CN106480115A - 从鱼加工副产品中提取二十二碳六烯酸的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了从鱼加工副产品中提取二十二碳六烯酸的方法。鱼加工后的副产品中鱼油含量很高，众所周知，鱼油中含有二十二碳六烯酸，本发明通过磨成浆状得到鱼杂匀浆、用糖化酶、蛋白酶和纤维素酶进行复合酶解、制备发酵培养基、接种产DHA菌株裂殖壶菌进行发酵及离心分离的方法制备二十二碳六烯酸，本发明充分利用了鱼加工后剩下的副产品，进行了综合利用，尤其是使用了酶解发酵方法，有效地把存在于鱼加工的副产品中提取分离出来，变废为宝，在整个酶解发酵分离过程中，无污染，产品性质稳定，有效利用了资源，降低了产品成本，增加了产品的竞争力。
Description
技术领域
本发明涉及的是从鱼加工副产品中提取二十二碳六烯酸的方法，属于海产品综合利用技术领域。
背景技术
鱼加工后会留下副产品，包括鱼头、鱼鳞、鱼油及鱼内脏，这些副产品传统的处理方法是干燥后作为生产饲料的原料，但在干燥过程中，逸出的恶臭气味对环境造成极大的污染，对鱼加工副产品中所含有有效成份未能充分利用，造成了浪费。鱼加工后的副产品中鱼油含量很高，众所周知，鱼油中含有二十二碳六烯酸，二十二碳六烯酸是一种不饱和脂肪酸，是大脑细胞膜的重要构成成分，参与脑细胞的形成和发育，对神经细胞轴突的延伸和新突起的形成有重要作用，可维持神经细胞的正常生理活动，参与大脑思维和记忆形成过程，具有抗衰老，降血脂及改善血液循环的作用。因此，利用鱼加工副产品提取二十二碳六烯，能够提高鱼加工品的综合利用价值。
发明内容
本发明的目的，就是提供一种从鱼加工副产品中提取二十二碳六烯酸的方法，利用二氧化碳超临界萃取方式将鱼加工副产品中的二十二碳六烯酸提取分离出来，克服传统提取分离方式所存在的不足。
为实现上述目的，本发明采用了这样的措施：从鱼加工副产品中提取二十二碳六烯酸的方法，包括下述步骤：
（1）将鱼加工后的副产品洗净，以固液重量比是1：1-1.2的比例加入水，再磨成浆状得到鱼杂匀浆；
（2） 取鱼杂匀浆加热至50-60℃，加入糖化酶、蛋白酶和纤维素酶进行复合酶解，使得每克鱼杂匀浆中添加糖化酶100～300U、蛋白酶15～35U、纤维素酶10～20U，酶解时间3-5小时，得到酶解混合物，在转速为2500-5000转/分钟的离心分离机分离后，得到酶解液备用，残渣另作它用；
（3） 于酶解液中添加葡萄糖和无机盐，使得糖浓度为80～100克/升，无机盐浓度为2.5-15.5克/升,得到发酵培养基,用酸碱剂调节发酵培养基的pH值为5.5-7.0；
（4）将发酵培养基常规灭菌后，按活菌浓度为108～109cfu/ml的菌悬液、10％ (v/v)的接种量接种产DHA菌株裂殖壶菌 (Schizochytrium)到发酵罐中进行发酵，发酵5-6天，其间不定时搅拌，得到发酵液；
（5）于发酵液中添加5.0g/L维生素E作为抗氧化剂，添加0.3g/L壳聚糖作为絮凝剂，絮凝40min后，离心分离得到发酵底物，将发酵底物用蒸馏水洗涤干净，60-80℃温度干燥后即得到二十二碳六烯酸复合物。
所述裂殖壶菌 (Schizochytrium)已有商品销售。
采取上述措施的本发明，充分利用了鱼加工后剩下的副产品，进行了综合利用，尤其是使用了酶解发酵方法，有效地把存在于鱼加工的副产品中提取分离出来，变废为宝，在整个酶解发酵分离过程中，无污染，产品性质稳定，有效利用了资源，降低了产品成本，增加了产品的竞争力。
为详细说明本发明，下面结合实施例对本发明进一步详述：
实施例1
（1）将鱼加工后的鱼头、鱼鳞、鱼油及鱼内脏洗净，加入固液重量比是1：1的水，用磨浆机磨成浆状得到鱼杂匀浆；
（2） 取鱼杂匀浆加热至50℃，加入糖化酶、蛋白酶和纤维素酶进行复合酶解，使得每克鱼杂匀浆中添加糖化酶100U、蛋白酶15U、纤维素酶10U，酶解时间5小时，得到酶解混合物，在转速为2500转/分钟的离心分离机分离后，得到酶解液备用，残渣另作它用；
