CN105359983A - 一种铁皮石斛原球茎直播的方法 - Google Patents

一种铁皮石斛原球茎直播的方法 Download PDF

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吴玲玲
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Abstract

本发明公开了一种铁皮石斛原球茎直播的方法,该方法先将铁皮石斛种子在组培条件下生长成为原球茎,然后将组培后的原球茎在温室大棚中的苗床上直接直播育苗。本发明方法简单易行,先在组培条件下使种子快速萌发,后期在原球茎需要转接培养时,将其移栽在自然界中,既提高了发芽率,而且降低了生产成本,能在短时间内获得大量的铁皮石斛种苗,满足大面积、规模化铁皮石斛育苗的需要,具有生产与经济上的双重意义。

Description

一种铁皮石斛原球茎直播的方法
技术领域
本发明属于药用植物人工种植技术领域,具体涉及一种药用植物铁皮石斛的原球茎直播繁育方法。
背景技术
铁皮石斛(DendrobiumofficinaleKimuraetMigo)为兰科石斛属多年生草本植物,主要分布于云南、浙江等地,为一种珍稀的中药材。因其具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功效,位列“中华九大仙草之首”,并被录入《2015版药典》。
铁皮石斛以其干燥茎入药,其主要药用成分为多糖、生物碱、氨基酸、挥发油及其他微量元素。现代药理学表明,铁皮石斛具有滋阴养胃、调节免疫、抗氧化、降血糖及抗疲劳的作用,鉴于其特殊的药理药效作用,使其野生资源受到了掠夺式开采,因而其野生资源已濒临灭绝。
铁皮石斛果荚内存有种子1万粒左右,但是其种子没有胚乳,自然条件下萌发率低甚至不萌发,因此,解决铁皮石斛资源短缺主要还是通过组织培养的方式。目前,有关铁皮石斛的组织培养技术成熟,均已实现工厂化生产,但是其要求无菌、恒温、恒湿等环境,造成其培育成本较高。有关兰科植物的繁育技术,部分可以通过有性繁殖的方式在自然条件下直播成功,其大大降低了生产成本,但是从种子到种苗所需生长周期较长,一般需要10个月以上的时间。
发明内容
本发明所要解决的技术问题在于克服现有铁皮石斛种植存在的问题,提供一种生产成本低、发芽率高且能在短时间内获得大量铁皮石斛种苗的方法。
解决上述技术问题所采用的技术方案由下述步骤组成:
1、铁皮石斛种子萌发
选取成熟的铁皮石斛果荚,依次用灭菌水、升汞、体积分数为75%的乙醇水溶液消毒,然后剥开果荚取出铁皮石斛种子,将种子均匀播撒在组培瓶内的铁皮石斛培养基上,在温度为25±2℃、光照强度2000~3000Lx、光照12h/12h的组织培养室培养100~120天,使种子变绿膨大并萌发成原球茎,再将组培瓶移至温室苗床上炼苗处理7~10天,将原球茎取出,用水将上面附着的培养基冲洗干净。
2、苗床处理
选择智能温室的苗床,苗床高度为1~1.5m,苗床每隔2米用木棍隔档,将塑料纸平铺在苗床上,塑料纸的四周固定在苗床边缘,确保苗床上能保持2cm高的水。
3、育苗基质处理
将椰糠、发酵过的松树皮粉、多菌灵按照体积比为150~250:80~150:1混匀,配制成育苗基质,将配好的育苗基质装入底部有孔的穴盘中,装至穴盘深度的2/3处,压平压实,将穴盘放在苗床上,给育苗基质浇水,使育苗基质彻底浇透。
4、原球茎播种
将步骤1炼苗处理后的原球茎作为种,按照行距3~4cm、株距2~3cm,用镊子轻轻夹至育苗基质表面,播种完后用保鲜膜覆盖穴盘,控制大棚内的温度为20~25℃、相对湿度为40%~60%,并保持大棚内通风,播种一周后每隔3~5天由穴盘与穴盘之间的空隙浇水一次。
