CN106508406A - 白及苗组培快繁方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于植物育苗领域,具体公开了白及苗组培快繁方法,包括如下步骤:步骤1:培养土准备;步骤2:外植体准备;步骤3:播种;步骤4:初苗培养;步骤5:初炼苗;步骤6:自然炼苗;步骤7:收获。针对现有的组培苗驯化成活率低的技术问题,现在急需一种白及苗组培快繁方法。
Description
技术领域
本发明涉及植物育苗领域,具体涉及一种白及苗组培快繁方法。
背景技术
近年来作为中草药的白及价格逐年高涨,四大药材交易市场的交易价格已突破500元/公斤,并且需求大于供给,可谓是中药材中的“明星”,发家致富的好路子。白及是一种地生兰科植物,白及原产中国,广布于长江流域各省,全国大部分地方都能栽培。
白及由于本身的生物学特性,自然繁殖系数低,现在主要采用组培的方式繁育白及苗。用白及种子进行组培繁殖,就组培技术难度而言是简单的,近2年白及组培苗大量出现在市场,但组培苗驯化技术和条件限制,一般种植户驯化成活率低。
针对现有的组培苗驯化成活率低的技术问题,现在急需一种白及苗组培快繁方法。
发明内容
本发明针对现有的组培苗驯化成活率低的技术问题,提供了一种白及苗组培快繁方法。
本方案提供的基础方案为:白及苗组培快繁方法,包括如下步骤:
步骤1:培养土准备,将培养土放置在盘子内后,对其进行疏松后,放入蒸汽锅中进行杀菌消毒,然后在培养盘中用1/2MS培养基配方加入椰子汁,土豆汁,琼脂,配置成营养层,120度高温蒸汽灭菌10分钟后,待其自然冷却后,在培养基上均匀铺洒一层培养土,然后轻轻压实后刮平,然后在培养土表面挖一个种植坑,种植坑的坑底距离培养基1-5mm;
步骤2:外植体准备,选用在白及果荚呈褐色采集的新鲜的白及种子作为组培外植体,将白及种子放置到浓度为70%的乙醇溶液中浸泡5分钟,取出沥干后,用封膜刀将白及种子对剖;所述封膜刀包括刀体,刀体的一端设有刀把,刀体的下侧设有刃口,刀体内设有蓄液腔,刀体上设有让蓄液腔与外界连通的槽口,槽口位于蓄液腔的下方,槽口处设有封堵条,刀体的侧面上设有簧片,簧片的一侧与刀体固定,簧片的另一侧与封堵条固定,簧片的中间从刀体的侧面凸起,凸起距离刃口1mm-2mm,封膜刀的蓄液腔中装满了生长素溶液液。
步骤3:播种,用镊子夹取步骤2对剖后的种子,将种子的剖面向下放入种植坑内,撒上一层1-3cm厚的培养土,然后用薄膜覆盖在培养盘上,最后在薄膜上用针开设气孔;
步骤4:初苗培养,将培养盘放置在通风能够接触到阳光的室外,避免雨淋,控制培养土的湿度在60%-80%,28d-35d小苗即可萌发,待小苗萌发后撤去薄膜,50d-70d后营养盘内营养耗尽,重新按照步骤1制作新的培养盘,将小苗分盘继续培养;
步骤5:初炼苗,小苗在分盘继续培养80d-90d后,将培养盘中的培养土刮去表面一层,然后将大棚内的新鲜泥土直接洒在培养土表面,10-15d后,用1000倍大黄素甲醚溶液对小苗的叶面喷雾;
步骤6:自然炼苗,将小苗从培养盘中移栽到树林中培育30d-40d后,再用6%寡糖·链蛋白稀释1000倍进行叶面喷雾,然后继续培育30d-40d后,将小苗移植到种植土地自然生长;
步骤7:收获:3-5年后即可收获。
本方案的工作原理及优点在于:步骤1中椰子汁是指椰子坚果腔内的液体胚乳,白及种子是没有胚乳的,椰汁含有丰富的钾、镁等矿物质,其成分与细胞内液的成分相似,在培养基中加入椰子汁,能够有效弥补白及种子因没有胚乳而出苗缓慢的缺点。椰子汁中还含有一定量的植物激素,进一步促进白及种子发芽出苗。
