KR20160045072A - 혈액학적 신생물의 치료를 위한 하이드록시알킬 전분 - Google Patents

Abstract

본 발명은 특히 암세포의 증식 속도를 효과적으로 감소시키고 암세포 성장을 저해시킴으로써 혈액학적 신생물의 치료를 위한 하이드록시알킬 전분 또는 이의 약제학적 제제에 관한 것이되, 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량(MW)이 20 내지 1300kDa이고, 몰 치환(MS)이 0.1 내지 1.5의 범위이며, 알킬화는 에틸화, 프로필화 또는 뷰틸화 또는 이의 혼합물일 수 있고; 알킬은 추가로 치환될 수 있다.

Description

혈액학적 신생물의 치료를 위한 하이드록시알킬 전분{HYDROXYALKYL STARCH FOR THE TREATMENT OF HEMATOLOGICAL NEOPLASMS}

암, 종양 관련 질환 및 신생물 질환 상태는 심각하고 종종 생명을 위협하는 병태이다. 하위그룹의 암 유형은 혈액, 골수 및 림프계에 영향을 미치는 암 유형인 혈액학적 신생물이다.

혈액 또는 골수에 영향을 미치는 대부분의 암 유형은 백혈병(leukemia: 미국식 영어) 또는 백혈병(leukaemia: 영국식 영어)으로 불린다. 그들은 "아세포(blast)"로 불리는 미성숙 백혈구의 비정상적 증가를 특징으로 한다. 용어 백혈병은 림프종 이외의 혈액 또는 골수, 예를 들어, 골수성(또는 골수) 백혈병의 대부분의 혈액학적 신생물 질환을 포함한다. 용어 림프종은 림프구, 예컨대 호지킨 림프종(HL) 및 비호지킨 림프종(NHL)이 발생하는 혈액학적 신생물의 그룹을 지칭한다.

대부분의 백혈병 치료는 화학요법, 의학적 방사선 요법, 호르몬 치료 또는 골수 이식을 수반한다. 치료율은 백혈병의 유형뿐만 아니라 환자의 연령에 의존한다. 2000년에 전세계에서 대략 256,000명의 어린이 및 성인은 백혈병의 일부 형태가 발생되었고, 209,000명은 그것으로 사망하였다. 모든 백혈병의 약 90%는 성인에서 진단된다.

림프계에 영향을 미치는 혈액학적 신생물은 림프종으로 불린다. 림프종은, 예를 들어, B 또는 T 림프구가 정상 세포보다 더 빠르게 분화되거나 또는 장기간의 수명을 가질 때 생기는 암의 유형이다. 림프종은 림프절, 비장, 골수, 혈액 또는 다른 기관에서 발생할 수 있으며, 종국적으로 그들은 종양을 형성할 수 있다. 종양이 성장하기 시작하기 전에 진단하는 것은 거의 불가능하지만, 림프계에서 악성의 고도로 증식성인 세포의 검출은 가능하다. 따라서 림프종의 치료는 종양 성장 및/또는 종양 세포 성장뿐만 아니라 이들 세포의 증식 속도의 감소를 표적화할 수 있다.

림프종 세포가 림프절 내에 축적된다면, 그들은 절의 확장으로서 제시되는 종양을 형성할 수 있다. 이들 세포는 또한 다른 기관에 영향을 미칠 수 있고 신생물이 결절외 림프종으로서 지칭되는 경우에 종양을 형성한다. 결절외 부위는 피부, 뇌, 장 및 뼈를 포함한다. 중추 신경계 림프종은 림프 조직으로부터의 악성(암) 세포가 뇌 및/또는 척수(원발성 CNS)에서 축적하거나 신체의 다른 부분으로부터 뇌 및/또는 척수까지 퍼지는(2차성 CNS) 희귀 비호지킨 림프종이다.

다른 유형의 혈액학적 신생물은 또한 림프구에서 유래되지만 전형적으로 순환 혈액 및 골수 및 골수외조혈을 지니는 부위(혈액 세포는 조혈로 지칭되는 과정에서 생성됨)만을 수반하고 보통 고정 고형 종양을 형성하지 않는 림프성 백혈병이다.

림프종 치료는 화학요법을 수반하고 일부 경우에 방사선요법 및/또는 골수 이식을 수반할 수 있다.

WHO(2008)에 의한 최근의 분류는 4가지의 광범위한 군으로 나뉘어지는 다수의 상이한 형태의 림프종 및 백혈병을 열거한다(Swerdlow, Steven H.; International Agency for Research on Cancer; World Health Organization (2008). WHO classification of tumours of haematopoietic and lymphoid tissues. World Health Organization classification of tumors 2 (4th ed.). International Agency for Research on Cancer). 이 시스템은 세포 유형(즉, 암과 비슷한 가장 비슷한 정상 세포 유형)의 에 따라 림프종 및 백혈병을 그룹화하는 시도를 하며, 표현형, 분자 또는 세포 유전학적 특징을 정한다. 3가지의 큰 그룹이 있다: B세포, T 세포 및 자연살해 세포 종양. 다른 덜 흔한 그룹이 또한 인식된다. 호지킨 림프종은, 세계보건기구(World Health Organization)(및 전술한) 분류 내에서 별도로 고려되기는 하지만, 현저하게 비정상일지라도 성숙 B 세포 계열의 림프구의 종양인 것으로 현재 인식되고 있다.

다음에서, 용어 혈액학적 신생물은 혈액, 골수 및 림프계, 바람직하게는 백혈병 및 림프종에 영향을 미치는 모든 형태의 암 유형을 포함하는 것으로 이해된다. 혈액학적 신생물의 그룹은, 혈관벽을 받치는 내피 유형 세포의 암이기는 하지만 혈관육종을 포함하지 않는 것으로 이해되어야 한다. 이는 혈액(혈관육종) 또는 림프관(림프혈관육종)에 관련될 수 있다.

비제어 세포 증식을 특징으로 하는 혈액학적 신생물은 또한 이들 질환의 치료에 효과적인 것으로 증명된 새로운 활성 치료 성분을 동정하는 것에 이바지하는 다수의 연구 프로젝트의 초점이다. 이러한 활성 성분은 환자의 기대 수명을 연장시키며, 혈액학적 신생물과 관련된 빠르게 진행하는 세포 성장을 저해하거나 혈액학적 신생물의 퇴행을 초래하거나, 또는 고통받는 환자의 삶의 질을 개선시킨다.

현재, 혈액학적 질환, 예컨대 백혈병 및 림프종의 일상적인 치료는 3가지의 치료 선택, 수술, 방사선 요법 및 화학 요법에 의존한다. 따라서, 혈액학적 질환으로 진단된 매우 다수의 환자는 현재 화학요법에 의해 치료된다.

화학요법은 고도로 증식성인 세포, 예컨대 암세포 또는 종양 세포를 사멸시키거나 또는 적어도 그들의 임의의 추가적인 증식을 중단시키도록 설계된 약물 투여를 기재하기 위해 사용되는 용어이다. 이들 약물은 통상적으로 세포증식억제 또는 세포독성 약물로서 지칭된다. 그러나, 이들 약물은 암세포만을 사멸시키는데 선택적이지 않다. 따라서 이 유형의 치료는 환자에 대한 중증의 부작용과 관련된다.

잠재적 부작용의 비포괄적 열거는 빈혈증, 구역, 구토, 식욕변화, 설사, 변비, 피로, 통증, 탈모, 출혈, 종창, 감염에 대해 증가된 감수성, 감소된 기억, 신경 변화, 구강 및 후두 변화, 성적 및 출산력의 변화, 피부 및 손발톱, 배뇨 문제를 포함한다. 이들 부작용은 매우 증증일 수 있어서, 환자가 살아있도록 유지하기 위해, 세포증식억제에 의한 치료는 고독성 때문에 중단되어야 한다. 그러나, 이들 회복기 동안, 환자는 일부 일반적 건강상태를 재획득할 수 있고, 종양은 또한 종종 회복되고 다시 성장을 시작한다. 고독성의 세포증식억제의 문제는 잘 공지되어 있다. 따라서 암의 진행을 저해시키지만 임의의 추가적인 치료가 필요한 대상체에 스트레스를 주거나 또는 손상시키지 않는 혈액학적 신생물로 고통받는 환자에 대한 치료선택에 대한 당업계의 필요가 있다.

이상적 암치료는 종양 성장 및 종양 세포 증식을 선택적으로 표적화한다. 정상 및 제어된 속도에서 건강한 세포 증식은 영향받지 않았다.

하이드록시알킬 전분(hydroxyalkyl starch: HAS)은 천연 베이스 물질로부터 유래되고 변형된 중합체이다. HAS는 아밀로펙틴 풍부 전분로부터 제조된다. 모 전분은 분지 또는 비분지일 수 있거나, 또는 둘 다의 혼합물로 이루어질 수 있다. 하이드록시에틸 전분은 아밀로펙틴에, 다시 말해서 글루코스 분자의 분지쇄에 거의 배타적으로 기반한다.

하이드록시알킬 전분, 및 더 구체적으로는 하이드록시에틸 전분은 대용혈장제로서 용적요법에서 그리고 또한 임상 혈액투석에서 사용된다(Sommermeyer et al., 1987, Krankenhauspharmazie, 8(8): 271-278; Weidler et al., 1991, Arzneimittelforschung/Drug Research, 41: 494-498). 적혈구(erythrocyte)(적혈구(red blood corpuscle))가 신체를 통해 산소를 계속해서 수송하게 하는 하이드록시에틸 전분 용액은, 외상에 의해 또는 수술에 의해 야기되는 중증의 혈액 손실 후 쇼크 상태를 예방하기 위해 정맥내로 투여될 수 있다.

추가적으로 화학치료적 약물의 노출 시간을 연장시키기 위한 HES 용액의 콜로이드-삼투 특성을 사용하는 것이, 이들이 국소로 적용될 때에 제안되었다. 복막 암종증의 일부 치료 요법에서, 화학요법의 세포독성 또는 세포증식억제 약물은 복막 내로 국소로 적용된다. 여기서 약제학적 성분에 추가로 HES를 함유하는 용액의 국소 사용은 삼투적으로 활성인 콜로이드가 없는 투석 용액의 사용에 비해 복막 내 세포독성 또는 세포증식억제 약물의 더 높은 체류시간을 초래한다(Mohamed et al (2003) European Journal of Surgical Oncology vol 29, p 261-265).

WO 96/40108에서, 또한 손상된 체강 내의 접착방지제로서 흡수가능한 장벽으로서 HES를 사용하는 것이 시사되었다.

본 발명은 혈액학적 신생물을 치료하는데 사용하기 위한 그리고 특히 이하에 기재하는 임의의 방법에서 사용하기 위한 하이드록시알킬화된 전분을 제공한다. 추가로 혈액학적 신생물을 치료하는 방법을 제공한다.

치료방법은 혈액학적 신생물을 지니는 것으로 진단된 대상체에게 하이드록시알킬화된 전분을 투여함으로써 효과적으로 종양 성장속도를 감소시키거나, 암세포 성장을 감소시키거나, 암세포의 증식 속도를 감소시키거나, 증식성 활성을 감소시키거나 또는 대상체에서 암세포 수를 감소시키는 단계를 포함하되, 암세포는 혈액학적 신생물로부터 유래되거나, 또는 혈액학적 신생물에 의해 야기된다. 바람직하게는 이는 독성 효과가 없거나 또는 상당히 더 적은 독성 효과가 세포증식억제에 의한 표준 치료에 의할 때 생기는 것과 동시에 달성된다.

본 발명은 또한 상이한 구획 내에 2가지 물질을 제공하기 위한 키트, 즉, 하나의 구획 내에, 예를 들어 제1 바이알 내에 세포증식억제 또는 세포독성 조성물, 바람직하게는 표준 진료 지침 약물 및 제2 구획 내에, 예를 들어, 제2 바이알 내에 HAS, 바람직하게는 주사용 용액을 포함하며, 둘 다 하나의 키트로 제공된다.

본 발명의 다른 양태는 혈액학적 신생물의 치료에 사용하기 위한, 종양 성장속도, 암세포 수, 암세포 성장, 암세포의 증식속도, 암세포 분할 또는 대상체에서 암세포의 증식성 활성의 감소를 위한 유일한 치료적 활성 성분으로서 하이드록시알킬화된 전분을 포함하는 약제학적 조성물이되, 암은 혈액학적 신생물이다.

HAS 용액은 임의의 중증의 부작용을 나타내는 일 없이 (종양이 없는) 매우 다수의 인간에게 투여되었지만, 이제 이들 물질이 혈액학적 신생물에 대한 특징인 세포에 대해 항증식 효과를 가질 수 있다는 것이 처음으로 주목되었다. 마우스 모델에서 골수성 백혈병 세포의 피하 적용으로부터 유래된 종양은 대조군 치료 종양보다 빠르지 않게 발생된 것을 발견할 수 있었다.

하이드록시알킬화된 전분은 안정제 또는 가용화제 또는 삼투적 활성 성분으로서 제안되었지만, HAS 그 자체의 적용은 혈액학적 신생물에 대해 추가적인 항증식 효과를 갖는다는 것은 결코 나타난 적이 없었다.

본 발명에 따르면, 하이드록시알킬화된 전분은 혈액학적 신생물을 치료함에 있어서, 바람직하게는 종양 성장속도, 고도로 증식성인 세포의 수, 암세포의 수를 감소시키거나, 암세포 분할 빈도를 감소시키거나 또는 암세포 성장 속도를 감소시키기 위한 용도를 위한 치료적 활성 화합물로서 제공되되, 암은 혈액학적 신생물이다.

바람직하게는 하이드록시알킬화된 전분은 종양 성장속도, 암세포의 수, 암세포의 증식속도, 세포성장, 암 세포분할 또는 암세포의 증식성 활성을 감소시키기 위해 사용되되, 암은 바람직하게는 혈액학적 신생물로 진단된 대상체에서 혈액학적 신생물이다. 바람직하게는 치료는 정상적으로 증싱하는 세포에 영향을 미치지 않는다.

추가 실시형태에서, 본 발명은 본 발명에 따른 하이드록시알킬화된 전분의 투여를 포함하는 혈액학적 신생물의 치료방법에 관한 것이다.

상기 치료방법은 대상체에게 종양 성장속도 감소, 암세포성장 감소, 암세포의 증식속도의 감소, 증식활성의 감소 또는 대상체에서 암세포 수의 감소 중 적어도 하나에서 효과적인 하이드록시알킬화된 전분을 포함하거나 또는 이것으로 이루어진 제1 화합물을 투여하는 단계를 포함한다.

바람직하게는 상기 방법은 다음의 단계들을 포함한다: 제1 단계에서, 하이드록시알킬화된 전분이 투여되며, 제2 단계에서 세포증식억제제, 항암활성을 지니는 생물제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 제2 화합물이 투여된다. 제1 단계는 제2 단계 전에 또는 제2 단계 후에 수행될 수 있다. 제2 화합물의 투여는 의사의 일상적인 치료에 따라, 예를 들어 동일한 양의 활성 성분에서 및/또는 동일한 빈도로 표준 요법으로 주어진 바와 같이 수행될 수 있거나, 또는 환자의 필요에 따라 감소된 양 및 감소된 빈도로 수행될 수 있다. 바람직하게는 치료방법은 더 적은 양의 제2 화합물, 바람직하게는 유일한 치료 선택사항으로서 제공될 때보다 더 적은 양의 세포증식억제제에 의한 투여를 수반한다.

치료 방법의 바람직한 실시형태에서, 상기 하이드록시알킬화된 전분은 대상체에게 제2 화합물의 투여에 의한 치료요법의 시작 전에 또는 제2 화합물의 투여 전에 투여된다.

세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물의 투여에 기반한 표준요법을 이후에 받거나 또는 이전에 받거나 또는 동시에 받는 혈액학적 신생물로 진단된 환자의 필요에 따라 HAS의 투여 또는 HAS를 포함하는 약제학적 조성물의 투여가 반복되는 것(볼루스의 투여)은 본 발명에 따른 바람직한 실시형태이다.

