CN101032596B - 一种用于治疗鸡呼吸道疾病的药物及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种用于治疗鸡呼吸道疾病的药物,制得该药物的有效成分的原料药为石膏、知母、紫花地丁、金银花、连翘、龙胆草、板蓝根、大青叶、鱼腥草、射干、赤芍、玄参、生地、麦冬、桔梗、蟾酥等16味原料药。其制备方法是,将原料粉碎成粗粉,石膏加水先煎20~30分钟,然后加入其他药物高压煎煮两次,合并煎液,放置24小时,滤过,滤液浓缩至每毫升含1克生药,再加入研磨为极细粉末的蟾酥和微量辅料苯甲酸钠,搅匀,静置,灌封,灭菌,即得。本发明制备的治疗鸡呼吸道疾病的药物为棕褐色的液体,气微,具有抗病毒、抑菌、解热镇痛、抗炎和提高机体免疫功能的功效,适用于由病毒和细菌等引起鸡的呼吸道感染。
Description
技术领域
本发明涉及一种动物药物,特别是一种用于治疗鸡呼吸道疾病的药物及其制备方法。
背景技术
据统计,引起鸡上呼吸道感染的病毒主要有新城疫病毒、火鸡鼻气管炎病毒、鸡流感病毒、禽传染性支气管炎病毒、禽传染性喉气管炎病毒,并且在临床上极为常见,是引起鸡的高度接触性急性传染病,主要侵害鸡的呼吸系统、消化系统、生殖系统和泌尿系统等,造成鸡呼吸困难、肠炎、产蛋数量和质量下降,肾脏高度肿大而死亡。该类疾病主要由于免疫不当或免疫失败引起,已严重地危害养禽业的发展。
鸡的上呼吸道感染疾病主要由病毒和细菌等引起,通过空气传播,危害极大。各年龄阶段的鸡均有发病,传播迅速,未免疫鸡群发病较为严重,春、秋季发病较多。国内外正在开展广泛的研究,预防主要以疫苗为主,根据申请人的了解,尚无特效药物治疗,临床上以西药对症治疗为主,但易产生耐药性,抗生素还会在肉、蛋中残留,危害人体健康。
而中草药制剂,无毒副作用、无残留、不易产生耐药性和致使产生“三变”(癌、畸、突变)等弊端,鸡粪等排泄物不含化学药物,不污染环境,为人们的健康服务,提供无公害的鸡肉、鸡蛋,并符合国际食品卫生要求,还可以为出口创汇,具有良好的社会和生态效益,因此以中草药作为动物药物是本领域的技术人员当前研究的方向,对养鸡业健康发展有着十分重要的意义,应用价值和市场前景广阔。
发明内容
本发明的目的在于,提供一种用于治疗鸡呼吸道疾病的药物及其制备方法,该药物经动物实验研究和药效、药理学试验证明,该药物具抗病毒、抑菌、解热镇痛、抗炎和提高机体免疫功能的功效,对由病毒和细菌等引起鸡的呼吸道感染有很好的治疗作用。
为了实现上述任务,本发明采取如下的技术解决方案:
一种用于治疗鸡呼吸道疾病的药物,其特征在于,制得该药物的有效成分的原料药及其重量百分比为:石膏:12%~24%,知母:4%~6%,紫花地丁:4%~6%,金银花:4%~6%,连翘:6%~8%,龙胆草:4%~6%,板蓝根:6%~8%,大青叶:4%~6%,鱼腥草:6%~8%,射干:4%~6%,赤芍:4%~6%,玄参:4%~6%,生地:4%~6%,麦冬:4%~6%,桔梗:4%~6%,蟾酥:0.04%~0.06%;上述原料药的重量百分比之和为100%。
上述药物的制备方法,其特征在于,该方法按下列步骤制备:
取配方中的原料,除蟾酥外的其它原料粉碎成粗粉,蟾酥则研磨为极细粉末备用;
取石膏加水煎20~30分钟,然后加入其它药物按常规的高压方法煎煮两次,第一次1.5小时,第二次为1小时,合并煎液,放置24小时,滤过,滤液浓缩至每毫升含1克生药;
然后浓缩液中加入蟾酥粉末和微量辅料苯甲酸钠,搅匀,静置,灌封,灭菌,即得。
本发明制备的用于治疗鸡呼吸道疾病的药物为棕褐色的液体,气微,具有抗病毒、抑菌、解热镇痛、抗炎和提高机体免疫功能的功效,适用于由病毒和细菌等引起鸡的呼吸道感染。
附图说明
