CN106232142B - 用于治疗血液学赘瘤的羟烷基淀粉 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于尤其通过有效降低癌细胞的增殖速率以及抑制癌细胞生长来治疗血液学赘瘤的羟烷基淀粉或其药物制剂，并且其中所述羟烷基淀粉具有高于20且低于1300kDa的平均分子量(MW)以及在0.1至1.5的范围内的摩尔取代度(MS)，其中烷基化可为乙基化、丙基化或丁基化或其混合；并且其中烷基可被进一步取代。

Description

用于治疗血液学赘瘤的羟烷基淀粉

癌症、肿瘤相关的疾病和赘生疾病病况是严重并且常常危急生命的病状。一个子组的癌症类型是血液学赘瘤，其是影响血液、骨髓和淋巴系统的癌症类型。

影响血液或骨髓的大多数癌症类型被称为白血病(leukemia)(美式英语)或白血症(leukaemia)(英式英语)。它们的特征在于称为“母细胞”的不成熟白血细胞异常增加。除淋巴瘤之外，术语白血病还包括血液或骨髓的大多数血液学赘生疾病，例如骨髓原性(或骨髓性)白血病。术语淋巴瘤是指一组从淋巴细胞发展的血液学赘瘤，诸如霍奇金淋巴瘤(Hodgkin lymphoma，HL)和非霍奇金淋巴瘤(NHL)。

大多数白血病治疗涉及化学疗法、医学放射疗法、激素治疗或骨髓移植。治愈率取决于白血病的类型以及患者的年龄。在2000年，全世界约256,000名儿童和成人显现某一形式的白血病，并且209,000人因其死亡。所有白血病中约90％在成人中被诊断。

影响淋巴系统的血液学赘瘤被称为淋巴瘤。淋巴瘤是一种例如当B或T淋巴细胞分裂快于正常细胞或具有延长的寿命时发生的癌症类型。淋巴瘤可显现在淋巴结、脾、骨髓、血液或其它器官中，并且最终它们可形成肿瘤。几乎不可能在肿瘤已开始生长之前诊断淋巴瘤，但有可能在淋巴系统中检测到恶性高度增殖性细胞。因此，治疗淋巴瘤可不仅以降低肿瘤生长和/或肿瘤细胞生长为目标，而且也以降低这些细胞的增殖速率为目标。

如果淋巴瘤细胞在淋巴结中积累，那么它们可形成呈现为结节增大的肿瘤。这些细胞也会影响其它器官，并且在那里形成肿瘤，在所述情况下，赘瘤被称为结外淋巴瘤。结外部位包括皮肤、脑、肠和骨。中枢神经系统淋巴瘤是一种罕见非霍奇金淋巴瘤类型，其中来自淋巴组织的恶性(癌)细胞在脑和/或脊髓中积累(原发性CNS)，或从身体的其它部分向脑和/或脊髓扩散(继发性CNS)。

另一类型的血液学赘瘤是淋巴细胞性白血病，其也起源于淋巴细胞中，但通常仅涉及循环血液和骨髓以及骨髓外造血部位(其中以称为造血的过程产生血细胞)，并且通常不形成静态实体肿瘤。

淋巴瘤治疗可能涉及化学疗法以及在一些情况下涉及放射疗法和/或骨髓移植。

由WHO进行的最新分类(2008)列出被分成四个大组的许多不同形式的淋巴瘤和白血病(Swerdlow,Steven H.；International Agency for Research on Cancer；WorldHealth Organization(2008).WHO classification of tumours of haematopoietic andlymphoid tissues.World Health Organization classification of tumors 2(第4版).International Agency for Research on Cancer.)。这个系统试图通过细胞类型(即最类似于癌的正常细胞类型)以及确定表型、分子或细胞发生特征来将淋巴瘤和白血病分组。存在三个大组：B细胞、T细胞和自然杀伤细胞肿瘤。也认定其它较不常见的组。尽管在世界卫生组织(以及先前)分类法内被单独考虑，但霍奇金淋巴瘤现时被认定为成熟B细胞谱系的淋巴细胞(虽然显著异常)的肿瘤。

在下文中，术语血液学赘瘤应理解为涵盖影响血液、骨髓和淋巴系统的所有形式的癌症类型，优选是白血病和淋巴瘤。应了解血液学赘瘤的群组不包含脉管肉瘤(angiosarcoma)，尽管其是内衬于脉管壁的内皮型细胞的癌症。这可涉及血管(血管肉瘤(hemangiosarcoma))或淋巴管(淋巴管肉瘤(lymphangiosarcoma))。

特征在于细胞增殖不受控制的血液学赘瘤也是致力于鉴定被证明有效治疗这些疾病的新型活性治疗成分的许多研究项目的焦点。所述活性成分延长患者的预期寿命，抑制与血液学赘瘤相关的快速进展性细胞生长，或致使血液学赘瘤消退，或改进受折磨患者的生活质量。

当前，对诸如白血病和淋巴瘤的血液学疾病的常规治疗依赖于三种治疗选项，即手术、放射疗法和化学疗法。因此，当前用化学疗法治疗许多被诊断有血液学疾病的患者。

化学疗法是一个用于描述施用被设计以杀灭高度增殖性细胞(诸如癌细胞或肿瘤细胞)或至少阻止它们更进一步增殖的药物的术语。这些药物通常被称为细胞抑制性或细胞毒性药物。然而，这些药物在仅杀灭癌细胞方面不具有选择性。因此，这个类型的治疗伴有对患者的重度副作用。

潜在副作用的非详尽清单包含贫血、恶心、呕吐、食欲变化、腹泻、便秘、疲劳、疼痛、脱发、流血、肿胀、对感染的易感性增加、记忆力减退、神经变化、口和喉变化、性欲和生育力变化、皮肤和甲(nail)副作用、排尿问题。这些副作用可如此重度以致用细胞抑制剂进行的治疗由于高毒性而必须终止以保持患者活着。然而，在其中患者可重新获得一定总体健康状况的这些康复时期期间，肿瘤也常常复原并开始再次生长。细胞抑制剂的高毒性问题是熟知的。因此，本领域中需要用于受血液学赘瘤折磨的患者，抑制癌症进展，同时不更进一步使需要治疗的受试者应激或受损的治疗选项。

理想癌症治疗将选择性靶向肿瘤生长和肿瘤细胞增殖。在正常和受控速率下的健康细胞增殖将不受影响。

羟烷基淀粉(HAS)是源于天然基础物质并被改性的聚合物。HAS由富含支链淀粉的淀粉制备。母体淀粉可为分支或未分支的，或可由两者的混合物组成。羟乙基淀粉几乎仅基于支链淀粉，换句话说，基于葡萄糖分子的支链。

羟烷基淀粉，并且更特定来说羟乙基淀粉，作为血浆代用品用于容量疗法中，并且也用于临床血液透析中(Sommermeyer等,1987,K rankenhauspharmazie,8(8):271-278；Weidler等,1991,Arzneimittelf orschung/Drug Research,41:494-498)。使红细胞(红血球)持续贯穿身体来转运氧的羟乙基淀粉溶液可被静脉内施用以预防在由创伤或由手术引起的重度失血之后的休克状态。

另外，已提出使用HES溶液的胶体渗透性质来延长化学治疗药物在局部施加时的暴露时间。在腹膜癌病的一些治疗方案中，向腹膜中局部施加化学疗法的细胞毒性或细胞抑制性药物。此处，相较于使用不含渗透活性胶体的透析溶液，局部使用除药物成分之外也含有HES的溶液导致细胞毒性或细胞抑制性药物在腹膜中保留时间更高(Mohamed等(2003)European Journal of Surgical Oncology第29卷,第261-265页)。

在WO 96/40108中，也已建议将HES作为抗粘附剂用作受损体腔中的可吸收屏障。

本发明提供用于治疗血液学赘瘤，以及尤其用于任何下述方法中的羟烷基化淀粉。它进一步提供治疗血液学赘瘤的方法。

治疗方法包括向被诊断有血液学赘瘤的受试者施用羟烷基化淀粉，以及由此在所述受试者中有效降低肿瘤生长速率，降低癌细胞生长，降低癌细胞的增殖速率，降低增殖活性或降低癌细胞的数目，其中癌细胞源于所述血液学赘瘤，或由所述血液学赘瘤引起。优选地，这在同时将不发生毒性副作用，或毒性副作用将在显著小于用细胞抑制剂进行的标准治疗下发生时实现。

本发明还包括一种在不同隔室中提供两种物质的试剂盒，即细胞抑制性或细胞毒性组合物，优选是护理标准药物在一个隔室中，例如在第一小瓶中，而优选呈可注射溶液形式的HAS在第二隔室中，例如在第二小瓶中，两者均存在于一个试剂盒中。

本发明的另一方面是包含羟烷基化淀粉作为唯一治疗活性成分的药物组合物，其用于在受试者中治疗血液学赘瘤，降低肿瘤生长速率、癌细胞的数目、癌细胞生长、癌细胞的增殖速率、癌细胞分裂或癌细胞的增殖活性，其中癌症是血液学赘瘤。

发明详述

尽管HAS溶液已向许多人(无肿瘤)施用而未显示任何重度副作用，但现时首次注意到这些物质可能对为血液学赘瘤所特有的细胞具有抗增殖作用。在小鼠模型中可显示由皮下施加骨髓原性白血病细胞产生的肿瘤没有对照治疗肿瘤发展快速。

尽管已提出羟烷基化淀粉作为稳定剂或增溶剂或渗透活性成分，但从未显示施加HAS自身对血液学赘瘤具有额外抗增殖作用。

根据本发明，羟烷基化淀粉作为治疗活性化合物被提供以用于治疗血液学赘瘤，优选用于降低肿瘤生长速率、高度增殖性细胞的数目、癌细胞的数目，降低癌细胞分裂的频率，或降低癌细胞生长速率，其中癌症是血液学赘瘤。

优选地，羟烷基化淀粉用于优选在被诊断有血液学赘瘤的受试者中降低肿瘤生长速率、癌细胞的数目、癌细胞的增殖速率、细胞生长、癌细胞分裂或癌细胞的增殖活性，其中癌症是血液学赘瘤。优选地，治疗不影响正常增殖性细胞。

在另一实施方案中，本发明涉及治疗血液学赘瘤的方法，其包括施用本发明的羟烷基化淀粉。

治疗方法包括向受试者施用包括羟烷基化淀粉或由羟烷基化淀粉组成，在所述受试者中在至少一个以下方面有效的第一化合物：降低肿瘤生长速率、降低癌细胞生长、降低癌细胞的增殖速率、降低增殖活性或降低癌细胞的数目。

优选地，方法包括以下步骤：在第一步中，施用羟烷基化淀粉，并且在第二步中，施用选自由以下组成的群组的第二化合物：细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素。第一步可在第二步之前或在第二步之后进行。可根据医生的常规治疗进行第二化合物的施用，例如以与它将在标准疗法中被给与相同的活性成分量和/或相同的频率，或它可根据患者的需要以降低的量和降低的频率来运用。优选地，治疗方法涉及施用小于作为唯一治疗选项给与时的量的第二化合物，优选施以较小量的细胞抑制剂。

在治疗方法的一优选实施方案中，在开始用第二化合物进行的治疗方案之前，或在施用第二化合物之前，向受试者施用羟烷基化淀粉。

本发明的一优选实施方案是根据被诊断有血液学赘瘤的患者的需要重复施用HAS或包含HAS的药物组合物(团剂施用)，所述患者此后或之前或同时接受基于施用一种或多种选自由以下组成的群组的化合物的标准疗法：细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素。

由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组意图包含通常向罹患某一类型的白血病或淋巴瘤的患者给与的所有药物。术语细胞抑制剂尤其意图描述一组包括以下，或优选由以下组成的药物：烷基化剂、烷基磺酸盐、抗代谢物、抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、有丝分裂抑制剂、蛋白酶体抑制剂、小分子酪氨酸激酶抑制剂、分化剂、免疫调节药物和普乐沙福(Plerixafor)。细胞抑制剂的群组包含

·烷基化剂，其包括各类型的氮芥，如用以治疗ALL和骨髓瘤、淋巴瘤、白血病、多发性骨髓瘤的环磷酰胺(cyclophosphamide)；用于治疗淋巴瘤、CLL和霍奇金氏淋巴瘤的苯丁酸氮芥(chlorambucil)；用于治疗CLL和淋巴瘤的苯达莫司汀(bendamustine)；用以治疗非霍奇金氏淋巴瘤的异环磷酰胺(ifosfamide)；用以治疗真菌型皮肤T细胞淋巴瘤(CTCL)的二氯甲基二乙胺(mechlorethamine)；用于治疗多发性骨髓瘤的马法兰(melphalam)；和亚硝基脲，诸如用以治疗多发性骨髓瘤、霍奇金氏病和非霍奇金氏淋巴瘤的卡莫司汀(carmustine)；用以治疗霍奇金淋巴瘤的洛莫司汀(lomustine)；和三嗪，诸如用以治疗转移性恶性黑素瘤以及霍奇金和非霍奇金淋巴瘤的达卡巴嗪(dacarbazine)；和苯甲酰胺，诸如用于治疗淋巴瘤的丙卡巴肼(procarbazine)；和顺铂(cisplatin)；