세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군은 백혈병 또는 림프종 유형으로 고통받는 환자에게 통상적으로 주어지는 모든 약물을 포함하는 것을 의미한다. 특히, 용어 세포증식억제제는 알킬화제, 알킬 설포네이트, 대사길항물질, 항종양 항생제, 토포아이소머라제 저해제, 유사분열 저해제, 프로테아좀 저해제, 소분자 타이로신 키나제 저해제, 분화제, 면역조절 약물 및 플레릭사포르(Plerixafor)를 포함하거나 또는 바람직하게는 이루어지는 약물의 군을 설명하는 것을 의미한다. 세포증식억제제의 그룹은 하기를 포함한다,

ALL 및 골수종, 림프종, 백혈병, 다발성 골수종을 치료하기 위한 사이클로포스파마이드, 림프종, CLL 및 호지킨 림프종을 치료하기 위해 사용되는 클로람부실, CLL 및 림프종을 치료하기 위해 사용되는 벤다무스틴, 비호지킨 림프종을 치료하기 위한 이포스파마이드, 진균성-유형 피부 T 세포 림프종(CTCL)을 치료하기 위한 메클로레타민, 다발성 골수종을 치료하기 위해 사용되는 멜팔란; 및 나이트로소유레아, 예컨대 다발성 골수종, 호지킨병 및 비호지킨 림프종을 치료하기 위한 카무스틴, 호지킨 림프종을 치료하기 위한 로무스틴; 및 트라이아진, 예컨대 전이성 악성 흑색종, 및 호지킨 및 비호지킨 림프종을 치료하기 위한 다카바진, 및 벤즈아마이드, 예컨대 림프종을 치료하기 위해 사용되는 프로카바진, 및 시스플라틴과 같은 질소 머스터드를 포함하는, 알킬화제;

CML을 치료하기 위해 사용되는 부설판을 포함하는 알킬 설포네이트;

백혈병, ALL 및 소아과 비호지킨 림프종을 치료하기 위해 사용되는 6-머캅토퓨린, 재발 또는 난치 ALL을 치료하기 위해 사용되는 퓨린 뉴클레오사이드 대사길항물질인 클로파라빈, ALL, AML, 비호지킨 림프종, CML 및 수막 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 사이타라빈, 림프종 및 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 다이하이드로 환원효소 저해제인 메토트렉세이트, 특히 어린이에서 급성 림프구성 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 퓨린 유사체인 티오구아닌, T-세포 ALL, T-세포 림프구성 림프종을 치료하기 위해 사용되는 다른 퓨린 뉴클레오사이드 유사체인 넬라라빈, 모발세포 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 클라드리빈, CLL, 지연성 비호지킨 림프종 및 ALL을 치료하기 위해 사용되는 플루다라빈, 모발세포 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 펜토스타틴, 골수증식성 질환을 치료하기 위해 사용되는 하이드록시유레아, 림프종을 치료하기 위해 사용되는 겜시타빈, 재발 또는 난치 주변 T-세포 림프종을 치료하기 위해 사용되는 프랄라트렉세이트, T-세포 ALL 및 T-세포 림프구성 림프종을 치료하기 위해 사용되는 넬라라빈을 포함하는 대사길항물질;

안트라사이클린, 예컨대 ALL 및 AML을 치료하기 위해 사용되는 다우노루비신, 및 ALL 및 AML 및 상이한 유형의 백혈병 및 림프종을 치료하기 위해 사용되는 독소루비신 및 AML, ALL 및 CML을 치료하기 위해 사용되는 이다루비신; 및 호지킨 림프종 및 기타 림프종을 치료하기 위해 사용되는 블레오마이신을 포함하는, 항종양 항생제;

ALL을 치료하기 위해 사용되는 테니포사이드 및 호지킨 및 비호지킨 림프종, 및 비림프구성 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 에토포사이드, AML 및 비호지킨 림프종을 치료하기 위해 사용되는 미톡산트론을 포함하는 토포아이소머라제 저해제;

ALL 급성 백혈병, 악성 림프종, 호지킨병 및 급성 적혈병을 치료하기 위해 사용되는 빈크리스틴, 호지킨 및 비호지킨 림프종을 치료하기 위해 사용되는 빈블라스틴, 비호지킨 림프종을 치료하기 위해 사용되는 익사베필론을 포함하는, 유사분열 저해제;

재발 다발성 골수종 및 맨틀세포 림프종을 치료하기 위해 사용되는 보르테조밉 및 다발성 골수종을 치료하기 위해 사용되는 카르필조밉을 포함하는 프로테아좀 저해제;

필라델피아 염색체 양성 만성 골수성 백혈병, Ph+ 급성 림프구성 백혈병 및 CML을 치료하기 위한 이마티닙, 치료 전 내성 또는 불내증(intolerance) 및 CML과 함께 필라델피아 염색체-양성 급성 림프구성 백혈병을 지니는 성인을 치료하기 위한 다사티닙, 및 필라델피아 염색체 양성 급성 림프구성 백혈병, CML을 치료하기 위한 포나티닙; 예컨대 CLL 및 림프종을 치료하기 위해 사용되는 이브루티닙, 필라델피아 염색체-양성(Ph+) CML을 치료하기 위해 사용되는 보수티닙 및 이마티닙 내성 CML을 치료하기 위한 닐로티닙을 포함하는, 타이로신 키나제 저해제;

급성 전골수성 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 트레티노인, 피부 T 세포 림프종을 치료하기 위해 사용되는 벡사로텐, 및 급성 전골수성 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 삼산화비소를 포함하는 분화제;

다발성 골수종을 치료하기 위해 사용되는 탈리도마이드 및 레날리도마이드, 및 항혈관신생 재발 및 난치 다발성 골수종을 치료하기 위해 사용되는 포말리도마이드를 포함하는, 면역조절 약물;

림프종 및 다발성 골수종을 치료하기 위한 플레릭사포르.

용어 항암 활성을 지니는 생물학적 제제는 항체 타이로신 키나제 저해제, 분화제, 단클론성 항체, 면역조절 약물을 포함하거나 또는 바람직하게는 이루어지는 약물의 군을 기재하는 것을 의미한다.

본 발명에 따라 항암 활성을 지니는 생물학적 제제의 군은

예를 들어, 세툭시맙, 베바시주맙, 파니투무맙 및 트라스투주맙을 포함하는, 항체 타이로신 키나제 저해제;

예를 들어, CD20-양성 비호지킨 림프종 및 만성 림프성 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 리툭시맙, B-세포 만성 림프성 백혈병을 치료하기 위해 사용되는 알렘투주맙, CLL, 여포성 비호지킨 림프종 또는 미만성 거대 B-세포 림프종을 치료하기 위해 사용되는 오파투무맙, CLL을 치료하고 B-세포를 사멸시키기 위해 사용되는 오비누투주맙, 및 호지킨 림프종 및 전신 역형성 대세포 림프종을 치료하기 위한 브렌툭시맙 베도틴, 및 다발성 골수종을 치료하기 위한 실툭시맙을 포함하는, 단클론성 항체;

전신성 홍반성 낭창을 치료하기 위해 사용되는 벨리무맙, CAPS 증후군을 치료하기 위해 사용되는 카나키누맙, 크론병을 치료하기 위해 사용되는 인플릭시맙, 흑색종을 치료하기 위해 사용되는 이필리무맙 및 다발성 경화증을 치료하기 위해 사용되는 나탈리주맙과 같은 항체를 포함하는, 면역조절 단백질.

항암 활성을 지니는 호르몬은 멜라토닌 및 코르티코스테로이드를 포함한다. 코르티코스테로이드는 ALL 및 비호지킨 림프종, 호지킨 림프종 및 다발성 골수종의 치료에서 사용되는 프레드니손 또는 프레드니솔론, 및 다발성 골수종의 치료에서 사용되는 덱사메타손을 포함한다.

다른 애주번트 요법은 또한 치료적 활성 화합물로서 HAS의 투여에 기반한 치료와 병용될 수 있다.

치료방법의 바람직한 실시형태에서, 하이드록시알킬화된 전분은 치료 간격 동안 반복적으로 투여되는 한편, 환자는 제2 화합물로 치료한 부작용으로부터 회복된다.

다른 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따른 치료적으로 유효한 물질은 연속적으로 투여되는 반면, 연속적 투여 시간 이후에 또는 전에 또는 내에서 환자는 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물의 투여에 기반한 표준 요법을 받는다.

바람직하게는, 물질 둘 다, 즉, 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물과 하이드록시알킬화된 전분을 포함하는 단일 조성물의 투여에 의한 동시 투여는 달리 명확하게 구체화되지 않는 한 본 발명의 범주 내에 포함되지 않는다.

바람직한 실시형태에서 하이드록시알킬화된 전분 및 제2 화합물은 동일한 약제학적 조성물에 포함되지 않으며, 바람직하게는 그들은 동시에 투여된다.

바람직하게는 HAS를 투여하는 제1 단계 a) 및 단계 a) 전에 또는 후에 혈액학적 신생물의 표준 진료 지침 치료로서 제공되는 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 투여하는 제2 단계 b)를 포함하는 상기 방법은 혈액학적 신생물로 진단된 환자에 대해 덜 변형되며, 단독으로 혈액학적 신생물의 표준 진료 지침 치료로서 제공되는 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물에 의한 치료보다 더 적은 부작용을 야기한다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따른 치료방법은 세포증식억제제로 이루어진 군으로부터 선택되고, 바람직하게는 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물의 투여에 의해 동일한 질환을 치료하는 것보다 더 효과적이다.

추가 실시형태에서, 본 발명은 혈액학적 신생물의 치료를 위해 본 발명에 따른 HAS를 포함하는 약제학적 조성물을 포함하는 키트에 관한 것이다. 바람직하게는 상기 키트는 또한 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 치료적 활성 화합물을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 포함한다. 바람직하게는 제2 약제학적 조성물에서 치료적 활성 화합물은 백혈병 또는 림프종 환자를 치료하기 위해 EMEA 또는 FDA에 의해 승인된 것으로부터 선택되고, 가장 바람직하게는 그것은 표준 진료 지침 약물이다.

본 발명에 따르면, 용어 "암"은 정상 성장 대조군에 비해 상실된 감수성을 갖는 세포의 증식에 의해 야기되거나 또는 이를 특징으로 하는 증식성 장애 또는 질환을 지칭한다. 상기 용어는 종양 성장 및 임의의 다른 세포 증식성 장애와 관련된 질환을 포함한다. 상기 용어는 단계 또는 침입력과 상관없이 세포의 제어되지 않은 성장을 수반하는 모든 병리학적 병태를 포함하는 것을 의미한다.

일 실시형태에서, 암은 구체적 조직 또는 기관에 대해(예를 들어, 유방, 전립선 또는 폐에서) 국소화될 수 있고, 따라서, 유래 조직을 지나서 퍼지지 않을 수 있다. 다른 실시형태에서, 암은 침습성일 수 있고, 따라서 그것이 유래된 조직의 층을 지나서 정상의 주변 조직으로 퍼질 수 있다(빈번하게는 국소로 진행된 암으로서 언급됨). 침습성 암은 전이성일 수도 있고 전이성이 아닐 수도 있다. 바람직한 실시형태에서, 암은 전이성이다. 암이 그것의 본래의 위치로부터 신체의 멀리있는 부분까지 퍼진다면 전이성이다.

추가로, 용어 암은 당업계에 공지된 모든 유형의 암을 기재하는 것으로 이해된다.

용어 "종양"은 비제어 방식, 비정상적으로 성장한 또는 성장 중인 신체 조직 또는 증식성 세포의 국소화된 축적인 세포의 국소화된 축적을 기재하는 것을 의미한다. 종양은 암성(악성) 또는 비암성(양성)일 수 있다. 신체 조직으로부터 생기는 세포 증식성 질환은 고형종양의 발생을 초래하는 반면, 혈액, 림프 또는 골수 세포로부터 생기는 림프종 및 백혈병과 같은 혈액학적 신생물은 비고형 악성종양으로 고려된다. 백혈병, 혈액학적 신생물의 유형은 보통 종양을 형성하지 않는다. 그러나, 림프종은 그 자체가 종양으로서 존재할 수 있다. 보통, 세포는 대상체가 림프종으로 진단되기 전에 림프절 내에 축적된다.

일반적으로 혈액학적 신생물은 바람직한 치료에 기인하여 고형 종양의 부재를 특징으로 하는 것이 바람직하되, 대상체는 종양이 형성되기 전에 또는 제1 종양이 이미 진단되었다면 적어도 제2 종양이 형성되기 전에 치료된다. 구체적 혈액학적 신생물의 정의가 종양 세포의 외관 또는 유전자 특징(마커)에 의존할 때, 이 종양은 축적 전에 혈액 또는 림프계를 통해 유동하는 암세포로부터 유래되어 종양을 형성한다. 바람직한 치료에서 환자는 고형 종양이 형성되기 전에 치료된다.

그러나, 피하로 주사될 때 백혈병 세포는 종양이 국소적으로 성장하게 하는 것으로 예상된다. 백혈병에 대한 치료 선택사항을 연구하기 위한 동물 모델에서 상기 원칙이 사용된다.

본 발명에 따른 "약제학적 조성물"은, 예를 들어 알킬 나머지에 부착되는 하이드록실 작용기를 통해, 또는 이 하이드록실 작용기 대신에 추가로 치환될 수 있는 본 명세서에 기재된 바와 같은 치료적 유효량의 HAS, 및 바람직하게는 티오-HAS 및 티오-HES를 포함하는 구체적이고 명확하게 개시된 모든 해당 HAS 및 HES를 포함한다.

약제학적 조성물은 상이한 농도의 고체 또는 액체 제형을 포함할 수 있다. 그 자체로 또는 약제학적 조성물로서 하이드록실 알킬화된 전분을 포함하는 상이한 실시형태는 이하에서 더 상세하게 기재되며: 본 발명에 따르면, 활성 성분, 하이드록시알킬 전분은 그 자체로, 단순히 전해질 용액 중에 용해되어 투여될 수 있거나, 또는 약제학적 부형제와 조합하여 사용될 수 있다. 일반적으로, 하이드록시알킬 전분 그 자체는 고체 또는 액체 형태일 수 있는 적합한 약제학적 부형제와 조합될 수 있는 고체 형태일 것이다. 부형제로서, 탄수화물, 무기염, 항균제, 항산화제, 계면활성제, 완충제, 산, 염기 및 이들의 조합물이 언급될 수 있다. 구체적 탄수화물 부형제는, 예를 들어: 단당류, 예컨대 프럭토스, 말토스, 갈락토스, 글루코스, D-만노스, 소르보스 등; 이당류, 예컨대 락토스, 수크로스, 트레할로스, 셀로비오스 등; 및 알디톨, 예컨대 만니톨, 말티톨, 락티톨, 자일리톨, 솔비톨(글루시톨), 피라노실 솔비톨, 마이오이노시톨 등을 포함한다. 부형제는 또한 무기산 또는 완충제, 예컨대 시트르산, 염화나트륨, 염화칼륨, 황산나트륨, 질산칼륨, 제1인산나트륨, 제2인산나트륨 및 이들의 조합물을 포함할 수 있다.

본 발명에 따르는 약제학적 조성물은 또한 미생물 성장을 방지하거나 또는 결정하기 위한 항균제, 예컨대, 염화벤즈알코늄, 염화벤제토늄, 벤질 알코올, 염화세틸피리디늄, 클로로부탄올, 페놀, 페닐에틸 알코올, 페닐질산수은, 티오머살 및 이들의 조합물을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 또한 항산화제, 예컨대 팔미트산아스코빌, 뷰틸화된 하이드록시아니솔, 뷰틸화된 하이드록시톨루엔, 하이포아인산, 모노티오글라이세롤, 프로필 갈레이트, 아황산수소나트륨, 폼알데하이드나트륨설폭실레이트, 메타중아황산나트륨 및 이들의 조합물을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 또한 계면활성제, 예컨대, 폴리솔베이트 또는 솔비탄 에스터; 지질, 예컨대 인지질 및 레시틴 및 기타 포스파티딜콜린, 포스파티딜에탄올아민, 산 및 지방 에스터; 스테로이드, 예컨대 콜레스테롤; 및 킬레이트제, 예컨대 EDTA 또는 아연을 포함할 수 있다.

본 발명에 따른 약제학적 조성물은 또한 산 또는 염기, 예컨대 염산, 아세트산, 인산, 시트르산, 말산, 락트산, 폼산, 트라이클로로아세트산, 질산, 과염소산, 인산, 황산, 푸마르산 및 이들의 조합물 및/또는 수산화나트륨, 아세트산나트륨, 수산화암모늄, 수산화칼륨, 아세트산암모늄, 아세트산칼륨, 인산나트륨, 인산칼륨, 시트르산나트륨, 폼산나트륨, 황산나트륨, 황산칼륨, 푸마르산칼륨 및 이들의 조합물을 포함할 수 있다.

