CN106399106A - 一种室内敞口培养藻的方法 - Google Patents

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柴英辉
孙朦朦
于宏
周文礼
李连星
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
    • C12N1/12—Unicellular algae; Culture media therefor

Abstract

本发明提供了一种室内敞口培养藻的方法，将微藻使用培养溶液进行室内敞口培养，且加入碳酸氢钠以及营养物质，碳酸氢钠的浓度为0.0005g/L～0.003g/L；所述培养溶液为含有f/2培养基成分的海水。本发明实现了在室内微藻的快速生长，且同时通过不同药物刺激因素，使微藻在室内能够快速生长满足生产的需求及室外水环境的肥水工作，促使藻在5天达到浓度最高值，解决了微藻敞口在自然界下产量低和生长缓慢的问题和大量海水长途运输的费用。

Description

一种室内敞口培养藻的方法
技术领域
本发明涉及微藻培养技术领域，尤其涉及一种室内敞口培养藻的方法。
背景技术
微藻是单细胞或者由数个细胞组成的微小藻类。富含丰富的蛋白质、维生素、多不饱和脂肪酸等物质。一般用作水产养殖的开口饲料，尤其应用海鱼、海虾幼虫阶段早期的人工鱼苗阶段，市场上一般没有纯净的藻液，一般都是经过浓缩的藻液或者加入某些特殊物质保存的藻，在漫长的运输旅途中增加了运输费用和大量的人工费，如果保存不当还容易使藻液变质造成资源的浪费。
发明内容
有鉴于此，本发明旨在提出一种室内敞口培养藻的方法，该方法不但实现了藻脱离灭菌锅和培养箱问题，解决了微藻生长缓慢的问题，且同时保证藻转移到室外培养的稳定性，本发明适用于中小型企业培育藻稳定水环境养殖水体。
为达到上述目的，本发明的技术方案是这样实现的：
一种室内敞口培养藻的方法，将微藻使用培养溶液进行室内敞口培养，且加入碳酸氢钠以及营养物质，碳酸氢钠的浓度为0.0005g/L～0.003g/L；优选的，0.001g/L；所述培养溶液为含有f/2培养基成分的海水。
优选的，所述微藻的体积含量为10％～15％。
优选的，所述营养物质为生物素、葡萄糖、尿素、维生素B1、维生素B12中的一种或者两种以上混合物。
优选的，所述微藻为塔胞藻、等鞭金藻、海链藻中的一种。
优选的，每升海水中添加的f/2培养基，包括如下组分，硝酸钠75mg、磷酸二氢钠5mg、硅酸钠30mg、硫酸锌0.023mg、硫酸铜0.01mg、氯化锰0.012mg、氯化铁3.16mg、钼酸钠0.07mg、乙二铵四乙酸钠4.36mg、氯化钴0.012mg、维生素B120.5mg、维生素H 0.5mg、维生素B10.1mg。
优选的，各物质在培养溶液中的浓度如下所示，所述生物素的浓度为0.002～0.003g/L；所述葡萄糖的浓度为0.08～0.12g/L；所述维生素B1的浓度为0.045～0.55g/L；所述维生素B12的浓度为0.002～0.003g/L；所述尿素的浓度为0.045～0.055g/L；优选的，所述生物素的浓度为0.0025g/L；所述葡萄糖的浓度为0.1g/L；所述维生素B1的浓度为0.05g/L；所述维生素B12的浓度为0.0025g/L；所述尿素的浓度为0.05g/L。
优选的，所述微藻在盐度为25～35‰的海水中培养，加入f/2培养基；优选的盐度为30‰。
优选的，所述微藻的培养环境为溶解氧的浓度大于4mg/L，温度为26-30℃；白炽灯的光照强度为500～2000Lux；优选的，每日光照时间为12～16小时。
优选的，所述海水为经过20ppm次氯酸钠曝气消毒6小时，再经过硫代硫酸钠解毒6小时后，用3700ml自来水和300ml卤水混合而成。
相对于现有技术，本发明所述的一种室内敞口培养藻的方法，具有以下优势：
(1)本发明所述的方法，不但实现了自然条件下快速养藻问题，解决了培养箱和灭菌锅空间有限的问题，且同时保证藻的快速生长和稳定性，也适合在大的水泥池场所保证稳定的藻相。
(2)本发明所述的方法，实现了在室内微藻的快速生长，且同时通过药物刺激因素，使微藻在室内能够快速生长满足生产的需求及室外水环境的肥水工作，促使藻在5天达到浓度最高值，解决了微藻敞口在自然界下产量低和生长缓慢的问题和大量海水长途运输的费用。
