CN106432045B

CN106432045B - 一种泊马度胺杂质的合成方法

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Publication number: CN106432045B
Application number: CN201610496336.0A
Authority: CN
Inventors: 唐田; 彭江华; 吴婧; 王彦青; 黎万; 杨经安; 佘琴; 冯汉林
Original assignee: Shenzhen Neptune Medical Science And Technology Research Institute Co Ltd
Current assignee: Shenzhen Neptune medical science and Technology Research Institute Co., Ltd.
Priority date: 2016-06-29
Filing date: 2016-06-29
Publication date: 2018-12-18
Anticipated expiration: 2036-06-29
Also published as: CN106432045A

Abstract

本发明公开了一种泊马度胺杂质(S)‑5‑氨基‑4‑(4‑氨基‑1,3‑二氧异吲哚‑2‑基)‑5‑氧代戊酸合成方法，包括：S1.酰化反应：将3‑硝基邻苯二甲酸酐(1)、L‑异谷酰胺、分子筛、N,N‑二甲基甲酰胺加到反应瓶中，在80～120℃反应15～20h，反应液经后处理得(S)‑5‑硝基‑4‑(4‑氨基‑1,3‑二氧异吲哚‑2‑基)‑5‑氧代戊酸(2)；S2.氢化还原反应：将上述所得(S)‑5‑硝基‑4‑(4‑氨基‑1,3‑二氧异吲哚‑2‑基)‑5‑氧代戊酸(2)加入反应瓶中，再加入钯炭和甲醇，氢气存在下，室温搅拌反应12～20h，减压浓缩得产品。具有操作简单、收率高、纯度高的优点。提升了泊马度胺成品检测分析对杂质M10的准确定性。

Description

一种泊马度胺杂质的合成方法

技术领域

本发明属于化学制药技术领域，具体涉及一种泊马度胺杂质M10：(S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸的合成方法。

背景技术

多发性骨髓瘤(MM)可以有效治疗但不能够治愈。97%的患者诊断时年龄超过40岁，仅3%的病例发病年龄小于40岁。80%的病例发生在60岁以后，而中国正快速步入老龄化社会，60岁及以上人口占全国总人口的13.26%，接近一亿八千万人。随着老龄人口基数的增长，多发性骨髓瘤的发病率将呈上升趋势。

泊马度胺的化学名为：4-氨基-2-(2,6-二氧-哌啶-3-基)-异吲哚啉-1,3-二酮，泊马度胺是一种沙利度胺类似物，是一种有抗肿瘤活性免疫调节剂。在体外细胞学试验，泊马度胺抑制造血肿瘤细胞增殖和诱导凋亡。此外，泊马度胺抑制来那度胺-耐药多发性骨髓瘤细胞株的增殖和在来那度胺-敏感和来那度胺-耐药细胞株与地塞米松协同诱导肿瘤细胞凋亡。泊马度胺增强T细胞和天然杀伤(NK)细胞介导的免疫和抑制单核细胞促炎性细胞因子的生成(如，TNF-α和IL-6)。在小鼠肿瘤模型和和体外脐带模型中泊马度胺显示抗血管生成活性。

杂质M10 (S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸为泊马度胺放置过程中降解而来，可能残留到泊马度胺最终产品中，影响产品质量，其结构式如(Ⅰ)所示。经检索，尚未有关于该杂质合成的文献报道，因此，提供一种泊马度胺杂质M10的合成方法用于杂质标准品的制备具有重要的现实意义。

（Ⅰ）

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的缺点，提供一种泊马度胺杂质M10：(S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸的合成方法，该合成方法具有操作简单、原料便宜易得，收率高、纯度高的优点。

本发明的目的通过以下技术方案来实现：一种泊马度胺杂质M10的合成方法，所述杂质M10为(S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸，合成路线如下：

具体制备方法包括以下步骤：

S1. 酰化反应：将3-硝基邻苯二甲酸酐(1)、L-异谷酰胺、分子筛、N,N-二甲基甲酰胺加到反应瓶中，在80～120℃反应15～20h，反应液经后处理得(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)；

S2.氢化还原反应：将上述所得(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)加入反应瓶中，再加入钯炭和甲醇，氢气存在下，室温搅拌反应12～20h，减压浓缩得泊马度胺杂质。