바람직한 실시형태에서, 약제학적 조성물은 혈액학적 신생물을 치료함에 있어서 치료적 활성을 지니는 유일한 성분으로서, 더 바람직하게는 암을 치료함에 있어서 치료적 활성을 지니는 유일한 화합물로서, 더 바람직하게는 암을 치료하기 위해 유럽 의약국(EMA)-에 의해 승인된 유일한 치료적 활성 화합물 또는 미국식품의약국(FDA)-승인 약물 또는 둘 다에 의한 본 발명에 따르는 하이드록시알킬 전분을 포함한다.

가장 바람직하게는 HAS는 이러한 약제학적 조성물 중의 유일한 약제학적 활성 성분 또는 더 바람직하게는 유럽 의약국(EMA)- 또는 미국식품의약국(FDA)으로부터 승인된 유일한 치료적 활성 화합물 또는 둘 다이다.

용어 "표준 진료 지침 약물" 또는 "표준 진료 지침 치료"는 각각의 암 유형에 대해 기재된 바와 같은 최적의 약물을 표시한다. 본 발명과 관련하여, 이는 종양학자, 당업자에 대해 제공될 때 환자가 받는 가장 이용가능한 치료를 기재하기 위해 사용된다.

용어 "기준 약물"은 각각의 동물 모델에 대해 기재된 바와 같은 최적의 약물을 나타낸다. 도 1 및 도 2에서, 이는 "SOC"로서 지칭되었다.

용어 "혈액학적 신생물을 치료하는 또는 혈액학적 신생물의 치료" 및 "혈액학적 신생물로 진단된 환자를 치료하는 또는 혈액학적 신생물로 진단된 환자의 치료"는 치료적 측정을 지칭하되, 목적은 림프계, 골수 또는 혈액의 과증식성 병태, 예컨대 세포 증식성 질환 또는 신생물 질환, 양성 또는 악성 종양의 형성 또는 그것으로부터의 전이의 성장, 발생 또는 퍼짐과 같은 원치않는 생리학적 변화 또는 장애를 예방하거나 또는 늦추기 위한(줄이는) 것이다. 본 발명의 목적을 위해, 유리한 또는 목적으로 하는 임상 결과는 증상의 경감, 질환 정도의 감소, 질환의 안정화된(즉, 악화되지 않은) 상태, 질환 진행의 지연 또는 늦춤, 질환 상태의 개선 또는 경감 및 부분적이든 전체적이든 관해를 포함하지만, 이들로 제한되지 않는다. 전이성 암세포는 보통 본 명세서에 개시된 세포유형으로부터 생기며, 본 명세서에 개시된 유형과의 주된 차이는 이들 세포가 이제 암세포가 본래 발생하지 않은 조직에 존재한다는 것이다. 결과적으로, 암 유형 또는 증식성 질환이 언급된다면, 상기 용어는 그의 전이성 형태를 포함한다.

치료는 또한 치료를 받지 않는다면 예상되는 생존에 비해 장기간의 생존을 의미할 수 있는 것으로 이해되어야 한다. 치료는 또한 암의 예방 또는 종양 성장의 예방으로서 이해될 수 있다는 것이 이해되어야 한다.

바람직한 실시형태에서, 치료는 전이성 암으로부터 생기는 종양의 성장 속도를 감소시키거나 또는 전이의 형성을 예방하는데 효과적이다.

본 발명에 따르는 용어 "혈액학적 신생물의 치료"는 치료적 유효량의 하이드록시알킬화된 전분 또는 유일한 치료적 활성 성분으로서 하이드록시알킬 전분을 포함하는 약제학적 조성물의 투여를 포함하는 것으로 특히 생각된다. 치료적 유효량은 암세포 수의 감소; 종양 크기의 감소; (e) 종양 형성의 예방; 주위 기관 내로 암세포 침윤을 저해시키는 것, 즉, 어느 정도 늦추고, 바람직하게는 중단시키는 것; 암세포의 퍼짐(전이)을 예방하는 것; 종양 전이를 저해시키는 것, 즉, 어느 정도 늦추고, 바람직하게는 중단시키는 것; 종양 성장을 어느 정도 저해시키는 것; 세포 증식 속도를 감소시키는 것; 증식성 세포의 수를 감소시키는 것 및 암과 관련된 하나 이상의 증상을 어느 정도 완화시키는 것; 혈액학적 신생물을 약화, 개선 또는 제거하는 것, 및 삶의 질을 증가시키는 것으로 이루어진 군으로부터의 효과 중 적어도 하나를 야기하는 양이다. 특정 양의 하이드록시알킬화된 전분이 이들 효과 중 적어도 하나 또는 몇몇을 발휘하는지, 즉, 약제학적으로 유효한지의 여부는 표준 측정에 의해 결정될 수 있다. 특히, 이는 암요법 효능을 평가함으로써 결정될 수 있다. 암 요법 효능은, 예를 들어 질환 진행에 대한 시간, 삶의 질의 증가를 결정하고/하거나 반응 속도를 결정함으로써 평가될 수 있다. 따라서, 필요한 투약량은 치료 중인 병태의 중증도, 환자 개개의 반응, 사용되는 투여 방법, 암 유형, 종양 등에 의존할 것이다. 당업자는 그의 일반적 지식에 기반하여 정확한 투약량을 확립할 수 있다. 일반적으로, 하이드록시알킬화된 전분 구성성분의 용량은 또한 생성물이 비독성으로서 고려되고 용량 제한이 현재의 임상 경험(예를 들어, HES 130/0.4: 30㎖/㎏/일의 용액으로서 볼루벤(Voluven)(등록상표) 10% 라벨링 및/또는 HES 130/0.4: 50㎖/㎏/일의 용액으로서 볼루라이트(Volulyte)(등록상표) 6% 라벨링에 의함)에 기반하는 것으로 고려되기 때문에 질환 상태와 독립적으로 투여된다. 최근에 투약 권장량은 볼루벤(등록상표) 10%: 18㎖/㎏/일 및/또는 볼루라이트(등록상표) 6%: 30㎖/㎏/일로 수정되었다.

본 명세서에 사용되는 바와 같은 용어 "투여하는"은 바람직하게는 화합물(예컨대, 하이드록시알킬 전분 또는 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 화합물)의 또는 본 발명에 따른 약제학적 조성물의 대상체, 예컨대 혈액학적 신생물로 진단된 환자 내로의 도입을 지칭한다. 상기 용어는 비경구 및 장 투여 경로에 의해 투여하는 것을 포함한다. 비경구 투여 경로는 혈관내, 경점막, 경피-진피내, 근육내(i.m.), 정맥내(i.v.), 진피내, 피하(s.c), 복강내(i.p.), 심실내, 두개내, 질, 비강, 종양내, 골내, 척추강내 및 폐내를 포함하는 군으로부터 선택된다. 장 투여방법은 경구, 비강, 설하 및 직장 투여 및 (섭식관을 통한) 위관 영양법, 예컨대 위루술(PEG 관) 또는 제주노(percutaneous jejunostomy feeding tube: PJG 관)에 의한 투여를 포함하는 군으로부터 선택된다. 투여 경로는 치료될 암에 따를 수 있다는 것이 이해되어야 한다.

본 발명에 따르면, 바람직한 투여 경로는 비경구 투여이다. 추가로 이러한 비경구 경로는, 바람직하게는 혈관 내로의 주입이 바람직하다. 가장 바람직한 투여경로는 정맥내 경로이다.

바람직하게는, 단일 용량(볼루스)의 치료적 유효량의 앞서 언급한 화합물의 투여는 5분 내지 5시간의 기간에 걸친다.

다음에서 용어 "세포증식억제제"는 세포성장을 저해시킴으로써 증가된 생존율, 환자의 연장된 수명, 악성 세포수의 감소 및/또는 혈액학적 신생물로 고통받고 있는 환자에서 증상의 경감을 목적으로 하는 화학요법에서 유효한 것으로 알려진 하나 이상의 물질로 이루어진 것으로 이해될 것이다. 따라서, 용어는 세포독성 및 세포증식억제 활성 성분을 포함한다.

세포증식억제제로 칭해지는 물질의 그룹은 추가로 생명공학적 합성과 대조적으로 화학적 합성에 의해 얻을 수 있는 것을 특징으로 하는 것으로 이해된다. 용어 세포증식억제제는 HAS 또는 HES를 포함하지 않을 것이고, 바람직하게는 또한 다른 전분 유도체를 포함하지 않을 것이며, 가장 바람직하게는 다른 다당류를 포함하지 않을 것이다.

용어 "항암 활성을 지니는 생물학적 제제"는 암 세포에 대해 세포독성 및/또는 세포증식억제 효과를 이용하는 생명공학적 방법에 의해 생산된 단백질 또는 핵산으로 이루어지는 것으로 이해될 것이다. 예는 항체, 예컨대 세툭시맙이다.

용어 "항암 활성을 지니는 호르몬"은 세포, 샘, 기관에 의해 또는 생합성에 의해 생산되든 방출되든, 멀리있는 세포 또는 기관에서의 기능에 영향을 미칠 수 있고, 예를 들어 대응하는 호르몬 수용체를 발현시킴으로써 이러한 호르몬의 작용에 민감한 암세포에서 항증식 효과를 발휘하는 생화학적 화합물(단백질을 포함)로 이루어지는 것으로 이해될 것이다.

저혈량증의 치료 및 예방을 위한 하이드록시에틸화된 전분은 또한 다년간 정맥내 주입으로서 사용되었으며, 독성의 부작용을 나타내지 않는다. 이러한 다른 의학적 용도로부터 알려진 용량 권장사항은 생리적 제한에만 기인하여 상한을 구체화한다. 0.9% 염화나트륨에서 "6% 하이드록시에틸 전분 130/0.4"로서 라벨링된 용액은 며칠에 걸쳐 반복적으로 투여될 수 있다. 따라서 환자는 그의 암을 치료하고 종양 성장 속도를 저해하기 위해 단일 용량 또는 다회 용량의 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물과 조합하여 HES의 계속된 주입을 제공할 수 있다.

하이드록시알킬화된 전분은 또한, 예를 들어, 세포증식억제에 의한 혈액학적 신생물 치료요법 동안 또는 후에 소위 관수 요법(watering therapy)에서 사용될 수 있다(Ko et al. (2011) Intravenous fluid therapy successfully prevents renal injury by gemcitabine in patients with pancreatic cancer. Pancreas 2011 Jul; 40(5): 784-6). 본 명세서에서 암 혈액학적 신생물을 치료하는 것의 추가적인 이점은 기관, 예를 들어 신장 및 방광의 보호 외에도 달성될 수 있는데, 관수 용액을 투여함으로써 달성된다.

바람직하게는, 하이드록시알킬 전분은 적합한 담체 및/또는 적합한 희석제, 예컨대 바람직하게는 i.v., i.m., i.p. 또는 s.c. 적용을 위한 멸균 용액과 함께 투여된다.

추가로 투여 경로는 HAS의 바로 사용가능한 액체 용액과 연루되는 것이 바람직하다.

본 명세서에 사용되는 용어 "대상체"는 동물, 바람직하게는 포유류에 관한 것이다. 바람직한 실시형태에서, 대상체는 마우스 또는 래트와 같은 설치류이다. 훨씬 더 바람직한 실시형태에서, 대상체는 영장류이다. 가장 바람직하게는, 대상체는 인간이다. 본 발명에 따르면, 용어 "대상체"는 또한 혈액학적 신생물로 고통받고 있는 개체 또는 이러한 치료가 필요한 개체에 관한 것으로 이해된다. 본 발명의 바람직한 실시형태에서 용어 "대상체"는 혈액학적 신생물로 진단된 암환자를 기재한다.

용어 "하이드록시알킬 전분" 또는 "하이드록시 알킬화된 전분"은 이하에 더 상세하게 기재될 바와 같이 다양한 하이드록실-알킬화된 전분을 포함한다. 이들 하이드록시알킬 전분은 추가로 대체될 수 있다.

하이드록시알킬 전분은 부분적으로 가수분해된 천연 전분의 에터 유도체이며, 이때 전분의 하이드록실기는 적합하게 하이드록시알킬화된다. 바람직한 하이드록시알킬 전분은 하이드록시프로필 전분 및 하이드록시에틸 전분이며, 하이드록시에틸 전분이 특히 바람직하다.

본 발명은 하이드록시 작용기를 운반하는 알킬 잔기로 치환되는 하이드록시알킬화된 전분(HAS)의 새로운 의학적 용도를 포함할 뿐만 아니라, 대안의 알킬기로 치환된 해당 알킬화된 전분을 포함한다. 일 실시형태에서, 알킬기는 설프하이드릴기로서 지칭되는 티올기를 운반한다. 다른 실시형태에서, 해당 알킬화된 전분은 티오 작용기(티올기)에 의해 대체되는 글루코스 단위 내 비치환 하이드록시 작용기(하이드록실기)를 가진다. 다른 실시형태에서, 알킬화된 전분의 일부 글루코스 단위는 알킬화되되, 일부 이들 알킬기는 티올기를 운반하며, 일부는 하이드록실 작용기를 운반하고, 일부 C2, C3 및 C6 위치는 바람직하게는 티올기에 의해 치환될 수 있다. 이들 전분은 본 명세서에서 티오-HAS로서 지칭된다. 그들은 이하에서 그리고 PCT/EP2011/003458호에서 더 상세하게 기재되었다.

본 출원에 따르면, "알킬기"는 포화된 탄화수소로, 바람직하게는 2 내지 12개 탄소 원자의 쇄 길이로 이루어진 선형 또는 분지형 작용기 또는 측쇄를 포함하는 것으로 이해된다. 상기 포화된 탄화수소는 선형(화학식 -C_nH_{2n +1})일 수 있되, 탄소 원자는 뱀과 같은 구조, 예컨대 프로필-, 뷰틸-, 펜틸-, 헥실-, 헵틸-, 옥틸-, 노닐-, 데칸일-, 운데칸일- 및 도데칸일-잔기에 결합되고; 또는 분지되되(화학식 -CnH2n+1, 여기서 n은 3 이상임), 예를 들어 아이소프로필-, 아이소뷰틸-, tert-뷰틸, 1-아이소펜틸-, 2-아이소펜틸, 3-아이소펜틸-, 네오펜틸-나머지를 포함하는, 탄소 백본은 하나 이상의 방향으로 분할된다.

전분은 글라이코시드 결합을 통해 결합된 실질적으로 알파-D-글루코스 단위로 구성된 화학식 (C₆H₁₀O₅)_n의 다당류이다. 일반적으로 말해서, 전분은 실질적으로 아밀로스 및 아밀로펙틴로 이루어진다. 아밀로스는 선형쇄로 구성되며, 이때 글루코스 단위는 알파-1,4-글라이코사이드 결합을 통해 연결된다. 아밀로펙틴은 알파-1,4-글라이코사이드 결합 및 알파-1,6-글라이코사이드 결합을 지니는 고도로 분지된 구조를 가진다.

하이드록시알킬 전분이 제조될 수 있는 천연 전분은 곡물 전분, 곡실용 두과 작물 전분 및 감자 전분을 포함한다. 잡곡 전분은 쌀 전분, 밀 전분, 예컨대 외알밀 전분, 스펠트 전분, 연질 전분, 에머밀 전분, 듀럼밀 전분 또는 카무트 전분, 메이즈 전분, 라이 전분, 귀리 전분, 보리 전분, 라이밀 전분 및 기장 전분, 예컨대 수수 전분 또는 테프 전분을 포함한다. 곡실용 두과 작물 전분은 콩 전분, 완두콩 전분, 녹두 전분 및 루핀 전분을 포함한다. 하이드록시알킬 전분이 제조되는 바람직한 천연 전분은 아밀로스에 비해 고함량의 아밀로펙틴을 가진다. 이들 전분의 아밀로펙틴 함량은, 예를 들어, 적어도 70중량%, 바람직하게는 적어도 75중량%, 더 바람직하게는 적어도 80중량%, 더 바람직하게는 적어도 85중량%, 더 바람직하게는 적어도 90중량%, 예컨대 95중량%까지, 96중량%까지, 97중량%까지, 98중량%까지 또는 99중량% 또는 100중량%까지이다. 특히 높은 아밀로펙틴 함량을 갖는 천연 전분은, 예를 들어, 바람직하게는 실질적으로 무아밀로스 감자로부터 추출되고, 전통적으로 경작된, 예를 들어, 자연종 엘리안(Eliane) 또는 유전자 변형된 아밀로펙틴 감자 품종, 및 왁스같은 품종의 곡물, 예컨대 왁스같은 메이즈 또는 왁스같은 쌀로부터의 전분인, 왁스같은 감자 전분과 같은 적합한 감자 전분이다.

