CN105002110A - 复合微生物制剂及其在水华爆发水体处理中的应用 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种复合微生物制剂及其在水华爆发水体处理中的应用，该微生物制剂包括溶藻菌、粘性菌和净水菌，其中溶藻菌为肠杆菌和/或枯草芽孢杆菌，粘性菌为胶质芽孢杆菌，净水菌为光合细菌和/或硝化杆菌。其配制方法为各菌种进行单独培养后再按比例进行菌种的混合培养，从而得到复合微生物制剂。本发明的优势在于单独培养可使各菌种最有效的生长，单独培养后的混合施用可使控藻复合微生物制剂将各菌剂的效果充分发挥。本发明可有效解决由于水流冲击菌剂导致的溶藻效果下降的问题，除藻的同时达到净化水质的效果，特别是对水体中氮元素的去除。本发明打破了传统菌剂仅适用于小面积静水的限制，可应用范围包括河道、湖泊以及再生水体。

Description

复合微生物制剂及其在水华爆发水体处理中的应用
技术领域
本发明属于环境保护和生态修复领域，更具体地涉及一种复合微生物制剂及其在水华爆发水体处理中的应用。
背景技术
我国的主要支撑产业为农业和工业，污染物质随着雨水径流进入河湖水系，导致河湖中氮、磷等营养物质增加，水体富营养化。随着工农业的发展以及全球气候变暖导致的水域污染和富营养化现象的严重，我国的许多水域相继出现了水体污染和水华爆发的现象，严重影响水体使用功能、危害水生生物及水产养殖，部分地区直接影响居民饮用水安全。
水华爆发的主要时节为夏季，爆发原因为河湖中营养物质充沛以及较高的水温为藻类繁殖提供了适宜的条件。市面上主要用于防治水华爆发的产品分为两类，一类是使用噬藻菌或溶藻菌直接对藻类进行分解，另一类是使用益生菌分解水中营养物质，与藻类产生竞争关系减少藻类数量。第一类产品直接被投加入水中后，会由于水流冲刷影响无法高效分解藻类，同时，常见溶藻菌黄单胞杆菌具有一定毒性，投放间隔、剂量难以把握；而另一类产品主要预防了藻类的增加，但对已产生的藻类去除效果不明显。
发明内容
针对上述技术中的不足，本发明的主要目的在于提供一种复合微生物制剂，以便在使水体中藻类明显减少的同时，还能明显改善水质，特别是去除水体中的氮元素。
为实现上述目的，作为本发明的一个方面，本发明提供了一种复合微生物制剂，其中所述复合微生物制剂的主要成分为溶藻菌、粘性菌和净水菌，其中所述溶藻菌∶粘性菌∶净水菌的活性成分比为12-18∶3-5∶6-12。
其中，所述溶藻菌为肠杆菌和/或枯草芽孢杆菌。
其中，所述粘性菌为胶质芽孢杆菌。
其中，所述净水菌包括光合细菌和/或硝化细菌。 
其中，所述光合细菌为沼泽红假胞杆菌和/或海生红球菌。
作为本发明的另一个方面，本发明还提供了一种复合微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：
分别培养制备溶藻菌、粘性菌和净水菌菌液；
将所述溶藻菌菌液、粘性菌菌液和净水菌菌液混合即得所述复合微生物制剂，其中在所述复合微生物制剂中所述溶藻菌∶粘性菌∶净水菌的活性成分比为12-18∶3-5∶6-12。
其中，所述溶藻菌为肠杆菌和/或枯草芽孢杆菌，所述粘性菌为胶质芽孢杆菌，所述净水菌包括光合细菌和/或硝化细菌。
其中，所述分别培养制备溶藻菌、粘性菌和净水菌菌液的步骤进一步包括：
(1)将所述溶藻菌、粘性菌和净水菌接种到培养基中分别进行实验室培养5-7天；
(2)将经上述步骤(1)培养后的各菌种，分别在28-32℃条件下进行母液扩大通气发酵培养5-7天；
(3)将按上述步骤(2)发酵后的种子进行规模化发酵生产，时间为6-8天。
作为本发明的再一个方面，本发明还提供了根据如上任意一项所述的制备方法制备的复合微生物制剂。
作为本发明的还一个方面，本发明还提供了如上任意一项所述的复合微生物制剂在水华爆发水体处理中的应用。
