CN106574227B - 使用电泳清理组织的装置 - Google Patents
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Abstract
根据本发明的使用电泳的清理组织的装置相关于用于分离生物组织的组分和清理组织的装置,该装置包括:腔,其能在其中容纳缓冲溶液和生物组织,并且具有用于循环所述缓冲溶液的入口和出口;支撑构件,其设置于腔内,用于支撑生物组织;和电极,其设置于腔内并且由对应于彼此的第一电极和第二电极分别形成。根据本发明,由于通过使用板电极而不是现有的线电极而以相同的电流施加低电压,以使得副反应的量是小的并且缓冲溶液的温度的快速升高被避免,并且因此缓冲溶液通过入口和出口的循环速度被减缓,应可能相较于一般的装置最小化分解效率的降低,并且快速清理组织。
Description
技术领域
本发明要求申请于2014年7月7日的韩国专利申请no. 10-2014-0084705的优先权,并且其所有内容以整体通过参考包括。本发明相关于使用电泳清理组织的装置。更具体地,本发明相关于通过使用电泳移除组织成分或组分的装置。
背景技术
CLARITY,一种组织清理的方法,由Karl Deisseroth等于2013年在美国斯坦福大学发明,并且刊登于《自然》(“Nature”)(Chung K et al., Nature,497:332-337(2013))。
具体地,根据该方法,生物组织内的特定组分被外源性水凝胶材料取代,其促成透明的组织并且因此允许其光学上被检测。即,该方法是为了通过以化学处理流程分离大脑中的油脂组分来可视化大脑组织。
根据用于分析大脑中的微观结构和神经元网络的一般解剖方法,首先大脑组织被切成薄片,来理解其各自的神经元网络,并且接着整合从切片得到的大量的信息,来分析大脑细胞和分子分布的总体结构。
然而,不同于一般的方法,Karl Deisseroth等的CLARITY方法价值在于其让在宏观或分子水平使用透明的大脑组织探测神经元网络而不损害组织成为可能。因此,期望CLARITY在大脑疾病研究和生物组织实验等方面作出高度贡献。
图1(其包括在上述的自然中)示出CLARITY方法并且简单解释用于从老鼠大脑组织清理油脂组分的装置。根据图1,老鼠的大脑首先容纳在腔中,并且铂线设置于组织的相对侧,并且随后10~60V电施加于铂线上,来通过电泳从组织分离油脂组分。当产生于阴极的负电荷(阴离子)(-)在电泳过程中移向阳极时,围绕油脂组分的电离的微粒从大脑分离油脂并且继续移向阳极。同时,腔具有用于循环缓冲溶液的一对入口和出口,该缓冲溶液通过水循环器循环。该循环被进行用于保证缓冲能力并且替换受污染的缓冲溶液。此外,当腔中的温度通过电力的施加而升高时,缓冲溶液的循环用于降低腔中的温度。
然而,CLARITY方法具有如下一些缺陷:i)由于其使用线电极,相较于板电极,电极的表面面积小但是电阻高,并且因此相对更高的电压以相同的电流施加于电极。此外,高电压导致高温热产生,其增加副反应的量(比如,水或有机材料的电解),并且加速溶液的污染速率。ii) 控制热产生是困难的,因为相较于板电极,冷却线电极是不容易的。iii) 缓冲溶液循环快如数升每分钟,以致于其增加副反应的量。iv)使用 CLARITY方法从老鼠大脑组织分离油脂组分需花费5天到9天。
由此,仍应需要发展新的组织清理方法,其中该方法可更快地从生物组织移除或分离油脂组分或成分,同时控制热产生并且降低缓冲溶液的循环速率,来减少副反应的量。
发明内容
技术问题
我们的发明者做了很多研究,来发展可以以更稳定、有效和快速的方式从生物组织移除油脂组分的组织清理装置。由此,我们的发明者通过发现板电极而不是线电极提供大脑组织的更稳定和快速的油脂清理完成了本发明。
本发明的意图是为了提供用于从生物组织清理组分和成分的使用电泳的组织清理装置,其中该装置使用板型电极。
本发明的另一意图和优势将通过以下的本发明、权利要求和附图的详细描述被清楚地理解。
技术方案
根据本发明的示例实施例,提供了一种使用电泳的组织清理装置,该装置用于从生物组织分离组分或成分,其中该装置特征在于以下方面:
(a)腔,其能容纳缓冲溶液和生物组织,其中所述腔中具有用于循环所述缓冲溶液的入口和出口;和
(b)第一电极和第二电极,其分别地放置于腔中的两个相对的位置中,其中每个电极形状设置为平板。