일반적으로, 하이드록시알킬 전분은 목적으로 하는 크기를 갖는 분자를 얻기 위해 전분 곡물을 부수고 거대분자를 절단함으로써 제조된다. 절단은, 예를 들어 효소적 분해에 의해, 예를 들어 알파-아밀라제 및/또는 베타-아밀라제를 이용하고/하거나 산 가수분해에 의해 수행될 수 있다. 예를 들어, 한외여과에 의해, 예를 들어, 분자량이 5000Da까지 또는 1000Da까지인 저분자량 부산물의 분리를 허용하는 적합한 차단 제한(cut-off limit)을 갖는 막을 이용하여 목적으로 하는 분획의 정제를 달성할 수 있다. 동일 또는 상이한 절단 기법을 이용하는 것의 각각의 단계에서의 가능성에 의해 2 이상의 절단 단계가 연속해서 수행될 수 있다. 각각의 절단 단계 후에, 얻어진 생성물은 정제될 수 있다. 궁극적으로 얻어진 생성물은, 예를 들어 냉동 건조에 의해 단리될 수 있다.

이렇게 얻어진 전분 분획에 기반하여, 하이드록시알킬 전분은 하이드록실기의 에터화에 의해 제조된다. 일반적으로, 저분자 알코올의 에터화로부터의 알려진 모든 반응, 예컨대 촉매가 없는 반응 또는 염기성 촉매에 의한 반응이 상정될 수 있다. 기술적 과정에서 바람직한 방법은 활성화된 올레핀의 마이클 첨가(Michael addition), 지방족 할로겐을 함유하는 화합물의 친핵성 치환에 의한 윌리암(Williams) 합성, 또는 에폭사이드로서도 공지된 옥시란과의 반응을 포함한다.

하이드록시알킬 전분, 더 구체적으로는 하이드록시에틸 전분의 제조에 관해, 예를 들어, 문헌[Sommermeyer et al., Chromatographia, 25, 1988, pp. 167-168; C. Jungheinrich et al., Clin. Pharmacokin., 44 (7), 2005, pp. 681-699; J.-M. Mishler IV, Pharmacology of hydroxyethyl starches, Oxford Medical Publications, 2002, pp. 1-30]이 언급될 수 있다.

본 발명에 따르면, 용어 "하이드록시알킬 전분"(HAS)은 하기 화학식 III에 따른 구성을 갖는 전분 유도체를 지칭한다.

[화학식 III]

여기서, 도시된 고리 구조는 본 출원에 의해 별도로 기재되는 바와 같은 하나의 무수글루코스 단위일 수 있는, HAS 분자의 말단 또는 비말단 당류 단위이며, HAS"는 나머지, 즉, 하이드록시알킬 전분 분자의 잔여 부분이고, 상기 잔여 부분은 잔기 R^aa, R^bb 및 R^cc 및 R^rr를 함유하는 도시된 고리 구조와 함께 전체 HAS 분자를 형성한다. 화학식 III에서, R^aa, R^bb 및 R^cc는 독립적으로 서로 하이드록실, 선형 또는 분지형 하이드록시알킬기 또는 -O-HAS"이다.

도시된 고리 구조가 HAS 분자의 비말단 당류 단위인 경우에 잔여 R^rr은 -O-HAS"이다. 도시된 고리 구조가 HAS 분자의 말단 당류 단위인 경우에, R^rr은 -OH이고, 화학식 III은 그의 헤미아세탈 형태로 이런 말단 당류 단위를 나타낸다. 예를 들어, 용매에 따라서 이 헤미아세탈 형태는 하기 반응식에 나타내는 바와 같은 유리 알데하이드와 평형상태일 수 있다:

상기 기재한 바와 같은 잔기 R^rr과 관련하여 사용되는 용어 O-HAS"는 화학식 III의 왼편에 나타낸 나머지 HAS"에 추가로 화학식 III의 도시된 고리 구조에 대해 잔기 R^rr로서 연결되는 HAS 분자의 추가적인 나머지이며

[화학식 III]

화학식 III의 왼편에 나타낸 잔기 HAS" 및 도시된 고리 구조와 함께 전체 HAS 분자를 형성한다.

상기 논의한 각각의 나머지 HAS"는 - 말단 당류 단위와 별도로 - 화학식 IIIa에 따르는 하나 이상의 반복 단위를 포함하고, 바람직하게는 본질적으로 이루어진다.

[화학식 IIIa]

본 발명에 따르면, 화학식 III에 나타낸 HAS 분자는 주어진 당류 단위의 잔기 R^aa, R^bb 및 R^cc 중 적어도 하나가 추가 나머지 -O-HAS"를 아직 포함하는지 여부에 따라서, 선형이거나 또는 적어도 하나의 분지점을 포함한다. 주어진 당류 단위의 R^aa, R^bb 및 R^cc 중 어떤 것도 화학식 III의 왼편에 나타낸 HAS"와 별도로, 그리고 선택적으로 R^rr에 함유된 HAS"와 별도로 추가 나머지 -O-HAS"를 아직 포함하지 않으며, HAS 분자는 선형이다.

2 이상의 상이한 하이드록시알킬기를 포함하는 하이드록시알킬 전분이 또한 생각될 수 있다. 하이드록시알킬 전분에 포함된 적어도 하나의 하아드록시알킬기는 하나 이상의, 특히 2 이상의 하이드록실기를 포함할 수 있다. 바람직한 실시형태에 따르면, 적어도 하나의 하이드록시알킬기는 단지 하나의 하이드록실기를 포함한다.

본 발명에 따르면, 혈액학적 신생물의 치료를 위해 상기 언급한 화학식 III에 따른 하이드록시알킬 전분(HAS)이 개시된다.

[화학식 III]

말단 당류 단위와 별도로 HAS"에 포함된 당류 단위는 동일 또는 상이할 수 있고, 바람직하게는 이하에 나타내는 화학식 IIIa에 따른 구조를 가진다.

[화학식 IIIa]

이 단위는 또한 다음에서 더 상세하기 기재된다:

하이드록시알킬 전분 분자의 전형적인 무수글루코스 단위는 하기 화학식 I을 가진다:

[화학식 I]

화학식 I에서, 잔기 R^a(화학식 III에서 -OR^a는 R^cc로서 도시됨), R^b(화학식 III에서 -OR^b는 R^aa로서 도시됨) 및 R^c(-OR^c는 화학식 III에서 R^bb로서 도시됨)는 독립적으로 [(-CR^jR^k)_y-0]_z-H이고, 이때 R^j 및 R^k는 독립적으로 H 또는 알킬, 바람직하게는 저급알킬, 예컨대 메틸 또는 에틸, 바람직하게는 H이며;

y는 0 내지 6, 바람직하게는 2 내지 4, 예컨대 0, 1, 2, 3, 4, 더 바람직하게는 2 또는 3, 더 바람직하게는 2의 정수이고;

z는 0 내지 20, 바람직하게는 0 내지 10, 더 바람직하게는 0 내지 6, 더 바람직하게는 0 내지 4, 예컨대 0, 1, 2, 3, 4의 정수이며, 단, y가 0인 경우에, z는 마찬가지로 0이다.

그러나 글루코스 분자에 위치된 거대분자의 분지 부위가 있다면, R^c는 또한, 예를 들어, (Glc-1,4-Glc)_n-Glc와 같은 글루코스 분자의 추가쇄일 수 있고, 이때 n은 0 내지 20의 값을 가질 수 있다. 이러한 측쇄에서 무수글루코스 단위는 또한 처음에 동정한 쇄와 같이 치환될 수 있다.

무수글루코스 단위가 적어도 하나의 하이드록시알킬 모이어티에 의해 치환되지 않는 하이드록시알킬 전분 분자의 단위라면, R^a 및 R^b 및 R^c의 지수 z는 0이다. 무수글루코스 단위가 C2 위치에서만 하이드록시알킬 모이어티에 의해 치환되는 하이드록시알킬 전분 분자의 단위라면, 지수 z는 R^b 및 R^c에서 0이고, R^a에서 0보다 크다. 무수글루코스 단위가 C3 위치에서만 하이드록시알킬 모이어티에 의해 치환되는 하이드록시알킬 전분 분자의 단위라면, 지수 z는 R^a 및 R^c에서 0이고, R^b에서 0보다 크다. 무수글루코스 단위가 C6 위치에서만 하이드록시알킬 모이어티에 의해 치환되는 하이드록시알킬 전분 분자의 단위라면, 지수 z는 R^a 및 R^b에서 0이고 R^c에서 0보다 크다. 무수글루코스 단위가 C2 및 C3 위치에서만 하이드록시알킬 모이어티에 의해 치환되는 하이드록시알킬 전분 분자의 단위라면, 지수 z는 R^c에서 0이고 R^a 및 R^b에서 0보다 크다. 무수글루코스 단위가 C2 및 C6 위치에서만 하이드록시알킬 모이어티에 의해 치환되는 하이드록시알킬 전분 분자의 단위라면, 지수 z는 R^b에서 0이고 R^a 및 R^c에서 0보다 크다. 무수글루코스 단위가 C3 및 C6 위치에서만 하이드록시알킬 모이어티에 의해 치환되는 하이드록시알킬 전분 분자의 단위라면, 지수 z는 R^a에서 0이고 R^b 및 R^c에서 0보다 크다. 무수글루코스 단위가 C2 및 C3 및 C6 위치에서만 하이드록시알킬 모이어티에 의해 치환되는 하이드록시알킬 전분 분자의 단위라면, 지수 z는 R^a 및 R^b 및 R^c에서 0보다 크다.

본 발명에 따른 일 실시형태에서, 하이드록시알킬 전분은 순수 하이드록시프로필 전분이며, 여기서 0보다 큰 지수 z를 지니는 각각의 잔기 R^a 또는 R^b 또는 R^c는 지수 y가 3이며, R^j와 R^k는 둘 다 H이다. 다수의 하이드록시프로필화가 제조 동안 생길 수 있기 때문에, 지수 z는 2, 3 이상과 같이 1보다 클 수 있다.

추가로, 에폭사이드를 이용하여 알킬화가 수행될 때는 언제든지, 추가 형태의 측쇄가 형성된다. 이 경우에, 하이드록시 작용기는 알킬 측쇄의 말단 C 원자 상에 위치되지 않지만, 대신에 C², 즉, 두 번째 C 원자 상에서 고리로부터 카운팅된다. 에폭사이드 1,2-에폭시프로판에 의한 프로필화 후에, 잔기 R^a 또는 R^b 또는 R^c 중 적어도 하나는 다음의 외관을 가진다, 예를 들어: (C¹R^jR^k-C²R_j(OH)-C³R^jR^kH). 비치환 1,2-에폭시프로판에 의한, 다시 말해서 메틸옥시란("산화프로필렌")에 의한 프로필화 후에, R^J 및 R^k는 각각 H이다.

바람직한 실시형태에서, 하이드록시알킬 전분은 순수한 하이드록시에틸 전분이며, 여기서 0보다 큰 지수 z를 지니는 각각의 잔기 R^a 또는 R^b 또는 R^c는 지수 y가 2이며, R^j와 R^k는 둘 다 H이다. 다수의 하이드록시프로필화가 제조 동안 생길 수 있기 때문에, 지수 z는 2, 3 이상과 같이 1보다 클 수 있다. 예를 들어, 이중 하이드록시에틸화가 무수글루코스 단위의 제공된 하이드록실기 상에서 일어난다면, 지수 y와 지수 z는 둘 다 2이고, 하나의 각각의 잔기 R^a(또는 R^b 또는 R^c)에서 잔기 R^j와 R^k는 둘 다 H이고, 따라서, -CH₂-CH₂-O-CH₂-CH₂-OH이다.

또한 상이한 알킬화제가 사용되는 것(혼합된 알킬화)이 가능하며, R^a, R^b 및 R^c는 대안적으로 y가 상이한 값을 가질 수 있는 방법으로 표시된다는 것을 의미하고 -따라서, 예를 들어, 혼합된 하이드록시에틸화 및 하이드록시프로필화의 경우에, y는 하나의 잔기에서 2일 수 있고, 다른 잔기에서 3일 수 있다. 더 나아가, z가 0 초과인 잔기 R에서, 측쇄일 수 있으며, 이때 값 y는 상이한 값, 예를 들어, 2 또는 3을 가질 수 있다.

에폭사이드와의 혼합된 알킬화는 또한 상이한 숫자에서 하나 또는 다양한 잔기 R^a, R^b 또는 R^c에서 형태 [(-CR^jR^k)_y-0]_z-H의 구조적 단위 및 형태 [-C¹R^jR^k-C²R^j(C³R^jR^kH)-0]_z-H의 구조적 단위의 가능한 존재를 초래할 수 있다.

더 나아가, 글루코스 중합체는 또한 티오알킬 잔기로 치환될 수 있다. 따라서, 원칙적으로, 상기 기재한 실시형태는 치환된 측쇄에서 산소 원자 대신 황 원자와 함께 존재하는 것이 가능하다. 이 경우에, 잔기 R^a, R^b 및 R^c 중 적어도 하나는 -[(-CR^jR^k)_y-S]_z-H 또는 [-C¹R^jR^k-C²R^j(C³R^jR^kH)-S]_z-H일 수 있다. 본 발명에 따르면, 이 종류의 티오하이드록시알킬 전분은 혈액학적 신생물의 치료를 위해 개시된 것과 같다.

티오하이드록시알킬 전분의 제조방법은 2012년 1월에 공개된 국제 특허 출원 WO2012/004005호(PCT/EP2011/003458)(발명의 명칭: "Conjugates comprising Hydroxyalkyl Starch and a Cytotoxic Agent and Process for their Preparation")에서 발견할 수 있으며; 특히, 245 내지 252 페이지에 대한 제조방법("1.3. Special Procedures"에서 시작하여 "1.4.9. General procedure for the synthesis of SH-HES using sodium sulfide as nucleophile"까지를 포함), 이해를 위해 필요한 경우, 259 내지 263 페이지의 표 6 내지 9가 언급된다.

바람직한 실시형태에서, 본 발명의 하이드록시알킬 전분은 하이드록시에틸 전분, 하이드록시프로필 전분 또는 하이드록시뷰틸 전분이며, 하이드록시에틸 전분이 특히 바람직하다.

본 발명에 따르면, 하이드록시알킬 전분(HAS)은 바람직하게는 하이드록시에틸 전분(HES)이며, 하이드록시에틸 전분 바람직하게는 다음의 화학식 III에 따른 구조를 가진다.

[화학식 III]

식 중, R^aa, R^bb 및 R^cc는 독립적으로 -O-HES" 및 -[0-CH₂-CH₂]_s-OH로 이루어진 군으로부터 서로 선택되고, s는 0 내지 4의 범위이며, HAS"는 하이드록시에틸 전분의 나머지이고, HES"로 약칭된다. 잔사 R^rr은 -O-HES"이거나 또는, 화학식 III의 경우에 HES의 말단 당류를 나타내며, R^rr은 -OH이다.

중합체로서, 제조방법에 따라서, 하이드록시알킬 전분은 개개 하이드록시알킬 전분 분자가 중합도, 분지 부위의 수 및 패턴 및 치환 패턴, 즉, 하이드록시알킬기의 수 및/또는 부위와 관련하여 상이할 수 있는 다분산성 화합물이다. 따라서, 하이드록시알킬 전분은 보통 통계적으로 평균화된 매개변수를 특징으로 한다. 이들은 일반적으로 평균 분자량, 및 치환 패턴을 특징으로 하는 매개변수이다. 후자의 매개변수는 전형적으로 치환도(DS), 분자 치환(MS) 및 C2/C6 비, 즉, C2 위치에서 치환된 무수글루코스 단위의 수 대 C6 위치에서 치환된 무수글루코스 단위의 수의 비, 또는 보통 PDI(다분산 지수)로서 지칭되는 Mn에 대한 Mw의 비(M_w/M_n)로서 동정되며, 분자 분자량 분포의 퍼짐을 특징으로 한다.

하이드록시알킬 전분은 C2 및 C6 부위에서뿐만 아니라 C3 부위에서 하이드록시알킬기로 치환될 수 있지만, 이 정보는 보통 구체적 유형의 HAS를 지칭할 때 생략된다.