基于上述技术方案可知，本发明的复合微生物制剂及其应用具有以下有益效果：单独培养可使各菌种最有效的生长，单独培养后的混合施用可使控藻复合微生物制剂将各菌剂的效果充分发挥；避免了由于水流冲击菌剂导致的溶藻效果下降的问题，复合微生物制剂中的硝化杆菌和光合杆菌在控藻的同时降低水体污染物浓度，使本发明的复合微生物制剂除藻的同时达到净化水质的效果，特别是对水体中氮元素的去除。本发明的复合微 生物制剂打破了传统产品仅适用于小面积静水的限制，可应用范围包括河道、湖泊以及再生水体。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明作进一步的详细说明。
本发明公开了一种控藻复合微生物制剂，可以应用于河道、湖泊等自然水体，特别应用于再生水受纳水体，该微生物制剂易于培养，适合于控制河湖内水华爆发的现象。
本发明公开的一种复合微生物制剂，主要成分为(活性成分比)溶藻菌∶粘性菌∶净水菌＝12-18∶3-5∶6-12。
所述溶藻菌例如可以为肠杆菌、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。
所述粘性菌例如可以为胶质芽孢杆菌(Bacillus mucilaginosus)。
所述净水菌例如可以由多种复合微生物组成，包括光合细菌(沼泽红假胞杆菌(Rhodopseudomonas palustris)和/或海生红球菌(Rhodococcus marinonascens)、硝化杆菌(Nitrobacteriaceae)。
本发明还公开了一种控藻复合微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：将肠杆菌、枯草芽孢杆菌、胶质芽孢杆菌、光合细菌和/或硝化杆菌接种到培养基中分别进行实验室培养，菌种培养约5-7天后即可生长好。
经培养后的各菌种，按照其功能分为溶藻菌、粘性菌和净水菌分别进行母液扩大发酵培养。在28-32℃条件下通气发酵培养。一般5-7天后发酵完成，可以作为规模化生产的种子。
对发酵后种子，进行规模化发酵生产，一般进行6-8天即可。
最后将规模化发酵生产的菌液按照溶藻菌菌液、粘性菌菌液和净水菌菌液以3.5∶1.8-2.2∶4.3-4.7的体积比混合即可。
更具体地，本发明的控藻复合微生物制剂制备方法，使用下述培养基对各种菌种进行实验室培养：
(a)肠杆菌、枯草芽孢杆菌培养基：牛肉膏1g，蛋白胨15g，氯化钠5g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1L，pH值为7.4-7.6。
(b)胶质芽孢杆菌培养基：牛肉膏3g，蛋白胨5g，氯化钠3g，葡萄糖10g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁1g，蒸馏水1L，pH值为7.2-7.4。
(c)硝化杆菌培养基：葡萄糖6.0g、硫酸铵2.5g、氯化钠1.0g、磷酸氢二钾0.8g、硫酸镁1.5g，蒸馏水1L，pH值为7.2-7.5。
(d)光合细菌培养基：氯化氨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化镁0.2克，氯化钠2克，酵母膏0.1克，蒸馏水1L，pH值为7.4-7.6。
实验室培养方法如下：
①菌种试管斜面培养
无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净工作台内的紫外灯同时打开，灭菌1h。
接种：试管、平板和三角瓶接种应在超净工作台内进行。
培养：菌种接种后应放在培养架上或生物培养箱内培养，温度控制在25℃-29℃。
②菌种三角瓶液体培养：
无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净工作台内的紫外灯同时打开，灭菌1h。
