CN104556403B - 一种降低海参生长水域中富营养化的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种降低海参生长水域中富营养化的方法，包括混合菌种的配比、耐盐混合菌种的培养、耐盐混合菌种的扩大培养、离心得到混合菌液以及将混合菌液与氨基酸和乳酸杆菌进行配比后稀释应用于养殖海参的水域。在海参生长水域中加入本发明方法得到的耐盐混合菌液，通过分析每升海参养殖海水中排泄物，动物残体等有机固形物含量在耐盐混合菌液投入之前和投入之后的变化，分析后得出在投入耐盐混合菌液后每升海参养殖海水中排泄物，动物残体等含量明显降低，水质环境明显得到改善；分析海参养殖海水中氨基酸，葡萄糖，脂肪酸等含量在耐盐混合菌液投入之前和投入之后的变化，发现海参养殖海水中氨基酸，葡萄糖，脂肪酸等的含量明显上升。
Description
技术领域
本发明涉及海参养殖技术领域，更具体地说涉及一种降低海参生长水域中富营养化的方法。
背景技术
海参，属海参纲(Holothuroidea)，是生活在海边至8000米的海洋棘皮动物，距今已有六亿多年的历史，海参以海底藻类和浮游生物为食。海参全身长满肉刺，广布于世界各海洋中。我国南海沿岸种类较多，约有二十余种海参可供食用，海参同人参、燕窝、鱼翅齐名，是世界八大珍品之一。海参不仅是珍贵的食品，也是名贵的药材。据《本草纲目拾遗》中记载：海参，味甘咸，补肾，益精髓，摄小便，壮阳疗痿，其性温补，足敌人参，故名海参。海参具有提高记忆力、延缓性腺衰老，防止动脉硬化、糖尿病以及抗肿瘤等作用。随着海参价值知识的普及，海参逐渐进入百姓餐桌。生活环境决定海参品质，荣成地处东经122.25度，北维37.10度，水质，温度都适合海参环境。
富营养化是指生物所需的氮、磷等营养物质大量进入湖泊、河口、海湾等缓流水体，引起藻类及其它浮游生物迅速繁殖，水体溶氧量下降，鱼类及其它生物大量死亡的现象。大量死亡的水生生物沉积到湖底，被微生物分解，消耗大量的溶解氧，使水体溶解氧含量急剧降低，水质恶化，以致影响到鱼类的生存，大大加速了水体的富营养化过程。水体出现富营养化现象时，由于浮游生物大量繁殖，往往使水体呈现蓝色、红色、棕色、乳白色等，这种现象在江河湖泊中叫水华(水花)，在海中叫赤潮。在发生赤潮的水域里，一些浮游生物暴发性繁殖，使水变成红色，因此叫“赤潮”。这些藻类有恶臭、有毒，鱼不能食用。藻类遮蔽阳光，使水底生植物因光合作用受到阻碍而死去，腐败后放出氮、磷等植物的营养物质，再供藻类利用。这样年深月久，造成恶性循环，藻类大量繁殖，水质恶化而又腥臭，水中缺氧,造成鱼类窒息死亡。
水体富营养化过程与氮、磷的含量及氮磷含量的比率密切相关。反映营养盐水平的指标总氮、总磷，反映生物类别及数量的指标叶绿素a和反映水中悬浮物及胶体物质多少的指标透明度作为控制湖泊富营养化的一组指标。有文献报道，当总磷浓度超过0.1mg/L(如果磷是限制因素)或总氮浓度超过0.3mg/L(如果氮是限制因素)时，藻类会过量繁殖。经济合作与发展组织(OECD)提出富营养湖的几项指标量为：平均总磷浓度大于0.035mg/L；平均叶绿素浓度大于0.008mg/L；平均透明度小于3m。
发明内容
本发明克服了现有技术中的不足，提供了一种降低海参生长水域中富营养化的方法。
本发明的目的通过下述技术方案予以实现。
一种降低海参生长水域中富营养化的方法，按照下述步骤进行：
步骤1，将亚硝化螺菌：红螺菌：芽孢杆菌：乳酸杆菌按体积比为1-5:7-20:10-30:6-20进行配比，得到配比后的混合菌种；
步骤2，将所述步骤1中得到的混合菌种接种在培养基上，所述培养基的组成为：牛肉膏10-20g，蛋白胨20-40g，氯化钠0.5-4.0g，氯化铵0.8-3.0g，醋酸钠1.0-2.0g，钼酸钠0.05-0.25g以及经过灭菌的海水1L，培养3-5天，得到耐盐混合菌株；