HAS를 구체화하는 제2 매개변수는 보통 분자 치환도 MS를 지칭하며, 제3 매개변수는 C2에서의 치환 대 C6에서의 치환(C2/C6 비) 또는 PDI를 지칭한다.

일반적으로 말해서, 하이드록시알킬 전분의 평균 분자량을 통계적으로 기재하는 2가지 방법이 있다. 제1 매개변수는 통상적으로 Mn 또는 M_n으로서 지칭되는 수평균 분자량이고; 제2 매개변수는 통상적으로 Mw 또는 M_w로서 지칭되는 중량 평균 분자량이다.

분자량은, 예를 들어 다각도 광산란 검출(multiple-angle light-scattering detection: GPC/MALLS/RI)을 이용하는 겔투과 크로마토그래피에 의해 결정될 수 있다. 예를 들어, 문헌[W.-M. Kulicke et al., Starch, 45 (12), 1993, pp. 445-450]이 언급된다. 대안적으로, 분자량은, 예를 들어 유럽약전 7.0, 01/2011:1785, p. 984 또는 그 밖에 문헌[B. Wittgren et al., Int. J. Polym. Anal. Charact. 7 (1-2), 2002, pp. 19-40]에 따라 유동-FFF/MALLS를 이용하여 결정된다.

이와 관련하여, 수 평균 분자량은 식 1에 의해 정해진다:

(1)

식 중, n_i는 몰 질량 M_i를 갖는 종 i의 하이드록시알킬 전분 분자의 수이다.

은 이것이 평균 값이라는 것을 표시내지만, 선은 전형적으로 생략된다.

중량 평균 분자량 M_w는 다음의 식에 의해 정해진다:

(2)

식 중 n_i는 몰 질량 M_i를 갖는 종 i의 하이드록시알킬 전분 분자의 수이다.

는 이것이 평균값이라는 것을 표시하지만, 선은 전형적으로 생략된다.

본 설명과 관련하여, 용어 "평균 분자량"은 MALLS(다각도 레이저 광 산란)-GPC 방법에 의해 결정된 중량을 지칭한다.

본 발명에 따른 하이드록시알킬 전분은 20kDa만큼 적게부터 1300kDA까지의 평균 분자량으로 다른 평균 분자량(Mw 또는 MW)을 가진다.

PDI(다분산 지수)로 보통 지칭되는 Mn(Mw/Mn)에 대한 Mw의 비는 분자량 분포의 퍼짐을 특징으로 하는 매개변수이다. 이 매개변수가 값 1에 가까울수록, 분자량 분포는 덜 분산된다.

본 발명에 따르면 전형적인 PDI 값은 4.0 내지 1.1의 범위에 있다.

치환 패턴은 적어도 부분적으로 ¹H NMR을 이용하여 또는 더 정교한 방법에 의해, 고해상도 ¹³C NMR에 의해 정량적으로 결정될 수 있다. 문헌[Y. M. Liu et al., Chin. Chem. Lett. 13 (11), 2002, pp. 1097-1099, 및 W.-M. Kulicke et al., Starch, 45 (12), 1993, pp. 445-450]이 언급된다. 일반적으로 하이드록시알킬 전분의 치환도를 설명하는 3가지 관례적 매개변수가 있다.

"DS"(치환도)로서 동정되는 제1 매개변수는 치환된 무수글루코스 단위의 수 대 모든 무수글루코스 단위의 총 수의 비를 기재한다. 본 정의를 고려하여, DS의 이론적 최대값은 1.0이다.

매개변수 DS는, 예를 들어, 문헌[W. Banks et al., Br. J. Pharmac, 47, 1973, pp. 172-178, O. Larm et al., Starch, 33 (7), 1981, pp. 240-244, 또는 Sommermeyer et al., Starch, 44 (6), 1992, pp. 215-218]에 따라 결정될 수 있다.

전형적으로 "MS"(분자 치환)로서 동정되는 제2 매개변수는 전분 거대분자의 글루코스 분자에 하이드록시알킬화에 의해 첨가된 하이드록시알킬 잔기 수(㏖)의 분자 내 글루코스 단량체의 수에 대한 비를 기재한다.

알킬화가 하이드록시 작용기 당 단일 알킬 단위의 첨가를 초래한다고 추정하면, 몰 치환도는 전분 분자 상의 글루코스 단위가 하이드록시알킬 단위로 치환 또는 대체된 3개의 하이드록시 단위의 비율을 나타낸다. 본 명세서에서 치환도 1은 3개의 자유 하이드록시기 중 하나의 100% 치환이다. 따라서 이론적으로 치환 범위는 0.1 내지 3으로 다를 수 있되, 3개는 모든 3개의 하이드록시 단위가 100% 치환되었다는 것을 나타내었다. 시판 중인 다수의 상이한 유형의 HAS가 있으며, 그들의 치환도는 0.3 내지 2로 다르다.

매개변수 MS는 문헌[Ying-Che Lee et al., Anal. Chem. 55, 1983, pp. 334-338; 또는 K. L. Hodges et al., Anal. Chem. 51, 1979, p. 2171]에 따라 결정될 수 있다. 이들 방법에 따르면, 알려진 양의 하이드록시알킬 전분을 자일렌 중에서 에터 절단시키고, 아디프산 및 요오드화수소산을 첨가한다. 방출된 요오도알칸의 양은 후속적으로 내부 표준으로서 톨루엔을 이용하고 외부 표준으로서 요오도알칸 교정 용액을 이용하여 기체 크로마토그래피에 의해 결정된다.

C2/C6 비로서 동정되는 세 번째 매개변수는 C2 위치에서 치환된 무수글루코스 단위의 수 대 C6 위치에서 치환된 무수글루코스 단위의 수의 비를 기재한다. 하이드록시알킬 전분의 제조 동안, C2/C6 비는 하이드록시알킬화 반응을 위해 사용되는 염기의 양을 통해 영향받을 수 있다. 일반적으로 말해서, 염기의 농도가 더 높을수록, C6 위치에서 하이드록시알킬화된 하이드록실기의 수는 더 많다.

매개변수 C2/C6은, 예를 들어, 문헌[Sommermeyer et al., Krankenhauspharmazie 8 (8), 1987, pp. 271-278, 특히 273 페이지]에 따라 결정될 수 있다.

따라서, 다양한 유형의 하이드록시알킬- 및 하이드록시에틸 전분은 보통 그들의 평균 분자량(kDa으로 표현), 그들의 몰 치환도(MS), 그들의 분지도(C2/C6)의 언급에 의해 또는 그들의 다분산성(Mw/Mn)의 표시에 의해 기재된다.

본 발명은 암치료제의 투여와 관련된 문제가 되는 부작용을 감소시키는 혈액학적 신생물의 치료를 위한 근본적으로 새로운 활성 치료제를 제공한다. 특히, 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물의 투여와 관련된 독성 부작용은, 혈액학적 신생물이 이의 감소된 투약량에 의해 치료될 때에 감소될 수 있다.

따라서 본 발명은 치료방법에 관한 것이되, HAS는 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 치료적 활성 화합물을 특징으로 하는 제2 의약의 투여 전에 또는 후에 투여될 수 있는 제1 의약으로서 또는 단독 의약으로서 혈액학적 신생물의 치료를 위해 투여된다.

예상치 못하게, 혈액학적 신생물로부터의 암세포가 피하로 접종된 그리고 그에 따라서 종양을 형성한 포유류에 대한 HAS의 투여는 그들의 증상을 완화시키고 상당한 종양 성장 감소를 야기한 반면, 그들의 건강상태 또는 체중에 유해하게 영향을 미치지 않은 것을 발견하였다.

유리하게는, 상기 하이드록시알킬 전분을 포함하는 하이드록시알킬 전분 또는 약제학적 조성물은 독성이 없으며, 정맥내로 주어질 때 임의의 부작용을 거의 촉발시키지 않는데, 이는 세포독성제에 비해 큰 이점을 가진다. 따라서, 통상적인 세포독성제의 최대 투약량은 그의 독성 부작용에 의해 심각하게 제한되며, 환자는 1일 기준(잠재적으로 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물에 의한 표준 진료 지침 치료에 추가로)으로 하이드록시에틸 전분의 반복된 용량 또는 연속적 주입을 받을 수 있다.

바람직하게는 기재된 바와 같은 치료방법은 화합물 단독에 의한 임상 실행에 비해 제2 화합물의 용량을 감소시키는 반면(표준 진료 지침 치료에서와 같음), 치료 효능을 보존한다.

대상체에 투여되는 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 MW가 20kDa 초과, 바람직하게는 40kDa 초과, 및 훨씬 더 바람직하게는 MW가 65kDa 초과인 것이 바람직하다. 바람직하게는 MW는 또한 1300kDa보다 크지 않다. 더 바람직하게는 MW는 75 내지 1200kDa의 범위, 더 바람직하게는 90 내지 800kDa의 범위에 있다.

일 실시형태에서, 본 발명에 따른 하이드록시알킬 전분(HAS)은 HAS의 몰 치환도 MS가 0.1 내지 1.5의 범위에 있다. 바람직한 실시형태는 0.15 내지 1.5, 0.2 내지 1.5, 0.3 내지 1.5, 0.4 내지 1.5, 0.5 내지 1.5, 0.6 내지 1.5, 0.7 내지 1.5, 0.75 내지 1.5의 몰 치환 값의 특정 범위, 더 바람직하게는 0.1 내지 1.3, 0.1 내지 1.0, 0.1 내지 0.8, 0.1 내지 0.6, 및 0.1 내지 0.5의 범위에서, 그리고 또한 바람직하게는 0.90 내지 1.4, 예컨대 0.90, 0.95, 1.0, 1.05, 1.1, 1.15, 1.2, 1.25, 1.3, 1.35 또는 1.4의 범위에서 포함한다. 특히 바람직한 범위는 0.1 내지 1.0, 더 바람직하게는 0.1 내지 0.6, 더 바람직하게는 0.25 내지 0.55이다.

특히 바람직한 실시형태에 따르면, 하이드록시알킬 전분 유도체는 평균 분자량 MW가 80 내지 1200kDa의 범위에 있고, MS는 0.1 내지 1.5의 범위에 있다. 바람직한 실시형태는 0.15 내지 1.45, 0.3 내지 1.45, 0.45 내지 1.45, 0.6 내지 1.45, 0.7 내지 1.45, 0.75 내지 1.45의 몰 치환 값의 특정 범위, 더 바람직하게는 0.1 내지 0.5의 범위에서, 그리고 바람직하게는 0.90 내지 1.4, 예컨대 0.90, 0.95, 1.0, 1.05, 1.1, 1.15, 1.2, 1.25, 1.3, 1.35 또는 1.4의 범위에서, 더 바람직하게는 0.1 내지 1.30, 또는 0.1 내지 0.5의 범위에서 몰 치환 MS를 포함한다.

특히 바람직한 실시형태에서, 하이드록시알킬 전분 유도체는 평균 분자량 MW가 30 내지 700kDa의 범위에 있고, 몰 치환은 0.1 내지 0.7의 범위에 있으며; 더 바람직하게는 평균 분자량 MW가 80 내지 700kDa의 범위에 있고, MS는 0.1 내지 0.7의 범위에 있다.

일 실시형태에서, HAS의 C2/C6 비는 0.5 내지 20의 범위에 있으며, 더 바람직하게는 2 내지 20, 18, 2 내지 17, 2 내지 14, 2 내지 12, 2 내지 10, 2 내지 8, 2 내지 6, 2 내지 5, 또는 2 내지 4의 범위에 있다. 다른 바람직한 실시형태에서, 상기 C2/C6 치환은 4 내지 12, 6 내지 12, 7 내지 12의 범위에 있거나, 또는 바람직하게는 7 내지 10의 범위에 있거나, 더 바람직하게는 8 내지 9의 범위에 있다. 다른 바람직한 실시형태에서, 상기 C2/C6 치환은 4 내지 6의 범위에 있고, 더 바람직하게는 5.7이다.

바람직한 실시형태에서, 다분산 지수 PDI는 1.1 내지 4.0의 범위에 있으며, 더 바람직하게는 1.1 내지 3.5, 1.1 내지 3, 1.1 내지 2.5, 1.1 내지 2, 1.1 내지 1.5, 1.1 내지 1.4, 1.1 내지 1.3 및 1.1 내지 1.2의 범위에 있다. 다른 바람직한 실시형태에서, PDI는 1.2 내지 4, 1.35 내지 4, 1.5 내지 4, 1.7 내지 4, 1.8 내지 4, 1.9 내지 4, 2 내지 4, 2.5 내지 4 또는 2 내지 4, 또는 1.4 내지 3.0의 범위에 있다.

모든 이들 범위는 주어진 정확한 수와 그의 수치적 값의 약 1/10만큼 상이한 값을 포함하는 것으로 고려된다.

바람직하게는, 본 발명에 따른 하이드록시알킬 전분, 특히 상기 기재한 바와 같은 하이드록시에틸 전분은 평균 분자량 MW(중량 평균)이 신장 역치(renal threshold) 초과이다.

다른 바람직한 실시형태에서, 본 발명에 따른 하이드록시알킬 전분, 특히 상기 기재한 바와 같은 하이드록시에틸 전분은 평균 분자량 MW(중량 평균)가 신장 역치 미만이다.

신장 역치는 와이트징거(Waitzinger) 등의 문헌[Clin. Drug Invest. 1998; 16: 151-160]에 의해 기재되고, 융하인리히(Jungheinrich) 등의 문헌[Clin. Pharmacokinet. 2006; 44(7): 681-699)]에 의해 검토된 방법에 따라 결정된다. 바람직하게는, 신장 역치는 40kDa, 또는 45kDa 또는 60kDa 또는 65kDa 이상의 평균 분자량 MW를 나타낸다.

다음에서, 하이드록시알킬 전분 구조는 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물과의 병용요법에서 사용되는 기재된 부류의 HAS의 몇몇 상이한 바람직한 실시형태를 포함하여, 더욱 상세하게 기재된다.

일 바람직한 실시형태에서, 하이드록시알킬화된 전분은 명칭 "HES 130/0.4" 하에 공지된 하이드록시에틸화된 전분이다. 명칭 "HES 130/0.4"에도 불구하고, 이는 유럽약전 7.0(01/2011:1785, p.984)에서 기재된 표준 측정 및 교정 방법에 따르면 평균 분자량이 105kDa이고, 몰 치환도가 0.38 내지 0.45(평균 몰 치환도는 0.42임)인 하이드록시에틸 전분이다. 그의 C2/C6 비는 8.0 내지 12.0이다. 그의 PDI는 약 2, 즉, 1.7 내지 2.3이다. 이는 등록 상표명 볼루벤(Voluven)(등록상표) 하에서, 예를 들어 0.9% NaCl 용액 중의 10% 용액으로서 상업적으로 입수가능하다. "HES 130/0.4"의 공개된 명세서 및 HES 105/0.4에 대한 보정 명세서의 MW 130 값 사이의 차이는 HAS의 Mw를 결정하기 위해 사용한 교정 방법에서의 변화로부터 생긴다. 반면에 이전의 결정은 좀머마이어(Sommermeyer) 등의 문헌[Krankenhauspharmazie, 8, 1987, 08, p. 271-278]에 따라 수행하였고, 보정값(Mw 105)은 유럽약전 7.0(01/2011:1785, p.984)에 기재된 바와 같은 교정에 따라 결정되었다. 방법 간의 차이는 광산란 값 dn/dc이되, 좀머마이어 방법에서, dn/dc 값 0.135가 사용되고, 이 값은 "약전 방법"에서 0.147+/-0.001로 변화된다.

본 발명에 따른 다른 바람직한 실시형태에서, HAS는 "HES 100/1.0/1.3"으로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 소머마이어 등에 따라 결정한 평균 분자량이 100kDa이고, 유럽약전 7.0(01/2011:1785, p.984)에 따라 결정한 평균 분자량이 약 84kDa(75 내지 93kDa)이며, 몰 치환도가 1.0±0.05인 하이드록시에틸이다. 그의 C2/C6 비는 5.0 내지 6.0 또는 바람직하게는 5.7이고, PDI는 1.3±0.1이다.