图1是鸡的呼吸道感染病理变化图片,其中,图(a)为喉头和气管黏膜肿胀、充血、出血、坏死;图(b)为气管腔内有血凝块、黏液、淡黄色干酪样渗出物或气管栓塞。
具体实施方式
以下结合发明人给出的实施例和本发明的药物的药效、药理试验对本发明作进一步的详细说明。
本发明根据中兽医药的卫气营血辨证理论,并按照中兽医学的组方原则,筛选具有防治鸡呼吸道疾病的中草药组方,制剂,应用体外抗病毒试验、抑菌、消炎、解热镇痛试验、提高机体免疫力试验、毒性试验等方法,再通过人工感染试验和临床试验,确认该制剂对鸡呼吸道疾病的预防和治疗效果。合剂使用方便,较之目前防治鸡病常用的散剂更适合患鸡食欲减少甚至废绝时使用,无毒副作用。其结果将为治疗目前尚无有效药物的鸡呼吸道疾病提供有力的手段和途径,对养鸡业健康发展有着十分重要的意义,应用价值和市场前景广阔。
以下是发明人给出的实施例,需要说明的是,以下的实施例均是较佳的例子,用于说明本发明的效果,本发明并不限于这些实施例。
实施例1:
处方:石膏160g、知母60g、紫花地丁60g、金银花60g、连翘80g、龙胆草60g、板蓝根80g、大青叶60g、鱼腥草80g、射干40g、赤芍60g、玄参60g、生地50g、麦冬50g、桔梗40g、蟾酥0.5g;制成1000mL。
制法:上述配方中的原料除蟾酥外的原料粉碎成粗粉,蟾酥则研磨为极细的粉末,取石膏加水煎20分钟,然后加入其它药物按常规的高压方法煎煮两次,第一次1.5小时,第二次为1小时,合并煎液,放置24小时,滤过,滤液浓缩至每毫升含1克生药,滤液中加入蟾酥粉末和微量辅料苯甲酸钠0.3g,搅匀,静置,灌封,灭菌,即得中草药合剂。
性状:本品为棕褐色的液体;气微。
药方分析:
本发明的处方是申请人根据多年临床经验,在中兽医药理论的指导下,按卫气营血辨证,针对鸡呼吸系统疾病的特征和临床表现组成本方。方中金银花、紫花地丁、连翘、板兰根、大青叶、鱼腥草、射干、蟾酥清热解毒药,透热外出。其中板兰根、大青叶善治热毒时疫、咽喉肿痛、热毒发斑;射干、鱼腥草祛痰、平喘等作用;龙胆草清泻肝胆之火;现代药理学研究证明,金银花、连翘、板兰根、大青叶、鱼腥草、射干均有不同程度的抑制病毒作用。石膏、知母,清热泻火药,清泻肺胃热;配以赤芍,凉血活血,主治血热妄行引起的各种出血症和瘟病发斑;玄参、生地、麦冬具有滋阴清热,用于温病引起的津液亏损,桔梗具有宣肺祛痰,排脓消肿和引药上升之力。诸药合用,清热、解毒、滋阴,能使热毒迅速清除。
主要药效学试验:
特别说明:以下文中出现的中草药合剂,均指本发明的治疗鸡呼吸道疾病的药物。
1、体外抗病毒试验
实验材料:
新城疫F48E9病毒株EID50为10-6.71,鸡传染性支气管炎病毒H52毒株,由西北农林科技大学重大动物疫病防治与畜产品安全工作室提供。
9日龄非免鸡胚,84枚,购自杨凌绿方公司。随机分为以下7组,每组12枚。
(1)新城疫病毒治疗组:先经尿囊腔接种病毒0.1mL,置胚于37℃温箱60min后,取出,每胚尿囊腔再注射中草药合剂0.2mL。
(2)新城疫病毒预防组:先于尿囊腔注射药物0.2mL,置胚于37℃温箱60min后,取出,每胚于尿囊腔接种病毒0.1mL。
(3)鸡传染性支气管炎病毒治疗组:先经尿囊腔接种病毒0.1mL,置胚于37℃温箱60min后,取出,每胚尿囊腔再注射中草药合剂0.2mL。
(4)鸡传染性支气管炎病毒预防组:先于尿囊腔注射药物0.2mL,置胚于37℃温箱60min后,取出,每胚于尿囊腔接种病毒0.1mL。
(5)金刚烷胺对照组:先于尿囊腔接种病毒0.1mL,置胚于37℃温箱60min后,取出,每胚卵黄囊注射金刚烷胺水溶液0.2mL。
(6)新城疫病毒对照组:先于尿囊腔接种病毒0.1mL,置胚于37℃温箱60min后,取出,于尿囊腔注射生理盐水0.2mL。
(7)鸡传染性支气管炎病毒对照组:先于尿囊腔接种病毒0.1mL,置胚于37℃温箱60min后,取出,于尿囊腔注射生理盐水0.2mL。
