一种抗感染酶复合剂及其在饲料中的应用
技术领域
本发明涉及一种抗感染酶复合剂及其在饲料中的应用,属于饲料添加剂领域。
背景技术
抗感染酶(环己六醇磷脂酸酶,PI-PLC酶)可以切掉病原微生物与肠粘膜的粘合点,从而阻断了病原微生物对动物组织的感染,达到抗病抗感染的功能效果。PI-PLC的抗感染功能是当今世界最先进的发现与研究之一。从分子水平看,病原体感染首先是病原体类丁质与寄主细胞的多糖体粘着定植。组织细胞表面负责粘着的分子结构多糖环己六醇磷脂(GPI)连接的碳水化合物和蛋白正是病原微生物的识别与结合点。PI-PLC作用于肠粘膜的GPI上,一举切掉病原菌结合的碳水化合物核心基座、蛋白质、蛋白糖三种结构而剪断了病原微生物和寄主细胞的粘着。国内外已有不少试验证明PI-PLC在抗细菌、寄生虫感染方面具有实际意义。
饲料添加剂是指在饲料生产加工、使用过程中添加的少量或微量物质,在饲料中用量很少但作用显著。
本发明旨在提供一种抗感染酶复合剂及其在饲料中的应用,通过抗感染酶和其他组分的协同作用,显著提到抗感染酶的抗菌效果,并且对动物球虫病具有很好的治疗效果,在绿色生态饲料添加剂方面具有很好的市场应用前景。
发明内容
基于背景技术存在的技术问题,本发明针对背景技术存在的问题,提供一种抗感染酶复合剂及其在饲料中的应用,通过抗感染酶和其他组分的协同作用,显著提到抗感染酶的抗菌效果,并且对动物球虫病具有很好的治疗效果,在绿色生态饲料添加剂方面具有很好的市场应用前景。
本发明的目的通过以下技术方案实现:
一种抗感染酶复合剂,其由如下组分组成:
所述抗感染酶复合剂可以作为饲料添加剂使用,添加比例为500g/吨。
本发明的有益之处在于:
1)当前国内在防治鸡球虫病的方法中,药物防治仍处于主导地位,而国外已逐步走向通过生物、免疫的方法控制鸡球虫病。到目前为止,国内外已有不少的试验证明PI-PLC在抗球虫方面具有实际效果,由上海国龙生物科技有限公司研制生产的PI-PLC抗感染酶复合剂对鸡球虫病具有非常显著的治疗效果,各组分之间具有显著的协同效果,而且不具有抗药性,未来必有广阔的发展前景。
2)保质期长,常温下贮存可以达到24个月以上。
具体实施方式
实施例1:
抗菌活性测定:用微量稀释法测定单纯PI-PLC以及本发明的感染酶复合剂对4株大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),浓度均按照PI-PLC的浓度计算。
表1 PI-PLC对4株大肠杆菌的抗菌活性
(注:多重比较结果用ABC法表示,ABC表示差异极显著(P<0.01)
表2本发明的感染酶复合剂对4株大肠杆菌的抗菌活性
(注:多重比较结果用ABC法表示,ABC表示差异极显著(P<0.01)
本试验选取了2株标准大肠杆菌(E.coliCMCC44103、ATCC25922)、2株临床分离株(大肠杆菌猪分离株),3次试验测得PI-PLC以及本发明的感染酶复合剂对4株大肠杆菌的MIC和MBC值均一致。
方差分析结果表明,除2株临床分离株间MIC差异不显著外(P>0.05),其余菌株间差异均显著(P<0.05)。该结果与组内(每个菌株每次测得的MIC值)无差异有关。由此说明,PI-PLC对大肠杆菌不同菌株间及标准株之间的抗菌活性存在一定差异。虽然标准株与临床分离株抗菌活性存在差异,但也不表明临床分离株产生了耐药性。本试验标准株与临床分离株MIC仅相差0.4-0.6mg/L,且其MIC值小于8mg/L,按NCCLS(Nationalcommitteeofclinicallaboratorystandard)判定标准,尚未产生耐药性。这说明PI-PLC在临床上不产生所谓的耐药性。
此外,可以看出本发明的感染酶复合剂的抑菌杀菌效果显然优于单纯的PI-PLC,大大降低了抑菌浓度和杀菌浓度,显然各组分之间起到了显著的协同作用。
实施例2:
PI-PLC,本发明的感染酶复合剂和伏球对球虫病的疗效对比试验:
鸡球虫病是由多种鸡艾美耳球虫寄生于鸡肠上皮细胞引起的一种原虫病。本病分布广泛,感染普遍,一旦感染会造成鸡群生长迟缓,甚至造成大批死亡,带来巨大的经济损失,是集约化养鸡场最常见也是危害较严重的疾病之一。几十年来,国内外兽医科研人员一直在寻找更有效,更安全的抗球虫药。目前,市场上的抗球虫药已有40多种,较为常见的有伏球(地克珠利)和盐霉素等。由于鸡的致病性球虫对化学药物易产生抗药性,且抗球虫化学药物毒性较大,试验不当易发生中毒。这促使人们考虑应用其它方法来控制球虫病,如应用生物学方法控制球虫。
