CN106474259A - 一种治疗流行性感冒的中药制剂及其制备方法及应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种治疗流行性感冒的中药制剂及其制备方法及应用,所述中药制剂按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶16~22份、大黄5~9份、透骨草8~13份和铁力木3~6份;将辣椒叶、透骨草和铁力木洗净,粉碎,混合,乙醇热回流提取两次,合并提取液,浓缩,加入等量的蜂蜜,浓缩成稠膏;将大黄洗净,粉碎,与乙醇加热至沸腾回流,过滤,收集渗漉液,浓缩至浸膏;将稠膏与浸膏混合,制成散剂,即得。经临床验证,本发明中药制剂对流行性感冒的治愈率为90~94%,总有效率高达100%。
Description
技术领域
本发明涉及中药技术领域,具体是一种治疗流行性感冒的中药制剂及其制备方法及应用。
背景技术
流行性感冒(简称流感)是流感病毒引起的急性呼吸道感染,也是一种传染性强、传播速度快的疾病,其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。流行性感冒典型的临床症状是:急起高热、全身疼痛、显著乏力和轻度呼吸道症状。一般秋冬季节是其高发期,所引起的并发症和死亡现象非常严重。该病是由流感病毒引起,可分为甲(A)、乙(B)、丙(C)三型,甲型病毒经常发生抗原变异,传染性大,传播迅速,极易发生大范围流行。甲型H1N1也就是甲型一种。本病具有自限性,但在婴幼儿、老年人和存在心肺基础疾病的患者容易并发肺炎等严重并发症而导致死亡。
目前,临床上速效、显效的抗流感病毒药物较少,然而,由于疫情的蔓延和市场需求的推动,全球抗流感病毒药物市场创出新高。迄今为止,全球抵御流感病毒的主要措施仍以接种疫苗和西药为主,由于西药通常有不同程度的毒副作用,在临床上受到一定约束。在中药治疗领域,有不少用于治疗感冒的中成药,但都笼统的以清热解毒入手,疗效并不明显。
辣椒叶,为茄科植物辣椒的叶;性温,味苦;具有消肿涤络、杀虫止痒的作用。主水肿;顽癣;疥疮;冻疮;痈肿。
发明内容
本发明的目的在于提供一种对金黄色葡萄球菌和流感病毒引起的体内感染有显著的保护作用、毒副作用小的治疗流行性感冒的中药制剂及其制备方法及应用,经临床验证,该中药制剂对流行性感冒的治愈率为90~94%,总有效率高达100%。
为实现上述目的,本发明提供如下技术方案:
一种治疗流行性感冒的中药制剂,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶16~22份、大黄5~9份、透骨草8~13份和铁力木3~6份。
作为本发明进一步的方案:按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶18~20份、大黄6~8份、透骨草10~12份和铁力木3~5份。
作为本发明进一步的方案:按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶20份、大黄7份、透骨草10份和铁力木4份。
所述的治疗流行性感冒的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将辣椒叶、透骨草和铁力木洗净,粉碎,混合,加入相当于混合物质量3~4倍的体积浓度为92~98%的乙醇溶液,加热回流2~3h,提取,过滤获得第一提取液;过滤获得的药渣再加入相当于所述药渣质量2~3倍的体积浓度为90~95%的乙醇溶液,加热回流1~2h,提取,过滤获得第二提取液;将第一提取液和第二提取液合并,减压浓缩除去乙醇溶剂,加入等量的蜂蜜,经减压浓缩成65℃下相对密度为1.14~1.16的稠膏,备用;