·烷基磺酸盐，其包括用于治疗CML的白消安(busulfan)；

·抗代谢物，其包括用于治疗白血病、ALL和儿科非霍奇金氏淋巴瘤的6-巯基嘌呤；氯法拉滨(clofarabine)，即一种用于治疗复发或难治性ALL的嘌呤核苷抗代谢物；用于治疗ALL、AML、非霍奇金氏淋巴瘤、CML和脑膜白血病的阿糖胞苷(cytarabine)；甲氨蝶呤(methotrexate)，即一种用于治疗淋巴瘤和白血病的二氢叶酸还原酶抑制剂；硫鸟嘌呤(thioguanine)，即一种用于治疗尤其是儿童的急性成淋巴细胞性白血病的嘌呤类似物；奈拉滨(nelarabine)，即用于治疗T细胞ALL、T细胞成淋巴细胞性淋巴瘤的另一嘌呤核苷类似物；用于治疗毛细胞白血病的克拉屈滨(cladribine)；用于治疗CLL、无痛非霍奇金氏淋巴瘤和AML的氟达拉滨(fludarabine)；用于治疗毛细胞白血病的喷司他汀(pentostatin)；用于治疗骨髓增殖性疾病的羟基脲；用于治疗淋巴瘤的吉西他滨(gemcitabine)；用于治疗复发或难治性外周T细胞淋巴瘤的普拉曲沙(pralatrexate)；用于治疗T细胞ALL和T细胞成淋巴细胞性淋巴瘤的奈拉滨；

·抗肿瘤抗生素，其包括蒽环霉素(anthracycline)，诸如用于治疗ALL和AML的道诺霉素(daunorubicin)以及用于治疗ALL和AML以及不同类型的白血病和淋巴瘤的多柔比星(doxorubicin)和用于治疗AML、ALL和CML的伊达比星(idarubicin)；和用以治疗霍奇金氏淋巴瘤和其它淋巴瘤的博莱霉素(bleomycin)；

·拓扑异构酶抑制剂，其包括用于治疗ALL的替尼泊苷(teniposide)和用于治疗霍奇金氏和非霍奇金氏淋巴瘤以及非淋巴细胞性白血病的依托泊苷(etoposide)；用于治疗AML和非霍奇金氏淋巴瘤的米托蒽醌(mitoxantrone)；

·有丝分裂抑制剂，其包括用于治疗ALL急性白血病、恶性淋巴瘤、霍奇金氏病和急性红细胞增多症的长春新碱(vincristine)；用于治疗霍奇金氏和非霍奇金氏淋巴瘤的长春花碱；用于治疗非霍奇金氏淋巴瘤的伊沙匹隆(ixabepilone)；

·蛋白酶体抑制剂，其包括用于治疗复发多发性骨髓瘤和套膜细胞淋巴瘤的硼替佐米(bortezomib)和用于治疗多发性骨髓瘤的卡非佐米(carfilzomib)；

·酪氨酸激酶抑制剂，其包括用以治疗费城染色体(Philadelphia chromosome)阳性慢性骨髓性白血病、Ph+急性成淋巴细胞性白血病和CML的伊马替尼(imatinib)；用以治疗患有对先前疗法具有抗性或不耐受性的费城染色体阳性急性成淋巴细胞性白血病以及CML的成人的达沙替尼(dasatinib)；和用以治疗费城染色体阳性急性成淋巴细胞性白血病、CML的泊那替尼(ponatinib)；诸如用于治疗CLL和淋巴瘤的依布替尼(ibrutinib)；用于治疗费城染色体阳性(Ph+)CML的博舒替尼(bosutinib)和用以治疗伊马替尼抗性CML的尼罗替尼(nilotinib)；

·分化剂，其包括用于治疗急性早幼粒细胞性白血病的维甲酸(tretinoin)、用于治疗皮肤T细胞淋巴瘤的蓓萨罗丁(bexarotene)和用于治疗急性早幼粒细胞性白血病的三氧化二砷；

·免疫调节药物，其包括用于治疗多发性骨髓瘤的沙利度胺(thalidomide)和来那度胺(lenalidomide)以及用于治疗抗血管生成复发和难治性多发性骨髓瘤的泊马度胺(pomalidomide)；

·用以治疗淋巴瘤和多发性骨髓瘤的普乐沙福

术语具有抗癌活性的生物制剂意图描述一组包括以下，或优选由以下组成的药物：抗体酪氨酸激酶抑制剂、分化剂、单克隆抗体、免疫调节药物。

本发明的具有抗癌活性的生物制剂的群组包含

·抗体酪氨酸激酶抑制剂，其包括例如西妥昔单抗(cetuximab)、贝伐单抗(bevacizumab)、帕尼单抗(panitumumab)和曲妥珠单抗(trastuzumab)；

·单克隆抗体，其包括例如用于治疗CD20阳性非霍奇金氏淋巴瘤和慢性淋巴细胞性白血病的利妥昔单抗(rituximab)、用于治疗B细胞慢性淋巴细胞性白血病的阿来珠单抗(alemtuzumab)、用于治疗CLL、滤泡性非霍奇金氏淋巴瘤或弥漫性大B细胞淋巴瘤的奥法珠单抗(ofatumumab)、用于治疗CLL以及杀灭B细胞的奥滨尤妥珠单抗(obinutuzumab)以及用以治疗霍奇金淋巴瘤和全身性间变性大细胞淋巴瘤的布妥昔单抗维多汀(brentuximabvedotin)和用以治疗多发性骨髓瘤的斯图希单抗(siltuximab)；

·免疫调节蛋白质，其包括例如抗体，诸如用于治疗全身性红斑狼疮的贝利木单抗(belimumab)、用于治疗CAPS综合征的卡那单抗(canakinumab)、用于治疗克罗恩病(Morbus Crohn)的英夫利昔单抗(infliximab)、用于治疗黑素瘤的易普利单抗(ipilimumab)和用于治疗多发性硬化症的那他珠单抗(natalizumab)。

具有抗癌活性的激素包括褪黑素(melatonin)和皮质类固醇(corticosteroid)。皮质类固醇包括用于治疗ALL和非霍奇金氏淋巴瘤、霍奇金氏淋巴瘤和多发性骨髓瘤的泼尼松(prednisone)或泼尼松龙(prednisolone)以及用于治疗多发性骨髓瘤的地塞米松(dexamethasone)。

其它辅助疗法也可与基于施用HAS作为治疗活性化合物的治疗组合。

在治疗方法的一优选实施方案中，在治疗间隔期间重复施用羟烷基化淀粉，同时患者从已用第二化合物治疗所致的副作用康复。

在另一优选实施方案中，连续施用本发明的治疗有效物质，同时患者此后或之前或在连续施用的时间内接受基于施用一种或多种选自由以下组成的群组的化合物的标准疗法：细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素。

优选地，除非明确指定，否则通过施用包含两种物质，即羟烷基化淀粉和选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组的化合物的单一组合物进行的同时施用不涵盖在本发明的范围中。

在一优选实施方案中，羟烷基化淀粉和第二化合物不包含在同一药物组合物中，优选地，它们不被同时施用。

优选地，包括第一步a)施用HAS以及在步骤a)之前或之后第二步b)施用一种或多种选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组，被作为血液学赘瘤的护理标准治疗剂给与的化合物的方法对被诊断有血液学赘瘤的患者的损伤较小，并且导致的副作用小于用单独一种或多种选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组，被作为血液学赘瘤的护理标准治疗剂给与的化合物进行的治疗。

在一优选实施方案中，本发明的治疗方法比通过施用选自由细胞抑制剂组成的群组，优选选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组的化合物来治疗相同疾病更有效。

在另一实施方案中，本发明涉及一种试剂盒，其包括用于治疗血液学赘瘤的本发明的包含HAS的药物组合物。优选地，试剂盒还包括包含一种或多种选自由以下组成的群组的治疗活性化合物的第二药物组合物：细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素。优选地，第二药物组合物中的治疗活性化合物选自由EMEA或FDA核准用于治疗白血病或淋巴瘤患者的那些，最优选地，它是护理标准药物。

根据本发明，术语“癌症”是指由已丧失对正常生长控制的易感性的细胞的增殖引起或特征在于所述增殖的增殖性病症或疾病。所述术语涵盖与肿瘤生长相关的疾病和任何其它细胞增殖性病症。所述术语意图包括涉及细胞生长不受控制的所有病理学病状，而不管时期或侵袭性如何。

在一个实施方案中，癌症可定位于特定组织或器官(例如在乳房、前列腺或肺中)，并且因此可未已超出起源组织进行扩散。在另一实施方案中，癌症可为侵袭性的，并且因此可已超出它起源于其中的组织的层次扩散至正常周围组织中(常常也被称为局部晚期癌症)。侵袭性癌症可为或可不为转移性的。在一优选实施方案中，癌症是转移性的。如果癌症已从它的原始位置扩散至身体的远端部分，那么它是转移性的。

此外，术语癌症应被理解为描述本领域中已知的所有类型的癌症。

术语“肿瘤”意图描述正以不受控制方式生长的细胞的局部化积累、已或正异常生长的身体组织、或增殖性细胞的局部化积累。肿瘤可为癌性的(恶性)或非癌性的(良性)。从身体组织显现的细胞增殖性疾病导致出现实体肿瘤，而从血液、淋巴或骨髓细胞显现的血液学赘瘤(如淋巴瘤和白血病)被视为非实体恶性肿瘤。作为一种类型的血液学赘瘤的白血病通常不形成肿瘤。然而，淋巴瘤可将它们自身呈现为肿瘤。通常，细胞在受试者被诊断有淋巴瘤之前积累在淋巴结中。

由于其中在肿瘤已形成之前，或如果已诊断出第一肿瘤，那么至少在第二肿瘤已形成之前治疗受试者的治疗是优选的，所以通常优选的是血液学赘瘤的特征在于不存在实体肿瘤。当对特定血液学赘瘤的确定依赖于肿瘤细胞的出现或遗传特征(标志物)时，这个肿瘤起源于在积累以形成肿瘤之前通过血液或淋巴系统浮动的癌细胞。在一优选治疗中，患者在实体肿瘤已形成之前被治疗。

然而，预期白血病细胞在皮下注射时会导致肿瘤局部生长。那个原理在动物模型中用于研究针对白血病的治疗选项。

本发明的“药物组合物”包含治疗有效量的如本文所述的HAS，其可例如通过连接在烷基剩余部分处的羟基官能基或替代这个羟基官能基被进一步取代，并且优选包含治疗有效量的所有那些特定和明确公开的HAS和HES，包括硫代HAS和硫代HES。

药物组合物可包含不同浓度的固体或液体制剂。以下更详细描述包括独自或呈药物组合物形式的羟烷基化淀粉的不同实施方案：根据本发明，活性成分羟烷基淀粉可仅在溶解于电解质溶液中的情况下独自施用，或它可与药物赋形剂组合使用。通常，羟烷基淀粉自身将呈固体形式，其可与可呈固体或液体形式的适合药物赋形剂组合。作为赋形剂，可提及碳水化合物、无机盐、抗微生物剂、抗氧化剂、表面活性剂、缓冲剂、酸、碱及其组合。特定碳水化合物赋形剂包括例如单糖，诸如果糖、麦芽糖、半乳糖、葡萄糖、D-甘露糖、山梨糖等；二糖，诸如乳糖、蔗糖、海藻糖、纤维二糖等；和糖醇，诸如甘露糖醇、麦芽糖醇、乳糖醇、木糖醇、山梨糖醇(葡糖醇)、吡喃糖基山梨糖醇、肌醇等。赋形剂也可包括无机盐或缓冲剂，诸如柠檬酸、氯化钠、氯化钾、硫酸钠、硝酸钾、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠及其组合。

本发明的药物组合物也可包含用于防止或测定微生物生长的抗微生物剂，例如像氯化苯甲烃铵、苄索氯铵、苯甲醇、氯化十六烷基吡啶鎓、氯丁醇、苯酚、苯乙醇、硝酸苯汞、硫柳汞及其组合。

本发明的药物组合物也可包含抗氧化剂，例如像抗坏血酸棕榈酸酯、丁基化羟基苯甲醚、丁基化羟基甲苯、次磷酸、单硫代甘油、五倍子酸丙酯、亚硫酸氢钠、甲醛次硫酸钠、焦亚硫酸钠及其组合。

本发明的药物组合物也可包含表面活性剂，例如像聚山梨醇酯或脱水山梨醇酯；脂质，诸如磷脂和卵磷脂以及其它磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、酸和脂肪酯；类固醇，诸如胆固醇；和螯合剂，诸如EDTA或锌。

本发明的药物组合物也可包含酸或碱，例如像盐酸、乙酸、磷酸、柠檬酸、苹果酸、乳酸、甲酸、三氯乙酸、硝酸、高氯酸、磷酸、硫酸、反丁烯二酸及其组合、和/或氢氧化钠、乙酸钠、氢氧化铵、氢氧化钾、乙酸铵、乙酸钾、磷酸钠、磷酸钾、柠檬酸钠、甲酸钠、硫酸钠、硫酸钾、反丁烯二酸钾及其组合。