1材料与方法
1.1试验药物
PI-PLC:由上海国龙生物科技有限公司生物发酵生产,含PI-PLC酶活300U/克;
抗感染酶复合剂,其由如下组分组成:
伏球(地克珠利):浙江升华拜克生产,0.5%含量。
1.2实验动物及分组
广西三黄鸡苗50只,养至14日龄,随机将小鸡分5个小组,分别是PI-PLC试验组,抗感染酶复合剂试验组,伏球试验组,阳性试验组(只感染虫卵不喂药),阴性试验组(不感染虫卵不喂药),每组10只。
1.3虫卵
采集自广西大学动科院牧试站鸡场40日龄小鸡的带血粪便。采用常规卵囊收集法-漂浮法收集虫卵,将收集到的虫卵经过2000r/min的离心机离心,取沉淀物置于含2.5%重铬酸钾的平器皿培养,待其孢子化备用。
1.4饲料
自己配制粉状配合饲料,按照试验设计添加各类药物。
1.5试验设计与程序
1.5.1试验设计(见表1)
表3本次实验的具体要求
1.5.2试验步骤
1.5.2.1小鸡14日龄开始喂试验料,自由采食。
1.5.2.2小鸡15日龄进行称重记录,随后人工感染虫卵。感染后每天观察并记录鸡的粪便状态、出血程度和鸡的体况。
1.5.2.3人工感染虫卵后8d,测定每组鸡体重,然后扑杀剖检,进行病变评分,同时计算试验期各组所耗料。
1.6观察指标
1.6.1粪便记分:按5分制标准。0分:粪中无血;1分:粪中有少量血;2分:粪中有较多血,其他为正常粪;3分:粪中有较多量血,其他为白色粘液,或有2/3的血,有少量正常粪;4分:全部为血或2/3的血,其他为白色粘液。
1.6.2病变记分:按5分制记分。0分:肠道无异常;1分:充血或增厚;2分:肠道增厚,出血和渗出;3分:肠道弥漫性出血;4分:严重出血,肠道有血液或者肠道有肠芯。
1.6.3肠道中的卵囊数:剖杀后将肠道内容物取出,加一定量的水,充分混匀,用Mc.Mastei法计数每克粪便中的卵囊数。
1.6.4抗球虫指数(ACI):按美国Meick(默克)公司方法计数,即(相对增重值+存活率)-(病变值+卵囊值)。
病变值:每组记分的平均数×10
卵囊值:按角田清的标准,即卵囊数比数为0-1%的卵囊值为0;2%-25%时为5;26%-50%时为10;51%-75%时为20;76%-100%时为40。
卵囊比数=健康组或试验组卵囊数/感染不给药组卵囊数×100%
结果与分析(见表4)
表4对鸡球虫病的疗效结果
据规定,抗球虫指数(ACI)在120以下不宜作抗球虫药物;在160以下,抗球虫的能力低;在160-180间,抗球虫的效力为中等;在180以上,抗球虫非常有效。本试验中PI-PLC组ACI为216.05;抗感染酶复合剂ACI为312.06,化学药组ACI为182.87,可见PI-PLC和伏球抗球虫都非常有效,而PI-PLC的效力略优于地克珠利,抗感染酶复合剂效力最优。
此外,PC-PLC组的相对增重率为133.05%,抗感染酶复合剂组的相对增重率为167.92%,伏球试验组为98.87%。结果表明,PC-PLC组相对增重率高于伏球试验组,PC-PLC组对鸡的增重有较好的提高作用,而抗感染酶复合剂组则对鸡的增重有更好的提高作用。
地克珠利是近年来国际上研制的新一代抗球虫药。据报道:药物在肠道中能保持很高的浓度,持续时间长,高效广谱残留少,毒性低,性质稳定,不会抑制畜禽的生长发育。其抗球虫指数180以上,本试验结果与之相符合。
当前国内在防治鸡球虫病的方法中,药物防治仍处于主导地位,而国外已逐步走向通过生物、免疫的方法控制鸡球虫病。到目前为止,国内外已有不少的试验证明PI-PLC在抗球虫方面具有实际效果,本试验也证实由上海国龙生物科技有限公司研制生产的PI-PLC抗感染酶复合剂对鸡球虫病具有治疗效果,各组分之间具有显著的协同效果,而且不具有抗药性,未来必有广阔的发展前景。
以上所述,仅为本发明较佳的具体实施方式,但本发明的保护范围并不局限于此,任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内,根据本发明的技术方案及其发明构思加以等同替换或改变,都应涵盖在本发明的保护范围之内。