(2)将大黄洗净,粉碎,加入其质量5~6倍的体积浓度为75~80%的乙醇溶液,加热至沸腾回流2~3h,过滤,采用渗漉法以每分钟1~2ml的速度缓缓渗漉,收集渗漉液,随后在真空度0.07~0.08MPa下减压浓缩至55℃时相对密度为1.08~1.10的浸膏;
(3)将步骤(1)的稠膏与步骤(2)的浸膏混合,制成散剂,即为所述的治疗流行性感冒的中药制剂。
所述的治疗流行性感冒的中药制剂的用法及用量为:口服,每日两次,分早、晚服用,饭后半小时温开水冲服,每次服用0.5g(约合20g生药)。2天为一个疗程,2-3个疗程见效。
所述的中药制剂在制备治疗流行性感冒的药物中的应用。
与现有技术相比,本发明的有益效果是:本发明中药制剂配方简单,所用原料来源广、价格低廉,通过对本发明中药制剂进行的急性毒性实验和药效学实验,结果表明本发明中药制剂在体外有明显的抗病毒、抗细菌作用,并对金黄色葡萄球菌和流感病毒引起的体内感染有显著的保护作用,同时本发明中药制剂的毒副作用小,适于临床推广使用。经临床验证,本发明中药制剂对流行性感冒的治愈率为90~94%,总有效率高达100%。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例1
本发明实施例中,一种治疗流行性感冒的中药制剂,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶16份、大黄9份、透骨草8份和铁力木6份。
所述的治疗流行性感冒的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将辣椒叶、透骨草和铁力木洗净,粉碎,混合,加入相当于混合物质量3倍的体积浓度为98%的乙醇溶液,加热回流2h,提取,过滤获得第一提取液;过滤获得的药渣再加入相当于所述药渣质量2倍的体积浓度为95%的乙醇溶液,加热回流1h,提取,过滤获得第二提取液;将第一提取液和第二提取液合并,减压浓缩除去乙醇溶剂,加入等量的蜂蜜,经减压浓缩成65℃下相对密度为1.14的稠膏,备用;
(2)将大黄洗净,粉碎,加入其质量5倍的体积浓度为80%的乙醇溶液,加热至沸腾回流2h,过滤,采用渗漉法以每分钟2ml的速度缓缓渗漉,收集渗漉液,随后在真空度0.08MPa下减压浓缩至55℃时相对密度为1.08的浸膏;
(3)将步骤(1)的稠膏与步骤(2)的浸膏混合,制成散剂,即为所述的治疗流行性感冒的中药制剂。
实施例2
本发明实施例中,一种治疗流行性感冒的中药制剂,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶22份、大黄5份、透骨草13份和铁力木3份。
所述的治疗流行性感冒的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将辣椒叶、透骨草和铁力木洗净,粉碎,混合,加入相当于混合物质量4倍的体积浓度为92%的乙醇溶液,加热回流3h,提取,过滤获得第一提取液;过滤获得的药渣再加入相当于所述药渣质量3倍的体积浓度为90%的乙醇溶液,加热回流2h,提取,过滤获得第二提取液;将第一提取液和第二提取液合并,减压浓缩除去乙醇溶剂,加入等量的蜂蜜,经减压浓缩成65℃下相对密度为1.16的稠膏,备用;
(2)将大黄洗净,粉碎,加入其质量6倍的体积浓度为75%的乙醇溶液,加热至沸腾回流3h,过滤,采用渗漉法以每分钟1ml的速度缓缓渗漉,收集渗漉液,随后在真空度0.07MPa下减压浓缩至55℃时相对密度为1.10的浸膏;
(3)将步骤(1)的稠膏与步骤(2)的浸膏混合,制成散剂,即为所述的治疗流行性感冒的中药制剂。
实施例3