以上各组鸡胚接种完毕后,用石蜡封孔。放入37.5℃温箱孵育96小时,每12小时照蛋一次,弃去24小时内死亡的鸡胚。收集余胚尿囊液,测定其血凝(HA)效价。试验结果见表1。并分别与对照组进行方差分析,差异极显著(P<0.01),结果表明,中草药合剂在鸡胚内对新城疫病毒F48E9毒株具有显著的抑制作用。
表1鸡胚试验血凝效价测定结果
组别 | 胚数(枚) | 血凝效价(x±S) |
新城疫病毒治疗组 | 11 | 2.09±1.70<sup>**</sup> |
新城疫病毒预防组 | 12 | 2.67±1.15<sup>**</sup> |
传染性支气管炎病毒治疗组 | 12 | 2.50±1.17<sup>**</sup> |
传染性支气管炎病毒预防组 | 12 | 3.50±0.67<sup>**</sup> |
金刚烷胺组 | 12 | 3.31±0.67<sup>**</sup> |
组别 | 胚数(枚) | 血凝效价(x±S) |
新城疫病毒对照组 | 10 | 6.50±0.85 |
传染性支气管炎病毒对照组 | 10 | 5.60±0.30 |
注:**差异极显著(P<0.01)
2.人工感染试验
将240只健康雏鸡随机分为以下6组,每组40只,3组用于新城疫病毒感染实验,3组用于传染性支气管炎病毒感染实验,感染病毒量为0.5mL/只(含2.65×103ELD50),药物灌服剂量为每只每次0.5mL,12小时灌服1次。
(1)预防组:于给药后24小时接种病毒0.5mL,连续给药3d。
(2)治疗组:于给药前24小时接种病毒0.5mL,连续给药3d。
(3)对照组:灌服生理盐水前24小时接种病毒0.5mL,每12小时灌服生理盐水0.5mL,连续3d。观察各组鸡的临床症状、死亡情况及剖检变化,并记录结果。
动物试验中,新城疫病毒对照组在给毒48小时后,逐渐出现临床症状;60小时后,其他3组出现临床症状。体温升高,升幅多在0.5℃~1℃,有的鸡甚至达到1℃以上。食欲减少或不吃、昏睡、拉黄绿色或黄白色稀粪、呼吸困难、伸头、张口呼吸、倒提时有大量黏液从口内流出,有的病鸡出现神经症状,96~128小时为死亡高峰期。剖检可见典型新城疫病变。预防组、治疗组与对照组之间进行X2检验,结果预防组、治疗组与对照组相比较,差异显著,说明中草药合剂有明显抑制病毒作用。雏鸡存活率和平均存活天数见表2-1。
传染性支气管炎病毒对照组在给毒48小时后,逐渐出现临床症状;60小时后,其他2组出现临床症状。咳嗽,打喷嚏,流鼻涕及气管啰音,精神沉郁,食欲减退,饮水量增加。96~128小时为发病高峰期。剖检可见气管有浆液性渗出物,肾脏苍白、肿大、肾小管和输尿管因尿酸盐沉积而扩张。治疗组、预防组与对照组之间进行X2检验,结果治疗组、预防组与对照组相比较,差异显著,说明中草药合剂有明显抑制病毒作用。雏鸡发病数和发病率见表2-2。
表2-1新城疫病毒人工感染试验雏鸡存活率和平均存活天数
组别 | 感染只数 | 存活数 | 存活率% | 平均存活天数d |
预防组 | 40 | 24 | 60<sup>*</sup> | 8.63 |
治疗组 | 40 | 16 | 40<sup>*</sup> | 8.45 |
对照组 | 40 | 2 | 5 | 5.73 |
注:*差异显著(P<0.05)
表2-2传染性支气管炎病毒人工感染试验雏鸡发病率
组别 | 感染只数 | 发病数 | 发病率% |
预防组 | 40 | 20 | 50<sup>*</sup> |
治疗组 | 40 | 18 | 45<sup>*</sup> |
对照组 | 40 | 36 | 90 |
注:*差异显著(P<0.05)
3体外抑菌试验
