CN106163286A - 杀生物混合物组合物及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明一般性地涉及包含苯丙醇和啤酒花提取物的具有杀生物作用的协同混合物。特别地，本发明的混合物可用于化妆品、药品和食品领域。

Description

杀生物混合物组合物及其用途
本发明一般性地涉及包含苯丙醇和啤酒花提取物的具有协同作用的杀生物混合物。特别地，本发明的混合物用于化妆品、药品和食品领域。
发明背景
啤酒花(hop,Humulus lupulus)的抗菌性质是已知的，特别是球果(雌花)提取物(其主要用作啤酒添加剂，其具有调味和稳定作用，使其具有苦辣味)的抗菌性质。还已知球果提取物中β-酸的存在提供抗菌性质，特别是针对革兰氏阳性细菌和某些藻类。
已知苯丙醇为用于芳香剂和气味掩蔽剂的溶剂。
直到现在，还没有已知的具有杀生物作用的包含啤酒花提取物和苯丙醇的组合。检索到的最接近的现有技术是国际专利申请WO2012175626，其涉及瘢痕的治疗或者预防，其请求保护洋葱提取物和脂质体，其还包含一些任选存在的成分，例如至少一种防腐剂(如苯丙醇等)，和/或至少一种其它活性成分，例如啤酒花提取物等。该文件具有与本发明完全不同的目的，其未提及或提示啤酒花提取物和苯丙醇的共存，也未提及或提示由该组合产生的一些作用。
根据本发明发现，现有技术没有公开啤酒花提取物和苯丙醇的组合，所述组合出人意料地呈现重要的协同杀生物作用，其与已知的抗微生物剂一样有效。
根据本文中所用的含义，啤酒花提取物的用途也包括即使不包含在啤酒花提取物中的β-酸本身的用途。
发明内容
本发明一般性地涉及杀生物混合物，其特征在于其包含啤酒花提取物和苯丙醇。
在本发明的非限制性具体实施方案中，啤酒花提取物富含游离碱或金属盐(例如钾盐)形式的β-酸，例如蛇麻酮、合蛇麻酮和加蛇麻酮(adlupulone)。有益地，啤酒花提取物包含约45±1.5％w/w的β-酸。
在本发明的非限制性具体实施方案中，包含约45％β-酸的啤酒花提取物与苯丙醇的比例为1:30至1:50。该特定范围等价于β-酸与苯丙醇的含量之间大约1:66至1:112的比例。
重点指出的是啤酒花提取物含量相对于苯丙醇含量的增加对本发明的混合物的作用：形成更深的褐色颜色和辣味，并且混合物的成本增加。鉴于这些方面，本领域技术人员知道对于具体需求或可能性设置更加适当的比例。
在具体实施方案中，除了啤酒花提取物和苯丙醇组分外，本发明的协同杀生物混合物还包含一种或多种活性成分以及一种或多种非活性成分，例如载体或稀释剂。
本发明的另一方面是所述协同杀生物混合物在制备化妆品组合物、药物组合物或食品组合物中的用途。
本发明的另一方面是组合物，其特别用于化妆品、药物或食品领域，其包含量为0.05-5％w/w，更特别为0.1％-1％w/w的本发明的杀生物混合物。
在这样的组合物中可以以下不同的方式使用本发明的混合物：
-将所述两种组分(啤酒花提取物(或β-酸)和苯丙醇)预混合；
-在制备所述组合物期间，将两种单独的组分同时或者顺序加入；
-在制备所述组合物期间，将两种各自包含所述混合物的组分之一的独立的配制物同时或者顺序加入。
不排除其他可能的选择，洗发水、护发素(conditioner)、液体肥皂、洗剂和防晒霜等是在化妆品领域中本发明的组合物的实例。
实施例
以下实施例仅仅是对本发明的阐述，本发明不限于以下实施例。此外，这样的实施例不会对本发明产生超出所附权利要求中包含的那些之外的限制。
实施例1最低抑菌浓度(MIC)
该实施例意图使用测定抑制微生物生长的物质或混合物的最低浓度的方法学来分析与混合物组分的单个活性相比，本发明的混合物的微生物活性。
所测试的微生物为：
·金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)，ATCC 6538
·大肠杆菌(Escherichia coli)，ATCC 8739
·铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)，ATCC 9027
·洋葱伯霍尔德杆菌(Burkholderia cepacia)，ATCC 25416
·白念珠菌(Candida albicans)，ATCC 10231
·巴西曲霉(Aspergillus brasiliensis)，ATCC 16404
所测试的样品为：
样品 描述
1 苯丙醇
2 含有45％β-酸的啤酒花提取物