本发明实施例中,一种治疗流行性感冒的中药制剂,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶18份、大黄8份、透骨草10份和铁力木5份。
所述的治疗流行性感冒的中药制剂的制备方法与实施例1相同。
实施例4
本发明实施例中,一种治疗流行性感冒的中药制剂,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶20份、大黄6份、透骨草12份和铁力木3份。
所述的治疗流行性感冒的中药制剂的制备方法与实施例2相同。
实施例5
本发明实施例中,一种治疗流行性感冒的中药制剂,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶20份、大黄7份、透骨草10份和铁力木4份。
所述的治疗流行性感冒的中药制剂的制备方法,包括以下步骤:
(1)将辣椒叶、透骨草和铁力木洗净,粉碎,混合,加入相当于混合物质量4倍的体积浓度为95%的乙醇溶液,加热回流3h,提取,过滤获得第一提取液;过滤获得的药渣再加入相当于所述药渣质量3倍的体积浓度为92%的乙醇溶液,加热回流2h,提取,过滤获得第二提取液;将第一提取液和第二提取液合并,减压浓缩除去乙醇溶剂,加入等量的蜂蜜,经减压浓缩成65℃下相对密度为1.16的稠膏,备用;
(2)将大黄洗净,粉碎,加入其质量6倍的体积浓度为78%的乙醇溶液,加热至沸腾回流3h,过滤,采用渗漉法以每分钟1ml的速度缓缓渗漉,收集渗漉液,随后在真空度0.07MPa下减压浓缩至55℃时相对密度为1.10的浸膏;
(3)将步骤(1)的稠膏与步骤(2)的浸膏混合,制成散剂,即为所述的治疗流行性感冒的中药制剂。
一、急性毒性试验
1、预试验
健康昆明种小鼠10只,雌雄各半,体重20~22g。一次灌胃给予本发明中药制剂,最大给药浓度为70%(m/v)水溶液、小鼠的最大给药体积为0.3ml/10g,连续观察7d。小鼠未见明显毒性反应,体重正常增长,无一死亡。因而进行最大给药量试验。
2、最大给药量试验方法
健康昆明种小鼠20只,雌雄各半,体重20~22g。禁食不禁水12h后灌胃给予70%中药制剂1次,给药容积为0.3ml/10g。给药后继续禁食4h。
给药后连续观察12h,观察动物毛色、精神状态、自主活动、呼吸、口鼻分泌物、饮食、二便,出现症状的起始时间、恢复时间等。异日不定期多次观察,连续观察14d。于给药前、给药后7d、14d各测量一次体重。体重变化如表1所示。观察期结束后,颈椎脱臼处死全部试验动物。解剖,肉眼观察动物外表、全身各脏器,记录主要脏器有无质地、颜色、体积等变化。若发现异常则作组织病理学检查。心、肝、脾、肺、肾、胃等主要脏器置10%甲醛溶液中固定保存,待进行组织病理学检查。
表1 小鼠体重变化表(n=10,±S)
结果:小鼠给药后,活动明显减少,静卧,30min内均全部恢复,未见呼吸改变、运动异常、惊厥、流泪等症状,鼻、眼无分泌物,二便未见异常。观察期间小鼠饮食、行为活动正常,精神状态良好,动物体重正常增加。观察期结束后,解剖观察心、肝、脾、肺、肾、胃等主要脏器未见异常改变。测得中药制剂小鼠灌胃1d内最大给药剂量为21g/kg。
二、药效学实验
1、试验材料
病毒株:流感病毒A3、甲型H1N1病毒、RSV病毒、流感病毒亚甲型FM1(由中国预防医学科学院病毒研究所提供提供)。
细胞模型:狗肾细胞MDCK细胞、Hep-11(由中国医学科学院基础医学研究所提供)。
菌株:金黄色葡萄球菌(CMCC(B)26001-25)、大肠杆菌(CMCC(B)44104-4)、肺炎链球菌、甲型溶血性链球菌、乙型溶血性链球菌(CMCC(B)32172-10)均由中国药品生物制品检定所提供。
阳性对照药:连花清瘟胶囊(石家庄以岭药业股份有限公司提供)、利巴韦林口服溶液(辅仁药业集团有限公司提供)。