在一优选实施方案中，药物组合物包含本发明的羟烷基淀粉作为在治疗血液学赘瘤方面具有治疗活性的唯一成分，更优选作为在治疗癌症方面具有治疗活性的唯一化合物，更优选是由欧洲药品管理局(EMA)或食物与药品管理局(FDA)或两者核准用于治疗癌症的唯一治疗活性化合物-核准药物。

最优选地，HAS是这种药物组合物中的唯一药物活性成分，或更优选是由欧洲药品管理局(EMA)或食物与药品管理局(FDA)或两者核准的唯一治疗活性化合物。

术语“护理标准药物”或“护理标准治疗剂”代表如对于相应癌症类型所述的最优药物。在本发明的情形下，它用于描述患者在被向本领域中熟练的肿瘤学家呈递时将接受的最佳可用治疗剂。

术语“参照药物”代表如对于相应动物模型所述的最优药物。在图1和2中，它已被称为“SOC”。

术语“治疗血液学赘瘤”和“治疗被诊断有血液学赘瘤的患者”是指治疗措施，其中目标在于预防或减缓(减轻)非所需生理变化或病症，诸如淋巴系统、骨髓或血液的过度增殖性病状(诸如细胞增殖性疾病或赘生疾病)的增长、发展或扩散；良性或恶性肿瘤或由其产生的转移的形成。出于本发明的目的，有益或所需临床结果包括但不限于减轻症状、减小疾病程度、使疾病病况稳定(即不恶化)、延迟或减缓疾病进展、改善或缓解疾病病况、以及部分或总体缓和。转移性癌细胞通常产生于本文公开的细胞类型，并且与本文公开的各类型的主要差异是这些细胞现时存在于癌细胞最初并非从其发展的组织中。因此，如果提及某一癌症类型或增殖性疾病，那么术语涵盖它的转移形式。

应了解治疗也可意指相较于如果不接受治疗的预期存活期，使存活期延长。应了解治疗也可被理解为预防癌症或防止肿瘤生长。

在一优选实施方案中，治疗有效降低产生于转移性癌症的肿瘤的生长速率或预防转移形成。

特别设想的是术语根据本发明“治疗血液学赘瘤”包括施用治疗有效量的羟烷基化淀粉或包含羟烷基淀粉作为唯一治疗活性成分的药物组合物。治疗有效量是导致至少一种来自由以下组成的群组的作用的量：降低癌细胞的数目；降低肿瘤尺寸；(e)预防肿瘤形成；抑制，即在一定程度上减缓并且优选阻止癌细胞浸润至周围器官中；预防癌细胞扩散(转移)；抑制，即在一定程度上减缓并且优选阻止肿瘤转移；至少在一定程度上抑制肿瘤生长；降低细胞增殖速率；降低增殖性细胞的数目以及在一定程度上缓和一种或多种与癌症相关的症状；减弱、改善或消除血液学赘瘤以及提高生活质量。可通过标准措施来确定特定量的羟烷基化淀粉是否施加这些作用中的至少一个或若干，即在药学上有效。特定来说，这可通过评估癌症疗法功效来确定。例如可通过确定达到疾病进展的时间、生活质量的提高和/或通过测定响应速率来评估癌症疗法功效。因此，所需剂量将取决于所治疗病状的严重性、患者的个体响应、所用施用方法、癌症类型、肿瘤等。熟练人士能够基于他的常识确定恰当剂量。通常，羟烷基化淀粉组分的剂量也可独立于疾病病况加以施用，因为产品被视为无毒，并且剂量限度被视为基于当前临床经验(用例如标注为HES 130/0.4的溶液的

10％：30ml/kg/天和/或标注为HES 130/0.4的溶液的

6％：50ml/kg/天)。近来，剂量推荐被修正为

10％：18ml/kg/天和/或

6％：30ml/kg/天。

如本文所用的术语“施用”优选是指将化合物(诸如羟烷基淀粉或选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组的化合物)或本发明的药物组合物引入受试者，诸如被诊断有血液学赘瘤的患者中。所述术语包括通过胃肠外和经肠施用途径来施用。胃肠外施用途径选自包含以下的群组：血管内、经粘膜、经皮/皮内、肌肉内(i.m.)、静脉内(i.v.)、皮内、皮下(s.c.)、腹膜内(i.p.)、室内、颅内、经阴道、经鼻、肿瘤内、骨內、鞘内和肺内。经肠施用方法选自包含以下的群组：口服、经鼻、舌下和经直肠施用以及通过管饲(通过馈送管)来施用，诸如经皮内窥镜胃造口术(PEG管)或经皮空肠造口术馈送管(PJG管)。应了解施用途径可取决于待治疗的癌症。

根据本发明，优选施用途径是胃肠外施用。进一步优选的是所述胃肠外途径是输注，优选向血管中输注。最优选施用途径是静脉内途径。

优选地，施用单次剂量(团注)的治疗有效量的以上提及的化合物历经5分钟至5小时的时期。

在下文中，术语“细胞抑制剂”应被理解为由一种或多种已知在化学疗法中有效，旨在通过抑制细胞生长来在罹患血液学赘瘤的患者中增加存活率、延长患者寿命、降低恶性细胞计数和/或减轻症状的物质组成。因此，所述术语包括细胞毒性和细胞抑制性活性成分。

应了解与生物工艺学合成相对比，名为细胞抑制剂的物质的群组被进一步表征为可通过化学合成获得。术语细胞抑制剂将不涵盖HAS或HES，优选也不涵盖其它淀粉衍生物，最优选不涵盖其它多糖。

术语“具有抗癌活性的生物制剂”应被理解为由通过生物工艺学方法产生，对癌细胞具有细胞毒性和/或细胞抑制性作用的蛋白质或核酸组成。实例是抗体，诸如西妥昔单抗。

术语“具有抗癌活性的激素”应被理解为由能够影响远端细胞或器官中的功能的生物化学化合物(包括蛋白质)组成，所述化合物由细胞、腺体、器官或以生物合成方式产生并释放，以及在例如通过表达相应激素受体而易感于所述激素的作用的癌细胞中施加抗增殖作用。

许多年来，用于治疗和防治血容量减少的羟乙基化淀粉也呈i.v.输注形式处于使用中，并且未显示毒性副作用。由所述其它医学用途得知的剂量推荐仅由于物理限制而指定上限。标注为于0.9％氯化钠中的“6％羟乙基淀粉130/0.4”的溶液可历经数天重复施用。因此，患者可被提供以与单次剂量或多次剂量的一种或多种选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组的化合物联合的持续HES输注以治疗他的癌症，并且抑制肿瘤的生长速率。

羟烷基化淀粉也可在用例如细胞抑制剂进行的血液学赘瘤治疗方案期间或之后用于所谓浇灌疗法(watering therapy)中(Ko等(2011)Intravenous fluid therapysuccessfully prevents renal injury by gemcitabine in patients with pancreaticcancer.Pancreas 2011年7月；40(5):784-6)。此处，除通过施用浇灌溶液实现的对例如肾和膀胱的器官的保护之外，也可实现治疗癌症血液学赘瘤的额外益处。

优选地，羟烷基淀粉连同适合载体和/或适合稀释剂，诸如优选是供i.v.、i.m.、i.p.或s.c.施加的无菌溶液一起施用。

进一步优选的是施用途径涉及HAS的备用液体溶液。

如本文所用的术语“受试者”涉及动物，并且优选涉及哺乳动物。在一优选实施方案中，受试者是啮齿动物，诸如小鼠或大鼠。甚至更优选的是其中受试者是灵长类动物的实施方案。最优选地，受试者是人。根据本发明，应了解术语“受试者”也涉及罹患血液学赘瘤的个体或需要治疗血液学赘瘤的个体。在本发明的一优选实施方案中，术语“受试者”描述被诊断有血液学赘瘤的癌症患者。

术语“羟烷基淀粉”或“羟烷基化淀粉”涵盖各种羟烷基化淀粉，如将在以下更详细所述。这些羟烷基淀粉可被进一步取代。

羟烷基淀粉是部分水解的天然淀粉的醚衍生物，其中淀粉中的羟基被适合羟烷基化。优选羟烷基淀粉是羟丙基淀粉和羟乙基淀粉，其中羟乙基淀粉是尤其优选的。

本发明不仅包括被携带羟基官能基的烷基残基取代的羟烷基化淀粉(HAS)的新型医学用途，而且还包括被替代性烷基取代的那些烷基化淀粉的新型医学用途。在一个实施方案中，烷基携带也被称为硫氢基的硫醇基团。在另一实施方案中，那些烷基化淀粉在被硫基官能基(硫醇基团)置换的葡萄糖单元中具有未取代的羟基官能基(羟基)。在另一实施方案中，烷基化淀粉的一些葡萄糖单元被烷基化，其中这些烷基中的一些携带硫醇基团，并且一些携带羟基官能基，并且其中C2、C3和C6位置中的一些可被取代，优选被硫醇基团取代。这些淀粉在本文中被称为硫代HAS。它们已在以下以及在PCT/EP2011/003458中被更详细描述。

根据本申请，“烷基”应理解为包括由优选具有2至12个碳原子的链长度的饱和烃组成的直链或支链官能团或侧链。所述饱和烃可为直链(通式-C_nH_2n+1)，其中碳原子以蛇样结构接合，诸如丙基-、丁基-、戊基-、己基-、庚基-、辛基-、壬基-、癸基-、十一烷基-和十二烷基-残基；或支链(通式-CnH2n+1，其中n高于或等于3)，其中碳主链在一个或多个方向上分裂，其包括例如异丙基-、异丁基-、叔丁基、1-异戊基-、2-异戊基、3-异戊基-、新戊基-剩余部分。

淀粉是一种具有式(C₆H₁₀O₅)_n的多糖，其大致上由通过糖苷键联加以偶联的α-D-葡萄糖单元组成。一般来说，淀粉大致上由直链淀粉和支链淀粉组成。直链淀粉由直链组成，其中葡萄糖单元通过α-1,4-糖苷键联加以连接。支链淀粉具有高度分支结构，具有α-1,4-糖苷键联和α-1,6-糖苷键联。

可由其制备羟烷基淀粉的天然淀粉包括谷物淀粉、谷物豆类淀粉和马铃薯淀粉。谷物淀粉包括稻米淀粉、小麦淀粉(诸如单粒小麦(einkorn)淀粉、斯佩耳特小麦(spelt)淀粉、软质小麦淀粉、二粒小麦(emmer)淀粉、硬粒小麦淀粉或卡姆特小麦(kamut)淀粉)、玉米淀粉、黑麦淀粉、燕麦淀粉、大麦淀粉、黑小麦淀粉和粟淀粉(诸如高粱淀粉或苔麸(teff)淀粉)。谷物豆类淀粉包括菜豆淀粉、豌豆淀粉、扁豆淀粉和羽扇豆淀粉。由其制备羟烷基淀粉的优选天然淀粉具有相对于直链淀粉，高含量的支链淀粉。这些淀粉的支链淀粉含量是例如至少70重量％、优选至少75重量％、更优选至少80重量％、更优选至少85重量％、更优选至少90重量％，诸如多达95重量％、多达96重量％、多达97重量％、多达98重量％或多达99重量％或多达100重量％。具有尤其高支链淀粉含量的天然淀粉是例如优选从属于传统载培(例如天然Eliane种类)或遗传修饰的支链淀粉马铃薯种类的大致上无直链淀粉马铃薯提取的适合马铃薯淀粉(诸如蜡质马铃薯淀粉)和来自蜡质种类的谷物(诸如蜡质玉米或蜡质稻米)的淀粉。

通常，通过使淀粉粒破碎以及裂解大分子以获得具有所需大小的分子来制备羟烷基淀粉。裂解可例如通过如例如使用α-淀粉酶和/或β-淀粉酶的酶促降解，和/或借助于酸性水解来进行。所需部分的纯化可例如借助于使用具有适合截断限度的膜进行超滤来实现，所述膜允许分离例如具有多达5000Da或多达1000Da的分子量的低分子副产物。可连续进行两个或更多个裂解阶段，其中在各阶段中有可能使用相同或不同裂解技术。在各裂解阶段之后，可纯化所得产物。可如例如通过冷冻干燥来分离最终获得的产物。

基于由此获得的淀粉部分，通过使羟基醚化来制备羟烷基淀粉。一般来说，可涵盖由使低分子醇醚化得知的所有反应，诸如不用催化剂或用碱性催化剂的反应。技术工艺中的优选方法包括活化烯烃的迈克尔(Michael)加成、以含有脂族卤素的化合物的亲核取代进行的威廉姆斯(Williams)合成、或用也称为环氧化物的环氧乙烷进行的反应。

关于制备羟烷基淀粉，更特定来说制备羟乙基淀粉，参照例如Sommermeyer等,Chromatographia,25,1988,第167-168页；C.Jungheinrich等,Clin.Pharmacokin.,44(7),2005,第681-699页；J.-M.Mishler IV,Pharmacology of hydroxyethyl starches,OxfordMedical Publications,2002,第1-30页。