接种：试管、平板和三角瓶接种应在超净工作台内进行，操作人员必须穿戴消毒过的工作服和工作帽，接种前手先用体积分数75％的酒精消毒后再开始操作，接种针或环必须在酒精灯上烧红3次，才能进行接种，将试管斜面培养好的菌种，用接种针和接种环，将菌种转接到三角瓶液体中，操作时接种物在酒精灯的火焰边进行，接种完毕后立即用棉塞将试管封口或立即盖上三角瓶。
培养：菌种接种后应放在恒温摇床上振动培养，温度控制在25℃-29℃，如果没有恒温摇床可以在培养架或生物培养箱内培养，每天应摇动2-3次为宜。
菌种培养约5-7天后即可生长好，即可进行母液扩大培养。
将菌种按照其功能分为溶藻菌、粘性菌和净水菌分别使用下述培养基进行母液扩大发酵培养：
(a)溶藻菌培养基配制：先用40-60℃的温水将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，加蒸馏水，然后加入氯化钠，其中按牛肉膏60g、葡萄糖20g、氯化 钠20g、硫酸铵10g、硫酸镁10g的比例在混合器中搅拌均匀，再分别装入10L的清洗干净的塑料壶中。
(b)粘性菌培养基配制：先用40-60℃的温水将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，加蒸馏水，然后加入氯化钠，其中按牛肉膏60g、葡萄糖20g、氯化钠20g、硫酸铵10g、硫酸镁10g的比例在混合器中搅拌均匀，再分别装入10L的清洗干净的塑料壶中。
(c)净水菌培养基配制：先用40-60℃的温水将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，加蒸馏水，然后加入氯化钠，其中按牛肉膏60g、葡萄糖20g、氯化钠20g、硫酸铵10g、硫酸镁10g，的比列在混合器中搅拌均匀，再分别装入10L的清洗干净的塑料壶中。
①接种：待本步骤第一步培养基融化后，冷却到29-31℃，再加入250-350mL三角瓶培养好的菌种，然后把接种好的菌水塑料壶用棉塞或牛皮纸包扎。
②发酵：在壶口插上通气和出气管各一支，在28-32℃条件下通气发酵培养。一般5-7天后发酵完成，可以作为规模化生产的种子。
先用40-60℃的温水，将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，然后加入氯化钠，其中分别以牛肉膏1500g，蛋白胨5000g，氯化钠5000g的量在混合器中搅拌均匀，再放入1-10m3的培养池中，加芽孢杆菌菌种母液0.1-1m3，然后加蒸馏水至1-10m3，最后用塑料薄膜密封，28-32℃发酵培养。一般6-8天后即可。
规模化发酵生产的菌液按照溶藻菌液、粘性菌液和净水菌液以3.5∶1.8-2.2∶4.3-4.7的体积比混合后施用于受污染的水体中即可。
本发明的控藻复合微生物制剂，其中各菌种的功能如下：
肠杆菌：破坏藻类细胞结构，达到溶藻的目的。
枯草芽孢杆菌：破坏藻类细胞结构，达到溶藻的目的。
胶质芽孢杆菌：分泌大量胞外多糖，具有一定黏性，可将溶藻菌附着于藻类表面，防止由于水流对菌剂效果的影响。
硝化杆菌：消减水体中过量的氮，与藻类竞争养分的同时达到净水的目的。
光合细菌：消减水体中过量的营养物质，与藻类竞争养分的同时达到净水的目的。
本发明的优势在于：避免了由于水流冲击菌剂导致的溶藻效果下降的问题，复合微生物制剂中的硝化杆菌和光合杆菌在控藻的同时降低水体污染物浓度，使本复合微生物制剂除藻的同时达到净化水质的效果，特别是对水体中氮元素的去除。本产品打破了传统产品仅适用于小面积静水的限制，可应用范围包括河道、湖泊以及再生水体。
下面结合具体实施例，对本发明的技术方案做进一步的说明阐述。
本发明公开了一种复合微生物制剂的制备方法，其步骤是：
A、溶藻菌实验室培养：
(1)肠杆菌与枯草芽孢杆菌培养基：
牛肉膏1g，蛋白胨15g，氯化钠5g，葡萄糖20g，琼脂20g，蒸馏水1L，pH7.4-7.6。
(2)菌种试管斜面培养
无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净工作台内的紫外灯同时打开，灭菌1h。
