CN106418124A - 酵母提取物的去味方法及对酵母味成分的鉴定方法 - Google Patents

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倪贺
刘峻熙
李海航
李慧
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Abstract

本发明公开一种酵母提取物的去味方法:用有机溶剂对酵母提取物的水溶液进行萃取，分离萃取后的有机相以去除所述酵母提取物的水溶液中的酵母味成分。还提供一种酵母味成分的鉴定方法，其包括以下步骤：用有机溶剂对酵母提取物的水溶液进行萃取，获取萃取后的有机相；用硅胶柱层析法对所述有机相中的溶质进行纯化；用结构分析手段对所述溶质进行鉴定。本发明酵母提取物的去味方法及对酵母味成分的鉴定方法能简便、高效地从酵母提取物中去除酵母味成分，并可对主要的酵母味成分进行分离和鉴定。本发明的应用，可有效去除酵母提取物中的酵母味，制备无酵母味的酵母提取物，大大提高酵母提取物的品质和价值及其在食品和化妆品等领域的应用范围。

Description

酵母提取物的去味方法及对酵母味成分的鉴定方法
技术领域
本发明涉及一种食品和生物制品加工领域，尤其涉及一种酵母提取物的去味方法，及对酵母味成分的鉴定方法。
背景技术
酵母提取物是从酵母细胞或其水解后的产物中抽提出来的浓缩物，包含蛋白质、多肽、氨基酸、核苷酸、维生素类、谷胱甘肽和微量元素等成分。酵母提取物含丰富的可溶性营养与风味物质，可被人体可直接吸收利用。酵母提取物中含多种生物活性肽，具有抗氧化、延缓衰老等多种生理药理活性，欧美、日本等的发达国家已经将酵母提取物应用于生物医药、食品、保健品、化妆品和饲料中。我国已有多个大型酵母菌及其提取物的生产企业，生产大量酵母菌及其提取物产品，用于食品和饲料等工业。同时，我国还需从国外大量进口酵母提取物。
酵母提取物有一种特殊的臭味，被称为“酵母味”。酵母提取物添加到食品和化妆品等产品中，会使产品产生酵母臭味。由于部分人群不喜欢酵母味，使酵母提取物在食品和化妆品中的应用受到很大的很限制。
发明内容
本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种处理酵母提取物的方法，以获得无酵母味的酵母提取物，大大提高酵母提取物的品质和价值及其在食品和化妆品等领域的应用。
本发明还提供了一种酵母味成分的鉴定方法，以便于对酵母提取物的去味效果进行验证。
为达到以上技术目的，本发明采用的技术方案如下：
首先提供一种酵母提取物的去味方法:用有机溶剂对酵母提取物的水溶液进行萃取，分离萃取后的有机相以去除所述酵母提取物的水溶液中的酵母味成分。
具体地，所述酵母提取物的水溶液源自酵母培养液或固体的酵母提取物的水溶液。
进一步地，所述有机溶剂选自中等极性或低极性的有机溶剂。
优选地，所述有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿和石油醚中的一种或两种及两种以上的组合。
进一步优选地，所述有机溶剂与酵母提取物的水溶液的体积比为1：1。
可选择地，所述萃取次数为至少一次。
其次提供一种酵母味成分的鉴定方法，其包括以下步骤：
用有机溶剂对酵母提取物的水溶液进行萃取，获取萃取后的有机相；
用硅胶柱层析法对所述有机相中的溶质进行纯化；
用结构分析手段对所述溶质进行鉴定。
具体地，所述用有机溶剂对酵母提取物的水溶液进行萃取的方法采用如前所述酵母提取物的去味方法。
优选地，对所述有机相中的溶质进行纯化之前，将所述有机相中的溶剂去除。所述溶剂通过旋转蒸发或真空干燥进行去除。
进一步地，将去除溶剂的所述溶质重新溶解于乙酸乙酯，用第一洗脱溶剂对所述乙酸乙酯相的溶质进行第一次硅胶柱层析，通过感官评价收集含有酵母味的洗脱液以作为第一洗脱液。
优选地，所述第一洗脱溶剂包含乙酸乙酯和甲醇，所述甲醇的浓度为0～100％。
更进一步地，用第二洗脱剂对所述第一洗脱液进行第二次硅胶柱层析，通过感官评价收集含有酵母味的洗脱液以作为第二洗脱液。
优选地，所述第二洗脱液包含1，2-二氯乙烷和乙醇，所述乙醇的浓度为0～20％。
更进一步地，用液相色谱-质谱联用的方法对所述第二洗脱液中的溶质进行分子结构的鉴定。
与现有技术相比较，本发明具有如下优势：
(1)经感官评价及含量测定，利用本发明能够快速、高效地去除酵母提取物中的酵母味。
(2)本发明设备投资少，操作简单，产品生产成本低，便于大规模生产。
(3)本发明鉴定了酵母味成分，为进一步分析酵母味成分的产生、含量及去除效果提供保证。
(4)本发明的实施将显著提高酵母提取物的品质和价值及其在食品和化妆品等领域的应用，有巨大的经济和社会效益。
附图说明
图1本发明酵母提取物的去味方法及对酵母味成分的鉴定方法的流程示意图。
图2为本发明第一次硅胶柱层析收集洗脱液TLC分析结果。
图3为本发明第二次硅胶柱层析收集洗脱液TLC分析结果。
图4为本发明获得酵母味成分的高效液相色谱分析结果。
图5为本发明获得酵母味成分的质谱分析结果。
图6为酵母味物质结构式示意图。
具体实施方式
以下结合附图和具体实施方式对本发明作进一步详细描述。
本发明酵母提取物的去味方法和酵母味成分的鉴定方法是可以看作是对酵母提取物处理流程中针对不同组分的工序，结合实际生产情况，这两个方法可以同时进行。
具体地，参考图1，该发明的具体操作步骤如下：
S1：制备酵母提取物的水溶液。
所述酵母提取物的水溶液可以来源于酵母培养液，或者来源于固体的酵母提取物的水溶液。
S2：萃取法去除酵母味成分。
用乙酸乙酯、氯仿或石油醚等中等极性或低极性有机溶剂进行液-液萃取，所述有机溶剂通常只选用一种，在特殊情况下，也可以选用两种及两种以上的组合物。
具体地，将2g酵母提取物溶于20ml水中，用等体积(20ml)的乙酸乙酯液液萃取1次或多次，通过感官评价(即嗅觉评价)直至酵母提取物的水溶液完全无酵母味，并获得无酵母味的水相和有酵母味的有机相。下一步，将所述有机相通过旋转蒸发或真空干燥去除溶剂后获得酵母味物质粗提物。
S3：酵母味成分分离纯化。
将酵母味物质粗提物溶于乙酸乙酯，以乙酸乙酯和甲醇组成的洗脱体系作为洗脱溶剂进行硅胶柱层析，分离纯化酵母味成分，其甲醇的浓度为0～100％，所述乙酸乙酯和甲醇优选的混合比例为80：20。
以1BV为单位收集11份柱层析第一洗脱液，利用薄层层析(TLC)分析柱层析分离效果(见图2)，并将各份洗脱液蒸干，通过感官评价收集含有酵母味的组分进行第二次硅胶柱层析。
第二次硅胶柱层析以1，2-二氯乙烷和乙醇组成的洗脱体系作为洗脱溶剂纯化酵母味成分，其乙醇的浓度为0～20％，所述1，2-二氯乙烷和乙醇优选的混合比例为90：10。
以1BV为单位收集10份柱层析第二洗脱液，利用TLC分析硅胶柱层析的分离效果。如图3所示，编号为4～8的所述第二洗脱液组分有一条迁移距离相同的层析带，推测该层析带指示了酵母味成分。
S4：酵母味成分鉴定。
将硅胶柱层析纯化获得的酵母味物质进行LC-MS分析，参考图4和图5的分析结果，确定酵母味成分为Brevianamide F，CAS:38136-70-8。
所述酵母味成分Brevianamide F，又名2,5-diketopiperazines，该物质为二酮哌嗪类化合物，具有涩味、苦味；其分子结构式如图6所示。
综上所述，本发明酵母提取物的去味方法及对酵母味成分的鉴定方法能简便、高效地从酵母提取物中去除酵母味成分，并可对主要的酵母味成分进行分离和鉴定。本发明的应用，可有效去除酵母提取物中的酵母味，制备无酵母味的酵母提取物，大大提高酵母提取物的品质和价值及其在食品和化妆品等领域的应用范围。
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但并不仅仅受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，均包含在本发明的保护范围之内。

