CN110447778A - 过瘤胃褪黑素在改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构和提高乳品质中的应用 - Google Patents

过瘤胃褪黑素在改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构和提高乳品质中的应用 Download PDF

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Abstract

本发明提供了过瘤胃褪黑素在提高乳品质和改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构中的应用。本发明发现将褪黑素制成过瘤胃褪黑素后，以口服的方式饲喂反刍动物，降低奶牛体细胞数，对体细胞数在40万/mL‑70万/mL的奶牛可以降低20万/mL‑40万/mL，并显著提高牛奶中乳蛋白、乳脂、干物质含量，降低牛奶中乳糖含量，明显改善牛奶质量，另外本发明还发现残留在瘤胃中的过瘤胃褪黑素还可增加瘤胃中菌群的丰度。

Description

过瘤胃褪黑素在改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构和提高乳 品质中的应用
技术领域
本发明涉及动物营养与饲料技术领域，具体地涉及过瘤胃褪黑素在改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构和提高乳品质中的应用。
背景技术
随着人们对乳制品需求的增加，奶牛产业逐渐壮大，大型规模化奶牛养殖场越来越多。但是，随着牛场规模扩大，奶牛养殖问题逐步凸显，例如：奶牛的繁殖健康、奶牛的营养调控等，其中最具有危害的，也是最难解决的为奶牛体细胞数高的问题。奶牛体细胞数的高与低，反应乳房的健康状况，与产奶量密切相关，由于奶牛体细胞数问题每年给奶牛养殖企业带来巨大的经济损失，因此对奶牛体细胞数的防控迫在眉睫。我国牛奶中乳成分，尤其是乳蛋白含量明显低于发达国家，乳蛋白含量高的牛奶具有更高的营养价值。
褪黑素是由松果体分泌的一种胺类物质。褪黑素通过调节促炎、抑炎因子，提高机体抗炎症能力，褪黑素可以减少由于应激产生的缓激肽、蛋白水解酶和前列腺素等物质的数量和不良反应，调整机体适应力，提高机体免疫力。
奶牛产业中，牛乳体细胞数高是每个养殖企业最头疼的问题，体细胞数高不仅对奶牛健康有影响，还会降低奶牛产奶量和牛奶质量，而且高体细胞牛奶对人体健康也有害处。因此，在收购牛奶时，对体细胞高于50万/mL的牛奶会减价收购或者拒收。近年来，褪黑素在奶牛中的应用越来越多，对荷斯坦奶牛用不同外源褪黑素处理方式，探究褪黑素在体内的分泌规律和代谢速率。在奶牛养殖过程中，使用褪黑素抗氧化复合物可以提高产后奶牛的情期受胎率，降低奶牛牛乳体细胞数，提高牛奶品质。对奶牛连续4天注射4.64mg褪黑素可以显著降低奶牛体细胞数，体细胞数在30万/mL～100万/mL的高产奶牛效果更加明显，实验中还发现褪黑素可以降低皮质醇浓度、白细胞、淋巴细胞和中性粒细胞数量，增加白蛋白、丙氨酸氨基转移酶和血清乳酸脱氢酶浓度。以上研究说明：注射褪黑素可以降低奶牛牛乳体细胞数，增加奶牛免疫力。
褪黑素还可以提高奶牛产后情期受胎率，实验测定22头奶牛产后至配种时的血液中褪黑素浓度，发现妊娠母牛血液中褪黑素浓度均高于60ppb，低于30ppb的奶牛均未妊娠。褪黑素可以改善冷冻精液品质、促进卵母细胞成熟、提高体外胚胎发育及玻璃化冷冻效率。
