CN103828841B - 一种防治家蚕微粒子病的药物组合物及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及一种防治家蚕微粒子病的药物组合物及其应用。所述组合物含有阿苯达唑、氟苯尼考和磷酸三钠。本发明一方面利用阿苯达唑对寄生虫的驱杀作用机理，使药物在宿主家蚕体内代谢形成药物的内环境，致使寄生虫家蚕微孢子虫无法存活和繁殖，对家蚕微粒子病具有较好的防治效果；另一方面，通过结合利用氟苯尼考具有抗菌谱广，可以有效地治疗家蚕体内包括各种革兰氏阳性病原菌所致的细菌性肠胃病、革兰氏阴性菌所致的细菌性败血病，减少由于添食阿苯达唑溶液可能带来的潜在细菌病的问题；同时利用磷酸三钠有助溶和协同增效作用，可加速释放阿苯达唑和氟苯尼考达到目的浓度，提高治疗效果。将本发明药物喂食家蚕，可以提高家蚕的摄食量和对阿苯达唑的吸收率，从而实现利用较低浓度的阿苯达唑就可以起到防治家蚕微粒子病和家蚕细菌病的作用，降低用药成本。
Description
技术领域
本发明涉及家蚕微粒子病防治技术领域，具体涉及一种防治家蚕微粒子病的药物组合物及其应用。
背景技术
微孢子虫（Microsporidia）是一类专性细胞内寄生的单细胞真核生物，由家蚕微孢子虫感染引发的家蚕微粒子病导致蚕业生产上的毁灭性病害。调研发现，家蚕原种因感染微孢子虫而超出国家法定的标准（简称“超毒”）而淘汰的比例逐年增加的趋势相对明显。大体上，每生产1万张原种，就要因检测出微粒子病而淘汰近1000张，而剩余的带毒合格的和无毒合格的基本各占50%，直接经济损失达上千万元。微粒子病成为蚕种生产中蚕病防治的重点。
目前对于家蚕饲养中所发生的家蚕微粒子病，尚无十分有效的防治手段和药物。现有的治疗家蚕微粒子病的药物主要为农药或化学药品，如以农药多菌灵为主成分的防微灵等，治疗效果并不十分显著，且在用药过程中对蚕体的正常生长和发育有不同程度的影响，也造成养蚕环境的污染及蚕体内的药物残留，对人体健康也有一定的危害。因此，为了家蚕微粒子病治疗药物的更新换代，通过对更多更高效、广谱、使用安全的化学材料、兽药以及人类使用各种治疗寄生虫病的药物的不断筛选，期望获得具有显著防治作用的家蚕微粒子病新药物以满足蚕桑生产的需要。
阿苯达唑为一高效低毒的广谱驱虫药。临床可用于驱蛔虫、蛲虫、绦虫、鞭虫、钩虫、粪圆线虫等。在体内代谢为亚砜类或砜类后，抑制寄生虫对葡萄糖的吸收，导致虫体糖原耗竭，或抑制延胡索酸还原酶系统，阻碍ATP的产生，使寄生虫无法存活和繁殖。杨琼等在广东蚕业发表的“家蚕微粒子病治疗药物的研究I.药物筛选”中公开了阿苯达唑对家蚕微粒子病的防治效果较为理想，但是，杨琼等仅仅公开了500mg/L的阿苯达唑对家蚕微粒子病的治疗效果为95.8%，感染率为4.12%。
发明内容
本发明的目的是为了克服现有技术的不足，提供一种防治家蚕微粒子病的药物组合物。
本发明的另一个目的在于提供一种防治家蚕微粒子病的药物组合物的制备方法。
本发明的另一个目的在于提供一种防治家蚕微粒子病的药物组合物的应用。
本发明的目的通过下述技术方案予以实现：
一种药物组合物，所述药物组合物包括以下含量的组分：100～400 mg/L阿苯达唑、20～200 μg/L 氟苯尼考和50～400mg/L磷酸三钠。
优选地，所述药物组合物包括以下含量的组分：300 mg/L阿苯达唑、200 μg/L氟苯尼考和300mg/L磷酸三钠。
一种如上所述药物组合物的制备方法，包括如下步骤：按如上所述配方称取阿苯达唑、氟苯尼考和磷酸三钠，将阿苯达唑、氟苯尼考和磷酸三钠充分溶于冷开水中，即得药物。为了使药物混合的比较充分，优选地制备方式为：按如上所述配方称取阿苯达唑、氟苯尼考和磷酸三钠，三者混合后，加入少量水，充分研碎后再加水余量的水。
一种如上所述药物组合物的应用，具体应用于防治家蚕微粒子病。
优选地，所述应用的具体方法为：将所述药物组合物通过添食或喷布桑树上的方式给药，给药的时间为家蚕四龄起蚕开始，连续9～11日，直至家蚕上蔟，每日添食1～2次。
添食给药的方式主要用于实验室防治研究，喷布桑树上的方式给药主要是用于大田防治。喷布桑树的优选操作为：桑树在家蚕5龄眠前或熟蚕前2～3天内喷药1次；柞蚕上山（树）后遇雨7d内喷药1次，喷药量以叶面布满雾滴、叶尖和叶缘有少量药液滴下为止（柞蚕换树后再次遇雨需再喷1次）。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