根据本发明，术语“羟烷基淀粉”(HAS)是指具有根据下式(III)的组成的淀粉衍生物

其中描绘的环结构是末端或非末端糖单元，其可为HAS分子的一个如在本申请中单独所述的脱水葡萄糖单元，并且其中HAS”是剩余部分，即羟烷基淀粉分子的残余部分，所述残余部分连同描绘的含有残基R^aa、R^bb以及R^cc和R^rr的环结构一起形成总体HAS分子。在式(III)中，R^aa、R^bb和R^cc彼此独立地是羟基、直链或支链羟烷基或-O-HAS”。

在描绘的环结构是HAS分子的非末端糖单元的情况下，残基R^rr是-O-HAS”。在描绘的环结构是HAS分子的末端糖单元的情况下，R^rr是-OH，并且式(III)以它的半缩醛形式显示这个末端糖单元。视例如溶剂而定，这个半缩醛形式可与游离醛形式平衡，如以下流程中所示：

除显示在式(III)的左手侧的剩余部分HAS”之外，如在如上所述的残基R^rr的情形下所用的术语O-HAS”也是HAS分子的另一剩余部分，其作为残基R^rr连接于式(III)的描绘的环结构，

并且连同显示在式(III)的左手侧的残基HAS”和描绘的环结构一起形成总体HAS分子。

除末端糖单元之外，以上讨论的各剩余部分HAS”也包含以下，优选基本上由以下组成：一个或多个根据式(IIIa)的重复单元

根据本发明，视给定糖单元的残基R^aa、R^bb和R^cc中的至少一个是否还包含另一剩余部分-O-HAS”而定，式(III)中所示的HAS分子是直链或包含至少一个分支点。如果除显示在式(III)的左手侧的HAS”之外，以及任选除R^rr中含有的HAS”之外，给定糖单元的R^aa、R^bb和R^cc都不包含另一剩余部分-O-HAS”，那么HAS分子是直链。

包含两种或更多种不同羟烷基的羟烷基淀粉也是可设想的。包含在羟烷基淀粉中的至少一种羟烷基可含有一个或多个，特定来说两个或更多个羟基。根据一优选实施方案，至少一种羟烷基仅含有一个羟基。

根据本发明，根据以上提及的式(III)的羟烷基淀粉(HAS)

被公开用于治疗血液学赘瘤。除末端糖单元之外，包含在HAS”中的糖单元也可为相同或不同，并且优选具有如上所示的根据式(IIIa)的结构

这个单元也更详细描述于下文中：

羟烷基淀粉分子的典型脱水葡萄糖单元具有以下式(I)：

在式(I)中，残基R^a(-OR^a在式III中被描绘成R^cc)、R^b(-OR^b在式III中被描绘成R^aa)和R^c(-OR^c在式III中被描绘成R^bb)独立地是[(-CR^jR^k)_y-O]_z-H，其中R^j和R^k独立地是H或烷基(优选是低级烷基，诸如甲基或乙基)，优选是H；

y是整数0至6，优选是2至4，诸如0、1、2、3、4，更优选是2或3，更优选是2；

z是整数0至20，优选是0至10，更优选是0至6，更优选是0至4，诸如0、1、2、3、4，条件是在y是0的情况下，z同样是0。

然而，如果存在大分子的分支位点位于葡萄糖分子上，那么R^c也可为葡萄糖分子的另一链，例如像(Glc-1,4-Glc)_n-Glc，其中n可具有0至20的值。类似于初始鉴定的链，这种侧链中的脱水葡萄糖单元也可被取代。

如果脱水葡萄糖单元是羟烷基淀粉分子的不被至少一个羟烷基部分取代的单元，那么R^a以及R^b和R^c中的下标z是0。如果脱水葡萄糖单元是羟烷基淀粉分子的仅在C2位置中被羟烷基部分取代的单元，那么R^b和R^c中的下标z是0，而在R^a中大于0。如果脱水葡萄糖单元是羟烷基淀粉分子的仅在C3位置中被羟烷基部分取代的单元，那么R^a和R^c中的下标z是0，而在R^b中大于0。如果脱水葡萄糖单元是羟烷基淀粉分子的仅在C6位置中被羟烷基部分取代的单元，那么R^a和R^b中的下标z是0，而在R^c中大于0。如果脱水葡萄糖单元是羟烷基淀粉分子的仅在C2和C3位置中被羟烷基部分取代的单元，那么R^c中的下标z是0，而在R^a和R^b中大于0。如果脱水葡萄糖单元是羟烷基淀粉分子的仅在C2和C6位置中被羟烷基部分取代的单元，那么R^b中的下标z是0，而在R^a和R^c中大于0。如果脱水葡萄糖单元是羟烷基淀粉分子的仅在C3和C6位置中被羟烷基部分取代的单元，那么R^a中的下标z是0，而在R^b和R^c中大于0。如果脱水葡萄糖单元是羟烷基淀粉分子的在C2以及C3和C6位置中被羟烷基部分取代的单元，那么R^a以及R^b和R^c中的下标z大于0。

在本发明的一个实施方案中，羟烷基淀粉是纯羟丙基淀粉，其中下标z大于0的相应残基R^a或R^b或R^c具有的下标y是3，并且R^j与R^k两者均是H。因为在制备期间可发生多重羟丙基化，所以下标z可大于1，诸如是2、3或更大。

此外，每当使用环氧化物进行烷基化时，形成另一形式的侧链。在这个情况下，羟基官能基不位于烷基侧链的末端C原子上，而是代之以位于C²，即从环计数的第二C原子上。在借助于环氧化物1,2-环氧丙烷进行丙基化之后，残基R^a或R^b或R^c中的至少一个将具有以下外观，例如：(C¹R^jR^k-C²R_j(OH)-C³R^jR^kH)。在借助于未取代的1,2-环氧丙烷，换句话说用甲基环氧乙烷(“氧化丙烯”)进行丙基化之后，R^j和R^k各自是H。

在一优选实施方案中，羟烷基淀粉是纯羟乙基淀粉，此处下标z大于0的相应残基R^a或R^b或R^c具有的下标y是2，并且R^j与R^k两者均是H。因为在制备期间可发生多重羟乙基化，所以下标z可大于1，诸如是2、3或更大。如果例如在脱水葡萄糖单元的给定羟基上发生双重羟乙基化，那么下标y和下标z均是2，并且一个相应残基R^a(或R^b或R^c)中的残基R^j和R^k均是H，因此，所述相应残基是-CH₂-CH₂-O-CH₂-CH₂-OH。

也有可能的是使用不同烷基化剂(混合烷基化)，此意味着R^a、R^b和R^c将以y可具有不同值的方式替代地加以表示-因此，举例来说，在混合羟乙基化和羟丙基化的情况下，一个残基中的y可为2，而在另一残基中可为3。此外，在z>0的残基R中，可存在其中值y可具有不同值(例如2或3)的侧链。

用环氧化物进行的混合烷基化也可导致可能在一个或各个残基R^a、R^b或R^c中以不同数目存在具有形式[(-CR^jR^k)_y-O]_z-H和具有形式[-C¹R^jR^k-C²R^j(C³R^jR^kH)-O]_z-H的结构单元。

此外，葡萄糖聚合物也可被硫代烷基残基取代。因此，在原则上，上述实施方案也有可能以在取代的侧链中具有硫原子而非氧原子的形式存在。在这个情况下，残基R^a、R^b和R^c中的至少一个可为-[(-CR^jR^k)_y-S]_z-H或[-C¹R^jR^k-C²R^j(C³R^jR^kH)-S]_z-H。根据本发明，这个种类的硫代羟烷基淀粉同样被公开用于治疗血液学赘瘤。

用于制备硫代羟烷基淀粉的方法可见于2012年1月公开的PCT申请“Conjugatescomprising Hydroxyalkyl Starch and a Cytotoxic Agent and Process for theirPreparation”WO2012/004005(PCT/EP2011/003458)中；特定来说，参照在第245-252页的制备方法(以“1.3.Special Procedures”开始直至并包括“1.4.9.General procedure forthe synthesis of SH-HES using sodium sulfide as nucleophile”)，并且当为理解所必需时，参照在第259-263页的相关表格6至9。

在一优选实施方案中，本发明的羟烷基淀粉是羟乙基淀粉、羟丙基淀粉或羟丁基淀粉，其中羟乙基淀粉是特别优选的。

根据本发明，羟烷基淀粉(HAS)优选是羟乙基淀粉(HES)，所述羟乙基淀粉优选具有根据以下式(III)的结构

其中R^aa、R^bb和R^cc彼此独立地选自由以下组成的群组：-O-HES”和-[O-CH₂-CH₂]_s-OH，其中s在0至4的范围内，并且其中HAS”是羟乙基淀粉的剩余部分并以HES”缩写。残基R^rr是-O-HES”，或在式(III)显示HES的末端糖单元的情况下，R^rr是-OH。

作为聚合物以及由于制备方法，羟烷基淀粉是一种多分散化合物，其中个别羟烷基淀粉分子就聚合度、分支位点的数目和样式以及取代样式(即羟烷基的数目和/或位点)而言可不同。因此，通常通过统计平均参数来表征羟烷基淀粉。这些参数通常是平均分子量和表征取代样式的参数。后述参数通常鉴定为取代度(DS)、分子取代度(MS)和C2/C6比率，即在C2位置中被取代的脱水葡萄糖单元的数目与在C6位置中被取代的脱水葡萄糖单元的数目的比率，或Mw相对于Mn的比率(Mw/Mn)，其通常被称为PDI(多分散性指数)，并且表征分子量分布的分散度。

羟烷基淀粉可不仅在C2和C6位点处，而且也在C3位点处被羟烷基取代，但这个信息在提及特定类型的HAS时通常被省略。

具体说明HAS的第二参数通常涉及分子取代度MS，并且第三参数涉及在C2处的取代相对于在C6处的取代的比率(C2/C6比率)或涉及PDI。

一般来说，有两种方式在统计上描述羟烷基淀粉的平均分子量。第一参数是数均分子量，通常被称为Mn或M_n；第二参数是重均分子量，通常被称为Mw或M_w。

可例如借助于使用多角度光散射检测的凝胶渗透色谱法(GPC/MALLS/RI)来测定分子量。例如参照W.-M.Kulicke等,Starch,45(12),1993,第445-450页。或者，可如例如根据欧洲药典7.0,01/2011:1785,第984页，使用流动FFF/MALLS，或另外根据B.Wittgren等,Int.J.Polym.Anal.Charact.7(1-2),2002,第19-40页来测定分子量。

在这个情形下，数均分子量由等式1定义：

(1)

其中n_i是具有摩尔质量M_i的种类i的羟烷基淀粉分子的数目。

指示这是平均值，但通常省略线条。

重均分子量M_w由以下等式定义：

(2)

其中n_i是具有摩尔质量M_i的种类i的羟烷基淀粉分子的数目。

指示这是平均值，但通常省略线条。

在本描述的情形下，术语“平均分子量”是指通过MALLS(多角度激光散射)-GPC方法测定的重量。

根据本发明的羟烷基淀粉具有从低至约20kDa变化至平均分子量多达1300kDA的平均分子量(Mw或MW)。

Mw相对于Mn的比率(Mw/Mn)，通常被称为PDI多分散性指数，是一种表征分子量分布的分散度的参数。这个参数越接近值1，分子量分布的分散度越小。

根据本发明，典型PDI值在4.0至1.1的范围内。

取代样式可使用¹H NMR，或通过更精细方法，借助于高分辨率¹³C NMR来至少部分定量测定。参照Y.M.Liu等,Chin.Chem.Lett.13(11),2002,第1097-1099页以及W.-M.Kulicke等,Starch,45(12),1993,第445-450页。一般来说，有三个惯用参数描述羟烷基淀粉的取代度。

鉴定为“DS”(取代度)的第一参数描述取代的脱水葡萄糖单元的数目与所有脱水葡萄糖单元的总数的比率。鉴于这个定义，DS的理论最大值是1.0。

可例如根据W.Banks等,Br.J.Pharmac.,47,1973,第172-178页；O.Larm等,Starch,33(7),1981,第240-244页；或Sommermeyer等,Starch,44(6),1992,第215-218页测定参数DS。

通常鉴定为“MS”(分子取代度)的第二参数描述已通过羟烷基化添加至淀粉大分子的葡萄糖分子中的羟烷基残基的数目(以mol计)相对于分子中葡萄糖单体的数目的比率。

假定烷基化导致每个羟基官能基添加单一烷基单元，摩尔取代度指示淀粉分子上的葡萄糖单元中的三个羟基单元已被羟烷基单元取代或置换的比例。在本文中，取代度1相当于三个游离羟基中的一个被100％取代。因此，在理论上，取代度的范围可从0.1变化至3，其中三指示所有三个羟基单元都将被100％取代。市场上存在许多不同类型的HAS，并且它们的取代度从0.3变化至2。

可根据Ying-Che Lee等,Anal.Chem.55,1983,第334-338页；或K.L.Hodges等,Anal.Chem.51,1979,第2171页测定参数MS。根据这些方法，在添加己二酸和氢碘酸下使已知量的羟烷基淀粉在二甲苯中经受醚裂解。随后借助于气相色谱法，使用甲苯作为内部标准物以及碘代烷校正溶液作为外部标准物来测定释放的碘代烷的量。