目前利用褪黑素降低体细胞数主要是通过注射方式，大多数牛场为了节省成本，注射褪黑素或者其他药物时并未使用一次性注射器。这样的注射方法存在很高的交叉感染风险，如果注射器没有洗干净，还可能存在药物互作。此外，注射时形成的针孔虽然非常小，但是在炎热的夏季，依然可能会有伤口感染的风险。近几年，褪黑素在动物生长性能上的研究取得了一定的成果，周爱民等用褪黑素对小鼠进行灌胃，结果表明，褪黑素对免疫功能低下或缺陷的小鼠，在特异性和非特异性免疫功能发挥免疫增强作用，但对于正常小鼠，褪黑素只能提高特异性细胞免疫功能。目前对于褪黑素研究还局限在小型实验动物阶段，仍然有诸多问题没有解决。
褪黑素直接饲喂，由于瘤胃微生物会利用褪黑素，不能让褪黑素尽可以多的到达小肠，影响反刍动物对褪黑素的吸收和利用，因此发明过瘤胃褪黑素，使其尽可以少的在瘤胃中停留，更多的在小肠中被吸收，从而提高奶牛对蛋白质利用率，节约蛋白饲料，降低生产成本，进而提高奶牛的经济效益。并且饲喂过瘤胃褪黑素还可以影响奶牛血液中与免疫应激相关的激素浓度，饲喂过瘤胃褪黑素可以提高奶牛血液中褪黑素浓度，但是由于血-乳屏障的存在，对牛奶中褪黑素含量并没有显著性影响。
发明内容
本发明的目的是在于提供过瘤胃褪黑素在提高乳品质和改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构中的应用。
本发明提供了过瘤胃褪黑素在改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构中的应用。
本发明提供了过瘤胃褪黑素在增加反刍动物瘤胃微生物丰富度中的应用。
本发明所述过瘤胃褪黑素通过口服的方式饲喂反刍动物。
过瘤胃制剂的制备方法是本领域内公知的方法，为了有效避开瘤胃微生物的降解，本领域技术人员能够根据不同的活性成分，基于本领域的公知常识制备过瘤胃制剂，这并不存在技术障碍。对于本申请而言，制备一种能够小部分残留在瘤胃内，大部分进入肠道被吸收的过瘤胃褪黑素，是本领域技术人员能够借鉴常规技术很容易实现的。本发明提供的过瘤胃褪黑素是由包衣和包核两部分组成，所述包衣为过瘤胃脂肪粉，所述包核的活性成分为褪黑素；所述包核是由活性成分褪黑素和辅料制备得到的颗粒；所述辅料由第一辅料和第二辅料组成。所述第一辅料为硬脂酸钙或二氧化硅，所述第二辅料含有淀粉，糊精和羧甲基纤维素钠。所述包核与包衣质量比为45:55～50:50，本发明的过瘤胃褪黑素中，褪黑素含量在4％～6％，第一辅料的含量为4.4％～4.6％，淀粉含量为21.52％～22.3％，糊精含量为15％～17％，羧甲酸纤维素钠含量为0.08％～0.1％，余量为过瘤胃脂肪粉，所述％均为质量比。
本发明提供了过瘤胃褪黑素在降低血清中皮质醇浓度、TNF-α浓度、IL-6浓度、或提高血清中IL-10浓度中的应用。
本发明提供了过瘤胃褪黑素在提高反刍动物乳品质中的应用。
具体地，所述的应用为以下任一或多个应用：
(1)降低反刍动物乳中体细胞数；
(2)提高乳蛋白含量；
(3)提高乳脂率；
(4)提高乳中干物质含量；
(5)降低乳糖含量。
优选地，上述应用中，所述过瘤胃褪黑素通过口服的方式饲喂反刍动物。
本发明还提供了褪黑素在制备药物或保健品中的应用，为以下任一应用：(1)在制备改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构药物、饲料添加剂或保健品中的应用；