（3） 于酶解液中添加葡萄糖和无机盐，使得糖浓度为80克/升，无机盐浓度为2.5克/升,得到发酵培养基,用酸碱剂调节发酵培养基的pH值为5.5；
（4）将发酵培养基常规灭菌后，按活菌浓度为108cfu/ml的菌悬液、10％ (v/v)的接种量接种产DHA菌株裂殖壶菌 (Schizochytrium)到发酵罐中进行发酵，发酵5-6天，其间不定时搅拌，得到发酵液；
（5）于发酵液中添加5.0g/L维生素E作为抗氧化剂，添加0.3g/L壳聚糖作为絮凝剂，絮凝40min后，离心分离得到发酵底物，将发酵底物用蒸馏水洗涤干净，60℃温度干燥后即得到二十二碳六烯酸复合物。
实施例2
（1）将鱼加工后的鱼头、鱼鳞、鱼油及鱼内脏洗净，加入固液重量比是1： 1.2的水，于磨浆机中磨成浆状得到鱼杂匀浆；
（2） 取鱼杂匀浆加热至60℃，加入糖化酶、蛋白酶和纤维素酶进行复合酶解，使得每克鱼杂匀浆中添加糖化酶300U、蛋白酶35U、纤维素酶20U，酶解时间3小时，得到酶解混合物，在转速为5000转/分钟的离心分离机分离后，得到酶解液备用，残渣另作它用；
（3） 于酶解液中添加葡萄糖和无机盐，使得糖浓度为100克/升，无机盐浓度为15.5克/升,得到发酵培养基,用酸碱剂调节发酵培养基的pH值为7.0；
（4）将发酵培养基常规灭菌后，按活菌浓度为109cfu/ml的菌悬液、10％ (v/v)的接种量接种产DHA菌株裂殖壶菌 (Schizochytrium)到发酵罐中进行发酵，发酵5-6天，其间不定时搅拌，得到发酵液；
（5）于发酵液中添加5.0g/L维生素E作为抗氧化剂，添加0.3g/L壳聚糖作为絮凝剂，絮凝40min后，离心分离得到发酵底物，将发酵底物用蒸馏水洗涤干净， 80℃温度干燥后即得到二十二碳六烯酸复合物。
实施例3
（1）将鱼加工后的鱼头、鱼鳞、鱼油及鱼内脏洗净，加入固液重量比是1： 1.1的水，于磨浆机中磨成浆状得到鱼杂匀浆；
（2） 取鱼杂匀浆加热至55℃，加入糖化酶、蛋白酶和纤维素酶进行复合酶解，使得每克鱼杂匀浆中添加糖化酶200U、蛋白酶25U、纤维素酶15U，酶解时间4小时，得到酶解混合物，在转速为2500转/分钟的离心分离机分离后，得到酶解液备用，残渣另作它用；
（3） 于酶解液中添加葡萄糖和无机盐，使得糖浓度为90克/升，无机盐浓度为9克/升,得到发酵培养基,用酸碱剂调节发酵培养基的pH值为6.0；
（4）将发酵培养基常规灭菌后，按活菌浓度为108cfu/ml的菌悬液、10％ (v/v)的接种量接种产DHA菌株裂殖壶菌 (Schizochytrium)到发酵罐中进行发酵，发酵5-6天，其间不定时搅拌，得到发酵液；
（5）于发酵液中添加5.0g/L维生素E作为抗氧化剂，添加0.3g/L壳聚糖作为絮凝剂，絮凝40min后，离心分离得到发酵底物，将发酵底物用蒸馏水洗涤干净，60-80℃温度干燥后即得到二十二碳六烯酸复合物。
Claims (1)
1.从鱼加工副产品中提取二十二碳六烯酸的方法，其特征在于所述方法包括下述步骤：
（1）将鱼加工后的副产品洗净，以固液重量比是1：1-1.2的比例加入水，再磨成浆状得到鱼杂匀浆；
（2） 取鱼杂匀浆加热至50-60℃，加入糖化酶、蛋白酶和纤维素酶进行复合酶解，使得每克鱼杂匀浆中添加糖化酶100～300U、蛋白酶15～35U、纤维素酶10～20U，酶解时间3-5小时，得到酶解混合物，在转速为2500-5000转/分钟的离心分离机分离后，得到酶解液备用，残渣另作它用；
（3） 于酶解液中添加葡萄糖和无机盐，使得糖浓度为80～100克/升，无机盐浓度为2.5-15.5克/升,得到发酵培养基,用酸碱剂调节发酵培养基的pH值为5.5-7.0；
（4）将发酵培养基常规灭菌后，按活菌浓度为108～109cfu/ml的菌悬液、10％ (v/v)的接种量接种产DHA菌株裂殖壶菌到发酵罐中进行发酵，发酵5-6天，其间不定时搅拌，得到发酵液；
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