鉴定为C2/C6比率的第三参数描述在C2位置中被取代的脱水葡萄糖单元的数目与在C6位置中被取代的脱水葡萄糖单元的数目的比率。在制备羟烷基淀粉期间，C2/C6比率可通过用于羟烷基化反应的碱的量来影响。一般来说，碱的浓度越高，在C6位置中被羟烷基化的羟基的数目越大。

可例如根据Sommermeyer等,Krankenhauspharmazie 8(8),1987,第271-278页,尤其第273页测定参数C2/C6。

因此，各种类型的羟烷基淀粉和羟乙基淀粉通常通过陈述用kDa表示的它们的平均分子量、它们的摩尔取代度(MS)和它们的分支度(C2/C6)，或通过指示它们的多分散性(Mw/Mn)来描述。

本发明提供一种用于治疗血液学赘瘤的在根本上是新型的活性治疗剂，其降低与施用癌症治疗剂相关的问题性副作用。特定来说，，与施用一种或多种选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组的化合物相关的毒性副作用在血液学赘瘤以其减低的给药治疗时可得以降低。

因此，本发明涉及一种治疗方法，其中HAS作为唯一药剂或作为第一药剂被施用以治疗血液学赘瘤，所述HAS可在施用被表征为选自由以下组成的群组的治疗活性化合物的第二药剂之前或之后施用：细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和抗癌激素。

出乎意料地发现向用来自血液学赘瘤的癌细胞皮下接种，并且因此形成肿瘤的哺乳动物施用HAS减轻了他们的症状，并且导致肿瘤生长显著降低，同时不会不利影响他们的健康状况或体重。

有利的是，羟烷基淀粉或包含所述羟烷基淀粉的药物组合物在静脉内给与时不具有毒性，并且几乎不触发任何副作用，此在相较于细胞毒性剂时具有极大优势。因此，其中常规细胞毒性剂的最大剂量严重受限于它的毒性副作用，患者可潜在地除用一种或多种选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组的化合物进行护理标准治疗之外，也基于每日接受重复剂量或连续输注的羟乙基淀粉。

优选地，相较于用单独化合物进行的临床实践(如护理标准治疗中)，如所述的治疗方法允许降低第二化合物的剂量，同时保持治疗功效。

优选的是向受试者施用的羟烷基淀粉具有的平均分子量MW高于20kDa，优选高于40kDa，并且甚至更优选是MW大于65kDa。优选地，MW也不高于1300kDa。更优选地，MW在75至1200kDa的范围内，并且更优选在90至800kDa的范围内。

在一个实施方案中，根据本发明的羟烷基淀粉(HAS)具有的HAS的摩尔取代度MS在0.1至1.5的范围内。优选实施方案包括摩尔取代度值的特定范围是0.15至1.5、0.2至1.5、0.3至1.5、0.4至1.5、0.5至1.5、0.6至1.5、0.7至1.5、0.75至1.5，更优选在0.1至1.3、0.1至1.0、0.1至0.8、0.1至0.6以及0.1至0.5的范围内，并且也优选在0.90至1.4的范围内，诸如0.90、0.95、1.0、1.05，1.1、1.15、1.2、1.25、1.3、1.35或1.4。一特别优选范围是0.1至1.0，更优选是0.1至0.6，更优选是0.25至0.55。

根据一尤其优选实施方案，羟烷基淀粉衍生物具有在80至1200kDa的范围内的平均分子量MW和在0.1至1.5的范围内的MS。优选实施方案包括摩尔取代度值的特定范围是0.15至1.45、0.3至1.45、0.45至1.45、0.6至1.45、0.7至1.45、0.75至1.45，更优选在0.1至0.5的范围内，并且优选在0.90至1.4的范围内，诸如0.90、0.95、1.0、1.05，1.1、1.15、1.2、1.25、1.3、1.35或1.4，更优选地，摩尔取代度MS在0.1至1.30或0.1至0.5的范围内。

在一尤其优选实施方案中，羟烷基淀粉衍生物具有在30至700kDa的范围内的平均分子量MW和在0.1至0.7的范围内的摩尔取代度；更优选地，平均分子量MW在80至700kDa的范围内，并且MS在0.1至0.7的范围内。

在一个实施方案中，HAS的C2/C6比率在0.5至20的范围内，更优选在2至20、18、2至17、2至14、2至12、2至10、2至8、2至6、2至5或2至4的范围内。在另一优选实施方案中，所述C2/C6取代度在4至12、6至12、7至12的范围内，或优选在7至10的范围内，更优选在8至9的范围内。在另一优选实施方案中，所述C2/C6取代度在4至6的范围内，更优选是5.7。

在一优选实施方案中，多分散指数PDI在1.1至4.0的范围内，更优选在1.1至3.5、1.1至3、1.1至2.5、1.1至2、1.1至1.5、1.1至1.4、1.1至1.3以及1.1至1.2的范围内。在另一优选实施方案中，PDI在1.2至4、1.35至4、1.5至4、1.7至4、1.8至4、1.9至4、2至4、2.5至4或2至4或1.4至3.0的范围内。

所有这些范围都被视为包含与给出的精确数值相差它们的数值的约十分之一的值。

优选地，如上所述的本发明的羟烷基淀粉，特别是羟乙基淀粉，具有高于肾阈值的平均分子量MW(重均)。

在另一优选实施方案中，如上所述的本发明的羟烷基淀粉，特别是羟乙基淀粉，具有低于肾阈值的平均分子量MW(重均)。

根据由Waitzinger等(Clin.Drug Invest.1998；16:151-160)描述以及由Jungheinrich等(Clin.Pharmacokinet.2006；44(7):681-699)综述的方法测定肾阈值。优选地，肾阈值被表示为意指分子量MW等于或高于40kDa或45kDa或60kDa或65kDa。

在下文中，更详细描述羟烷基淀粉结构，其包括与一种或多种选自由以下组成的群组的化合物一起用于组合疗法中的所述类别的HAS的若干不同优选实施方案：细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素。

在一个优选实施方案中，羟烷基化淀粉是根据名称“HES130/0.4”已知的羟乙基化淀粉。尽管具有名称“HES 130/0.4”，但这是一种羟乙基淀粉，根据欧洲药典7.0,01/2011:1785,第984页中所述的标准测量和校正方法，其具有平均分子量105kDa，具有摩尔取代度0.38--0.45、平均摩尔取代度0.42。它的C2/C6比率在8.0与12.0之间。它的PDI是约2，即在1.7与2.3之间。它可商购获得，例如根据注册商标名

以于0.9％NaCl溶液中的10％溶液形式获得。“HES 130/0.4”的公开已知的规格的MW值130与HES 105/0.4的修正规格之间的差异由用于测定HAS的Mw的方法校正的变化所致。然而在先前根据Sommermeyer等(Krankenhauspharmazie,8,1987,08,第271-278页)进行测定，修正值(Mw 105)已根据如欧洲药典7.0,01/2011:1785,第984页中所述的校正加以测定。方法的差异是光散射值dn/dc的值：其中在Sommermeyer方法中，使用dn/dc值0.135，在“药典方法”中，这个值变为0.147+/-0.001。

在本发明的另一优选实施方案中，HAS是称为“HES 100/1.0/1.3”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有根据Sommermeyer等测定的平均分子量100kDa；并且具有根据欧洲药典7.0,01/2011:1785,第984页测定的平均分子量约84kDa(75-93kDa)；以及摩尔取代度1.0±0.05。它的C2/C6比率是5.0-6.0，或优选是5.7，并且PDI是1.3±0.1。

常常，括号中指示的名称，诸如“HES 200/0.5”是指陈旧测量结果，但在本文中对它进行说明，如果根据欧洲药典(如之前所引用)加以测量，那么将产生所述Mw值。除非另外明确提及，否则本申请中的Mw值(其不是名称的一部分)是指根据欧洲药典7.0,01/2011:1785,第984页，用其中规定的校正方法，使用dn/dc值0.147-0.149测定的那些。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 70/0.4/1.8”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量70kDa、摩尔取代度0.4以及PDI为1.8。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 70/0.5”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量70kDa、摩尔取代度0.5。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的羟乙基化淀粉HES100/0.1/2.0。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量100kDa、摩尔取代度0.1以及PDI为2.0。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的名为“HES 100/0.1/2.0”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量130kDa、摩尔取代度0.1以及PDI为2.0。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 100/0.7/1.3”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量100kDa、摩尔取代度0.7以及PDI为1.3。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 100/1.0/1.1”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量100kDa、摩尔取代度1.0以及PDI为1.1。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 150/0.7/1.3”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量150kDa、摩尔取代度0.7以及PDI为1.3。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 150/1.0/1.3”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量150kDa、摩尔取代度1.0以及PDI为1.3。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“维阿淀粉(Viastarch)”的羟乙基化淀粉，其具有平均分子量：Mw 150-300kDa、摩尔取代度MS 0.40--0.50，特征进一步在于最低10％部分的Mw>＝25kDa，最高10％部分的Mw<＝2000kDa，其也可被称为“HES 180/0.45”。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 200/0.5”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量200kDa，特征进一步在于Mw 170—290，而且具有摩尔取代度0.43至0.55。这个HES的特征可进一步在于最低10％部分的Mw>15kDa，并且最高10％部分的Mw<600kDa。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“喷他淀粉(Pentastarch)”的羟乙基化淀粉，其具有平均分子量：Mw 200-300kDa以及MS 0.40-0.50；特征进一步在于最低10％部分的Mw>＝15kDa，最高10％部分的Mw<＝1500kDa，其可被称为“HES 250/0.45”。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 300/1.0/1.3”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量250+/-17kDa(或根据Sommermeyer等的300kDa)、摩尔取代度1.0+/-0.05以及PDI为1.3+/-0.1。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的羟乙基化淀粉，具有平均分子量300kDa、取代度Ds低于0.4，如WO 00/48637中所述。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 450/0.7”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量450kDa(Mw400—500kDa)，其可通过最低10％部分的Mw>＝25kDa和最高10％部分的Mw<＝3000kDa；以及摩尔取代度0.7(MS 0.65—0.75)来进一步具体说明。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的羟乙基化淀粉，具有根据在Sommermeyer等下提及的方法的平均分子量500kDa以及摩尔取代度0.28和C2/C6比率8.7，如属于Weidler等的美国专利5,502,043“Use of hydroxyethyl starch for improvement ofmicrocirculation”的实施例3中所述并根据所述专利的实施例3。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的羟乙基化淀粉，具有平均分子量500kDa以及摩尔取代度MS在0.25与0.5之间和C2/C6比率2至低于8，如欧洲专利EP1732953B(权利要求1)中所述并根据所述专利(权利要求1)。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的羟乙基化淀粉，具有平均分子量600kDa和摩尔取代度0.5，如属于Fresenius AG的欧洲专利EP0402724B中所述并根据所述专利。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 700/0.5/2.5”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量600+/-40kDa(或根据Sommermeyer等的700kDa)、摩尔取代度0.5+/-0.05以及PDI为2.5。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“贺塔淀粉(Hetastarch)”的羟乙基化淀粉，具有平均分子量：Mw 550--800kDa、MS 0.70--0.80、最低10％部分的Mw>＝13kDa，最高10％部分的Mw<＝4000kDa；其可被描述为“HES 700/0.7”。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 700/0.7/2.0”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量600+/-40kDa(或根据Sommermeyer等的700kDa)、摩尔取代度0.7+/-0.05以及PDI为2.0。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 700/1.0/1.5”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量600+/-40kDa(或根据Sommermeyer等的700kDa)、摩尔取代度1.0+/-0.05以及PDI为1.5。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 700/1.3/1.5”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量600+/-40kDa(或根据Sommermeyer等的700kDa)、摩尔取代度1.3+/-0.05以及PDI为1.6+/-0.1。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 60/1.3/1.3”的羟乙基化淀粉。这是一种羟乙基淀粉，具有平均分子量50+/-5kDa(或根据Sommermeyer等的60kDa)、摩尔取代度1.3+/-0.05以及PDI为1.3+/-0.1。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的羟乙基化淀粉，具有平均分子量Mw1000kDa和取代度Ds在4与10之间，如美国专利6,680,305中所述。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的称为“HES 70000”的羟乙基化淀粉，也被称为“HES 70/0.55”，具有平均分子量Mw 60-80kDa。优选地，它具有MS 0.55-0.61。优选地，它具有PDI为2.3+/-0.1。

另一实施方案是用于治疗血液学赘瘤的已知羟乙基化淀粉，具有平均分子量Mw70kDa和C2/C6比率在2至8与之间，如A.N.Belder和B.Norman,Carbohydrate Research,第10卷,1969,第391-394页中所述并根据所述文献。

应了解尽管用于治疗的不同化合物被描述为实施方案，但这些化合物也被公开用于这种治疗中。此外，也公开用于治疗血液学赘瘤的方法，其包括以治疗有效量向有需要的受试者施用这种如本文所述的化合物。

在一优选实施方案中，HAS的治疗活性对癌细胞的增殖活性产生抑制作用，其中HAS降低血液学赘瘤细胞的增殖速率。这基于在比较HES治疗小鼠和未治疗小鼠的肿瘤组织时进行的观察。