종종 삽입 어구로 표시되는 명칭, 예컨대 "HES 200/0.5"는 오래된 측정을 지칭하지만, 본 명세서에서 유럽 약전(상기 인용한 것)에 따라 측정된다면 Mw 값이 생성될 것임을 설명한다. 적용(명칭의 부분이 아님)에서 Mw 값은, 달리 구체적으로 언급되지 않는 한, 유럽약전 7.0(01/2011:1785, p.984)에 따라 0.147 내지 0.149의 dn/dc 값을 이용하여 유럽약전에서 정해지는 교정 방법에 의해 결정된 것을 지칭한다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물의 치료를 위해 "HES 70/0.4/1.8"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 70kDa이고, 몰치환도가 0.4이며, PDI가 1.8인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 70/0.5"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 70kDa이고, 몰치환도가 0.5인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 하이드록시에틸화된 전분 HES 100/0.1/2.0이다. 이는 평균 분자량이 100kDa이고, 몰치환도가 0.1이며, PDI가 2.0인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 100/0.1/2.0"으로서 지칭되는 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 130kDa이고, 몰치환도가 0.1이며, PDI가 2.0인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 100/0.7/1.3"으로서 지칭되는 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 100kDa이고, 몰치환도가 0.7이며, PDI가 1.3인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 100/1.0/1.1"로서 지칭되는 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 100kDa이고, 몰치환도가 1.0이며, PDI가 1.1인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 150/0.7/1.3"으로서 지칭되는 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 150kDa이고, 몰치환도가 0.7이며, PDI가 1.3인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 150/1.0/1.3"으로서 지칭되는 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 150kDa이고, 몰치환도가 1.0이며, PDI가 1.3인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 평균 분자량 Mw가 150 내지 300kDa이고, 몰 치환도가 MS 0.40 내지 0.50이며, 추가로 가장 낮은 10% 분획의 Mw가 25kDa 이상이고, 가장 높은 10% 분획의 Mw가 2000kDa 이하인 것을 특징으로 하는 "비아스타치(Viastarch)"로서 공지되어 있고, 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 180/0.45"으로서 또한 지칭될 수 있는 하이드록시에틸화된 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 200/0.5"으로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 200kDa이며, 추가로 Mw가 170 내지 290이고, 몰 치환도가 0.43 내지 0.55인 것을 특징으로 하는 하이드록시에틸 전분이다. 이 HES는 추가로 가장 낮은 10% 분획의 Mw가 15kDa 초과이고, 가장 높은 10% 분획의 Mw가 600kDa 미만인 것을 특징으로 할 수 있다.

다른 실시형태는 평균 분자량: Mw가 200 내지 300kDa이고, MS 0.40 내지 0.50이며; 추가로 가장 낮은 10% 분획의 Mw가 15kDa 이상이고, 가장 높은 10% 분획의 Mw가 1500kDa 이하인 것을 특징으로 하는, 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 250/0.45"로서 지칭될 수 있는, "펜타스타치(Pentastarch)"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 300/1.0/1.3"으로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 250+/-17kDa(또는 좀머마이어(Sommermeyer) 등에 따른 300kDa)이고, 몰 치환도가 1.0+/-0.05이며, PDI는 1.3+/-0.1인 하이드록시에틸화된 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 WO 00/48637호에 기재된 바와 같이 평균 분자량이 300kDa이고, 치환도가 0.4 미만인 하이드록시에틸화된 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 450/0.7"로서 알려 진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 450kDa(Mw 400 내지 500kDa)이고, 가장 낮은 10% 분획의 Mw가 25kDa 이상이고, 가장 높은 10% 분획의 Mw가 3000kDa 이하이며; 몰 치환도가 0.7(MS 0.65 내지 0.75)인 것으로 구체화될 수 있다.

다른 실시형태는 평균 분자량이 좀머마이어 등 하에서 지칭된 방법에 따라 500kDa이고 몰 치환도가 0.28이며, 혈액학적 신생물 치료용으로 미국 특허 제5,502,043호(발명의 명칭: "Use of hydroxyethyl starch for improvement of microcirculation", 웨이들러(Weidler) 등) 실시예 3에 기재되고 이에 따른 C2/C6 비가 8.7인 하이드록시에틸화된 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용으로 유럽 특허 제1732953B호(제1항)에 따르고 기재된 평균 분자량이 500kDa이고, 몰 치환도 MS가 0.25 내지 0.5 이며, C2/C6 비가 2 내지 8 미만인 하이드록시에틸화된 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용으로 프레세니우스 아게(Fresenius AG)에 의해 유럽 특허 제0402724B호에 따르고 기재된 평균 분자량이 600kDa이고, 몰 치환도가 0.5인 하이드록시에틸화된 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용으로 "HES 700/0.5/2.5"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 600+/-40kDa(또는 좀머마이어 등에 따라 700kDa)이고 몰 치환도가 0.5+/-0.05이며, PDI는 2.5인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 평균 분자량: Mw 550--800kDa, MS 0.70--0.80이고, 가장 낮은 10% 분획의 Mw는 13kDa 이상이고, 가장 높은 10% 분획의 Mw는 4000kDa 이하인 "헤타스타치(Hetastarch)"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이며; 이는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 700/0.7"로서 기재될 수 있다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 700/0.7/2.0"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량 600+/-40kDa(또는 좀머마이어 등에 따라 700kDa)이고, 몰 치환도가 0.7+/-0.05이며 PDI는 2.0인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 700/1.0/1.5"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 600+/-40kDa(또는 좀머마이어 등에 따라 700kDa)이고, 몰 치환도가 1.0+/-0.05이며 PDI는 1.5인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 700/1.3/1.5"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 600+/-40kDa(또는 좀머마이어 등에 따라 700kDa)이고, 몰 치환도가 1.3+/-0.05이며 PDI는 1.6+/-0.1인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 "HES 60/1.3/1.3"로서 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다. 이는 평균 분자량이 50+/-5kDa (또는 좀머마이어 등에 따라 60kDa)이고, 몰 치환도가 1.3+/-0.05이며 PDI는 1.3+/-0.1인 하이드록시에틸 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 미국 특허 제6,680,305호에 기재된 바와 같은 평균 분자량 Mw가 1000kDa이고, 치환도 Ds는 4 내지 10인 하이드록시에틸화된 전분이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 평균 분자량 Mw가 60 내지 80kDa인 "HES 70000"로서 알려지고 "HES 70/0.55"로서도 지칭되는 하이드록시에틸화된 전분이다. 바람직하게는 이는 MS가 0.55 내지 0.61이다. 바람직하게는 이는 PDI가 2.3 +/-0.1이다.

다른 실시형태는 혈액학적 신생물 치료용의 문헌[A.N.Belder and B.Norman in Carbohydrate Research, Vol 10, 1969, p. 391-394]에 따르고 기재된 바와 같이 평균 분자량 Mw가 70kDa이고 C2/C6 비는 2 내지 8인 알려진 하이드록시에틸화된 전분이다.

치료를 위한 상이한 화합물이 실시형태로서 기재되었지만, 이들 화합물은 또한 이러한 치료에서의 사용에 대해 개시된다는 것이 이해된다. 추가로, 이러한 치료가 필요한 대상체에게 치료적 유효량으로 본 명세서에 기재된 바와 같은 이러한 화합물의 투여를 포함하는 혈액학적 신생물을 치료하는 방법이 또한 개시된다.

바람직한 실시형태에서 HAS의 치료적 활성은 암세포의 증식 활성에 대해 저해 효과를 야기하되, HAS는 혈액학적 신생물 세포의 증식 속도를 감소시킨다. 이는 HES-치료 마우스와 비치료 마우스의 종양 조직을 비교할 때 이루어진 관찰에 기반한다.

본 발명의 실시형태에서, HAS는 암세포 또는 생리학적 제어 없이 증식하는 세포의 증식 속도를 감소 또는 저해시키거나 또는 유사분열 주기를 저지하는데 치료적으로 활성이되, 암은 혈액학적 신생물이다.

본 발명의 다른 실시형태에서, HAS는 유사분열 주기에서 암세포를 저지함으로써 암세포 증식 속도를 감소시키는데 치료적으로 활성이되, 암은 혈액학적 신생물이다.

HAS 용액은 백혈병 암세포의 피하 적용에 의해 야기되는 종양의 성장 속도에 대해 직접적 효과를 갖는 것으로 나타날 수 있었지만, 반면에 HAS 용액에 의한 치료는 건강한 세포에서 정상적으로 증식하는 세포에 영향을 미치지 않는 것으로 추정될 수 있다.

본 발명에 따른 바람직한 실시형태에서, 암은 혈액, 골수 및 림프계로부터, 바람직하게는 혈액학적 신생물로부터 유래된 암의 그룹으로부터 선택된다. 바람직하게는 군은 표 1에 열거된 바와 같은 모든 해당 조혈 및 림프성 암으로 이루어진다.

혈액학적 신생물은 백혈병 및 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다.

림프계의 혈액학적 신생물은 림프종의 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다. 추가로 림프종의 군은 뇌 및/또는 척수의 원발성 CNS 림프종을 포함하지 않는 것이 바람직하다. 추가로 림프종의 군은 원발성 CNS 림프종을 포함하지 않는 것이 바람직하다.

림프종의 군은 바람직하게는 성숙 B 세포 신생물 및 성숙 T-세포 및 NK-세포 신생물 및 조직구 및 수지상 세포 신생물 유형의 림프종;뿐만 아니라 호지킨 림프종으로 이루어진다. 일부 림프종은 상이한 명칭으로 알려져 있으며, 예를 들어 B 성숙 세포 신생물 유형은 비호지킨 림프종으로서 또한 지칭될 수 있다. 예를 들어, 카흘러병(Morbus Kahler)으로서 또는 형질세포 골수종으로서도 알려진 다발성 골수종은 비호지킨 림프종일뿐 아니라 성숙 B 세포 신생물이다.

특히 혈액학적 신생물은 성숙 B 세포 신생물의 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다.

혈액학적 신생물은 소림프구 림프종, 지라의 가장자리 구역 림프종, 비장 림프종, 림포형질세포 림프종, 점막 연관 림프성 조직의 결절외 변연부 림프종, 결절성 변연부 림프종, 여포성 림프종, 일차 피부 여포 중심 림프종, 맨틀세포 림프종, 중쇄병s, 뼈의 고립성 형질세포종, 뼈외적인 형질세포종, 미만성 거대 B-세포 림프종, 일차 종격(흉선) 거대 B-세포 림프종, 정맥내 거대 B-세포 림프종, ALK-양성 거대 B-세포 림프종, 형질아세포 림프종, HHV8-관련 다중심적 캐슬맨 질병 원발성 삼출성 림프종에서 생기는 거대 B-세포 림프종, 원발성 삼출성 림프종, 버킷 림프종, 미만성 거대 B-세포 림프종과 버킷 림프종 사이의 중간체를 특징으로 하는 분류할 수 없는 B-세포 림프종 및 미만성 거대 B-세포 림프종과 고전적 호지킨 림프종 사이의 중간체를 특징으로 하는 분류할 수 없는 B-세포 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 특히 바람직하다.

혈액학적 신생물은 성숙 T-세포 및 K-세포 신생물의 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 특히 바람직하다.

혈액학적 신생물은 아동의 전신 EBV-양성 T-세포 림프증식성 질환, 종두상 수포증-유사 림프종, 성인 T-세포 백혈병/림프종, 결절외 NK/T-세포 림프종, 비강 유형 장질환 연관 T-세포 림프종, 간비장 T-세포 림프종, 피하 지방층양 T-세포 림프종, 균상 식육종, 탈락홍색피부증, 일차 피부 CD30+ T-세포 림프증식성 장애, 일차 피부 역형성 거대세포 림프종, 일차 피부 γδ T-세포 림프종, 일차 피부 CD8+ 공격적 상피세포 친화성 세포독성 T-세포 림프종, 일차 피부 CD4+ 소/중 T-세포 림프종, 말초 T-세포 림프종, NOS; 혈관면역아세포성 T-세포 림프종, 역형성 거대세포 림프종 - ALK-양성 및 역형성 거대세포 림프종 - ALK-음성으로부터 선택되는 것이 특히 바람직하다.

다른 바람직한 실시형태에서, 림프종은 호지킨 림프종이다. 바람직하게는 호지킨 림프종은 결절성 림프구 우세 호지킨 림프종, 고전적 호지킨 림프종, 결절성 경화증 고전적 호지킨 림프종, 림프구-풍부 고전적 호지킨 림프종, 혼합 세포형 고전적 호지킨 림프종 및 림프구-고갈 고전적 호지킨 림프종으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

바람직한 실시형태에서, 혈액학적 신생물은 조직구 및 수지상 세포 신생물이다. 바람직하게는 이는 조직구 육종, 랑게르한스 세포 조직구증, 랑게르한스 세포 육종, 지상감입 수지상 세포 육종, 여포성 수지상 세포 육종, 섬유아세포 망상세포 종양, 중간 수지상 세포 종양 및 파종성 소아 황색육아종으로 이루어진 군으로부터 선택된다.

다른 바람직한 실시형태에서, 혈액학적 신생물은 표 1에 따른 이식후 림프증식성 장애(PTLD)이다.

바람직하게는 혈액학적 신생물은 비호지킨 림프종이다.

바람직한 실시형태에서, 혈액학적 신생물, 바람직하게는 림프계의 혈액학적 신생물은 그들이 아직 종양을 형성하지 않은 단계이다. 림프종은 그들이 종양을 형성하기 전이 치료되는 것이 바람직하다.

추가로 혈액학적 신생물은 종양을 형성하지 않는 혈액학적 신생물의 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다.

혈액학적 신생물은 백혈병의 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다. 백혈병의 군은 아세포성 백혈병을 포함하지 않는 것이 바람직하다.

임상적으로 그리고 병리학적으로, 백혈병은 다양한 거대 군으로 더욱 분할된다. 제1 분할은 그의 급성과 만성 형태 사이이다. 추가적으로, 질환은 영향 받는 혈액 세포의 종류에 따라 더욱 분할된다. 이 분할은 백혈병을 림프구성 또는 림프성 백혈병 및 골수성 또는 골수성 백혈병으로 분할한다.

림프구성 또는 림프성 백혈병에서, 암성 변화는 감염과 싸우는 면역 세포인 림프구를 정상적으로 계속해서 형성하는 골수 유형에서 생긴다. 대부분의 림프성 백혈병은 림프구의 구체적 하위 유형인 B 세포를 수반한다. 골수성 또는 골수성 백혈병에서, 암성 변화는 백혈구, 일부 다른 유형의 백혈구 및 혈소판을 정상적으로 계속해서 형성하는 골수 세포 유형에서 생긴다.

바람직하게는 혈액학적 신생물은 골수증식성 신생물, 호산구 증가증을 지니는 골수성 및 림프성 신생물 및 PDGFRA, PDGFRB 또는 FGFR1의 이상, 골수형성이상/골수증식성, 골수형성이상 증후군, 급성 골수성 백혈병(AML) 및 관련된 전구체 신생물, 계열모호의 급성 백혈병 및 전구체 림프성 신생물의 군을 포함하며, 모두 표 1에 따른다.

바람직하게는 혈액학적 신생물은 급성 골수성 백혈병, 급성 림프구성 백혈병, 만성 골수성 백혈병 및 만성 림프구성 백혈병의 군으로부터 선택된다.

바람직하게는 혈액학적 신생물은 급성 백혈병, 더 바람직하게는 혈액 세포의 골수성 계열의 암이며, 골수 내에서 축적되고 정상 혈액 세포의 생산을 방해하는 비정상 백혈구의 빠른 성장을 특징으로 하는 급성 골수성 백혈병 또는 급성 비림프성 백혈병(ANLL)으로서도 알려진 급성 골수성 백혈병(AML)이다. WHO에 따르면, 재발성 유전자 이상을 지니는 급성 골수성 백혈병은 염색체 8과 21 사이에 전좌를 지니는 AML, 염색체 16에서 역위를 지니는 AML, 염색체 15와 17 사이에 전좌를 지니는 APL, 염색체 9와 11에서 전좌를 지니는 AML을 포함한다. 다계열 이형성증을 지니는 AML은 AML로 전환되는 사전 골수형성이상 증후군(MDS) 또는 골수증식성 질환(MPD)을 갖는 환자를 포함한다. 이 범주의 AML은 노인 환자에서 가장 자주 생기며, 종종 나쁜 예후를 가진다. 치료와 관련된 AML 및 MDS는 사전 화학요법 및/또는 방사선을 받고, 이후에 AML 또는 MDS가 발생한 환자를 포함한다. 이들 백혈병은 특이적 염색체 이상을 특징으로 하며, 종종 나쁜 예후를 옮길 수 있다. 달리 범주화되지 않은 AML은 상기 범주에 속하지 않는 AML의 하위유형을 포함한다.