(3)本发明所述的方法，可以使活性极低并且含有大量絮状物的藻，恢复较好的活性且快速生长。
具体实施方式
需要说明的是，在不冲突的情况下，本发明中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。
下面将结合实施例来详细说明本发明。
一种室内敞口培养藻的方法，包括如下步骤：
1)海水的配置：自来水加入20ppm次氯酸钠曝气6小时，后加入硫代硫酸钠解毒6小时，保持次氯酸钠与硫代硫酸钠用量比为3:3.8，再用300ml卤水与3700ml自来水混合。
2)将步骤1)配置的4L海水中，加入f/2培养基以及碳酸氢钠，使碳酸氢钠的浓度为0.001g/L；每升海水中添加的f/2培养基，包括如下组分，硝酸钠75mg、磷酸二氢钠5mg、硅酸钠30mg、硫酸锌0.023mg、硫酸铜0.01mg、氯化锰0.012mg、氯化铁3.16mg、钼酸钠0.07mg、乙二铵四乙酸钠4.36mg、氯化钴0.012mg、维生素B120.5mg、维生素H 0.5mg、维生素B10.1mg。
3)藻的接种：在室内或者自然条件下，将藻种接种到步骤2)得到的配好的海水中。
4)藻的养殖温度为26-30℃；白炽灯的光照强度为500～2000Lux；光照时间为14个小时，进行曝气，光照时，溶解氧不低于4mg/L，不进行光照时，溶解氧不低于6mg/L。
实施例一
步骤3)中，将藻种接种到步骤2)得到的海水中，体积含量为11％，步骤4)中，在步骤3)制备已经接种藻的溶液中，加入浓度为0.5g/50ml生物素1ml，藻的增长率在第一天达到最大值91﹪，比无生物素组提前一天，第三天达到2000000个细胞/mL。
藻的养殖环境为：温度为27℃；白炽灯的光照强度为800Lux；光照时间为14个小时(早上八点至下午五点)，且使用的是塔胞藻。
实施例二
步骤3)中，将藻种接种到步骤2)得到的海水中，体积含量为14％，步骤4)中，在步骤3)制备已经接种藻的溶液中，加入浓度为0.5g/50ml维生素B12，1ml；可以促进每个藻细胞内的色素含量增加22％。
藻的养殖环境为：所述温度为28℃；白炽灯的光照强度为1500Lux；光照时间为14个小时(早上八点至下午五点)，且使用的是塔胞藻。
实施例三
步骤3)中，将藻种接种到步骤2)得到的海水中，体积含量为12％，步骤4)中，在步骤3)制备已经接种藻的溶液中，加入0.4g葡萄糖，可以促进藻浓度在六天内增加1.19倍。
藻的养殖环境为：所述温度为26℃；白炽灯的光照强度为1200Lux；光照时间为14个小时(早上八点至下午五点)，且使用的是塔胞藻。
实施例四
步骤3)中，将藻种接种到步骤2)得到的海水中，体积含量为13％，步骤4)中，在步骤3)制备已经接种藻的溶液中，加入0.4g葡萄糖，可以促进藻浓度在六天内增加1.3倍。
藻的养殖环境为：所述温度为28℃；白炽灯的光照强度为1500Lux；光照时间为14个小时(早上八点至下午五点)，且使用的是等鞭金藻。
实施例五
步骤3)中，将藻种接种到步骤2)得到的海水中，体积含量为12％，步骤4)中，在步骤3)制备已经接种藻的溶液中，在接种好藻的溶液中，加0.3g尿素，藻的增长率在四天内增加1倍。
藻的养殖环境为：所述温度为26-30℃；白炽灯的光照强度为1600Lux；光照时间为14个小时(早上八点至下午五点)，且使用的是海链藻。
实施例六
步骤3)中，将藻种接种到步骤2)得到的海水中，体积含量为14％，步骤4)中，在步骤3)制备已经接种藻的溶液中，在接种好藻的溶液中，加0.4g葡萄糖、浓度为0.5g/50ml维生素B12，1ml、浓度为0.5g/50ml生物素1ml、维生素B1加入0.2g，藻能够正常生长且藻中的絮状物消失，三天之内恢复较好的活性且快速生长。
藻的养殖环境为：所述温度为28℃；白炽灯的光照强度为1500Lux；光照时间为14个小时(早上八点至下午五点)，使用的是活性极低并且含有大量絮状物的塔胞藻。
以上所述仅为本发明创造的较佳实施例而已，并不用以限制本发明创造，凡在本发明创造的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明创造的保护范围之内。

Claims (9)

1.一种室内敞口培养藻的方法，其特征在于：将微藻使用培养溶液进行室内敞口培养，且加入碳酸氢钠以及营养物质，碳酸氢钠的浓度为0.0005g/L～0.003g/L；优选的，0.001g/L；所述培养溶液为含有f/2培养基成分的海水。
2.根据权利要求1所述的室内敞口培养藻的方法，其特征在于：所述微藻的体积含量为10％～15％。
3.根据权利要求1所述的室内敞口培养藻的方法，其特征在于：所述营养物质为生物素、葡萄糖、尿素、维生素B1、维生素B12中的一种或者两种以上混合物。
4.根据权利要求1所述的室内敞口培养藻的方法，其特征在于：所述微藻为塔胞藻、等鞭金藻、海链藻中的一种。
5.根据权利要求1所述的室内敞口培养藻的方法，其特征在于：每升海水中添加的f/2培养基，包括如下组分的，硝酸钠75mg、磷酸二氢钠5mg、硅酸钠30mg、硫酸锌0.023mg、硫酸铜0.01mg、氯化锰0.012mg、氯化铁3.16mg、钼酸钠0.07mg、乙二铵四乙酸钠4.36mg、氯化钴0.012mg、维生素B120.5mg、维生素H0.5mg、维生素B10.1mg。
6.根据权利要求3所述的室内敞口培养藻的方法，其特征在于：各物质在培养溶液中的浓度如下所示，所述生物素的浓度为0.002～0.003g/L；所述葡萄糖的浓度为0.08～0.12g/L；所述维生素B1的浓度为0.045～0.55g/L；所述维生素B12的浓度为0.002～0.003g/L；所述尿素的浓度为0.045～0.055g/L；优选的，所述生物素的浓度为0.0025g/L；所述葡萄糖的浓度为0.1g/L；所述维生素B1的浓度为0.05g/L；所述维生素B12的浓度为0.0025g/L；所述尿素的浓度为0.05g/L。
7.根据权利要求1～6任一项所述的室内敞口培养藻的方法，其特征在于：所述微藻在盐度为25～35‰的加入f/2培养基的海水中培养；优选的，盐度为30‰。
8.根据权利要求1～6任一项所述的室内敞口培养藻的方法，其特征在于：所述微藻的培养环境为溶解氧的浓度大于4mg/L，温度为26-30℃；白炽灯的光照强度为500～2000Lux；优选的，每日光照时间为12～16小时。
9.根据权利要求1～6任一项所述的室内敞口培养藻的方法，其特征在于：所述海水为经过20ppm次氯酸钠曝气消毒6小时，再经过硫代硫酸钠解毒6小时后，用3700ml自来水和300ml卤水混合而成。
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