CN106577408B - 一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法 - Google Patents
一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106577408B CN106577408B CN201611030312.2A CN201611030312A CN106577408B CN 106577408 B CN106577408 B CN 106577408B CN 201611030312 A CN201611030312 A CN 201611030312A CN 106577408 B CN106577408 B CN 106577408B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- artemia
- shelling
- eggs
- parts
- artemia eggs
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 230000012447 hatching Effects 0.000 title claims abstract description 44
- 239000002893 slag Substances 0.000 title claims abstract description 24
- 238000006213 oxygenation reaction Methods 0.000 title claims abstract description 22
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 5
- 241001247197 Cephalocarida Species 0.000 claims abstract description 68
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 claims abstract description 58
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims abstract description 28
- 102000002322 Egg Proteins Human genes 0.000 claims abstract description 27
- 108010000912 Egg Proteins Proteins 0.000 claims abstract description 27
- 210000004681 ovum Anatomy 0.000 claims abstract description 27
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 claims abstract description 16
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 claims abstract description 14
- 235000009917 Crataegus X brevipes Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000013204 Crataegus X haemacarpa Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000009685 Crataegus X maligna Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000009444 Crataegus X rubrocarnea Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000009486 Crataegus bullatus Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000017181 Crataegus chrysocarpa Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000009682 Crataegus limnophila Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000004423 Crataegus monogyna Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000002313 Crataegus paludosa Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 235000009840 Crataegus x incaedua Nutrition 0.000 claims abstract description 13
- 210000001136 chorion Anatomy 0.000 claims abstract description 13
- 210000000941 bile Anatomy 0.000 claims abstract description 9
- 241000222120 Candida <Saccharomycetales> Species 0.000 claims abstract description 8
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 claims abstract description 8
- 102000014384 Type C Phospholipases Human genes 0.000 claims abstract description 5
- 108010079194 Type C Phospholipases Proteins 0.000 claims abstract description 5
- 240000000171 Crataegus monogyna Species 0.000 claims abstract 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 34
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 28
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 claims description 28
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 claims description 28
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims description 18
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims description 18
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 claims description 14
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 12
- 241000238582 Artemia Species 0.000 claims description 11
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 11
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 claims description 9
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 8
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 8
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 claims description 6
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 claims description 6
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 claims description 6
- AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N dimethyl 2-(3-ethyl-3-methylpentyl)propanedioate Chemical class CCC(C)(CC)CCC(C(=O)OC)C(=O)OC AIUDWMLXCFRVDR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 6
- 238000007654 immersion Methods 0.000 claims description 6
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 claims description 6
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 claims description 6
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 claims description 6
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 claims description 6
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 claims description 6
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 claims description 6
- 229940066779 peptones Drugs 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 6
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 claims description 6
- 230000008961 swelling Effects 0.000 claims description 6
- 239000003643 water by type Substances 0.000 claims description 6
- 238000010564 aerobic fermentation Methods 0.000 claims description 5
- 238000011049 filling Methods 0.000 claims description 5
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 claims description 2
- 150000002367 halogens Chemical class 0.000 claims description 2
- 244000189799 Asimina triloba Species 0.000 claims 1
- 235000006264 Asimina triloba Nutrition 0.000 claims 1
- 235000009467 Carica papaya Nutrition 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 10
- 239000004365 Protease Substances 0.000 abstract description 9
- 108090000526 Papain Proteins 0.000 abstract description 7
- 229940055729 papain Drugs 0.000 abstract description 7
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 abstract description 7
- 108010013563 Lipoprotein Lipase Proteins 0.000 abstract description 4