大肠埃希菌、鼠伤寒沙门氏菌、多杀性巴氏杆菌、无乳链球菌、金黄色葡萄球菌的标准菌株,均由西北农林科技大学兽医微生物学实验室提供。采用琼脂扩散法,打孔,观察抑菌环大小并记录结果。同时用青霉素抑菌试验作对照(结果见表3)。
表3中草药合剂对5种细菌的抑菌结果(mm)
4.中草药合剂对机体免疫器官的影响
昆白系小白鼠(体重18~22g,雌雄各半),购自第四军医大学实验动物中心,40只、雏鸡(0日龄,雄性),30只。将小鼠随机分为两组,试验组小鼠每只每天插胃管灌服中草药制剂0.2mL,对照组小鼠灌服生理盐水0.2mL。雏鸡也同样分为两组,试验组自由饮用中草药制剂与水的等量混合液,对照组自由饮水。
分别于给药前(0d),给药后7d、14d测定小鼠脾脏指数;于给药后20d测定雏鸡法氏囊指数。取小鼠脾脏、胸腺及鸡法氏囊、脾脏制备组织学切片,光镜下观察、记录、照像。
分别于给药前(0d),给药后7d、14d测定小鼠T淋巴细胞酯酶染色率、腹腔巨噬细胞吞噬率。
4.1小鼠脾脏指数
灌药7d、14d后,试验组与对照组相比,脾脏指数均无明显变化,但14d时试验组脾脏指数略高于对照组。
4.2雏鸡法氏囊指数
从0日龄起,让雏鸡自由饮用中草药制剂20d后,实验组雏鸡法氏囊指数为4.92±0.69(mg/g),对照组雏鸡法氏囊指数为2.80±0.66(mg/g),试验组与对照组法氏囊指数相比差异极显著(P<0.01)。
4.3免疫器官组织学观察
小鼠灌药14d时,试验组脾脏与对照组相比,白髓面积显著增大,淋巴小结结构清晰,小结内中小淋巴细胞数量增加,中央动脉周围淋巴鞘淋巴细胞也见增多。灌药14d时,试验组胸腺脂肪变性面积显著低于对照组,且试验组胸腺皮质、髓质结构清晰,皮质内淋巴细胞密度高于对照组。
雏鸡20日龄时,试验组脾脏红髓、白髓结构清晰,白髓面积显著高于对照组;淋巴小结数量多于对照组,且淋巴小结个体也显著增大;小结内中小淋巴细胞密度也显著高于对照组。20日龄时,试验组法氏囊皱襞增加,皱襞内史丹纽士滤泡显著多于对照组,且其个体也比对照组大。试验组单个史丹纽士滤泡皮质、髓质清晰,皮质厚度大于对照组,皮质内核蓝染的中、小淋巴细胞密度高于对照组。
4.4中草药合剂对小鼠T淋巴细胞酯酶染色率的影响(见表4)
表4灌药前后小鼠T淋巴细胞酯酶染色率变化
灌药天数(d) | 组别 | 小鼠数(只) | 酯酶染色率x±S(%) |
0 | 试验组对照组 | 55 | 37.41±3.94<sup>a</sup>37.51±1.81<sup>b</sup> |
7 | 试验组对照组 | 1010 | 48.98±3.52<sup>c</sup>41.06±1.77<sup>d</sup> |
14 | 试验组对照组 | 1010 | 48.81±2.16<sup>e</sup>42.08±2.20<sup>f</sup> |
注:①组间a:b,P>0.05;c:d,e:f,P<0.01;
②组内c:a,P<0.01;d:b,P<0.05;e:c,f:d,P>0.05。
根据表4,灌药前两组小鼠血液中成熟T淋巴细胞数量并不存在差异,经灌用中草药制剂7d后,小鼠血液中成熟T淋巴细胞数量迅速上升,虽对照组也有所上升,但试验组染色率显著高于对照组。而14d后,两组小鼠血中成熟T淋巴细胞数量不再继续增加,试验组小鼠血中成熟T淋巴细胞数量仍保持于较高水平。
4.5中草药合剂对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力影响(见表5)
表5灌药前后小鼠腹腔巨噬细胞吞噬率变化
灌药天数(d) | 组别 | 小鼠数(只) | 吞噬率x±S(%) |
0 | 试验组对照组 | 55 | 28.19±4.01<sup>a</sup>27.68±4.64<sup>b</sup> |
灌药天数(d) | 组别 | 小鼠数(只) | 吞噬率x±S(%) |
