CN106491503A - 黄皮叶有效成分的提取方法及其制备护肤霜的用途 - Google Patents

Abstract

本发明公开了黄皮叶有效成分的提取方法及其制备护肤霜的用途，是运用纤维素酶和复配蛋白酶使植物细胞壁疏松、破裂、减小传质阻力，加速有效成分黄酮类物质和多酚类的释放，利用弱碱性小分子团水再次对枸树渣残存的有效成分进行浸提，微滤膜纯化提取液等现代生物工程技术制备的黄皮叶提取物，富含多酚、黄酮等抗氧化成分和抗菌消炎成分，提取和分离得率高，可用于制备护肤霜。

Description

黄皮叶有效成分的提取方法及其制备护肤霜的用途

技术领域

本发明涉及一种从植物中提取有效成分的方法，特别涉及一种黄皮叶有效成分的提取方法及其制备护肤霜的用途。

背景技术

黄皮，【拉丁学名】Clausena lansium (Lour.) Skeels 【别称】黄弹，黄弹子，黄段；芸香科，小乔木，高可达12米。小叶卵形或卵状椭圆形，两侧不对称，圆锥花序顶生；花蕾圆球形，花萼裂片阔卵形，花瓣长圆形，花丝线状，果淡黄至暗黄色，果肉乳白色，半透明，种子1-4粒；4-5月开花，7-8月结果。黄皮原产中国南方，在中国一千五百多年的历史了。中国海南的花果期均提早1-2个月。

黄皮是中国南方果品之一，含丰富的维生素C、糖、有机酸及果胶，果皮及果核皆可入药，有消食化痰、理气功效，用于食积不化、胸膈满痛、痰饮咳喘等症，并可解郁热，理疝痛，叶性味辛凉，有疏风解表，除痰行气功效，用于防治流行性感冒、温病身热、咳嗽哮喘、水胀腹痛、疟疾、小便不利、热毒疥癞等症；根可治气痛及疝痛。黄皮叶含有丰富的黄酮类化合物，在微波辅助提取条件下，总黄酮类化合物提取率达3.28％，其黄酮的种类主要为双氢黄酮 、查尔酮和黄酮醇等。黄皮叶中还含有丰富的多酚类和氨基酸。

关于从黄皮提取有效成分的文献如下：

申请号：201510116170.0；申请人：柳州师范高等专科学校；发明名称：一种利用双水相体系与超声集成提取黄皮叶总黄酮的方法；摘要：本发明公开了一种利用双水相体系与超声集成提取黄皮叶总黄酮的方法；所述方法首先将黄皮叶粉碎，加入一定浓度的异丙醇和硫酸铵水溶液形成双水相体系，以超声提取黄皮叶中总黄酮，所述方法在单因素试验结果基础上设计正交试验，优选出总黄酮的提取工艺条件；最佳提取条件确定为硫酸铵浓度310mg/mL，40％异丙醇溶液，超声时间 20min，料液比 1∶40；本发明的方法操作简便，缩短提取时间，有效的提高了提取效率。

申请号：201310247660.5；申请人：广东医学院；发明名称：黄皮果提取物在防治药源性肝炎药物中的应用；摘要：本发明涉及一种黄皮果提取物的制备方法和黄皮果提取物在防治药源性肝炎药物中的应用。本发明的黄皮果提取物的制备方法，包括以下步骤：（1）取晒干的芸香科黄皮属植物有核黄皮的果实，去核， 粉碎，过 40 目筛，得到黄皮果粉末；（2）用乙醇浸泡上述黄皮果粉末，连续回流提取 5次；（3）过滤，合并滤液，离心，取上清液浓缩，然后再用正己烷萃取 3 次，每次正己烷萃取后分去上层萃取液，取下层液体挥去正己烷，然后浓缩；（4）真空干燥成浸膏即得黄皮果提取物。本发明制备的黄皮果提取物可以应用在防治药源性肝炎的药物中，作为一种防治药源性肝炎的新方法，可以有效缓解药源性肝炎的发病，对防治肝纤维化有较好的效果。