- 102000043296 Lipoprotein lipases Human genes 0.000 abstract description 4
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 abstract description 4
- 239000012528 membrane Substances 0.000 abstract description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 abstract description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 239000011149 active material Substances 0.000 abstract description 2
- 239000012267 brine Substances 0.000 abstract description 2
- 239000003112 inhibitor Substances 0.000 abstract description 2
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 abstract description 2
- 230000028327 secretion Effects 0.000 abstract description 2
- HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M sodium;chloride;hydrate Chemical compound O.[Na+].[Cl-] HPALAKNZSZLMCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 30
- 241001092040 Crataegus Species 0.000 description 11
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 6
- 125000001309 chloro group Chemical group Cl* 0.000 description 4
- 208000031513 cyst Diseases 0.000 description 4
- 239000011152 fibreglass Substances 0.000 description 4
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 4
- 241000143060 Americamysis bahia Species 0.000 description 3
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 3
- 102000004882 Lipase Human genes 0.000 description 3
- 239000004367 Lipase Substances 0.000 description 3
- 108090001060 Lipase Proteins 0.000 description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 3
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 3
- QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N hypochlorous acid Chemical compound ClO QWPPOHNGKGFGJK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000019421 lipase Nutrition 0.000 description 3
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 3
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 238000009423 ventilation Methods 0.000 description 3
- 244000241257 Cucumis melo Species 0.000 description 2
- 235000015510 Cucumis melo subsp melo Nutrition 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical compound [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 2
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 2
- 239000005708 Sodium hypochlorite Substances 0.000 description 2
- FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N [4,6-bis(cyanoamino)-1,3,5-triazin-2-yl]cyanamide Chemical compound N#CNC1=NC(NC#N)=NC(NC#N)=N1 FJJCIZWZNKZHII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 2
- SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N sodium hypochlorite Chemical compound [Na+].Cl[O-] SUKJFIGYRHOWBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000002023 wood Substances 0.000 description 2
- 244000021789 Aponogeton distachyus Species 0.000 description 1