7 | 试验组对照组 | 1010 | 55.47±4.13<sup>c</sup>39.63±4.00<sup>d</sup> |
14 | 试验组对照组 | 1010 | 65.64±7.60<sup>e</sup>37.66±4.19<sup>f</sup> |
注:①组间a:b,P>0.05;c:d,e:f,P<0.01;
②组内c:a,e:c,P<0.01;d:b,P<0.01;f:d,P>0.05。
表5显示:试验前两组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性无差异,经灌药后7d试验组小鼠腹腔巨噬细胞活性已明显高于对照组;虽对照组小鼠腹腔巨噬细胞吞噬活性在7d内有所升高但仍低于试验组,且7d后其活性不再继续增长,而试验组小鼠腹腔巨噬细胞活性继续增长吞噬率达65.64%,显著高于对照组37.66%(p<0.01)。
5.中草药合剂的抗炎作用研究
本研究应用了四种实验性炎症模型。包括三方面内容:一是毛细血管通透性的测定,包括皮内染料渗出与腹腔染料渗出法;二是炎性肿胀的测定(耳壳炎症);三是肉芽肿模型。通过以下药效学试验,为临床应用提供充分的试验依据。具体试验见下。
昆明种小白鼠,18~22g,160只,雌雄各半,购自第四军医大学实验动物中心。
5.1中草药合剂对腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增高的影响
小鼠40只,雌雄各半,分为4组(n=10)。第1组为对照组,每只灌服生理盐水0.4mL;第2组、第3组、第4组分别按0.2mL/只、0.4mL/只、0.6mL/只灌服中草药合剂,每天给药一次。于第4天给药1小时后各鼠尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.3mL/只,随即于腹腔注射0.6%醋酸0.2mL/只致炎,20min后脱臼处死小鼠,打开腹腔,用6mL生理盐水分数次洗涤腹腔,吸出洗涤液,合并后加入生理盐水至10mL,3000r/min离心15min,在721分光光度计下,于590nm下比色测定光密度值并记录结果。结果见表6。
表6中草药合剂对腹腔注射醋酸所致小鼠腹腔毛细管通透性增高的影响(x±S)
注:*表示与对照组相比差异显著(P<0.05);**表示与对照组相比差异极显著(P<0.01);△△表示与0.2mL、0.4mL剂量组相比差异极显著。
表6结果表明,0.2mL剂量组对小鼠腹腔毛细血管通透性有显著抑制作用,0.4mL和0.6mL对小鼠腹腔毛细血管通透性有极显著的抑制作用,而且0.6mL与0.2mL、0.4mL相比有极显著的差异。
5.2中草药合剂对二甲苯所致小鼠皮肤毛细血管通透性的影响
40只小鼠,雌雄各半,随机分组,给药途径及剂量同5.1。第4天给药1小时后尾静脉注射0.5%伊文思蓝生理盐水溶液0.3mL/只,随即每只小鼠背部皮内注入二甲苯0.03mL致炎,20min后脱臼处死小鼠,背部剪毛,将蓝染的皮肤剪下切碎并放入6mL丙酮生理盐水中浸泡48小时,2000r/min离心10min,取上清液用721分光光度计(λ=590nm)测定光密度值并记录结果。结果见表7。
表7中草药合剂对小鼠皮肤毛细血管通透性的影响(x±S)
注:*表示与对照组相比差异显著(P<0.05);**表示与对照组相比差异极显著(P<0.01);△表示与0.4mL剂量组相比差异显著(P<0.05),△△表示与0.2mL剂量组相比差异极显著(P<0.01)。
表7结果表明,0.2mL剂量组对小鼠皮肤毛细血管通透性有显著的抑制作用,0.4mL和0.6mL剂量组对小鼠皮肤毛细血管通透性有极显著的抑制作用,而且各剂量组之间有明显差异呈正相关性。