实验动物:健康昆明种小鼠(南京中医药大学实验动物中心提供,实验动物饲养许可证号:SYXK(苏)2002-0002)。
受试品:按实施例5的配方及制备方法所制得的中药制剂。
2、体外抗病毒实验
将MDCK细胞和Hep-Ⅱ细胞按常规方法传代培养于96孔细胞板上,长成单层后,弃去培养液,分别加入100倍半数组织培养感染量(TCID50)的流感病毒液A3、甲型流感H1N1病毒和RSV病毒液,置CO2培养箱37℃吸附2h。设病毒对照组、细胞对照组、阳性对照利巴韦林口服溶液组、阳性对照连花清瘟胶囊组和受试组。将受试品配成系列浓度,加入样品测试孔,使药物终浓度分别为5、10、20、40、70mg/ml,置CO2培养箱中37℃时培养3d后,观察细胞变化。结果如表2所示。
由表2可以看出:本发明中药制剂在≥20mg/ml时对流感病毒A3引起的细胞病变有抑制作用,在≥40mg/ml时对甲型流感H1N1病毒、RSV病毒引起的细胞病变有抑制作用。
表2 本发明中药制剂对流感病毒和RSA病毒引起的细胞病变的影响
3、体内抗病毒实验
3.1 分组
取小鼠120只,随机分为6组,分别为中药制剂高剂量、中药制剂中剂量、中药制剂低剂量组,阳性对照组(连花清瘟胶囊组、利巴韦林口服溶液组)和空白对照组。
3.2 实验方法
自感染病毒前1d开始灌胃给药,空白对照组给同体积蒸馏水,中药制剂高剂量、中药制剂中剂量、中药制剂低剂量组分别给予16g/kg、8g/kg、4g/kg的本发明中药制剂,利巴韦林口服溶液组肌内注射给药。在乙醚浅麻醉下,滴鼻感染10倍半数感染量(MID50)的流感病毒液0.05ml/只,感染后继续给药5d,末次给药后4h解剖小鼠,收集呼吸道洗液,接种于已长满单层细胞的96孔板,置CO2培养箱中37℃时培养3d后,观察细胞变化,计算各组的感染率。结果见表3。
由表3可以看出:本发明中药制剂高剂量(16g/kg)、中药制剂中剂量(8g/kg)可明显降低小鼠的病毒感染率(P<0.05和P<0.01),而中药制剂低剂量(4g/kg)对感染率无明显影响。
表3 本发明中药制剂对流感病毒感染小鼠的保护作用
4、对小鼠流感病毒性肺炎的影响
取健康昆明种雄性小鼠60只,随机分成正常对照组、病毒感染对照组、利巴韦林口服溶液组、中药制剂低剂量组、中药制剂中剂量组、中药制剂高剂量组共6组,每组10只。除正常对照组外,其余各组小鼠用乙醚轻度麻醉,选用流感病毒亚甲型鼠肺适应株FM1的15个LD50病毒浓度,滴鼻感染小鼠,每只0.05ml。从感染1d开始按0.1ml/10g的剂量灌胃给药,每天2次,连续5d,病毒感染对照组以等体积蒸馏水灌胃。第6天称取小鼠体重后解剖,肉眼观察肺部病变,记录肺部肝样实变的程度,摘取全肺称重,与体重计算肺指数值,并求出肺指数抑制率。计算公式如下:肺指数=[肺重(g)/体重(g)]×100%肺指数抑制率=(病毒对照组肺指数均值-试验组肺指数均值)/病毒对照组肺指数均值×100%,结果如表4所示。
由表4可以看出:中药制剂中剂量组、中药制剂高剂量组小鼠的肺指数值明显低于病毒感染对照组(P<0.05),说明本发明中药制剂对流感病毒引起的小鼠肺部炎症有明显抑制作用。
表4 本发明中药制剂对小鼠流感病毒性肺炎的影响
5、体外抗菌实验
按试管稀释法稀释药液并分别加人试管,加人0.05ml浓度为7.5×106/ml的待检菌,并设细菌对照管和空白对照管,以连花清瘟胶囊作为阳性对照。在37℃培养箱孵育18h,观察结果,求出样品对各种待检菌的最小抑菌浓度(MlCs)。
结果:本发明中药制剂对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、甲型溶血性链球菌、肺炎球菌、乙型溶血性链球菌均有抑制作用,其MICS值见表5。