Claims (15)

1.一种酵母提取物的去味方法，其特征在于，用有机溶剂对酵母提取物的水溶液进行萃取，分离萃取后的有机相以去除所述酵母提取物的水溶液中的酵母味成分。
2.如权利要求1所述的酵母提取物的去味方法，其特征在于，所述酵母提取物的水溶液源自酵母培养液或固体的酵母提取物的水溶液。
3.如权利要求1所述的酵母提取物的去味方法，其特征在于，所述有机溶剂选自中等极性或低极性的有机溶剂。
4.如权利要求3所述的酵母提取物的去味方法，其特征在于，所述有机溶剂为乙酸乙酯、氯仿和石油醚中的一种或两种及两种以上的组合。
5.如权利要求3所述酵母提取物的去味方法，其特征在于，所述有机溶剂与酵母提取物的水溶液的体积比为1：1。
6.如权利要求1所述的酵母提取物的去味方法，其特征在于，所述萃取次数为至少一次。
7.一种酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，其包括以下步骤：
用有机溶剂对酵母提取物的水溶液进行萃取，获取萃取后的有机相；
用硅胶柱层析法对所述有机相中的溶质进行纯化；
用结构分析手段对所述溶质进行鉴定。
8.如权利要求7所述的酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，所述用有机溶剂对酵母提取物的水溶液进行萃取的方法采用如权利要求1～6任意一项所述酵母提取物的去味方法。
9.如权利要求7所述的酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，对所述有机相中的溶质进行纯化之前，将所述有机相中的溶剂去除。
10.如权利要求9所述的酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，所述溶剂通过旋转蒸发或真空干燥进行去除。
11.如权利要求9所述的酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，将去除溶剂的所述溶质重新溶解于乙酸乙酯，用第一洗脱溶剂对所述乙酸乙酯相的溶质进行第一次硅胶柱层析，通过感官评价收集含有酵母味的洗脱液以作为第一洗脱液。
12.如权利要求11所述的酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，所述第一洗脱溶剂包含乙酸乙酯和甲醇，所述甲醇的浓度为0～100％。
13.如权利要求11所述的酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，用第二洗脱剂对所述第一洗脱液进行第二次硅胶柱层析，通过感官评价收集含有酵母味的洗脱液以作为第二洗脱液。
14.如权利要求13所述的酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，所述第二洗脱液包含1，2-二氯乙烷和乙醇，所述乙醇的浓度为0～20％。
15.如权利要求13所述的酵母味成分的鉴定方法，其特征在于，用液相色谱-质谱联用的方法对所述第二洗脱液中的溶质进行分子结构的鉴定。
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