CN117530955B - 一种防治乳腺炎的制剂及其应用 - Google Patents
一种防治乳腺炎的制剂及其应用 Download PDFInfo
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Abstract
本发明提供一种防治反刍动物乳腺炎的制剂及其应用,所述制剂包括碳酸盐缓冲合剂,还包括菊粉和玉米可溶性纤维中的至少一种,且不含有抗生素。通过将碳酸盐缓冲合剂和益生元复配,能纠正瘤胃pH,改善瘤胃内环境,维持胃肠道菌群稳态,进而达到了优异的预防和治疗乳腺炎的效果。本发明具有原料易获得、成本低、效果好的特点,适于广泛使用,在促进奶牛健康生长和提高免疫力方面具有潜在应用价值。
Description
技术领域
本发明属于药物制剂技术领域,具体涉及一种防治乳腺炎的制剂及其应用。
背景技术
乳腺炎主要是外源性病原体感染乳腺引起的局部炎症反应,但针对乳腺局部抗菌消炎的防治策略疗效有限。中医理论则认为“乳痈由肝气郁结、胃热壅滞而成”,提示机体或存在内源性因素诱发乳腺炎的致病途径。但是,现有的常规防治乳腺炎方法主要存在以下问题和缺点:
1.多数使用抗生素等药物,但长期使用可能导致耐药性和环境污染;
2.现有治疗反刍动物(尤其是奶牛)乳腺炎的费用高,副作用大,治疗效果不佳,容易出现复发的情况。
对于乳腺炎的致病原因,发明人研究发现,第一方面,乳腺炎奶牛伴随着明显的瘤胃菌群紊乱,并且将乳腺炎奶牛瘤胃菌群移植给小鼠可诱发小鼠乳腺炎。第二方面,在生产实践中,为了最大程度地提高产奶量,常对奶牛过饲喂高精料以满足其泌乳的营养需要。但是,长期过度地饲喂高精饲料会导致瘤胃pH值降低,瘤胃菌群紊乱,甚至是亚急性瘤胃酸中毒(SARA),也会导致乳腺炎。第三方面,实验研究证明,过食高精料诱导瘤胃菌群紊乱会增加奶牛乳中体细胞数(SCC),导致乳腺炎。据此,确证瘤胃菌群是奶牛乳腺炎的重要内源性诱因。因此,调整瘤胃pH值,以及恢复瘤胃内环境,特别是瘤胃菌群稳态,对奶牛乳腺炎的防治至关重要。
因此,本发明针创新性地提出了一种通过调节瘤胃pH值及瘤胃菌群防治乳腺炎的制剂,通过饲喂碳酸盐缓冲合剂纠正瘤胃pH,改善瘤胃内环境,维持瘤胃菌群稳态。同时,在不添加抗生素的前提下,通过添加菊粉、可溶性玉米纤维作为益生元调节胃肠道菌群,获得了优异的防治乳腺炎的效果,该方法具有原料易获得、成本低、效果好的特点,适于广泛使用,在促进生长和提高抗病性能方面具有潜在应用价值。
发明内容
本发明的目的在于提供了一种防治乳腺炎的制剂及其应用。本发明通过将碳酸盐缓冲合剂和益生元复配,达到了优异的预防和治疗乳腺炎的效果。
本发明提供的技术方案如下:
本发明的第一方面,提供了一种防治反刍动物乳腺炎的制剂,所述制剂包括碳酸盐缓冲合剂和益生元,不含抗生素。
进一步地,所述益生元包括菊粉和玉米可溶性纤维中的至少一种。
进一步地,所述碳酸盐缓冲合剂包括碳酸钠和碳酸氢钠。
进一步地,所述碳酸盐缓冲合剂包括碳酸钠、碳酸氢钠、氯化钠和氯化钾;
更进一步地,所述碳酸盐缓冲合剂中碳酸钠、碳酸氢钠、氯化钠和氯化钾的质量比为1-2:15-19:3-5:1-2。
在本发明的一个实施方式中,所述碳酸盐缓冲合剂中碳酸钠、碳酸氢钠、氯化钠和氯化钾的质量比为2:17:4:1。
进一步地,碳酸盐缓冲合剂与菊粉的质量比为1-2:1-2;
进一步地,碳酸盐缓冲合剂与玉米可溶性纤维的质量比为1-2:1-2。
本发明的第二方面,提供了一种防治反刍动物乳腺炎的制剂,所述制剂包括碳酸盐缓冲合剂、菊粉和玉米可溶性纤维。
进一步地,所述组合物中碳酸盐缓冲合剂、菊粉和玉米可溶性纤维的质量比为1-2:1-2:1-2;
在本发明的一个实施方式中,所述组合物中碳酸盐缓冲合剂、菊粉和玉米可溶性纤维的质量比为1:1:1。
本发明的第三方面,提供了一种防治反刍动物乳腺炎的制剂的制备方法,包括如下步骤:称取各原料并混合。
进一步地,所述制备方法还包括将混合后的原料溶解于水中的步骤。
更进一步地,所述溶解于水中的浓度为500g-800g/10L。
在本发明的一个实施方式中,所述溶解于水中的浓度为600g/10L。
本发明的第四个方面,提供了一种含有第一方面或第二方面所述制剂的组合物。
本发明的第五个方面,提供了第一方面和第二方面所述制剂或第四方面所述组合物的应用,所述应用包括如下应用中的至少一种:
(1)在制备治疗或预防反刍动物乳腺炎的产品中的应用;
(2)在制备治疗或预防反刍动物瘤胃菌群紊乱的产品中的应用;
(3)在制备降低反刍动物乳汁中体细胞数的产品中的应用;
(4)在制备降低反刍动物乳汁中炎性细胞因子浓度的产品中的应用;
(5)在制备改善反刍动物乳腺组织病理损伤的产品中的应用。
进一步地,所述组合物可以为药物、饲料添加剂或饲料。
更进一步地,所述反刍动物为牛、羊、骆驼或鹿。
更进一步地,所述牛为奶牛、黄牛、水牛或牦牛。
更进一步地,所述羊为绵羊或山羊。
在本发明的一个实施方式中,所述反刍动物为奶牛。
本发明的第六个方面,本发明提供了第一方面和第二方面所述制剂或第四方面所述组合物在防治反刍动物乳腺炎、预防瘤胃菌群紊乱、降低乳汁中体细胞数、降低乳汁中炎性细胞因子浓度或改善乳腺组织病理损伤中的应用。
进一步地,在所述应用中,所述制剂的服用剂量为500-800g/500kg体重。
在本发明的一个实施方式中,所述制剂的服用剂量为600g/500kg体重。
本发明的有益效果包括:
1. 通过使用碳酸盐缓冲合剂纠正反刍动物瘤胃pH,改善瘤胃内环境,维持瘤胃菌群稳态;
2. 本发明克服了现有技术中治疗反刍动物乳腺炎的制剂中通常添加抗生素的缺陷,在不添加抗生素的前提下,通过添加菊粉、可溶性玉米纤维作为益生元调节胃肠道菌群;
3.本发明通过碳酸盐缓冲合剂与益生元,特别是与菊粉和/或可溶性玉米纤维的协同作用,在反刍动物乳腺炎防治方面获得了优异的效果;
4.本发明组合物的原料易获得、成本低、效果好,适于广泛使用,在促进反刍动物生长和提高抗病性能方面具有潜在应用价值。
附图说明
图1为各组奶牛饲养方法。
图2为各组方剂对乳腺组织病理损伤的影响评估中H&E染色检测病理变化,标尺为50μm。
图3为各组方剂对乳腺组织病理损伤的影响评估中乳腺组织炎症评分。
图4为各组方剂对乳汁中SCC水平的影响。
图5为各组方剂对乳腺组织中MPO活性的影响。
图6为各组方剂对血清中TNF-α浓度的影响。
图7为各组方剂对血清中IL-1β浓度的影响。
附图中显著性程度记为:*代表p值小于0.05,**代表p值小于0.01,***代表p值小于0.001。
具体实施方式
除非另有定义,本发明中所使用的所有科学和技术术语具有与本发明涉及技术领域的技术人员通常理解的相同的含义。
术语“SCC”是指体细胞数。
术语“MPO”是指髓过氧化物酶。
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述,但是本领域技术人员将会理解,下列实施例仅用于说明本发明,而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者,按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者,均为可以通过市购获得的常规产品。
饲养方法