表5 本发明中药制剂和连花清瘟胶囊对不同细菌的MICs比较
项目 | 中药制剂 | 连花清瘟胶囊 |
大肠杆菌 | 850 | 450 |
金黄色葡萄球菌 | 710 | 250 |
甲型溶血性链球菌 | 192 | 62.5 |
肺炎球菌 | 30 | 20 |
乙型溶血性链球菌 | 101 | 78 |
6、体内抗菌实验
将小鼠随机分为6组,即中药制剂高剂量16g/kg组、中药制剂中剂量8g/kg组、中药制剂低剂量4g/kg组,连花清瘟胶囊3g/kg组,青霉素10万U/kg(相当于临床用量的20倍)组和空白对照组。每组20只,取培养18h的金黄色葡萄球菌,用5%胃膜素稀释为最小致死量(MLD)的菌悬液,每鼠腹腔注射0.5ml。于感染后1、6及12h灌胃给药,阳性药青霉素肌内注射,空白对照组给溶媒。记录小鼠死亡数,作统计学处理。
结果:中药制剂16、8g/kg可明显降低金黄色葡萄球菌感染小鼠的死亡率(P<0.05和P<0.01),提示它有较好的体内抗菌作用,结果见表6。
表6 本发明中药制剂对金黄色葡萄球菌感染小鼠的保护作用(in vivo)
综上所述,本发明中药制剂配方简单,所用原料来源广、价格低廉,通过对本发明中药制剂进行的急性毒性实验和药效学实验,结果表明本发明中药制剂在体外有明显的抗病毒、抗细菌作用,并对金黄色葡萄球菌和流感病毒引起的体内感染有显著的保护作用,同时本发明中药制剂的毒副作用小,适于临床推广使用。
三、临床试验
1、病例选择
选择确诊的流行性感冒患者350例临床观察,其中男性137例,女性213例,年龄8~64岁,平均年龄30岁,病程2天~半个月。将该350例患者随机分为治疗1~5组、对照1~2组共七组,每组50例,各组病例的病程、症状轻重程度基本一致,无显著差异,具有可比性。
2、治疗方法
治疗1~5组分别服用本发明实施例1-5制得的散剂,口服,每日两次,分早、晚服用,饭后半小时温开水冲服,每次服用0.5g(约合20g生药)。2天为一个疗程,2-3个疗程见效。
对照1组服用的散剂,仅含有大黄、透骨草和铁力木三种组分,其余与实施例5完全相同。口服,每日两次,分早、晚服用,饭后半小时温开水冲服,每次服用0.5g(约合20g生药)。2天为一个疗程,2-3个疗程见效。
对照2组服用的散剂,仅含有辣椒叶这一种组分,其余与实施例5完全相同。口服,每日两次,分早、晚服用,饭后半小时温开水冲服,每次服用0.5g(约合20g生药)。2天为一个疗程,2-3个疗程见效。
3、疗效判定标准
痊愈:治疗3天以内体温恢复正常,流行性感冒症状的症状全部消失;
显效:治疗3天以内体温正常,流行性感冒症状的大部分症状消失;
有效;治疗3天以内体温较以前降低,流行性感冒症状的主要症状部分消失;
无效:治疗3天以内体温未降或升高,流行性感冒症状的主要症状没有改善。
4、治疗结果
表7 各组的疗效比较
项目 | 病例数 | 治愈数 | 显效数 | 有效数 | 无效数 | 治愈率 | 总有效率 |
治疗1组 | 50 | 45 | 2 | 3 | 0 | 90% | 100% |
治疗2组 | 50 | 45 | 3 | 2 | 0 | 90% | 100% |
治疗3组 | 50 | 46 | 3 | 1 | 0 | 92% | 100% |
治疗4组 | 50 | 46 | 4 | 0 | 0 | 92% | 100% |
治疗5组 | 50 | 47 | 3 | 0 | 0 | 94% | 100% |
对照1组 | 50 | 10 | 5 | 7 | 28 | 20% | 44% |
对照2组 | 50 | 0 | 3 | 5 | 42 | 0% | 16% |