步骤3，将所述步骤2中得到的耐盐混合菌株在25-35℃，光照强度为1000-5000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为：海参养殖海水1L，氯化钠0.5-4.0g，氯化铵0.8-3.0g，醋酸钠1.0-2.0g，硫酸镁1.5-3.5g以及硫酸亚铁0.02-0.35g，pH为7.0-7.7，培养5-10天，得到初步培养混合菌液；
步骤4，将所述步骤3中得到的初步培养混合菌液，置于20-25℃下，光照条件下培养3-5天，得到培养混合菌液；
步骤5，将所述步骤4中得到的培养混合菌液在1000-7000rpm的条件下，离心10-30min后，取上清液，得到耐盐混合菌液；
步骤6，将所述步骤5中的得到的耐盐混合菌液与氨基酸以及乳酸链球菌以体积比为7-20:1-5:2-7混合后，得到混合菌液，所述混合菌液用海参养殖海水以体积比为1:2-1:5稀释后，泼洒至海参养殖水域即可。
在所述步骤1中，所述红螺菌采用淡水红螺菌或者无硫红螺菌的一种或两种，所述芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌、豆芽芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或者短小芽孢杆菌中的一种或几种，所述亚硝化螺菌：所述红螺菌：所述芽孢杆菌：所述乳酸杆菌的体积比为3:12:25:16。
在所述步骤2中，所述培养基的组成为：牛肉膏15g，蛋白胨25g，氯化钠1.8g，氯化铵1.7g，醋酸钠1.4g，钼酸钠0.18g以及经过灭菌的海水1L，所述培养时间为4天。
在所述步骤3中，所述培养条件为：30℃，光照强度为4000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为：海参养殖海水1L，氯化钠1.8g，氯化铵1.7g，醋酸钠1.4g，硫酸镁2.8g以及硫酸亚铁0.27g，pH为7.4，所述培养时间为7天。
在所述步骤4中，所述培养温度为25℃，所述培养时间为5天。
在所述步骤5中，所述离心转速为5000rpm，所述离心时间为25min。
在所述步骤6中，所述耐盐混合菌液与所述氨基酸以及所述乳酸链球菌的体积比为15:3:6混合后，得到所述混合菌液，所述混合菌液与所述海参养殖海水以体积比为1:4进行稀释。
本发明的有益效果为：在海参生长水域中加入采用本方法得到的混合菌液，通过分析每升海参养殖海水中排泄物，动物残体等有机固形物含量在耐盐混合菌液投入之前以及投入之后的变化，分析后得出在投入混合菌液后每升海参养殖海水中排泄物，动物残体等有机固形物含量降低了50％以上，海参养殖的水质环境明显得到改善；同时，分析海参养殖海水中氨基酸，葡萄糖，脂肪酸等容易被海参吸收的小分子营养物质的含量在混合菌液投入之前以及投入之后的变化，发现投入混合菌液后海参养殖海水中氨基酸，葡萄糖，脂肪酸等的含量明显上升，上升幅度为40％以上。
具体实施方式
下面通过具体的实施例对本发明的技术方案作进一步的说明。
实施例1
一种降低海参生长水域中富营养化的方法，按照下述步骤进行：
步骤1，将亚硝化螺菌：红螺菌：芽孢杆菌：乳酸杆菌按体积比为1:7:10:6进行配比，得到配比后的混合菌种；
步骤2，将步骤1中得到的混合菌种接种在培养基上，培养基的组成为：牛肉膏10g，蛋白胨20g，氯化钠0.5g，氯化铵0.8g，醋酸钠1.0g，钼酸钠0.05g以及经过灭菌的海水1L，培养5天，得到耐盐混合菌株；
步骤3，将步骤2中得到的耐盐混合菌株在35℃，光照强度为5000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为：海参养殖海水1L，氯化钠0.5g，氯化铵0.8g，醋酸钠1.0g，硫酸镁1.5g以及硫酸亚铁0.02g，pH为7.7，培养10天，得到初步培养混合菌液；