【题名】超声波辅助法提取细叶黄皮叶总黄酮及其清除羟自由基活性的测定【作者】苏秀芳；郭青；甘海妹；黄智想；【机构】广西民族师范学院化学与生物工程系；江苏省食品药品检验所【刊名】化学世界，2011年第7期，第420-431页【摘要】对超声波法提取细叶黄皮叶中黄酮类物质进行了研究，通过单因素及 L3（34）正交实验，最佳提取工艺条件为 A₁B₃ C₃D ₃，即：温度 60℃，乙醇浓度60% ，超声波功率 90 W，料液比 1:25 ，提取时间 70min。此条件下细叶黄皮叶总黄酮提取率达 5.730%。 在设置的 5 个质量浓度梯度下，总黄酮提取液对羟自由基的清除效果与其质量浓度呈正相关，当样品质量浓度为 0.694 g/L时，其清除率达49.1% 。

【题名】大孔吸附树脂纯化水黄皮根总黄酮 的工艺研究；【作者】赵映淑 ，董志 ，朱毅 ，陈国彪 ，储关娜【机构】重庆医科大学 ；海南省药品检验所；海南省药物质量研究重点实验室 【摘要】目的 研究大孔吸附树脂纯化水黄皮根总黄酮的最佳工艺。 方法 选择3种不同大孔吸附树脂对水黄皮根总黄酮进行静态和动态的吸附与解吸 ；考察上柱原液总黄酮浓度、流速、pH 和洗脱 剂等对水黄皮根总黄酮优化的影响 。结果 D101 最适于水黄皮总黄酮的纯化 ，最佳工艺为 ：调节水黄皮根提取液总黄酮浓度为 0.6071 mg·ml^-1，调pH = 3 ，以 2 ml·min^-1 的流速上样，以相同速率用适量纯化水洗脱 (molish 反应阴性)后，再用 3BV 20 ％ 乙醇溶液除杂洗脱 ， 最后用 70％ 乙醇作为洗脱剂进行洗脱 。 结论 经 D 101 大孔吸附树脂分离纯化后 ，水黄皮根总黄酮 浓度可达 50 ％ 以上 。

上述公开文献从不同角度对提取黄皮叶有效成分进行了论述，申请号为201510116170.0的专利是将粉碎的黄皮叶加入到双水相体系，超声一定时间，再将黄皮叶过滤，滤液置于分液漏斗中静置，分液取上层溶液，得到黄皮叶总黄酮；申请号为201310247660.5的专利是现将黄皮果粉末用乙醇回流提取，取清液用正丁烷萃取，然后真空干燥成浸膏得到黄皮果提取物；题名为大孔吸附树脂纯化水黄皮根总黄酮 的工艺研究的期刊则是利用大孔树脂对水黄皮根总黄酮进行纯化；上述三种不同的提取方法得到不同用途的枸树有效成分，但是有的方法提取不完全，使得黄皮叶资源未能充分利用。

发明内容

本发明的目的是提供一种从黄皮叶提取有效成分的方法，是运用纤维素酶和复配蛋白酶使植物细胞壁疏松、破裂、减小传质阻力，加速有效成分黄酮类物质和多酚类的释放，利用弱碱性小分子团水再次对枸树渣残存的有效成分进行浸提，微滤膜纯化提取液等现代生物工程技术制备的黄皮叶提取物，富含多酚、黄酮等抗氧化成分和抗菌消炎成分，提取和分离得率高，可用于制备护肤霜。

本发明的技术方案是这样实现的：

黄皮叶有效成分的提取方法，包括如下步骤：

1）首先清除黄皮叶的泥土及杂草，将黄皮叶用自来水洗干净，阴干，然后利用粉碎机将黄皮叶进行粉碎处理，达到200-300目，得到黄皮叶粉末；

2）按照黄皮叶粉末的重量，加入5-10倍量的水浸泡步骤1）得到的黄皮叶粉末，同时在加热反应釜中加入黄皮叶粉末重量1‰-5‰的纤维素酶，调整pH为6-7，温度为40-50℃，搅拌速度为20-35rpm，酶解2-4hr；纤维素酶酶解后再加入黄皮叶重量1‰-5‰的复配蛋白酶，调整pH为6-7，温度为40-50℃，搅拌速度为20-35rpm，酶解2-4hr；复配蛋白酶酶解后，在90-100℃高温下处理 2～5min 使复配蛋白酶失活；离心，得酶解液和黄皮叶渣；

