CN103908670B - 一种治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物 - Google Patents

Abstract

本发明涉及一种治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物，由以下重量份比例的原料组成：抗菌药3‑30份，透骨草5‑200份。将原料混匀后制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂，按照0.1‑7g/kg饲料添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，能够逆转细菌对抗菌药的耐药性，从而提高抗菌药的治疗效果，大幅降低用药成本和药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，且保障人类的食品安全。

Description

一种治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物

技术领域

本发明属于畜禽大肠杆菌感染治疗技术领域，尤其涉及一种治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物。

背景技术

大肠杆菌是常见的条件致病菌，也是常发的一种疾病，它可原发引起鸡急性败血症、腹膜炎、肝炎、肺炎、肠炎等多部位严重感染，亦可继发或混发于病毒病，给养殖业造成巨大的经济损失。阿莫西林、氨苄西林、头孢噻呋、头孢曲松、阿莫西林/克拉维酸、氨苄西林/舒巴坦等β-内酰胺环类抗生素是防治该病的常用的重要药物，随着养殖规模集约化程度愈来愈大，用药愈来愈泛滥，其耐药菌株愈来愈多，关于大肠杆菌耐药性的报道也较多。研究证实，耐药的主要机制之一是产生β-内酰胺酶，尤其是超广谱β-内酰胺酶（Extended-Spectrumβ-lactamase，ESBLs），该酶能较强和快速地水解β-内酰胺环，使这类抗生素丧失抗菌活性。ESBLs是β-内酰胺酶的最主要酶型，它不仅对头孢三代和氨曲南耐药，而且对氨基糖苷类、喹诺酮类和磺胺类呈交叉耐药，仅对碳青霉烯类、头霉烯类药物敏感。许多文献已经报道大肠杆菌的多重耐药性与产生ESBLs有密切关系，国内外对之较为关注。发明人最近开展了食品动物源致病菌ESBLs的检测、提取、酶对抗生素的水解率及舒巴坦、他唑巴坦以及中药的抑酶保护作用等研究，对部分ESBLs大肠杆菌的药敏试验表明，其多重耐药率明显高于非ESBLs菌株。另外，结果还表明产ESBLs菌株不仅对头孢噻呋等第三代头孢菌素严重耐药，而且亦对氟喹诺酮类、氨基糖苷类和磺胺类、磷霉素等多种抗菌药耐药，呈严重的多重耐药。发明人在产ESBLs菌株中分离到耐磷霉素产fosA3耐药基因的大肠杆菌，更加强了细菌的耐药性。大肠杆菌的耐药性造成养殖户用药成本增加，治疗疗程延长，畜禽死亡率增加，给生产带来较大经济损失，并且增加畜禽药物残留风险。因此，实际生产中亟需一种对无论是否耐药的大肠杆菌都能有较好治疗作用的药物，并能缩短治疗疗程，减少死亡率，降低经济损失且降低药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，也保障人类的健康安全。

发明内容

本发明要解决的技术问题是提供一种治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物，它能够较快地杀死细菌，克服抗菌药治疗由于耐药性问题造成的疗效差、用量大、残留高和成本高的缺陷，避免了单纯中药杀菌谱窄、杀菌慢的问题。

为解决以上技术问题，本发明采用以下技术方案：治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物，包括以下重量份的原料：抗菌药3-30份、透骨草5-200份。

抗菌药为β-内酰胺类、氟喹诺酮类、氨基糖苷类、卡巴氧类、多肽类、酰胺醇类或盐酸沃尼妙林中的一种。

β-内酰胺类抗菌药为阿莫西林、头孢曲松钠或头孢噻呋钠；氟喹诺酮类抗菌药为诺氟沙星；氨基糖苷类抗菌药为阿米卡星；卡巴氧类抗菌药为痢菌净；酰胺醇类为氟苯尼考；多肽类抗菌药为粘杆菌素。