- 235000003279 Aponogeton distachyus Nutrition 0.000 description 1
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000254173 Coleoptera Species 0.000 description 1
- 241000196171 Hydrodictyon reticulatum Species 0.000 description 1
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 1
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 1
- 241000595940 Notostraca Species 0.000 description 1
- 238000011953 bioanalysis Methods 0.000 description 1
- 239000013064 chemical raw material Substances 0.000 description 1
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 1
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- 238000013329 compounding Methods 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 description 1
- 238000005265 energy consumption Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 208000003243 intestinal obstruction Diseases 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K61/00—Culture of aquatic animals
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Marine Sciences & Fisheries (AREA)
- Zoology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
本发明涉及一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法，属于卤虫卵技术领域。本发明首先以山楂为原料进行榨汁，将含有有机酸的山楂汁与淡盐水对卤虫卵进行水合，再用胆汁和磷脂酶C配合使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解，然后再用皱褶假丝酵母菌及其分泌的脂蛋白脂酶、活性物质与木瓜蛋白酶配合使卤虫卵脱壳，并且去壳卵卵膜对木瓜蛋白酶和脂蛋白脂酶的抗性强，可不使用专门的抑制剂即可终止反应，即可得到脱壳卤虫卵，本发明得到的脱壳卤虫卵在进行孵化时孵化率大幅度提高，达到了93～96%，并且本发明去壳效果稳定，操作难度低。
Description
技术领域
本发明涉及一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法，属于卤虫卵技术领域。
背景技术
卤虫又叫丰年虫，是世界性分布的小型甲壳虫，生活于盐湖、盐场等高盐水域中。卤虫卵是优质的水产鱼苗饵料，在水产养殖业具有重要作用。卤虫卵是含铁脂蛋白，鱼虾幼苗无法消化，因此一般需要先孵化出卤虫幼体，然后再将幼体作为饵料投喂。孵化后的卵壳和幼体不易彻底分离，易造成部分已孵化幼体随壳倒掉而损耗或卵壳和幼体一起被采食导致鱼虾幼苗肠梗阻死而亡。卤虫卵去壳后可以直接投喂，也可以孵化出幼体。由于没有卵壳，可以减少幼体破壳时大的能量消耗，有利于保留更多营养。在鱼虾育苗中，卤虫卵的费用往往占育苗场50～70%成本。通过去壳的方式，可以提高孵化率并使卤虫幼体保留更多营养，同时还可以利用大量孵化率低的低质卵，降低育苗成本，对育苗场意义重大。
目前卤虫卵去壳多采用化学法，即用次氯酸钠及氢氧化钠溶液溶解卵壳，去壳后反应无法立刻终止，需要将去壳卵捞出清洗除去余氯，此过程中溶液的余氯继续对脱壳卵作用，损伤较大；同时在去壳过程中溶液温度容易升高，影响孵化率，需要采取降温措施；操作过程对孵化率影响较大，工艺不稳定；且卵表面余氯难以彻底去除，投喂时有氯特有气味影响水产幼苗采食，往往还需要添加诱食剂。
发明内容
本发明所要解决的技术问题：针对现有的卤虫卵去壳时多采用化学法，去壳后反应无法立刻终止，去壳卵表面的余氯继续对脱壳卵作用，使脱壳卵卵膜损伤较大，并且去壳时溶液温度升高，影响孵化率的问题，提供了一种有机酸软化卵壳，生物酶和胆汁复配分解、溶解卵壳使卤虫卵脱壳来制备脱壳卤虫卵的方法，本发明首先以山楂为原料进行榨汁，将含有有机酸的山楂汁与淡盐水对卤虫卵进行水合，再用胆汁和磷脂酶C配合使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解，然后再用皱褶假丝酵母菌及其分泌的脂蛋白脂酶、活性物质与木瓜蛋白酶配合使卤虫卵脱壳，并且去壳卵卵膜对木瓜蛋白酶和脂蛋白脂酶的抗性强，可不使用专门的抑制剂即可终止反应，即可得到脱壳卤虫卵，本发明得到的脱壳卤虫卵在进行孵化时孵化率大幅度提高，达到了93～96%，并且本发明去壳效果稳定，操作难度低。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案是：
（1）称取100～150g未成熟的山楂，经人工去籽后，用去离子水清洗3～5次，将洗净的山楂和500～600mL去离子水一同置于榨汁机中进行榨汁，得到山楂汁；
（2）称取100～200g卤虫卵加入到烧杯中，再加入300～400mL质量分数为8%氯化钠溶液和200～300mL上述山楂汁，曝气处理3～4h，使卤虫卵充分吸水膨胀，再用纱布过滤，收集卤虫卵，得到预处理卤虫卵；
（3）取300～400g新鲜猪胆汁和2～4g磷脂酶C加入到盛有300～400mL去离子水的烧杯中，搅拌混合3～5min后，再加入上述预处理卤虫卵，并通入空气，控制气流量为50～70m3/（m2·min），浸泡处理30～40min，使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解，再用纱布过滤，收集卤虫卵，备用；