在本发明的一实施方案中，HAS在降低或抑制增殖速率或阻滞癌细胞的有丝分裂周期或细胞在不受生理控制下增殖方面具有治疗活性，其中癌症是血液学赘瘤。

在本发明的另一实施方案中，HAS在通过阻滞处于有丝分裂周期中的癌细胞来降低癌细胞增殖速率方面具有治疗活性，其中癌症是血液学赘瘤。

可显示的是HAS溶液对由皮下施加白血病癌细胞引起的肿瘤的生长速率具有直接作用，然而可假定用HAS溶液治疗不影响健康组织中的正常增殖性细胞。

在本发明的一优选实施方案中，癌症选自源于血液、骨髓和淋巴系统的癌症的群组，优选选自血液学赘瘤的群组。优选地，群组由如表1中所列的所有那些造血性和淋巴癌症组成。

优选的是血液学赘瘤选自由白血病和淋巴瘤组成的群组。

表1(来自Swerdlow SH,Campo E,Harris NL等“WHO classification of tumoursof haematopoietic and lymphoid tissues”World Health Organizationclassification of tumors 2(第4版).International Agency for Research onCancer)

骨髓增殖性赘瘤

慢性骨髓性白血病，BCR-ABL1阳性

慢性中性粒细胞白血病

真性红细胞增多症

原发性骨髓纤维化

原发性血小板增多症

慢性嗜酸性粒细胞性白血病，不另外指定

肥大细胞增多症

骨髓增殖性赘瘤，不可分类

与嗜酸粒细胞增多以及PDGFRA、PDGFRB或FGFR1的异常相关的骨髓性和淋巴赘瘤

与PDGFRA重排相关的骨髓性和淋巴赘瘤

与PDGFRB重排相关的骨髓性赘瘤

与FGFR1异常相关的骨髓性和淋巴赘瘤

骨髓发育不良/骨髓增殖性赘瘤(MDS/MPN)

慢性骨髓单核细胞性白血病

非典型慢性骨髓性白血病，BCR-ABL1阴性

青少年骨髓单核细胞性白血病

骨髓发育不良/骨髓增殖性赘瘤，不可分类

暂定疾病单元：伴有环形成高铁红细胞和血小板增多的难治性贫血

骨髓发育不良综合征

伴有单谱系发育不良的难治性血细胞减少症

难治性贫血

难治性嗜中性白细胞减少症

难治性血小板减少症

伴有环形成高铁红细胞的难治性贫血

伴有多谱系发育不良的难治性血细胞减少症

伴有过量母细胞的难治性贫血

伴有孤立del(5q)的骨髓发育不良综合征

骨髓发育不良综合征，不可分类

儿童期骨髓发育不良综合征

暂定疾病单元：儿童期难治性血细胞减少症

急性骨髓性白血病(AML)和相关前体赘瘤

伴有复发性遗传异常的急性骨髓性白血病

AML伴t(8；21)(q22；q22)；RUNX1-RUNX1T1

AML伴inv(16)(p13.1q22)或t(16；16)(p13.1；q22)；CBFB-MYH11

APL伴t(15；17)(q22；q12)；PML-RARA

AML伴t(9；11)(p22；q23)；MLLT3-MLL

AML伴t(6；9)(p23；q34)；DEK-NUP214

AML伴inv(3)(q21q26.2)或t(3；3)(q21；q26.2)；RPN1-EVI1

AML(成巨核细胞性)伴t(1；22)(p13；q13)；RBM15-MKL1

暂定疾病单元：伴有突变NPM1的AML

暂定疾病单元：伴有突变CEBPA的AML

伴有骨髓发育不良相关变化的急性骨髓性白血病

治疗相关骨髓性赘瘤

急性骨髓性白血病，NOS(＝不另外指定)

伴有最小分化的AML

不伴有成熟的AML

伴有成熟的AML

急性髓单核细胞白血病

急性成单核细胞性/单核细胞性白血病

急性红细胞样白血病

纯红细胞样白血病

红细胞样/骨髓性红白血病

急性成巨核细胞性白血病

急性嗜碱性细胞白血病

伴有骨髓纤维化的急性全骨髓增殖

骨髓性肉瘤

与唐综合征(Down syndrome)相关的骨髓性增殖

短暂异常骨髓生成

与唐综合征相关的骨髓性白血病

母细胞性浆细胞样树突细胞赘瘤

不明确谱系的急性白血病

急性未分化性白血病

混合表型急性白血病伴t(9；22)(q34；q11.2)；BCR-ABL1

混合表型急性白血病伴t(v；11q23)；MLL重排

混合表型急性白血病，B骨髓性，NOS

混合表型急性白血病，T骨髓性，NOS

暂定疾病单元：自然杀伤(NK)细胞成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤

前体淋巴赘瘤

B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤

B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤，NOS

伴有复发性遗传异常的B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤

B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤伴t(9；22)(q34；q11.2)；BCR-ABL 1

B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤伴t(v；11q23)；MLL重排

B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤伴t(12；21)(p13；q22)TEL-AML1(ETV6-RUNX1)

伴有超二倍性的B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤

伴有低二倍性的B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤

B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤伴t(5；14)(q31；q32)IL3-IGH

B成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤伴t(1；19)(q23；p13.3)；TCF3-PBX1

T成淋巴细胞性白血病/淋巴瘤

成熟B细胞赘瘤

慢性淋巴细胞性白血病/小淋巴细胞性淋巴瘤

B细胞前淋巴细胞性白血病

脾边缘区淋巴瘤

毛细胞白血病

脾淋巴瘤/白血病，不可分类

脾弥漫性红髓小B细胞淋巴瘤

毛细胞白血病变体

淋巴浆细胞性淋巴瘤

瓦尔登斯特伦巨球蛋白血症(

macroglobulinemia)

重链病

α重链病

γ重链病

μ重链病

浆细胞骨髓瘤

骨孤立性浆细胞瘤

骨外浆细胞瘤

粘膜相关的淋巴组织的结外边缘区淋巴瘤(MALT淋巴瘤)

结节边缘区淋巴瘤

儿科结节边缘区淋巴瘤

滤泡性淋巴瘤

儿科滤泡性淋巴瘤

原发性皮肤滤泡中心淋巴瘤

套膜细胞淋巴瘤

弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)，NOS

富含T细胞/组织细胞的大B细胞淋巴瘤

原发性腿型皮肤DLBCL，

老年人的EBV阳性DLBCL

与慢性炎症相关的DLBCL

类淋巴瘤肉芽肿病

原发性纵隔(胸腺)大B细胞淋巴瘤

血管内大B细胞淋巴瘤

ALK阳性大B细胞淋巴瘤

成浆细胞性淋巴瘤

在HHV8相关的多中心卡斯尔曼病(Castleman disease)中出现的大B细胞淋巴瘤

原发性渗出淋巴瘤

勃基特淋巴瘤(Burkitt lymphoma)

B细胞淋巴瘤，不可分类，特征介于弥漫性大B细胞淋巴瘤与勃基特淋巴瘤中间

B细胞淋巴瘤，不可分类，特征介于弥漫性大B细胞淋巴瘤与经典霍奇金淋巴瘤中间

成熟T细胞和NK细胞赘瘤

T细胞前淋巴细胞性白血病

T细胞大颗粒淋巴细胞性白血病

NK细胞的慢性淋巴组织增殖性病症

侵袭性NK细胞白血病

儿童期全身性EBV阳性T细胞淋巴组织增殖性疾病

痘疮样水疱样淋巴瘤

成人T细胞白血病/淋巴瘤

鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤

肠病相关的T细胞淋巴瘤

肝脾T细胞淋巴瘤

皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤

蕈样真菌病

西泽里综合征(Sézary syndrome)

原发性皮肤CD30⁺T细胞淋巴组织增殖性病症

淋巴瘤样丘疹病

原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤

原发性皮肤γδT细胞淋巴瘤

原发性皮肤CD8⁺侵袭性嗜表皮细胞毒性T细胞淋巴瘤

原发性皮肤CD4⁺小/中等T细胞淋巴瘤

外周T细胞淋巴瘤，NOS

成血管免疫细胞性T细胞淋巴瘤

间变性大细胞淋巴瘤，ALK阳性

间变性大细胞淋巴瘤，ALK阴性

霍奇金淋巴瘤

结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤

经典霍奇金淋巴瘤

结节性硬化经典霍奇金淋巴瘤

富含淋巴细胞的经典霍奇金淋巴瘤

混合细胞性经典霍奇金淋巴瘤

淋巴细胞消减的经典霍奇金淋巴瘤

组织细胞和树突细胞赘瘤

组织细胞肉瘤

朗格汉斯(Langerhans)细胞组织细胞增多症

朗格汉斯细胞肉瘤

交错性树突细胞肉瘤

滤泡性树突细胞肉瘤

成纤维细胞性网状细胞肿瘤

中级树突细胞肿瘤

散播性青少年黄色肉芽肿

移植后淋巴组织增殖性病症(PTLD)

早期病变

浆细胞性增殖

传染性单核细胞增多症样PTLD

多形性PTLD

单形性PTLD(B细胞和T/NK细胞类型)

经典霍奇金淋巴瘤型PTLD

优选的是淋巴系统的血液学赘瘤选自淋巴瘤的群组。进一步优选的是淋巴瘤的群组不包含脑和/或脊髓的原发性CNS淋巴瘤。进一步优选的是淋巴瘤的群组不包含原发性CNS淋巴瘤。

淋巴瘤的群组优选由成熟B细胞赘瘤和成熟T细胞和NK细胞赘瘤以及组织细胞和树突细胞赘瘤类型的淋巴瘤；以及霍奇金淋巴瘤组成。一些淋巴瘤由不同名称而得知，例如B成熟细胞赘瘤类型的一些淋巴瘤也可被称为非霍奇金淋巴瘤。举例来说，也称为卡勒病(Morbus Kahler)或浆细胞骨髓瘤的多发性骨髓瘤是非霍奇金淋巴瘤，但也是成熟B细胞赘瘤。

尤其优选的是血液学赘瘤选自由成熟B细胞赘瘤的淋巴瘤组成的群组。

尤其优选的是血液学赘瘤选自由以下组成的群组：小淋巴细胞性淋巴瘤、脾边缘区淋巴瘤、脾淋巴瘤、淋巴浆细胞性淋巴瘤、粘膜相关的淋巴组织的结外边缘区淋巴瘤、结节边缘区淋巴瘤、滤泡性淋巴瘤、原发性皮肤滤泡中心淋巴瘤、套膜细胞淋巴瘤、重链病、骨孤立性浆细胞瘤、骨外浆细胞瘤、弥漫性大B细胞淋巴瘤、原发性纵隔(胸腺)大B细胞淋巴瘤、血管内大B细胞淋巴瘤、ALK阳性大B细胞淋巴瘤、成浆细胞性淋巴瘤、在HHV8相关的多中心卡斯尔曼病中出现的大B细胞淋巴瘤、原发性渗出淋巴瘤、勃基特淋巴瘤、B细胞淋巴瘤-不可分类，特征介于弥漫性大B细胞淋巴瘤与勃基特淋巴瘤中间；以及B细胞淋巴瘤-不可分类，特征介于弥漫性大B细胞淋巴瘤与经典霍奇金淋巴瘤中间。

尤其优选的是血液学赘瘤选自由成熟T细胞和K细胞赘瘤的淋巴瘤组成的群组。

尤其优选的是血液学赘瘤选自由以下组成的群组：儿童期全身性EBV阳性T细胞淋巴组织增殖性疾病、痘疮样水疱样淋巴瘤、成人T细胞淋巴瘤、鼻型结外NK/T细胞淋巴瘤、肠病相关的T细胞淋巴瘤、肝脾T细胞淋巴瘤、皮下脂膜炎样T细胞淋巴瘤、蕈样真菌病、西泽里综合征、原发性皮肤CD30+T细胞淋巴组织增殖性病症、原发性皮肤间变性大细胞淋巴瘤、原发性皮肤γδT细胞淋巴瘤、原发性皮肤CD8+侵袭性嗜表皮细胞毒性T细胞淋巴瘤、原发性皮肤CD4+小/中等T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤，NOS；成血管免疫细胞性T细胞淋巴瘤、间变性大细胞淋巴瘤-ALK阳性和间变性大细胞淋巴瘤-ALK阴性。

在另一优选实施方案中，淋巴瘤是霍奇金淋巴瘤。优选地，霍奇金淋巴瘤选自由以下组成的群组：结节性淋巴细胞为主型霍奇金淋巴瘤、经典霍奇金淋巴瘤、结节性硬化经典霍奇金淋巴瘤、富含淋巴细胞的经典霍奇金淋巴瘤、混合细胞性经典霍奇金淋巴瘤和淋巴细胞消减的经典霍奇金淋巴瘤。

在优选实施方案中，血液学赘瘤是组织细胞和树突细胞赘瘤。优选地，它选自由以下组成的群组：组织细胞肉瘤、朗格汉斯细胞组织细胞增多症、朗格汉斯细胞肉瘤、交错性树突细胞肉瘤、滤泡性树突细胞肉瘤、成纤维细胞性网状细胞肿瘤、中级树突细胞肿瘤和散播性青少年黄色肉芽肿。