本发明利用阿苯达唑对寄生虫的驱杀作用机理，采用添食给药途径，使药物在宿主家蚕体内代谢形成药物的内环境，致使寄生虫无法存活和繁殖，对家蚕微粒子病具有较好的防治效果，且其不会对养蚕环境产生污染，对家蚕的正常生长不会照成影响，对人类身体健康不会造成危害。
更重要的是本发明通过将阿苯达唑、氟苯尼考和磷酸三钠组合在一起喂食，结合利用氟苯尼考具有抗菌谱广，可以有效地治疗家蚕体内包括各种革兰氏阳性病原菌所致的细菌性肠胃病、革兰氏阴性菌所致的细菌性败血病，减少由于添食阿苯达唑溶液可能带来的潜在细菌病的问题，同时利用磷酸三钠有助溶和协同增效作用，可加速释放阿苯达唑和氟苯尼考达到目的浓度，提高家蚕的摄食量和对阿苯达唑的吸收率，从而，可以实现利用较低浓度的阿苯达唑就可以起到防治家蚕微粒子病的作用，降低用药成本。
具体实施方式
下面结合具体实施例对本发明作出进一步地详细阐述，所述实施例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。下述实施例中所使用的试验方法如无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，为可从商业途径得到的试剂和材料。
一、生物材料
家蚕（Bombyx mori）品种：高白A 、高白B、皓月*高白A（有斑A）、皓月*高白B（无斑B），由苏州大学贡成良教授提供。
家蚕微孢子虫（Nosema bombycis），又称家蚕微粒子孢子，简称N.b，由华南农业大学亚热带蚕病防控实验室经常规的桑叶添食继代繁殖获得，也可以采用本领域其他实验室或者研究院所提供的家蚕微孢子虫。
二、供试药品
阿苯达唑（商品名肠虫清）。“肠虫清”（阿苯达唑片），购自中美天津史克制药有限公司。
实施例1
一种药物组合物，所述药物组合物包括以下含量的组分：300mg/L阿苯达唑、200 μg/L氟苯尼考和300mg/L磷酸三钠。
药物的制备方法：10 L冷开水中加入阿苯达唑3g、氟苯尼考2mg和磷酸三钠3g，充分混匀即得药物。或者，即将阿苯达唑3g、氟苯尼考2mg和磷酸三钠3g充分混匀后，加入少量冷开水，充分研碎后，再加水余量冷开水，混匀后即得药物。
实施例2
一种药物组合物，所述药物组合物包括以下含量的组分：100mg/L阿苯达唑、100 μg/L氟苯尼考和100mg/L磷酸三钠。
药物的制备方法：10 L冷开水中加入阿苯达唑1g、氟苯尼考1mg和磷酸三钠1g，充分混匀即得药物。或者，即将阿苯达唑1g、氟苯尼考1mg和磷酸三钠1g充分混匀后，加入少量冷开水，充分研碎后，再加水余量冷开水，混匀后即得药物。
实施例3
一种药物组合物，所述药物组合物包括以下含量的组分：400mg/L阿苯达唑、50 μg/L氟苯尼考和400mg/L磷酸三钠。
药物的制备方法：10 L冷开水中加入阿苯达唑4g、氟苯尼考0.5mg和磷酸三钠4g，充分混匀即得药物。或者，即将阿苯达唑4g、氟苯尼考0.5mg和磷酸三钠4g充分混匀后，加入少量冷开水，充分研碎后，再加水余量冷开水，混匀后即得药物。
实施例4
将实施例1所述药物组合应用于防治家蚕微孢子病，具体步骤如下：
S1.攻毒处理：用1×105粒/mL浓度的家蚕微孢子虫N.b液涂抹在桑叶上，然后给试验蚕添毒约6小时。
S2.药物处理：将实施例1所述的药物组合物的药液浸泡桑叶，待晾干后喂蚕。
S3.对照组处理：分别设置2个对照组，水处理组1为没有添食N.b孢子、也没有添食本发明药物组合物的对照组；水处理组2为添食105粒/mL家蚕微孢子虫N.b孢子、无添食本发明药物组合物的对照组。
S4.治疗效果调查：将N.b孢子添毒、本发明药物组合物处理以及对照处理的试验蚕饲养至上蔟结茧，蚕蛾羽化后5～6天烘杀，逐蛾镜检，调查各区的微孢子虫感染率，并分别算出治疗指数。饲养期间每天记录家蚕的生长情况，记录死蚕或病蚕条数、结茧数、羽化数、死蛹数、双宫茧、总茧量和茧层量等。
治疗指数=[1-（试验区感染率÷对照区感染率）] ×100。另外，根据样品在640倍显微镜下镜检时每个视野内微粒子孢子的密度，标出各区的感染程度。
S5.试验结果
本实施例药物组合物治疗家蚕微粒子病试验结果如表1~3所示。
表1 四龄起蚕添食105粒/ml N.b孢子后每天的生长情况（总数）
表2 蚕茧收集情况
表3 实施例1所述药物组合物治疗家蚕微粒子病效果调查
对比例1
本实施例主要调查不同浓度的阿苯达唑溶液（商品名“肠虫清”）对家蚕微孢子虫的治疗效果，实验组共设五个浓度（2000mg/L、1000mg/L、500mg/L、200mg/L和100mg/L）；水处理组1为没有添食孢子，也没有用添食肠虫清的对照组；水处理组2为添食105粒/mL微粒子孢子、但没有添食肠虫清的对照组。具体步骤如下：
S1.攻毒处理：用1×105粒/mL浓度的家蚕微孢子虫N.b液涂抹在桑叶上，然后给试验蚕添毒约6小时。
S2.药物处理：将“肠虫清”原液分别稀释成100mg/L、200mg/L、500mg/L、1000 mg/L、2000mg/L浓度，将不同浓度的药液分别浸泡桑叶，待晾干后喂蚕。
S3.对照组处理：分别设置2个对照组，水处理组1为没有添食N.b孢子、也没有添食本发明药物组合物的对照组；水处理组2为添食105粒/mL家蚕微孢子虫N.b孢子、无添食本发明药物组合物的对照组。
S4.治疗效果调查：将N.b孢子添毒、本发明药物组合物处理以及对照处理的试验蚕饲养至上蔟结茧，蚕蛾羽化后5～6天烘杀，逐蛾镜检，调查各区的微孢子虫感染率，并分别算出治疗指数。饲养期间每天记录家蚕的生长情况，记录死蚕或病蚕条数、结茧数、羽化数、死蛹数、双宫茧、总茧量和茧层量等。
治疗指数=[1-（试验区感染率÷对照区感染率）] ×100。另外，根据样品在640倍显微镜下镜检时每个视野内微粒子孢子的密度，标出各区的感染程度。
S5.试验结果
“肠虫清”治疗家蚕微粒子病试验结果如表4~6所示。
表4 四龄起蚕添食105粒/ml N.b孢子后每天的生长情况（总数）
表5 蚕茧收集情况
表6 对比例1所述药物治疗家蚕微粒子病效果调查
由表4～6的实验数据可知，适当浓度的“肠虫清”溶液对家蚕微粒子病可以起到一定的治疗效果，且其对家蚕的正常生长不会造成影响。其中，水处理组l家蚕的发病率为0%，说明正常饲养的家蚕无感染微孢子虫。当用105粒/ml孢子添食家蚕，用2000mg/L “肠虫清”溶液处理后，与对照组2相比，实验组家蚕的发病率为0%，治疗效果最佳，达到100%；当添食的“肠虫清”溶液为l000mg/L时，实验组家蚕的发病率与对照组相比，也比较低，其中有斑A为0%，其余三个品种发病率为2～4.5%，效果比较明显。当添食“肠虫清”溶液浓度为500mg/L时，其治疗效果与l000mg/L相当，也有明显的效果。当“肠虫清”溶液浓度降低为200mg/L和100mg/L时，微粒子病发病率大大提高，分别为14.58%和25.53%。水处理组2的发病率最高为42.22%。以上结果说明“肠虫清”治疗家蚕微粒子病有一定的疗效，当浓度高于500mg/L时可以起到明显的治疗效果，低于500mg/L时，治疗作用减弱。
综合实施例1和对比例1的结果来看，本发明通过将阿苯达唑和氟苯尼考以及磷酸三钠组合在一起喂食，可以提高家蚕的摄食量和对阿苯达唑的吸收率，从而，可以实现利用较低浓度的阿苯达唑就可以起到防治家蚕微粒子病的作用，降低用药成本。
Claims (5)
1.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括以下含量的组分：100～400 mg/L阿苯达唑、20～200 μg/L 氟苯尼考和50～400mg/L磷酸三钠。
2.根据权利要求1所述的药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括以下含量的组分：300 mg/L阿苯达唑、200 μg/L氟苯尼考和300mg/L磷酸三钠。
3.权利要求1或2所述药物组合物的制备方法，其特征在于，按权利要求1或2所述配方称取阿苯达唑、氟苯尼考和磷酸三钠，将阿苯达唑、氟苯尼考和磷酸三钠充分溶于冷开水中，即得药物。
4.权利要求1或2所述的药物组合物的应用，其特征在于，应用于防治家蚕微粒子病。
5.根据权利要求4所述的药物组合物的应用，其特征在于，所述应用的具体方法为：将所述药物组合物通过添食或喷布桑树上的方式给药，给药的时间为家蚕四龄起蚕开始，连续9～11日，直至家蚕上蔟，每日添食1～2次。
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