CN106497771A - 一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片 - Google Patents

一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片 Download PDF

Info

Publication number
CN106497771A
CN106497771A CN201610918868.9A CN201610918868A CN106497771A CN 106497771 A CN106497771 A CN 106497771A CN 201610918868 A CN201610918868 A CN 201610918868A CN 106497771 A CN106497771 A CN 106497771A
Authority
CN
China
Prior art keywords
micro
valve
cell
pdms
valve group
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN201610918868.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106497771B (zh
Inventor
孟宪生
索轶平
包永睿
王帅
李天娇
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zhejiang Hongrui Medical Technology Co ltd
Original Assignee
Liaoning University of Traditional Chinese Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Liaoning University of Traditional Chinese Medicine filed Critical Liaoning University of Traditional Chinese Medicine
Priority to CN201610918868.9A priority Critical patent/CN106497771B/zh
Publication of CN106497771A publication Critical patent/CN106497771A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106497771B publication Critical patent/CN106497771B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/5005—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells
    • G01N33/5008—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving human or animal cells for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/50273—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by the means or forces applied to move the fluids
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502738—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by integrated valves
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L3/00—Containers or dishes for laboratory use, e.g. laboratory glassware; Droppers
    • B01L3/50—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes
    • B01L3/502—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures
    • B01L3/5027—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip
    • B01L3/502753—Containers for the purpose of retaining a material to be analysed, e.g. test tubes with fluid transport, e.g. in multi-compartment structures by integrated microfluidic structures, i.e. dimensions of channels and chambers are such that surface tension forces are important, e.g. lab-on-a-chip characterised by bulk separation arrangements on lab-on-a-chip devices, e.g. for filtration or centrifugation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12M—APPARATUS FOR ENZYMOLOGY OR MICROBIOLOGY; APPARATUS FOR CULTURING MICROORGANISMS FOR PRODUCING BIOMASS, FOR GROWING CELLS OR FOR OBTAINING FERMENTATION OR METABOLIC PRODUCTS, i.e. BIOREACTORS OR FERMENTERS
    • C12M23/00—Constructional details, e.g. recesses, hinges
    • C12M23/02—Form or structure of the vessel
    • C12M23/16—Microfluidic devices; Capillary tubes
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2200/00—Solutions for specific problems relating to chemical or physical laboratory apparatus
    • B01L2200/06—Fluid handling related problems
    • B01L2200/0647—Handling flowable solids, e.g. microscopic beads, cells, particles
    • B01L2200/0668—Trapping microscopic beads
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2300/00—Additional constructional details
    • B01L2300/08—Geometry, shape and general structure
    • B01L2300/0861—Configuration of multiple channels and/or chambers in a single devices
    • B01L2300/0883—Serpentine channels
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00—Moving or stopping fluids
    • B01L2400/04—Moving fluids with specific forces or mechanical means
    • B01L2400/0475—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific mechanical means and fluid pressure
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00—Moving or stopping fluids
    • B01L2400/04—Moving fluids with specific forces or mechanical means
    • B01L2400/0475—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific mechanical means and fluid pressure
    • B01L2400/0487—Moving fluids with specific forces or mechanical means specific mechanical means and fluid pressure fluid pressure, pneumatics
    • B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
    • B01L—CHEMICAL OR PHYSICAL LABORATORY APPARATUS FOR GENERAL USE
    • B01L2400/00—Moving or stopping fluids
    • B01L2400/06—Valves, specific forms thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2503/00—Use of cells in diagnostics
    • C12N2503/02—Drug screening
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2500/00—Screening for compounds of potential therapeutic value
    • G01N2500/10—Screening for compounds of potential therapeutic value involving cells

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Clinical Laboratory Science (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Sustainable Development (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)

Abstract

用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片涉及微流控芯片技术领域，本发明提供一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，由上层的PDMS微阀控制通道层，中层的PDMS流体通道层和下层起支撑和细胞贴附作用的玻璃基底层构成；PDMS微阀控制通道层包括第一微阀组和第二微阀组，PDMS流体通道层包括阵列式细胞培养区，PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层经热键合后再与玻璃基底层等离子键合形成一体。阵列式细胞培养区由若干个培养单元和多级分支流体进样通道构成，第一微阀组为联动微阀，第二微阀组为若干个用于控制细胞腔室进样口与S形弯曲通道的通断的独立微阀。

Description

一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片
技术领域
本发明涉及微流控芯片技术领域，尤其涉及一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片。
背景技术
药物筛选（drug screening）是从天然或合成的化合物中筛选出高效的新药或先导化合物，对其进行生物活性和药理作用检测，并根据检测结果评价某一物质的药用前景，是新药研究的最初过程和关键步骤。但是传统的药物筛选过程复杂，效率低下，且成本昂贵，不能适应大规模样品的同时筛选，因此需要开发效率更高的药物筛选方法。近年来，随着细胞生物学技术的迅速发展，基于细胞水平的高通量、高内涵筛选为新药筛选提供了新的信息和机会，细胞水平药物筛选具有微量化、超高通量化、均质检测的优点，并可进行多指标、多靶点及多通道检测。而微流控芯片凭借其样品及试剂消耗少、分析速度快、效率高、操作模式灵活多变、集成化优势明显等特点，为细胞水平高通量及高内涵药物筛选提供了一个优秀的实验技术平台。微流控芯片细胞水平筛选方法的出现，给药物发现领域带来了新的生机，使得药物发现进入到了一个更深的层次。
目前，将微流控芯片技术应用于药物筛选领域的报道已有不少，例如Wu 等在文献（Wu J,Wheeldon I,Guo Y,et al.A sandwiched microarray platform for benchtopcell-based high throughputscreening[J].Biomaterials, 2011,32(3): 841-848.）中设计了一种具有“三明治”夹层结构的、细胞水平的阵列式高通量筛选芯片，通过荧光检测药物与乳腺癌细胞（MCF-7）的相互作用，筛选出潜在的抗肿瘤药物，实验采用9-羟基喜树碱进行实验，证明其有效可行，该方法为药物活性成分的筛选提供了一种快速、低成本的途径。但就目前的技术发展来说，一种芯片实现多种功能的筛选依然是药物高通量筛选的瓶颈，成为一大难题而长期无法突破。因此，如何简易高效地进行高通量药物筛选及药物对细胞特异性的筛选仍是亟待解决的问题。
发明内容
本发明针对上述问题，弥补现有技术的不足，提供一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片。其可实现多种细胞的同时筛选实验，还可实现多种药物的同时筛选实验。
为实现本发明的上述目的，本发明提供一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，由上层的PDMS微阀控制通道层，中层的PDMS流体通道层和下层起支撑和细胞贴附作用的玻璃基底层构成；其特征在于，所述PDMS微阀控制通道层包括第一微阀组和第二微阀组，所述PDMS流体通道层包括阵列式细胞培养区；所述PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层经热键合后再与玻璃基底层等离子键合形成一体。
所述阵列式细胞培养区由若干个培养单元和多级分支流体进样通道构成，所述培养单元包括细胞培养单元、S形弯曲通道、细胞腔室进样口、S形混合器和废液口；所述细胞培养单元的一端通过S形弯曲通道与细胞腔室进样口相连通，细胞培养单元的另一端通过S形混合器与废液口相连通；所述细胞培养单元由两列细胞培养腔室并联构成，每列细胞培养腔室由若干个细胞培养腔相互串联组成一列；在S形弯曲通道与细胞培养单元的连接处由微通道逐级互相连接，最终连接成一个多级分支流体进样通道，该多级分支流体进样通道的末端作为培养通道进样口。
所述第一微阀组为联动微阀，包含若干个用于控制与细胞培养单元相连通的多级分支流体进样通道的通断的联动微阀控制处，该联动微阀控制处由联动微阀阀通道逐级互相连接，最终连接为一个微阀输注孔，该联动微阀控制处的数量与所述细胞培养单元的数量相同；所述第二微阀组为若干个用于控制细胞腔室进样口与S形弯曲通道的通断的独立微阀；该独立微阀的数量与所述细胞培养单元的数量相同；所述第一微阀组与第二微阀组的结构均是由PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层的PDMS薄膜构成密闭的空腔，并分别与压力施加装置相连。
作为本发明的一种优选方案，所述压力施加装置为注射器、微量注射泵或气动微阀微泵控制装置。
作为本发明的另一种优选方案，所述独立微阀位于PDMS微阀控制通道层、细胞腔室进样口与S形弯曲通道的连接处所对应的纵向相对应的位置且不与该连接处相连通。
作为本发明的另一种优选方案，所述联动微阀控制处位于PDMS微阀控制通道层、组成多级分支流体进样通道的微通道的纵向相对应的位置，联动微阀控制处与所述微通道不连通。
作为本发明的另一种优选方案，所述PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层的预聚物与固化剂的比例不同，经加热固化形成一整体后，再与玻璃基底层通过不可逆键合形成完整的芯片。
作为本发明的另一种优选方案，所述S形混合器采用S形弯曲通道，宽度为90-210μm。
作为本发明的另一种优选方案，所述第一微阀组与第二微阀组均为气动控制微阀组，第一微阀组的联动微阀控制处截面为圆形或椭圆形，尺寸为(800-1200)×(800-1200)μm，第二微阀组包括独立微阀阀通道和独立微阀控制处，联动微阀阀通道和独立微阀阀通道宽度相同，均为100-300μm。
作为本发明的另一种优选方案，所述S形弯曲通道宽度为100-200μm。
作为本发明的另一种优选方案，所述第一微阀组的高度为60-150μm，第一微阀组的联动微阀控制处的两两间距为3000-3440μm，所述第二微阀组的高度为60-150μm，第二微阀组的独立微阀之间的间距3880-4220μm。
作为本发明的另一种优选方案，所述细胞培养腔截面为圆形或椭圆形，其尺寸为(800-1200)×(800-1200)μm，细胞培养腔的高度为60-150μm，所述废液口、细胞腔室进样口及培养通道进样口的截面相同，均为圆形或椭圆形，尺寸为(900-1100)×(900-1100)μm。
与现有技术相比本发明有益效果。
本发明具有操作灵活简单、易于集成、实验成功率高、结果稳定、制作成本低及多功能等特点，可实现芯片里一种特定浓度药物对多种细胞的活性筛选，多种药物同时作用于一种细胞的活性筛选，上游外接圣诞树模型还可实现不同浓度的药物对不同种类细胞的筛选，双列细胞培养腔室的应用，不仅增大了样本量，同时降低了细胞染菌的可能性，从而提高了实验成功率和结果的准确性，具有微型化、高通量、低成本、低消耗、试验数据准确可靠的特点。具有较高的潜在生物学研究价值与经济价值。避免了传统96孔板的繁琐操作，可以为基于微流控芯片的实验提供较好的技术支撑，有望为以后高通量药物筛选奠定一定的前期实验基础，并且为新药开发与利用提供一个崭新的平台。
附图说明
下面结合附图和具体实施方式对本发明做进一步说明。本发明保护范围不仅局限于以下内容的表述。
图1是本发明的多功能微流控芯片总体结构示意图。
图2是本发明的多功能微流控芯片第一微阀组示意图。
图3是本发明的多功能微流控芯片第二微阀组示意图。
图4是本发明上层PDMS微阀控制通道层及中层的PDMS流体通道层键合后示意图。
图5是LIVE/DEAD 染色后荧光显微镜下培养24h SMMC-7721等４种细胞的形态图。
图6为顺铂对SMMC-7721等4种细胞Hoechst33342、PI双染色后荧光显微镜下的SMMC-7721等4种细胞凋亡坏死形态图。
图7为不同种类抗肿瘤西药作用下Hoechst33342、PI双染色后荧光显微镜下的肝肿瘤细胞SMMC-7721凋亡坏死形态图。
图中，1为微阀输注孔、2为细胞腔室进样口、3为独立微阀、4为S形弯曲通道、5为细胞培养腔、6为细胞培养腔室、7为细胞培养单元、8为S形混合器、9为废液口、10为培养通道进样口、11为多级分支流体进样通道、12为联动微阀控制处、13为联动微阀阀通道、14为第一微阀组、15为第二微阀组、16为独立微阀控制处、17为独立微阀阀通道。
具体实施方式
如图1- 4所示，本发明由上层的PDMS微阀控制通道层，中层的PDMS流体通道层和下层起支撑和细胞贴附作用的玻璃基底层构成；所述PDMS微阀控制通道层包括第一微阀组14和第二微阀组15，所述PDMS流体通道层包括阵列式细胞培养区；所述PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层经热键合后再与玻璃基底层等离子键合形成一体。
所述阵列式细胞培养区由若干个培养单元和多级分支流体进样通道11构成，所述培养单元包括细胞培养单元7、S形弯曲通道4、细胞腔室进样口2、S形混合器8和废液口9；所述细胞培养单元7的一端通过S形弯曲通道4与细胞腔室进样口2相连通，细胞培养单元7的另一端通过S形混合器8与废液口9相连通；所述细胞培养单元7由两列细胞培养腔室6并联构成，每列细胞培养腔室6由若干个细胞培养腔5相互串联组成一列；在S形弯曲通道4与细胞培养单元7的连接处由微通道逐级互相连接，最终连接成一个多级分支流体进样通道11，该多级分支流体进样通道11的末端作为培养通道进样口10。
所述第一微阀组14为联动微阀，包含若干个联动微阀控制处12，该联动微阀控制处12用于控制与细胞培养单元7相连通的多级分支流体进样通道11的通断，该联动微阀控制处12由联动微阀阀通道13逐级互相连接，最终连接为一个微阀输注孔1，该联动微阀控制处12的数量与所述细胞培养单元7的数量相同。
所述第二微阀组15为若干个独立微阀3，该独立微阀3用于控制细胞腔室进样口2与S形弯曲通道4之间的通断；该独立微阀3的数量与所述细胞培养单元7的数量相同。
所述第一微阀组14与第二微阀组15的结构均是由PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层的PDMS薄膜构成密闭的空腔，并分别与压力施加装置相连。
本发明所述压力施加装置为注射器、微量注射泵或气动微阀微泵控制装置。也可以是常规微流控气动微阀，包括装有高压空气、高压氮气的高压气瓶，压力调节器等。使用时，将注射器连接到微量注射泵上，注射器内部吸入空气后经注射泵注入芯片内。
本发明所述独立微阀3用于控制细胞腔室进样口2与S形弯曲通道4的通断，其位于PDMS微阀控制通道层、细胞腔室进样口2与S形弯曲通道4的连接处所对应的纵向相对应的位置且不与该连接处相连通。
本发明所述联动微阀控制处12位于PDMS微阀控制通道层、组成多级分支流体进样通道11的微通道的纵向相对应的位置，且该微通道是与细胞培养单元7相连的多级分支流体进样通道11，联动微阀控制处12与所述微通道不连通。
本发明所述PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层的预聚物与固化剂的比例不同，经加热固化形成一整体后，再与玻璃基底层通过不可逆键合形成完整的芯片。
本发明所述S形混合器8采用S形弯曲通道4，宽度为90-210μm。
本发明所述第一微阀组14与第二微阀组15均为气动控制微阀组，第一微阀组14的联动微阀控制处12的截面为圆形或椭圆形，尺寸为(800-1200)×(800-1200)μm，第二微阀组15包括独立微阀3阀通道和独立微阀3控制处，联动微阀阀通道13和独立微阀阀通道17宽度相同，均为100-300μm。
本发明所述S形弯曲通道4宽度为100-200μm。
本发明所述第一微阀组14的高度为60-150μm，第一微阀组14的联动微阀控制处12的两两间距为3000-3440μm，所述第二微阀组15的高度为60-150μm，第二微阀组15的独立微阀3之间的间距3880-4220μm。
本发明所述细胞培养腔5截面为圆形或椭圆形，其尺寸为(800-1200)×(800-1200)μm，细胞培养腔5的高度为60-150μm，所述废液口9、细胞腔室进样口2及培养通道进样口10的截面相同，均为圆形或椭圆形，尺寸为（900-1100）×（900-1100）μm。
所述第一微阀组14可实现联动控制，第二微阀组15可实现独立控制，微阀可保持良好的关闭状态，无漏液现象，且回弹效果好可实现对流体的操控，用于药物-细胞的筛选。
所述双列细胞培养腔室6的应用，不仅增大样本量，同时降低了细胞染菌的可能性，从而提高了实验成功率和结果的准确性。
本实施例提供三种用于多种药物-细胞同时筛选的多功能微流控芯片的具体应用方法，具体如下。
应用方法一包含以下步骤。
步骤1 外接实验室自制的气动微泵微阀控制装置，关闭第一微阀组14，打开第二微阀组15，使用精密注射泵，以0.2μL/min的速度，将调整好密度的SMMC-7721等多种肿瘤细胞分别由细胞腔室进样口2注入，放置培养箱中培养约4h。
步骤2 约4h细胞贴壁后，关闭第二微阀组15，打开第一微阀组14，使用精密注射泵，以0.2μL/min的速度,由下方多级分支培养通道的培养通道进样口10注入RPMI-1640培养液，实时动态培养24h。
步骤3 培养24h后，用培养液配置成24.04μg/mL的顺铂待测溶液，经精密注射泵，以0.2μL/min的速度,由下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入，放置培养箱中进行药物对细胞的刺激。
步骤4 药物刺激完毕，由下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入PBS缓冲液，对细胞进行清洗。
步骤5在所述下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入LIVE/DEAD染液，使用精密注射泵施加驱动力，以0.2μL/min对细胞进行染色。
步骤6 倒置荧光显微镜下，进行细胞凋亡坏死检测，分析特定浓度药物对不同种类细胞的活性筛选。
应用方法二包含以下步骤。
步骤1 外接实验室自制的气动微泵微阀控制装置，打开第一微阀组14，关闭第二微阀组15，使用精密注射泵，以0.2μL/min的速度，将调整好密度的SMMC-7721肿瘤细胞由下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入，放置培养箱中培养约4h。
步骤2 约4h细胞贴壁后，使用精密注射泵，以0.2μL/min的速度,将含10%胎牛血清的RPMI-1640培养液由多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入，放置培养箱中实时培养24h。
步骤3 培养24h后，关闭第一微阀组14，打开第二微阀组15，使用精密注射泵，以0.2μL/min的速度,将配置好的多种不同种类的药液分别由细胞腔室进样口2注入，放置培养箱中进行药物对细胞的刺激。
步骤4 药物刺激完毕，由下方多级分支流体进样通道的培养通道进样口10注入PBS缓冲液，对细胞进行清洗。
步骤5在所述下方多级分支流体进样通道的培养通道进样口10注入LIVE/DEAD 染液，使用精密注射泵施加驱动力，以0.2μL/min对细胞进行染色。
步骤6 倒置荧光显微镜下，进行细胞凋亡坏死检测，分析不同种类药物对特定细胞的活性筛选。
应用方法三包含以下步骤。
步骤1 外接实验室自制的气动微泵微阀控制装置，关闭第一微阀组14，打开第二微阀组15，使用精密注射泵，以0.2μL/min的速度，将调整好密度的SMMC-7721等多种肿瘤细胞分别由细胞腔室进样口2注入，放置培养箱中培养约4h。
步骤2 约4h细胞贴壁后，打开第一微阀组14，关闭第二微阀组15，使用精密注射泵，以0.2μL/min的速度,由下方多级分支培养通道的培养通道进样口10注入RPMI-1640培养液，实时动态培养24h。
步骤3 培养24h后，关闭第一微阀组14，打开第二微阀组15，通过聚四氟乙烯管，上游外接经典“圣诞树”浓度梯度生成结构，由注射泵以0.2μL/min注入，自动生成八种不同的浓度梯度，放置培养箱中进行药物对细胞的刺激。
步骤4 药物刺激完毕，打开第一微阀组14，关闭第二微阀组15，使用精密注射泵，以0.2μl/min的速度,由下方多级分支流体通道11的培养通道进样口10注入PBS缓冲液，对细胞进行清洗。
步骤5在所述下方培养通道进样口10注入LIVE/DEAD 染液，使用精密注射泵施加驱动力，以0.2μL/min对细胞进行染色。
步骤6 倒置荧光显微镜下，进行细胞凋亡坏死检测，分析不同浓度梯度药物对不同种类细胞的活性筛选。
为进一步验证本发明的实用性，提供以下案例。
实施例一。
1、材料与仪器。
SU-8 2075负性光刻胶；Sylgard184型聚二甲基硅氧烷（PDMS）；固化剂（美国DowCorning公司）；JKG-2A 型光刻机（上海学泽光学机械有限公司）；HPDC-32G-2型等离子清洗机（美国Harrick Plasma公司）；匀胶机（SC-1B型，北京创世威纳科技有限公司）；真空干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；精密注射泵（LSP04-1A，保定兰格公司）；Nikon ECLIPSETI倒置荧光显微镜（日本Nikon公司）。
2、芯片里细胞培养。
（1）芯片预处理：制作好的芯片先用无菌三级水润洗三遍，之后注入75%乙醇，清洗三遍，然后用无菌水洗三遍，烘干，紫外光照射30min杀菌，之后通入0.1mg•L-1的多聚L-赖氨酸（PLL），于37℃下孵育1h，对芯片的细胞培养腔5室进行包被处理，提高细胞的贴壁率，最后用无菌水将剩余PLL 冲掉，烘干备用。
（2）芯片细胞培养及活力检测：将对数生长期的人肝肿瘤SMMC-7721细胞、正常人肝细胞L-02、正常大鼠肾细胞NRK、肺癌细胞A549用含10%灭活胎牛血清的RPMI-1640培养液配制成密度为5×105个/cm 2的悬液，外接实验室自制的气动微泵微阀控制装置，关闭第一微阀组14，打开第二微阀组15，将调整好密度的SMMC-7721等4种细胞分别由细胞腔室进样口2注入，之后将芯片放入细胞培养箱中静置，约3-3.5h 细胞贴壁后，打开第一微阀组14，关闭第二微阀组15，使用精密注射泵以0.2μL•min-1的流速从下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入RPMI-1640培养液，实时动态培养24h后,在所述下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入LIVE/DEAD 染液，使用精密注射泵施加驱动力，以0.2μL/min对细胞进行避光染色30min，然后继续用PBS清洗细胞3次，使用倒置荧光显微镜进行拍照，并结合图像分析软件IPP 检测细胞的存活率。如图5所示，结果显示芯片中培养的细胞活力良好，细胞存活率能达到95%以上。
3、芯片里细胞凋亡坏死研究。
将肝肿瘤SMMC-7721细胞、正常人肝细胞L-02、正常大鼠肾细胞NRK、肺癌细胞A549四种细胞密度调整为5×105个/cm 2，关闭第一微阀组14，打开第二微阀组15，将调整好密度的SMMC-7721等4种细胞分别由细胞腔室进样口2注入经过消毒处理的芯片中，待细胞贴壁且进入对数生长期时，打开第一微阀组14，关闭第二微阀组15，使用精密注射泵以0.2μL•min-1的流速从下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入含顺铂（8μg/mL）的培养液，实时刺激24h，之后使用精密注射泵以0.2μL•min-1的流速从下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入PBS缓冲液，对细胞清洗3 遍后，向芯片中通入凋亡坏死试剂盒中现配的Hoechst 33342 和PI 染液（V/V=1:1）对细胞进行双染，4℃避光孵育12min，然后用PBS 清洗剩余的染料，最后使用Nikon eclipse Ti倒置荧光显微镜对芯片进行拍照处理，并结合IPP 软件计算出待测药物对肝肿瘤SMMC-7721细胞、正常人肝细胞L-02、正常大鼠肾细胞NRK、肺癌细胞A549 四种细胞的凋亡坏死率。
因需要对每种细胞的凋亡坏死率进行相对定量分析，所以以四种细胞对应四种空白对照为例，进行Hoechst 33342 和碘化丙啶（PI）双染凋亡坏死分析，后续如果定性分析，可直接进行八种细胞的分析，这里选取每种细胞的一个细胞培养腔5，作为整个双染结果的代表，结果如图6、表1所示。
表1顺铂对SMMC-7721等4种细胞凋亡坏死率的影响（%）（±s）。
实施例二。
1、材料与仪器。
SU-8 2075负性光刻胶；Sylgard184型聚二甲基硅氧烷（PDMS）；固化剂（美国DowCorning公司）；JKG-2A 型光刻机（上海学泽光学机械有限公司）；HPDC-32G-2型等离子清洗机（美国Harrick Plasma公司）；匀胶机（SC-1B型，北京创世威纳科技有限公司）；真空干燥箱（上海一恒科学仪器有限公司）；精密注射泵（LSP04-1A，保定兰格公司）；Nikon ECLIPSETI倒置荧光显微镜（日本Nikon公司）。
2、芯片里细胞培养。
（1）芯片预处理：制作好的芯片先用无菌三级水润洗三遍，之后注入75%乙醇，清洗三遍，然后用无菌水洗三遍，烘干，紫外光照射30min杀菌，之后通入0.1mg•L-1的多聚L-赖氨酸（PLL），于37℃下孵育1h，对芯片的细胞培养腔5室进行包被处理，提高细胞的贴壁率，最后用无菌水将剩余PLL 冲掉，烘干备用。
（2）芯片细胞培养及活力检测：将对数生长期的人肝肿瘤SMMC-7721细胞用含10%灭活胎牛血清的RPMI-1640 培养液配制成密度为5×105个/cm 2的悬液，打开第一微阀组14，关闭第二微阀组15，利用精密注射泵将细胞通过下方多级分支培养通道的培养通道进样口10注入，之后将芯片放入细胞培养箱中静置，约3-3.5h 细胞贴壁后，使用精密注射泵以0.2μL•min-1的流速通入培养液，进行灌流培养24h,之后，用精密注射泵从细胞注入口11处通入磷酸盐缓冲液（PBS），对细胞进行清洗后，将配制好的LIVE/DEAD 染液混匀后通入芯片，避光染色30min，然后继续用PBS清洗细胞3 次，使用倒置荧光显微镜进行拍照，并结合图像分析软件IPP 检测细胞的存活率，如图5所示，结果显示芯片中培养的细胞活力良好，细胞存活率能达到95% 以上。
3、芯片里细胞凋亡坏死研究。
将肝肿瘤细胞SMMC-7721 密度调整为5×105个/cm 2，打开第一微阀组14，关闭第二微阀组15，利用精密注射泵由下方多级分支流体进样通道11的培养通道进样口10注入经过消毒处理的芯片中，待细胞贴壁且进入对数生长期时，关闭第一微阀组14，打开第二微阀组15。这里选用常见的五种广谱抗癌西药进行试验（他们均通过抗代谢物而起作用，干扰DNA或RNA 的合成），之后将用RPMI-1640培养液配制好的五种待测药液分别由第一到第五系列细胞培养腔5室的细胞腔室进样口2以0.2μL•min-1的速度实时灌注刺激，第六系列注入空白培养液，作为对照组，五种待测药液的种类和浓度分别为顺铂（8μg/mL）、吉西他滨(8μg/mL)、奥沙利铂(8μg/mL)、阿霉素(5μg/mL)、5-Fu(10μg/mL)。当药物作用SMMC-7721 细胞24h 后，吸取一定量的PBS 缓慢匀速的注入到第一到第六系列细胞培养腔5室，对细胞清洗3 遍后，向芯片中通入凋亡坏死试剂盒中现配的Hoechst 33342 和PI 染液（V/V=1:1）对细胞进行双染，4℃避光孵育12min，然后用PBS 清洗剩余的染料，最后使用Nikon eclipse Ti倒置荧光显微镜对芯片进行拍照处理，并结合IPP 软件计算出待测药物对SMMC-7721 细胞的凋亡坏死率。
选取每种常见抗肿瘤西药的1 个细胞培养腔5，作为整个双染结果的代表，Hoechst 33342 和碘化丙啶（PI）双染结果如图7、表2所示。
表2 常见五种抗肿瘤西药对肝肿瘤细胞SMMC-7721凋亡坏死率的影响（%）（±s）。
可以理解的是，以上关于本发明的具体描述，仅用于说明本发明而并非受限于本发明实施例所描述的技术方案，本领域的普通技术人员应当理解，仍然可以对本发明进行修改或等同替换，以达到相同的技术效果；只要满足使用需要，都在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，由上层的PDMS微阀控制通道层，中层的PDMS流体通道层和下层起支撑和细胞贴附作用的玻璃基底层构成；其特征在于，所述PDMS微阀控制通道层包括第一微阀组(14)和第二微阀组(15)，所述PDMS流体通道层包括阵列式细胞培养区；所述PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层经热键合后再与玻璃基底层等离子键合形成一体；
所述阵列式细胞培养区由若干个培养单元和多级分支流体进样通道(11)构成，所述培养单元包括细胞培养单元(7)、S形弯曲通道(4)、细胞腔室进样口(2)、S形混合器(8)和废液口(9)；所述细胞培养单元(7)的一端通过S形弯曲通道(4)与细胞腔室进样口(2)相连通，细胞培养单元(7)的另一端通过S形混合器(8)与废液口(9)相连通；所述细胞培养单元(7)由两列细胞培养腔室(6)并联构成，每列细胞培养腔室(6)由若干个细胞培养腔(5)相互串联组成一列；在S形弯曲通道(4)与细胞培养单元(7)的连接处由微通道逐级互相连接，最终连接成一个多级分支流体进样通道(11)，该多级分支流体进样通道(11)的末端作为培养通道进样口(10)；
所述第一微阀组(14)为联动微阀，包含若干个用于控制与细胞培养单元(7)相连通的多级分支流体进样通道(11)的通断的联动微阀控制处(12)，该联动微阀控制处(12)由联动微阀阀通道(13)逐级互相连接，最终连接为一个微阀输注孔(1)，该联动微阀控制处(12)的数量与所述细胞培养单元(7)的数量相同；所述第二微阀组(15)为若干个用于控制细胞腔室进样口(2)与S形弯曲通道(4)的通断的独立微阀(3)；该独立微阀(3)的数量与所述细胞培养单元(7)的数量相同；所述第一微阀组(14)与第二微阀组(15)的结构均是由PDMS微阀控制通道层与PDMS流体通道层的PDMS薄膜构成密闭的空腔，并分别与压力施加装置相连。
2.根据权利要求1所述的压力施加装置，其特征在于：所述压力施加装置为注射器、微量注射泵或气动微阀微泵控制装置。
3.根据权利要求1所述的用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，其特征在于：所述独立微阀(3)位于PDMS微阀控制通道层、细胞腔室进样口(2)与S形弯曲通道(4)的连接处所对应的纵向相对应的位置且不与该连接处相连通。
4.根据权利要求1所述的用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，其特征在于：所述联动微阀控制处(12)位于PDMS微阀控制通道层、组成多级分支流体进样通道(11)的微通道的纵向相对应的位置，联动微阀控制处(12)与所述微通道不连通；因为联动微阀控制处用于控制细胞培养单元(7)与多级分支流体进样通道(11)的通断。
5.根据权利要求1所述的用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，其特征在于：所述PDMS微阀控制通到层与PDMS流体通道层的预聚物与固化剂的比例不同，（经加热固化）形成一整体后，再与玻璃基底层通过不可逆键合形成完整的芯片。
6.根据权利要求1所述的用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，其特征在于：所述S形混合器(8)采用S形弯曲通道(4)，宽度为90-210μm。
7.根据权利要求1所述的用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，其特征在于：所述第一微阀组(14)与第二微阀组(15)均为气动控制微阀组，第一微阀组(14)的联动微阀控制处(12)截面为圆形或椭圆形，尺寸为(800-1200)×(800-1200) μm，第二微阀组(15)包括独立微阀(3)阀通道和独立微阀(3)控制处，联动微阀阀通道(13)和独立微阀(3)阀通道宽度相同，均为100-300。
8.根据权利要求1所述的用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，其特征在于：所述S形弯曲通道(4)宽度为100-200μm。
9.根据权利要求1所述的用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，其特征在于：所述第一微阀组(14)的高度为60-150μm，第一微阀组(14)的联动微阀控制处(12)的两两间距为3000-3440μm，所述第二微阀组(15)的高度为60-150，第二微阀组(15)的独立微阀(3)之间的间距3880-4220。
10.根据权利要求1所述的用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片，其特征在于：所述细胞培养腔(5)捷面为圆形或椭圆形，其尺寸为(800-1200)×(800-1200)μm，细胞培养腔(5)的高度为60-150μm，所述废液口(9)、细胞腔室进样口(2)及培养通道进样口(10)的截面相同，均为圆形或椭圆形，尺寸为(900-1100)×(900-1100)μm。
CN201610918868.9A 2016-10-21 2016-10-21 一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片 Active CN106497771B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610918868.9A CN106497771B (zh) 2016-10-21 2016-10-21 一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610918868.9A CN106497771B (zh) 2016-10-21 2016-10-21 一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106497771A true CN106497771A (zh) 2017-03-15
CN106497771B CN106497771B (zh) 2018-08-31

Family

ID=58318248

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610918868.9A Active CN106497771B (zh) 2016-10-21 2016-10-21 一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106497771B (zh)

Cited By (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106881160A (zh) * 2017-05-03 2017-06-23 山东大学 一种白假丝酵母菌微流控芯片
CN109234163A (zh) * 2018-09-06 2019-01-18 大连理工大学 一种高通量肿瘤靶向药物浓度筛选微流控器件
CN111235029A (zh) * 2020-03-09 2020-06-05 辽宁中医药大学 一种多功能微流控芯片及其制备方法与应用
CN111316957A (zh) * 2018-12-14 2020-06-23 深圳先进技术研究院 微流控芯片、其制备方法、线虫培养装置和应用
KR20200127333A (ko) * 2019-05-02 2020-11-11 재단법인 오송첨단의료산업진흥재단 다중 분석을 위한 분기형 바이오 칩
CN111996112A (zh) * 2019-09-30 2020-11-27 南方科技大学 微流控芯片装置及其制备方法、微藻生产生物质的方法
CN112206840A (zh) * 2019-07-11 2021-01-12 中国科学院大连化学物理研究所 一种基于氧化石墨烯淬灭核酸适配体的外泌体检测微流控芯片及其制备方法
CN112206839A (zh) * 2019-07-11 2021-01-12 中国科学院大连化学物理研究所 一种基于氧化石墨烯淬灭核酸适配体的外泌体检测微流控芯片及应用
CN112300930A (zh) * 2019-07-31 2021-02-02 上海新微技术研发中心有限公司 一种微流控实验板及双面细胞培养方法
CN112358968A (zh) * 2020-11-17 2021-02-12 辽宁中医药大学 一种用于肿瘤细胞迁移研究的微流控芯片及其制备方法
CN113005026A (zh) * 2020-06-17 2021-06-22 山东大学 一种基因检测芯片及检测方法
CN115895864A (zh) * 2022-11-30 2023-04-04 重庆大学 一种基于平面电极的微流控芯片检测系统
CN115926980A (zh) * 2022-12-23 2023-04-07 成都诺医德医学检验实验室有限公司 一种用于细胞培养的芯片装置及方法
CN115975804A (zh) * 2022-12-23 2023-04-18 成都诺医德医学检验实验室有限公司 一种用于细胞培养和自动加药的芯片装置及方法
US12064759B2 (en) 2020-04-30 2024-08-20 Nutech Ventures Microfluidic device with embedded cell culture chambers for high throughput biological assays
WO2024193112A1 (zh) * 2023-03-21 2024-09-26 中国科学院深圳先进技术研究院 一种微流控芯片、制备方法及细菌耐药性的检测方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101629143A (zh) * 2008-12-02 2010-01-20 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 用于高通量药物筛选的微流控细胞阵列芯片、方法及应用
US7718420B2 (en) * 2006-10-10 2010-05-18 Postech Academy-Industry Foundation Microfluidic biochip for blood typing based on agglutination reaction
KR101152791B1 (ko) * 2010-05-10 2012-06-12 광주과학기술원 쯔바이파흐-풍 효과를 이용한 세포 발열량 측정 센서 및 이의 제조방법
US20130090268A1 (en) * 2006-01-04 2013-04-11 Emd Millipore Corporation Valved, microwell cell-culture device and method
CN104569329A (zh) * 2014-12-23 2015-04-29 天津大学 一种基于微流控装置的组合药物高通量筛选系统及操作方法
CN105032512A (zh) * 2015-08-25 2015-11-11 辽宁中医药大学 用于药物配伍筛选的集成化微流控芯片、制备方法及应用
CN105080627A (zh) * 2015-08-25 2015-11-25 辽宁中医药大学 一种用于药物筛选的集成化微流控芯片及其应用方法
CN105838603A (zh) * 2016-05-12 2016-08-10 辽宁中医药大学 用于多种肿瘤细胞同时在线筛选的多功能集成微流控芯片

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20130090268A1 (en) * 2006-01-04 2013-04-11 Emd Millipore Corporation Valved, microwell cell-culture device and method
US7718420B2 (en) * 2006-10-10 2010-05-18 Postech Academy-Industry Foundation Microfluidic biochip for blood typing based on agglutination reaction
CN101629143A (zh) * 2008-12-02 2010-01-20 中国科学院上海微系统与信息技术研究所 用于高通量药物筛选的微流控细胞阵列芯片、方法及应用
KR101152791B1 (ko) * 2010-05-10 2012-06-12 광주과학기술원 쯔바이파흐-풍 효과를 이용한 세포 발열량 측정 센서 및 이의 제조방법
CN104569329A (zh) * 2014-12-23 2015-04-29 天津大学 一种基于微流控装置的组合药物高通量筛选系统及操作方法
CN105032512A (zh) * 2015-08-25 2015-11-11 辽宁中医药大学 用于药物配伍筛选的集成化微流控芯片、制备方法及应用
CN105080627A (zh) * 2015-08-25 2015-11-25 辽宁中医药大学 一种用于药物筛选的集成化微流控芯片及其应用方法
CN105838603A (zh) * 2016-05-12 2016-08-10 辽宁中医药大学 用于多种肿瘤细胞同时在线筛选的多功能集成微流控芯片

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
JINHUI WU等: "A sandwiched microarray platform for benchtop cell-based high throughput screening", 《BIOMATERICLS》 *
庞磊等: "药物筛选微流控芯片的构建及其在花蕊石抗肝癌研究中的应用", 《中南药学》 *

Cited By (21)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106881160A (zh) * 2017-05-03 2017-06-23 山东大学 一种白假丝酵母菌微流控芯片
CN109234163B (zh) * 2018-09-06 2021-10-15 大连理工大学 一种高通量肿瘤靶向药物浓度筛选微流控器件
CN109234163A (zh) * 2018-09-06 2019-01-18 大连理工大学 一种高通量肿瘤靶向药物浓度筛选微流控器件
CN111316957A (zh) * 2018-12-14 2020-06-23 深圳先进技术研究院 微流控芯片、其制备方法、线虫培养装置和应用
KR20200127333A (ko) * 2019-05-02 2020-11-11 재단법인 오송첨단의료산업진흥재단 다중 분석을 위한 분기형 바이오 칩
KR102272251B1 (ko) * 2019-05-02 2021-07-02 재단법인 오송첨단의료산업진흥재단 다중 분석을 위한 분기형 바이오 칩
CN112206840A (zh) * 2019-07-11 2021-01-12 中国科学院大连化学物理研究所 一种基于氧化石墨烯淬灭核酸适配体的外泌体检测微流控芯片及其制备方法
CN112206839A (zh) * 2019-07-11 2021-01-12 中国科学院大连化学物理研究所 一种基于氧化石墨烯淬灭核酸适配体的外泌体检测微流控芯片及应用
CN112300930A (zh) * 2019-07-31 2021-02-02 上海新微技术研发中心有限公司 一种微流控实验板及双面细胞培养方法
CN111996112A (zh) * 2019-09-30 2020-11-27 南方科技大学 微流控芯片装置及其制备方法、微藻生产生物质的方法
CN111235029A (zh) * 2020-03-09 2020-06-05 辽宁中医药大学 一种多功能微流控芯片及其制备方法与应用
US12064759B2 (en) 2020-04-30 2024-08-20 Nutech Ventures Microfluidic device with embedded cell culture chambers for high throughput biological assays
CN113005026A (zh) * 2020-06-17 2021-06-22 山东大学 一种基因检测芯片及检测方法
CN112358968B (zh) * 2020-11-17 2023-03-31 辽宁中医药大学 一种用于肿瘤细胞迁移研究的微流控芯片及其制备方法
CN112358968A (zh) * 2020-11-17 2021-02-12 辽宁中医药大学 一种用于肿瘤细胞迁移研究的微流控芯片及其制备方法
CN115895864A (zh) * 2022-11-30 2023-04-04 重庆大学 一种基于平面电极的微流控芯片检测系统
CN115926980A (zh) * 2022-12-23 2023-04-07 成都诺医德医学检验实验室有限公司 一种用于细胞培养的芯片装置及方法
CN115975804A (zh) * 2022-12-23 2023-04-18 成都诺医德医学检验实验室有限公司 一种用于细胞培养和自动加药的芯片装置及方法
CN115926980B (zh) * 2022-12-23 2023-10-24 成都诺医德医学检验实验室有限公司 一种用于细胞培养的芯片装置及方法
CN115975804B (zh) * 2022-12-23 2023-11-07 成都诺医德医学检验实验室有限公司 一种用于细胞培养和自动加药的芯片装置及方法
WO2024193112A1 (zh) * 2023-03-21 2024-09-26 中国科学院深圳先进技术研究院 一种微流控芯片、制备方法及细菌耐药性的检测方法

Also Published As

Publication number Publication date
CN106497771B (zh) 2018-08-31

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN106497771B (zh) 一种用于多种药物及细胞同时筛选的多功能微流控芯片
CN105080627A (zh) 一种用于药物筛选的集成化微流控芯片及其应用方法
CN105032512B (zh) 用于药物配伍筛选的集成化微流控芯片、制备方法及应用
CN111218404A (zh) 一种仿生多器官芯片及其制备方法和应用
CN112608841B (zh) 一种肿瘤类器官培养和药物实验的微流控系统及使用方法
US11566224B2 (en) Dendritic cell generator
CN101382490A (zh) 一种用于细胞水平高内涵药物筛选的方法
CN204865880U (zh) 一种用于多物质配伍药效筛选的微流控芯片
CN105838603B (zh) 用于多种肿瘤细胞同时在线筛选的多功能集成微流控芯片
CN206244793U (zh) 一种微流控芯片
Lam et al. High-throughput dental biofilm growth analysis for multiparametric microenvironmental biochemical conditions using microfluidics
US10731119B2 (en) Method and devices for the in vitro production of arrangements of cell layers
CN105713834A (zh) 一种微流控芯片及其制备方法和应用
CN108148752B (zh) 一种基于微流控芯片的集成化药物筛选与染色方法
CN205856486U (zh) 一种简易的微流控芯片
CN106811409A (zh) 基于微流控芯片的多器官肿瘤靶向药物测试平台及其应用
CN204891906U (zh) 一种用于细胞水平药物筛选的微流控芯片
CN212316139U (zh) 一种仿生多器官芯片
CN109837237A (zh) 一种基于硝酸纤维素基底膜的微流控肠芯片及其应用
CN105543072B (zh) 基于微流控芯片的癌细胞迁移及抗癌药物筛选共培养模型
CN107904155A (zh) 一种用于液体分散的微流控芯片及其应用、使用方法
CN110295107A (zh) 一种用于核酸检测的多通量微流控芯片
CN107523472A (zh) 抗菌和可循环利用的细胞捕获装置及其循环方法
CN209098693U (zh) 一种间歇式流式电转染装置
Lou et al. A flexible and cost-effective manual droplet operation platform for miniaturized cell assays and single cell analysis

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant
TR01 Transfer of patent right
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20230707

Address after: 318000 Room 501, building a, Fangyuan e-commerce Pioneer Park, 155 xitaihe Road, Haimen street, Jiaojiang District, Taizhou City, Zhejiang Province

Patentee after: Zhejiang Hongrui Medical Technology Co.,Ltd.

Address before: 110847 No. 79, Chong Shan Road, Huanggu District, Shenyang, Liaoning.

Patentee before: LIAONING University OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE