CN106509906B - 一种破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺 - Google Patents
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Classifications
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- A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
- A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
- A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs
Abstract
本发明公开了一种破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺，包括以下步骤：1)破壁灵芝孢子粉的制备；2)破壁灵芝孢子粉多糖的制备；3)破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备。本发明与传统的碱提醇沉等提取方法相比，本发明的工艺过程均在低温、无化学溶剂接触条件下进行，有效地保留了破壁灵芝孢子粉多糖的生物活性，使其免受溶剂、温度等理化因素的影响。用这一工艺提取的灵芝孢子粉多糖口感醇香，无灵芝菌丝体多糖、子实体多糖的苦味而具有蔗糖甜醇感，在后续的成品配方中不需要添加遮味剂，可直接入组方；这种多糖物料具有良好的流动性、可压性及较大的堆积密度，适合加工成片剂、胶囊剂。
Description
技术领域
本发明属于中药保健领域，具体涉及一种破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺。
背景技术
灵芝多糖是灵芝“扶正固本”的有效成分。灵芝多糖存在于灵芝菌丝体、子实体、孢子粉及灵芝工程菌株的发酵液中，由肽多糖、葡聚糖、杂多糖等组成的混合物。葡聚糖中大部分为β2葡聚糖，少数为α2葡聚糖，而β2葡聚糖是其发挥活性的主要成分。研究表明，灵芝多糖具有广泛的生理活性，具有提高机体免疫力、抑制肿瘤、增强机体耐缺氧能力、消除自由基、抗衰老等作用。目前，提取灵芝多糖的方法大多采用水提醇沉法、酸碱提取法、酶法提取、超临界流体辅助提取、以及超声波微波提取法等。用这些方法提取的灵芝多糖，其结构、生物活性均会受到溶剂、提取温度、酸碱度等条件的影响而下降，这些方法也存在提取率不高，杂质较多等缺憾，同时灵芝多糖的提取部位也对其物理性质、化学性质及生物学功能产生较大的影响。
目前，面市上的灵芝多糖保健食品中，其多糖成分主要来源于灵芝菌丝体，或灵芝子实体，少部分来源于灵芝高产菌株的发酵产物，并以灵芝提取物的形式组成产品组方，以灵芝孢子粉多糖为原料的产品正是凤毛麟角。从灵芝孢子粉中提取多糖的制备工艺大多停留在实验室阶段，或处于中试过程中，尚未见到一款用成熟的灵芝孢子粉多糖提取工艺制备的产品问世。
传统的灵芝多糖提取、分离方法普遍存在提取效率不高、纯度低、溶剂用量大等缺点。新型提取分离技术如超声波提取、酶法提取、大孔树脂分离等虽然在一定程度上能够弥补传统方法的不足，但由于上述方法的最优操作条件较为苛刻，若要将其运用到实际生产中，还需要进行大量的基础实验研究。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺。
为解决上述技术问题，本发明采用的技术方案如下：一种破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺，包括以下步骤：
1)破壁灵芝孢子粉的制备；
2)破壁灵芝孢子粉多糖的制备；