上述治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物，包括以下重量份的原料：阿莫西林3-20份和透骨草40-180份，或诺氟沙星3-25份和透骨草30-190份，或阿米卡星5-30份和透骨草10-160份，或痢菌净3-20份和透骨草10-180份，或粘杆菌素3-30份和透骨草15-170份，或氟苯尼考5-30份和透骨草10-170份，或盐酸沃尼妙林7-30份和透骨草10-170份。

该复方组合物的剂型为散剂、片剂、口服液或颗粒剂。

上述治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物的制备方法，将透骨草粉碎过60目筛，再与粉末状的抗菌药混匀，按常规方法制备成散剂、片剂、口服液或颗粒剂。

针对目前畜禽大肠杆菌感染存在的耐药性问题，发明人利用广西特色中药透骨草与抗菌药组成复方组合物。研究证明，抗菌药中加入透骨草后，能够逆转细菌对抗菌药的耐药性，从而提高抗菌药的治疗效果。按常规方法将该复方组合物制成散剂、片剂、口服液或颗粒剂，按照0.1-7g主药/kg饲料的添加量添加到畜禽饲料中进行饲喂，可大幅降低用药成本和药物残留，为养殖户创造更高的经济效益，同时也确保了食品安全。

具体实施方式

一、透骨草对抗菌药的耐药逆转作用研究

抗菌药本身具有治疗大肠杆菌的效果，但由于产ESBLs耐药基因的大肠杆菌具有较强的耐药性，致使抗菌药在正常的使用剂量情况下并未表现出较好的治疗效果。

为了验证透骨草对抗菌药的耐药逆转作用，在96孔板上采用微量试管二倍稀释法，先测定了抗菌药对产ESBLs和fosA3耐药基因的大肠杆菌株的最小抑菌浓度和透骨草对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌株的亚抑菌浓度，然后在培养基中加入亚抑菌浓度的透骨草再次使用微量试管二倍稀释法培养测定抗菌药的最小抑菌浓度；利用连续传代法在加有同样亚抑菌浓度透骨草和同样浓度抗菌药的培养基中对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌株进行传代培养，直至观测到的抗菌药最小抑菌浓度与传代前相比变小4倍以上，即可判断为透骨草对抗菌药具有耐药逆转作用。试验结果统计如表1所示：

表1亚抑菌浓度（0.25g/mL）透骨草传代引起产ESBLs和fosA3大肠杆菌西药MIC的变化（mg/mL）。

由上表可知，抗菌药对耐药大肠杆菌的最小抑菌浓度均减小4倍以上，即可判断是透骨草对产ESBLs和fosA3耐药基因大肠杆菌具有耐药逆转作用。

二、本发明复方组合物的应用实例

按照以下方法制备实施例1-实施例20：将透骨草粉碎过60目筛后，作为基础原料，再与粉末状的抗菌药按重量份比例放入混合器中混匀，按常规方法，将实施例2、3、6、9、15和19制备成散剂；实施例1、5、10、16和18制备成片剂，实施例7、11、13和17制备成口服液；实施例4、8、12、14和20制备成颗粒剂。

表2实施例1-20的配方及产品

发明人将上述实施例获得复方组合物产品进行了如下实验：

1、实施例1-4所得的复方组合物产品对鸡大肠杆菌疾病的疗效实验

临床症状：广西玉林某鸡场，25日龄肉鸡，鸡群出现零星死亡，剖检个别鸡出现包心包肝病理变化，典型的大肠杆菌疾病特征。

实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断小鸡感染为大肠杆菌疾病，PCR扩增，证明产有TEM型的ESBLs耐药基因。

试验用药方案：将发病鸡群分成6组给药，第一组用实施例1按照3.8g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例2按照2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例3按照0.8g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例4按照2g/kg饲料的添加量给药；第五组用阿莫西林粉剂按照0.2g/kg饲料的添加量给药，第六组用透骨草粗散剂按照3.7g/kg饲料的添加量给药；以上六组用药方案均持续使用5天。

效果反馈：第一组至第四组的鸡群用药后，病鸡采食量上升，不再出现死鸡，继续使用3天，鸡群基本痊愈；第五组的鸡群用药2天后，鸡群多数仍不健康，仍有个别鸡死亡，继续使用3天，鸡死亡现象仍没有得到有效控制；第六组的鸡群用药2天后，鸡群没有太大的明显改观，继续使用3天，鸡死亡现象仍没有得到有效控制。可见，含有透骨草的复方组合物疗效优于单方。

2、实施例5-8所得的复方组合物产品对20日龄的肉鸭腹泻的疗效实验

临床症状：广西南宁某鸭场，20日龄肉鸭，鸭群拉水样粪便，粪便中有明显的未消化的饲料。鸭群只吃料但不长，个别腹泻严重的鸭逐渐的出现脚软慢慢死亡。

剖检病变：病死鸭脱水比较严重，个别鸭子还是挺大，鸭肝肿大、充血，部分鸭的肝脏上有白色膜，气囊浑浊，初步诊断为大肠杆菌或鸭浆膜炎。

试验用药方案：发病鸭群分六组给药，第一组用实施例5按照2g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例6按照1g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例7按照1g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例8按照0.2g/kg饲料的添加量给药；第五组用诺氟沙星粉剂按照0.15g/kg饲料的添加量给药，第六组用透骨草粗散剂按照2.0g/kg饲料的添加量给药；以上六组用药方案均持续使用5天。

使用效果反馈：第一组至第四组用药2天后，病鸭不再拉水样粪便，粪便成形，不再出现死鸭，继续使用3天，鸭群基本痊愈；第五组用药2天后，鸭群效果不明显，很多还是拉水样粪便，含有未消化的饲料，继续使用3天，稍微有些好转，但没有好彻底，稀水样粪便还是出现，养殖户对这两组鸭无法停药，只好改用实施例6所得的复方组合物，继续使用2天，才基本痊愈，再使用1天，粪便全部转为正常；第六组用药2天后，鸭没有太大的明显改观，继续使用3天，鸭死亡现象仍没有得到有效控制。可见，含有透骨草的复方组合物对鸭腹泻的疗效优于单方。

3、实施例9-12所得的复方组合物产品对30日龄的肉鸭腹泻的疗效实验

临床症状：广西钦州某鸭场，30日龄肉鸭，鸭群拉水样粪便，粪便中有明显的未消化的饲料。个别腹泻严重的鸭逐渐的出现脚软慢慢死亡。

剖检病变：病死鸭脱水比较严重，个别鸭子还是挺大，鸭肝肿大、充血，部分鸭的肝脏上有白色膜，气囊浑浊，初步诊断为大肠杆菌或鸭浆膜炎。

试验用药方案：发病鸭群分六组给药，第一组用实施例9按照1.5g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例10按照0.2g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例11按照2g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例12按照0.7g/kg饲料的添加量给药；第五组用阿米卡星粉剂按照0.2g/kg饲料的添加量给药，第六组用透骨草粗散剂按照2.0g/kg饲料的添加量给药；以上六组用药方案均持续使用5天。

使用效果反馈：第一组至第四组用药3天后，病鸭不再拉水样粪便，粪便成形，不再出现死鸭，继续使用2天，鸭群基本痊愈；第五组用药3天后，鸭群效果不明显，很多还是拉水样粪便，含有未消化的饲料，继续使用2天，稍微有些好转，但没有好彻底，稀水样粪便还是出现，养殖户改用实施例9所得的复方组合物，继续使用3天，粪便全部转为正常；第六组用药3天后，鸭没有太大的明显改观，继续使用2天，鸭死亡现象仍没有得到有效控制。可见，含有透骨草的复方组合物对鸭腹泻的疗效优于单方。