바람직하게는 백혈병의 군은 또한 백혈병 세포가 골수성 또는 림프성 세포로 분류될 수 었을 때, 또는 두 유형의 세포가 모두 존재하는 경우에 생기는 계열모호의 급성 백혈병(또한 혼합 표현형 또는 이중표현형 급성 백혈병으로서 알려짐)을 포함하거나 또는 가장 바람직하게는 이루어진다.

바람직하게는 백혈병의 군은 또한 성숙 B-세포 신생물의 백혈병을 포함하거나 또는 가장 바람직하게는 이루어진다. 바람직하게는 혈액학적 신생물은 따라서 림프성 백혈병, 만성 림프성 백혈병 B-세포 전림프성 백혈병, 모발세포 백혈병, 비장 백혈병, T-세포 전림프성 백혈병, T-세포 거대 과립 림프성 백혈병, 공격적 NK-세포 백혈병 및 성인 T-세포 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택된다. 바람직하게는 백혈병의 군은 또한 NK 세포의 만성 림프증식성 장애를 포함한다.

또한 혈액학적 신생물은 성숙 T-세포 및 K-세포 신생물 유형의 백혈병으로 이루어진 군으로부터 선택되는 것이 바람직하다. 바람직하게는 백혈병의 군은 또한 T-세포 전림프성 백혈병, T-세포 거대 과립 림프성 백혈병, NK 세포 및 공격적 NK-세포 백혈병의 만성 림프증식성 장애를 포함하거나 또는 가장 바람직하게는 이루어진다.

본 발명의 다른 바람직한 실시형태는 혈액학적 신생물의 치료를 위한 의약의 제조를 위한 하이드록시알킬 전분, 또는 본 발명에 따른 약제학적 조성물의 용도에 관한 것이되, 하이드록시알킬 전분은 바람직하게는 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 화합물을 함유하는 약제학적 조성물의 투여 전에 또는 후에 대상체에게 투여되는 치료적 활성 성분이되, 하이드록시알킬 전분은 동일한 치료일 내에, 동일 시간 내에 또는 며칠 또는 몇주까지 그 사이에 치료 휴식을 두고 투여될 수 있다.

본 발명에 따른 치료 방법은 모든 혈액학적 신생물에, 바람직하게는 본 명세서에 언급된 모든 백혈병 암 유형에 대해 표적화될 수 있으며, 투여되는 HAS는 모든 유형의 HAS 및 바람직하게는 본 명세서에 개시된 HES를 포함할 수 있다.

다음의 특히 바람직한 실시형태는 또한 본 발명에 포함된다:

1. 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 치료적 활성 화합물로서의 하이드록시알킬 전분(HAS).

2. 치료적 유효량이 상기 대상체에게 투여되는, 실시형태 1에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

3. 상기 혈액학적 신생물이 백혈병 및 림프종의 군으로부터 선택되는, 실시형태 1 또는 실시형태 2에 따른 하이드록시알킬 전분.

4. 상기 혈액학적 신생물이 백혈병 및 림프종의 군으로부터 선택되되, 이 군은 원발성 CNS 림프종을 포함하지 않는, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따른 하이드록시알킬 전분.

5. 상기 치료가 HAS의 투여, 또는 HAS를 포함하는 약제학적 조성물의 투여를 포함하되, 상기 투여는 감소된 종양 성장속도, 감소된 암세포성장 속도, 감소된 증식 활성, 감소된 암세포 수 또는 전이의 예방 중 적어도 하나를 포함하는, 실시형태 1 내지 실시형태 4 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

6. 상기 치료가 종양 성장속도를 감소시키는 것, 고도로 증식성인 세포 수를 감소시키는 것, 암세포 수를 감소시키는 것, 암세포분할 빈도를 감소시키는 것, 암세포성장속도를 감소시키는 것 및 종양 형성을 방지하는 것 중 적어도 하나를 포함하는, 실시형태 1 내지 실시형태 4 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

7. 상기 치료가 말초 기관 내로의 암세포 침윤을 저해하는 것 및 암세포의 퍼짐을 방지하는 것을 포함하는, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

8. 상기 치료는 혈액학적 신생물 세포가 증식하는 것을 저해하는 것을 포함하는 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

9. 상기 치료는 혈액핵적 신생물 세포가 증식하는 것을 저해하는 한편, 정상적으로 성장하는 세포에 영향을 미치지 않는 것을 포함하는, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

10. HAS가 하나 이상의 제2 화합물의 투여 전에 또는 투여 후에 투여되는, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

11. HAS의 투여 없이 치료에서 주어진 용량에 비해 하나 이상의 제2 화합물의 용량 감소가 달성되는, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

12. 상기 하나 이상의 제2 화합물이 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 용도를 위한, 실시형태 10 및 11에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

13. 상기 하나 이상의 제2 화합물이 세포증식억제제 및 항암 활성을 지니는 생물학적 제제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 실시형태 10 및 11에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

14. 상기 하나 이상의 제2 화합물이 세포증식억제제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 실시형태 10 및 11에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

15. 상기 세포증식억제제의 군이 알킬화제, 알킬 설포네이트, 대사길항물질, 항종양 항생제, 토포아이소머라제 저해제, 소분자 타이로신 키나제 저해제, 유사분열 저해제 분화제, 프로테아좀 저해제 및 플레릭사포르를 포함하거나 또는 바람직하게는 이루어진, 실시형태 10 내지 실시형태 14 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

16. 상기 항암 활성을 지니는 생물학적 제제의 군이 항암 활성을 지니는 생물학적 제제의 군은 항체 타이로신 키나제 저해제, 단클론성 항체 및 면역조절 단백질을 포함하거나 또는 바람직하게는 이루어진, 실시형태 10 내지 실시형태 13 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

17. 상기 하이드록시알킬 전분이 하기 화학식 I에 따른 적어도 하나의 구조 단위를 포함하는, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS):

[화학식 I]

식 중, R^a, R^b 및 R^c는 서로 독립적으로 -O-HAS", -[0-(CR^wR^x)-(CR^yR^z)]_x-OH, -[0-(CR^wR^x)-(CR^yR^z)]_y-XH로 이루어진 군으로부터 선택되고,

R^w, R^x, R^y 및 R^z는 서로 독립적으로 수소 및 알킬로 이루어진 군으로부터 선택되며,

y는 0 내지 20 범위, 바람직하게는 0 내지 4 범위의 정수이고,

x는 0 내지 20 범위, 바람직하게는 0 내지 4 범위의 정수이며,

R^a, R^b 및 R^c 중 적어도 하나는 -[0-(CR^wR^x)-(CR^yR^z)]_y-XH이고, 그리고

X는 -S- 및 -O-로 이루어진 군으로부터 선택된다.

18. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 20 내지 1300kDa인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

19. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 40 내지 1300kDa인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

20. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 65 내지 1300kDa인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

21. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 70 내지 1200kDa인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

22. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 75 내지 800kDa인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

23. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 90 내지 800kDa인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

24. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 100 내지 700kDa인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

25. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 100 내지 110kDa인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

26. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 신장 역치를 초과하는, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

27. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량 Mw가 신장 역치 미만인, 실시형태 1 내지 실시형태 19 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

28. 상기 하이드록시알킬 전분은 몰치환 MS가 0.1 내지 1.5인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

29. 상기 하이드록시알킬 전분은 몰치환 MS가 0.1 내지 1.3인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

30. 상기 하이드록시알킬 전분은 몰치환 MS가 0.1 내지 1.1인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

31. 상기 하이드록시알킬 전분은 몰치환 MS가 0.1 내지 0.9인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

32. 상기 하이드록시알킬 전분은 몰치환 MS가 0.3 내지 0.8인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

33. 상기 하이드록시알킬 전분은 몰치환 MS가 0.3 내지 0.7인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

34. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량이 80 내지 230kDa이고, 몰 치환 MS는 0.3 내지 0.6인, 실시형태 21에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

35. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량이 100 내지 110kDa이고, 몰 치환 MS는 0.3 내지 0.5인, 실시형태 33에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

36. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량이 150 내지 200kDa이고, 몰 치환 MS는 0.4 내지 0.5인, 실시형태 21에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

37. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량이 105이고, 몰 치환 MS는 0.42인, 실시형태 33에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

38. 상기 하이드록시알킬 전분은 평균 분자량이 400 내지 700kDa이고, 몰 치환 MS는 0.6 내지 0.8인, 실시형태 23에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

39. 상기 하이드록시알킬 전분이 하이드록시에틸 전분인, 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따라 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).

40. 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따른 혈액학적 신생물의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS)을 포함하는 약제학적 조성물로서, 상기 HAS는 암을 치료하는데 치료적 활성을 지니는 유일한 성분인, 약제학적 조성물.

41. 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체에게 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는 하나 이상의 제2 화합물을 투여하기 전에 또는 투여한 후에 치료적 유효량의 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따른 하이드록시알킬 전분을 투여하여, 바람직하게는 암세포의 증식 속도를 감소시키는 한편, 바람직하게는 정상 세포의 증식 속도를 감소시키지 않고 암 진행을 저해하는 단계를 포함하는 치료방법.

42. 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료방법으로서, 치료는 혈액학적 신생물로 진단된 대상체에게 선행하는 실시형태 중 어느 하나에 따른 치료적 유효량의 HAS를 투여하는 단계를 포함하되,

상기 치료는 혈액학적 신생물 세포의 증식 속도를 감소시키는 것을 포함하고, 상기 대상체에게 제2의 치료적 활성 화합물이 투여된 적이 없는, 치료방법.

44. 상기 증식 속도를 감소시키는 것이 상기 유사분열 주기에서 상기 암세포를 저지하는 것을 포함하는, 실시형태 41 및 실시형태 42에 따른 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료방법.

도면의 설명:

도 1:

도 1은 실시예 1에서 관찰되는 바와 같이 EOL-1 종양 세포를 접종한 마우스의 시간에 따른 상대적 종양 용적의 발생을 도시한 도면. Y축에 대한 값은 중앙값 상대적 종양 용적(백분율)을 나타내고, X축은 치료 시작 후 시간(일수)을 나타낸다. 물질은 다음의 기호로 표시된다: 0.9% 등장 식염수(NaCl)를 1주 2회 정맥내로 마우스에 투여할 때 "▲"(검정색 상향 삼각형)을 사용하고, "대조군"으로서 표시하였다. 사이클로포스파마이드(75㎎/㎏, 제0일에 단일 용량)를 마우스에 복강내로 투여하였을 때 "■"(큰 검정색 정사각형)을 사용하고, "SOC"로 나타낸다. 볼루벤(등록상표) 10%를 마우스에 정맥내로 1주 2회 투여하였을 때 "◆"(검정색 다이아몬드)를 사용하고, "HES"로서 표시하였다.

도 2:

도 2는 실시예 1에서 관찰한 바와 같이 EOL-1 종양 세포를 접종한 마우스의 시간에 따른 체중의 변화를 나타낸다. Y축에 대한 값은 체중(그램) + 표준편차(sd)를 나타낸다. X축에 대한 값은 치료 시작 후 시간(일)을 나타낸다. 물질을 다음의 기호로 표시한다: 0.9% 등장 식염수(NaCl)를 1주 2회 정맥내로 마우스에 투여할 때 "▲"(검정색 상향 삼각형)을 사용하고, "대조군"으로서 표시하였다. 사이클로포스파마이드(75㎎/㎏, 제0일에 단일 용량)를 마우스에 복강내로 투여하였을 때 "■"(큰 검정색 정사각형)을 사용하고, "SOC"로 나타낸다. 볼루벤(등록상표) 10%를 마우스에 정맥내로 1주 2회 투여하였을 때 "◆"(검정색 다이아몬드)를 사용하고, "HES"로서 표시하였다.

도 3 내지 도 6에서, 상이한 혈액학적 신생물 세포에 대한 하이드록시에틸 전분의(표 7에서 특성규명한 바와 같은 "HES 130/0.4") 저해 효과를 나타낸다. Y축에 대한 값은 시험한 하이드록시알킬 전분 "HES 130/0.4"(9가지의 상이한 농도에서)에 의한 처리 후 프레스토블루(Prestoblue)(등록상표)의 사용에 기반한 생존도에 의해 결정한 살아있는 세포수(%)를 나타낸다. X축에 대한 값은 시험한 상이한 HES 농도(㎎/㎖)를 나타낸다.

도 3:

도 3에서, 주카트(JURKAT) 세포(ALL 세포)에 대한 하이드록시알킬 전분 HES 130/0.4의 저해 효과를 나타낸다.

도 4:

도 4에서, TF-1 세포(AML 세포)에 대한 하이드록시알킬 전분 HES 130/0.4의 저해 효과를 나타낸다.

도 5:

도 5에서, MEG-01 세포(CML 세포)에 대한 하이드록시알킬 전분 HES 130/0.4의 저해 효과를 나타낸다.

도 6:

도 6에서, K562 세포(CML 세포)에 대한 하이드록시알킬 전분 HES 130/0.4의 저해 효과를 나타낸다.

실시예

실시예 1:

이 실시예에서, 상기 상세하게 기재한 바와 같은 2000㎎/㎏ "HES 130/04"로 라벨링한 명칭 볼루벤(등록상표) 10% 하에서 상업적으로 입수가능한 HES 유형을 사용하였다.

요약: EOL-1 골수성 백혈병 세포주로부터의 종양을 보유하는 성체 수컷 NOD/SCID 마우스를 사이클로포스파마이드(엔독산(Endoxan)(등록상표))의 단일 i.p. 주사로 75㎎/㎏의 용량에서 또는 혈장 용적 증량제 볼루벤(등록상표) 10% i.v.에 의해 꼬리 정맥 내로(20 ㎖/㎏) 처리하여 실험 과정에 걸쳐 종양 성장 및 체중을 결정하였다.

물질: 사이클로포스파마이드(명칭 엔독산(등록상표) 하에 입수가능)를 박스터 옹콜로지 게엠베하(Baxter Oncology GmbH)(로트 2D714D; 독일 할레에 소재)로부터 얻고 나서, 사용할 때까지 2 내지 8℃에서 저장하였다. 볼루벤(등록상표) 10%(주사를 위해 0.9% 염화나트륨 중의 "하이드록시에틸 전분 130/0.4"로서 라벨링)를 프레세니우스 카비 오스트리아 게엠베하(Fresenius Kabi Austria GmbH)(로트 14FC3308; 오스트리아 린츠에 소재)로부터의 바로 사용가능한 제품으로서 얻고, 사용할 때까지 실온에서 저장하였다.

0.9% 식염수(로트 12495407, 비. 브라운 베트 케어 게엠베하(B. Braun Vet Care GmbH), 독일 투트링겐에 소재) 중에 적절한 양의 물질을 최종 용량 7.5 ㎎/㎖로 용해시킴으로써 주사 직전에 사이클로포스파마이드의 최종 용액을 준비하였다.

모든 용액을 준비하고 나서 멸균 조건 하에 주사하였다.

동물: 성체 수컷 NOD/SCID 마우스(타코닉 유럽(TACONIC Europe), 덴마크 릴 스켄스베드에 소재)를 연구에서 사용하였다. 실험의 시작 시, 그들은 6 내지 8주령이었고, 중앙값 체중은 20 내지 25g이었다.

모든 마우스를 엄격하게 제어되고 표준화된 장벽 조건 하에 유지시켰다. 그들을 다음의 환경적 조건: 22+/-1℃ 실온, 50+/-10% 상대습도, 12 시간-명암-리듬 하에 개개로 통기시킨 우리(마크롤론 타입-II(Macrolon Typ-II), 이탈리아에 소재한 시스템 테크니플라스트(system Techniplast))에 수용시켰다(최대 5마리/우리). 그들은 고압멸균시킨 사료와 잠자리(독일 소스트에 소재한 스니프(Ssniff)) 그리고 산성화시킨(pH 4.0) 음용수를 임의량으로 받았다.

종양이 감지할 수 있는 종양 크기에 도달될 후에 동물을 각각 5마리 마우스가 있는 실험군으로 계층화시켰다. 시험 시작시, 동물의 귀를 표시하고 나서, 각각의 우리를 우리 번호, 연구 번호 및 우리 당 동물수로 라벨링하였다.