接种：试管、平板和三角瓶接种应在超净工作台内进行。
培养：菌种接种后应放在培养架上或生物培养箱内培养，温度控制在25℃-29℃。
(3)菌种三角瓶液体培养：
无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净工作台内的紫外灯同时打开，灭菌1h。
接种：试管、平板和三角瓶接种应在超净工作台内进行，操作人员必须穿戴消毒过的工作服和工作帽，接种前手先用体积分数75％的酒精消毒后再开始操作，接种针或环必须在酒精灯上烧红3次，才能进行接种，将试管斜面培养好的菌种，用接种针和接种环，将菌种转接到三角瓶液体中，操作时接种物在酒精灯的火焰边进行，接种完毕后立即用棉塞将试管封口或立即盖上三角瓶。
培养：菌种接种后应放在恒温摇床上振动培养，温度控制在25℃-29℃，如果没有恒温摇床可以在培养架或生物培养箱内培养，每天应摇动2-3次为宜。
菌种培养约5-7天后即可生长好，即可进行母液扩大培养。
B、溶藻菌菌种母液扩大培养：
培养基配制：先用40-60℃的温水将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，加蒸馏水，然后加入氯化钠，其中按牛肉膏60g、葡萄糖20g、氯化钠20g、硫酸铵10g、硫酸镁10g的比例在混合器中搅拌均匀，再分别装入10L的清洗干净的塑料壶中。
接种：待本步骤第一步培养基融化后，冷却到29-31℃，再加入250-350mL三角瓶培养好的菌种，然后把接种好的菌水塑料壶用棉塞或牛皮纸包扎。
发酵：在壶口插上通气和出气管各一支，在28-32℃条件下通气发酵培养。一般5-7天后发酵完成，可以作为规模化生产的种子。
C、溶藻菌规模化生产方法：
(1)溶藻菌培养基：
牛肉膏1500g，蛋白胨5000g，氯化钠5000g，蒸馏水1000L，pH＝7.0-7.8。
(2)溶藻菌规模化发酵生产：
先用40-60℃的温水，将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，然后加入氯化钠，其中分别以牛肉膏1500g，蛋白胨5000g，氯化钠5000g的量在混合器中搅拌均匀，再放入1-10m3的培养池中，加溶藻菌菌种母液0.1-1m3，然后加蒸馏水至1-10m3，最后用塑料薄膜密封，28-32℃发酵培养。一般6-8天后即可。
D、胶质芽孢杆菌实验室培养：
(1)培养基：
牛肉膏3g，蛋白胨5g，氯化钠3g，葡萄糖10g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁1g，蒸馏水1L，pH值为7.2-7.4。
(2)菌种试管斜面培养
无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净工作台内的紫外灯同时打开，灭菌1h。
接种：试管、平板和三角瓶接种应在超净工作台内进行。
培养：菌种接种后应放在培养架上或生物培养箱内培养，温度控制在25℃-29℃。
(3)菌种三角瓶液体培养：
无菌室消毒：接种前将无菌室内和超净工作台内的紫外灯同时打开，灭菌1h。接种应在无菌室内的超净工作台上进行。
接种：试管、平板和三角瓶接种应在超净工作台内进行，操作人员必须穿戴消毒过的工作服和工作帽，接种前手先用体积分数75％的酒精消毒后再开始操作，接种针或环必须在酒精灯上烧红3次，才能进行接种，将试管斜面培养好的菌种，用接种针和接种环，将菌种转接到三角瓶液体中，操作时接种物在酒精灯的火焰边进行，接种完毕后立即用棉塞将试管封口或立即盖上三角瓶。
培养：菌种接种后应放在恒温摇床上振动培养，温度控制在25℃-29℃，如果没有恒温摇床可以在培养架或生物培养箱内培养，每天应摇动2-3次为宜。
菌种培养约5-7天后即可生长好，即可进行母液扩大培养。
E、芽孢杆菌菌种母液扩大培养：