另一优选实施方案是其中血液学赘瘤是根据表1的移植后淋巴组织增殖性病症(PTLD)。

优选地，血液学赘瘤是非霍奇金淋巴瘤。

在一优选实施方案中，血液学赘瘤(优选是淋巴系统的那些)处于其中它们尚未形成肿瘤的时期。优选的是淋巴瘤在它们形成肿瘤之前被治疗。

进一步优选的是血液学赘瘤选自未形成肿瘤的血液学赘瘤的群组。

优选的是血液学赘瘤选自白血病的群组。优选的是白血病的群组不包括母细胞性白血病。

在临床上以及在病理学上，白血病被再分成多个大组。第一划分在它的急性形式与慢性形式之间。另外，疾病被根据哪个种类的血细胞受影响加以再分。这个拆分将白血病分成成淋巴细胞性或淋巴细胞性白血病以及骨髓性(myeloid)或骨髓性(myelogenous)白血病。

在成淋巴细胞性或淋巴细胞性白血病中，癌性变化发生在通常继续以形成作为感染对抗性免疫系统细胞的淋巴细胞的某一类型的骨髓细胞中。大多数淋巴细胞性白血病涉及淋巴细胞的特定亚型，即B细胞。在骨髓性(myeloid/myelogenous)白血病中，癌性变化发生在通常继续以形成白血细胞、一些其它类型的白细胞以及血小板的某一类型的骨髓细胞中。

优选地，血液学赘瘤包括以下的群组：骨髓增殖性赘瘤、伴有嗜酸粒细胞增多以及PDGFRA、PDGFRB或FGFR1的异常的骨髓性和淋巴赘瘤、骨髓发育不良/骨髓增殖性赘瘤、骨髓发育不良综合征、急性骨髓性白血病(AML)和相关前体赘瘤、不明确谱系的急性白血病和前体淋巴赘瘤，全都根据表1。

优选地，血液学赘瘤选自急性骨髓性白血病、急性成淋巴细胞性白血病、慢性骨髓性白血病和慢性成淋巴细胞性白血病的群组。优选地，血液学赘瘤是急性白血病，更优选是急性骨髓性白血病(Acute myeloid leukemia，AML)，也称为急性骨髓性白血病(acutemyelogenous leukemia)或急性非淋巴细胞性白血病(ANLL)，其是骨髓血细胞系的癌症，特征在于在骨髓中积累并干扰正常血细胞的产生的异常白血细胞的快速生长。根据WHO，伴有复发性遗传异常的急性骨髓性白血病包括伴有在染色体8与21之间的易位的AML、伴有在染色体16中的倒位的AML、伴有在染色体15与17之间的易位的APL、伴有在染色体9和11中的易位的AML。伴有多谱系发育不良的AML包括患者已患有转变成AML的先前骨髓发育不良综合征(MDS)或骨髓增殖性疾病(MPD)。这个种类的AML最常发生在年长患者中，并且常具有更糟预后。治疗相关的AML和MDS包括患者已进行先前化学疗法和/或放射，并且随后显现AML或MDS。这些白血病的特征可在于具有特定染色体异常，并且常携有更糟预后。不另外分类的AML包括AML的不属于以上种类的亚型。

优选地，白血病的群组也包含以下，或最优选由以下组成：不明确谱系的急性白血病(也称为混合表型或双表型急性白血病)，其在白血病细胞不能分类为骨髓或淋巴细胞时，或在两种类型的细胞均存在时被想到。

优选地，白血病的群组也包含以下或最优选由以下组成：成熟B细胞赘瘤类型的白血病。优选地，因此，血液学赘瘤选自由以下组成的群组：淋巴细胞性白血病、慢性淋巴细胞性白血病、B细胞前淋巴细胞性白血病、毛细胞白血病、脾性白血病、T细胞前淋巴细胞性白血病、T细胞大颗粒淋巴细胞性白血病、侵袭性NK细胞白血病和成人T细胞白血病。优选地，白血病的群组也包含NK细胞的慢性淋巴组织增殖性病症。

也优选的是血液学赘瘤选自由成熟T细胞和K细胞赘瘤类型的白血病组成的群组。优选地，白血病的群组也包含以下或最优选由以下组成：T细胞前淋巴细胞性白血病、T细胞大颗粒淋巴细胞性白血病、NK细胞的慢性淋巴组织增殖性病症和侵袭性NK细胞白血病。

本发明的另一优选实施方案涉及本发明的羟烷基淀粉或药物组合物用于制造用以治疗血液学赘瘤的药剂的用途，其中羟烷基淀粉是治疗活性成分，其优选在施用含有一种或多种选自由以下组成的群组的化合物的药物组合物之前或之后向受试者施用：细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素，其中羟烷基淀粉可在同一治疗日内，在同一小时内，或以之间多达数日或数周的治疗停顿加以施用。

根据本发明的治疗方法可靶向所有血液学赘瘤，优选靶向本文提及的所有白血病癌症类型，并且施用的HAS可包括所有类型的HAS，并且优选包括本文公开的HES。

以下尤其优选实施方案也被包括在本发明中：

1.一种羟烷基淀粉(HAS)，其作为治疗活性化合物用于治疗罹患血液学赘瘤的受试者。

2.根据实施方案1所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中向所述受试者施用治疗有效量。

3.根据实施方案1或2所述的羟烷基淀粉，其中所述血液学赘瘤选自白血病和淋巴瘤的群组。

4.根据先前实施方案中任一个所述的羟烷基淀粉，其中所述血液学赘瘤选自白血病和淋巴瘤的群组，并且其中这个群组不包含原发性CNS淋巴瘤。

5.根据实施方案1至4所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述治疗包括施用HAS或包含HAS的药物组合物，并且其中所述施用导致以下至少一个：降低肿瘤生长速率、降低癌细胞生长速率、降低增殖活性、降低癌细胞的数目或预防转移。

6.根据实施方案1至4所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述治疗包括以下至少一个：降低肿瘤生长速率、降低高度增殖性细胞的数目、癌细胞的数目、降低癌细胞分裂的频率、降低癌细胞生长速率以及预防肿瘤形成。

7.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述治疗包括抑制癌细胞浸润至周围器官中以及预防癌细胞扩散。

8.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述治疗包括抑制血液学赘瘤细胞增殖。

9.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述治疗包括抑制血液学赘瘤细胞增殖，同时不影响正常生长细胞。

10.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中在施用一种或多种第二化合物之前或之后施用所述HAS。

11.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中相较于在不施用HAS的治疗中给与的剂量，实现一种或多种第二化合物的剂量降低。

12.根据实施方案10和11所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述一种或多种第二化合物选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组。

13.根据实施方案10和11所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述一种或多种第二化合物选自由细胞抑制剂和具有抗癌活性的生物制剂组成的群组。

14.根据实施方案10和11所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述一种或多种第二化合物选自由细胞抑制剂组成的群组。

15.根据实施方案10至14所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述细胞抑制剂群组包含以下，或优选由以下组成：烷基化剂、烷基磺酸盐、抗代谢物、抗肿瘤抗生素、拓扑异构酶抑制剂、小分子酪氨酸激酶抑制剂、有丝分裂抑制剂、分化剂、蛋白酶体抑制剂和普乐沙福。

16.根据实施方案10至13所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中具有抗癌活性的生物制剂的所述群组包含以下，或优选由以下组成：抗体酪氨酸激酶抑制剂、单克隆抗体和免疫调节蛋白质。

17.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉包含至少一个根据下式(I)的结构单元

其中R^a、R^b和R^c彼此独立地选自由以下组成的群组：-O-HAS”、-[O-(CR^wR^x)-(CR^yR^z)]_x-OH、-[O-(CR^wR^x)-(CR^yR^z)]_y-XH，

其中R^w、R^x、R^y和R^z彼此独立地选自由氢和烷基组成的群组，

y是在0至20的范围内，优选在0至4的范围内的整数，并且

x是在0至20的范围内，优选在0至4的范围内的整数，

并且其中R^a、R^b和R^c中的至少一个是-[O-(CR^wR^x)-(CR^yR^z)]_y-XH，并且

其中X选自由-S-和-O-组成的群组。

18.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在20与1300kDa之间的平均分子量Mw。

19.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在40与1300kDa之间的平均分子量Mw。

20.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在65与1300kDa之间的平均分子量Mw。

21.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在70与1200kDa之间的平均分子量Mw。

22.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在75与800kDa之间的平均分子量Mw。

23.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在90与800kDa之间的平均分子量Mw。

24.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在100与700kDa之间的平均分子量Mw。

25.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在100与110kDa之间的平均分子量Mw。

26.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有高于肾阈值的平均分子量Mw。

27.根据实施方案1至19所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有低于肾阈值的平均分子量Mw。

28.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在0.1与1.5之间的分子取代度MS。

29.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在0.1与1.3之间的分子取代度MS。

30.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在0.1与1.1之间的分子取代度MS。

31.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在0.1与0.9之间的分子取代度MS。

32.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在0.3与0.8之间的分子取代度MS。

33.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在0.3与0.7之间的分子取代度MS。

34.根据实施方案21所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在80与230kDa之间的平均分子量和在0.3与0.6之间的分子取代度MS。

35.根据实施方案33所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有100至110kDa的平均分子量和在0.3与0.5之间的分子取代度MS。

36.根据实施方案21所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在150与200kDa之间的平均分子量和在0.4与0.5之间的分子取代度MS。

37.根据实施方案33所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有平均分子量105kDa和分子取代度MS为0.42。

38.根据实施方案23所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉具有在400与700kDa之间的平均分子量和在0.6与0.8之间的分子取代度MS。

39.根据先前实施方案中任一个所述的供使用的羟烷基淀粉(HAS)，其中所述羟烷基淀粉是羟乙基淀粉。

40.一种包含根据先前实施方案中任一个所述的用于治疗血液学赘瘤的羟烷基淀粉(HAS)的药物组合物，其中所述HAS是在治疗癌症方面具有治疗活性的唯一成分。

41.一种治疗罹患血液学赘瘤的受试者的方法，其包括在施用一种或多种选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组的第二化合物之前或之后施用治疗有效量的根据先前实施方案中任一个所述的羟烷基淀粉，由此优选通过降低癌细胞的增殖速率来抑制癌症的进展，优选同时不降低正常细胞的增殖速率。

42.一种治疗罹患的血液学赘瘤受试者的方法，其中所述治疗包括向被诊断有血液学赘瘤的受试者施用治疗有效量的根据先前实施方案中任一个所述的HAS，其中所述治疗包括降低血液学赘生性细胞的增殖速率，并且其中未已向所述受试者施用第二治疗活性化合物。

44.根据实施方案41和42所述的治疗罹患血液学赘瘤的受试者的方法，其中所述增殖速率的所述降低包括阻滞处于有丝分裂周期中的所述癌细胞。

附图描述:

图1：

图1显示如在实施例1中所观察，用EOL-1肿瘤细胞接种的小鼠的相对肿瘤体积随时间的发展。在Y轴上的值指示以百分比计的中值相对肿瘤体积，在X轴上的值指示在开始治疗之后以天计的时间。物质由以下符号指示：当每周两次向小鼠静脉内施用指示为“对照”的0.9％等张盐水(NaCl)时，使用“▲”(黑色上指三角)。当向小鼠腹膜內施用指示为“SOC”的环磷酰胺(75mg/kg，在第0天单次剂量)时，使用“■”(大黑色方块)。当每周两次向小鼠静脉内施用指示为“HES”的

10％时，使用“◆”(黑色菱形)。

图2：

图2显示如在实施例1中所观察，用EOL-1肿瘤细胞接种的小鼠的体重随时间的发展。在Y轴上的值指示以克计的平均体重±标准偏差(sd)。在X轴上的值指示在开始治疗之后以天计的时间。物质由以下符号指示：当每周两次向小鼠静脉内施用指示为“对照”的0.9％等张盐水(NaCl)时，使用“▲”(黑色上指三角)。当向小鼠腹膜內施用指示为“SOC”的环磷酰胺(75mg/kg，在第0天单次剂量)时，使用“■”(大黑色方块)。当每周两次向小鼠静脉内施用指示为“HES”的

10％时，使用“◆”(黑色菱形)。

在图3至6中，显示羟乙基淀粉(“HES 130/0.4”，如表7中所表征)对不同血液学赘生性细胞的抑制作用。在Y轴上的值指示以％计的存活细胞数目，其在用测试羟烷基淀粉“HES 130/0.4”(在9种不同浓度下)处理之后，以基于使用