步骤2中,用封膜刀对剖白及种子时,簧片在刀体的侧面的凸起会与白及种子产生相互的挤压,由于簧片的一端与封膜刀固定,因此,簧片会将封堵条向上顶起,这样蓄液腔中的生长素溶液会从槽口流到白及种子的切割面上。生长素溶液具有促进根分化的作用,在播种后能够让白及种子更快的生根。白及种子在种植坑内时,由于白及种子距离培养基是有1mm-5mm的距离的,在生长素溶液刺激白及种子将根分化出来后,利用植物的向肥性,白及种子的根能够快速的向培养基生长。由于在封膜刀切割时即将生长素涂抹上去了,生长素能够对种子的切割面迅速起作用,并且能够起到隔绝空气,保护种子的切割面的作用。如果是先切割,然后再涂抹的话,切割面会有较多的细胞死亡,影响白及种子的萌发率。
步骤5中,小苗在分盘继续培养80d-90d后,培养盘中的大部分营养已经被耗尽,将新鲜泥土引入,新鲜泥土中的细菌由于培养盘中大部分营养被耗尽,细菌营养物质缺乏,不会大规模增殖。新鲜泥土中的细菌会开始侵害小苗,能够刺激小苗自身的免疫能力,然后用1000倍大黄素甲醚溶液对小苗的叶面喷雾,进一步促进小苗的自身的免疫能力,保证小苗的正常生长,让小苗适应有有菌的环境。
步骤6中,在小苗移植到树林中后,小苗还没有完全适应自然环境,此时能够进一步刺激小苗本身的免疫能力,提高小苗移植在自然环境下的成活率,此时用再用6%寡糖·链蛋白稀释1000倍进行叶面喷雾,能够进一步提高小苗的免疫能力。
本方案白及苗组培快繁方法,用椰子汁作为白及种子的胚乳,并且用封膜刀在对剖种子的同时在白及种子的切割面涂抹上生长素,能够快速的促进白及种子分化出根,并且在培养盘的设计上,培养基是位于培养土下方的,白及种子是位于培养土内,在白及种子分化出根后,利用植物根的向肥性,进一步促进白及种子根的生长,提高白及种子的发芽率。并且在将小苗移植到自然环境前,进行两次适应性培养(驯化),在培养的过程中喷洒提高植物免疫能力的药物,以提高白及的小苗自身的免疫能力,以提高白及的小苗在移植到自然环境下的成活率,解决了组培苗驯化成活率低的问题。
优选方案一:作为基础方案的优选方案,步骤1中,种植坑的坑底距离培养基2-4mm。这种距离在白及的种子分化出来后,能够快速的从培养基中汲取营养。
优选方案二:作为优选方案一的优选方案:步骤1中,在培养基上均匀铺洒一层8-10mm厚的培养土。这种厚度的培养土,能够方便白及的种子发芽,并且这种厚度的培养土保水性也较好。
优选方案三:作为优选方案二的优选方案:步骤2中,储液腔内盛有生长素类似物溶液,生长素类似物溶液配制方法如下:选用2,4-D原粉1g,放入烧杯中,加入少量水,并滴入浓度为1%的酚酞溶液,然后在用浓度为5%氢氧化钠溶液滴定,每滴入一滴浓度为5%氢氧化钠溶液均要搅拌,直至搅拌后粉红色不消失,然后再加水至1000ml。这种方法配置的生长素类似物溶液中富含钠离子,能够哦促进白及的种子的生长。
优选方案四:作为方案三的优选方案:步骤5中,用1000倍大黄素甲醚溶液对小苗的叶面喷雾2-3次。能够提高小苗的成活率。
优选方案五:作为优选方案四的优选方案:步骤5中,用1000倍大黄素甲醚溶液对小苗的叶面喷雾2-3次,每次间隔8天。能够提高小苗的成活率。
附图说明
图1是本发明白及苗组培快繁方法实施例1中封膜刀的结构示意图;
图2是本发明白及苗组培快繁方法实施例1中封膜刀的侧剖图。
具体实施方式
下面通过具体实施方式对本发明作进一步详细的说明:
说明书附图中的附图标记包括:刀体1、刀把11、刃口12、蓄液腔2、槽口21、封堵条22、簧片23。
实施例1
白及苗组培快繁方法,包括如下步骤:
步骤1:培养土准备,将培养土放置在盘子内后,对其进行疏松后,放入蒸汽锅中进行杀菌消毒,然后在培养盘中用1/2MS培养基配方加入50ml椰子汁,50ml土豆汁,6g琼脂,配置成营养层,120度高温蒸汽灭菌10分钟后,待其自然冷却后,在培养基上均匀铺洒一层8mm厚的培养土,然后轻轻压实后刮平,然后在培养土表面挖一个种植坑,种植坑的坑底距离培养基4mm;
步骤2:外植体准备,选用在白及果荚呈褐色采集的新鲜的10000颗白及种子作为组培外植体,将白及种子放置到浓度为70%的乙醇溶液中浸泡5分钟,取出沥干后,用封膜刀将白及种子对剖;所述封膜刀(如附图1、图2所示)包括刀体1,刀体1的一端设有刀把11,刀体1的下侧设有刃口12,刀体1内设有蓄液腔2,刀体1上设有让蓄液腔2与外界连通的槽口21,槽口21位于蓄液腔2的下方,槽口21处设有封堵条22,刀体1的侧面上设有簧片23,簧片23的一侧与刀体1固定,簧片23的另一侧与封堵条22固定,簧片23的中间从刀体1的侧面凸起,凸起距离刃口121mm,封膜刀的蓄液腔2中装满了2,4-D溶液。
生长素类似物溶液,配置方法如下:选用2,4-D原粉1g,放入烧杯中,加入少量水,并滴入浓度为1%的酚酞溶液,然后在用浓度为5%氢氧化钠溶液滴定,每滴入一滴浓度为5%氢氧化钠溶液均要搅拌,直至搅拌后粉红色不消失,然后再加水至1000ml。这种方法配置的生长素类似物溶液中富含钠离子,能够哦促进白及的种子的生长。
步骤3:播种,用镊子夹取上述对剖后的种子,将种子的剖面向下放入种植坑内,撒上一层2cm厚的培养土,然后用薄膜覆盖在培养盘上,最后在薄膜上用针开设气孔;
步骤4:初苗培养,将培养盘放置在通风能够接触到阳光的室外,避免雨淋,控制培养土的湿度在60%-80%,28d-35d小苗即可萌发,待小苗萌发后撤去薄膜,50d-70d后营养盘内营养耗尽,重新按照步骤1制作新的培养盘,将小苗分盘继续培养;
步骤5:初炼苗,小苗在分盘继续培养80d-90d后,将培养盘中的培养土刮去表面一层,然后将大棚内的新鲜泥土直接洒在培养土表面,10-15d后,用1000倍大黄素甲醚溶液对小苗的叶面喷雾2-3次,每次间隔8天。
步骤6:自然炼苗,将小苗从培养盘中移栽到树林中培育30d-40d后,再用6%寡糖·链蛋白稀释1000倍进行叶面喷雾,然后继续培育30d-40d后,将小苗移植到种植土地自然生长;
步骤7:收获:3-5年后即可收获。
对比例1
与实施例1相比,不同之处仅在于,在步骤2中,未采用封膜刀对剖种子,采用的是普通的刀对剖,间隔3min后涂抹生长素。
对比例2
与实施例1相比,不同之处仅在于,步骤5不执行,在步骤4之后直接执行步骤6。
对比例3
与实施例1相比,不同之处仅在于,步骤6不执行,在步骤5之后,直接将小苗移植到自然环境中。
对比例4
采用现有的组培方式培植出的幼苗。现有的组培方式如下:(1)培养土的准备,(2)播种、喷水,(3)覆盖,(4)灌溉,(5)出棚培育,(6)喷洒叶面肥,(7)移植到自然环境。
记录上述实施例和所有对比例中的小苗在萌发率、幼苗萌发时间、小苗在各个步骤的成活率以及移植到种植地自然生长30d后的成活率。得到结果如表1所示:
表1
通过对比实施例1与对比例1,可得出结论,使用封膜刀对剖白及种子,能够有效的提高白及种子的萌发率,缩短白及种子的萌发时间,提高幼苗的成活率。
通过对比实施例1与对比例2,可得出结论,在本发明中,步骤5,初炼苗能够与步骤6配合,提高白及苗在自然条件下的成活率。
通过对比实施例1与对比例3,可得出结论,在本发明中,步骤6,能够与步骤5配合,提高白及苗在自然条件下的成活率。
