CN106596781A - 一种快速检测咪鲜胺的气相色谱分析方法 - Google Patents

Abstract

本发明是一种快速检测咪鲜胺的气相色谱分析方法，步骤为：用称取样品，置于聚四氟乙烯离心管中，向聚四氟乙烯离心管中加入乙腈、无水和NaCl，涡旋混匀后离心，取上清液，转入梨形瓶中浓缩蒸干；将正己烷转入蒸干的梨形瓶中定容，再将正己烷吸出，转入装有PSA和C₁₈的离心管中振荡混匀后提取液离心，最后将离心管中的正己烷倒入配有滤膜的注射器中过滤后用气相色谱检测。本发明采用采用气相色谱配NPD检测器检测咪鲜胺，避免了现有技术中将咪鲜胺衍生化成2,4,6‑三氯苯酚以及衍生化后用浓硫酸净化等繁琐问题，而且NPD检测器只对含氮和磷的物质响应，可以减少杂质干扰，前处理方法更简单，此方法可以方便、快速的检测咪鲜胺。

Description

一种快速检测咪鲜胺的气相色谱分析方法

技术领域

本发明涉及药物检测方法技术领域，具体来说是一种快速检测咪鲜胺的气相色谱分析方法。

背景技术

咪鲜胺(prochloraz)是一种咪唑类广谱杀菌剂，具有一定的触杀性和内吸作用，可用于防治枸杞炭疽病。目前，对咪鲜胺残留物的检测主要采用主要有GC和高效液相色谱(HPLC)2种方法。在质谱还未普及之前主要采用ECD进行检测，我国农业部颁布的行业标准以及日本厚生劳动省颁布的关于咪鲜胺及其代谢物的检测标准，采用的是GC-ECD法进行检测。目前尚未见有关咪鲜胺采用GC-NPD的残留分析的报道。

GC-ECD法：过去常采用GC-ECD法测定咪鲜胺的最终降解产物2,4,6-三氯苯酚，再换算成咪鲜胺。这种方法必须采用吡啶盐酸盐在高温下与咪鲜胺反应，转化成2,4,6-三氯苯酚，而且还需要用浓硫酸净化，十分繁琐，耗时，危险。

HPLC法：采用HPLC方法时，吸收波长为210nm左右，很多干扰杂质也是在此时出峰，这就对样品前处理的要求十分严格，无形中会增加很大难度。

质谱法：采用质谱可以很好的检测出咪鲜胺，但是质谱的价格比较贵，一般地方承担不起，可行性不强。

发明内容

本发明的目的是针对上述技术存在的问题，提供一种快速检测咪鲜胺的气相色谱分析方法。

为实现上述目的，本发明采用的技术方案是：一种快速检测咪鲜胺的气相色谱分析方法，包括如下步骤：

(1)、称取10g样品，置于50mL聚四氟乙烯离心管中；

(2)、分别依次向聚四氟乙烯离心管中加入20mL乙腈、5g无水MgSO₄和3g NaCl，涡旋混匀3-5min后，以6000r/min的转速离心5-6min；

(3)、离心结束后取上清液10mL，转入50mL梨形瓶中，在旋转蒸发仪40℃温度下恒温浓缩蒸干；

(4)、将1mL正己烷转入蒸干的梨形瓶中定容至50mL；

(5)、将梨形瓶中的1mL正己烷吸出，转入装有50mg PSA和30mg C₁₈的2mL离心管中，振荡混匀3-5min；

(6)、将装有提取液的离心管以6000r/min的转速离心5-6min，最后将离心管中的正己烷倒入配有滤膜的注射器中过滤后用气相色谱检测。

本发明的有益技术效果是：

1)、提取步骤简单，只需使用少量的乙腈提取，利用乙腈与水在加氯化钠以后分层的特性提取；

2)、无需将咪鲜胺高温转化成2,4,6-三氯苯酚：采用气相色谱配NPD检测器来直接检测咪鲜胺，不需将咪鲜胺转化后用气相色谱配ECD检测；

3)、NPD检测器选择性强，只对含氮和磷的物质响应，因此无需用危险的浓硫酸对提取物进行净化：本发明采用分散固相净化剂PSA和C₁₈对提取物进行净化，方便快捷，用本方法检测咪鲜胺，耗费溶剂少，操作简便，无需繁琐的衍生化和净化。

附图说明

为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动性的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。

图1不同Vertex时间对咪鲜胺的提取效率；

图2枸杞样品的空白(CK)图谱；

图3枸杞样品的标准样品(1μg/mL)图谱；

图4枸杞样品的添加回收样品(1μg/mL)图谱。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

实施例1

一种快速检测咪鲜胺的气相色谱分析方法，包括如下步骤：

(1)、用天平称取10g样品，置于50mL聚四氟乙烯离心管中

(2)、分别依次向聚四氟乙烯离心管中加入20mL乙腈、5g无水MgSO₄和3gNacl，并用vertex涡旋振荡器涡旋3-5min

(3)、将涡旋震荡后的离心管放入离心机中，以6000r/min的转速离心5-6min

(4)、离心结束后，取离心管上清液10mL，转入50mL梨形瓶中，在旋转蒸发仪40℃温度下恒温浓缩蒸干

(5)、将1mL正己烷转入蒸干的梨形瓶中定容

(6)、将梨形瓶中的1mL正己烷用吸管吸出，转入装有50mg PSA和30mg C₁₈的2mL塑料离心管中，并放在vertex涡旋振荡器涡旋3-5min净化

(7)、将装有提取液的2mL离心管放入离心机中以6000r/min的转速离心5-6min，最后将离心管中的正己烷倒入配有滤膜的注射器中过滤，待气相色谱检测。

应用实施例1

1、田间试验(实验地点选择青海、宁夏、甘肃、内蒙四地)；

1.1施药

1.1.1枸杞上咪鲜胺残留消解动态试验：重复小区数3，小区内最少应包括4棵枸杞树(根据各地枸杞实际生产情况确定)，施药时期为枸杞挂果初期，施药剂量300mg/kg，施药次数1次，采样距施药间隔2h、1d、3d、7d、10d、14d、21d、28d。

1.1.2枸杞上咪鲜胺最终残留试验

(1)试验小区每个重复最少应包括4棵枸杞树，重复3次，施药时期：根据采收间隔向前推算确定施药时间。

(2)分别以200mg/kg、300mg/kg的剂量施药3、4次，施药间隔7天。末次施药后间隔3、5、7天分别采集成熟枸杞果实。

1.2采样

枸杞样品：按方案1.1中施药后不同的天数，采用随机的方法，在小区内不同方向的枸杞树上，分别采集上、中、下、里、外等不同部位采集(不少于1kg)生长正常、无病害的枸杞果实，混匀后，四分法分取250g样品装入容器中，容器内外各加上标签，保存在-20℃冰箱中待测。

2、室内试验

采用实施例1中的方法对枸杞样品进行前处理并检测。

应用实施例2

为了验证本发明方法的可行性，做了咪鲜胺在枸杞上的日内日间连续三天的添加回收实验(添加回收的典型谱图见图2-4)，结果如下：

^a平均回收率

^b不同三天共15个样品的相对标准偏差

结果表明：此方法稳定可行，且回收率高

列举各种实施例

1、不同提取剂对咪鲜胺的提取效率

注：A：甲醇；B：二氯甲烷；C：丙酮；D：乙腈；E：乙酸乙酯；F：乙腈/水(v/v＝8/2，含1％醋酸水)

结论：乙腈的提取效果最好

2不同Vertex时间对咪鲜胺的提取效率如图1所示。

结论：涡旋3-5min最好

3比较不同的净化剂的净化效果和用量

通过比较发现只有PSA和C₁₈两种净化剂组合的净化效果最好，分别设置PSA和C₁₈的用量为10、20、30、40、50、60、70mg进行配对组合实验，最终发现PSA 50mg和C₁₈ 30mg组合净化效果最好。

本技术领域技术人员可以理解，除非另外定义，这里使用的所有术语(包括技术术语和科学术语)具有与本发明所属领域中的普通技术人员的一般理解相同的意义。还应该理解的是，诸如通用字典中定义的那些术语应该被理解为具有与现有技术的上下文中的意义一致的意义，并且除非像这里一样定义，不会用理想化或过于正式的含义来解释。

最后所应说明的是：以上实施例仅用以说明而非限制本发明的技术方案，尽管参照上述实施例对本发明进行了详细说明，本领域的普通技术人员应该理解：依然可以对本发明进行修改或者等同替换，而不脱离本发明的精神和范围的任何修改或局部替换，其均应涵盖在本发明的权利要求范围当中。

Claims (1)

1.一种快速检测咪鲜胺的气相色谱分析方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)、称取10g样品，置于50mL聚四氟乙烯离心管中；

(2)、分别依次向聚四氟乙烯离心管中加入20mL乙腈、5g无水MgSO₄和3g NaCl，涡旋混匀3-5min后，以6000r/min的转速离心5-6min；

(3)、离心结束后取上清液10mL，转入50mL梨形瓶中，在旋转蒸发仪40℃温度下恒温浓缩蒸干；

(4)、将1mL正己烷转入蒸干的梨形瓶中定容至50mL；

(5)、将梨形瓶中的1mL正己烷吸出，转入装有50mg PSA和30mg C₁₈的2mL离心管中，振荡混匀3-5min；

(6)、将装有提取液的离心管以6000r/min的转速离心5-6min，最后将离心管中的正己烷倒入配有滤膜的注射器中过滤后用气相色谱检测。