종양 모델

인간 급성 골수성 백혈병 EOL-1 세포주를 면역결핍 수컷 NOD/SCID 마우스에서 s.c. 이종이식 모델로서 사용하였다. 인간 골수성 백혈병 세포주 EOL-1(ACC386)을 브라운슈바이크에 소재한 독일 생물 자원센터(Leibniz Institute DSMZ-Deutsche Sammlung von Mikroorganismen und Zellkulturen GmbH)로부터 얻었다. 세포를 37℃, 90% 습도 및 5% CO₂에서 T150 세포 배양 플라스크 내 1% L-글루타민 및 10% 소태아 혈청(FCS)으로 보충한 RPMI 1640에서 성장시켰다. EOL-1 세포를 인간 호산성 백혈병 세포주로부터 얻고, 정상 배양 조건 하에 골수아세포의 세포학적 특징을 나타내며, 다수의 자극 시 표현형적으로뿐만 아니라 기능적으로 호산구로 분화시킨다. EOL-1 세포는 백혈병 세포 분화 및 악성 호산구의 특성을 분석하는데 특히 유용하다.

연구 제10일에 100㎕ PBS 중의 1x10⁷개 종양 세포를 각각의 마우스의 좌측 옆구리에 s.c.로 이식하였다. 10일 후에, 종양은 평균크기가 0.1㎤로 감지할 수 있었고, 마우스를 개개 종양 용적에 기반하여 그룹 당 5 마리 마우스로 3그룹으로 계층화하여 비교가능한 평균 종양 용적 및 최소 표준 편차를 지니는 그룹을 얻었다. 같은 날에, 이하의 표 3에 따라 치료를 개시하였다. 이 모델에서, 사이클로포스파마이드가 기준 약물(SOC)이다:

개개 종양 용적(tumor volume: TV)을 1주 3회 캘리퍼 유사 기기를 이용하는 측정에 의해 얻은 2개의 수선 직경으로부터 계산하였다.

TV를 다음의 식에 따라 계산하였다: TV[㎤]=(폭² x 길이)/2. 상대 종양 용적(relative tumor volume: RTV)의 계산에 대해, 각각의 측정에서 종양 용적은 제1 치료일과 관련되었다. 각각의 측정일에, 그룹 당 중앙값 및 평균 종양 용적 및 또한 처리군 대 대조군(T/C) 값(%)을 계산하였다.

마우스의 개개 체중을 1주에 3회 결정하였고, 체중 변화는 독성 매개변수로서 작용한다. 치료 시작에 관하여 그룹 당 평균 체중 및 체중 변화(BWC)를 계산하였다.

종양이 한 방향으로 1.5㎝ 초과의 직경에 도달되었을 때 마우스를 희생시켰다. 해부 시, 모든 동물의 체중을 재고, 경추파열법에 의해 죽였다.

통계학적 평가

설명적 데이터 분석을 이용하여 종양 용적을 분석하고 나서, 중앙값을 그래프로 나타내었다.

결과

대조군(그룹 A)에서 모든 종양은 진행적 성장을 나타내었다. 75㎎/㎏의 사이클로포스파마이드에 의한 EOL-1 골수성 백혈병 보유 마우스의 단일 i.p. 치료는 종양 성장의 상당한 저해를 유도하였다. 볼루벤(등록상표) 10% i.v.의 1주 2회 투여는 보통의 저해 활성을 나타내었고, 이에 의해 백혈병 세포 성장에서 알킬화된 전분의 저해 가능성을 입증하였다(도 1 참조).

볼루벤(등록상표) 10%에 의한 치료는 체중 발생에 대해 효과가 없었고, 따라서 분명한 치료 관련 독성이 없었다.

실시예 2

이 연구의 목적은 상이한 백혈병 세포주의 세포 생존력에 대한 하이드록시에틸 전분("HES 130/0.4")의 잠재적 효과를 조사하는 것이다. 선별 이유를 위해 상이한 "HES 130/0.4" 농도로 인큐베이션 후에 상업적으로 입수가능한 "프레스토블루 형광 세포 생존도 분석"을 이용하여 28종의 상이한 백혈병 세포주에서 50% 저해 농도(IC50)를 결정하였다. 시험한 HES의 농도 변화는 100㎎/㎖ 내지 391 ng/㎖였다.

프레스토블루(PrestoBlue)(등록상표) 시약은 세포 증식을 정량적으로 측정하기 위해 살아있는 세포의 환원력을 이용함으로써 세포 생존도 지표로서 기능하는 레자주린계 용액이다. 프레스토블루(등록상표) 시약은 색상이 파란색이며 사실상 비형광성인 세포 삼투 화합물을 함유한다. 세포에 첨가될 때, 프레스토블루(등록상표) 시약은 살아있는 세포의 환원 환경에 의해 변형되며, 색이 적색으로 바뀌고, 고도로 형광성이 된다. 이 변화는 형광 또는 흡광 측정을 이용하여 검출될 수 있다(예를 들어, 문헌[Int J Microbiol. 2013; 2013: 420601]; 2013년 4월 4일 온라인 상에 공개됨 doi: 10.1155/2013/420601 PMCID PMC3638707).

각각의 세포주를 HES 또는 표준 화학요법 약물 시스플라틴을 상이한 농도에서 시험 항목과 함께 처리하였다. 시스플라틴은 양성 기준으로서 작용하였다. 물질 둘 다의 세포의 인큐베이션 시간은 72시간이었다.

모든 세포를 5% CO₂ 및 95% 습도 하에 37℃에서 10% FBS로 보충한 배지에서 배양시켰다. 배양 배지를 미국에 소재한 깁코(GIBCO) 또는 시그마(Sigma)로부터 구입하였다.

본 연구 실시예에서 사용한 약어
약어	전문 및 설명
ALL	급성 림프구성 백혈병
AML	급성 골수성 백혈병
CLL	만성 림프성 박혈병
CML	만성 골수성 백혈병
FBS	소태아 혈청
DMSO	다이메틸 설폭사이드
PBS	인산염 완충 식염수
USA	미국
ATCC	미국 균주 보존기관
DSMZ	독일 생물 자원센터
SIBS	상하이 생물과학 연구소
FU	형광 단위

시험 용액의 제조:

이 연구에서 사용한 "HES 130/0.4"는 프레세니우스 캬비 오스트리아 게엠베하(Fresenius Kabi Austria GmbH)에 의해 제공된 로트 번호 17123722로부터의 10g 샘플이었다. 사용하기 전에, 이를 주위 온도에 저장하였다. 이는 다음을 특징으로 하였다:

적합한 용기 내에서 중간의 시작량을 제공하고, 계산한 양의 HES를 교반하에 무혈청 배지에 조심스럽게 첨가하며(5 내지 20분 동안 취하여 맑은 용액을 얻음), 목적으로 하는 농도(20mg/㎖)로 조절하기 위해 최종적으로 남은 양의 배지를 첨가함으로써 각각의 세포 배지를 이용하여 200㎎/㎖(20%)의 저장액을 준비하기 위해 적절한 양을 용해시켰다. 이 저장 용액을 0.22㎛ 기공 크기 장치를 이용하여 여과시킴으로써 멸균시키고, 즉시 사용하였다. 용액을 사용 전에 새로 준비하였다. 모든 HES 및 기준 작업 용액을 새로 준비하였다.

이 연구에서 사용한 시스플라틴을 중국에 소재한 난징 지야오사(Nanjing Zhiyao)로부터의 로트 번호 212029CF(유효기일 2016년 7월)로부터 분말로서 구입하였다. 사용하기 전에 그것을 실온에 저장하였다. 그것의 분자량이 300,05 Da이 되는 것을 결정하였다.

2.0mM의 농도로 저장액을 생성하기 위해 시스플라틴을 PBS 중에 용해시켰다.

장비

인비전 멀티 라벨 판독기(EnVision Multi Label Reader) 2104-0010A, 퍼킨 엘머(Perkin Elmer)(미국), 장비 ID: BMRP004; 카운트스타(Countstar), 이노 얼라이언스 바이오테크(Inno-Alliance Biotech)(미국), 장비 ID: BANA011; 포마 시리즈 II 워터 자켓(Forma Series II Water Jacket) CO₂ 인큐베이터, 써모 사이언티픽(Thermo Scientific)(미국), 장비 ID: BINC040/BINC045/BINC046; 생물 안전 캐비닛, 써모 사이언티픽(미국), 장비 ID: BBSCO21/BBSCO22/BBSCO24/BBSCO25; 도립 현미경, 올림푸스(Olympus) CKX41SF(일본), 장비 ID: BMICO20.

절반의 최대 저해 농도 IC ₅₀ 의 결정

대수 성장 기간 동안 세포를 채취하고 나서, 상업적으로 입수가능한 세포 계수화 장치 카운트스타를 이용하여 계수화하였다. 세포 농도를 20% FBS를 함유하는 각각의 배양 배지를 이용하여 3.33x10⁴개 세포/㎖로 조절하였다. 60㎕ 세포 현탁액을 2개의 96웰 플레이트(A 및 B)에 첨가하였고, 최종 세포 밀도는 2x10³개 세포/웰이었다.

각각의 세포주의 성장속도를 시험함으로써 세포 품질을 모니터링하기 위한 다음날 T ₀ 판독의 수행.

T₀ 판독을 위해 플레이트의 각 웰에서, 60㎕ 무혈청 배양 배지를 첨가하였다. 플레이트를 37℃에서 5% CO₂와 함께 습윤화시킨 인큐베이터에서 밤새 인큐베이션시켰다. 플레이트를 실온에서 대략 30분 동안 평형상태로 만들었다. 이후에 라이프 테크놀로지즈사(Life Technologies)로부터 구입한 13㎕ 프레스토블루(등록상표) 시약(10x 용액)을 배양 배지 내 세포 상에 직접 제공하였다. 내용물을 회전 교반기 상에서 2분 동안 혼합하였다. 이어서, 형광(T₀)이 엔비전 멀티 라벨 판독기(EnVision Multi Label Reader)(여기: 540 내지 570㎚/방출: 580 내지 610㎚)를 이용하여 기록될 수 있을 때까지 플레이트를 실온에서 30분 동안 인큐베이션시켰다.

시험 판독 플레이트

플레이트를 37℃에서 5% CO₂와 함께 습윤화시킨 인큐베이터 내에서 밤새 인큐베이션시켰다. HES를 200㎎/㎖(20%)의 농도에서 FBS 없이 배양 배지에 용해시켜(상기 참조) 2x 용액을 형성하고 0.22㎛ 기공 크기 장치를 이용하여 여과시킴으로써 멸균시켰다. HES의 2x 용액을 배양 배지를 이용하여 희석시켜(2배) 9 용량 수준에 도달시켰다: 각각 10, 5, 2.5, 1.25, 0.63, 0.31, 0.16, 0.08, 0.04% 또는 100, 50, 25, 12.5, 6.25, 3.13, 1.56, 0.78, 0.39㎎/㎖.

"HES 130/0.4"의 60㎕(2x) 용액을 시험 플레이트의 각각의 웰(각각의 약물 농도에 대해 3회)에서 제공하였다.

시험 플레이트를 37℃에서 5% CO₂와 함께 습윤화시킨 인큐베이터에서 72시간 동안 인큐베이션시키고, 이어서, 프레스토블루 분석에 의해 측정하였다. 이후에 13㎕ 프레스토블루(등록상표) 시약(10x 용액)을 배양 배지 내 세포 상에 직접 제공하였다. 내용물을 회전 교반기 상에서 2분 동안 혼합하였다. 이어서, 플레이트를 엔비전 멀티 라벨 판독기(EnVision Multi Label Reader)(여기: 540 내지 570㎚/방출: 580 내지 610㎚)를 이용하여 형광(TO)을 기록할 수 있을 때까지 실온에서 30분 동안 인큐베이션시켰다.

데이터 분석

그래프패드 프리즘(GraphPad Prism) 5.0을 이용하여 데이터를 그래프로 나타내었다.

IC₅₀을 계산하기 위해, S자형 용량 반응에 의한 비선형 회귀 모델을 이용하여 용량 반응 곡선을 적합화시켰다. 생존 비율의 식을 이하에 나타내며, 그래프패드 5.0에 의해 IC₅₀을 자동으로 생성하였다.

생존 비율(%)= (FU_{시험 항목}-FU_{배지 대조군})/(FU_{치료한 것 없음}-FU_{배지 대조군})* 100%.

FU: 형광 단위

표 8은 HES의 적용이 생존도 또는 모든 유형의 혈액학적 신생물 세포(즉, AML; ALL; CML 또는 CLL 유형 세포)의 세포 증식 속도를 저해하는 방법을 입증한다.

총 28종의 백혈병 세포주를 본 연구에서 시험하였고, 화합물 하이드록시에틸 전분(HES) 130/0.4은 상이한 백혈병 유형(급성 림프구성 백혈병, 급성 골수성 백혈병, 만성 림프성 백혈병 및 만성 골수성 백혈병)의 모든 세포주에 대해 명확하게 저해 효과를 가졌다.

특히, HES 130/0.4는 주카트 세포에 대해 가장 강력하였지만(도 3에 나타낸 바와 같음), 다른 27종의 세포주에 대해 여전히 주목할 만한 효과를 마찬가지로 입증할 수 있었다. 본 연구의 결과는 효력과 효능 간의 상관관계를 시사한다. 더 민감한 세포주는 HES로 치료할 때 덜 민감한 세포보다 더 높은 최대 저해값을 나타내었다.

Claims (15)

1. 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 치료적 활성 화합물로서의 하이드록시알킬 전분(hydroxyalkyl starch: HAS)으로서, 상기 치료는 상기 대상체에게 치료적 유효량의 상기 HAS의 투여를 포함하는, 하이드록시알킬 전분(HAS).
2. 제1항에 있어서, 상기 혈액학적 신생물은 백혈병 및 림프종의 군으로부터 선택되는, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 치료는 혈액학적 신생물 세포의 성장 또는 증식 속도를 감소시키는 것 또는 말초 기관 내로의 혈액학적 신생물 세포 침윤을 저해하는 것 중 적어도 하나를 포함하는, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
4. 제1항 내지 제3항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 HAS는 상기 대상체에게 하나 이상의 제2의 치료적으로 유효한 화합물의 투여 전에 또는 후에 제1 화합물로서 상기 대상체에게 투여되는, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
5. 제4항에 있어서, 상기 하나 이상의 제2 화합물은 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
6. 제4항에 있어서, 상기 하나 이상의 제2 화합물은 세포증식억제제 및 항암 활성을 지니는 생물학적 제제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
7. 제4항에 있어서, 상기 하나 이상의 제2 화합물은 세포증식억제제로 이루어진 군으로부터 선택되는, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
8. 제5항 내지 제7항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 세포증식억제제의 군은 알킬화제, 알킬 설포네이트, 대사길항물질, 항종양 항생제, 토포아이소머라제 저해제, 분화제, 유사분열 저해제, 소분자 타이로신 키나제 저해제, 프로테아좀 저해제, 면역조절 약물 및 플레릭사포르(plerixafor)로 이루어진, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
9. 제4항에 있어서, 상기 하나 이상의 제2 화합물은 항암 활성을 지니는 생물학적 제제의 군으로부터 선택되는, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
10. 제5항, 6항 및 제9항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 항암 활성을 지니는 생물학적 제제의 군은 항체 타이로신 키나제 저해제, 단클론성 항체 및 면역조절 단백질로 이루어진, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
11. 제1항 내지 제10항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 혈액학적 신생물은 백혈병인, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
12. 제1항 내지 제11항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 하이드록시알킬 전분은 하이드록시에틸 전분인, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
13. 제1항 내지 제12항 중 어느 한 항에 있어서, 상기 치료는 상기 혈액학적 신생물 세포의 유사분열 주기를 저해하는 것을 포함하는, 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS).
14. 제1항 내지 제13항 중 어느 한 항의 혈액학적 신생물로 고통받는 대상체의 치료에 사용하기 위한 하이드록시알킬 전분(HAS)을 포함하는 제1 약제학적 조성물 및 하나 이상의 제2 화합물을 포함하는 제2 약제학적 조성물을 포함하는 키트로서, 상기 조성물에서 HAS는 혈액학적 신생물의 치료를 위한 유일한 치료적으로 활성인 성분인, 키트.
15. 제14항에 있어서, 상기 하나 이상의 제2 화합물은 세포증식억제제, 항암 활성을 지니는 생물학적 제제 및 항암 활성을 지니는 호르몬으로 이루어진 군으로부터 선택되는, 키트.

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