3 混合物1+2(97.5％苯丙醇和2.5％啤酒花提取物)
4 对照：“液体Germall Plus”(*)
(*)39.60％尿素醛、0.40％碘丙炔醇丁基氨甲酸酯和60％丙二醇，由AshlandInc.提供。
所应用的方法学如下：
首先，将上表中的样品基于其在水中的溶解度以3％的初始浓度制备，然后稀释以得到以下浓度：1.5％；0.75％；0.375％；0.1875％；0.09375％。
如下获得稀释液：(a)向含有5mL胰酶解酪蛋白(tripticase)大豆肉汤(TSB)的第一试管中加入5mL 3％浓度的溶液，并将混合物涡旋。将该试管的5 mL内容物移除，并加入到含有5mL TSB的第二试管中，并将混合物涡旋。重复该操作直到获得各种浓度。
将测试的微生物制备为盐水悬浮液形式的典型微生物接种物。细菌接种物的浓度为大约1 x 106cfu/mL(“菌落形成单位每毫升”)。真菌接种物的浓度为大约1 x 105孢子/mL。按顺序，将各样品溶液用0.1mL微生物接种物接种并将其涡旋。将包含细菌的试管在35℃下孵育24小时，并将包含真菌的试管在25℃下孵育48小时。
将来自这些试管的0.1mL等分部分转移至含有9mL包含中和剂的Letheen肉汤的试管中。将这些Letheen试管再次在细菌或真菌的孵育温度下用Letheen孵育48小时。然后，将之前用TSB润湿的药签与浓度为1.5％、0.75％、0.375％、0.1875％和0.09375％的样品溶液接触，然后将其在培养板的表面上擦拭(对于细菌：Letheen琼脂，AOAC-Association ofOfficial Analytical Chemists；对于真菌：低pH的琼脂，含20聚山梨醇酯表面活性剂)。
下表显示对于微生物生长获得的结果：
说明
-＝无生长
+＝低生长
++＝中度生长
+++＝高生长
上表表明组分1即使在1.5％的浓度下也不能抑制某些微生物(金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、洋葱伯霍尔德杆菌)的生长；组分2也在1.5％的浓度下未抑制其他微生物(白念珠菌和巴西曲霉)的生长。出人意料地，根据本发明，两种组分的组合(在2.5％的啤酒花提取物和97.5％的苯丙醇的比例下)在0.75％下可有效抑制所有被评估的微生物。这清楚地表明两种组分之间的协同作用，所述作用在分开使用时未获得。
根据本文中采用的理解，在盖伦配制物领域，协同的定义是：在受控的混合物中，协同作用的标示是当两种或更多种给定浓度的成分的联合作用大于各成分的单独贡献之和。
实施例2–SPF 30防晒液
用0.5％的本发明的混合物制备防晒系数(SPF)为30的防晒液，以测试其抗菌功效。
下表I提供成分的信息。
表I-成分和防晒液相的列表，SPF 30
(1)UltraThixTMP100，由Ashland(美国公司)销售。
(2)EscalolTM517，由Ashland(美国公司)销售。
(3)EscalolTM587，由Ashland(美国公司)销售。
(4)EscalolTM597，由Ashland(美国公司)销售。
(5)CerasyntTM945，由Ashland(美国公司)销售。
(6)CeraphylTM55，由Ashland(美国公司)销售。
(7)AntaronTMV-220，由Ashland(美国公司)销售。
(8)EscalolTMBlock，由Ashland(美国公司)销售。
(9)EscalolTMS，由Ashland(美国公司)销售。
(10)Si-TecTMCM 040，由Ashland(美国公司)销售。
(11)Vital ETTM产品，由Ashland(美国公司)销售。
制备操作
1-将相A组分合并，匀化直至分散，并加热至83-88℃。
2-将相B组分混合合并，并加热至83-88℃。将相B加入相A中。
3-在83-88℃，在搅拌下10分钟内，将相C加入相AB中。将混合物进一步使用turrax混合器搅拌5分钟。
4-加入相D。将其匀化5分钟。
5-在40℃下，加入相E，并匀化5分钟。
6-随后，将混合物冷却至30-35℃，并将相F的成分分开加入，每次加入后匀化。
7-将pH根据需要调节至6-7.2。
实施例3-液体肥皂
由下表II制备液体肥皂配制物(含0.2％的本发明的混合物)，以测试其抗菌功效。
(1)GafquatTMHS100，由Ashland(美国公司)销售。