经过2~3个疗程的治疗后,各组的疗效如表1所示:治疗组的治愈率为90~94%,总有效率为100%;与对照组相比,治疗组的治愈率和总有效率均远远优于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),尤其治疗5组的疗效远远优于对照1组与对照2组的疗效之和,说明辣椒叶在本发明中药制剂中具有不可替代的、重要的作用,辣椒叶与本发明中药制剂中其余组分有明显的协同增效作用。且在整个治疗过程中,各组均未发生明显不良反应。
5、典型病例
病例1:汪某,男,8岁。常突然起病,畏寒高热,体温可达39~40℃,多伴头痛、全身肌肉关节酸痛、极度乏力、食欲减退等全身症状,服用实施例5制得的散剂3天后,痊愈。
病例2:丁某,女,62岁。因持续高热1天,抽搐昏厥2次住院,用青霉素、丁卡、地塞米松输液治疗,每次输液后休温降至正常,第2天又高热抽搐,如此反复1周。服用实施例5制得的散剂4天后痊愈。
病例3:蔡某,女,31岁,急起高热、全身疼痛、显著乏力和轻度呼吸道症状。服用实施例5制得的散剂5天后,诸症皆愈。
病例4:陈某,男,48岁。咽喉痛、干咳,可有鼻塞、流涕、胸骨不适,颜面潮红,眼结膜外眦轻度充血,服用实施例5制得的散剂6天后,痊愈。
对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。
此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。
Claims (5)
1.一种治疗流行性感冒的中药制剂,其特征在于,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶16~22份、大黄5~9份、透骨草8~13份和铁力木3~6份。
2.根据权利要求1所述的治疗流行性感冒的中药制剂,其特征在于,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶18~20份、大黄6~8份、透骨草10~12份和铁力木3~5份。
3.根据权利要求1所述的治疗流行性感冒的中药制剂,其特征在于,按照质量份数计,由以下原料制成:辣椒叶20份、大黄7份、透骨草10份和铁力木4份。
4.根据权利要求1~3任一所述的治疗流行性感冒的中药制剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将辣椒叶、透骨草和铁力木洗净,粉碎,混合,加入相当于混合物质量3~4倍的体积浓度为92~98%的乙醇溶液,加热回流2~3h,提取,过滤获得第一提取液;过滤获得的药渣再加入相当于所述药渣质量2~3倍的体积浓度为90~95%的乙醇溶液,加热回流1~2h,提取,过滤获得第二提取液;将第一提取液和第二提取液合并,减压浓缩除去乙醇溶剂,加入等量的蜂蜜,经减压浓缩成65℃下相对密度为1.14~1.16的稠膏,备用;
(2)将大黄洗净,粉碎,加入其质量5~6倍的体积浓度为75~80%的乙醇溶液,加热至沸腾回流2~3h,过滤,采用渗漉法以每分钟1~2ml的速度缓缓渗漉,收集渗漉液,随后在真空度0.07~0.08MPa下减压浓缩至55℃时相对密度为1.08~1.10的浸膏;
(3)将步骤(1)的稠膏与步骤(2)的浸膏混合,制成散剂,即为所述的治疗流行性感冒的中药制剂。
5.根据权利要求1~3任一所述的中药制剂在制备治疗流行性感冒的药物中的应用。
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俞丽霞等主编: "《中药药理学》", 31 December 2012, 浙江大学出版社 * |
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