步骤4，将步骤3中得到的初步培养混合菌液，置于25℃下，光照条件下培养5天，得到培养混合菌液；
步骤5，将步骤4中得到的培养混合菌液在7000rpm的条件下，离心10min后，取上清液，得到耐盐混合菌液；
步骤6，将步骤5中的得到的耐盐混合菌液与氨基酸以及乳酸链球菌以体积比为7:1:2混合后，得到混合菌液，混合菌液用海参养殖海水以体积比为1:2稀释后，泼洒至海参养殖水域即可。
在步骤1中，红螺菌采用淡水红螺菌，芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌和豆芽芽抱杆菌。
实施例2
一种降低海参生长水域中富营养化的方法，按照下述步骤进行：
步骤1，将亚硝化螺菌：红螺菌：芽孢杆菌：乳酸杆菌按体积比为5:20:30:20进行配比，得到配比后的混合菌种；
步骤2，将步骤1中得到的混合菌种接种在培养基上，培养基的组成为：牛肉膏20g，蛋白胨40g，氯化钠4.0g，氯化铵3.0g，醋酸钠2.0g，钼酸钠0.25g以及经过灭菌的海水1L，培养3天，得到耐盐混合菌株；
步骤3，将步骤2中得到的耐盐混合菌株在25℃，光照强度为1000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为：海参养殖海水1L，氯化钠4.0g，氯化铵3.0g，醋酸钠2.0g，硫酸镁3.5g以及硫酸亚铁0.35g，pH为7.0，培养5天，得到初步培养混合菌液；
步骤4，将步骤3中得到的初步培养混合菌液，置于20℃下，光照条件下培养3天，得到培养混合菌液；
步骤5，将步骤4中得到的培养混合菌液在1000rpm的条件下，离心30min后，取上清液，得到耐盐混合菌液；
步骤6，将步骤5中的得到的耐盐混合菌液与氨基酸以及乳酸链球菌以体积比为20:5:7混合后，得到混合菌液，混合菌液用海参养殖海水以体积比为1:5稀释后，泼洒至海参养殖水域即可。
在步骤1中，红螺菌采用无硫红螺菌，芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌、豆芽芽孢杆菌和纳豆芽孢杆菌。
实施例3
一种降低海参生长水域中富营养化的方法，按照下述步骤进行：
步骤1，将亚硝化螺菌：红螺菌：芽孢杆菌：乳酸杆菌按体积比为3:12:25:16进行配比，得到配比后的混合菌种；
步骤2，将步骤1中得到的混合菌种接种在培养基上，培养基的组成为：牛肉膏15g，蛋白胨25g，氯化钠1.8g，氯化铵1.7g，醋酸钠1.4g，钼酸钠0.18g以及经过灭菌的海水1L，培养4天，得到耐盐混合菌株；
步骤3，将步骤2中得到的耐盐混合菌株在30℃，光照强度为4000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为：海参养殖海水1L，氯化钠1.8g，氯化铵1.7g，醋酸钠1.4g，硫酸镁2.8g以及硫酸亚铁0.27g，pH为7.4，培养7天，得到初步培养混合菌液；
步骤4，将步骤3中得到的初步培养混合菌液，置于25℃下，光照条件下培养5天，得到培养混合菌液；
步骤5，将步骤4中得到的培养混合菌液在5000rpm的条件下，离心25min后，取上清液，得到耐盐混合菌液；
步骤6，将步骤5中的得到的耐盐混合菌液与氨基酸以及乳酸链球菌以体积比为15:3:6混合后，得到混合菌液，混合菌液用海参养殖海水以体积比为1:4稀释后，泼洒至海参养殖水域即可。
在步骤1中，红螺菌采用淡水红螺菌和无硫红螺菌，芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌、豆芽芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌和短小芽孢杆菌。