5.3中草药合剂对二甲苯所致小鼠耳壳炎症的影响
40只小鼠,雌雄各半,随机分组,给药途径及剂量同5.1。第4天给药1小时后左耳壳滴二甲苯0.02mL/只,30min后脱臼处死,用剪刀沿小鼠的耳廓基线剪下两耳,在同一部位用0.6cm的穿孔器冲下耳片,两耳片称重求差,结果见表8。
表8中草药合剂对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀的影响(x±S)
注:**表示与对照组相比差异极显著(p<0.01);△△表示与0.2mL剂量组相比差异极显著(p<0.01)。
表8结果表明,0.2mL剂量组对小鼠耳壳炎症无显著抑制作用;0.4mL和0.6mL剂量组对小鼠耳壳炎症有极显著的抑制作用,而且0.4mL和0.6mL与0.2mL剂量组相比有极显著的差异。
5.4中草药合剂对小鼠棉球肉芽肿的影响
40只小鼠,雌雄各半,随机分组,各鼠用乙醚麻醉,背部剪毛消毒,切一0.5cm长的切口,从切口向两侧腋下各植入一个5mg的灭菌棉球,缝合切口。从手术当日起连续给药7天,第8天脱臼处死小鼠,切开背部皮肤,将棉球连同周围的肉芽组织一起取出,剔除脂肪组织,置于60℃干燥箱烘干,精确称取重量并记录结果,致炎棉球重量减去棉球重量求差,结果见表9。
表9中草药合剂对小鼠棉球肉芽肿的影响(x±S)
注:*表示与对照组相比差异显著(P<0.05);**表示与对照组相比差异极显著(p<0.01);△表示与0.4mL剂量组相比差异显著(P<0.05);△△表示与0.2mL剂量组相比差异极显著(P<0.01)。
表9结果表明,0.2mL剂量组对小鼠棉球肉芽肿有显著的抑制作用;0.4mL和0.6mL对小鼠棉球肉芽肿有极显著的抑制作用,而且0.6mL比其它剂量组有明显的抑制作用。
结果证明中草药合剂具有极显著的抗炎作用,而且与剂量呈正相关性。为临床应用提供了充分的试验依据。
6.中草药合剂的解热作用研究
家兔,20只,体重1.5~2.0kg,雌雄兼有,由西北农林科技大学实验动物中心提供。
6.1中草药合剂对松节油致家兔发热反应的影响
1.5kg~2.0kg家兔10只,雌雄兼有,适应环境3d,并连续3d适应性测量家兔直肠温度,选取基础体温38.5℃~39.5℃,温度变化<0.3℃家兔。试验当天间隔1小时测温2次,取平均值作为给药前体温,随机分为中草药合剂药物组和生理盐水对照组,按不同动物间用药剂量换算家兔的每次的用药剂量约为20mL/只,药物组灌服中草药合剂,对照组灌服等量的生理盐水,每隔12小时给药1次,共3次。每只家兔在末次给药前24小时背部皮下注射松节油0.4mL/kg,剔除温度<0.8℃家兔,末次给药后每隔1小时测温1次,共计5次,记录致热后24小时和药后各时间点体温。结果见表10。
表10中草药合剂对松节油致家兔发热的影响(x±S)℃
组别 | 药前温度 | 24h体温 | 1h | 2h | 3h | 4h | 5h |
对照组 | 39.25±0.59 | 41.39±0.09 | 41.29±0.18 | 41.20±0.22 | 41.19±0.25 | 41.06±0.2 | 40.98±0.14 |
药物组 | 39.20±0.22 | 41.08±0.10<sup>**</sup> | 40.93±0.07<sup>*</sup> | 40.81±0.54 | 40.75±0.11<sup>*</sup> | 40.64±0.11<sup>*</sup> | 40.49±0.13<sup>*</sup> |
注:与对照组相比*P<0.05,**P<0.01
从表10可以看出,中草药合剂对松节油所致家兔发热有明显的解热作用。各个时间点体温都有降低。
6.2中草药合剂对猪瘟活疫苗致家兔发热反应的影响
