JPS63188381A - 遺伝子導入チヤンバ - Google Patents
遺伝子導入チヤンバInfo
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- JPS63188381A JPS63188381A JP62021287A JP2128787A JPS63188381A JP S63188381 A JPS63188381 A JP S63188381A JP 62021287 A JP62021287 A JP 62021287A JP 2128787 A JP2128787 A JP 2128787A JP S63188381 A JPS63188381 A JP S63188381A
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Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
- C12M35/00—Means for application of stress for stimulating the growth of microorganisms or the generation of fermentation or metabolic products; Means for electroporation or cell fusion
- C12M35/02—Electrical or electromagnetic means, e.g. for electroporation or for cell fusion
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Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、遺伝子導入装置において、遺伝子や高分子物
質（以下、遺伝子等という）と細胞を混在させた溶液（
以下、混在液という）に電気パルスで刺激を与えること
によって細胞外に浮遊している遺伝子等を細胞内に取り
込ませるための装置に関するものである。
質（以下、遺伝子等という）と細胞を混在させた溶液（
以下、混在液という）に電気パルスで刺激を与えること
によって細胞外に浮遊している遺伝子等を細胞内に取り
込ませるための装置に関するものである。
（従来の技術）
従来の遺伝子導入チャンバでは、平行電極により細胞に
一方向から電気パルスをかけて細胞の表面に孔をあけ、
そこから細胞内に遺伝子等を導入していた。
一方向から電気パルスをかけて細胞の表面に孔をあけ、
そこから細胞内に遺伝子等を導入していた。
従来の遺伝子導入チャンバで、第４図に概略的に示され
るように、対向電極４，６ｒＩ！Ｊに細胞２を置き、電
極４，６間に電界Ｅを印加したとする。
るように、対向電極４，６ｒＩ！Ｊに細胞２を置き、電
極４，６間に電界Ｅを印加したとする。
電界Ｅの方向と細胞２の表面上の任意の点Ｑとのなす角
をθとすると、細胞包含膜当り、近似的にＶ ＝ （３
／ ２） ｒ Ｅｃｏｓθなる電位差■が生じること
が知られている（ ｒＢｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂ
ｉｏｐｈｙｓｉｃａ ＡＣＴＡＪ誌、第１６３号、第３
７〜４３頁（１９６８年）参照）。
をθとすると、細胞包含膜当り、近似的にＶ ＝ （３
／ ２） ｒ Ｅｃｏｓθなる電位差■が生じること
が知られている（ ｒＢｉｏｃｈｉｍｉｃａ ｅｔ Ｂ
ｉｏｐｈｙｓｉｃａ ＡＣＴＡＪ誌、第１６３号、第３
７〜４３頁（１９６８年）参照）。
ｒは細胞２の半径である。
この電位差Ｖが約０．５〜３ボルトになると、細胞包含
膜の透過性が増加して細胞Ｓ濁液中の物質と細胞内物質
との交流が行なわれ、細胞２外に浮遊している遺伝子等
が細胞２内に取り込まれる。
膜の透過性が増加して細胞Ｓ濁液中の物質と細胞内物質
との交流が行なわれ、細胞２外に浮遊している遺伝子等
が細胞２内に取り込まれる。
（発明が解決しようとする問題点）
細胞包含膜に作用する電位差Ｖは、細胞表面上の点Ｑの
なす角度θの増加に伴って低下し、θ＝ ｎ ｔｔ ／
２ （ｎ ＝ １ 、３ ）でＶ＝Ｏとなる。したが
って遺伝子等が導入されるのは、図中でＰ。
なす角度θの増加に伴って低下し、θ＝ ｎ ｔｔ ／
２ （ｎ ＝ １ 、３ ）でＶ＝Ｏとなる。したが
って遺伝子等が導入されるのは、図中でＰ。
Ｓで示されるような対向電極の特異な領域（θ＝Ｏ９π
）に限られる。
）に限られる。
この遺伝子等の導入領域を増加させるためには、電界Ｅ
を大きくすればよいが、その場合、Ｐ、８点においては
電位差Ｖが大きくなり過ぎるために、細胞包含膜の完全
破壊が起り、続いて細胞死に至る。
を大きくすればよいが、その場合、Ｐ、８点においては
電位差Ｖが大きくなり過ぎるために、細胞包含膜の完全
破壊が起り、続いて細胞死に至る。
本発明は、細胞破壊に至らない程度の必要最低限の細胞
包含膜間電圧Ｖが細胞表面の複数個所で誘起されるよう
にして、細胞膜の特定の部分に電気エネルギーの集中が
起こらないようにするとともに、遺伝子等が細胞内に取
り込まれる確率を高めることができる遺伝子等の導入チ
ャンバを提供することを目的とするものである。
包含膜間電圧Ｖが細胞表面の複数個所で誘起されるよう
にして、細胞膜の特定の部分に電気エネルギーの集中が
起こらないようにするとともに、遺伝子等が細胞内に取
り込まれる確率を高めることができる遺伝子等の導入チ
ャンバを提供することを目的とするものである。
（問題点を解決するための手段）
実施例を示す第１図を参照して説明すると、本発明の遺
伝子導入チャンバでは、内側形状が正六面体をなす容器
（１０，１２）の内側各面に互いに絶縁された電極（８
−１〜８−６）が設けられており、対向する各対の電極
間（８−１，８−４）、（８−２，８−５）、（８−３
，８−６）に電圧が印加される （作用） 容器（１０，１２）内に混在液を入れ、各対の電極間（
８−１，８−４）、（８−２，８−５）。
伝子導入チャンバでは、内側形状が正六面体をなす容器
（１０，１２）の内側各面に互いに絶縁された電極（８
−１〜８−６）が設けられており、対向する各対の電極
間（８−１，８−４）、（８−２，８−５）、（８−３
，８−６）に電圧が印加される （作用） 容器（１０，１２）内に混在液を入れ、各対の電極間（
８−１，８−４）、（８−２，８−５）。
（８−３，８−６）に順次電圧を印加していくと、第２
図に示されるように細胞２にはｘ、ｙ、ｚの方向に６個
の孔１４をあけることができる。
図に示されるように細胞２にはｘ、ｙ、ｚの方向に６個
の孔１４をあけることができる。
（実施例）
第１図は一実施例を表わしたものである。
１０は容器本体、１２は容器の蓋であり、容器本体１０
と蓋１２を組み合わすことによって内側形状が正六面体
の容器が構成される。容器本体１０と蓋１２はポリアク
リル樹脂などの絶縁性材料によって構成されている。
と蓋１２を組み合わすことによって内側形状が正六面体
の容器が構成される。容器本体１０と蓋１２はポリアク
リル樹脂などの絶縁性材料によって構成されている。
容器１０，１．２の内側の各面にはそれぞれ電極８−１
〜８−６が接着されている。各電極８−１〜８−６は互
いに接触しないように、容器１０゜１２の内側面の面積
よりも小さい大きさに設定されている。例えば、各内側
面の大きさは１０ｍｍＸ１０ｍｍの正方形であり、電極
の大きさは８ｍｍ Ｘ ８ ｍ ｍの正方形である。各
内側面には周辺部に電極のない部分が１ｍｍの幅で形成
されている。
〜８−６が接着されている。各電極８−１〜８−６は互
いに接触しないように、容器１０゜１２の内側面の面積
よりも小さい大きさに設定されている。例えば、各内側
面の大きさは１０ｍｍＸ１０ｍｍの正方形であり、電極
の大きさは８ｍｍ Ｘ ８ ｍ ｍの正方形である。各
内側面には周辺部に電極のない部分が１ｍｍの幅で形成
されている。
各電極８−１〜８−６からは容器１０．１２を貫通して
リード線９−１〜９−６が外部に取り出されている。
リード線９−１〜９−６が外部に取り出されている。
本実施例では、蓋１２をあけて混在液を注入して容器本
体１０を満す。そして、蓋１２を閉じ、任意の対向電極
対（８−１，８−４）、（８−２゜８−５）、（８−３
，８−６）に所定の直流電圧パルスを印加する。電気処
理が終了した後は、蓋１２をあけて混在液を回収する。
体１０を満す。そして、蓋１２を閉じ、任意の対向電極
対（８−１，８−４）、（８−２゜８−５）、（８−３
，８−６）に所定の直流電圧パルスを印加する。電気処
理が終了した後は、蓋１２をあけて混在液を回収する。
第３図は混在液を大量に処理する場合に好都合な実施例
を表わしたものである。
を表わしたものである。
容器本体１６と蓋１８からなる内側が正六面体の大型容
器内に仕切２０を入れて、容器１６，１８の内側を８個
の正六面体の空間に分割したものである。８個の正六面
体容器のそ九ぞれの６個の面にはそれぞれ電極８が接着
されており、分割されたそれぞれの小さい正六面体容器
は第１図に示された遺伝子導入チャンバと同じく、互い
に＃！ｌｌＩ＃された電極８によって囲まれている。各
電極８からは容器１６．１８の外部にリード線（図示略
）が取り出されている。
器内に仕切２０を入れて、容器１６，１８の内側を８個
の正六面体の空間に分割したものである。８個の正六面
体容器のそ九ぞれの６個の面にはそれぞれ電極８が接着
されており、分割されたそれぞれの小さい正六面体容器
は第１図に示された遺伝子導入チャンバと同じく、互い
に＃！ｌｌＩ＃された電極８によって囲まれている。各
電極８からは容器１６．１８の外部にリード線（図示略
）が取り出されている。
本実施例でも、それぞれの小さい正六面体の対向した各
対の電極８の間に電圧が印加されるようになっている。
対の電極８の間に電圧が印加されるようになっている。
（発明の効果）
本発明では内側形状が正六面体をなす容器の内側各面に
互いに絶縁された電極が設けられ、対向する各対の電極
間に電圧が印加されるので、細胞の向きを変えるような
操作をしなくても細胞に多方向（三次元方向）又は特定
の方向に孔をあけることができ、遺伝子の導入効率が向
上する。
互いに絶縁された電極が設けられ、対向する各対の電極
間に電圧が印加されるので、細胞の向きを変えるような
操作をしなくても細胞に多方向（三次元方向）又は特定
の方向に孔をあけることができ、遺伝子の導入効率が向
上する。
第１図は一実施例を示す斜視図、第２図は同実施例によ
り細胞にあけられる孔の位置を示す概略図、第３図は他
の実施例を示す斜視図、第４図は電極間の細胞を示す模
式図である。 ２・・・・・・細胞、 ８．８−１〜８−６・・・・・・電極、１０．１６・・
・・・・容器本体、 １２．１８・・・・・・容器の蓋。
り細胞にあけられる孔の位置を示す概略図、第３図は他
の実施例を示す斜視図、第４図は電極間の細胞を示す模
式図である。 ２・・・・・・細胞、 ８．８−１〜８−６・・・・・・電極、１０．１６・・
・・・・容器本体、 １２．１８・・・・・・容器の蓋。
Claims (1)
- （１）内側形状が正六面体をなす容器の内側各面に互い
に絶縁された電極が設けられており、対向する各対の電
極間に電圧が印加される遺伝子導入チャンバ。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62021287A JPS63188381A (ja) | 1987-01-30 | 1987-01-30 | 遺伝子導入チヤンバ |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP62021287A JPS63188381A (ja) | 1987-01-30 | 1987-01-30 | 遺伝子導入チヤンバ |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS63188381A true JPS63188381A (ja) | 1988-08-03 |
Family
ID=12050916
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP62021287A Pending JPS63188381A (ja) | 1987-01-30 | 1987-01-30 | 遺伝子導入チヤンバ |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS63188381A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002250463A (ja) * | 2001-02-22 | 2002-09-06 | Ckd Corp | 方向制御弁、及び方向制御弁用の流体圧操作部 |
| EP3168290A4 (en) * | 2014-07-07 | 2018-03-28 | Logos Biosystems, Inc. | Apparatus for clearing tissue using electrophoresis |
-
1987
- 1987-01-30 JP JP62021287A patent/JPS63188381A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2002250463A (ja) * | 2001-02-22 | 2002-09-06 | Ckd Corp | 方向制御弁、及び方向制御弁用の流体圧操作部 |
| EP3168290A4 (en) * | 2014-07-07 | 2018-03-28 | Logos Biosystems, Inc. | Apparatus for clearing tissue using electrophoresis |
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