在海参生长水域中加入采用本方法得到的混合菌液，通过分析每升海参养殖海水中排泄物，动物残体等有机固形物含量在耐盐混合菌液投入之前以及投入之后的变化，分析后得出在投入混合菌液后每升海参养殖海水中排泄物，动物残体等有机固形物含量降低了50％以上，海参养殖的水质环境明显得到改善；同时，分析海参养殖海水中氨基酸，葡萄糖，脂肪酸等容易被海参吸收的小分子营养物质的含量在混合菌液投入之前以及投入之后的变化，发现投入混合菌液后海参养殖海水中氨基酸，葡萄糖，脂肪酸等的含量明显上升，上升幅度为40％以上。
以上对本发明做了示例性的描述，应该说明的是，在不脱离本发明的核心的情况下，任何简单的变形、修改或者其他本领域技术人员能够不花费创造性劳动的等同替换均落入本发明的保护范围。
Claims (7)
1.一种降低海参生长水域中富营养化的方法，其特征在于：按照下述步骤进行：
步骤1，将亚硝化螺菌：红螺菌：芽孢杆菌：乳酸杆菌按体积比为1-5:7-20:10-30:6-20进行配比，得到配比后的混合菌种；
步骤2，将所述步骤1中得到的混合菌种接种在培养基上，所述培养基的组成为：牛肉膏10-20g，蛋白胨20-40g，氯化钠0.5-4.0g，氯化铵0.8-3.0g，醋酸钠1.0-2.0g，钼酸钠0.05-0.25g以及经过灭菌的海水1L，培养3-5天，得到耐盐混合菌株；
步骤3，将所述步骤2中得到的耐盐混合菌株在25-35℃，光照强度为1000-5000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为：海参养殖海水1L，氯化钠0.5-4.0g，氯化铵0.8-3.0g，醋酸钠1.0-2.0g，硫酸镁1.5-3.5g以及硫酸亚铁0.02-0.35g，pH为7.0-7.7，培养5-10天，得到初步培养混合菌液；
步骤4，将所述步骤3中得到的初步培养混合菌液，置于20-25℃下，光照条件下培养3-5天，得到培养混合菌液；
步骤5，将所述步骤4中得到的培养混合菌液在1000-7000rpm的条件下，离心10-30min后，取上清液，得到耐盐混合菌液；
步骤6，将所述步骤5中的得到的耐盐混合菌液与氨基酸以及乳酸链球菌以体积比为7-20:1-5:2-7混合后，得到混合菌液，所述混合菌液用海参养殖海水以体积比为1:2-1:5稀释后，泼洒至海参养殖水域即可。
2.根据权利要求1所述的一种降低海参生长水域中富营养化的方法，其特征在于：在所述步骤1中，所述红螺菌采用淡水红螺菌或者无硫红螺菌的一种或两种，所述芽孢杆菌采用枯草芽孢杆菌、豆芽芽孢杆菌、纳豆芽孢杆菌或者短小芽孢杆菌中的一种或几种，所述亚硝化螺菌：所述红螺菌：所述芽孢杆菌：所述乳酸杆菌的体积比为3:12:25:16。
3.根据权利要求1所述的一种降低海参生长水域中富营养化的方法，其特征在于：在所述步骤2中，所述培养基的组成为：牛肉膏15g，蛋白胨25g，氯化钠1.8g，氯化铵1.7g，醋酸钠1.4g，钼酸钠0.18g以及经过灭菌的海水1L，所述培养时间为4天。
4.根据权利要求1所述的一种降低海参生长水域中富营养化的方法，其特征在于：在所述步骤3中，所述培养条件为：30℃，光照强度为4000LX的条件下培养，所选用的培养基的组成为：海参养殖海水1L，氯化钠1.8g，氯化铵1.7g，醋酸钠1.4g，硫酸镁2.8g以及硫酸亚铁0.27g，pH为7.4，所述培养时间为7天。
5.根据权利要求1所述的一种降低海参生长水域中富营养化的方法，其特征在于：在所述步骤4中，所述培养温度为25℃，所述培养时间为5天。
6.根据权利要求1所述的一种降低海参生长水域中富营养化的方法，其特征在于：在所述步骤5中，所述离心转速为5000rpm，所述离心时间为25min。
7.根据权利要求1所述的一种降低海参生长水域中富营养化的方法，其特征在于：在所述步骤6中，所述耐盐混合菌液与所述氨基酸以及所述乳酸链球菌的体积比为15:3:6混合后，得到所述混合菌液，所述混合菌液与所述海参养殖海水以体积比为1:4进行稀释。
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