家兔数量、分组、饲养管理条件同6.1,各家兔按20mL/只灌服给药或生理盐水,每隔12小时给药1次,共3次,末次给药前背部皮下注射猪瘟活疫苗8头份/只,随后每隔1小时测温1次,共计6次,记录致热后各时间点体温。结果见表11。
表11中草药合剂对猪瘟活疫苗致热的解热作用(x±S)℃
组别 | 注苗前体温 | 1h | 2h | 3h | 4h | 5h | 6h |
对照组 | 39.25±0.19 | 40.23±0.30 | 40.55±0.17 | 40.78±0.10 | 40.43±0.10 | 40.33±0.15 | 40.22±0.29 |
药物组 | 39.22±0.16 | 39.90±0.26 | 39.97±0.30<sup>*</sup> | 40.38±0.08<sup>**</sup> | 40.24±0.10<sup>*</sup> | 39.89±0.07<sup>**</sup> | 39.67±0.10<sup>*</sup> |
注:与对照组相比*P<0.05,**P<0.01
从表11可看出使用中草药合剂的家兔,其体温上升慢,并且幅度小,各个点体温均差异显著,最高峰差异极显著,下降速度快。
7.中草药合剂的解热镇痛作用研究
小白鼠,80只,昆明种小鼠,18~22g,由第四军医大学实验动物中心提供。
7.1中草药合剂对热板致小鼠疼痛反应的影响
先将水浴锅加满水,使水面接触热板,调节恒温装置使水温控制在55±0.5℃,随后选取雌性小鼠数只,每次一只放在热板上,测痛阈值,判断标准为小白鼠放在热板上至出现舔后足所需时间,弃去痛阈值小于5秒、大于30秒或跳跃者,挑出40只小白鼠,随机分为生理盐水对照组和0.2mL、0.4mL、0.6mL中草药合剂药物组,均灌服给药。分别测定灌药后15min、30min、60min的痛阈值。结果见表12。
表12中草药合剂对小鼠热板疼痛反应的影响(x±S)
注:与对照组相比*P<0.05
从表12可看出中草药合剂对热板致小鼠疼痛反应效果不明显,在0.2mL和0.4mL两个剂量均差异不显著,对0.6mL剂量,在30min后差异显著(P<0.05)。
7.2中草药合剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响
小白鼠40只,雌雄各半,分组给药同7.1。60min后每鼠腹腔注射0.5%醋酸0.2mL,记录15min内扭体次数,判断标准为腹部内凹,伸展后肢,臀部抬高。结果见表13。
表13中草药合剂对醋酸致小鼠扭体反应的影响
注:与对照组相比*P<0.05,**P<0.01
从表13可以看出,使用0.4mL剂量灌服有明显作用(P<0.05),用0.6mL灌服作用极显著(P<0.01)。各剂量小鼠均出现扭体反应,其抑制率为0。
8.中草药合剂的急性毒性试验
1)对小鼠的毒性试验
昆明种小鼠40只,18~22g,雌雄各半,每次灌服0.5mL,每12小时一次,连续观察2周。结果:各组小鼠在急性毒性实验期间生长情况良好,均未见异常反应,无死亡发生。根据急性毒性分级标准,中草药合剂属无毒物。
2)对鸡胚的毒性试验:
10日龄非免鸡胚10枚,每个尿囊腔接种中草药合剂0.3mL,每12小时照蛋1次,鸡胚正常孵化至出壳,未发现对鸡胚有毒性。
实施例2:
处方:石膏160g、知母60g、紫花地丁60g、金银花50g、连翘80g、龙胆草60g、板蓝根80g、大青叶60g、鱼腥草80g、射干50g、赤芍60g、玄参60g、生地50g、麦冬50g、桔梗40g、蟾酥0.4g;制成1000mL。
制法:上述配方中的原料除蟾酥外的原料粉碎成粗粉,蟾酥则研磨为极细的粉末,取石膏加水先煎20分钟,然后加入其他药物高压煎煮两次,第一次1.5小时,第二次为1小时,合并煎液,放置24小时,滤过,滤液浓缩至每毫升含1克生药,滤液中加入蟾酥粉末和微量辅料苯甲酸钠0.3g,搅匀,静置,灌封,灭菌,即得中草药合剂。