3)破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备。
其中，上述步骤1)中的破壁灵芝孢子粉的制备工艺包括以下步骤：原材料准备：取灵芝孢子粉原材料，水洗、去杂；真空干燥：设置真空度和真空干燥时间，使真空干燥后水分≤6％；冷冻脆化破壁：将真空干燥后的原材料在‐18℃条件下，放置脆化3‐5h；然后在40～70℃条件下，进行超声波混合破壁，即得所述破壁灵芝孢子粉。
其中，上述步骤1)中的真空度0.7～1.0MPa和真空干燥时间4-8h，超声波的超声频率为18-22千赫兹，混合时间为4～12min，混合转速为20～50rpm。
其中，上述步骤2)破壁灵芝孢子粉多糖的制备方法如下：预处理：取破壁灵芝孢子粉，加入纯化水在混匀机中混合得到混合物；超声空化：将预处理后得到的混合物加入超声波反应斧中进行超声空化得到提取液，超声频率为10～30kHZ；初纯：将提取液抽真空后静置得到上清液，所述真空度为-0.2～-0.1MPa；静置时间为10～14h；浸膏浓缩：将上清液进行低温浓缩得到浸膏；浓缩温度为40～50℃；冷冻干燥：将浸膏真空冷冻干燥得到冻干粉，分为三个阶段：预冷处理、冷冻处理、升温处理；所述预冷的温度为-16℃～-20℃，过夜；所述冷冻处理过程中冷阱温度为-22℃，冷冻时间为20～24h，升温处理过程中的升华温度为35～45℃，升华时间为16～20h；整个真空干燥过程中的真空度为-0.2～-0.1MPa；粉碎并收集：将冻干粉经粉碎机粉碎整齐，颗粒通过70～90目筛网，装袋，封口即得。
其中，上述步骤2)破壁灵芝孢子粉多糖的制备步骤中：破壁灵芝孢子粉：纯化水的质量比为1：(5‐10)。
其中，上述步骤2)破壁灵芝孢子粉多糖的制备步骤中：混匀机转速为30～40rpm，混合温度为50～60℃，混合时间为5～10min。
其中，上述步骤3)破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺如下：将玉米淀粉、异麦芽酮糖醇与破壁灵芝孢子粉多糖充分混合，得到混合料；取上述混合料，加入硬脂酸镁，充分混合均匀后，压片，即得破壁灵芝孢子粉多糖含片。
其中，上述破壁灵芝孢子粉多糖含片由以下重量份的原料制成：破壁灵芝孢子粉多糖5～334.4份、异麦芽酮糖醇1.0～60份、玉米淀粉0.5～28份、硬脂酸镁0.1～5.6份。
其中，上述破壁灵芝孢子粉多糖含片由以下重量份的原料制成：破壁灵芝孢子粉多糖334.4份、异麦芽酮糖醇40份、玉米淀粉20份、硬脂酸镁5.6份。
其中，上述破壁灵芝孢子粉多糖含片由以下重量份的原料制成：破壁灵芝孢子粉多糖5份、异麦芽酮糖醇1.0份、玉米淀粉0.5份、硬脂酸镁0.1份。
其中，上述破壁灵芝孢子粉多糖含片由以下重量份的原料制成：破壁灵芝孢子粉多糖334.4份、异麦芽酮糖醇60份、玉米淀粉28份、硬脂酸镁5.6份。
本发明的主要原料来源于灵芝(Ganoderma lucidum)。我国在《真菌类保健食品申报与审评规定(试行)》中明确，灵芝是可用于保健食品的真菌菌种。破壁灵芝孢子粉多糖是以新鲜灵芝孢子粉为原料，经去杂、破壁、超声空化提取、低温浓缩、冷冻干燥、粉碎等工艺而制成的破壁灵芝孢子粉提取物。黄晓兰等学者研究破壁与不破壁孢子粉多糖的单糖组成。他们指出：破壁与不破壁孢子粉多糖的单糖组成相同，但破壁灵芝孢子粉多糖较不破壁孢子粉的多糖高出70％，增加部分为相对分子质量较小的多糖，其生物活性较强，药用价值更好。研究表明，灵芝孢子粉的多糖可显著增强巨噬细胞的吞噬功能，具有免疫调节作用。灵芝多糖能提高小鼠特异性体液免疫功能，提高小鼠的B淋巴细胞产生特异性抗体的能力。由此可见，灵芝提取物中的多糖类成分均为增强免疫的主要有效成分。
本发明的另一原料为异麦芽酮糖醇。异麦芽酮糖醇(Isomalt)又称帕拉金糖醇(Palatinitol)，国外称益寿糖，是近年来新兴的功能性食用糖醇，天然存在于蜂蜜和甘蔗汁中，是一种功能性二糖。异麦芽酮糖醇呈白色无臭结晶或粉末，甜度约为蔗糖的50％，低吸湿性，它具有不引起血糖和胰岛素水平波动，非致龋齿性、低热量、高耐受性等生理功效，被美国FDA给予食品安全最高等级“GRAS(公认安全)”。2008年异麦芽酮糖醇由我国卫生部批准为新资源食品(中华人民共和国卫生部公告2008年第20号)。异麦芽酮糖醇以它良好的可压性，在本产品的配方工艺中是一种干粉直压的填充剂。正由于异麦芽酮糖醇这一特性，使本产品的压片工艺变得快捷、方便。本产品中异麦芽酮糖醇的食用量为160mg/天，远低于100克/天的规定量(中华人民共和国卫生部公告2008年第20号)，并按照“中华人民共和国卫生部公告2008年第20号”中有关异麦芽酮糖醇项下的质量标准及“QB/T 4486异麦芽酮糖醇”的质量标准使用这一功能性糖醇。
玉米淀粉，俗名六谷粉。是一种来源于玉米的食品原料。玉米淀粉在本产品作为崩解剂，确保本产品在胃肠中遇水能快速吸水崩解，溶出灵芝多糖等功效物质，便于被人体吸收、利用。按照我国国家标准“GB/T 8885食用玉米淀粉”的质量要求，使用玉米淀粉。
硬脂酸镁(CNS号02.006)，在本产品的组方中贡献于润滑剂，并按照食品添加剂指定标准“卫生部关于指定D-甘露糖醇等58个食品添加剂产品标准的公告(2011年第8号)”及《中华人民共和国药典》2015年二部的规定使用硬脂酸镁；硬脂酸镁在本品中的用量按照“GB 2760-2014食品安全国家标准食品添加剂使用标准”规定的用量组成本配方。
本发明中破壁方法采用冷冻脆化破壁，仅需在-18℃条件下，放置脆化3-5h，再进行超声波破壁，即可达到99％以上的破壁率，条件要求低，工艺简单，无需添加任何辅料，并且能有效保留原料中的有效成分，破壁率高。现有技术中有采用液氮中超低温冷冻处理5-120分钟，然后室温静置，并且反复多次的破壁方法，该方法成本高，操作复杂，条件要求高，并且破壁效果不佳；还有技术将原料置于干冰和无水乙醇的混合物中，采用超声波进行机械粉碎破壁，虽然该技术也采用超声波破壁，但是其破壁仍然需要在低温环境下，并且还需加入干冰和无水乙醇，除了增加成本外，无水乙醇会破坏其中有效成分，甚至造成残留。
本发明是以破壁灵芝孢子粉提取灵芝孢子油后的剩余物料为原料，采用超声空化、极限真空低温水提取工艺制取灵芝孢子粉多糖，再经低温浓缩膏状物、冷冻干燥，粉碎过筛等步骤制备具有增强免疫力功能的保健食品原料灵芝孢子粉多糖干品，是对灵芝孢子粉的综合利用。本发明制备的破壁灵芝孢子粉多糖，与传统的灵芝子实体多糖有着明显的区别：灵芝孢子粉多糖无苦味、具有破壁灵芝孢子粉特有的气香味、蔗糖醇味。灵芝多糖(灵芝子实体多糖)具有强烈苦味，传统工艺用乙醇提取，配辅料环状糊精、羧甲纤维素钠把子实体多糖苦味以降到最低程度。本发明的提取工艺与传统的碱提取、醇沉等提取方法相比，水提取过程均在低温、无溶剂接触条件下进行，有效地保留了灵芝孢子粉多糖的生物活性，使其免受溶剂、温度等理化因素的影响。用这一方法提取的灵芝孢子粉多糖膏体水分低、杂质少，再经过后续的低温冷冻干燥进一步纯化破壁灵芝孢子粉多糖。本方法提取的灵芝孢子粉多糖具有蔗糖香甜、纯度高、无溶剂残留等特点。
有益效果：本发明的产品是以破壁灵芝孢子粉多糖、异麦芽酮糖醇、玉米淀粉、硬脂酸镁为原料，经配料、混合、压片、装瓶/铝塑包装、外包装而成的破壁灵芝孢子粉多糖含片。具有“增强免疫力”功能的保健食品。本发明与传统的碱提醇沉等提取方法相比，本发明的工艺过程均在低温、无化学溶剂接触条件下进行，有效地保留了破壁灵芝孢子粉多糖的生物活性，使其免受溶剂、温度等理化因素的影响。用这一工艺提取的灵芝孢子粉多糖口感醇香，无灵芝菌丝体多糖、子实体多糖的苦味而具有蔗糖甜醇感，在后续的成品配方中不需要添加遮味剂，可直接入组方；这种多糖物料具有良好的流动性、可压性及较大的堆积密度，适合加工成片剂、胶囊剂。