通过对比实施例1与对比例4,可得出结论,本发明与现有技术相比,能够有效地提高白及组培苗成活率。
以上所述的仅是本发明的实施例,方案中公知的具体结构及特性等常识在此未作过多描述。应当指出,对于本领域的技术人员来说,在不脱离本发明结构的前提下,还可以作出若干变形和改进,这些也应该视为本发明的保护范围,这些都不会影响本发明实施的效果和专利的实用性。本申请要求的保护范围应当以其权利要求的内容为准,说明书中的具体实施方式等记载可以用于解释权利要求的内容。
Claims (6)
1.白及苗组培快繁方法,其特征在于,包括如下步骤:
步骤1:培养土准备,将培养土放置在盘子内,对其进行疏松后,放入蒸汽锅中进行杀菌消毒,然后在培养盘中用1/2MS培养基配方加入椰子汁,土豆汁,琼脂,配置成营养层,120℃高温蒸汽灭菌10分钟后,待其自然冷却后,在培养基上均匀铺洒一层培养土,然后轻轻压实后刮平,然后在培养土表面挖一个种植坑,种植坑的坑底距离培养基1-5mm;
步骤2:外植体准备,选用白及果荚呈褐色时采集的新鲜的白及种子作为组培外植体,将白及种子放置到浓度为70%的乙醇溶液中浸泡5分钟,取出沥干后,用封膜刀将白及种子对剖;所述封膜刀包括刀体,刀体的一端设有刀把,刀体的下侧设有刃口,刀体内设有蓄液腔,刀体上设有让蓄液腔与外界连通的槽口,槽口位于蓄液腔的下方,槽口处设有封堵条,刀体的侧面上设有簧片,簧片的一侧与刀体固定,簧片的另一侧与封堵条固定,簧片的中间从刀体的侧面凸起,凸起距离刃口1mm-2mm,封膜刀的蓄液腔中装满了生长素溶液;
步骤3:播种,用镊子夹取步骤2中对剖的种子,将种子的剖面向下放入种植坑内,撒上一层1-3cm厚的培养土,然后用薄膜覆盖在培养盘上,最后在薄膜上用针开设气孔;
步骤4:初苗培养,将培养盘放置在通风能够接触到阳光的室外,避免雨淋,控制培养土的湿度在60%-80%,28d-35d小苗即可萌发,待小苗萌发后撤去薄膜,50d-70d后营养盘内营养耗尽,重新按照步骤1制作新的培养盘,将小苗分盘继续培养;
步骤5:初炼苗,小苗在分盘继续培养80d-90d后,将培养盘中的培养土刮去表面一层,然后将大棚内的新鲜泥土直接洒在培养土表面,10-15d后,用1000倍大黄素甲醚溶液对小苗的叶面喷雾;
步骤6:自然炼苗,将小苗从培养盘中移栽到树林中培育30d-40d后,再用6%寡糖·链蛋白稀释1000倍进行叶面喷雾,然后继续培育30d-40d后,将小苗移植到种植土地自然生长;
步骤7:收获,3-5年后即可收获。
2.根据权利要求1所述的白及苗组培快繁方法,其特征在于,步骤1中,种植坑的坑底距离培养基2-4mm。
3.根据权利要求1所述的白及苗组培快繁方法,其特征在于,步骤1中,在培养基上均匀铺洒一层8-10mm厚的培养土。
4.根据权利要求1所述的白及苗组培快繁方法,其特征在于,步骤2中,储液腔内盛有生长素类似物溶液,该生长素类似物溶液配制方法如下如下:选用2,4-D原粉1g,放入烧杯中,加入少量水,并滴入浓度为1%的酚酞溶液,然后再用浓度为5%氢氧化钠溶液滴定,每滴入一滴浓度为5%氢氧化钠溶液均要搅拌,直至搅拌后粉红色不消失,然后再加水至1000ml。
5.根据权利要求1所述的白及苗组培快繁方法,其特征在于,步骤5中,用1000倍大黄素甲醚溶液对小苗的叶面喷雾2-3次。
6.根据权利要求1所述的白及苗组培快繁方法,其特征在于,步骤5中,用1000倍大黄素甲醚溶液对小苗的叶面喷雾2-3次,每次间隔8天。
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