CN106539858A - 一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法，主要包括下列步骤：⑴精选黄芪药渣，干燥；⑵加入适量的水，搅拌均匀，在121℃高压灭菌30min；⑶接种，培养；⑷干燥；⑸粉碎。本发明的黄芪药渣为水提干燥后的药渣，可为个子、饮片、粉末、超微粉等形式水提后干燥的药渣，再利用市场上灵芝菌株进行固体发酵而得，最终的发酵产物的药用价值得到了很大的提升，所以值得开发利用。

Description

一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法

技术领域

本发明属于生物技术领域，涉及的是利用黄芪药渣的方法，尤其涉及一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法。

背景技术

黄芪是传统中药学中一味重要的药材，目前我国药典中规定药用的黄芪为豆科植物蒙古黄芪和膜荚黄芪的干燥根。据记载，黄芪具有补气升阳、益气固表、生津止渴、托毒生肌和利水消肿等功效，其主要起作用的有效成分为黄芪多糖，黄芪甲苷、黄芪酮等。

随着医药业的发展，各大中药制药企业取得了良好的发展，各类中药药渣排放量也日益增加，但对于处理中药药渣大多采取传统的办法，如：焚烧、固定区域堆放、填埋等处理方式，这样的处理方式环境不仅遭到破坏，也造成了资源浪费。据有关研究测定，经过水提后的黄芪残渣中也有大部分的黄芪多糖和黄芪甲苷等有效成分存在，药渣仍具有增强机体免疫功能、促进机体代谢等作用。因此本发明利用固体发酵的方法来处理黄芪药渣，所用的微生物会产生纤维素酶、果胶酶、蛋白酶、淀粉酶等多种次生代谢产物，通过这些活性分子与黄芪药渣的相互作用，不仅能够在比传统的物理化学方法更为温和的条件下实现药渣的利用，更对其药性进行适度的调整，扩大用药范围。

发明内容

以“双向固体发酵，生物转化理论”为指导，在以上描述的基础上，进行灵芝发酵黄芪药渣以提高黄芪药渣的利用与药用价值。

本发明利用黄芪药渣的方法是，由下述步骤组成：

⑴精选黄芪药渣，干燥；

⑵加入黄芪药渣0.4-0.8倍的水，搅拌均匀，在121℃高压灭菌15min-60min；

⑶以2％-20％的接种量接种真菌，于22-36℃培养，直至黄芪药渣上全部长满菌丝体；

⑷干燥

⑸粉碎。

本发明利用黄芪药渣的方法，其特征是步骤⑴中黄芪药渣为干燥后的药渣，可为个子、饮片、粉末、超微粉形式水提后干燥的药渣；

所述步骤⑵中加水量是黄芪药渣质量的0.4-0.8倍；

所述步骤⑵中灭菌时间为30min；

所述步骤⑶中的真菌为灵芝，且为药用灵芝；

所述步骤⑶中接种量为10％，温度为30℃；

所述步骤⑸中粉碎方式为一般粉碎和超微粉碎。

本发明的有益效果是：

本发明利用真菌灵芝，在特定的条件下对黄芪药渣进行固体发酵，经过双向固体发酵得到的发酵产物药用价值高，本发明这种生产方式不仅节能环保，又能“变废为宝”。

具体实施方式

实施例1

⑴精选黄芪个子药渣，干燥后分别准确称取黄芪个子药渣1kg2份；

⑵分别加入黄芪个子药渣质量0.4倍的水(即0.4kg)，搅拌均匀，在121℃高压灭菌15min；

⑶其中一份以2％的接种量接种灵芝，于22℃培养，直至黄芪个子药渣上全部长满菌丝体；

⑷干燥；

⑸用粉碎机粉碎即得。

实施例2

⑴精选黄芪粉末药渣，干燥后分别准确称取黄芪粉末药渣1kg2份；

⑵分别加入黄芪粉末药渣质量0.8倍的水(即0.8kg)，搅拌均匀，在121℃高压灭菌60min；

⑶其中一份以20％的接种量接种灵芝，于36℃培养，直至黄芪粉末药渣上全部长满菌丝体；

⑷干燥；

⑸用粉碎机粉碎即得。

实施例3

⑴精选黄芪饮片药渣，干燥后分别准确称取黄芪饮片药渣1kg2份；

⑵分别加入黄芪饮片药渣质量0.6倍的水(即0.6kg)，搅拌均匀，在121℃高压灭菌30min；

⑶其中一份以10％的接种量接种灵芝，于30℃培养，直至黄芪饮片药渣上全部长满菌丝体；

⑷干燥；

⑸用粉碎机粉碎即得。

注：本发明实施例1-3均选用黄芪药渣两份，一份不接种，一份接种。其余处理条件相同。

实施例4

急性毒性实验的评价

取本发明实施例3发酵产物超微粉碎调和至最大抽吸浓度，40g/kg·bw剂量一日三次经口灌胃昆明种小鼠后，在观察期内各动物行为活动未见异常，各天然孔无异常分泌物，无动物死亡，且体重自然增长。实验结束时活杀各动物，主要脏器均无肉眼可见病变。无明显的中毒表现或不良反应。即该发酵产物对雌雄性昆明种小鼠的急性经口最大耐受剂量大于120g/kg·bw时，未发现毒性。

实施例5

本发明发酵产物对肉鸡免疫系统的影响

选取体重基本一致的健康肉鸡54只，按每组18只随机分为3组，试验采用单因子实验设计，即对照组饲喂基础日粮，试验组在基础日粮上添加实施例3中的发酵产物，即：第一组为空白对照组，第2、3组分别添加实施例3对照和实施例3的发酵产物。

试验组与对照组相同，共同执行常规免疫和消毒程序，饲料由鸡场提供，由专人饲养，鸡舍温度、湿度、光照和通风按照饲养管理规定进行，定量采食，乳头式自动饮水。

从1日龄开始，饲喂至42d。分别测定以下的免疫指标。新城疫抗体效价分别于7、14、21、28、35、42日龄每组随机抽取3只鸡，翅静脉采血，制备血清。分装，﹣70℃冷冻保存。采用血细胞凝集抑制试验法(HI)测定，测定结果见表1。

外周血T淋巴细胞转化率分别于14、28、42日龄时，每组随机抽取6只鸡翅静脉采血，制备肝素抗凝血。测定方法为MTT法，用酶标仪(Bio-Tek Instruments,ELX-800)进行测定，结果见表2。

结果以刺激指数(SI)表示，SI＝试验组A值/对照组A值。

免疫器官指数分别于14、28、42日龄时，每组随机抽取8只鸡空腹屠宰，取胸腺、脾脏、法氏囊称其鲜重，计算免疫器官指数，测定结果见表3。

免疫器官指数＝免疫器官鲜重(mg)/活体重(g)。

表1本发明的发酵产物对肉鸡血清中新城疫抗体效价的影响(n＝8)(log2)

与对照组相比**p<0.01；*p<0.05

表2本发明的发酵产物对肉鸡外周血T淋巴细胞转化率的影响(n＝6)

与对照组相比**p<0.01；*p<0.05

表3本发明的发酵产物对肉鸡免疫器官指数的影响(n＝8)(mg/g)

与对照组相比**p<0.01；*p<0.05

由表1可以看出，7日龄各组的新城疫抗体效价是第一次免疫前测定的，各组之间差异不显著(P>0.05)。试验至14、21、28、35、42日龄时，与对照组相比，差异显著。

肉鸡外周血T淋巴细胞转化率由表2可见，试验至14d时添加发酵产物时差异显著，28d、42d时差异极显著。

肉鸡免疫器官指数由表3可见，胸腺：试验至28日龄时，发酵产物差异显著，试验至42日龄时，发酵产物差异极显著。脾脏：试验至28日龄时，发酵产物差异显著，试验至42日龄时，发酵产物差异极显著。法氏囊：试验至28日龄时，发酵产物差异显著，试验至42日龄时，发酵产物差异极显著。

因此，本发明发酵产物对肉鸡的新城疫抗体效价、外周血T淋巴细胞转化率、免疫器官指数都有提高，说明应用本发明方法制备的发酵产物可提高肉鸡的免疫力。

Claims (7)

1.一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法，是由下述步骤组成：

⑴精选黄芪药渣，干燥；

⑵加入黄芪药渣0.4-0.8倍重量的水，搅拌均匀，在121℃高压灭菌15min-60min；

⑶以2％-20％的接种量接种真菌，于22-36℃培养，直至黄芪药渣上全部长满菌丝体；

⑷干燥；

⑸粉碎。

2.如权利要求1所述的一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法，其特征是步骤⑴中黄芪药渣为干燥后的药渣，可为黄芪个子、饮片、粉末、超微粉水提后干燥的药渣。

3.如权利要求1所述的一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法，其特征是步骤⑵中加水量是黄芪药渣质量的0.6倍。

4.如权利要求1所述的一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法，其特征是步骤⑵中灭菌时间为30min。

5.如权利要求1所述的一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法，其特征是步骤⑶中的真菌为灵芝。

6.如权利要求1所述的一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法，其特征是步骤⑶中接种量为10％，温度为30℃。

7.如权利要求1所述的一种利用固体发酵技术利用黄芪药渣的方法，其特征是步骤⑸中粉碎方式为一般粉碎和超微粉碎。