3）采用弱碱性小分子团水对步骤2）中的黄皮叶渣，每公斤黄皮叶渣加入5-8升弱碱性小分子团水；在15-25℃的温度下提取1-2小时，再次分离出提取液和黄皮叶渣；

4）合并步骤2）的酶解液和步骤3）的提取液，得到混合提取液，将混合提取液过无机陶瓷微滤膜，无机陶瓷微滤膜孔径为0.1-1μm，微滤操作中，控制混合提取液的温度为40-60℃，压力为0.2-0.4 MPa，得到微滤液；再用体积浓度为60%的乙醇溶液对微滤液进行洗脱，得到洗脱液；将洗脱液进行减压浓缩处理，回收乙醇，减压干燥成干膏粉碎过 60 目筛，得到黄皮叶提取物。

所述的弱碱性小分子团水是采用申请号为201010253226.4，发明名称为“一种天然的永恒的弱碱性小分子团水的制作设备及其方法”的专利中所述的方法制备得到，其制作过程包括以下步骤：步骤 1：将水由进水管通入制作设备内，水依序流经过滤器和小分子团水发生器，由出水管流出；步骤 2：调整出水管上的水流量调节阀门，将出水管内的水流量调整为 20-80mL/min，酸碱度调整管中空腔体内的水流调整呈串珠断掉式下落；步骤 3：容器在酸碱度调整管下端的出水口接水，即可得到弱碱性小分子团水。在本发明中，采用弱碱性小分子团水对黄皮叶渣残存的有效成分进行浸提，提高有效成分的得率，具有提取过程温和、安全、绿色环保的特点，同时也避免了常规强酸强碱提取带来的危害。

所述的复配蛋白酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶按照1:1的重量比混合而成。

上述制备得到的黄皮叶提取物可用来制备黄皮叶护肤霜，而黄皮叶护肤霜由如下重量含量的原料组成：黄皮叶提取物5-10％；嫩竹叶水5-10％；蓖麻油0.5-1％；丝瓜浓缩液8-15％；牛奶10-20％；维生素E0.5-1％；蜂蜜 0.5-1％；山茶油2-3％；丙三醇10-15％；单硬脂酸甘油脂5-8%；余量为蒸馏水。

所述的嫩竹叶水的制备方法为：将新鲜采摘的嫩竹叶洗净，放入其重量4～8倍的沸水中蒸煮30～60 分钟，冷却放置，得到嫩竹叶水。

所述的丝瓜浓缩液的提取方法为：将丝瓜经物理压榨后，用网格布过滤，取滤液，加入滤液重量的3-5倍质量浓度为40%的乙醇作为提取溶剂，在40-50℃下加热回流20-30分钟，得提取液；将提取液分别经微滤膜、超滤膜、纳滤膜过滤分离后，浓缩，得丝瓜浓缩液。

黄皮叶护肤霜的制作方法为：按照重量百分比取材，将蓖麻油、山茶油和单硬脂酸甘油脂，放入到不锈钢锅中，隔水加热至上述物质完全溶解，一边加热一边搅拌；将70-80℃的蒸馏水，慢慢倒入不锈钢锅中，用电动搅拌器搅拌3分钟，至成为绵密的奶油状即停止，静止1分钟，待温度到40-50℃时，依次加入黄皮叶提取物、嫩竹叶水、丝瓜浓缩液、牛奶、蜂蜜、山茶油、丙三醇，每添加一种物质后，要用搅拌棒搅拌一分钟，最后再加入维生素E，用搅拌棒搅拌至质地粘稠且不滴落，装瓶即可。

本发明的实质性特点和显著的进步为：

1、在本发明中，首先利用纤维素酶和复配蛋白酶使植物细胞壁疏松、破裂、减小传质阻力，加速有效成分黄酮类物质和多酚类的释放，从而提高提取效率，同时调节适宜的温度和pH 值，在温和的提取条件下即可使黄皮叶有效成分快速浸出，提取效率较高；接着采用弱碱性小分子团水对黄皮叶渣残存的有效成分进行浸提，提高有效成分的得率；再紧接着利用无机陶瓷微滤膜，能较好地去除黄皮叶提取液中的微粒、淀粉、果胶和蛋白质等大分子杂质，进一步提高有效成分的纯度；最后利用乙醇溶液洗脱，将洗脱液减压浓缩，回收乙醇，喷雾干燥，得到黄皮叶提取物。

2、本发明黄皮叶提取物中，黄酮类化合物的含量在70%以上，多酚类化合物在20%以上，回收率达到95%以上，而传统的醇-树脂法，总黄酮含量在60%以上，多酚类化合物含量在10%以上，回收率达90%以上。因此，可以看出，采用本发明的提取方法，黄酮类的含量从60%提高到70%，多酚类化合物含量也从10%提高到20%，其回收率也从90%提高到95%。

3、通过本发明的提取方法得到的黄皮叶提取物，富含多酚、黄酮等抗氧化成分和抗菌消炎成分，用于制备护肤霜，可高效清除皮肤细胞新陈代谢所堆积的自由基，提高人体排毒和防御机能，使衰老细胞的活力得以恢复，加快清除死亡的皮肤细胞，促进皮肤细胞的新生，延缓肌肤衰老。从而使因为年龄增长导致的面部黄斑变浅进而消失，毛孔收缩、变小甚至消失，面部粗细皱纹改善。长期使用会使皮肤白嫩、光滑，弹性恢复、富有青春光泽。

具体实施方式

实施例1

黄皮叶有效成分的提取方法，包括如下步骤：

1）首先清除黄皮叶的泥土及杂草，将黄皮叶用自来水洗干净，阴干，然后利用粉碎机将黄皮叶进行粉碎处理，达到200-300目，得到黄皮叶粉末；

2）按照黄皮叶粉末的重量，加入5倍量的水浸泡步骤1）得到的黄皮叶粉末，同时在加热反应釜中加入黄皮叶粉末重量1‰的纤维素酶，调整pH为6-7，温度为40℃，搅拌速度为35rpm，酶解4hr；纤维素酶酶解后再加入黄皮叶重量1‰的复配蛋白酶，调整pH为6-7，温度为40℃，搅拌速度为35rpm，酶解4hr；复配蛋白酶酶解后，在90℃高温下处理5min 使复配蛋白酶失活；离心，得酶解液和黄皮叶渣；

3）采用弱碱性小分子团水对步骤2）中的黄皮叶渣，每公斤黄皮叶渣加入5升弱碱性小分子团水；在15℃的温度下提取2小时，再次分离出提取液和黄皮叶渣；

4）合并步骤2）的酶解液和步骤3）的提取液，得到混合提取液，将混合提取液过无机陶瓷微滤膜，无机陶瓷微滤膜孔径为0.1-1μm，微滤操作中，控制混合提取液的温度为40℃，压力为0.4 MPa，得到微滤液；再用体积浓度为60%的乙醇溶液对微滤液进行洗脱，得到洗脱液；将洗脱液进行减压浓缩处理，回收乙醇，减压干燥成干膏粉碎过 60 目筛，得到黄皮叶提取物。

所述的弱碱性小分子团水是采用申请号为201010253226.4，发明名称为“一种天然的永恒的弱碱性小分子团水的制作设备及其方法”的专利中所述的方法制备得到，其制作过程包括以下步骤：步骤 1：将水由进水管通入制作设备内，水依序流经过滤器和小分子团水发生器，由出水管流出；步骤 2：调整出水管上的水流量调节阀门，将出水管内的水流量调整为 20-80mL/min，酸碱度调整管中空腔体内的水流调整呈串珠断掉式下落；步骤 3：容器在酸碱度调整管下端的出水口接水，即可得到弱碱性小分子团水。

所述的复配蛋白酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶按照1:1的重量比混合而成。

上述制备得到的黄皮叶提取物可用来制备黄皮叶护肤霜，而黄皮叶护肤霜由如下重量含量的原料组成：黄皮叶提取物5％；嫩竹叶水5％；蓖麻油0.5％；丝瓜浓缩液8％；牛奶10％；维生素E0.5％；蜂蜜 0.5％；山茶油2％；丙三醇10％；单硬脂酸甘油脂5%；余量为蒸馏水。

所述的嫩竹叶水的制备方法为：将新鲜采摘的嫩竹叶洗净，放入其重量4～8倍的沸水中蒸煮30～60 分钟，冷却放置，得到嫩竹叶水。

所述的丝瓜浓缩液的提取方法为：将丝瓜经物理压榨后，用网格布过滤，取滤液，加入滤液重量的3-5倍质量浓度为40%的乙醇作为提取溶剂，在40-50℃下加热回流20-30分钟，得提取液；将提取液分别经微滤膜、超滤膜、纳滤膜过滤分离后，浓缩，得丝瓜浓缩液。

黄皮叶护肤霜的制作方法为：按照重量百分比取材，将蓖麻油、山茶油和单硬脂酸甘油脂，放入到不锈钢锅中，隔水加热至上述物质完全溶解，一边加热一边搅拌；将70-80℃的蒸馏水，慢慢倒入不锈钢锅中，用电动搅拌器搅拌3分钟，至成为绵密的奶油状即停止，静止1分钟，待温度到40-50℃时，依次加入黄皮叶提取物、嫩竹叶水、丝瓜浓缩液、牛奶、蜂蜜、山茶油、丙三醇，每添加一种物质后，要用搅拌棒搅拌一分钟，最后再加入维生素E，用搅拌棒搅拌至质地粘稠且不滴落，装瓶即可。

实施例2

黄皮叶有效成分的提取方法，包括如下步骤：

1）首先清除黄皮叶的泥土及杂草，将黄皮叶用自来水洗干净，阴干，然后利用粉碎机将黄皮叶进行粉碎处理，达到200-300目，得到黄皮叶粉末；

2）按照黄皮叶粉末的重量，加入5-10倍量的水浸泡步骤1）得到的黄皮叶粉末，同时在加热反应釜中加入黄皮叶粉末重量3‰的纤维素酶，调整pH为6-7，温度为45℃，搅拌速度为30rpm，酶解3hr；纤维素酶酶解后再加入黄皮叶重量3‰的复配蛋白酶，调整pH为6-7，温度为45℃，搅拌速度为30rpm，酶解3hr；复配蛋白酶酶解后，在95℃高温下处理4min 使复配蛋白酶失活；离心，得酶解液和黄皮叶渣；

3）采用弱碱性小分子团水对步骤2）中的黄皮叶渣，每公斤黄皮叶渣加入7升弱碱性小分子团水；在20℃的温度下提取1.5小时，再次分离出提取液和黄皮叶渣；

4）合并步骤2）的酶解液和步骤3）的提取液，得到混合提取液，将混合提取液过无机陶瓷微滤膜，无机陶瓷微滤膜孔径为0.1-1μm，微滤操作中，控制混合提取液的温度为50℃，压力为0.3 MPa，得到微滤液；再用体积浓度为60%的乙醇溶液对微滤液进行洗脱，得到洗脱液；将洗脱液进行减压浓缩处理，回收乙醇，减压干燥成干膏粉碎过 60 目筛，得到黄皮叶提取物。

所述的弱碱性小分子团水是采用申请号为201010253226.4，发明名称为“一种天然的永恒的弱碱性小分子团水的制作设备及其方法”的专利中所述的方法制备得到，其制作过程包括以下步骤：步骤 1：将水由进水管通入制作设备内，水依序流经过滤器和小分子团水发生器，由出水管流出；步骤 2：调整出水管上的水流量调节阀门，将出水管内的水流量调整为 20-80mL/min，酸碱度调整管中空腔体内的水流调整呈串珠断掉式下落；步骤 3：容器在酸碱度调整管下端的出水口接水，即可得到弱碱性小分子团水。

所述的复配蛋白酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶按照1:1的重量比混合而成。

上述制备得到的黄皮叶提取物可用来制备黄皮叶护肤霜，而黄皮叶护肤霜由如下重量含量的原料组成：黄皮叶提取物8％；嫩竹叶水8％；蓖麻油0.8％；丝瓜浓缩液12％；牛奶15％；维生素E0.8％；蜂蜜 0.8％；山茶油2.5％；丙三醇12％；单硬脂酸甘油脂6%；余量为蒸馏水。

所述的嫩竹叶水的制备方法为：将新鲜采摘的嫩竹叶洗净，放入其重量4～8倍的沸水中蒸煮30～60 分钟，冷却放置，得到嫩竹叶水；

所述的丝瓜浓缩液的提取方法为：将丝瓜经物理压榨后，用网格布过滤，取滤液，加入滤液重量的3-5倍质量浓度为40%的乙醇作为提取溶剂，在40-50℃下加热回流20-30分钟，得提取液；将提取液分别经微滤膜、超滤膜、纳滤膜过滤分离后，浓缩，得丝瓜浓缩液；

黄皮叶护肤霜的制作方法为：按照重量百分比取材，将蓖麻油、山茶油和单硬脂酸甘油脂，放入到不锈钢锅中，隔水加热至上述物质完全溶解，一边加热一边搅拌；将70-80℃的蒸馏水，慢慢倒入不锈钢锅中，用电动搅拌器搅拌3分钟，至成为绵密的奶油状即停止，静止1分钟，待温度到40-50℃时，依次加入黄皮叶提取物、嫩竹叶水、丝瓜浓缩液、牛奶、蜂蜜、山茶油、丙三醇，每添加一种物质后，要用搅拌棒搅拌一分钟，最后再加入维生素E，用搅拌棒搅拌至质地粘稠且不滴落，装瓶即可。

实施例3

黄皮叶有效成分的提取方法，包括如下步骤：

1）首先清除黄皮叶的泥土及杂草，将黄皮叶用自来水洗干净，阴干，然后利用粉碎机将黄皮叶进行粉碎处理，达到200-300目，得到黄皮叶粉末；

2）按照黄皮叶粉末的重量，加入10倍量的水浸泡步骤1）得到的黄皮叶粉末，同时在加热反应釜中加入黄皮叶粉末重量5‰的纤维素酶，调整pH为6-7，温度为50℃，搅拌速度为20rpm，酶解2hr；纤维素酶酶解后再加入黄皮叶重量5‰的复配蛋白酶，调整pH为6-7，温度为50℃，搅拌速度为20rpm，酶解2hr；复配蛋白酶酶解后，在100℃高温下处理 2min 使复配蛋白酶失活；离心，得酶解液和黄皮叶渣；

3）采用弱碱性小分子团水对步骤2）中的黄皮叶渣，每公斤黄皮叶渣加入8升弱碱性小分子团水；在25℃的温度下提取1小时，再次分离出提取液和黄皮叶渣；

4）合并步骤2）的酶解液和步骤3）的提取液，得到混合提取液，将混合提取液过无机陶瓷微滤膜，无机陶瓷微滤膜孔径为0.1-1μm，微滤操作中，控制混合提取液的温度为60℃，压力为0.2MPa，得到微滤液；再用体积浓度为60%的乙醇溶液对微滤液进行洗脱，得到洗脱液；将洗脱液进行减压浓缩处理，回收乙醇，减压干燥成干膏粉碎过 60 目筛，得到黄皮叶提取物。

所述的弱碱性小分子团水是采用申请号为201010253226.4，发明名称为“一种天然的永恒的弱碱性小分子团水的制作设备及其方法”的专利中所述的方法制备得到，其制作过程包括以下步骤：步骤 1：将水由进水管通入制作设备内，水依序流经过滤器和小分子团水发生器，由出水管流出；步骤 2：调整出水管上的水流量调节阀门，将出水管内的水流量调整为 20-80mL/min，酸碱度调整管中空腔体内的水流调整呈串珠断掉式下落；步骤 3：容器在酸碱度调整管下端的出水口接水，即可得到弱碱性小分子团水。

所述的复配蛋白酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶按照1:1的重量比混合而成。

上述制备得到的黄皮叶提取物可用来制备黄皮叶护肤霜，而黄皮叶护肤霜由如下重量含量的原料组成：黄皮叶提取物10％；嫩竹叶水10％；蓖麻油1％；丝瓜浓缩液15％；牛奶20％；维生素E1％；蜂蜜1％；山茶油3％；丙三醇15％；单硬脂酸甘油脂8%；余量为蒸馏水。

所述的嫩竹叶水的制备方法为：将新鲜采摘的嫩竹叶洗净，放入其重量4～8倍的沸水中蒸煮30～60 分钟，冷却放置，得到嫩竹叶水.

所述的丝瓜浓缩液的提取方法为：将丝瓜经物理压榨后，用网格布过滤，取滤液，加入滤液重量的3-5倍质量浓度为40%的乙醇作为提取溶剂，在40-50℃下加热回流20-30分钟，得提取液；将提取液分别经微滤膜、超滤膜、纳滤膜过滤分离后，浓缩，得丝瓜浓缩液。

黄皮叶护肤霜的制作方法为：按照重量百分比取材，将蓖麻油、山茶油和单硬脂酸甘油脂，放入到不锈钢锅中，隔水加热至上述物质完全溶解，一边加热一边搅拌；将70-80℃的蒸馏水，慢慢倒入不锈钢锅中，用电动搅拌器搅拌3分钟，至成为绵密的奶油状即停止，静止1分钟，待温度到40-50℃时，依次加入黄皮叶提取物、嫩竹叶水、丝瓜浓缩液、牛奶、蜂蜜、山茶油、丙三醇，每添加一种物质后，要用搅拌棒搅拌一分钟，最后再加入维生素E，用搅拌棒搅拌至质地粘稠且不滴落，装瓶即可。

本发明应用情况

上述实施例制得的护肤霜给30名年轻女性试用，30名实验者大多数均有皮肤粗糙、容易干燥、有的使用过黄瓜面膜、鸡蛋加蜂蜜面膜，即使晚上脸部注意保湿，但是还是感觉不够好，特别是上班路上，汽车尾气排出的有害气体更加剧的脸部皮肤被损害。经过这些实验者试用，每天1-2次，一般三天内有效，一周后脸部皮肤均有细腻、有光泽的情况。30名实验者有效率为100%，虽然个体有不同，但是脸部皮肤改善还是比较显著的。

应用实施例1

黄某，梧州市某酒店迎宾小姐，其皮肤是蛇皮式皮肤，一到秋冬季节，皮肤特别干燥，容易起皮，整个人看起来是耷拉着的，一点精神气都没有，被老板批评了好多次，让其苦恼了好一阵子。后经朋友介绍后，使用了本发明的黄皮叶护肤霜，连续使用了一周，皮肤变得柔嫩、细致和光滑，原来起皮的地方慢慢变得饱满，整个人的精神气十足。

应用实施例2

李某某，24岁，防城港市某大型房地产的售楼小姐，需要经常加班加点，有段时间业绩不好，经常挨领导批评，那段时间脸上直冒小疙瘩和青春痘，用了市场上多款补水面膜和消痘产品，均没见成效；后来经人介绍后，使用了本发明的黄皮叶护肤霜，并且开始注意饮食，辣和热气的东西都不食用，连续使用一周后，青春痘明显减少，脸上的小疙瘩也慢慢消去，说明本发明黄皮叶护肤霜（主要作用物质为黄皮叶提取物中的黄酮类和多酚类化合物）能够抑制毒素生长，加速健康皮肤生长，并且其脸上皮肤慢慢恢复水分，逐渐变得光滑，滋润，年轻漂亮。

应用实施例3

周某，保险公司人员，30岁，8月份从防城港旅游回来后，整个人的脸被晒黑了一层，并且脸上皮肤干燥起皮，后经朋友介绍，连续使用本发明的黄皮叶护肤霜一周后，脸部肌肉饱满，皮肤滋润、光泽、恢复细腻红润。

Claims (5)

1.黄皮叶有效成分的提取方法，其特征在于：包括如下步骤：

1）首先清除黄皮叶的泥土及杂草，将黄皮叶用自来水洗干净，阴干，然后利用粉碎机将黄皮叶进行粉碎处理，达到200-300目，得到黄皮叶粉末；

2）按照黄皮叶粉末的重量，加入5-10倍量的水浸泡步骤1）得到的黄皮叶粉末，同时在加热反应釜中加入黄皮叶粉末重量1‰-5‰的纤维素酶，调整pH为6-7，温度为40-50℃，搅拌速度为20-35rpm，酶解2-4hr；纤维素酶酶解后再加入黄皮叶重量1‰-5‰的复配蛋白酶，调整pH为6-7，温度为40-50℃，搅拌速度为20-35rpm，酶解2-4hr；复配蛋白酶酶解后，在90-100℃高温下处理 2～5min 使复配蛋白酶失活；离心，得酶解液和黄皮叶渣；

3）采用弱碱性小分子团水对步骤2）中的黄皮叶渣，每公斤黄皮叶渣加入5-8升弱碱性小分子团水；在15-25℃的温度下提取1-2小时，再次分离出提取液和黄皮叶渣；

4）合并步骤2）的酶解液和步骤3）的提取液，得到混合提取液，将混合提取液过无机陶瓷微滤膜，得到微滤液；再用体积浓度为60%的乙醇溶液对微滤液进行洗脱，得到洗脱液；将洗脱液进行减压浓缩处理，回收乙醇，减压干燥成干膏粉碎过 60 目筛，得到黄皮叶提取物。

2.根据权利要求1所述的黄皮叶有效成分的提取方法，其特征在于：步骤2）中所述的复配蛋白酶为木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶按照1:1的重量比混合而成。

3.根据权利要求1所述的黄皮叶有效成分的提取方法，其特征在于：步骤4）所述的微滤操作中，无机陶瓷微滤膜孔径为0.1-1μm，混合提取液的温度为40-60℃，压力为0.2-0.4MPa。

4.权利要求1所述的黄皮叶有效成分的提取方法得到的黄皮叶提取物在制备护肤霜方面的用途。

5.根据权利要求4所述的黄皮叶提取物在制备护肤霜方面的用途，其特征在于：黄皮叶护肤霜由如下重量含量的原料组成：黄皮叶提取物5-10％；嫩竹叶水5-10％；蓖麻油0.5-1％；丝瓜浓缩液8-15％；牛奶10-20％；维生素E0.5-1％；蜂蜜 0.5-1％；山茶油2-3％；丙三醇10-15％；单硬脂酸甘油脂5-8%；余量为蒸馏水；

所述的嫩竹叶水的制备方法为：将新鲜采摘的嫩竹叶洗净，放入其重量4～8倍的沸水中蒸煮30～60 分钟，冷却放置，得到嫩竹叶水；

所述的丝瓜浓缩液的提取方法为：将丝瓜经物理压榨后，用网格布过滤，取滤液，加入滤液重量的3-5倍质量浓度为40%的乙醇作为提取溶剂，在40-50℃下加热回流20-30分钟，得提取液；将提取液分别经微滤膜、超滤膜、纳滤膜过滤分离后，浓缩，得丝瓜浓缩液；

黄皮叶护肤霜的制作方法为：按照重量百分比取材，将蓖麻油、山茶油和单硬脂酸甘油脂，放入到不锈钢锅中，隔水加热至上述物质完全溶解，一边加热一边搅拌；将70-80℃的蒸馏水，慢慢倒入不锈钢锅中，用电动搅拌器搅拌3分钟，至成为绵密的奶油状即停止，静止1分钟，待温度到40-50℃时，依次加入黄皮叶提取物、嫩竹叶水、丝瓜浓缩液、牛奶、蜂蜜、山茶油、丙三醇，每添加一种物质后，要用搅拌棒搅拌一分钟，最后再加入维生素E，用搅拌棒搅拌至质地粘稠且不滴落，装瓶即可。