进行的活力测试测定。在X轴上的值指示以mg/ml计的不同HES测试浓度。

图3：

在图3中，显示羟烷基淀粉HES 130/0.4对JURKAT细胞(ALL细胞)的抑制作用。

图4：

在图4中，显示羟烷基淀粉HES 130/0.4对TF-1细胞(AML细胞)的抑制作用。

图5：

在图5中，显示羟烷基淀粉HES 130/0.4对MEG-01细胞(CML细胞)的抑制作用。

图6：

在图6中，显示羟烷基淀粉HES 130/0.4对K562细胞(CML细胞)的抑制作用。

实施例

实施例1：

在这个实施例中，使用可根据名称

10％商购获得，标注为2000mg/kg“HES 130/04”的HES类型，如上所详述。

概述：携带来自EOL-1骨髓性白血病细胞系的肿瘤的成年雄性NOD/SCID小鼠用环磷酰胺

在75mg/kg的剂量下单次腹膜内注射治疗，或用血容量扩张剂

10％进行i.v.注射至尾部静脉中治疗(20ml/kg)以历经实验过程测定肿瘤生长和体重。

物质：环磷酰胺(可根据名称

获得)从Baxter Oncology GmbH(批号2D714D；Halle,Germany)获得，并且储存在2-8℃下直至使用。

10％(标注为“羟乙基淀粉130/0.4”，于0.9％氯化钠中，供注射用)以备用产品形式从Fresenius KabiAustria GmbH(批号14FC3308；Linz,Austria)获得，并且储存在室温下直至使用。

在注射之前即刻，通过将适量物质溶解于0.9％盐水(批号12495407，B.Braun VetCare GmbH,Tuttlingen,Germany)中以获得最终剂量7.5mg/ml来制备环磷酰胺的最终溶液。

所有溶液都在无菌条件下制备和注射。

表2：

动物：成年雄性NOD/SCID小鼠(TACONIC Europe,Lille Skensved,Denmark)用于研究中。在实验开始时，它们是6-8周龄，并且具有在20与25g之间的中值体重。

所有小鼠都维持在严格控制以及标准化屏障条件下。它们被舍饲-最多5只小鼠/笼-在处于以下环境条件下的个别通风的笼(Macrolon Typ-II,system Techniplast,Italy)中：22+/-1℃室温，50+/-10％相对湿度，12小时光照-黑暗节律。它们接受热压处理的食物和垫料(Ssniff,Soest,Germany)，并且随意取用酸化(pH 4.0)饮用水。

在肿瘤已达到可触知肿瘤尺寸之后，将动物分层至实验组中，各组5只小鼠。在治疗启始时，将动物的耳朵做标记，并且各笼用笼编号、研究编号和每笼的动物数目标记。

肿瘤模型

人急性骨髓性白血病EOL-1细胞系在免疫缺陷雄性NOD/SCID小鼠中用作皮下异种移植模型。人骨髓性白血病细胞系EOL-1(ACC386)从Leibniz Institute DSMZ-DeutscheSammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH,Braunschweig获得。使细胞在37℃、90％湿度和5％CO₂下，在T150细胞培养烧瓶中，于补充有1％L-谷氨酰胺和10％胎牛血清(FCS)的RPMI 1640中生长。EOL-1细胞从人嗜酸性粒细胞性白血病细胞系获得，在正常培养条件下显示成髓细胞的细胞学特征，而在许多刺激后不仅在表型上，而且也在功能上分化成嗜酸性粒细胞。EOL-1细胞特别适用于分析白血病细胞分化以及恶性嗜酸性粒细胞的性质。

在第10研究日，将1x10⁷个肿瘤细胞于100μl PBS中皮下移植至各小鼠的左侧腹中。在10天之后，肿瘤可触知，具有平均尺寸0.1cm³，并且基于个别肿瘤体积以每组5只小鼠将小鼠分层至3个组中以获得具有类似平均肿瘤体积和最小标准偏差的各组。在同一天，根据下表3来启始治疗。在这个模型中，环磷酰胺是参照药物(SOC)：

表3

由通过一周三次使用测径规样仪器进行测量获得的两个垂直直径计算个别肿瘤体积(TV)。

根据下式计算TV：TV[cm³]＝(宽度²x长度)/2。对于计算相对肿瘤体积(RTV)，使在各测量日时的肿瘤体积与第一治疗日相关联。在各测量日时，计算每组的中值和平均肿瘤体积以及以百分比计的治疗相对于对照(T/C)值。

每周三次测定小鼠的个别体重，并且体重变化充当毒性参数。计算每组平均体重和相对于开始治疗时的体重变化(BWC)。

当肿瘤在一个方向上达到直径超过1.5cm时，将小鼠处死。

在尸检时，称重所有动物，并且通过颈部脱位来杀死。

统计评估

使用描述性数据分析来分析肿瘤体积，并且图解显示为中值。

结果

对照组(组A)中的所有肿瘤都显示进行性生长。用75mg/kg环磷酰胺单次腹膜内治疗携带EOL-1骨髓性白血病的小鼠诱导显著肿瘤生长抑制。每周两次i.v.施用

10％显示中度抑制活性，并且由此证明烷基化淀粉在白血病细胞的生长方面的抑制潜力(参见图1)。

用

10％治疗对体重发展不具有影响，并且因此不具有明显治疗相关毒性。

实施例2

这个研究的目标在于探究羟乙基淀粉(“HES 130/0.4”)对不同白血病细胞系的细胞活力的潜在影响。出于筛选原因，在以不同“HES130/0.4”浓度进行孵育之后，使用可商购获得的“Prestoblue荧光细胞活力测定”，以28种不同白血病细胞系测定50％抑制浓度(IC50)。测试的HES的浓度范围是100mg/ml-391ng/ml。

试剂是一种基于刃天青(resazurin)的溶液，其通过使用活细胞的还原力来定量测量细胞的增殖而充当细胞活力指示剂。

试剂含有在颜色方面是蓝色，并且实际上是非荧光性的细胞渗透性化合物。当添加至细胞中时，PrestoBlue试剂因活细胞的还原环境而改性，并且在颜色方面变为红色，且变得具有高度荧光性。可使用荧光或吸光度测量来检测这个变化(参见例如Int J Microbiol.2013；2013:420601；2013年4月4日在线发表doi:10.1155/2013/420601PMCID PMC3638707)。

各细胞系用测试物品HES或标准化学疗法药物顺铂在不同浓度下加以处理。顺铂充当阳性参照。细胞与两种物质的孵育时间是72小时。

表4：测试的细胞系和使用的培养基

ATCC—美国；DSMZ—德国；SIBS—中国

*可适用于所有细胞系/所有实验

所有细胞都在37℃下，在5％CO₂和95％湿度下，于补充有10％FBS的培养基中培养。培养基购自GIBCO或Sigma,USA。

表5.用于这个研究实施例中的缩写

缩写	全文和描述
		ALL	急性成淋巴细胞性白血病
AML	急性骨髓性白血病
		CLL	慢性淋巴细胞性白血病
CML	慢性骨髓性白血病
		FBS	胎牛血清
DMSO	二甲亚砜
		PBS	磷酸盐缓冲盐水
USA	美利坚合众国
		ATCC	美国典型培养物保藏中心
DSMZ	德国微生物菌种保藏中心
		SIBS	上海生命科学研究院
FU	荧光单位

表6：试剂

名称	制造商	目录号
			汉姆氏F12K	GIBCO	21127-022
RPMI1640	Hyclone	SH30809.01B
			IMDM	Hyclone	SH30228.01B
FBS	GIBCO	10099-141
			胰蛋白酶	AMRESCO	458
PrestoBlue	Life Technologies	A-13262
			PBS	Crownbio	JJL-2014

制备测试溶液：

用于这个研究中的“HES 130/0.4”是由Fresenius Kabi Austria GmbH提供的来自批号17123722的10g样品。在使用之前，它被储存在环境温度下。它的特征如下：

表7：

*为测定Mw值，使用根据Sommermeyer的方法，即dn/dc值0.135。

使用相应细胞培养基，通过以下方式来将适量溶解以制备200mg/ml(20％)的储备溶液：在适合容器中提供初始量的培养基，在搅拌下小心添加计算量的HES至无血清培养基中，此花费5-20分钟以获得澄清溶液，以及最终添加剩余量的培养基以调整成所需浓度(20mg/ml)。通过用0.22μm孔径装置过滤来使这个储备溶液灭菌并立刻使用。在使用之前新鲜制备溶液。所有HES和参照工作溶液都新鲜制备。

用于这个研究中的顺铂以来自批号212029CF的粉末形式购自Nanjing Zhiyao,China，其中失效日期是2016年7月。在使用之前，它被储存在室温下。它的分子量被测定为300,05Da。

将顺铂溶解于PBS中以产生2.0mM浓度的储备溶液。

设备

EnVision多标记读取器2104-0010A,Perkin Elmer(USA),设备识别号：BMRP004；Countstar,Inno-Alliance Biotech(USA),设备识别号：BANA011；Forma系列II水夹套CO₂孵育器,Thermo Scienti fic(USA),设备识别号：BINC040/BINC045/BINC046；生物安全橱柜,Thermo Scientific,(USA),设备识别号：BBSC021/BBSC022/BBS C024/BBSC025；倒置显微镜,Olympus CKX41SF(Japan),设备识别号：BMIC020。

测定半数最大抑制浓度IC₅₀

在指数生长时期期间收集细胞，并且使用可商购获得的细胞计数装置Countstar加以计数。用含有20％FBS的相应培养基将细胞浓度调整至3.33x10⁴个细胞/毫升。添加60μl细胞混悬液至两个96孔板(A和B)中，其中最终细胞密度是2x10³个细胞/孔。

在次日进行T₀读取以通过测试各细胞系的生长速率来监测细胞品质。

在用于T₀读取的板的各孔中，添加60μl无血清培养基。在37℃下，在5％CO₂下，将各板在含湿气孵育器中孵育过夜。在室温下使各板平衡约30分钟。此后，直接向培养基中的细胞上给与13μl购自Life Technologies的

试剂(10x溶液)。在轨道振荡器上混合内含物2分钟。接着在室温下将板孵育30分钟，直至可使用EnVision多标记读取器(激发：540-570nm/发射：580-610nm)记录荧光(T₀)。

测试读取板

在37℃下，在5％CO₂下，将板在含湿气孵育器中孵育过夜。将HES在200mg/ml(20％)的浓度下溶解于无FBS的培养基(参见上文)中以形成2×溶液，并且通过用0.22μm孔径装置过滤来灭菌。HES的2×溶液用培养基稀释(2倍)以达到9个剂量水平：分别是10、5、2.5、1.25、0.63、0.31、0.16、0.08、0.04％或100、50、25、12.5、6.25、3.13、1.56、0.78、0.39mg/ml。

将60μl“HES 130/0.4”的(2×)溶液分配于测试板的各孔中(各药物浓度一式三份)。

在37℃下，在5％CO₂下，将测试板在含湿气孵育器中孵育72小时，接着借助于PrestoBlue测定加以测量。此后，直接向培养基中的细胞上给与13μl

试剂(10x溶液)。在轨道振荡器上混合内含物2分钟。接着在室温下将板孵育30分钟，直至可使用EnVision多标记读取器(激发：540-570nm/发射：580-610nm)记录荧光(T0)。

数据分析

使用GraphPad Prism 5.0图解显示数据。

为计算IC₅₀，使用非线性回归模型以S形剂量应答拟合剂量-应答曲线。以下显示存活率的公式，并且通过GraphPad Prism 5.0来自动产生IC₅₀。

存活率(％)＝(FU_测试物品-FU_{培养基对照})/(FU_不处理-FU_{培养基对照})×100％。

FU：荧光单位

表8说明施加HES如何抑制无论是AML；ALL；CML或CLL类型细胞的所有类型的血液学赘生性细胞的活力或细胞增殖速率。

表8：结果

在这个研究中测试总计28种白血病细胞系，并且化合物羟乙基淀粉(HES)130/0.4对以下不同白血病类型的所有细胞系都具有明确抑制作用：急性成淋巴细胞性白血病、急性骨髓性白血病、慢性淋巴细胞性白血病和慢性骨髓性白血病。

值得注意的是，HES 130/0.4对Jurkat细胞最强力(如图3中所示)，但仍然也可证明对其它27种细胞系的显著作用。这个研究的结果表明在效价与功效之间存在关联。当用HES处理时，敏感性更大的细胞系比敏感性较小的细胞呈现更高最大抑制值。

Claims (8)

1.羟乙基淀粉(HES)在制造用于治疗血液学赘瘤的药物中的用途，其中所述HES具有高于20KDa和不高于1300KDa的平均分子量(MW)以及在0.1至1.5范围内的摩尔取代度(MS)，其中所述血液学赘瘤选自白血病和淋巴瘤的群组。

2.根据权利要求1所述的用途，其中所述治疗包括以下至少一个：降低血液学赘生性细胞的生长或增殖速率或预防由其形成转移。

3.根据权利要求1所述的用途，其中所述用途包括在施用一种或多种第二治疗有效化合物之前或之后，将所述HES作为第一化合物施用，其中所述一种或多种第二化合物选自由细胞抑制剂、具有抗癌活性的生物制剂和具有抗癌活性的激素组成的群组。

4.根据权利要求3所述的用途，其中所述一种或多种第二化合物选自由细胞抑制剂和具有抗癌活性的生物制剂组成的群组。

5.根据权利要求3所述的用途，其中所述一种或多种第二化合物选自由细胞抑制剂组成的群组。

6.根据权利要求3所述的用途，其中所述一种或多种第二化合物选自具有抗癌活性的生物制剂的群组。

7.根据权利要求1-6中任一项所述的用途，其中所述血液学赘瘤是白血病。

8.根据权利要求1-6中任一项所述的用途，其中所述治疗包括阻滞所述血液学赘瘤细胞的有丝分裂周期。

Images