进一步地，步骤S1中所述3-硝基邻苯二甲酸酐(1)、L-异谷酰胺和分子筛的重量比为1：0.7～1.5：2～5；

进一步地，步骤S1中所述3-硝基邻苯二甲酸酐(1)与N,N-二甲基甲酰胺的重量比为1：10~30；

进一步地，步骤S2中所述(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)、钯炭的重量比为1：0.01～0.1；

进一步地，步骤S2中所述(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)与甲醇的重量比为1：5~15；

进一步地，步骤S1中所述后处理方法为：反应完毕后将反应液降至室温，过滤分子筛。减压浓缩得到固体，置于甲醇和水的混合溶剂打浆，然后过滤，滤出的固体用水洗涤，在50～60℃减压干燥4～8h，所得固体即(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)。

进一步地，所述步骤S2中采用后处理方法为：甲醇稀释，硅藻土过滤，减压浓缩，异丙醇打浆洗涤。

本发明具有以下优点: 本发明以3-硝基邻苯二甲酸酐为原料，经酰化反应和（钯炭/氢）还原反应得到泊马度胺杂质M10，合成高纯度的泊马度胺杂质M10可作为泊马度胺成品检测分析中的杂质M10标准品，从而提升泊马度胺成品检测分析对杂质M10的准确定位性和定性，有利于加强对该杂质的控制，进而提高泊马度胺成品质量，本发明提供的方法原料便宜易得，操作简单、所得产品HPLC纯度≥98.5％。

下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细说明，根据本领域普通技术知识和惯用手段做出各种替换和变更，均包括在本发明的范围内。

附图说明

图1 为泊马度胺杂质M10纯度HPLC 图谱。

图2 为泊马度胺杂质M10质谱图。

图3 为泊马度胺杂质M10核磁共振氢谱图。

具体实施方式

实施例1：泊马度胺杂质M10：(S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸的合成

将3-硝基邻苯二甲酸酐(1) (25.0 g, 129 mmol)、L-异谷氨酰胺(18.5 g,126mmol)、分子筛(3Å, 92 g)混合于N,N-二甲基甲酰胺(400 mL)中，在90˚C加热16小时。反应完全后将反应液将至室温，过滤掉分子筛。将滤液浓缩，浓缩得到黄色固体，置于甲醇和水（V/V=3:26, 232ml）的混合溶剂中室温搅拌过夜，然后过滤。滤出的固体用水(100ml)洗涤，然后在真空烘箱中（55˚C）干燥6小时得到(S)- 5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2) (21.0 g，浅黄色固体，产率53.0%）。LC/MS = 344.2 [M+Na]⁺, 1H NMR(400 MHz, DMSO-d ₆): δ 12.06 (s, 1H), 8.29 (d, 1H), 8.18 (d, 1H), 8.07 (t,1H), 7.62 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 4.62 (dd, 1H), 2.43-2.11 (m, 4H)。

将上述(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2) (21.0g,65.5 mmol)、10% 钯碳(694 mg)、甲醇(200 mL)的混合物在氢气球下室温搅拌18小时。反应完全后加入甲醇(1 L)稀释。将反应液通过硅藻土过滤。滤液浓缩后用异丙醇（100ml）打浆洗涤，然后在真空烘箱中（55˚C）干燥6小时得到泊马度胺杂质M10 (9.26 g, 黄色固体，HPLC纯度99.0%, 产率49.0%)。LC/MS = 314.2 [M+Na]⁺, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ12.09 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.46 (t, J = 8 Hz, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.99-6.95(m, 2H), 6.44 (s, 2H), 4.54-4.50 (m, 1H), 2.38-2.34 (m, 1H), 2.23-2.12 (m,3H)。

泊马度胺杂质M10HPLC 图谱如图1 所示，纯度为99.0％。

泊马度胺杂质M10质谱图如图2 所示，MS ：314[M+Na]⁺ 。

泊马度胺杂质M10核磁共振氢谱如图3 所示，检测结果与泊马度胺杂质M10结构相符。

实施例2：泊马度胺杂质M10：(S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸的合成

将3-硝基邻苯二甲酸酐(1) (25.0 g, 129 mmol)、L-异谷氨酰胺(17.5 g,119mmol)、分子筛(3Å, 50 g)混合于N,N-二甲基甲酰胺(266 mL)中，在80˚C加热15小时。反应完全后将反应液将至室温，过滤掉分子筛。将滤液浓缩，浓缩得到黄色固体，置于甲醇和水（V/V=3:26, 232ml）的混合溶剂中室温搅拌过夜，然后过滤。滤出的固体用水(100ml)洗涤，然后在真空烘箱中（50˚C）干燥4小时得到(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2) (20.0 g，浅黄色固体，产率50.5%）。

将上述(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2) (21.0g,65.5 mmol)、10% 钯碳(210 mg)、甲醇(133 mL)的混合物在氢气球下室温搅拌12小时。反应完全后加入甲醇(1 L)稀释。将反应液通过硅藻土过滤。滤液浓缩后用异丙醇（100ml）打浆洗涤，然后在真空烘箱中（50˚C）干燥4小时得到化合物M10 (9.0 g, 黄色固体，HPLC纯度98.7%, 产率47.6%)。

实施例3：泊马度胺杂质M10：(S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸的合成

将3-硝基邻苯二甲酸酐(1) (25.0 g, 129 mmol)、L-异谷氨酰胺(37.5 g,255mmol)、分子筛(3Å, 125 g)混合于N,N-二甲基甲酰胺(798 mL)中，在120˚C加热20小时。反应完全后将反应液将至室温，过滤掉分子筛。将滤液浓缩，浓缩得到黄色固体，置于甲醇和水（V/V=3:26, 232ml）的混合溶剂中室温搅拌过夜，然后过滤。滤出的固体用水(100ml)洗涤，然后在真空烘箱中（60˚C）干燥8小时得到(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2) (20.5 g，浅黄色固体，产率51.8%）。

将上述(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2) (21.0g,65.5 mmol)、10% 钯碳(2.10 g)、甲醇(399 mL)的混合物在氢气球下室温搅拌20小时。反应完全后加入甲醇(1 L)稀释。将反应液通过硅藻土过滤。滤液浓缩后用异丙醇（100ml）打浆洗涤，然后在真空烘箱中（60˚C）干燥8小时得到化合物M10 (9.2 g, 黄色固体，HPLC纯度98.8%, 产率48.5%)。

Claims

1.一种泊马度胺杂质的合成方法，所述杂质为M10： (S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸，其特征在于，合成路线如下：

具体制备方法包括以下步骤：

S1. 酰化反应：将3-硝基邻苯二甲酸酐(1)、L-异谷酰胺、分子筛3Å、N,N-二甲基甲酰胺加到反应瓶中，在80～120℃反应15～20h，反应液经后处理得(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)；

S2.氢化还原反应：将上述所得(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)加入反应瓶中，再加入钯炭和甲醇，氢气存在下，室温搅拌反应12～20h，减压浓缩得泊马度胺杂质M10。

2.如权利要求1 所述的泊马度胺杂质的合成方法，其特征在于，步骤S1中所述3-硝基邻苯二甲酸酐(1)、L-异谷酰胺和分子筛的重量比为1：0.7～1.5：2～5。

3.如权利要求1 所述的泊马度胺杂质的合成方法，其特征在于，步骤S1中所述3-硝基邻苯二甲酸酐(1)与N,N-二甲基甲酰胺的重量比为1：10~30。

4.如权利要求1 所述的泊马度胺杂质的合成方法，其特征在于，步骤S2 中所述(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)、钯炭的重量比为1：0.01～0.1。

5.如权利要求1 所述的泊马度胺杂质的合成方法，其特征在于，步骤S1 中所述后处理方法为：反应完毕后将反应液降至室温，过滤分子筛；减压浓缩得到固体，置于甲醇和水的混合溶剂打浆，然后过滤，滤出的固体用水洗涤，在50～60℃减压干燥4～8h，所得固体即(S)-5-氨基-4-(4-硝基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸(2)。

6.如权利要求1 所述的泊马度胺杂质的合成方法，其特征在于，所述的步骤S2 中采用后处理方法为：甲醇稀释，硅藻土过滤，减压浓缩，异丙醇打浆洗涤；在50～60℃减压干燥4～8h，所得固体即(S)-5-氨基-4-(4-氨基-1,3-二氧异吲哚-2-基)-5-氧代戊酸。