（4）按重量份数计，称取10～20份橄榄油，20～30份蛋白胨，8～12份酵母粉，0.3～0.5份磷酸氢二钾，0.1～0.3份硫酸镁和600～700份去离子水，加入到培养皿中，搅拌混合3～5min后，置于灭菌箱中，在90～100℃下灭菌5～10min，得到发酵培养基；
（5）将上述发酵培养基转移至发酵罐中，再按6～8%的接种量将皱褶假丝酵母菌接种到发酵罐中，在25～30℃下发酵2～3天后，再加入步骤（3）备用的卤虫卵和0.3～0.5g木瓜蛋白酶，并通入空气，好氧发酵3～4h，发酵结束，收集发酵罐内的物料，并用纱布过滤，收集滤渣，并用去离子水洗涤3～5次后，再用去离子水洗去脱壳卵表面的酶和菌，得到脱壳卤虫卵。
本发明的应用方法：首先将玻璃钢孵化桶用质量分数为75%无水乙醇溶液进行消毒，静待10～15min后，向孵化桶内加入20～25L质量分数为5%氯化钠溶液，并通入空气，控制气流量为50～70m3/（m2·min），随后将氯化钠溶液质量10～15%的脱壳卤虫卵倒入孵化桶中，控制孵化桶内温度在28～32℃，孵化24～26h，待卤虫完全孵化后，停止通气，静置3～5min后，打开孵化桶底阀，将沉卵和杂质放出后，将桶内剩余物质过滤，弃去溶液，收集滤渣，将滤渣用去离子水清洗3～5次后，得到卤虫无节幼体。经检测，本发明得到的脱壳卤虫卵在进行孵化时孵化率大幅度提高，达到了93～96%，比用次氯酸钠脱壳后的卤虫卵孵化率提高了15～20%，并且本发明去壳效果稳定，操作难度低。
本发明与其他方法相比，有益技术效果是：
（1）本发明属于生物法去壳，所用原料为天然物质，不引入化学原料，对去壳卵无化学污染且对去壳卵卵膜损伤小，对后续孵化无影响，并且去壳效果稳定；
（2）本发明得到的脱壳卤虫卵在进行孵化时孵化率大幅度提高，达到了93～96%，本发明操作步骤简单，所需成本低。
具体实施方式
首先称取100～150g未成熟的山楂，经人工去籽后，用去离子水清洗3～5次，将洗净的山楂和500～600mL去离子水一同置于榨汁机中进行榨汁，得到山楂汁；称取100～200g卤虫卵加入到烧杯中，再加入300～400mL质量分数为8%氯化钠溶液和200～300mL上述山楂汁，曝气处理3～4h，使卤虫卵充分吸水膨胀，再用纱布过滤，收集卤虫卵，得到预处理卤虫卵；然后取300～400g新鲜猪胆汁和2～4g磷脂酶C加入到盛有300～400mL去离子水的烧杯中，搅拌混合3～5min后，再加入上述预处理卤虫卵，并通入空气，控制气流量为50～70m3/（m2·min），浸泡处理30～40min，使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解，再用纱布过滤，收集卤虫卵，备用；再按重量份数计，称取10～20份橄榄油，20～30份蛋白胨，8～12份酵母粉，0.3～0.5份磷酸氢二钾，0.1～0.3份硫酸镁和600～700份去离子水，加入到培养皿中，搅拌混合3～5min后，置于灭菌箱中，在90～100℃下灭菌5～10min，得到发酵培养基；将上述发酵培养基转移至发酵罐中，再按6～8%的接种量将皱褶假丝酵母菌接种到发酵罐中，在25～30℃下发酵2～3天后，再加入备用的卤虫卵和0.3～0.5g木瓜蛋白酶，并通入空气，好氧发酵3～4h，发酵结束，收集发酵罐内的物料，并用纱布过滤，收集滤渣，并用去离子水洗涤3～5次后，再用去离子水洗去脱壳卵表面的酶和菌，得到脱壳卤虫卵。
实施例1
首先称取100g未成熟的山楂，经人工去籽后，用去离子水清洗3次，将洗净的山楂和500mL去离子水一同置于榨汁机中进行榨汁，得到山楂汁；称取100g卤虫卵加入到烧杯中，再加入300mL质量分数为8%氯化钠溶液和200mL上述山楂汁，曝气处理3h，使卤虫卵充分吸水膨胀，再用纱布过滤，收集卤虫卵，得到预处理卤虫卵；然后取300g新鲜猪胆汁和2g磷脂酶C加入到盛有300mL去离子水的烧杯中，搅拌混合3min后，再加入上述预处理卤虫卵，并通入空气，控制气流量为50m3/（m2·min），浸泡处理30min，使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解，再用纱布过滤，收集卤虫卵，备用；再按重量份数计，称取10份橄榄油，20份蛋白胨，8份酵母粉，0.3份磷酸氢二钾，0.1份硫酸镁和600份去离子水，加入到培养皿中，搅拌混合3min后，置于灭菌箱中，在90℃下灭菌5min，得到发酵培养基；将上述发酵培养基转移至发酵罐中，再按6%的接种量将皱褶假丝酵母菌接种到发酵罐中，在25℃下发酵2天后，再加入备用的卤虫卵和0.3g木瓜蛋白酶，并通入空气，好氧发酵3h，发酵结束，收集发酵罐内的物料，并用纱布过滤，收集滤渣，并用去离子水洗涤3次后，再用去离子水洗去脱壳卵表面的酶和菌，得到脱壳卤虫卵。
首先将玻璃钢孵化桶用质量分数为75%无水乙醇溶液进行消毒，静待10min后，向孵化桶内加入20L质量分数为5%氯化钠溶液，并通入空气，控制气流量为50m3/（m2·min），随后将氯化钠溶液质量10%的脱壳卤虫卵倒入孵化桶中，控制孵化桶内温度在28℃，孵化24h，待卤虫完全孵化后，停止通气，静置3min后，打开孵化桶底阀，将沉卵和杂质放出后，将桶内剩余物质过滤，弃去溶液，收集滤渣，将滤渣用去离子水清洗3次后，得到卤虫无节幼体。经检测，本发明得到的脱壳卤虫卵在进行孵化时孵化率大幅度提高，达到了93%，比用次氯酸钠脱壳后的卤虫卵孵化率提高了15%，并且本发明去壳效果稳定，操作难度低。
实施例2
首先称取130g未成熟的山楂，经人工去籽后，用去离子水清洗4次，将洗净的山楂和550mL去离子水一同置于榨汁机中进行榨汁，得到山楂汁；称取150g卤虫卵加入到烧杯中，再加入350mL质量分数为8%氯化钠溶液和250mL上述山楂汁，曝气处理3h，使卤虫卵充分吸水膨胀，再用纱布过滤，收集卤虫卵，得到预处理卤虫卵；然后取350g新鲜猪胆汁和3g磷脂酶C加入到盛有350mL去离子水的烧杯中，搅拌混合4min后，再加入上述预处理卤虫卵，并通入空气，控制气流量为60m3/（m2·min），浸泡处理35min，使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解，再用纱布过滤，收集卤虫卵，备用；再按重量份数计，称取15份橄榄油，25份蛋白胨，10份酵母粉，0.4份磷酸氢二钾，0.2份硫酸镁和650份去离子水，加入到培养皿中，搅拌混合4min后，置于灭菌箱中，在95℃下灭菌8min，得到发酵培养基；将上述发酵培养基转移至发酵罐中，再按7%的接种量将皱褶假丝酵母菌接种到发酵罐中，在28℃下发酵2天后，再加入备用的卤虫卵和0.4g木瓜蛋白酶，并通入空气，好氧发酵3h，发酵结束，收集发酵罐内的物料，并用纱布过滤，收集滤渣，并用去离子水洗涤4次后，再用去离子水洗去脱壳卵表面的酶和菌，得到脱壳卤虫卵。