此外,所述第一电极和所述第二电极的每个面积可不小于1mm,并且所述第一电极和所述第二电极之间的距离可不小于10mm。
此外,固定电流可通过所述第一电极和所述第二电极施加。具体地,所述固定电流可在0.5到3A(安培)之间。
使用电泳的组织清理装置可进一步包括控制部以将所述第一电极和所述第二电极的极性相互转换。此外,用于支撑生物组织的支撑构件进一步包括于腔中。所述支撑构件可以是可转动的。
此外,根据本发明的另一示例性实施例,所述第一电极和所述第二电极中的每一个具有两个或更多个电极以对应于彼此,并且所述第一电极和所述第二电极可放置于两个相对的位置,并且控制部可另外安装,来控制两个或更多个第一电极中的任一个和两个或更多个第二电极中的任一个相互起作用。在该情况中,所述控制部配置为将所述第一电极和所述第二电极的极性相互转换。
此外,仍根据本发明的另一示例性实施例,所述第一电极由一个电极组成并且所述第二电极由两个电极组成,并且所述第一电极和所述第二电极放置于相对的两个位置以对应于彼此,并且控制部可进一步配置为控制所述第一电极和所述第二电极中的任一个,以使得它们相互起作用。
此外本发明的使用电泳的组织清理装置可进一步包括以下部件:
(a)冷却板,其连接于所述腔的外侧;和
(b)热元件,其用于冷却所述冷却板。
所述冷却板可由至少一个冷却板组成,并且连接于所述第一电极和所述第二电极的外部区域中的每一个。所述热元件可由连接于冷却板的外部区域的至少一个热元件组成,并且其中所述热元件可进一步包括至少一个散热器,该散热器连接所述热元件的外部区域并且具有多个冷却柱。此外,可进一步安装至少一个冷却扇,所述冷却扇放置于散热器的外侧,并且使表面空气在散热器上循环。
有益效果
本发明的特征和优势总结如下:
(a)本发明提供使用电泳来分离生物组织的组分或成分的组织清理装置。
(b)本发明使用板电极并且特征在于电极的极性可相互转换。
(c)本发明的装置可抑制快速的温度增加,来减小循环通过入口和出口的缓冲溶液的循环速率。因此,本发明可减少副反应的量并且最小化清理效率的降低,并且因此相较于一般的装置可以实现快速的油脂清理。
附图说明
图1是使用电泳的一般大脑油脂清理装置的示意图。
图2是根据一个示例性实施例的本发明的组织清理装置的立体图。
图3是图2的组织清理装置的截面图。
图4是根据另一示例性实施例的本发明的组织清理装置的示意图。
图5是示出通过使用一般线型电极和本发明的板型电极水电解的比较结果的照片。
图6是示出通过使用一般线型电极和本发明的板型电极的缓冲液的颜色变化的比较结果的照片。
图7是示出在通过使用一般线型电极和本发明的板型电极处理48小时后检测到的油脂移除大脑组织的比较结果的照片。
图8是示出通过使用本发明的具有或不具有极性转换的组织清理装置的油脂移除的比较结果的照片。
图9和图10是在本发明的使用电泳的组织清理装置中电极运行的示意图。
图11是根据另一示例性实施例的本发明的使用电泳的组织清理装置的立体图。
图12是图11的组织清理装置的截面图。
最佳模式
结合附图来理解,本发明的上述和其它的特征和优势在下述的例型的实施例的具体描述中是明显的。具体描述和附图仅仅是本发明的说明而不是限制,本发明的范围通过所附权利要求和其等同物限定。
图2是本发明的使用电泳的组织清理装置(1)的立体图,图3是图 2的组织清理装置(1)的截面图。
本发明的使用电泳的组织清理装置(1)用于分离和移除生物组织的特定组分或成分。用于从老鼠大脑清理油脂组分的实验被进行来评估本发明的效率。在下文中,本发明参照于实验的结果解释。
本发明的使用电泳的组织清理装置(1)包括如图1或图3中示出的腔(10)和电极(21、22)。
本发明相关于使用电泳从生物组织清理特定组分的装置,并且特别地相关于快速清理大脑表面上的油脂而不损伤大脑表面的装置。
用于电泳的电极的一种缓冲溶液充满腔(10)的内部(11),并且和大脑(清理的目标)也容纳于腔中。
为此,腔具有容器形状,并且腔的上部可具有可分离地连接至腔(10) 的盖(12)。此外,用于缓冲溶液的流入和流出的入口(13)和出口(14) 可装配于腔(10)中,并且因此缓冲溶液循环通过入口(13)和出口(14)。
