加，其余与实施例5一致。

临床试验：

实验一

自染病养殖场，选取感染有疱疹病毒的锦鲤，其症状为：多数病鱼表现为眼球及头部皮肤凹陷。感染发生后，体表出现斑纹，背鳍似乎重叠，之后，体表分泌大量黏液。

选取染病锦鲤随机分为6组，每组中4个重复，每个重复25尾鱼。4组中1组空白组为仅投喂市售基础饲料；3组为实验组，实验组分实验1、2、3组，对应在市售基础饲料中分别添加7％(质量百分数)的本发明所示实施例1、2、3饲料添加剂；2组为对比组，对比组分为对比1、2组，分别对应添加了对比例1所述饲料、添加了对比例2所述饲料；

对照组与实验组的饲养环境和饲料质量严格保持一致，连续投喂三周，各实验组死亡率均大大降低。其中实验组1在第一周治愈率就到达85％，两周治愈率达93％，死亡率极低，即染病锦鲤获得了较强的免疫保护。对比1、2也起到一定的治疗效果，但其远不如本发明所采用各组分配伍的效果。

表1

实验二

自养殖场选取体重相当的健康锦鲤，对照组用的饲料中均不添加本发明饲料添加剂，下设3个重复；实验组分实验1、2、3组，对应所用饲料中分别添加5％(质量百分数)的本发明产品实施例1、2、3，实验1、2、3组分别下设3个重复。对照组与实验组的饲养环境和饲料质量严格保持一致，饲养60天。实验初期测定鱼体长度及鱼体质量，并记录，试验结束时，再对鱼体长度和鱼体质量进行测定；观察两组鱼的诱食反应，同时收集试验组鱼的排泄物和饵料残渣，烘干后称质量。

结论:从下表2、3可看出，试验组在诱食效果、鱼体长度、质量增长及肥满度方面比对照组有显著的提升；锦鲤的免疫指标(免疫指标吞噬指数、溶菌酶活力和补体活力)均显著高于对照组；且实验组1的整体效果要高于实验2、3组。

组别	诱食反应	增长率％	增重率％	肥满度％
					对照组	一般	2.3％	7.3％	5.5％
实验组1	强	6.2％	20％	9.3％
					实验组2	好于一般	4.5％	13％	6.7％
实验组3	强	5.6％	16％	8.9％

表2

表3

实验三

此外，分别在全国不同区域两处进行大田养殖试验，两处锦鲤的养殖实验以及对照组的实验均分别在4口塘进行，每口塘的平均面积均为3亩，对照组饲料中不添加本发明的基础饲料，实验组分别为饲喂实施例4-6所述饲料。经过180天的饲养实验后，鱼的成活率、锦鲤体内3种主要免疫指标(吞噬指数、溶菌酶活力和补体活力)结论与在试验场室内循环养殖系统中进行的实验结论一致，实施例5所在实验组，在染病几率、成活率、免疫指标方面明显高于其他实验组别。

以上对本发明的较佳实施例进行了详细说明，但所述内容仅为本发明的较佳实施例，不能被认为用于限定本发明的实施范围。凡依本发明申请范围所作的均等变化与改进等，均应仍归属于本发明的专利涵盖范围之内。

Claims (7)

1.一种防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，其特征在于按重量份数计包括如下中药组份：刺五加10-20份、党参5-10份、杜仲5-10份、茯苓5-10份、板蓝根5-10份、芒果叶5-15份、穿心莲提取物10-20份。

2.根据权利要求2所述的防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，其特征在于按重量份数计包括如下组份：刺五加15份、党参8份、杜仲8份、茯苓8份、板蓝根8份、芒果叶10份、穿心莲提取物15份。

3.根据权利要求1或2防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂，其特征在于所述穿心莲提取物，按质量百分比计，含有穿心莲内酯含量至少为40％及脱水穿心莲内酯含量至少为2％。

4.根据权利要求3所述防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂的制备方法，其特征在于包括如下制备步骤：

1)将芒果叶干燥粉碎至，用9倍量的乙醇回流提取2次，每次3小时，合并每次所得提取液，回收溶剂，用真空干燥箱50℃干燥，得芒果叶提取物；

2)将刺五加、党参、杜仲、茯苓、板蓝根按量称取，混合、粉碎过筛成40目的粉末，放入煎煮容器内，加入4-6倍质量的水，浸泡2小时，然后煎熬2小时，过滤，将药汁倒出；再次向药渣内加入相对于粉末质量2-4倍的水，煎熬1小时，过滤，得药汁；将两次过滤所得药汁混合，得中药混合液；

3)将芒果叶提取物加入到步骤2)所得中药混合液中，搅拌混合均匀，置入真空浓缩设备中进行浓缩，浓缩温度为60℃，浓缩时间为30分钟，冷却后得混合浓缩液；

4)将穿心莲提取物加入步骤3)所得混合浓缩液，混合均匀，得防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂待用液。

5.根据权利要求4所述防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂的制备方法，其特征在于还包括如下制备步骤：步骤4所制得的待用液，经过喷雾干燥，得到防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂干粉。

6.如权利1-5任一项所述的防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂在制备防治病毒性疾病提高锦鲤免疫机能的饲料中的应用，其特征在于所述饲料添加剂在基础饲料中的添加量为基础饲料总质量的1-10％。

7.如权利要求6所述的防治锦鲤病毒性疾病的饲料添加剂在制备防治病毒性疾病提高锦鲤免疫机能的饲料中的应用，其特征在于所述饲料添加剂在基础饲料中的添加量为基础饲料总质量的7％。