临床治疗:
养殖户王××:1000只供试鸡,品种为尼克红,100日龄,2004年3月9日发病;症状:鸡群出现“咯咯”声,啰音,伸颈,仰头,张口呼吸,精神不振,食欲减少,排绿色稀粪;治疗:连续服用中草药合剂三天,每天两次,每只每次用药量相当于1.0g原生药。
养殖户贺××:2500只供试鸡,1000只为尼克红,170日龄,1500只为尼克粉,240日龄,2004年3月9日发病;症状:尼克红表现为甩水,有“咯咯”声,啰音,气喘,微咳,产蛋量下降,粪便稀白;尼克粉鸡表现为咳嗽,喘气,有“咯咯“声,产蛋量下降,产畸形蛋,沙皮蛋;治疗:连续服用中草药合剂三天,每天两次,每只每次用药量相当于1.0g原生药。
养殖户侯××:750只供试鸡,品种为尼克粉,123日龄,2004年4月1日发病;症状:咳嗽,喘气,明显呼吸困难,窒息而死,剖检可见喉部黏膜上有淡黄色凝固物附着,不易擦去,排绿色稀粪;治疗:连续服用中草药合剂三天,每天两次,每只每次用药量相当于1.0g原生药。
表14中草药合剂临床治疗情况
实施例3:
处方:石膏160g、知母60g、紫花地丁60g、金银花50g、连翘80g、龙胆草60g、板蓝根80g、大青叶60g、鱼腥草80g、射干40g、赤芍60g、玄参50g、生地50g、麦冬50g、桔梗40g、蟾酥0.5g;制成1000mL。
制法:上述配方中的原料除蟾酥外的原料粉碎成粗粉,蟾酥则研磨为极细的粉末,取石膏加水先煎30分钟,然后加入其它药物按常规的高压方法煎煮两次,第一次1.5小时,第二次为1小时,合并煎液,放置24小时,滤过,滤液浓缩至每毫升含1克生药,滤液中加入蟾酥粉末和微量辅料苯甲酸钠0.3g,搅匀,静置,灌封,灭菌,即得中草药合剂。
2006年4~12月,中草药合剂在河南省周口市部分鸡场进行临床试用,主要用于治疗鸡传染性喉气管炎等,共试用38个鸡场,约5万只鸡,其中各年龄阶段的鸡均有发病,传播迅速,未免疫鸡群发病较为严重,春、秋季发病较多。主要临床症状为流泪,精神沉郁,食欲减退,呼吸困难,伸长颈部张口呼吸并伴有啰音和喘鸣声,咳嗽,甩头并咳出血痰和带有血液的黏性分泌物,有时还咳出干酪样的分泌物。其病理变化为:喉头和气管黏膜肿胀、充血、出血、坏死,气管腔内有血凝块、黏液、淡黄色干酪样渗出物或气管栓塞。见图1。
发病后立即使用中草药合剂进行治疗,同时投服电解多维,改善鸡舍通风,注意环境卫生,用消毒剂每日进行1~2次消毒。经过采取以上综合措施,大部分鸡场疫情得到控制。治疗效果明显,创造直接经济效益40余万元,社会效益显著。
Claims (2)
1.一种用于治疗鸡呼吸道疾病的药物,其特征在于,制得该药物的有效成分的原料药及其重量百分比为:石膏:12%~24%,知母:4%~6%,紫花地丁:4%~6%,金银花:4%~6%,连翘:6%~8%,龙胆草:4%~6%,板蓝根:6%~8%,大青叶:4%~6%,鱼腥草:6%~8%,射干:4%~6%,赤芍:4%~6%,玄参:4%~6%,生地:4%~6%,麦冬:4%~6%,桔梗:4%~6%,蟾酥:0.04%~0.06%;上述原料药的重量百分比之和为100%。
2.权利要求1所述的用于治疗鸡呼吸道疾病的药物的制备方法,其特征在于,该方法按下列步骤制备:
取配方中的原料,除蟾酥外的其它原料粉碎成粗粉,蟾酥则研磨为极细粉末备用;
取石膏加水煎20~30分钟,然后加入粉碎成粗粉的其余药物按常规的高压方法煎煮两次,第一次1.5小时,第二次为1小时,合并煎液,放置24小时,滤过,滤液浓缩至每毫升含1克生药;
然后浓缩液中加入蟾酥粉末和微量辅料苯甲酸钠,搅匀,静置,灌封,灭菌,即得。
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