培养基配制：先用40-60℃的温水将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，加蒸馏水，然后加入氯化钠，其中按牛肉膏60g、葡萄糖20g、氯化钠20g、硫酸铵10g、硫酸镁10g的比例在混合器中搅拌均匀，再分别装入10L的清洗干净的塑料壶中。
接种：待本步骤第一步培养基融化后，冷却到29-31℃，再加入250-350mL三角瓶培养好的菌种，然后把接种好的菌水塑料壶用棉塞或牛皮纸包扎。
发酵：在壶口插上通气和出气管各一支，在28-32℃条件下通气发酵培养。一般5-7天后发酵完成，可以作为规模化生产的种子。
F、粘性菌规模化生产方法：
(1)芽孢杆菌培养基：
牛肉膏1500g，蛋白胨5000g，氯化钠5000g，蒸馏水1000L，pH＝7.0-7.8。
(2)芽孢杆菌规模化发酵生产：
先用40-60℃的温水，将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，然后加入氯化钠，其中分别以牛肉膏1500g，蛋白胨5000g，氯化钠5000g的量在混合器中搅拌均匀，再放入1-10m3的培养池中，加芽孢杆菌菌种母液0.1-1m3，然后加蒸馏水至1-10m3，最后用塑料薄膜密封，28-32℃发酵培养。一般6-8天后即可。
G、净水菌(实验室)培养：
(1)硝化杆菌培养基：
葡萄糖6.0g、硫酸铵2.5g、氯化钠1.0g、磷酸氢二钾0.8g、硫酸镁1.5g，蒸馏水1L，pH值为7.2-7.5。
(2)光合细菌培养基：
氯化氨1克，磷酸氢二钾0.5克，氯化镁0.2克，氯化钠2克，酵母膏0.1克，蒸馏水1L，pH值为7.4-7.6。
(3)菌种试管斜面培养
无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净工作台内的紫外灯同时打开，灭菌1h。
接种：试管、平板和三角瓶接种应在超净工作台内进行。
培养：菌种接种后应放在培养架上或生物培养箱内培养，温度控制在25℃-29℃。
(4)菌种三角瓶液体培养：
无菌室消毒：接种应在无菌室内的超净工作台上进行，接种前将无菌室内和超净工作台内的紫外灯同时打开，灭菌1h。
接种：试管、平板和三角瓶接种应在超净工作台内进行，操作人员必须穿戴消毒过的工作服和工作帽，接种前手先用体积分数75％的酒精消毒后再开始操作，接种针或环必须在酒精灯上烧红3次，才能进行接种，将试管斜面培养好的菌种，用接种针和接种环，将菌种转接到三角瓶液体中，操作时接种物在酒精灯的火焰边进行，接种完毕后立即用棉塞将试管封口或立即盖上三角瓶。
培养：菌种接种后应放在恒温摇床上振动培养，温度控制在25℃-29℃，如果没有恒温摇床可以在培养架或生物培养箱内培养，每天应摇动2-3次为宜。
菌种培养约5-7天后即可生长好，即可进行母液扩大培养。
H、净水菌母液扩大培养：
培养基配制：先用40-60℃的温水将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，加蒸馏水，然后加入氯化钠，其中按牛肉膏60g、葡萄糖20g、氯化钠20g、硫酸铵10g、硫酸镁10g，的比列在混合器中搅拌均匀，再分别装入10L的清洗干净的塑料壶中。
接种：待本步骤第一步培养基融化后，冷却到29-31℃，再分别加入150-200mL三角瓶培养好的硝化杆菌与光合细菌菌种，然后把接种好的菌水塑料壶用棉塞或牛皮纸包扎。
发酵：在壶口插上通气和出气管各一支，在28-32℃条件下通气发酵培养。一般5-7天后发酵完成，可以作为规模化生产的种子。
I、净水菌规模化生产方法：
(1)硝化杆菌与光合细菌培养基：
牛肉膏1500g，蛋白胨5000g，氯化钠5000g，蒸馏水1000L，pH＝7.0-7.8。
(2)硝化杆菌与光合细菌规模化发酵生产：
先用40-60℃的温水，将牛肉膏、蛋白胨分别溶化，然后加入氯化钠，其中分别以牛肉膏1500g，蛋白胨5000g，氯化钠5000g的量在混合器中搅拌均匀，再放入1-10m3的培养池中，加硝化杆菌与光合细菌菌种母液0.1-1m3，然后加蒸馏水至1-10m3，最后用塑料薄膜密封，28-32℃发酵培养。一般6-8天后即可。