如图1所示,本实验共饲养45头体重和泌乳天数相近的荷斯坦奶牛,试验前在试验场地适应15天。
1.实验开始时,随机分为9组,包括对照组、模型组、方剂一组、方剂二组、方剂三组、方剂四组、方剂五组、方剂六组和方剂七组。
2. 在实验第一阶段(30天),所有组奶牛饲喂草料和精料质量比例为40:60的TMR混合饲料让其适应该饮食结构,连续饲喂30天,每天饲喂3次(早、中、晚各一次),自由饮水,并且每天挤奶3次(早、中、晚各一次)。
3. 在实验第二阶段(60天),除对照组之外,其他组奶牛饲喂草料和精料质量比例为30:70的TMR混合饲料;对照组饲喂草料和精料质量比例为40:60的TMR混合饲料。连续饲喂60天,每天饲喂3次(早、中、晚各一次),自由饮水,并且每天挤奶3次(早、中、晚各一次)。收集乳汁样本,检测乳中体细胞数及炎性细胞因子浓度,建立高精料诱导的奶牛乳腺炎模型。
4. 在实验第三阶段(3天),各组奶牛分别灌服按如下配方配置的方剂,灌服剂量均为10L/500kg体重。每天上午灌服一次,连续3天。
实验第三阶段中各组灌服方剂的组分及配比如下:
(1)对照组:温水10L。
(2)模型组:温水10L。
(3)对比例1(方剂一):碳酸钠50克;碳酸氢钠425克;氯化钠100克;氯化钾25克,溶解于温水10升。
(4)对比例2(方剂二):菊粉600g,溶解于温水10升。
(5)对比例3(方剂三):可溶性玉米纤维600g,溶解于温水10升。
(6)对比例4(方剂四):菊粉300g;可溶性玉米纤维300g,溶解于温水10升。
(7)实施例1(方剂五):碳酸钠25克;碳酸氢钠212.5克;氯化钠50克;氯化钾12.5克,菊粉300g,溶解于温水10升。
(8)实施例2(方剂六):碳酸钠25克;碳酸氢钠212.5克;氯化钠50克;氯化钾12.5克,可溶性玉米纤维300g,溶解于温水10升。
(9)实施例3(方剂七):碳酸钠17克;碳酸氢钠141克;氯化钠34克;氯化钾8克,菊粉200g;可溶性玉米纤维200g,溶解于温水10升。
5.实验结束后,采集各组
乳腺组织、乳汁和血液用于后续实验。
性能测试实验1 方剂对乳腺炎奶牛乳腺组织病理损伤的影响
通过在光学显微镜下观察H&E染色切片发现,模型组奶牛乳腺结构破坏严重、边缘模糊、腺泡内炎性细胞浸润。实施例1-3和对比例1-4方剂均能降低瘤胃菌群紊乱诱导的乳腺组织病理损伤和乳腺组织病理评分。
如图2所示,碳酸盐缓冲合剂与菊粉或可溶性玉米纤维联合使用(实施例1或实施例2)比单独使用其中一种(对比例1-3)对奶牛乳腺结构破坏的恢复作用更加明显。此外,碳酸盐缓冲合剂联合菊粉和玉米可溶性纤维(实施例3)的效果比其他组更为明显。如图3所示,乳腺组织病例评分结果同样表明,实施例3对乳腺炎奶牛乳腺组织的病理损伤的恢复效果最为显著。
性能测试实验2 方剂对奶牛SCC的影响
SCC是奶牛乳腺炎判定的最常用指标。如图4所示,模型组奶牛乳汁中SCC比对照组显著升高,说明建模成功;相比于模型组,实施例1-3和对比例1-4中方剂可不同程度的降低瘤胃菌群紊乱诱导的乳汁中SCC数的增高,其中,碳酸盐缓冲合剂与菊粉联合使用(实施例1),以及碳酸盐缓冲合剂与可溶性玉米纤维联合使用(实施例2)比碳酸盐缓冲合剂单独使用(对比例1)、菊粉单独使用(对比例2)和可溶性玉米纤维单独使用(对比例3)降SCC效果更加明显。此外,碳酸缓冲合剂、菊粉和可溶性玉米纤维联合使用(实施例3)降乳腺炎奶牛SCC效果最为显著。
性能测试实验3 方剂对乳腺组织中髓过氧化物酶(MPO)活性的影响
MPO活性是中心粒细胞数量和活性的重要标志,可作为乳腺炎指示物。如图5所示,相比于模型组,实施例1-3和对比例1-4中方剂处理后能够不同程度的降低乳腺炎奶牛乳腺组织MPO活性。其中,碳酸盐缓冲合剂与菊粉或可溶性玉米纤维联合使用(实施例1或实施例2)的效果优于单一类组分使用的效果;并且,相对于对比例1-4和实施例1-2,碳酸盐缓冲合剂、菊粉和可溶性玉米纤维三者联合(实施例3)对MPO活性的抑制作用显著提高。
性能测试实验4 方剂对血清中TNF-α浓度的影响
血清中TNF-α浓度能够反映奶牛的炎症水平,因此可以作为机体整体炎症水平和乳腺炎的指标。如图6所示,相比于模型组,实施例1-3和对比例1-4中方剂显著降低了瘤胃菌群紊乱诱发乳腺炎奶牛血清中TNF-α水平,其中酸缓冲合剂、菊粉和可溶性玉米纤维联合使用(实施例3)效果最明显,且显著优于实施例1和实施例2。
性能测试实验5 方剂对血清中IL-1β浓度的影响
对血清中炎性细胞因子IL-1β浓度进行了检测,如图7所示,相比于模型组,实施例1-3中方剂显著均降低了瘤胃菌群紊乱诱发乳腺炎奶牛血清中IL-1β水平,其中碳酸缓冲合剂、菊粉和可溶性玉米纤维联合使用(实施例3)的效果最显著。
上述实验结果表明,虽然单独通过碳酸盐缓冲溶液缓解瘤胃内pH纠正瘤胃内环境失衡,或者通过菊粉或可溶性玉米纤维作为益生元可以有效降低乳腺炎奶牛乳汁中SCC数量,进而降低乳腺炎相关炎症因子水平,达到一定的治疗和预防奶牛乳腺炎的效果。但是,在碳酸盐缓冲溶液的基础上添加菊粉和/或可溶性玉米纤维能够进一步强化缓解奶牛乳腺炎的效果,并且其效果显著优于单独使用碳酸盐缓冲溶液、菊粉或可溶性玉米纤维的效果。
最后应说明的是,以上各实施例仅用以说明本发明的技术方案,而非对其限制;尽管参照前述各实施例对本发明进行了详细的说明,但本领域的普通技术人员应当理解:其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改,或者对其中部分或者全部技术特征进行等同替换;而这些修改或者替换,并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的范围。
Claims (6)
1.一种防治反刍动物乳腺炎的制剂,其特征在于,所述制剂包括碳酸盐缓冲合剂、菊粉和玉米可溶性纤维;所述制剂中不含有抗生素;
所述碳酸盐缓冲合剂包括碳酸钠、碳酸氢钠、氯化钠和氯化钾;
所述碳酸盐缓冲合剂中碳酸钠、碳酸氢钠、氯化钠和氯化钾的质量比为2:17:4:1;
碳酸盐缓冲合剂、菊粉和玉米可溶性纤维的质量比为1:1:1。
2.如权利要求1所述的制剂的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括称取各原料并混合的步骤。
3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括将混合后的原料溶解于水中的步骤。
4.一种组合物,其特征在于,所述组合物含有权利要求1所述的制剂。
5.权利要求1所述的制剂或权利要求4所述的组合物的应用,其特征在于,所述应用包括如下应用中的至少一种:
(1)在制备治疗反刍动物乳腺炎的产品中的应用;
(2)在制备治疗反刍动物瘤胃菌群紊乱的产品中的应用;
(3)在制备降低乳腺炎奶牛乳汁中体细胞数的产品中的应用;
(4)在制备降低乳腺炎奶牛乳汁中炎性细胞因子浓度的产品中的应用;
(5)在制备改善乳腺炎奶牛乳腺组织病理损伤的产品中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于,所述产品为药品、饲料添加剂或饲料。
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