首先将玻璃钢孵化桶用质量分数为75%无水乙醇溶液进行消毒，静待13min后，向孵化桶内加入23L质量分数为5%氯化钠溶液，并通入空气，控制气流量为60m3/（m2·min），随后将氯化钠溶液质量13%的脱壳卤虫卵倒入孵化桶中，控制孵化桶内温度在30℃，孵化25h，待卤虫完全孵化后，停止通气，静置4min后，打开孵化桶底阀，将沉卵和杂质放出后，将桶内剩余物质过滤，弃去溶液，收集滤渣，将滤渣用去离子水清洗4次后，得到卤虫无节幼体。经检测，本发明得到的脱壳卤虫卵在进行孵化时孵化率大幅度提高，达到了94%，比用次氯酸钠脱壳后的卤虫卵孵化率提高了17%，并且本发明去壳效果稳定，操作难度低。
实施例3
首先称取150g未成熟的山楂，经人工去籽后，用去离子水清洗5次，将洗净的山楂和600mL去离子水一同置于榨汁机中进行榨汁，得到山楂汁；称取200g卤虫卵加入到烧杯中，再加入400mL质量分数为8%氯化钠溶液和300mL上述山楂汁，曝气处理4h，使卤虫卵充分吸水膨胀，再用纱布过滤，收集卤虫卵，得到预处理卤虫卵；然后取400g新鲜猪胆汁和4g磷脂酶C加入到盛有400mL去离子水的烧杯中，搅拌混合5min后，再加入上述预处理卤虫卵，并通入空气，控制气流量为70m3/（m2·min），浸泡处理40min，使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解，再用纱布过滤，收集卤虫卵，备用；再按重量份数计，称取20份橄榄油，30份蛋白胨，12份酵母粉，0.5份磷酸氢二钾，0.3份硫酸镁和700份去离子水，加入到培养皿中，搅拌混合5min后，置于灭菌箱中，在100℃下灭菌10min，得到发酵培养基；将上述发酵培养基转移至发酵罐中，再按8%的接种量将皱褶假丝酵母菌接种到发酵罐中，在30℃下发酵3天后，再加入备用的卤虫卵和0.5g木瓜蛋白酶，并通入空气，好氧发酵4h，发酵结束，收集发酵罐内的物料，并用纱布过滤，收集滤渣，并用去离子水洗涤5次后，再用去离子水洗去脱壳卵表面的酶和菌，得到脱壳卤虫卵。
首先将玻璃钢孵化桶用质量分数为75%无水乙醇溶液进行消毒，静待15min后，向孵化桶内加入25L质量分数为5%氯化钠溶液，并通入空气，控制气流量为70m3/（m2·min），随后将氯化钠溶液质量15%的脱壳卤虫卵倒入孵化桶中，控制孵化桶内温度在32℃，孵化26h，待卤虫完全孵化后，停止通气，静置5min后，打开孵化桶底阀，将沉卵和杂质放出后，将桶内剩余物质过滤，弃去溶液，收集滤渣，将滤渣用去离子水清洗5次后，得到卤虫无节幼体。经检测，本发明得到的脱壳卤虫卵在进行孵化时孵化率大幅度提高，达到了96%，比用次氯酸钠脱壳后的卤虫卵孵化率提高了20%，并且本发明去壳效果稳定，操作难度低。
Claims (1)
1.一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法，其特征在于具体步骤为：
（1）称取100～150g未成熟的山楂，经人工去籽后，用去离子水清洗3～5次，将洗净的山楂和500～600mL去离子水一同置于榨汁机中进行榨汁，得到山楂汁；
（2）称取100～200g卤虫卵加入到烧杯中，再加入300～400mL质量分数为8%氯化钠溶液和200～300mL上述山楂汁，曝气处理3～4h，使卤虫卵充分吸水膨胀，再用纱布过滤，收集卤虫卵，得到预处理卤虫卵；
（3）取300～400g新鲜猪胆汁和2～4g磷脂酶C加入到盛有300～400mL去离子水的烧杯中，搅拌混合3～5min后，再加入上述预处理卤虫卵，并通入空气，控制气流量为50～70m3/（m2·min），浸泡处理30～40min，使卤虫卵壳中的磷脂和胆固醇分解，再用纱布过滤，收集卤虫卵，备用；
（4）按重量份数计，称取10～20份橄榄油，20～30份蛋白胨，8～12份酵母粉，0.3～0.5份磷酸氢二钾，0.1～0.3份硫酸镁和600～700份去离子水，加入到培养皿中，搅拌混合3～5min后，置于灭菌箱中，在90～100℃下灭菌5～10min，得到发酵培养基；
（5）将上述发酵培养基转移至发酵罐中，再按6～8%的接种量将皱褶假丝酵母菌接种到发酵罐中，在25～30℃下发酵2～3天后，再加入步骤（3）备用的卤虫卵和0.3～0.5g木瓜蛋白酶，并通入空气，好氧发酵3～4h，发酵结束，收集发酵罐内的物料，并用纱布过滤，收集滤渣，并用去离子水洗涤3～5次后，再用去离子水洗去脱壳卵表面的酶和菌，得到脱壳卤虫卵。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611030312.2A CN106577408B (zh) | 2016-11-22 | 2016-11-22 | 一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN201611030312.2A CN106577408B (zh) | 2016-11-22 | 2016-11-22 | 一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN106577408A CN106577408A (zh) | 2017-04-26 |
| CN106577408B true CN106577408B (zh) | 2019-09-03 |
Family
ID=58591629
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN201611030312.2A Active CN106577408B (zh) | 2016-11-22 | 2016-11-22 | 一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN106577408B (zh) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN107049923A (zh) * | 2017-05-07 | 2017-08-18 | 辽宁石油化工大学 | 一种卤虫卵制品的制备方法 |
| CN110055213A (zh) * | 2019-04-23 | 2019-07-26 | 中国海洋大学 | 一种侏儒蛤卵膜的分离方法 |
| CN114698600A (zh) * | 2022-03-28 | 2022-07-05 | 浙江省淡水水产研究所 | 一种高效净化处理虾类育苗期用卤虫的方法 |
| CN115399265B (zh) * | 2022-09-01 | 2024-01-26 | 海南慈德高科技渔业有限公司 | 一种丰年虫卵的孵化方法 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102630639A (zh) * | 2012-01-10 | 2012-08-15 | 李新书 | 一种卤虫卵脱壳方法 |
| CN104273100A (zh) * | 2014-10-21 | 2015-01-14 | 天津海友佳音生物科技股份有限公司 | 一种用于提高孵化率的卤虫卵脱壳的方法 |
| CN105746446A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-07-13 | 辽宁石油化工大学 | 一种卤虫卵的去壳方法 |
| CN105900934A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-08-31 | 辽宁石油化工大学 | 木瓜蛋白酶在卤虫卵去壳方面的应用 |
-
2016
- 2016-11-22 CN CN201611030312.2A patent/CN106577408B/zh active Active
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102630639A (zh) * | 2012-01-10 | 2012-08-15 | 李新书 | 一种卤虫卵脱壳方法 |
| CN104273100A (zh) * | 2014-10-21 | 2015-01-14 | 天津海友佳音生物科技股份有限公司 | 一种用于提高孵化率的卤虫卵脱壳的方法 |
| CN105746446A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-07-13 | 辽宁石油化工大学 | 一种卤虫卵的去壳方法 |
| CN105900934A (zh) * | 2016-05-13 | 2016-08-31 | 辽宁石油化工大学 | 木瓜蛋白酶在卤虫卵去壳方面的应用 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 去壳时间和盐度对卤虫去壳卵孵化的影响;廖永岩等;《科学养鱼》;20120510(第5期);第72-74页 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN106577408A (zh) | 2017-04-26 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106577408B (zh) | 一种用于提高孵化率的脱壳卤虫卵的制备方法 | |
| CN110122386A (zh) | 一种适合高盐度海水养殖对虾的方法 | |
| CN101185426B (zh) | 无特定病原中国对虾零换水苗种生产方法 | |
| CN1362857A (zh) | 甲壳类幼虫饲养方法和设备 | |
| CN103966100B (zh) | 屠宰厂废水养殖球等鞭金藻和异胶藻的培养基及培养方法 | |
| CN110301385A (zh) | 一种养殖丰年虫的方法 | |
| CN110250062B (zh) | 一种海水综合利用的方法 | |
| CN206629767U (zh) | 一种石斑鱼工厂化养殖系统 | |
| CN104273100A (zh) | 一种用于提高孵化率的卤虫卵脱壳的方法 | |
| CN108793587A (zh) | 一种养猪场尿泡粪废液的快速处理方法 | |
| CN105532579A (zh) | 一种丰年虫卵的孵化培养基及制备方法与应用 | |
| CN102630639A (zh) | 一种卤虫卵脱壳方法 | |
| CN109479800A (zh) | 一种可叠层工厂化高效养殖的多孔虾巢 | |
| CN104872013B (zh) | 石斑鱼养殖方法和系统 | |
| CN103834569B (zh) | 一种微藻浓缩培养液及其应用 | |
| CN106508824A (zh) | 一种高效提高丰年虫卵孵化率的预处理方法 | |
| CN104957063B (zh) | 河蟹主养池青苔的生态预防方法 | |
| CN101946742A (zh) | 一种水产精养池塘养殖用水处理和循环利用方法 | |
| CN105746446B (zh) | 一种卤虫卵的去壳方法 | |
| CN105884426A (zh) | 淡水虾养殖用培养基及其制备方法 | |
| CN105900934B (zh) | 木瓜蛋白酶在卤虫卵去壳方面的应用 | |
| CN104996342A (zh) | 鲳鱼养殖方法 | |
| CN116649263A (zh) | 一种瘦身鱼的三级吊水养殖系统以及养殖方法 | |
| CN102715116B (zh) | 斑马鱼的饲养方法 | |
| CN203884437U (zh) | 南美白对虾养殖系统 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| TA01 | Transfer of patent application right |
Effective date of registration: 20190808 Address after: 225300 Industrial Centralized Area of Qingong Town, Huai'an District, Huai'an City, Jiangsu Province Applicant after: Jiangsu Haorun Biotechnology Co., Ltd. Applicant after: Liu Aimin Applicant after: Zhou Aimin Address before: 213164 Jiangsu Province, the Clock Tower District, five-star street, Tang Village, village committee, Village No. 75 Applicant before: Wang Yifan |
|
| TA01 | Transfer of patent application right | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |