CN106480152A - 一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,先将丝绸废水用粗过滤器过滤,调节所得清液的pH在8.0~9.0以下,加入蛋白酶进行酶解,灭酶后将所得水解液由超滤膜进行过滤,最后将所得透过液pH调节在6.0~7.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后,得到丝胶蛋白。本发明通过蛋白酶酶解反应结合超滤回收,使丝胶蛋白的生物活性不被破坏,该方法简单、易操作且环保,对于丝胶的回收率和纯度都很高。
Description
技术领域
本发明属于天然药物技术领域,具体涉及一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法。
背景技术
丝胶蛋白( SS)是一种生物相容性优良的天然高分子材料。丝胶蛋白富含丝氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸、苏氨酸等极性氨基酸,约占丝胶蛋白氨基酸总量的70%,与人体皮肤角质层中天然保湿因子的氨基酸组成及比例相似。此外,丝胶蛋白还具有良好的生物可降解性,促进细胞粘附分化和伤口愈合等功能特性,是一种优异的生物医用材料。丝胶包覆在蚕丝丝素的外围而起到保护和胶粘作用,占蚕丝总量的20%~30%。在蚕丝的加工利用过程中,由于制丝及纺织工艺的需要,丝胶往往作为废弃物被脱除并随脱胶废水排入周边环境,既造成丝胶蛋白的巨大浪费,又增加水体的化学耗氧量(COD)。因此,对丝胶蛋白的回收及开发利用不仅可以减少制丝工业对环境的污染,还有利于蚕丝资源的高效利用。
发明内容
解决的技术问题:本发明的目的是克服现有技术的不足而提供一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,本发明通过蛋白酶酶解反应结合超滤回收,使丝胶蛋白的生物活性不被破坏,该方法简单、易操作且环保,对于丝胶的回收率和纯度都很高。
技术方案: 一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,包括以下步骤:
步骤1,将丝绸废水用粗过滤器过滤,得清液;
步骤2,调节步骤1所得清液的pH在8.0~9.0以下,加入1~2wt.%蛋白酶进行酶解,灭酶后得到水解液;
步骤3,将步骤2所得水解液由超滤膜进行过滤,得到透过液;
步骤4,将步骤3所得透过液pH调节在6.0~7.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后,得到丝胶蛋白。
进一步地,步骤1中粗过滤器为砂滤。
进一步地,步骤2中采用10~15wt.%NaOH调节pH。
进一步地,步骤2中蛋白酶为碱性蛋白酶,酶解条件为45~55℃、50~70min。
进一步地,步骤3中超滤膜的截留分子量是200000Da。
进一步地,步骤4中采用10~20v/v%稀硫酸调节pH。
有益效果:本发明通过蛋白酶酶解反应结合超滤回收,使丝胶蛋白的生物活性不被破坏,该方法简单、易操作且环保,对于丝胶的回收率和纯度都很高。
具体实施方式
实施例1
一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,包括以下步骤:
步骤1,将丝绸废水用粗过滤器过滤,得清液;
步骤2,调节步骤1所得清液的pH在8.0以下,加入1wt.%蛋白酶进行酶解,灭酶后得到水解液;
步骤3,将步骤2所得水解液由超滤膜进行过滤,得到透过液;
步骤4,将步骤3所得透过液pH调节在6.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后,得到丝胶蛋白。
其中,步骤1中粗过滤器为砂滤;步骤2中采用10wt.%NaOH调节pH,蛋白酶为碱性蛋白酶,酶解条件为45℃、70min;步骤3中超滤膜的截留分子量是200000Da;步骤4中采用10v/v%稀硫酸调节pH。
实施例2
一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,包括以下步骤:
步骤1,将丝绸废水用粗过滤器过滤,得清液;
步骤2,调节步骤1所得清液的pH在8.5以下,加入1.4wt.%蛋白酶进行酶解,灭酶后得到水解液;
步骤3,将步骤2所得水解液由超滤膜进行过滤,得到透过液;
步骤4,将步骤3所得透过液pH调节在6.5,减压浓缩、结晶、离心、干燥后,得到丝胶蛋白。
其中,步骤1中粗过滤器为砂滤;步骤2中采用12wt.%NaOH调节pH,蛋白酶为碱性蛋白酶,酶解条件为50℃、70min;步骤3中超滤膜的截留分子量是200000Da;步骤4中采用12v/v%稀硫酸调节pH。
实施例3
一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,包括以下步骤:
步骤1,将丝绸废水用粗过滤器过滤,得清液;
步骤2,调节步骤1所得清液的pH在8.0以下,加入2wt.%蛋白酶进行酶解,灭酶后得到水解液;
步骤3,将步骤2所得水解液由超滤膜进行过滤,得到透过液;
步骤4,将步骤3所得透过液pH调节在7.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后,得到丝胶蛋白。
其中,步骤1中粗过滤器为砂滤;步骤2中采用14wt.%NaOH调节pH,蛋白酶为碱性蛋白酶,酶解条件为50℃、70min;步骤3中超滤膜的截留分子量是200000Da;步骤4中采用18v/v%稀硫酸调节pH。
实施例4
一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,包括以下步骤:
步骤1,将丝绸废水用粗过滤器过滤,得清液;
步骤2,调节步骤1所得清液的pH在9.0以下,加入2wt.%蛋白酶进行酶解,灭酶后得到水解液;
步骤3,将步骤2所得水解液由超滤膜进行过滤,得到透过液;
步骤4,将步骤3所得透过液pH调节在7.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后,得到丝胶蛋白。
其中,步骤1中粗过滤器为砂滤;步骤2中采用15wt.%NaOH调节pH,蛋白酶为碱性蛋白酶,酶解条件为55℃、50min;步骤3中超滤膜的截留分子量是200000Da;步骤4中采用20v/v%稀硫酸调节pH。
本发明通过蛋白酶酶解反应结合超滤回收,使丝胶蛋白的生物活性不被破坏,该方法简单、易操作且环保,对于丝胶的回收率和纯度都很高。
Claims (6)
1.一种用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,其特征在于:包括以下步骤:
步骤1,将丝绸废水用粗过滤器过滤,得清液;
步骤2,调节步骤1所得清液的pH在8.0~9.0以下,加入1~2wt.%蛋白酶进行酶解,灭酶后得到水解液;
步骤3,将步骤2所得水解液由超滤膜进行过滤,得到透过液;
步骤4,将步骤3所得透过液pH调节在6.0~7.0,减压浓缩、结晶、离心、干燥后,得到丝胶蛋白。
2.根据权利要求1所述的用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,其特征在于:步骤1中粗过滤器为砂滤。
3.根据权利要求1所述的用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,其特征在于:步骤2中采用10~15wt.%NaOH调节pH。
4.根据权利要求1所述的用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,其特征在于:步骤2中蛋白酶为碱性蛋白酶,酶解条件为45~55℃、50~70min。
5.根据权利要求1所述的用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,其特征在于:步骤3中超滤膜的截留分子量是200000Da。
6.根据权利要求1所述的用于敷料的丝胶蛋白的提取方法,其特征在于:步骤4中采用10~20v/v%稀硫酸调节pH。
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