具体实施方式
下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限定本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市购获得的常规产品。
本发明中的破壁灵芝孢子粉多糖得率按照以下公式算得：
多糖得率(％)＝破壁灵芝孢子粉多糖重量(g)/破壁灵芝孢子粉重量(g)*100％
实施例1：破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备
破壁灵芝孢子粉的制备：
(1)原材料准备：取灵芝孢子粉原材料，水洗、去杂；
(2)真空干燥：设置真空度和真空干燥时间，真空度为0.9MPa，真空干燥时间为6h，使真空干燥后水分≤6％；
(3)冷冻脆化破壁：将真空干燥后的原材料在-18℃条件下，放置脆化4h；然后在55℃条件下，进行超声波混合破壁，超声波的超声频率为20千赫兹，混合时间为8min，混合转速为35rpm，即得所述破壁灵芝孢子粉。
破壁灵芝孢子粉多糖的提取工艺，包括以下步骤：
1)预处理：取破壁灵芝孢子粉70kg，加入纯化水在混匀机中混合得到混合物；混匀机转速为30rpm，混合温度为50℃，混合时间为10min；其中，破壁灵芝孢子粉：纯化水的质量比为1：5；
2)超声空化：将步骤1)预处理后得到的混合物加入超声波反应斧中进行超声空化得到提取液；超声频率为30kHZ；
3)初纯：将步骤2)得到的提取液抽真空后静置得到上清液，所述真空度为-0.2MPa；静置时间为14h；
4)浸膏浓缩：将步骤3)得到的上清液进行低温浓缩得到浸膏；浓缩温度为40℃；
5)冷冻干燥：将浸膏真空冷冻干燥得到冻干粉，分为三个阶段：预冷处理、冷冻处理、升温处理；所述预冷的温度为-16℃，过夜；所述冷冻处理过程中冷阱温度为-22℃，冷冻时间为24h，升温处理过程中的升华温度为45℃，升华时间为16h；整个真空干燥过程中的真空度为-0.2MPa；
6)粉碎并收集：将冻干粉经粉碎机粉碎整齐，颗粒通过70目筛网，装袋，封口即得破壁灵芝孢子粉多糖6.8kg。
破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺如下：
1)将玉米淀粉20份、异麦芽酮糖醇40份与破壁灵芝孢子粉多糖334.4份充分混合，得到混合料；
2)取上述混合料，加入硬脂酸镁5.6份，充分混合均匀后，压片，即得破壁灵芝孢子粉多糖含片。
实施例2：破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备
破壁灵芝孢子粉的制备：
(1)原材料准备：取灵芝孢子粉原材料，水洗、去杂；
(2)真空干燥：设置真空度和真空干燥时间，真空度为0.9MPa，真空干燥时间为6h，使真空干燥后水分≤6％；
(3)冷冻脆化破壁：将真空干燥后的原材料在-18℃条件下，放置脆化4h；然后在55℃条件下，进行超声波混合破壁，超声波的超声频率为20千赫兹，混合时间为8min，混合转速为35rpm，即得所述破壁灵芝孢子粉。
破壁灵芝孢子粉多糖的提取工艺，包括以下步骤：
1)预处理：取破壁灵芝孢子粉70kg，加入纯化水在混匀机中混合得到混合物；混匀机转速为40rpm，混合温度为60℃，混合时间为5min；破壁灵芝孢子粉：纯化水的质量比为1：10；
2)超声空化：将步骤1)预处理后得到的混合物加入超声波反应斧中进行超声空化得到提取液；超声频率为30kHZ；
3)初纯：将步骤2)得到的提取液抽真空后静置得到上清液，所述真空度为-0.1MPa；静置时间为14h；
4)浸膏浓缩：将步骤3)得到的上清液进行低温浓缩得到浸膏；浓缩温度为50℃
5)冷冻干燥：将浸膏真空冷冻干燥得到冻干粉，分为三个阶段：预冷处理、冷冻处理、升温处理；所述预冷的温度为-20℃，过夜；所述冷冻处理过程中冷阱温度为-22℃，冷冻时间为20h，升温处理过程中的升华温度为35℃，升华时间为20h；整个真空干燥过程中的真空度为-0.1MPa；
6)粉碎并收集：将冻干粉经粉碎机粉碎整齐，颗粒通过90目筛网，装袋，封口即得破壁灵芝孢子粉多糖6.027kg。
破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺如下：
1)将玉米淀粉0.5份、异麦芽酮糖醇1.0份与破壁灵芝孢子粉多5份充分混合，得到混合料；
2)取上述混合料，加入硬脂酸镁0.1份，充分混合均匀后，压片，即得破壁灵芝孢子粉多糖含片。
实施例3破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备
破壁灵芝孢子粉的制备：
(1)原材料准备：取灵芝孢子粉原材料，水洗、去杂；
(2)真空干燥：设置真空度和真空干燥时间，真空度为0.9MPa，真空干燥时间为6h，使真空干燥后水分≤6％；
(3)冷冻脆化破壁：将真空干燥后的原材料在-18℃条件下，放置脆化4h；然后在55℃条件下，进行超声波混合破壁，超声波的超声频率为20千赫兹，混合时间为8min，混合转速为35rpm，即得所述破壁灵芝孢子粉。
破壁灵芝孢子粉多糖的提取工艺，包括以下步骤：
1)预处理：取破壁灵芝孢子粉70kg，加入纯化水在混匀机中混合得到混合物；混匀机转速为35rpm，混合温度为55℃，混合时间为7min；破壁灵芝孢子粉：纯化水的质量比为1：8；
2)超声空化：将步骤1)预处理后得到的混合物加入超声波反应斧中进行超声空化得到提取液；超声频率为20kHZ；
3)初纯：将步骤2)得到的提取液抽真空后静置得到上清液，所述真空度为-0.1MPa；静置时间为12h；
4)浸膏浓缩：将步骤3)得到的上清液进行低温浓缩得到浸膏；浓缩温度为45℃
5)冷冻干燥：将浸膏真空冷冻干燥得到冻干粉，分为三个阶段：预冷处理、冷冻处理、升温处理；所述预冷的温度为-18℃，过夜；所述冷冻处理过程中冷阱温度为-22℃，冷冻时间为22h，升温处理过程中的升华温度为40℃，升华时间为18h；整个真空干燥过程中的真空度为-0.2MPa；
6)粉碎并收集：将冻干粉经粉碎机粉碎整齐，颗粒通过80目筛网，装袋，封口即得破壁灵芝孢子粉多糖5.516kg。
破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺如下：
1)将玉米淀粉28份、异麦芽酮糖醇60份与破壁灵芝孢子粉多糖334.4份充分混合，得到混合料；
2)取上述混合料，加入硬脂酸镁5.6份，充分混合均匀后，压片，即得破壁灵芝孢子粉多糖含片。
实施例4破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备
破壁灵芝孢子粉的制备：
(1)原材料准备：取灵芝孢子粉原材料，水洗、去杂；
(2)真空干燥：设置真空度和真空干燥时间，真空度为0.7MPa，真空干燥时间为4h，使真空干燥后水分≤6％；
(3)冷冻脆化破壁：将真空干燥后的原材料在-18℃条件下，放置脆化3h；然后在40℃条件下，进行超声波混合破壁，超声波的超声频率为18千赫兹，混合时间为4min，混合转速为50rpm，即得所述破壁灵芝孢子粉。
破壁灵芝孢子粉多糖的提取工艺，包括以下步骤：
1)预处理：取破壁灵芝孢子粉70kg，加入纯化水在混匀机中混合得到混合物；混匀机转速为35rpm，混合温度为55℃，混合时间为8min；破壁灵芝孢子粉：纯化水的质量比为1：7；
2)超声空化：将步骤1)预处理后得到的混合物加入超声波反应斧中进行超声空化得到提取液；超声频率为25kHZ；
3)初纯：将步骤2)得到的提取液抽真空后静置得到上清液，所述真空度为-0.2MPa；静置时间为11h；
4)浸膏浓缩：将步骤3)得到的上清液进行低温浓缩得到浸膏；浓缩温度为46℃
5)冷冻干燥：将浸膏真空冷冻干燥得到冻干粉，分为三个阶段：预冷处理、冷冻处理、升温处理；所述预冷的温度为-19℃，过夜；所述冷冻处理过程中冷阱温度为-22℃，冷冻时间为23h，升温处理过程中的升华温度为42℃，升华时间为18h；整个真空干燥过程中的真空度为-0.1MPa；
6)粉碎并收集：将冻干粉经粉碎机粉碎整齐，颗粒通过85目筛网，装袋，封口即得破壁灵芝孢子粉多糖5.761kg。
破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺如下：
1)将玉米淀粉25份、异麦芽酮糖醇35份与破壁灵芝孢子粉多糖300份充分混合，得到混合料；
2)取上述混合料，加入硬脂酸镁3份，充分混合均匀后，压片，即得破壁灵芝孢子粉多糖含片。
实施例5破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备
破壁灵芝孢子粉的制备：
(1)原材料准备：取灵芝孢子粉原材料，水洗、去杂；
(2)真空干燥：设置真空度和真空干燥时间，真空度为1.0MPa，真空干燥时间为8h，使真空干燥后水分≤6％；
(3)冷冻脆化破壁：将真空干燥后的原材料在-18℃条件下，放置脆化5h；然后在70℃条件下，进行超声波混合破壁，超声波的超声频率为22千赫兹，混合时间为12min，混合转速为20rpm，即得所述破壁灵芝孢子粉。
破壁灵芝孢子粉多糖的提取工艺，包括以下步骤：
1)预处理：取破壁灵芝孢子粉70kg，加入纯化水在混匀机中混合得到混合物；混匀机转速为40rpm，混合温度为50℃，混合时间为10min；破壁灵芝孢子粉：纯化水的质量比为1：8；
2)超声空化：将步骤1)预处理后得到的混合物加入超声波反应斧中进行超声空化得到提取液；超声频率为15kHZ；
3)初纯：将步骤2)得到的提取液抽真空后静置得到上清液，所述真空度为-0.1MPa；静置时间为13h；
4)浸膏浓缩：将步骤3)得到的上清液进行低温浓缩得到浸膏；浓缩温度为43℃
5)冷冻干燥：将浸膏真空冷冻干燥得到冻干粉，分为三个阶段：预冷处理、冷冻处理、升温处理；所述预冷的温度为-16℃，过夜；所述冷冻处理过程中冷阱温度为-22℃，冷冻时间为24h，升温处理过程中的升华温度为45℃，升华时间为20h；整个真空干燥过程中的真空度为-0.2MPa；
6)粉碎并收集：将冻干粉经粉碎机粉碎整齐，颗粒通过70～90目筛网，装袋，封口即得破壁灵芝孢子粉多糖5.278kg。
破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺如下：
1)将玉米淀粉14份、异麦芽酮糖醇30份与破壁灵芝孢子粉多糖169.7份充分混合，得到混合料；
2)取上述混合料，加入硬脂酸镁2.85份，充分混合均匀后，压片，即得破壁灵芝孢子粉多糖含片。
实验例1破壁灵芝孢子粉多糖含片多糖含量的测定
1.样品处理：取样品用研钵粉碎，混合均匀。精密称取样品粉末0.5g，精确到0.001g，用冷水溶解并全部转移至250mL容量瓶中。定容并混合均匀后，置于4℃冰箱静置2－4小时。准确移取容量瓶中上层清液5.0mL，转移至50mL容量瓶，并用水定容。此溶液为样品测定液，过滤后使用。
2.标准曲线溶液的配制：精密吸取0mL、0.2mL、0.4mL、0.6mL、0.8mL、1.0mL葡萄糖标准溶液，分别置于25mL具塞比色管中，准确补水至1.0mL。加入5％苯酚水溶液1.0mL，再快速加5.0mL浓硫酸(与液面垂直加入，勿接触试管壁，以便与反应液充分混合)，静置10min，使用涡旋振荡器使反应液充分混合，然后将试管置于30℃水浴中反应20min，冷却至室温后，用分光光度计在490nm处测定吸光度值。取水1.0mL，加5％苯酚溶液1.0mL，浓硫酸5.0mL，同上做空白对照。以葡萄糖质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，制定标准曲线。
3.样品测定：精密吸取样品测定液1.0mL于25mL具塞比色管中，按步骤B.4.2操作，测吸光度，以标准曲线计算多糖含量。
4.计算
样品中多糖含量以质量分数ω计，单位以克每百克(g/100g)表示，按式(1)计算：
式中：
m1—样品测得的光度计数值带入标准曲线所求得的对应葡萄糖量，单位为微克(μg)；
m2—样品质量，单位为克(g)
V1—样品定容体积，单位为毫升(mL)
V2—比色测定时，所移取的样品测定液的体积，单位为毫升(mL)
通过上述方法对实施例1～5制备得到的破壁灵芝孢子粉多糖含片分别进行测定，得到多糖含量；通过对对实施例1～5制备得到的破壁灵芝孢子粉多糖分别进行测定得到多糖得率：
测定结果见表1：
| 实施例1 | 实施例2 | 实施例3 | 实施例4 | 实施例5 | |
| 多糖含量 | 57.8％ | 55.5％ | 56.7％ | 57.6％ | 57.5％ |
| 多糖得率 | 9.71％ | 8.61％ | 7.88％ | 8.23％ | 7.54％ |
实验例2破壁灵芝孢子粉多糖含片稳定性研究
采用浓硫酸法测定破壁灵芝孢子粉多糖含片中多糖含量
采用加速试验，考察所得破壁灵芝孢子粉多糖含片的稳定性，结果如下表2：
表2破壁灵芝孢子粉多糖含片稳定性考察
本发明制备工艺所得破壁灵芝孢子粉多糖含片，经过加速试验结果表明，其多糖含量在1个月、2个月和3个月时均没有显著变化，表明其稳定性强，性能优异。
尽管本发明的具体实施方式已经得到详细描述，本领域技术人员将会理解。根据已经公开的所有教导，可以对那些细节进行各种修改和替换，这些均在本发明的保护范围内。本发明的全部范围由所附专利要求极其任何等同物给出。
Claims (1)
1.一种破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺，其特征在于，所述制备工艺包括以下步骤：
A、破壁灵芝孢子粉的制备：
A1）原材料准备：取灵芝孢子粉原材料，水洗、去杂；
A2）真空干燥：设置真空度和真空干燥时间，真空度为0.9MPa，真空干燥时间为6h，使真空干燥后水分≤6%；
A3）冷冻脆化破壁：将真空干燥后的原材料在-18℃条件下，放置脆化4h；然后在55℃条件下，进行超声波混合破壁，超声波的超声频率为20千赫兹，混合时间为8min，混合转速为35rpm，即得所述破壁灵芝孢子粉；
B、破壁灵芝孢子粉多糖的提取工艺：
B1）预处理：取破壁灵芝孢子粉70kg，加入纯化水在混匀机中混合得到混合物；混匀机转速为30rpm，混合温度为50℃，混合时间为10min；其中，破壁灵芝孢子粉：纯化水的质量比为1：5；
B2）超声空化：将步骤1）预处理后得到的混合物加入超声波反应斧中进行超声空化得到提取液；超声频率为30kHZ；
B3）初纯：将步骤2）得到的提取液抽真空后静置得到上清液，所述真空度为-0.2MPa；静置时间为14h；
B4）浸膏浓缩：将步骤3）得到的上清液进行低温浓缩得到浸膏；浓缩温度为40℃；
B5）冷冻干燥：将浸膏真空冷冻干燥得到冻干粉，分为三个阶段：预冷处理、冷冻处理、升温处理；所述预冷的温度为-16℃，过夜；所述冷冻处理过程中冷阱温度为-22℃，冷冻时间为24h，升温处理过程中的升华温度为45℃，升华时间为16h；整个真空干燥过程中的真空度为-0.2MPa；
B6）粉碎并收集：将冻干粉经粉碎机粉碎整齐，颗粒通过70目筛网，装袋，封口即得破壁灵芝孢子粉多糖6.8kg；
C、破壁灵芝孢子粉多糖含片的制备工艺：
C1）将玉米淀粉20份、异麦芽酮糖醇40份与破壁灵芝孢子粉多糖334.4份充分混合，得到混合料；
C2）取上述混合料，加入硬脂酸镁5.6份，充分混合均匀后，压片，即得破壁灵芝孢子粉多糖含片。
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