(2)CeraphylTMRMT，由Ashland(美国公司)销售。
制备操作：
1.在搅拌下，将相A的组分以上表所示的顺序加入，直到组分完全溶解。
2.在第二个容器中，将相B的组分在搅拌下混合。将该相B加入至相A中。
3.在搅拌下，将相C的组分加入至之前混合的相中。
4.在搅拌下，将相D的组分加入至之前混合的相中。
实施例4-实施例2和实施例3的配制物的保存期限的模拟试验
由纯培养物制备实施例1中提及的微生物，并将其单独接种。
在6个测试小瓶的每一个中，加入30g实施例2(和实施例3)的产品样品，并将0.3mL包含不同微生物的接种物的溶液加入至这些小瓶的每一个中，以达到106cfu/g产品。需要高效搅拌以使接种物分散。
接种后，使用第一次稀释中的中和溶液(Letheen肉汤)制备样品的连续稀释物，并将溶液转移至培养皿中，对于细菌，向其中加入TSA培养基(胰酶解酪蛋白大豆琼脂)，对于真菌，向其中加入SDA(沙氏(Sabouraud)和葡萄糖琼脂)培养基。将含有TSA的板在35℃下孵育48小时，并将含有SDA的板在28℃下孵育5天。
在第一次接种后48小时、7天、14天、21天和28天后重复该操作，对微生物计数。在测试的第21天进行再次接种。
下表显示挑战试验(challenge test)的结果：
实施例2的配制物的挑战试验结果(I＝接种，R＝再次接种)：
实施例3的配制物的挑战试验结果(I＝接种，R＝再次接种)：
通常由化妆品的制造商实施挑战试验以证明他们的产品不会在其有效期内通过微生物污染而分解、不稳定和/或降解。当在化妆品中使用某些百分比(在本文中呈现的实施例中为0.2％和0.5％)的本发明的目标混合物时，挑战试验(其中将这些产品用标准微生物接种)的结果表明，28天后，由于本发明的混合物的作用，没有微生物。
实施例5-杀生物混合物的协同作用
由纯培养物制备实施例1中提及的微生物，并将其单独接种，并如实施例4中描述，将润肤液配制物用这些微生物挑战。
接种后，使用第一次稀释中的中和溶液(Letheen肉汤)制备样品的连续稀释物，并将溶液转移至培养皿中，对于细菌，向其中加入TSA培养基(胰酶解酪蛋白大豆琼脂)，对于真菌，向其中加入SDA(沙氏和葡萄糖琼脂)培养基。将含有TSA的板在35℃下孵育48小时，并将含有SDA的板在28℃下孵育5天。
在第一次接种后48小时、7天、14天、21天和28天后重复该操作，对微生物计数。在测试的第21天进行再次接种。
下表显示挑战试验的结果：
不包含防腐剂的配制物(对照样品)的挑战试验结果(I＝接种，R＝再次接种)：
包含0.5％杀生剂混合物的配制物的挑战试验结果(I＝接种，R＝再次接种)：
包含0.5％苯丙醇的配制物的挑战试验结果(I＝接种，R＝再次接种)：
包含0.5％具有45％β-酸的啤酒花提取物的配制物的挑战试验结果(I＝接种，R＝再次接种)：
这些挑战试验结果表明与在相同使用水平下的单独组分相比，杀生物混合物的更好的性能。
基于本文中呈现的信息和实施例，本领域技术人员可以等同形式(即，即使未明确描述，以功能性方式，并且达到与所描述的发明的性质相同的效果)实施本发明，因此其在所附权利要求书的范围之内。

Claims (11)

1.杀生物混合物，其特征在于其包含啤酒花提取物和苯丙醇。
2.权利要求1的杀生物混合物，其特征在于所述啤酒花提取物富含游离碱或者金属盐形式的β-酸。
3.权利要求1的杀生物混合物，其特征在于所述啤酒花提取物包含45±1.5％w/w的β-酸蛇麻酮、合蛇麻酮和加蛇麻酮。
4.权利要求1的杀生物混合物，其特征在于包含约45％的β-酸的啤酒花提取物与苯丙醇的比例为1:30至1:50。
5.权利要求1的杀生物混合物，其特征在于包含在所述啤酒花提取物中的β-酸与苯丙醇的比例为1:66至1:112。
6.权利要求1的杀生物混合物，其特征在于其还包含一种或多种活性成分以及一种或多种载体或稀释剂。
7.权利要求1-6中任一项的杀生物混合物的用途，其特征在于其用于制备化妆品组合物、药物组合物或者食品组合物。
8.组合物，其特征在于其包含权利要求1-6中任一项的杀生物混合物。
9.权利要求8的组合物，其特征在于其为化妆品组合物、药物组合物或者食品组合物。
10.权利要求8的组合物，其特征在于其包含0.05-5％w/w的所述杀生物混合物。
11.权利要求8的组合物，其特征在于其包含0.1-1％w/w的所述杀生物混合物。
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