J、使用时将溶藻菌菌液、粘性菌菌液和净水菌菌液以3.5∶1.8-2.2∶4.3-4.7的体积比混合后施用在受污染的水体中。
对于上面培养制得的控藻复合微生物制剂，分别在水华爆发的人工湖和市区河道进行了实验。
其中，在水华爆发的人工湖进行了实施例1、对比实施例1-1、1-2、1-3，实验条件为：水域面积18000平方米，水深1.5-2.0米，人工湖水源为再生水；在该人工湖水体的不同投放区域使用喷撒头将本发明的控藻复合微生物制剂及对比微生物制剂分别均匀喷洒于水华爆发严重的水面，投放的微生物菌液的配比如表1所示。未施用前对水体10个采样点进行水 质分析，平均水质为：叶绿素a：103.1μg/L、BOD：19.8mg/L、TN：21.9mg/L、氨氮：9.2mg/L、TP：0.7mg/L。分别检测在每一个投放区域相同的10个采样点处三个月后水质净化结果，结果如表2所示。
其中，在市区河道进行了实施例2、对比实施例2-1、2-2、2-3，实验条件为：水域面积4000平方米，水深约1.0-1.5米的河道；在不同投放区域使用喷撒头将本发明的控藻复合微生物制剂及对比微生物制剂分别均匀喷洒于水华爆发严重的水面，投放的微生物菌液的配比如表1所示。未施用前对水体10个采样点进行水质分析，平均水质为：叶绿素a：92.4μg/L、BOD：18.1mg/L、TN：15.6mg/L、氨氮：6.6mg/L、TP：0.69mg/L。分别检测在每一个投放区域相同的10个采样点处三个月后水质净化结果，结果如表2所示。
表1：投放的微生物制剂的体积配比
表2：水质净化结果
以上所述的具体实施例，对本发明的目的、技术方案和有益效果进行了进一步详细说明，应理解的是，以上所述仅为本发明的具体实施例而已，并不用于限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所做的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种复合微生物制剂，其特征在于，所述复合微生物制剂的主要成分为溶藻菌、粘性菌和净水菌，其中所述溶藻菌∶粘性菌∶净水菌的活性成分比为12-18∶3-5∶6-12。
2.如权利要求1所述的复合微生物制剂，其中所述溶藻菌为肠杆菌和/或枯草芽孢杆菌。
3.如权利要求1所述的复合微生物制剂，其中所述粘性菌为胶质芽孢杆菌。
4.如权利要求1所述的复合微生物制剂，其中所述净水菌包括光合细菌和/或硝化细菌。
5.如权利要求4所述的复合微生物制剂，其中所述光合细菌为沼泽红假胞杆菌和/或海生红球菌。
6.一种复合微生物制剂的制备方法，包括以下步骤：
分别培养制备溶藻菌、粘性菌和净水菌菌液；
将所述溶藻菌菌液、粘性菌菌液和净水菌菌液混合即得所述复合微生物制剂，其中在所述复合微生物制剂中所述溶藻菌∶粘性菌∶净水菌的活性成分比为12-18∶3-5∶6-12。
7.如权利要求6所述的复合微生物制剂的制备方法，其中所述溶藻菌为肠杆菌和/或枯草芽孢杆菌，所述粘性菌为胶质芽孢杆菌，所述净水菌包括光合细菌和/或硝化细菌。
8.如权利要求6所述的复合微生物制剂的制备方法，其中所述分别培养制备溶藻菌、粘性菌和净水菌菌液的步骤进一步包括：
(1)将所述溶藻菌、粘性菌和净水菌接种到培养基中分别进行实验室培养5-7天；
(2)将经上述步骤(1)培养后的各菌种，分别在28-32℃条件下进行母液扩大通气发酵培养5-7天；
(3)将按上述步骤(2)发酵后的种子进行规模化发酵生产，时间为6-8天。
9.根据权利要求6至8任意一项所述的制备方法制备的复合微生物制剂。
10.如权利要求1至5、9任意一项所述的复合微生物制剂在水华爆发水体处理中的应用。
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