第一电极和第二电极分别放置于腔的两个相对的位置中,并且每一个电极是板电极(板形的,例如,片或曲形的板)。一对第一电极(21) 和第二电极(22)定位为对应于彼此、在相对的两侧上,并且可放置为形成腔的不同内壁。即,第一电极(21)和第二电极(22)中的一个放置于侧内壁,并且另一个放置于腔(10)的相对的侧内壁。
此外,第一电极(21)和第二电极(22)优选地比生物组织(比如大脑组织)的突出区域具有更大的表面面积。因此,由第一电极和第二电极产生的电场影响整个被处理的生物组织,并且因此在电泳期间进行迅速的清理。具体地,第一电极和第二电极的每个面积不小于1平方厘米并且两个电极之间的距离不小于10毫米。
当电力施加于第一电极(21)和第二电极(22)时,从阴极产生的带负电荷的离子(阴离子)(-)围绕油脂组分并且将油脂组分从大脑分离,同时这些离子继续移向阳极。
本发明的使用电泳的组织清理装置(1)使用板电极而不是线电极,其可以以相对低的电压施加更高的电流,因为板电极相比于线电极引起低的热产生速率和少量的副反应。例如,0.5~3安的电流可以以10~60 伏的电压来施加。
于此,由于本发明的电泳组织清理装置相较于具有线电极的一般装置具有低的热产生速率,为了降低腔中的温度来增加缓冲溶液的循环速率是不需要的,并且通过降低副反应的量来最小化清理效率的降低是可能的。因此,本装置相较于一般的装置提供更快地移除或分离油脂组分的方式。
图5示出了比较通过分别使用一般的线电极和本发明的电极的水电解结果的照片。其说明了,相较于线电极,当板电极被使用时,水电解以更高的电流稳定地进行。图6示出用于分离油脂组分的缓冲液中分别使用一般的线电极和本发明的板电极的实验结果的照片。根据图6,副反应没有通过使用本发明的板电极(甚至24小时处理)而增加。因此,缓冲液的颜色改变程度很大程度上低于一般的线电极。
图7示出通过分别使用一般的线电极和本发明的板电极48小时的老鼠大脑组织清理结果的结果。老鼠大脑中的油脂组分有效地通过使用板电极而不是线电极被清理。
根据本发明的使用电泳的组织清理装置(1),电力可沿一固定方向施加于第一电极(21)和第二电极(22),但是第一电极(21)和第二电极(22)的极性可相互转换。为此,如图4中示出的控制部(70)可另外安装,并且控制部(70)改变电能供应器供应的电流方向,来转换第一电极(21)和第二电极(22)的极性。控制部(70)是用于转换极性的装置,其可以是机械转换装置类型或者半导体装置(比如,IC和晶体管等)。
通过控制部(70)的极性转换可在固定的时间段或变化的时间段进行,例如,10分钟、1分钟和10秒钟。产生于第一电极或第二电极的阴离子(-)的移动方向通过极性转换改变,并因此油脂组分的移除或分离在大脑的多个区域进行。因此,油脂组分可以被迅速清理。
图8是示出油脂清理实验的结果的照片,其中该实验通过在电泳组织清理装置(1)中以1分钟的固定时间间隔重复地使第一电极(21)和第二电极(22)的极性相互转换而进行。图8示出和比较(在没有极性转换和有极性转换的情况下)分别通过2小时、4小时和8小时的处理得到实验结果的照片。当极性被转换时,油脂组分被更有效地从老鼠大脑清理,来使大脑组织透明。
根据这些结果,可以确认,如果第一电极(21)和第二电极(22) 的极性相互转换(尤其是以短的时间间隔),油脂组分会有效地从组织清理。
另外,支撑构件(15)可以额外地包括在本发明的使用电泳的组织清理装置(1)中(图4)。支撑构件(15)配置为在腔(10)中支撑生物组织(大脑),并且可被设置为转动。如果支撑构件(15)转动,阴离子相对于大脑的移动方向被改变。即,在第一电极(21)和第二电极(22) 之间的电场形成的方向改变,并且因此油脂组分的快速清理实现。
根据本发明的使用电泳的组织清理装置(1),第一电极(21)和第二电极(22)中的每一个可由如图7中示出的一个电极或两个或更多个电极组成。当两个或更多个第一电极(21)和两个或更多个第二电极(22) 被包括时,它们可相对于腔(10)的中心沿圆周方向放置。即,多个第一电极(21a、21b、21c)可相对于腔(10)的中心沿圆周方向放置,并且多个第二电极(22a、22b、22c)也可相对于腔(10)的中心沿圆周方向放置。在此情况中,第二电极(22a、22b、22c)的数量可与第一电极 (21a、21b、21c)的数量相同。优选地,多个第一电极和多个第二电极定位为在相邻的电极之间具有相同的距离。
在此情况中,控制部(70)可控制两个或更多个第一电极(21a、21b、 21c)中的任何一个和两个或更多个第二电极(22a、22b、22c)中的任何一个,来使它们相互起作用。即,控制部(70)可控制第一电极(21a) 和第二电极(22b)在其他的第一电极(21b、21c)和第二电极(22b、 22c)不运行时相互起作用;或者可控制第一电极(21b)和第二电极(22b) 在其他的第一电极(21a、21c)和第二电极(22a、22c)不运行时相互起作用。此外,控制部(70)可配置为根据圆周方向改变运行的第一电极(21a、21b、21c)和第二电极(22a、22b、22c)。即,控制部(70) 可控制通过第一电极(21a、21b、21c)和第二电极(22a、22b、22c) 产生的电场(E)的方向,来使电场方向沿着顺时针或逆时针方向(图9 (a)至图9(c))持续地改变。
此外,控制部(70)可控制第一电极(21a、21b、21c)和第二电极 (22a、22b、22c)的极性,以使得其极性可相互转换,并且因此由第一电极(21a、21b、21c)和第二电极(22a、22b、22c)产生的电场的方向可沿着顺时针或逆时针方向持续地改变并且也重复地循环(图9(a) 至图9(f))。
根据第一电极(21)和第二电极(22)的这种配置和控制部(70) 的控制,阴离子相对于大脑移动的方向依次地变化,并且因此油脂清理可以快速地进行。
图10是示出根据本发明的另外一种示例实验的使用电泳的组织清理装置的电极的操控模式的示意图。根据组织清理装置(1),第一电极 (21)和第二电极(22)相对于腔(10)中心沿圆周方向放置,其中第一电极(21)或第二电极(22)由两个或更多个电极组成。即,多个第一电极(21)或第二电极(22)可相对于腔(10)中心沿圆周方向放置。图10示出一个示例实施例,其中第一电极(21)由一个电极组成,并且第二电极(22a、22b、22c)由多个电极组成。优选地,第一电极(21) 和第二电极(22a、22b、22c)放置成在相邻电极之间具有相同的距离。此外,控制部70可控制第一电极(21)和第二电极(22a、22b、22c) 来以多种方式相互起作用。例如,如图10中示出,当第二电极由多个电极(22a、22b、22c)组成时,控制部(70)可从一个到另一个顺序地转换与第一电极(21)相互起作用的第二电极(22a、22b、22c)。即,其可以以首先第二电极中的一个(22a)运行、另一第二电极(22b)运行,并且随后另外的第二电极(22c)运行的方式控制。因此,产生的电场(E) 的方向可被控制以改变。此外,控制部(70)可配置为控制运行的第二电极(22a、22b、22c)从一个到另一个转换,而同时两个或更多个第二电极(22a、22b、22c)与第一电极(21)保持相互起作用。如图10(a) 和图10(b)中示出,可以以一对第二电极(22a、22c)运行,并且此后另一对第二电极(22b、22c)运行的方式控制。此外,控制部(70) 可配置为改变与第一电机(21)相互起作用的第二电极(22a、22b、22c) 的数量。如图10(b)和图10(c)中示出,可以以两个第二电极(22b、 22c)运行并且随后三个第二电极(22a、22b、22c)运行的方式控制。于此,阴离子相对于大脑移动的方向通过第一电极(21)和第二电极(22) 以及控制部(70)的操控模式的多种组合以多种方式改变,并且油脂组分被相应地快速清理。
此外,本发明的使用电泳的组织清理装置(1)可额外地包括冷却板 (31、32)和热元件(41、42)。
冷却板(31、32)和热元件(41、42)被用于降低腔内部的温度。冷却板(31、32)连接于腔(10)的外侧,其具有平板形(例如,片或弯曲板形)并且由具有相对优良的热导率的金属组成。例如,金、银、铜、铝或其合金可被使用。具体地,冷却板(31、32)可配置为在腔(10)的外侧紧密粘附并且直接连接于第一电极和第二电极中的每一个。此外,冷却板(31、32)可像电极一样在两相对侧对称安装。
热元件(41、42)形状可设计成一般的热元件(41、42),其中该热元件通过珀尔帖效应吸收热量来冷却周围的温度,并且热元件(41、42) 紧密连接冷却板(31、32)的外部区域。一对热元件(41、42)对称放置于冷却板(31、32)的外部区域,并且电能供应器被提供给热元件(41、 42)中的每一个。此外,温度传感器可连接至热元件用于精确控制温度。
此外,本发明的使用电泳的组织清理装置(1)可额外地具有散热器 (51、52)和冷却扇(61、62)。图11是示出根据另一示例性实施例的本发明的使用电泳的组织清理装置(1)的立体图,并且图12是图 11的组织清理装置的截面图。
一对散热器(51、52)连接至热元件(41、42)的外部区域,并且包括用于有效地从热元件(41、42)放热的多个冷却柱。多个冷却柱配置为向外突出,并且因此从热元件传递的热量有效地释放。
一对冷却扇(61、62)放置于散热器(51、52)的外侧,来面向散热器,并且由通过电马达操控的风扇组成。散热器(51、52)外表面上的热量通过冷却扇(61、62)的运行向外快速释放。
本发明通过参照于此的多种示例性实施例描述。虽然本发明优选的实施例特别地公开于此,但是所属领域技术人员将完全理解,相同的原理同等可应用于并且实施于其它的系统,并且理解任何该变化将落入不偏离本发明的范围的修改中。应理解本发明不限于其对于任何示出安排的细节的应用中,由于本发明具有其它的实施例。此处使用的术语是以描述而不是限制为意图。此外,虽然特定的方法参照于此处示出的有特定顺序的特定步骤描述,在多个例子中,这些步骤可以以任何顺序进行,该顺序将被所属领域技术人员理解,并且该方法不限于此处公开的特定的步骤的安排。
附图标记
1:使用电泳的组织清理装置
10:腔
13:入口
14:出口
15:支撑构件
21、22:电极
31、32:冷却板
41、42:热元件
51、52:散热器
51a、52a:冷却柱
61、62:冷却扇
70:控制部
Claims (11)
1.一种使用电泳的组织清理装置,所述电泳用于分离生物组织的组分或成分,其包括:
(a)腔,其能容纳缓冲溶液和生物组织,其中所述腔中具有用于循环所述缓冲溶液的入口和出口;
(b)第一电极和第二电极,其分别地放置于两个相对的位置中以在腔中对应于彼此,其中每个电极是板形的;
(c)冷却板,其连接到所述腔的外侧;和
(d)热元件,其用于冷却所述冷却板;
其中所述第一电极和所述第二电极的每个面积不小于1cm2,并且所述第一电极和所述第二电极之间的距离不小于10mm。
2.如权利要求1所述的使用电泳的组织清理装置,其中固定电流通过所述第一电极和所述第二电极施加。
3.如权利要求2所述的使用电泳的组织清理装置,其中所述固定电流在0.5到3A(安培)之间。
4.如权利要求1至3中任一项所述的使用电泳的组织清理装置,其中进一步包括用于将所述第一电极和所述第二电极的极性相互转换的控制部。
5.如权利要求1至3中任一项所述的使用电泳的组织清理装置,其中所述腔中进一步包括用于支撑所述生物组织的支撑构件。
6.如权利要求1至3中任一项所述的使用电泳的组织清理装置,其中所述第一电极和所述第二电极中的每一个具有两个或更多个电极,并且所述第一电极和所述第二电极放置于两个相对的位置中以对应于彼此,并且其中进一步包括用于控制两个或更多个第一电极中的任一个和两个或更多个第二电极中的任一个相互起作用的控制部。
7.如权利要求6所述的使用电泳的组织清理装置,其中所述控制部控制所述第一电极和所述第二电极以相互转换极性。
8.如权利要求1至3中任一项所述的使用电泳的组织清理装置,其中所述第一电极由一个电极组成并且所述第二电极由两个电极组成,并且所述第一电极和所述第二电极放置于相对的两个位置中以对应于彼此,并且其中进一步包括用于控制所述第一电极和所述第二电极中的任一个相互起作用的控制部。
9.如权利要求1所述的使用电泳的组织清理装置,其中所述冷却板由至少一个冷却板组成,并且连接到所述第一电极和所述第二电极的外部区域中的每一个。
10.如权利要求1所述的使用电泳的组织清理装置,其中所述热元件由连接到冷却板的外部区域的至少一个热元件组成,并且其中所述热元件进一步包括至少一个散热器,所述散热器连接到所述热元件的外部区域并且具有多个冷却柱。
11.如权利要求10所述的使用电泳的组织清理装置,其进一步包括至少一个冷却扇,其中所述冷却扇放置于所述散热器的外侧,并且使表面空气在所述散热器上循环。
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