5、追肥管理
待铁皮石斛球茎长全两片真叶后,揭去保鲜膜,每隔一周分别喷洒兰宝营养液和磷酸二胺水溶液各1次。
上述步骤1中,所述的铁皮石斛培养基是在MS培养基中添加多效唑、萘乙酸、香蕉汁,用蒸馏水定容,然后用0.1mol/L的NaOH水溶液调节pH值至5.8~6.0,121℃灭菌20分钟,配制成铁皮石斛培养基,其中所述的香蕉汁是将75g香蕉在榨汁机中加100mL水打匀制得,铁皮石斛培养基中多效唑的浓度为0.5~1.5mg/L、香蕉浓度为75~120g/L、萘乙酸浓度为0.3~0.8mg/L。
上述步骤3中,优选将椰糠、发酵过的松树皮粉、多菌灵按照体积比为200:100:1混匀,配制成育苗基质。
铁皮石斛组培条件非常成熟,在种子播撒到组培瓶中120天左右,种子可以萌发成带新芽的原球茎,本发明在此阶段通过将原球茎人工驯化后,结合成熟的温室直播体系,进行原球茎,既提高了发芽率,而且降低了生产成本,能在短时间内获得大量的铁皮石斛种苗,满足大面积、规模化育苗的需要,具有生产与经济上的双重意义。
附图说明
图1是实施例1中铁皮石斛原球茎直播60天的照片。
图2是实施例2中铁皮石斛原球茎直播60天的照片。
图3是实施例3中铁皮石斛原球茎直播60天的照片。
具体实施方式
下面结合附图和实施例对本发明进一步详细说明,但本发明的保护范围不仅限于这些实施例。
实施例1
1、铁皮石斛种子萌发
选取成熟的铁皮石斛果荚,依次用灭菌水、升汞、体积分数为75%的乙醇水溶液消毒,然后剥开果荚取出铁皮石斛种子,将种子均匀播撒在组培瓶内的铁皮石斛培养基上,在温度为25±2℃、光照强度2500Lx、光照12h/12h的组织培养室培养120天,使种子变绿膨大并萌发成原球茎,部分原球茎上会产生根和芽,再将组培瓶移至温室苗床上炼苗处理10天,轻轻将原球茎取出,用水将上面附着的培养基冲洗干净。其中铁皮石斛培养基是在MS培养基中添加多效唑、萘乙酸、香蕉汁,用蒸馏水定容,然后用0.1mol/L的NaOH水溶液调节pH值至5.8~6.0,121℃灭菌20分钟,配制成铁皮石斛培养基,所述的香蕉汁是将75g香蕉在榨汁机中加100mL水打匀制得,铁皮石斛培养基中多效唑的浓度为1.0mg/L、香蕉浓度为100g/L、萘乙酸浓度为0.5mg/L。
2、苗床处理
选择智能温室的苗床,苗床高度为1.5m,苗床每隔2米用宽度为6cm的方形木棍隔档,将塑料纸平铺在苗床上,塑料纸的四周固定在苗床边缘,确保苗床上能保持2cm高的水。
3、育苗基质处理
将椰糠、发酵过的松树皮粉、多菌灵按照体积比为200:100:1混匀,配制成育苗基质,将配好的育苗基质装入底部有孔的穴盘中,装至穴盘深度的2/3处,压平压实,将穴盘放在苗床上,给育苗基质浇水,使育苗基质彻底浇透。
4、原球茎播种
将步骤1炼苗处理后的原球茎作为种,按照行距3cm、株距2cm,用镊子轻轻夹至育苗基质表面,播种完后用保鲜膜覆盖穴盘,控制大棚内的温度为20~25℃、相对湿度为40%~60%,并保持大棚内通风,播种一周后每隔5天由穴盘与穴盘之间的空隙浇水一次。
5、追肥管理
播种15天后,铁皮石斛球茎长全两片真叶后,出苗率在95%以上,揭去保鲜膜,每隔一周分别喷洒兰宝营养液和磷酸二胺水溶液各1次。播种30天后,铁皮石斛球茎长出两片叶子,由图1可见,播种60天后,铁皮石斛植株长出3片叶子,植株长势均匀,植株高度普遍超过2cm,且播种180天后,植株高度普遍可以达到8cm以上。
实施例2
1、铁皮石斛种子萌发
选取成熟的铁皮石斛果荚,依次用灭菌水、升汞、体积分数为75%的乙醇水溶液消毒,然后剥开果荚取出铁皮石斛种子,将种子均匀播撒在组培瓶内的铁皮石斛培养基上,在温度为25±2℃、光照强度2000Lx、光照12h/12h的组织培养室培养120天,使种子变绿膨大并萌发成原球茎,部分原球茎上会产生根和芽,再将组培瓶移至温室苗床上炼苗处理10天,轻轻将原球茎取出,用水将上面附着的培养基冲洗干净。其中铁皮石斛培养基是在MS培养基中添加多效唑、萘乙酸、香蕉汁,用蒸馏水定容,然后用0.1mol/L的NaOH水溶液调节pH值至5.8~6.0,121℃灭菌20分钟,配制成铁皮石斛培养基,所述的香蕉汁是将75g香蕉在榨汁机中加100mL水打匀制得,铁皮石斛培养基中多效唑的浓度为0.5mg/L、香蕉浓度为120g/L、萘乙酸浓度为0.8mg/L。
2、苗床处理
选择智能温室的苗床,苗床高度为1.5m,苗床每隔2米用宽度为6cm的方形木棍隔档,将塑料纸平铺在苗床上,塑料纸的四周固定在苗床边缘,确保苗床上能保持2cm高的水。
3、育苗基质处理
将椰糠、发酵过的松树皮粉、多菌灵按照体积比为150:150:1混匀,配制成育苗基质,将配好的育苗基质装入底部有孔的穴盘中,装至穴盘深度的2/3处,压平压实,将穴盘放在苗床上,给育苗基质浇水,使育苗基质彻底浇透。
4、原球茎播种
将步骤1炼苗处理后的原球茎作为种,按照行距3cm、株距2cm,用镊子轻轻夹至育苗基质表面,播种完后用保鲜膜覆盖穴盘,控制大棚内的温度为20~25℃、相对湿度为40%~60%,并保持大棚内通风,播种一周后每隔5天由穴盘与穴盘之间的空隙浇水一次。
5、追肥管理
播种15天后,铁皮石斛球茎长全两片真叶后,出苗率在85%以上,揭去保鲜膜,每隔一周分别喷洒兰宝营养液和磷酸二胺水溶液各1次。播种30天后,铁皮石斛球茎长出两片叶子,由图2可见,播种60天后,铁皮石斛植株长出3片叶子,植株长势较均匀,部分植株高度超过2cm,且播种180天后,植株高度普遍可以达到7cm以上。
实施例3
1、铁皮石斛种子萌发
选取成熟的铁皮石斛果荚,依次用灭菌水、升汞、体积分数为75%的乙醇水溶液消毒,然后剥开果荚取出铁皮石斛种子,将种子均匀播撒在组培瓶内的铁皮石斛培养基上,在温度为25±2℃、光照强度2500Lx、光照12h/12h的组织培养室培养120天,使种子变绿膨大并萌发成原球茎,部分原球茎上会产生根和芽,再将组培瓶移至温室苗床上炼苗处理10天,轻轻将原球茎取出,用水将上面附着的培养基冲洗干净。其中铁皮石斛培养基是在MS培养基中添加多效唑、萘乙酸、香蕉汁,用蒸馏水定容,然后用0.1mol/L的NaOH水溶液调节pH值至5.8~6.0,121℃灭菌20分钟,配制成铁皮石斛培养基,其中所述的香蕉汁是将75g香蕉在榨汁机中加100mL水打匀制得,铁皮石斛培养基中多效唑的浓度为1.5mg/L、香蕉浓度为75g/L、萘乙酸浓度为0.3mg/L。
2、苗床处理
选择智能温室的苗床,苗床高度为1.5m,苗床每隔2米用宽度为6cm的方形木棍隔档,将塑料纸平铺在苗床上,塑料纸的四周固定在苗床边缘,确保苗床上能保持2cm高的水。
3、育苗基质处理
将椰糠、发酵过的松树皮粉、多菌灵按照体积比为250:80:1混匀,配制成育苗基质,将配好的育苗基质装入底部有孔的穴盘中,装至穴盘深度的2/3处,压平压实,将穴盘放在苗床上,给育苗基质浇水,使育苗基质彻底浇透。
4、原球茎播种
将步骤1炼苗处理后的原球茎作为种,按照行距3cm、株距2cm,用镊子轻轻夹至育苗基质表面,播种完后用保鲜膜覆盖穴盘,控制大棚内的温度为20~25℃、相对湿度为40%~60%,并保持大棚内通风,播种一周后每隔5天由穴盘与穴盘之间的空隙浇水一次。
5、追肥管理
播种15天后,铁皮石斛球茎长全两片真叶后,出苗率在80%以上,揭去保鲜膜,每隔一周分别喷洒兰宝营养液和磷酸二胺水溶液各1次。播种30天后,铁皮石斛球茎长出两片叶子,由图3可见,播种60天后,铁皮石斛植株长出2片叶子,极少部分植株高度超过2cm,且播种180天后,部分植株高度可以达到7cm以上。

Claims (3)

1.一种铁皮石斛原球茎直播的方法,其特征在于它由下述步骤组成:
(1)铁皮石斛种子萌发
选取成熟的铁皮石斛果荚,依次用灭菌水、升汞、体积分数为75%的乙醇水溶液消毒,然后剥开果荚取出铁皮石斛种子,将种子均匀播撒在组培瓶内的铁皮石斛培养基上,在温度为25±2℃、光照强度2000~3000Lx、光照12h/12h的组织培养室培养100~120天,使种子变绿膨大并萌发成原球茎,再将组培瓶移至温室苗床上炼苗处理7~10天,将原球茎取出,用水将上面附着的培养基冲洗干净;
(2)苗床处理
选择智能温室的苗床,苗床高度为1~1.5m,苗床每隔2米用木棍隔档,将塑料纸平铺在苗床上,塑料纸的四周固定在苗床边缘,确保苗床上能保持2cm高的水;
(3)育苗基质处理
将椰糠、发酵过的松树皮粉、多菌灵按照体积比为150~250:80~150:1混匀,配制成育苗基质,将配好的育苗基质装入底部有孔的穴盘中,装至穴盘深度的2/3处,压平压实,将穴盘放在苗床上,给育苗基质浇水,使育苗基质彻底浇透;
(4)原球茎播种
将步骤(1)炼苗处理后的原球茎作为种,按照行距3~4cm、株距2~3cm用镊子轻轻夹至育苗基质表面,播种完后用保鲜膜覆盖穴盘,控制大棚内的温度为20~25℃、相对湿度为40%~60%,并保持大棚内通风,播种一周后每隔3~5天由穴盘与穴盘之间的空隙浇水一次;
(5)追肥管理
待铁皮石斛球茎长全两片真叶,揭去保鲜膜,每隔一周分别喷洒兰宝营养液和磷酸二胺水溶液各1次。
2.根据权利要求1所述的铁皮石斛原球茎直播的方法,其特征在于:所述的铁皮石斛培养基是在MS培养基中添加多效唑、萘乙酸、香蕉汁,用蒸馏水定容,然后用0.1mol/L的NaOH水溶液调节pH值至5.8~6.0,121℃灭菌20分钟,配制成铁皮石斛培养基,其中所述的香蕉汁是将75g香蕉在榨汁机中加100mL水打匀制得,铁皮石斛培养基中多效唑的浓度为0.5~1.5mg/L、香蕉浓度为75~120g/L、萘乙酸浓度为0.3~0.8mg/L。
3.根据权利要求1所述的铁皮石斛原球茎直播的方法,其特征在于:所述步骤(3)中,将椰糠、发酵过的松树皮粉、多菌灵按照体积比为200:100:1混匀,配制成育苗基质。
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