(2)在制备能够增加反刍动物瘤胃微生物丰富度的药物、饲料添加剂或保健品中的应用；
(3)在制备能够提高反刍动物乳品质中的应用；
(4)在制备能够降低血清中皮质醇浓度、TNF-α浓度、IL-6浓度、或提高血清中IL-10浓度的药物、保健品或饲料添加剂中的应用。
上述褪黑素在制备药物或保健品中的应用中，所述过瘤胃褪黑素或含有褪黑素的制剂中褪黑素的有效使用剂量范围为0.6μg/kg～0.13mg/kg。
本发明所述的反刍动物为奶牛、黄牛、水牛、山羊、绵羊、骆驼、羊驼、羚羊、牛羚。
本发明提供了一种用于提高反刍动物乳品质的产品，其为含有褪黑素的反刍动物口服用药物、保健品或添加剂。
本发明的有益效果在于，本发明发现将褪黑素制成过瘤胃褪黑素后，以口服方式饲喂反刍动物，能够改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构和提高乳品质。主要表现在：降低奶牛体细胞数，对体细胞数在40万/mL-70万/mL的奶牛可以降低20万/mL-40万/mL。显著提高牛奶中乳蛋白、乳脂、干物质含量，降低牛奶中乳糖含量，明显改善牛奶质量。过瘤胃褪黑素还可增加瘤胃中菌群的丰度，提高奶牛对蛋白质利用率。
本发明探索直接饲喂过瘤胃褪黑素是否具有有益效果，发现饲喂过瘤胃褪黑素后，能够改善瘤胃微生物的结构，提高瘤胃微生物的丰度，提高反刍动物对蛋白质利用率，改善奶牛乳品质，降低牛奶体细胞数和改善乳品质。本发明为过瘤胃褪黑素是否能成为饲料添加剂提供了有意义的研究基础。
附图说明
图1为饲喂7天过瘤胃褪黑素的奶牛牛乳体细胞数对比图。
图2为饲喂14天过瘤胃褪黑素的奶牛牛乳体细胞数对比图。
图3为饲喂21天过瘤胃褪黑素的奶牛牛乳体细胞对比图。
图4为全期饲喂过瘤胃褪黑素的奶牛牛乳体细胞数变化对比图。
图5为饲喂过瘤胃褪黑素7天乳蛋白平均值对比图。
图6为饲喂过瘤胃褪黑素14天乳蛋白平均值对比图。
图7为饲喂过瘤胃褪黑素21天乳蛋白平均值对比图。
图8为饲喂过瘤胃褪黑素7天乳脂平均值对比图。
图9为饲喂过瘤胃褪黑素14天乳脂平均值对比图。
图10为饲喂过瘤胃褪黑素21天乳脂平均值对比图。
图11为饲喂过瘤胃褪黑素7天乳糖平均值对比图。
图12为饲喂过瘤胃褪黑素14天乳糖平均值对比图。
图13为饲喂过瘤胃褪黑素21天乳糖平均值对比图。
图14饲喂过瘤胃褪黑素7天干物质平均值对比图。
图15饲喂过瘤胃褪黑素14天干物质平均值对比图。
图16饲喂过瘤胃褪黑素21天干物质平均值对比图。
图17稀释曲线(rarefaction curve)。
图18Shannon多样性曲线。
图19chao 1指数，observed species指数,PD whole tree指数,Shannon指数。
图20饲喂过瘤胃褪黑素7天血清中褪黑素含量。
图21饲喂过瘤胃褪黑素14天血清中褪黑素含量。
图22饲喂过瘤胃褪黑素21天血清中褪黑素含量。
图23连续饲喂21后停止饲喂7天血清中褪黑素含量。
图24饲喂过瘤胃褪黑素7天血清中皮质醇含量。
图25饲喂过瘤胃褪黑素14天血清中皮质醇含量。
图26饲喂过瘤胃褪黑素21天血清中皮质醇含量。
图27连续饲喂21后停止饲喂7天血清中皮质醇含量。
图28饲喂过瘤胃褪黑素7天血清中TNF-α含量。
图29饲喂过瘤胃褪黑素14天血清中TNF-α含量。
图30饲喂过瘤胃褪黑素21天血清中TNF-α含量。
图31连续饲喂21后停止饲喂7天血清中TNF-α含量。
图32饲喂过瘤胃褪黑素7天血清中IL-6含量。
图33饲喂过瘤胃褪黑素14天血清中IL-6含量。
图34饲喂过瘤胃褪黑素21天血清中IL-6含量。
图35连续饲喂21后停止饲喂7天血清中IL-6含量。
图36饲喂过瘤胃褪黑素7天血清中IL-10含量。
图37饲喂过瘤胃褪黑素14天血清中IL-10含量。
图38饲喂过瘤胃褪黑素21天血清中IL-10含量。
图39连续饲喂21后停止饲喂7天血清中IL-10含量。
图40饲喂7天(A)、14天(B)、21天(C)、停止饲喂7天(D)牛奶中MT含量。
图41饲喂7天(A)、14天(B)、21天(C)、停止饲喂7天(D)牛奶中TNF-α含量。
图42饲喂7天(A)、14天(B)、21天(C)、停止饲喂7天(D)牛奶中IL-10含量。
具体实施方式
除非另有定义，下文中所使用的所有专业术语与本领域技术人员通常理解的含义相同。本文中所使用的专业术语只是为了描述具体实施例的目的，并不是旨在限制本发明的保护范围。
除有特别说明，本发明中用到的各种试剂、原料均为可以从市场上购买的商品或者可以通过公知的方法制得的产品，以下实验中使用褪黑素药剂均采购于SIGMA公司。
本发明提供的过瘤胃褪黑素，由包衣和包壳两部分组成，所述包衣为过瘤胃脂肪粉，所述包核的活性成分为褪黑素；所述包核是由活性成分褪黑素和辅料制备的颗粒；所述辅料由第一辅料和第二辅料组成。所述第一辅料为硬脂酸钙或二氧化硅，所述第二辅料由淀粉，糊精和羧甲基纤维素钠组成。所述包核与包衣质量比为45:55～50:50，本发明的过瘤胃褪黑素中，褪黑素含量在4％～6％，第一辅料的含量为4.4％～4.6％，淀粉含量为21.52％～22.34％，糊精含量为15％～17％，羧甲酸纤维素钠含量为0.08％～0.1％余量为过瘤胃脂肪粉。过瘤胃制剂的制备方法为本领域常规、公知的方法，在此不赘述。经过瘘管牛实验，该过瘤胃褪黑素，过瘤胃率为83％～85％。本发明采用过瘤胃纯棕榈油脂肪粉，可以很大程度通过瘤胃；纯植物来源，棕榈油含量高，不是钙皂，具有良好的适口性；颗粒大小均匀，100％脂肪；无反式脂肪酸。
实施例1过瘤胃褪黑素在降低牛乳中体细胞、提高乳品质的效果验证
1.过瘤胃褪黑素的饲喂
选取35头体细胞较高奶牛(体细胞在30万/mL～100万/mL)，分为3组，各组内、组间牛的体重无显著差异，平均体重为600kg。饲喂过瘤胃褪黑素，其中含有效成分褪黑素为40mg组15头(实验组1，即每头牛饲喂过瘤胃褪黑素，其中褪黑素的有效剂量为40mg)，80mg组15头(实验组2，即每头牛饲喂过瘤胃褪黑素，其中褪黑素的有效剂量为80mg)，对照组5头(不饲喂过瘤胃褪黑素)。连续饲喂过瘤胃褪黑素21天，每隔两天采集奶样，每7天随机每组淘汰5头实验组奶牛，不再饲喂过瘤胃褪黑素，但依然采淘汰奶牛一周的奶样。
2.奶样DHI分析
每周送测奶样，参考《奶牛场DHI测定与应用指导》李英主编。统计体细胞数、乳蛋白率、乳脂率、乳糖率和总干物质。
(1)降低牛奶中的奶牛体细胞数。通过图1、图2和图3可知，饲喂7天，14天，21天褪黑素，饲喂过瘤胃褪黑素组体细胞均值均低于对照组。其中饲喂14天80mg组体细胞数均值20.12万/mL显著低于对照组41.67万/mL(P＜0.05)。通过图4，可以看出，全期饲喂褪黑素可以降低奶牛体细胞数，对体细胞数在40万/mL～70万/mL的奶牛可以降低20万/mL～40万/mL。
(2)提高牛奶中乳蛋白含量。饲喂7天、14天和21天褪黑素40mg和80mg，实验发现，饲喂40mg组可以显著提高牛奶中乳蛋白含量。通过图5：40mg组饲喂7天乳蛋白平均值为3.37％，显著高于对照组3.05％(P＜0.05)，80mg组饲喂7天乳蛋白平均值为3.06％，与对照组相比无显著性差异；图6：40mg组饲喂14天乳蛋白平均值为4.06％，显著高于对照组3.02％(P＜0.05)，80mg组饲喂14天乳蛋白平均值为3.13％，与对照组相比无显著性差异；图7：40mg组饲喂21天乳蛋白平均值为3.48％，显著高于对照组3.03％(P＜0.05)，80mg组饲喂21天乳蛋白平均值为2.91％，与对照组相比没有显著性差异。
(3)提高牛奶中乳脂含量。饲喂7天、14天和21天褪黑素制剂40mg和80mg均可以提高牛奶中乳脂含量。
如图8：饲喂7天40mg组乳脂平均为4.28％，80mg组为3.60％，40mg组、80mg组与对照组3.86％相比，没有显著性差异。
如图9：饲喂14天褪黑素制剂显著提高牛奶中乳脂含量40mg组平均值为4.14％，显著高于对照组为3.52％(P＜0.05)，80mg组乳脂含量为3.72％，与对照组相比无显著性差异。
如图10：饲喂21天40mg组乳脂平均为3.78％，80mg组为3.56％，对照组为3.36％，饲喂40mg组乳脂率显著高于对照组(P＜0.05)，80mg组与对照组相比无显著性差异。
(4)降低牛奶中乳糖含量。饲喂7天、14天和21天过瘤胃褪黑素制剂40mg和80mg，实验发现，饲喂40mg组可以降低牛奶中乳糖含量，图11显示饲喂7天，40mg组乳糖平均值为3.97％，80mg组乳糖平均值为4.17％，对照组乳糖平均值为4.65％，40mg组、80mg组与对照组相比没有显著性差异；如图12，图13：饲喂40mg组14天和21天可以显著降低牛奶中乳糖含量(P＜0.05)。饲喂14天40mg组乳糖平均值为4.37％，显著低于对照组4.56％(P＜0.05)，80mg组乳糖平均值为4.84％，与对照组相比没有显著性差异；饲喂21天40mg组乳糖平均值为4.12％，显著低于对照组4.47％(P＜0.05)，80mg组乳糖平均值为4.51％，与对照组相比没有显著性差异。
(5)如图14：饲喂7天，40mg组干物质平均值为11.64％，80mg组干物质平均值为10.53％，对照组干物质平均值为11.06％；从图15得出，饲喂14天褪黑素制剂，40mg组干物质平均值11.5％，显著高于对照组10.37％(P＜0.05)，80mg组干物质平均值10.37％，与对照组相比无显著性差异；如图16：饲喂21天褪黑素制剂，40mg组平均值为9.78％，80mg组平均值为10.1％，对照组为9.5％，40mg组、80mg组与对照组相比无显著性差异。
综上所述，饲喂40mg、80mg过瘤胃褪黑素均可以降低奶牛体细胞数，饲喂80mg组14天奶牛体细胞数平均值显著低于对照组(P＜0.05)；饲喂40mg组可以显著提高牛奶中乳蛋白含量、降低乳糖含量(P＜0.05)；饲喂40mg组可以提高牛奶中乳脂含量；饲喂40mg组14天还可以显著提高牛奶中干物质含量(P＜0.05)。因此饲喂40mg褪黑素为最优剂量，既可以降低奶牛体细胞数，又可以显著提高牛奶中乳蛋白、乳脂率、干物质，降低乳糖含量，明显改善牛奶质量(P＜0.05)。
实施例2褪黑素在改善瘤胃中微生物菌群的效果验证
1、实验方法
(1)对3只品种，年龄，生理状况相近的瘤胃瘘管牛瘤胃瘘管中投入0.6μg/kg～0.13mg/kg过瘤胃褪黑素(此处数值均指褪黑素有效剂量)，并且6小时后取出，投入褪黑素的时刻记做0时。采取0时，6时和取出褪黑素制剂6小时后(即12时)的瘤胃液。
(2)对在不同时间点取出的瘤胃液进行瘤胃微生物菌群DNA的提取，随后通过16SrRNA测序共获得1,351,116raw reads，其中去除嵌合体、短序列后，获得1,334,733条有效reads，平均每个样本1,334,733条reads，范围从25,820到316,522条。
2、实验结果
(1)以序列相似度为97％的水平下进行OUT划分，共获得1939个OUT。首先用稀释曲线(rarefaction curve)和Shannon多样性曲线对各文库进行了分析。从稀释曲线和Shannon多样性曲线来看，在测序量较少时，稀释曲线和Shannon多样性指数的数值呈现上升的趋势，而随着测序量的扩大，多样性指数数值增加的趋势逐渐变缓，并且最终达到饱和。这个结果表明，在此测序量下，动物肠道内微生物的多样性已经能够得到充分的检测，检测结果具有说服力。结果见图17和图18。
(2)从各组数据来看，瘘管投喂褪黑素制剂6小时，以及褪黑素制剂取出6小时以后菌群的Alpha多样性发生了变化。从chao 1指数，observed species指数,PD whole tree指数,Shannon指数的数值看，与0时(BM1)相比，投喂褪黑素6小时(BM2)后菌群的整体丰度均呈现上升的趋势，在取出褪黑素6小时后(即12时(BM3))菌群的整体丰度呈现下降趋势，如图19。由此可推测，过瘤胃褪黑素通过增加菌群的丰度来提高奶牛对蛋白质的利用率。
实施例3褪黑素对奶牛血液及牛奶中相关激素的影响
1.过瘤胃褪黑素饲喂
饲喂方式同实施例1，在采集奶样的同时采集血样，奶牛采用尾静脉采血。
2.血清及牛奶中相关激素浓度的测定
奶牛血清中测定激素种类为：MT、TNF-α、IL-6、IL-10、皮质醇。牛奶中测定激素种类为：MT、TNF-α、IL-10。测定方法为酶联免疫检测法(ELISA)。
3.实验结果
(1)提高血清中褪黑素浓度。通过图20，饲喂7天过瘤胃褪黑素80mg组血清中褪黑素含量显著高于对照组(P＜0.05)，80mg组血清中褪黑素浓度为35.56pg/ml，40mg组为30.49pg/ml，对照组为27.58pg/ml；通过图21，饲喂14天过瘤胃褪黑素40mg、80mg组血清中褪黑素含量均显著高于对照组(P＜0.05)，40mg组血清中褪黑素浓度为34.61pg/ml，80mg组为35.08pg/ml，对照组为28.81pg/ml；通过图22，饲喂21天过瘤胃褪黑素80mg组血清中褪黑素含量显著高于对照组(P＜0.05)，80mg组血清中褪黑素浓度为36.14pg/ml，40mg组为30.79pg/ml，对照组为29.32pg/ml；通过图23，在连续饲喂21天过瘤胃褪黑素后停止饲喂7天，实验组血清中褪黑素浓度和对照组没有显著性差异，40mg组血清中褪黑素浓度为33.69pg/ml，80mg组为29.93pg/ml，对照组为28.69pg/ml。
(2)降低血清中皮质醇浓度。如图24，饲喂7天过瘤胃褪黑素40mg和80mg组血清中皮质醇浓度均显著低于对照组(P＜0.05)，40mg组血清中皮质醇浓度为143.72μg/L，80mg组为132.07μg/L，对照组为166.51μg/L；如图25，饲喂14天过瘤胃褪黑素40mg和80mg组血清中皮质醇浓度均显著低于对照组(P＜0.05)，40mg组血清中皮质醇浓度为133.38μg/L，80mg组为134.45μg/L，对照组为174.81μg/L；如图26，饲喂21天过瘤胃褪黑素40mg组血清中皮质醇浓度显著低于对照组(P＜0.05)，40mg组皮质醇浓度为143.2μg/L，80mg为144.84μg/L，对照组为171.78μg/L；如图27，在连续饲喂21天过瘤胃褪黑素后停止饲喂7天，实验组血清中皮质醇浓度和对照组没有显著性差异，40mg组血清中皮质醇浓度为140.78μg/L，80mg组为167.83μg/L，对照组为170.05μg/L。
(3)降低血清中TNF-α浓度。如图28，饲喂7天过瘤胃褪黑素80mg组血清中TNF-α浓度显著低于对照组(P＜0.05)，40mg组血清中TNF-α浓度为214.19ng/L，80mg组为192.72ng/L，对照组为243.77ng/L；如图29，饲喂14天过瘤胃褪黑素80mg组血清中TNF-α浓度显著低于对照组(P＜0.05)，40mg组血清中TNF-α浓度为185.44ng/L，80mg组为156.42ng/L，对照组为187.94ng/L；如图30，饲喂21天过瘤胃褪黑素40mg、80mg组血清中TNF-α浓度均显著低于对照组(P＜0.05)，40mg组TNF-α为189.95ng/L，80mg组为175.92ng/L，对照组为231.03ng/L；如图31，在连续饲喂21天过瘤胃褪黑素后停止饲喂7天，实验组血清中TNF-α浓度与对照组无显著性差异，40mg组TNF-α浓度为250.65ng/L，80mg组为265.59ng/L，对照组为265.34ng/L。
(4)降低血清中IL-6浓度。如图32，饲喂7天过瘤胃褪黑素80mg组血清中IL-6浓度显著低于对照组(P＜0.05)，40mg组血清中IL-6浓度为18.57ng/L，80mg组为16.65ng/L，对照组为20.26ng/L；如图33，饲喂14天过瘤胃褪黑素40mg、80mg组血清中IL-6浓度显著低于对照组(P＜0.05)，40mg血清中IL-6浓度为16.72ng/L，80mg组为16.97ng/L，对照组为21.04ng/L；如图34，饲喂21天过瘤胃褪黑素40mg、80mg组血清中IL-6浓度显著低于对照组((P＜0.05))，40mg血清中IL-6浓度为18.24ng/L，80mg组为16.94ng/L，对照组为22.34ng/L；如图35，在连续饲喂21天过瘤胃褪黑素后停止饲喂7天，实验组血清中IL-6浓度与对照组无显著性差异，40mg组IL-6浓度为15.38ng/L，80mg组为17.75ng/L，对照组为16.82ng/L。
(5)提高血清中IL-10浓度。如图36，饲喂7天过瘤胃褪黑素血清中IL-10浓度与对照组没有显著性差异，40mg组IL-10浓度为44.93ng/L，80mg组为49.8ng/L，对照组为42.76ng/L；如图37，饲喂14天过瘤胃褪黑素40mg和80mg组血清中IL-10浓度均显著高于对照组(P＜0.05)，40mg组IL-10浓度为45.81ng/L，80mg组为48.88ng/L，对照组为37.36ng/L；如图38，饲喂21天过瘤胃褪黑素80mg组血清中IL-10浓度显著高于对照组(P＜0.05)，40mg组IL-10浓度为41.52ng/L，80mg组为45.54ng/L，对照组为37ng/L；如图39，在连续饲喂21天过瘤胃褪黑素后停止饲喂7天，实验组血清中IL-10浓度与对照组无显著性差异，40mg组IL-10浓度为47.8ng/L，80mg组为46.83ng/L，对照组为43.69ng/L。
(6)对牛奶中褪黑素含量无影响。如图40，通过饲喂7天(图40的A)，饲喂14天(图40的B)，饲喂21天(图40的C)，饲喂21天后停止饲喂7天(图40的D)可以看出，实验组和对照组褪黑素含量均无显著性差异。
(7)对牛奶中TNF-α含量无影响。如图41，通过饲喂7天(图41的A)，饲喂14天(图41的B)，饲喂21天(图41的C)，饲喂21天后停止饲喂7天(图41的D)可以看出，实验组和对照组TNF-α含量均无显著性差异。
(8)对牛奶中IL-10含量无影响。如图42，通过饲喂7天(图42的A)，饲喂14天(图42的B)，饲喂21天(图42的C)，饲喂21天后停止饲喂7天(图42的D)可以看出，实验组和对照组IL-10含量均无显著性差异。
综上所述：口服过瘤胃褪黑素可以降低血清中皮质醇、TNF-α、IL-6浓度，提高IL-10浓度，从而提高奶牛机体免疫力。
以上的实施例仅仅是对本发明的优选实施方式进行描述，并非对本发明的范围进行限定，在不脱离本发明设计精神的前提下，本领域普通工程技术人员对本发明的技术方案做出的各种变型和改进，均应落入本发明的权利要求书确定的保护范围内。

Claims (10)

1.过瘤胃褪黑素在改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构中，或在增加反刍动物瘤胃微生物丰富度中的应用。
2.过瘤胃褪黑素在降低血清中皮质醇浓度、TNF-α浓度、IL-6浓度、或提高血清中IL-10浓度中的应用。
3.如权利要求1或2所述的应用，其特征在于，所述过瘤胃褪黑素通过口服的方式饲喂反刍动物。
4.过瘤胃褪黑素在提高反刍动物乳品质中的应用。
5.如权利要求4所述的应用，其特征在于，其为以下任一或多个应用：
(1)降低反刍动物乳中体细胞数；
(2)提高乳蛋白含量；
(3)提高乳脂率；
(4)提高乳中干物质含量；
(5)降低乳糖含量。
6.如权利要求4或5所述的应用，其特征在于，所述过瘤胃褪黑素通过口服的方式饲喂反刍动物。
7.褪黑素在制备药物、保健品或饲料添加剂中的应用，其特征在于，为以下任一应用：
(1)在制备改善反刍动物瘤胃微生物菌群结构药物、饲料添加剂或保健品中的应用；
(2)在制备能够增加反刍动物瘤胃微生物丰富度的药物、饲料添加剂或保健品中的应用；
(3)在制备能够提高反刍动物乳品质中的应用；
(4)在制备能够降低血清中皮质醇浓度、TNF-α浓度、IL-6浓度、或提高血清中IL-10浓度的药物、保健品或饲料添加剂中的应用。
8.如权利要求1-7任一所述的应用，其特征在于，所述过瘤胃褪黑素的褪黑素有效使用剂量范围为0.6μg/kg～0.13mg/kg。
9.如权利要求1-8任一所述的应用，其特征在于，所述反刍动物为奶牛、黄牛、水牛、山羊、绵羊、骆驼、羊驼、羚羊、牛羚。
10.一种用于提高反刍动物乳品质的产品，其为含有褪黑素的反刍动物口服用药物、保健品或添加剂。
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