4、实施例13-16所得的复方组合物产品对45日龄的仔猪腹泻的疗效实验

临床症状：广西南宁某猪场，45日龄仔猪，该猪群在断奶转圈后，开始出现腹泻，拉水样粪便，粪便含有未消化的饲料，猪吃料但就是不长，个别严重的猪腹泻脱水死亡，没有出现呕吐症状，养殖户使用多种药物，治疗均没有出现理想效果。

剖检病变：剖检后猪肠壁菲薄，尤其小肠后端和结肠部位，肠粘膜脱落，肠壁充血、出血。

实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断仔猪感染为大肠杆菌疾病，PCR扩增，证明产有CTX-M型的ESBLs耐药基因和fosA3耐药基因。

试验用药方案：发病猪群分6组给药，第一组用实施例13按照0.3g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例14按照0.3g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例15按照3g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例16按照1g/kg饲料的添加量给药；第五组用痢菌净粉剂按照0.2g/kg饲料的添加量给药，第六组用透骨草粗散剂按照2.8g/kg饲料的添加量给药；以上六组用药方案均持续使用5天。

使用效果反馈：第一组至第四组用药2天后，猪群不再拉水样粪便，粪便成形，粪便中不再含有饲料，继续使用3天，猪群痊愈；第五组用药2天后，猪群仍不健康，继续使用3天，基本恢复健康，但个别还是拉糊状粪便，但停药3天后，猪群出现复发；第六组用药2天后，猪群无明显改观，继续使用3天，猪群继续拉稀，其余个别还比较严重。可见，含有透骨草的复方组合物对猪群疗效优于单方痢菌净和单方透骨草。

5、实施例17-20所得的复方组合物产品对50日龄的仔猪腹泻的疗效实验

临床症状：广西贵港某猪场，50日龄仔猪，该猪群在断奶转圈后，开始出现腹泻，拉水样粪便，粪便含有未消化的饲料，猪吃料但就是不长，个别严重的猪腹泻脱水死亡，没有出现呕吐症状，养殖户使用多种药物，治疗均没有出现理想效果。

剖检病变：剖检后猪肠壁菲薄，尤其小肠后端和结肠部位，肠粘膜脱落，肠壁充血、出血。

实验室诊断：取病变肝脏染片，革兰氏染色，显微镜下观察，可见红色的革兰氏阴性杆菌；初步判断为大肠杆菌疾病。通过大肠杆菌培养，生化实验鉴别，判断仔猪感染为大肠杆菌疾病，PCR扩增，证明产有OXA型的ESBLs耐药基因和fosA3耐药基因。

试验用药方案：发病猪群分6组给药，第一组用实施例17按照3g/kg饲料的添加量给药，第二组用实施例18按照4g/kg饲料的添加量给药，第三组用实施例19按照0.4g/kg饲料的添加量给药，第四组用实施例20按照2g/kg饲料的添加量给药；第五组用氟苯尼考粉剂按照0.3g/kg饲料的添加量给药，第六组用透骨草粗散剂按照3.8g/kg饲料的添加量给药；以上六组用药方案均持续使用5天。

使用效果反馈：第一组至第四组用药2天后，猪群不再拉水样粪便，粪便成形，粪便中不再含有饲料，继续使用3天，猪群痊愈；第五组用药2天后，猪群仍不健康，继续使用3天，基本恢复健康，但个别还是拉糊状粪便，但停药3天后，猪群出现复发；第六组用药2天后，猪群无明显改观，继续使用3天，猪群继续拉稀，其余个别还比较严重。可见，含有透骨草的复方组合物对猪群疗效优于单方氟苯尼考和单方透骨草。

Claims (2)

1.一种治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物，其特征在于，由以下重量份比例的原料组成：诺氟沙星3-30份，透骨草5-200份。

2.根据权利要求1所述的治疗畜禽大肠杆菌感染疾病的复方组合物，其特征在于，由以下重量份比例的原料组成：诺氟沙星3-25份，透骨草30-190份。